天然药物化学实验指导书
前言
天然药物化学实验是整个天然药物化学课的重要组成部分。其目的主要是：
1．通过实验检验在课堂上所学的理论知识。使学生对理性知识的理解更加深入，掌握得更加牢固。
2．通过实验训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练。
3．通过设计性实验，培养学生独立从事科研工作的基本能力。
在实验中，重点是要加强对学生基本操作技能的训练。天然药物化学实验要求学生掌握以下技能：
（一）提取分离方面
1．要求掌握常用的经典方法的原理及操作。其中包括液—固提取法（浸渍、渗漉、煎煮、回流提取）、液—液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法）、重结晶法等。
要求学生了解常见溶剂的性能，并能较好地选择提取溶剂。
２．掌握纸色谱、柱色谱（包括吸附柱、离子交换柱）、薄层色谱的原理及基本操作。以后要创造条件，使学生能逐步地学到气相色谱、高效薄层及高压液相的基本操作。
（二）鉴定方面
１．化学方法
①掌握一般定性反应在结构鉴定中的应用。
②掌握重要衍生物（乙酰化物、甲基化物生物碱盐类等）的制备方法及其在结构鉴定中的应用。
③了解重要降解反应的原理及其在结构鉴定中的应用。（芦丁的酸水解）
２．光谱方法
了解UV、IR、NMR、MS在天然产物结构鉴定中的应用。目前要求学生能了解黄酮类化合物的UV、NMR波谱，蒽醌的IR、NMR谱特征。
通过设计性实验逐步培养学生独立进行实验的能力。对某些实验内容，要求学生有一定的设计能力，为今后从事科研工作打下必要的基础。
本实验指导书主要是供理科基地班天然药物化学实验的参考书。
天然药物化学实验须知
在天然药物化学实验中，所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、甚至爆炸性药品，实验操作又经常在加温、加压等情况下进行，需要各种热源、电器或其他仪器，操作不慎易造成火灾、爆炸、中毒、触电等事故。但只要加强责任心和防患意识，提高警惕、消除隐患，注意实验规则，事故是可以避免的。
实验规则
（一）实验前必须预习实验内容，了解原理和操作规程。随时记录实验应记的项目，以作
正式报告。
（二）实验前应清点并检查仪器是否完整，装置是否正确，合格后方可进行实验。实验时不准做无关的事情，严禁吸烟，不得擅自离开，并应随时注意反应情况，仪器有否漏气、破裂等。
（三）药品仪器都是国家财产，须节约爱护使用，公用物品，用后立即放回原处。不可调错瓶塞，以免污染；仪器要洗刷干净。
（四）操作易燃性有机溶剂，回流、蒸馏、减压蒸馏时，不能明火直接加热，要放沸石或一端封死的毛细管；若在加热时发现未加沸石应冷却后再加，防止爆沸冲出。减压系统应装有安全瓶。加液时应停火或远离火源，一般勿漏气开口，冷凝水要通畅。启封易挥发溶剂瓶盖时，脸面要避开瓶口，慢慢启开，以防气体冲到脸上。
（五）有毒、具腐蚀药品应妥善保管，操作后要立即洗手。勿沾及五官或创口，以免中毒。
（六）实验中，有毒气或腐蚀性气体发生时应在通风橱中进行操作。必要时可带好防护用具进行工作。
（七）若将玻管插入塞中时，可在塞孔中涂些水或甘油等润滑剂，用布包住玻管使其旋转而入，防止折断割伤。
（八）实验台上不放无用的药品、仪器及其它物品；在实验时要做到水槽、仪器、桌面、地上清洁整齐。
（九）实验结束时，应将门、窗、水、电、煤气关好，室内打扫干净，并清点仪器后方可离去。
安全防火须知
（一）实验室存放易燃性有机溶剂时要远离火源，不得超过500ml。
（二）在进行易燃性有机溶剂实验时，一定要按着操作规程进行。不可将易挥发、易燃性有机溶剂倒入水槽或废液缸内。
（三）烘箱内不能烘盛有易燃性溶剂的器皿。
（四）消防器材，砂箱、石棉布、灭火器等应放在方便固定的地点，不能随意移动，均应处于备用状态。
（五）万一不慎着火，要沉着冷静积极抢救，应立即切断室内电源和火源，用石棉布将着火部位盖严，使其隔绝空气而熄灭，或视火势情况选用适当灭火器材进行灭火。在实验
室使用二氧化碳灭火器较好，它具有不腐蚀不导电之优点。
在实验室中常发生的事故如下，应予特别注意：
（一）蒸馏或回流加热时，发现未放沸石，未等溶液冷却就补加沸石，结果溶液冲出瓶外有时引起火灾。
（二）蒸馏易燃物时，忘记通冷却水，大量蒸气逸出亦易引起火灾。
（三）蒸馏易燃物时塞子漏气引起火灾。
（四）用三角烧瓶做减压装置的接收器，结果炸裂。
（五）减压操作结束后，放气太快，使压力计冲破。
（六）使用真空干燥器时，用完就直接开干燥器的放气阀了，结果使泵内的机油被吸到干燥
器中，样品被污染等。
（七）实验室水槽易发生用抹布或碎拖布条堵塞而造成水灾。
目录
实验一一叶萩碱的提取分离与鉴定?????????????????????????????1实验二芦丁的提取及鉴定??????????????????????????????????????6 实验三大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定?????????????????15实验四大黄蒽醌类化合物的色谱法分离??????????????????????24 附录
常用试剂配置及显色方法????????????????????????????????????????28
实验一 一叶萩碱的提取分离与鉴定
——正交设计法
一、 概述
一叶萩（Securinega suffruticosa （Pall ）Rehd ）为大戟科植物，也称叶底株，别名狗杏条等，我国资源十分丰富。其根、叶和嫩枝中均含有多种生物碱，结构已经清楚的有十几种[1]。主要生物碱有一叶萩碱，二氢一叶萩碱，别一叶萩碱，右旋别一叶萩碱，右旋一叶萩碱，一叶萩亭宁，一叶萩醇碱A ，B ，C 等。
其中一叶萩碱含量最高，已用于临床。该生物碱于1956年首先由前苏联学者分离得到[2]，62年完成确定了它的化学结构。我国在一叶萩碱的研究方面做出较大贡献，于62年自国产一叶萩中用活性炭吸附法提取分离出一叶萩碱，并测定了它的化学结构[3，4]。
N
O
H
H
O
一叶萩碱
一叶萩碱和它的衍生物能兴奋中枢X 神经，增强心肌收缩、升高血压，临床用硝酸一叶萩碱治疗面神经麻痹，小儿麻痹骶神经炎和股外侧神经炎感染引起的多发性神经炎，成为神经科疾患的常用药物。
一叶萩碱为淡黄色棱形晶体，难溶于水，易溶于醇、氯仿，较难溶于石油醚。一叶萩碱是一个由? α，β不饱和内酯环和一个环己烯及一个哌啶和吡啶并合而成的叔胺碱；分子中具有共轭双键，氮原子的孤对电子恰好处于键之上，因而可与π 电子发生干扰，从而“延伸”了共轭体系，产生了“跨环共轭”。一叶萩碱与酸生成盐后为无色，旋光度降低，表明N 原子上电子与质子不能参与“跨环共轭”。一叶萩碱中N 原子三价都结在环上，有一定程度的碱性（pKa=7.2），因而具有生物碱的一般通性，能与生物碱沉淀试剂产生沉淀反应，亦可与显色剂反应。
从一叶萩叶中提取生物碱可采用溶剂法[5]、活性炭吸附法[3]和离子交换法。
二、实验目的、要求、原理
（一）目的
通过一叶萩碱的提取分离，掌握用离子交换树脂法提取分离生物碱的原理和方法。 通过正交法设计考查提取分离条件，掌握考查最佳条件的方法。 （二）要求
分离得到纯一叶萩碱，用TLC 法加以鉴定。 （三）原理
酸化：Alk + H +/H 2O → Alk H + （Alk 为生物碱）
交换：RSO3-H+ + Alk H+→ RSO3- Alk H++ H+
碱化：RSO3- Alk H+ + NH4OH → RSO3- NH4+ +Alk + H2O
三、实验方法及注意事项
（一）提取分离内容
干燥一叶萩叶（100g）
置珐琅缸中，用3‰的H
2SO
4
水溶液300ml
充分浸润，放置30′后装渗漉筒[1]。然后再
用3‰的H
2SO
4
水溶液1000ml，以6-8ml/分的
滴速进行渗漉，渗漉液直接进入交换树脂柱。
药渣酸水液
×通过阳离子交换树脂柱[2]，以6-8ml/分的流速进行交换[3]，测定交换液的pH值
（0,1,2，3，5，10，15，20，30，60分）。待酸水液全部交换完毕后，将树脂倾入
烧杯中，水洗至橙明、抽干放置培养皿中，室温风干
风干后树脂
用NH
4OH10-12ml碱化，闷置20分钟后挥散多余NH
3
气。将树脂装入沙氏提取器中，
用120ml石油醚（30-60℃）回流洗脱3小时以上。取出树脂筒
树脂石油醚
（回收）回收至体积约20-30ml，转移到干燥的小锥形瓶中，加盖放置，结晶
析出后过滤
石油醚母液结晶
（回收）（供作鉴定）
注：[1]装渗漉筒：渗漉筒底部，放一块脱脂棉（先用水湿润），然后将润湿过的药材分次加入，分层填压，顶部盖一张滤纸压上洁净的鹅卵石。
[2]树脂处理：取新树脂（已用水膨胀过的）置烧杯中，用5倍量的6-7% HCl浸泡过夜，先
用去离子水洗至pH3-4，改用蒸馏水洗至中性，再用5%NaOH（约2倍）搅拌洗涤后，水洗至中性，最后用6-7% HCl转型，蒸馏水洗至近中性。
[3]装树脂柱：用蒸馏水将已处理好的树脂悬浮起来，加到底部垫有脱脂棉的交换柱中，等树
脂颗粒下沉后，其上覆盖一层棉花或一张滤纸，以免加入液体时冲破树脂表面。注意在整个操作过程中树脂的上部要覆盖少量液体，以免进入空气，影响交换效果。将树脂柱表层多余液体由底部活塞放出，待液层降至树脂层表面时，关闭活塞，由柱的上部加入一叶萩碱的酸水提取液，打开底部螺旋夹，控制流速。
（二）生物碱的定性试验
1．取渗漉液1ml，加硅钨酸试剂数滴，产生淡黄色↓；
2．取渗漉液1ml，加碘碘化钾试剂数滴，产生棕黄色↓；
3．取渗漉液1ml，加碘化铋钾试剂，产生棕红色↓。（三）鉴定
1．TLC：
吸附剂：Al
2O
3
（中性）
展开剂：a. CHCl
3
b. CHCl
3
:石油醚 (1:1)
c. CHCl
3
-EtOH (9:1)
样品: 一叶萩碱/CHCl3液
标准品：一叶萩碱/CHCl3液
显色剂：碘化铋钾试剂
2．熔点测定：
用显微熔点测定仪测定样品的熔点。
四、思考题
1．用离子交换树脂提取分离生物碱的原理是什么？2．装树脂柱应该注意哪些问题？
3．沙氏提取器的原理及其特点是什么？
4．NH
3·H
2
O碱化的目的是什么？用石油醚从树脂上洗脱一叶萩碱的原理是什么？
5．设计用正交试验法选择最佳提取分离条件，包括酸水浓度、用量、渗漉速度、树脂用量等。
五、参考文献
1．R H F Manske. The Alkaloids (chemistry and Physiology, Vol X IV 425-427,1973 (London) 2.V I Murav’eva and A I Ban’kovskii. Dok1, Akad. Nauk SSSR 1956,110,998(CA, 1957,51, 8121a)
3.方起程, 等.药学学报, 1962, 9(6):352.
4.陈国风, 等. 药学学报, 1963,10:22
5.
5.药学杂志（日），1962, 83:800.
6. I Satoda, M Murayama, et al. Tetra Lett. 1962, 1199.
7. 药学杂志（日），1964, 84:1126.
8. T. Nakano, et al. Chem Ind. (London). 1962,1651.
9. Chem Pharm Bull. 1966, 14:917.
10. Chem Pharm Bull. 1965, 13(11): 1307-1311.
11. Chem Pharm Bull. 1970, 18:2009.
实验二芦丁的提取及鉴定
一、概述
芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。尤以槐花米（为植物Sophora japonica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖脱水合成的苷[芸香糖（Rutinose）为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖]。
本品为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水。熔点为174-178℃，无水物188-190℃。溶解度：冷水中1：10000；热水中1：200；冷乙醇1：650；热乙醇1：60；冷吡啶1：12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。
提取芦丁的方法很多，我国多采用碱提取-酸沉淀方法，这个方法的提取原理是依据芦丁结构中含有酚羟基，能与碱反应，生成盐而溶于水中，向此盐溶液中加入酸，则芦丁游离析出。此外，还可以采用水和醇提取法。
芦丁具有维生素P样作用。有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，主要用作防治高血压病的辅助治疗剂（但不能降压），亦可用于对防治因缺乏芦丁所致的其它出血症。多作口服，也可作注射用。
二、实验目的和要求
（一）实验目的
1．通过芦丁的提取与精制，掌握碱提-酸沉法提取黄酮类等酚类化合物的原理及操作。
2．掌握鉴别黄酮类化合物的定性反应及色谱方法。
3．通过芦丁结构的检识，掌握苷类结构研究的一般程序和方法。
（二）要求
1．要拿到以下三个化合物：芦丁，槲皮素，芦丁的全乙酰化物。
2．能够根据化学试验，共TLC对照及UV，NMR数据初步推断出芦丁的结构。并对黄酮类化合物的结构测定有了解。
三、实验方法及注意事项
（一）芦丁的提取分离、重结晶及酸水解
槐花米（15g）
压碎[1]，置500ml烧杯中，加水300ml，在搅拌下加入石灰乳（大约1.5g CaO加10ml水），
调至pH8-9[2]，直火加热至微沸，加盖保持30分钟（注意维持pH8-9），趁热抽滤
残渣滤液
（×）在60-70℃下，用浓盐酸调至pH3-4[3]，静置，抽滤至干（双层滤纸）
滤液(×) 沉淀（粗制芦丁）
称重
重结晶水解
1/2量 1/2量
按1：60量加入蒸馏水[4], 按1：70加入2%硫酸溶液
将沉淀悬浮于蒸馏水中,加热煮沸 (V/V),加热40分钟,放冷,
15分钟,趁热过滤静置,抽滤至干
残渣滤液沉淀(苷元) 滤液
(×) 充分静置,冷却, 干燥 (用于糖的鉴定)
精制芦丁(备用) 槲皮素(备用)
注:
[1] 用乳钵压碎应适度,太碎不易过滤。
[2] 加入石灰乳即可达到碱溶解提取芦丁目的，还可以除去槐花米中含存的大量多糖类粘液质，
但pH不能过高否则钙能与芦丁形成鳌合物而析出沉淀。
[3] pH过低会使芦丁形成氧盐而降低收率。
[4] 利用芦丁在冷热水中溶解度的差别来达到结晶目的。芦丁在热水中溶解度1：200，在冷水中
的溶解度1：10000。也可以用冷、热乙醇重结晶。
（二）槐花米的乙醇溶液的定性反应
（1）盐酸-镁粉反应
取槐花米乙醇溶液2ml，加2-3滴浓盐酸，再酌加少许镁粉，注意观察颜色变化，记录。（2）α-萘酚反应（Molish’s reaction）
取槐花米乙醇溶液2ml，加等体积的10% α-萘酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁滴加浓硫酸适量，注意观察两液面产生的颜色变化。
（三）芦丁中糖的鉴定
[样品制备] 取芦丁的酸水解滤液5ml，用Ba(OH)
2乳（大约1.5g Ba(OH)
2
加10ml水,研磨），调至
中性，折叠滤纸过滤，滤液经水浴蒸发至干，放冷，加1ml 95%乙醇溶解，供做糖的纸
色谱鉴定用。
[标准品] 葡萄糖乙醇溶液，鼠李糖乙醇溶液
[展开剂] 正丁醇-醋酸-水（4：1：5，上层）
[显色剂] 邻苯二甲酸苯胺乙醇溶液。
[操作]
1．取一对直径大小相同的培养皿，内置一小层析槽，装上展开剂，密闭。
2．取一圆形滤纸，以圆心为中心，用铅笔将其分为六等份，分别标注。将标准品和样品用毛细管在距圆心1cm处分别以弧形点样[1]，挥干溶剂。
3．另取一小长条滤纸卷成纸卷，从圆滤纸的圆心处穿进去，插入层析槽的展开剂中上下培养皿密闭。由于毛细作用，展开剂在滤纸上不断水平扩散，当展开至距原点5-6cm处时取出，红外灯下烘干，喷显色剂，再烘至显出斑点为止。观察结果并记录Rf值。
注：[1]为确定点样量，应先做纸斑反应。方法为：取一长条滤纸，用毛细管分别点不同量的样品
溶液，红外灯下烘干，喷显色剂，再烘至显出斑点为止。确定最佳点样量。
（四）芦丁的十乙酰化反应
取干燥芦丁100mg，置干燥[1]的50ml圆底烧瓶中，加2ml吡啶使之溶解，再加入8ml醋酐，直火于水浴上回流30分钟。放冷，在搅拌下（慢加快搅），将反应液倾倒入70ml水中，一直搅拌到油滴消失，白色沉淀析出为止[2]。抽滤，干燥。
注：
[1] 此反应为无水操作，如含水，则醋酐变为醋酸，酰化能力降低。
[2] 芦丁的十乙酰化物是脂溶性化合物，难溶于水。
（五）聚酰胺薄层色谱
[样品制备] 分别取少量芦丁、槲皮素及芦丁的十乙酰化物，用1ml 95%乙醇溶解。其溶液供点样用。
[展开剂] 75%乙醇
无水乙醇溶液
[显色剂] 氨水，2%AlCl
3
[操作]
1．在100ml烧杯中加入5ml展开剂，放入一密闭层析缸中。
2．取一块（4×7cm）聚酰胺薄膜，在膜面距底边1cm处用铅笔标出原点位置及样品名称。点样，挥干溶剂后放入烧杯中，上行展开至离顶端1cm时取出，挥干溶剂，按下表要求顺序观察记录。
（六）芦丁、槲皮素的定性反应
取芦丁、槲皮素各少许，分别加95%乙醇5-6ml使溶解，取上清夜各均分成3份，备用。（1）盐酸-镁粉反应
取芦丁、槲皮素乙醇溶液各一份，分别加2-3滴浓盐酸，再酌加少许镁粉，观察颜色变化，必要时加热。记录现象。
（2） -萘酚反应（Molish’s reaction）
取芦丁、槲皮素乙醇溶液各一份，分别加等体积的10% -萘酚乙醇溶液，摇匀，沿管壁滴加浓硫酸适量，注意观察两液面产生的颜色变化。记录现象。
（3）2% 二氯氧锆-柠檬酸反应
取芦丁乙醇溶液1份，滴加2% 二氯氧锆甲醇溶液，摇匀，观察颜色变化。将溶液均分成2份，向其中1份滴加2%柠檬酸甲醇溶液，另1份加等量乙醇溶液，对比两试管颜色变化。记录现象。
槲皮素的反应操作同上。记录现象。
注：在样品溶液中假如2%二氯氧锆甲醇溶液后，如溶液呈黄色，示可能有C
5-OH，C
3
-OH；如加入
2%柠檬酸甲醇溶液，黄色不褪，示有C
3-OH；如黄色褪去，示无C
3
-OH，但有C
5
-OH。
（七）芦丁的光谱鉴定1．芦丁的紫外光谱
2．苷元-槲皮素的紫外光。3．芦丁的核磁共振谱4．槲皮素的核磁共振谱
四、思考题
1．设计提取分离芦丁的其它方法。
2．苷类化合物水解有几种催化方法？
3．苷类结构的检识程序是什么？
4．怎样确定芦丁结构中糖基连接在槲皮素的3-O-位上？
5．如何确定芦丁的分子中糖的种类？
6．苷元的结构是怎样确定的？
7．怎样确定苷键的构型？
实验三大黄中蒽醌类成分的提取分离和鉴定
一、概述
大黄记载于《神农本草经》等许多文献中，用于泻下、健胃、清热、解毒等。
自古以来，大黄在植物性泻下药中占有重要的位置，是一味很早就被各国药典收载的世界性生药。大黄的种类繁多，优质大黄是蓼科植物掌叶大黄（Rheum palmatclm L），大黄(R. offkcinale Baill)及唐古特大黄（R. tangutium Maxim.et Regll）的根茎及根。大黄中含有多种游离的羟基蒽醌类及其苷类。已经知道的羟基蒽醌主要有下列五种：
O O OH
OH
R2
R1
大黄中蒽醌苷元，其结构不同，因而酸性强弱也不同。大黄酸连有—COOH，酸性最强。大黄素连有 —OH，酸性第二，芦荟大黄素连有苄醇—OH，酸性第三，大黄素甲醚连—OCH3，大黄酚连有—CH3，该基团不是酸性基团，但因母核具1，8-二酚羟基，所以也具酸性，排列第四。根据这些特点，一般的分离方法都用梯度碱度萃取法。日本《植物化学实验书》以及上海药物所编的《中草药有效成分提取分离》比较系统地介绍了大黄中蒽醌类化合物的分离。
蒽醌类化合物在植物体内主要以苷的形式存在，其中有:大黄酸葡萄糖苷、大黄素甲醚葡萄糖苷、芦荟大黄素葡萄糖苷、大黄素葡萄糖苷、大黄酚双葡萄糖苷等。此外，新鲜大黄中还含有属
于蒽酮的番泻苷A及番泻苷B等。
本实验先用酸水将蒽醌苷充分水解成总蒽醌苷元，再用不同pH的碱液分步萃取，以分离不同酸度的蒽醌苷元。
二、目的要求
1．学习缓冲纸色谱的基本操作技术，并能根据色谱结果，设计液-液萃取法分离混合物的实验方案。（包括萃取剂的pH值及用量的确定）
2．掌握pH梯度萃取法的原理及操作技术及在酸碱性成分分离中的应用。
3．学习蒽醌类化合物的鉴定方法。
三、实验方法及注意事项
（一）大黄总蒽醌苷元的提取
大黄粗粉（100g）
置1000ml圆底烧瓶中，加20%H2SO4200ml，氯仿500ml，水浴回流2.5小
时[1]后，双层纱布过滤提取液
分取
残渣氯仿提取液
（约450ml，含蒽醌苷元，供分离用）
[1] 大黄当中的蒽醌类成分大部分和糖结合，以蒽苷的形式存在于植物组织中。所以要用酸水解使
生成苷元。蒽醌苷元可溶于氯仿，苯及乙醚等有机溶剂，用苯时应注意苯蒸气的挥发，严防中毒。用苯液提取总蒽醌苷元，有利于下步萃取分离操作，杂质带入也较少，但毒性太大，使用时注意。
[2] 所得的氯仿液中如带有酸水液，应该用分液漏斗分出弃去，并用蒸馏水回洗一次除去酸性以免
影响梯度萃取。氯仿提取液放置中，如有沉淀析出，可滤取之，该沉淀多为大黄素，余液进行下步分离实验用。
（二）总蒽醌苷元分离方案设计
1．大黄总蒽醌苷元的纸色谱
为了了解总蒽醌提取液中所含成分，进行如下纸色谱实验。
取新华滤纸，距离下端2cm处划一起始线，点加总提取液，用CHCl3/H2O为展开剂上行展开，用0.5%醋酸镁乙醇液喷雾显色，结果如图3-1。从图3-1中看出，共有四个组分，经与标准品对照得知，Rf=0.98处是大黄酚和大黄素甲醚的混合物。Rf=0.70处是芦荟大黄素，Rf=0.40是大黄素，Rf=0.00处是大黄酸。
2．蒽醌类成分的缓冲纸色谱实验
为了分离以上四种组分，进行缓冲纸色谱实验，以确定最佳分离条件。
缓冲纸的制备：取新华滤纸，22×14cm离下端2cm处划一起始线，再每隔1cm划纵向平行线，
每一条带处，顺次涂布不同pH的缓冲液和碱液，涂完后，将湿滤纸夹在两张干滤纸中间至半干，在每一种pH条带原点处，点加总蒽醌苷元提取液。用水饱和过的氯仿为展开剂进行上行展开，当溶剂上升至5-7cm时，取出。烘干，用0.5%醋酸镁乙醇液显色。色谱结果如图3-2所示。
在图3-2的纸色谱图谱中，可以有三条“S”型曲线，其中I为大黄酸，II为大黄素，III为芦荟大黄素，余下为大黄素甲醚和大黄酚的混合物。
各条滤纸分别用下述缓冲液或碱液处理：1—pH2，2—pH4，3—pH6，4—pH8（以上为柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液），5—5%NaHCO3，6—pH10，7—5% Na2CO3，8—0.5% KOH，9—1%KOH，10—5%NaOH水溶液。
3．最佳萃取剂及其用量的确定
根据图3—1纸色谱结果可以确定
（1）萃取大黄酸时以pH8缓冲液为最合适，因为在此条件下，总蒽醌中的大黄酸留在原点不动，而其它成分几乎被氯仿推至前沿，说明大黄酸对PH8缓冲液亲合力强，在萃取时易转溶于其中，其余成分对氯仿亲和力大，萃取时仍留在氯仿母液中，从而得到分离。
（2）萃取大黄素时，以用pH10缓冲液为宜，理由同上。
（3）萃取芦荟大黄素时，则以0.5%KOH为宜。
（4）大黄素甲醚留在氯仿母液中，可被5%NaOH提出。
4．各种萃取剂用量的确定。
（1）分离组分（大黄酸），pH8缓冲液的用量计算如下：
在pH8条带出：I号组分（大黄酸）Rf=0.04
II号以上（其余苷元）Rf=0.9
=1/2[Rf2/（1-Rf1）]=0.02
大黄酸的分配系数：K
1
其余苷元分配系数：K2=1/2[Rf2/（1-Rf1）]=4.5
1 1
由此计算容积比：R= =
√K1?K20.3
K2
分离因子β = = 225
K1
R=1/0.3说明在分离大黄酸时，氯仿总提取液与萃取剂的容积比应为1：0.3，又由于β值很大（225），因此可做一次简单萃取。
（2）分离组分（大黄素），pH10缓冲液的用量计算如下：
在pH10条带处，II号（大黄素）Rf2=0.1
III号以上成分Rf3=0.94
大黄素的分配系数：K2=1/2[Rf2/(1-Rf2)]=0.056
其余苷元的分配系数：K3=1/2[Rf3/(1-Rf3)]=7.8
容积比： 1 1
R= =
√K2?K3 0.65
分离因子：β= K2 / K1 =141
由此可知，用pH10缓冲液萃取大黄素时，用量应为氯仿提取液的0.65倍，又β值较大，也可一次
简单萃取。
（3）分离组分III（芦荟大黄素），碱液用量的计算：
在0.5%KOH条带处：III号（芦荟大黄素）Rf3=0.20
IV号以上Rf4=0.96
芦荟大黄素的分配系数：
K3=1/2[Rf3/(1-Rf3)]=0.125
其余苷元分配系数：K4=1/2[Rf4/(1-Rf4)]=12
1 1
容积比：R= =
√K1?K2 1.2
分离因子：β = K4 / K3= 94
由上计算可知，用0.5%KOH的碱液萃取芦荟大黄素时，用量应为氯仿总提取液的1.2倍，又β>50，仍可做简单萃取。
5．新分离方法的设计
氯仿总提取液(450ml)
加pH8缓冲液200ml(分二次萃取)
pH8缓冲液层氯仿层
加HCl酸化至pH2, 沉淀过滤加pH10缓冲液300ml(分二次萃取)
滤液沉淀氯仿层pH10缓冲液层
干燥后用10ml 加0.5%KOH400ml 加HCl酸化至pH3,
冰醋酸重结晶分二次萃取沉淀过滤
黄色针晶I (大黄酸)
沉淀滤液
碱水层氯仿液干燥后用10ml
加50mlCHCl3回洗浓缩冰醋酸重结晶
大黄酚和橙色针晶
氯仿液碱水层大黄素甲醚（大黄素）
加HCl酸化至pH3，过滤
滤液沉淀
干燥后用10ml醋酸乙酯重结晶
黄色针晶
III（芦荟大黄素）
（三）蒽醌类成分的分离与精制
1．大黄酸的分离与精制
将含有总游离蒽醌的氯仿液450ml移置1000ml的大分液漏斗中，加pH8缓冲液200ml，分二次萃取，充分振摇，静置至彻底分层，放出氯仿液后，倒出碱水液置250ml烧杯中，加HCl酸化至pH2，黄色沉淀析出完全后，过滤，沉淀干燥，干燥后的样品加冰醋酸10ml加热使溶，趁热过滤，滤液静置，析出黄色针晶为大黄酸，过滤即得到纯品可供鉴定用。
2．大黄素的分离与精制
将提出过大黄酸的氯仿液继续移置分液漏斗中，用pH10缓冲液300ml分二次振摇萃取，彻底
分层后，分出碱水层，并用HCl酸化至pH3，析出棕黄色沉淀，过滤，沉淀经干燥后，用10ml 冰醋酸加热使溶，趁热过滤，滤液静置，析出橙色大针晶，过滤后，即得大黄素纯品，可供鉴定用。
注：
大黄素的结晶溶剂最好是吡啶，但因吡啶臭味难闻，故也可用冰醋酸。
3．芦荟大黄素的分离与精制
余下氯仿液移置分液漏斗后，加0.5%KOH 400ml分二次萃取，振摇，分出碱水层，碱水液加50ml CHCl3回洗，然后碱水液加HCl酸化，析出的沉淀过滤干燥，用10ml醋酸乙酯重结晶，得黄色针晶的芦荟大黄素纯品，可供鉴定用。
(四)蒽醌类成分的鉴定
1．纸色谱鉴定
取样品的氯仿溶液，用新华滤纸进行上行展开，用0.5 MgAc2的甲醇溶液喷雾，并在100℃下加热5分钟显色。
展开剂：I：CHCl
3/H
2
O
II：石油醚:丙酮：水（1:1:3，上层）
2．IR光谱解析
取干燥的样品，用KBr压片，测定大黄酸，大黄素，芦荟大黄素的红外光谱，如下图。
四、参考文献
1.日本植物化学研究会.植物化学实验书,1962, 105-8.
2.上海药物研究所,中草药有效成分的提取和分离,上海人民出版社, 1972, 245.
实验四大黄蒽醌类化合物的色谱法分离
——设计性实验
一、实验目的和要求
1．设计用色谱法（硅胶柱色谱、制备薄层色谱）分离大黄蒽醌类化合物。
2．掌握用TLC选择色谱条件的方法，掌握柱色谱、制备薄层色谱的应用及基本操作技术。
3．要求学生自己设计提取分离方法：选择提取溶剂，提取方法、分离方法（包括吸附剂、洗脱剂、色谱方法等）。
4．要求每组至少得到3个单体化合物.
二、实验方法指导
（一）硅胶柱色谱
1．吸附剂用量
吸附剂用量视样品性质及组分复杂情况而定。硅胶用量一般是样品量的20-50倍，少者10倍，多者可达100倍以上。
2．洗脱剂
用TLC选择色谱条件：可以采用石油醚、CHCl
3
，EtOAc、丙酮、甲醇等混合溶剂作为展开剂，
如石油醚，石油醚-EtOAc；石油醚，石油醚-丙酮；石油醚-CHCl
3；CHCl
3
-MeOH，CHCl
3
-丙酮等。
选择展开后斑点分散均匀、形状较圆的溶剂系统为洗脱剂；选择第一斑点Rf≈0.1的溶剂梯度为起步溶剂。一般也可选择该溶剂系统中极性小的溶剂为起步溶剂（如石油醚，CHCl
3
等）。
3．装柱
湿法装柱：将部分起步溶剂先装入柱内，然后将吸附剂（硅胶、氧化铝等）和溶剂调成稀糊状，赶走气泡，慢慢地边搅拌边倒入柱中。此时，应将柱的下端活塞打开，使溶剂慢慢流出，吸附剂渐渐沉于柱底，加完吸附剂后，继续洗脱，平衡至吸附剂不再沉降为止。
干法装柱：在柱上端放一粗颈漏斗，使吸附剂均匀地经漏斗成一细流慢慢装入柱内，中间不应间断。时时轻轻敲打玻璃柱，使填装均匀。如果是湿柱色谱，可加入起步溶剂，备用。如果是干柱色谱，加样后再加溶剂洗脱。
注意：
（1）不能使吸附剂有裂缝和气泡，否则影响分离效果。
（2）吸附剂的高度一般为玻璃柱高度的3/4。
（3）装好的吸附剂和样品的柱上面一般要覆盖一层滤纸或脱脂棉或吸附剂，以保持吸附剂上端顶部平整，不受流入溶剂的干扰；如果顶部不平，将会产生不规则的色带。
（4）在全部色谱过程中吸附剂上面起码要保持覆盖约0.5-1cm高的洗脱剂。勿使吸附剂露出溶剂的液面。柱上端装一分液漏斗，用于加洗脱剂。
4.上样
干法上样：拌样：用适量的溶解度大的溶剂溶解样品，将该溶液加到适量吸附剂中（拌样硅胶用量一般为样品量的1.5-3倍）。搅拌，挥散溶剂至无溶剂味为止。上样：拌样硅胶均匀地撒到已装好吸附剂的柱内。
湿法上样：将样品溶解在一定体积的溶剂中，配成样品溶液（溶剂尽可能用洗脱剂或极性小
的溶剂）。将吸附剂上的多余溶剂放出，直到柱内液体表面到达吸附剂的表面时。停止放出溶剂。沿柱壁加入样品溶液，注意不让溶剂把吸附剂冲松浮起。样品溶液加完后，开启活塞，使液体渐渐放出，至溶剂液面和吸附剂表面相齐，即可加入洗脱溶剂，开始洗脱。
5．洗脱
一般采用梯度洗脱。
洗脱剂的梯度：洗脱剂一般可按0，1，2，3，5，7，10，15，20，25，30，50%等依次增加极性大的溶剂的比例。或根据斑点Rf情况选择变化的梯度。每一梯度的洗脱剂用量一般为5-10个保留体积。也可根据TLC检识结果更换梯度。
洗脱液流份的收集：一般按1/3-1/2个保留体积为一流份，收集洗脱液，回收溶剂。每一流份分别转移到试管或青霉素小瓶中，待用TLC检识后合并。
注意：（1）在整个洗脱过程中，吸附剂上液面一定要保持一定高度，勿使空气进入吸附剂。
（2）在收集洗脱液时，多采用等份收集，每个流份随所用吸附剂种类、用量及样品组分的具体情况而定，或根据保留体积而定。若洗脱剂的极性大或样品各组分的结构相近时，每份的收集量要少一些。
（3）洗脱流速不宜太快。流速太快，柱中交换来不及达到平衡，要影响分离效果；过慢或停止时间长，组分要发生扩散。
（4）保留体积的估算：
保留体积 = 装柱时加入的溶剂量-洗脱下来的溶剂量（柱内液体表面到达吸附剂的表面时）6．检识和合并
收集每个流份，利用TLC，PC等方法检查每个流份的成分，合并相同的流份。如果成分单一，可用重结晶的方法纯化；如果为混合物，再用不同的色谱方法分离（反复硅胶柱色谱、制备薄层色谱、HPLC等）。
（二）制备薄层色谱
1．板的制备
将薄层硅胶加入2.5-3倍体积的5%CMC-Na溶液，用乳钵研磨，调成均匀的糊状，除去气泡，涂布到玻璃板上。板上的吸附剂厚度一般为0.5-1毫米。一般在20×20厘米2的玻璃板上，可涂10-25g的硅胶。板铺好后，经室温干燥，可置烘箱活化。活化条件根据需要各有不同。
一般采用105℃加热30分钟，然后，置干燥器中保存备用。
2．样品：每块板一般可分离10-100毫克的样品。样品溶液浓度为5-10%。
分离较大量的样品，可用多块薄板分离。
3．点样：在离边缘1.5-2厘米处用铅笔轻划一条线，沿线用毛细管或点样器点上样品溶液。5．展开剂：用TLC选择展开剂，用与TLC一致的溶剂系统作展开剂。先将展开剂加到展开槽中使之饱和，然后放入薄层板，勿使样品带浸入溶剂中。展开剂用量一般为每块板35-50毫升。
待溶剂完全展开后，取出板，放到通风橱中挥散至干。
6．色带的位置确定：最好采用物理方法（如在紫外灯下观察荧光或暗班；如为脂溶性成分，喷水后，色带部分为白色）；如果必须采用化学方法显色时，可将薄层板的大部分用另一玻板盖住，留出一条显色，将需要的相应部分做出标记。
7．样品的洗脱：对于硬板，按色带刮下带有样品的吸附剂，分别洗脱。洗脱剂常用丙酮、丙酮-甲醇（无水）或无水甲醇。如用含水溶剂，可能会把铺板用的粘合剂洗脱下来。
注：制备薄层色谱尽量缩短处理时间，不要将载样玻板长时间放置。
（三）样品的鉴定
1．TLC鉴定纯度
选择三种溶剂系统，使斑点Rf在0.3, 0.5, 0.7左右。
2．熔点的测定
用显微熔点测定仪测定熔点。
3．样品的IR和NMR测定
分析IR，NMR图谱，并归属特征峰和核磁信号。
三、实验样品、仪器、试剂与时间安排
实验样品：大黄药材50g
试剂：常用有机溶剂，如石油醚，氯仿，丙酮，乙酸乙酯，乙醇，甲醇等。
仪器：提取、分离用常规仪器。
时间安排：要求在12学时内完成。
四、思考题
1．比较色谱法与pH梯度萃取法的优缺点。
2．在进行硅胶柱色谱和制备薄层色谱过程中应注意哪些问题？
3．讨论不同实验小组间提取分离结果有什么不同？原因是什么？
4．
五、参考文献
1．徐任生，陈仲良. 中草药有效成分提取与分离.上海科学技术出版社,1983, P88-102, 135-154.
2．沈阳药学院植化教研室.中草药化学实验指导书,1993.
天然药物化学实验指导 （供药学药剂专业用） 河北医科大学药学院天然药物化学教研室 2006年3月 前言 天然药物化学是运用现代科学理论与技术研究天然药物中化学成分的一门学科，是药学、药剂、药分、中药学等专业及相关专业本科学生必修的专业课，是国家职业药师(中药学)资格考试必考课程。本课程在有机化学、分析化学、有机化合物波谱学、中药学、生药学等课程的基础上，重点讲授天然药物中化学成分的化学结构、理化性质、提取分离方法、结构鉴定、生理活性、天然药物新药开发等方面的基本原理和实验技能，培养学生具有从事天然药物方面的研究、开发和生产的能力，为我国药学事业的发展输送人才。 天然药物化学实验是天然药物化学课的重要的、必不可少的组成部分。学习的主要目的是通过实验检验在课堂上所学的理论知识，使学生对理论知识的理解更加深入，掌握得更加牢固；通过实验训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练；使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。
实验教学的重点是加强学生基本操作技能的训练，要求学生掌握以下技能：（一）提取分离方面 1.要求掌握常用的经典方法的原理及操作。其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、逆流分布法）、重结晶法等。 2.掌握纸色谱、薄层色谱、柱色谱的原理和基本操作。 （二）结构鉴定方面 1.化学方法 ①掌握各类化学成分的一般定性反应在鉴定中的应用； ②掌握重要衍生物的制备方法及其在结构鉴定中的应用； ③了解重要降解反应的原理及应用。 2.光谱方法 了解UV、IR、NMR、MS在天然药物化学成分结构测定中的应用。 目录 实验须知1 实验技能操作规范2 实验一大黄中蒽醌苷元的提取、分离和检识8 实验二芦丁的提取、水解；黄酮类化合物与糖类的鉴别10 实验三苦参生物碱的提取、分离、鉴别和生物碱的检识15 实验四利用纸色谱先导设计法从洋金花中提取分离生物碱19 实验五一叶萩碱的分离和鉴定23
操作规程编号：LX-FS-A62353 实验室干燥箱安全操作规程标准范 本 In The Daily Work Environment, The Operation Standards Are Restricted, And Relevant Personnel Are Required To Abide By The Corresponding Procedures And Codes Of Conduct, So That The Overall Behavior Can Reach The Specified Standards 编写：_________________________ 审批：_________________________ 时间：________年_____月_____日 A4打印/ 新修订/ 完整/ 内容可编辑
实验室干燥箱安全操作规程标准范 本 使用说明：本操作规程资料适用于日常工作环境中对既定操作标准、规范进行约束，并要求相关人员共同遵守对应的办事规程与行动准则，使整体行为或活动达到或超越规定的标准。资料内容可按真实状况进行条款调整，套用时请仔细阅读。 1、本设备为电加热高温干燥设备，操作不当将会产生爆炸、高温烫伤等安全事故。 2、每次拿取样品时严禁直接用手拿取，应采用镊子等辅助工具拿取，以防高温烫伤。 3、干燥箱温度设置时应根据试验样品所需的试验温度进行设置，过高的温度将会使试验样品燃烧、爆炸。 4、每次实验烘烤的样板数量为大烘箱≤20张板或6个测固含的盖，小烘箱≤10张板或3个测固含的盖。
5、易燃易爆的物品严禁放入干燥箱内烘烤。 6、严禁用湿手直接操作电源开关，以免触电。 7、干燥箱周围不得放置易燃易爆品。 8、干燥箱内、外应及时清扫，保持清洁。 9、每天下班前应切断设备的电源，以免设备长时间通电而造成事故。 10、设备维护，维修时应在切断电源的情况下进行。 11、设备有异常情况时应及时通知相关人员前来处理，严禁私自拆启。 12、做稳定性测试用的干燥箱，统一使用玻璃瓶装样品，进行储存稳定性试验。 请在该处输入组织/单位名称 Please Enter The Name Of Organization / Organization Here
分析化学实验指导书
实验一食醋中总酸度的测定 一、教学要求 1、学会食醋中总酸度的测定原理和方法。 2、掌握指示剂的选择原则。 3、比较不同指示剂对滴定结果的影响。 4、加强移液管的使用； 5、掌握强碱滴定弱酸的滴定过程，突跃范围及指示剂的选择原理。 二、预习内容 1、碱式滴定管的规格、洗涤、润洗等操作步骤； 2、NaOH溶液的储存注意事项； 3、吸量管的使用； 三、基本操作 1、吸量管的使用 要准确移取一定体积的液体时，常使用吸管。吸管有无分度吸管(又称移液管)和有分度吸管(又称吸量管)两种。如需吸取5mL、10mL、25mL等整数，用相应大小的无分度吸管，而不用有分度吸管。量取小体积且不是整数时，一般用有分度吸管，使用时，令液面从某一分度（通常为最高标线）降到另一分度，两分度间的体积刚好等于所需量取的体积，通常不把溶液放到底部。在同一实验中，尽可能使用同一吸管的同一段，而且尽可能使用上面部分，不用末端收缩部分。 使用前，依次用洗液、自来水、蒸馏水洗涤，最后再取少量被量液体荡洗3次，以保证被吸取的溶液浓度不变。蒸馏水和溶液荡洗的用量由吸管大小决定，无分度吸管以液面上升到球部为限，有分度吸管则以充满全部体积的1/5为限。 用吸管吸取溶液时，左手拿洗耳球（预先排除空气），右手拇指及中指拿住管颈标线以上的地方。吸管下端至少伸入液面1cm，不要伸入太多，以免管口外壁沾附溶液过多，也不要伸入太少，以免液面下降后吸空。用洗耳球慢慢吸取溶液，眼睛注意正在上升的液面位置，吸管应随容器中液面下降而降低。当溶液上升到标线以上时迅速用右手食指紧按管口，取出吸管，左手拿住盛溶液的容器，并倾斜约45°。右手垂直地拿住吸管，使其管尖靠住液面以上的容器壁，微微抬起食指，当液面缓缓下降到与标线相切时，立即紧按食指，使流体不再流出。再把吸管移入准备接收溶液的容器中，仍使其管尖接触容
1*天然药物化学研究的内容有哪些？ 答：天然药物中各类化学成分的结构特点、理化性质、提取分离与鉴定方法，操作技术及实际应用。 2*如何理解有效成分和无效成分？ 答：有效成分是指天然药物中经药效实验筛选具有生物活性并能代表临床疗效的单体化合物，能用结构式表示，具有一定的物理常数。天然药物中不代表其治疗作用的成分为无效成分。一般认为天然药物中的蛋白质、多糖、淀粉、树脂、叶绿素、纤维素等成分是无效成分或杂质。 3*天然药物有效成分提取方法有几种？采用这些方法提取的依据是什么？ 答：①溶剂提取法：利用溶剂把天然药物中所需要的成分溶解出来，而对其它成分不溶解或少溶解。②水蒸气蒸馏法：利用某些化学成分具有挥发性，能随水蒸气蒸馏而不被破坏的性质。③升华法：利用某些化合物具有升华的性。 4*常用溶剂的亲水性或亲脂性的强弱顺序如何排列？哪些与水混溶？哪些与水不混溶？ 答：石油醚>苯>氯仿>乙醚>乙酸乙酯>正丁醇（与水互不相容）>丙酮>乙醇>甲醇>水（与水相混溶） 5*两相溶剂萃取法是根据什么原理进行？在实际工作中如何选择溶剂？ 答：利用混合物中各成分在两相互不相溶的溶剂中分配系数不同而达到分离的目的。实际工作中，在水提取液中有效成分是亲脂的多选用亲脂性有机溶剂如苯、氯仿、乙醚等进行液‐液萃取；若有效成分是偏于亲水性的则改用弱亲脂性溶剂如乙酸乙酯、正丁醇等，也可采用氯仿或乙醚加适量乙醇或甲醇的混合剂。 6*色谱法的基本原理是什么？ 答：利用混合物中各成分在不同的两相中吸附、分配及其亲和力的差异而达到相互分离的方法。 7*聚酰胺吸附力与哪些因素有关？ 答：①与溶剂有关：一般在水中吸附能力最强，有机溶剂中较弱，碱性溶剂中最弱；②与形成氢键的基团多少有关：分子结构中含酚羟基、羧基、醌或羰基越多，吸附越牢；③与形成氢键的基团位置有关：一般间位＞对位＞邻位；④芳香核、共轭双键越多，吸附越牢；⑤对形成分子内氢键的化合物吸附力减弱。 8*简述苷的分类。 答：据苷键的构型不同分为α-苷、β-苷；依据在植物体内的存在状态不同，可分为原生苷和次生苷；依据苷的结构中单糖数目的不同，可分为单糖苷、双糖苷、三糖苷；依据苷元结构不同，可分为黄酮苷、蒽醌苷、香豆素苷；依据糖链的数目不同，分为单糖链苷、双糖链苷；依据苷的生物活性，分为强心苷、皂苷等。 9*简述苷键酸水解的影响因素。 答：①苷原子不同，水解难以顺序：N-苷>O苷>S苷>C苷②呋喃糖苷较吡喃糖易水解③酮糖苷较醛糖苷易水解④吡喃糖苷中C5取代基越大越难水解。⑤吸点子基的诱导效应，尤其是C2上取代基的吸点子基对质子的竞争吸引，使苷键原子的电子云密度降低，质子化能力下降，水解速度下降⑥芳香族苷因苷元部分有供电子基，水解比脂肪族苷容易。 10*如何用化学方法鉴别：葡萄糖、丹皮苷、丹皮酚。 答：三种样品分别做α-萘酚-浓硫酸反应，不产生紫色环的是丹皮酚。产生紫色环的，再分别做斐林反应，产生砖红色沉淀的是葡萄糖，不反应的是丹皮苷。 11*为何《中华人民共和国药典》规定新采集的大黄必须储存两年以上才可药用？
天然药物化学实验指导 目录 实验室注意事项 (1) 实验一芦丁的提取分离与鉴定 (2) 实验二艾叶及丁香中挥发油的提取鉴定 (5) 实验三从红辣椒中分离红色素 (7) 实验四咖啡因的提取与分离 (8) 自选实验薯蓣皂苷元的提取与分离 (10) 自选实验甘草皂苷元的提取与分离 (10) 自主设计实验 (15)
实验室注意事项 天然药物化学实验课具有实验周期长、使用有机溶剂品种多，用量较大等特点，所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、实验操作经常在加温，减压下进行，需要使用各种热源和电器，再加上实验室较为拥挤，若操作不慎，易引起着火、触电、中毒、爆炸等事故，为确保实验安全顺利进行，特作如下要求。 一、实验前必须预习实验内容，了解实验原理和操作程序，检查仪器是否完整，装置是否正确，检查合格后方可开始实验。 二、实验室内要保持严肃、安静，不得大声说话打闹；室内严禁吸烟，实验进行时不得擅自离开，必要时委托专人看管。 三、未经教师允许不得擅自使用明火，需使用明火时，实验台周围不得放置易燃有机溶剂，如发生火情,应保持镇静，立即报告指导教师，同时切断火源，移走易燃品！用湿布闷盖或用灭火器进行灭火，切勿轻易用水，以免扩大火势。 四、实验时要做到整齐、清洁、用过的仪器要及时清洗并收人仪器柜内，保持水槽、仪器、桌面、地面四洁。 五、回流、蒸馏有机溶剂时，注意检查冷凝水是否通畅，装置不得密闭，接收有机溶剂时不得使用广口仪器，溶剂瓶不得敞口存放。在进行减压操作时，必须使用安全瓶，弄清操作程序，以免造成回水等事故。 六、使用挥发性试剂或喷显色剂时，应在窗口或通风橱内操作，不慎溅在桌面上的化学药品必须立即清除。身体直接接触化学物品后应及时用肥皂及大量水冲洗，如碱性试剂可用l％HAc溶液冲洗，酸性试剂可用3％NaHCO3溶液冲洗。不要用酒精、丙酮等洗涤皮肤上的有机物，以免增加皮肤对有毒物质的吸收，眼睛里溅入化学试剂后，应立即用大量水冲洗，及时到校医室就诊。 七、使用电器设备（如水浴锅、紫外灯、旋转蒸发仪、循环水泵等）一定要按操作规程进行，不得在烘箱内干燥带有易燃性有机溶剂的仪器或物品，仪器发生故障时及时报告指导教师，不得擅自拆卸。 八、每次实验结果后的产品，应妥善包装好，贴好标签，写明级别、产率等，放入干燥器内保存，不得随意丢失。 九、实验结束后，值日生应做好实验室清洁卫生工作，整理好公共仪器、药品，检查水、电、门窗，经教师检查后方可离去。
化学实验室操作规程 一、使用电器设备安全操作 1使用电器设备时，必须先检查开关，机械设备。各部分是否安装妥当。 2开始工作或停止工作时，必须将开关扣严拉下。 3要更换保险丝时，要按负荷选用保险丝不准加大或以铜丝代替使用。 4电器开关箱内，不准放任何东西。 5严禁用导电器具，去洗扫电器和用湿布擦洗电器。 6电器动力设备超过温度时应立即停止运转。 7定碳定硫电炉两端应设安全罩。安全罩严禁随意拆掉，以免发生触电事故。 8禁止洒水在电器设备和线路上，以免触电。 9凡使用110伏电源装备，仪器的金属外壳必须安装接地线。 10严禁湿手分，合开关和接触电源设备。 二、使用毒品安全规则 1.凡能产生毒气体和刺激性气体的操作应在通风柜内进行，这些气体是，—氧化碳，硫化氢，氟化氢，二氧化碳，氯，碘，二氧化硫，氧化锰，二氧化氮等。 2进行有毒物质的实验时，必须穿工作服，带口罩或面罩，手套，实验后要洗手，实验中禁止饮食和抽烟。 3工作人员，手，脸，皮肤有破裂时不许进行有毒物质操作，尤其是氢化物的操作。 4禁止用化验室内的任何器具盛放饮料和其他食物。 5处理无名药品，不允许用口尝，如嗅其味，可用手掌在药物口表面上空向腔部煽动嗅之。6遇到下列毒强烈物质时，应注意使用，汞及汞盐，铅及铅盐，砷及砷化物，氰化物，白磷及磷化氢，二氧化碳，钾，钠，氨和氯盐酸，铬的化合物，所以的有机化合物。 三、使用强酸，强碱，及腐蚀剂安全规程 1搬运和使用腐蚀性药品如强酸，强碱及溴等，要带橡皮手套，眼睛，并穿深筒胶鞋。 2搬运酸，碱前应仔细做下列检查，A搬运器具的强度B容器的位置固定是否稳C搬运时不许一人将容器背在背上D装酸或碱的容器是否密封。 3移注酸碱液时，要用虹吸管，不要用漏斗，以防酸碱溶液溅出。 4酸碱或其他苛性液体，禁止用嘴直接吸取，如无吸气器，可用量筒量取。 5开放盛溴，过氧化氢，氢氟酸，氨水，和其他苛性溶液容器时，应先用水冷却，然后开瓶，开瓶时，瓶口不准对人。 6在稀释酸（尤其是硫酸）时，应一面搅拌冷水，一面慢慢将酸到入，禁止将水到入酸内，7拿取碱金属及氢氧化物时，必须用镊子夹取或用磁勺采取。 8废酸废碱必须倒在专门的罐子内，罐子应放在安全的地方。 9腐蚀性强烈的物质有，溴及溴水，硝酸，硫酸，王水，氢氟酸，铬酸溶液，氰氟酸，五氧化二磷，磷酸，氢氧化钾，氢氧化钠，氢氧化铵，冰醋酸，硝酸银，盐酸。 四、化验室一般操作规则
普通化学实验指导书 齐鲁理工学院
目录 实验一酸碱比较滴定 (1) 实验二水中钙、镁离子的测定 (4)
实验一酸碱比较滴定 一、实验目的 1．掌握酸碱溶液的配制和比较滴定方法。 2．练习滴定操作技术和滴定终点的判断。 3．掌握滴定结果的数据记录和数据处理方法。 二、实验原理 在酸碱滴定中，酸标准溶液通常是用HCl或H2SO4来配制，其中用得较多的是HCl。如果试样要和过量的酸标准溶液共同煮沸时，则选用H2SO4。HNO3有氧化性并且稳定性较差，故不宜选用。 碱标准溶液一般都用NaOH配制。KOH较贵，应用不普遍。Ba(OH)2可以用来配制不含碳酸盐的碱标准溶液。 市售的酸浓度不定，碱的纯度也不够，而且常吸收CO2和水蒸气，因此都不能直接配制准确浓度的溶液，通常是先将它们配成近似浓度，然后通过比较滴定和标定来确定它们的准确浓度，其浓度一般是在0.01～1 mol·L－1之间，具体浓度可以根据需要选择。 酸碱比较滴定一般是指用酸标准溶液滴定碱标准溶液的操作过程。当HCl和NaOH溶液反应达到等量点时，根据等物质的量规则有： 即 因此，只要标定其中任何一种溶液的浓度，就可以通过比较滴定的结果(体积比)，算出另一种溶液的准确浓度。 三、仪器和试剂 (一)仪器 10mL量筒、500mL量杯、1000mL小口试剂瓶(2只)、酸式和碱式滴定管、锥形瓶（3只）。 (二)试剂 浓HCl、50％NaOH、0.2％甲基红乙醇溶液。
四、实验内容 (－)0.05 mol·L－1（HCl）溶液的配制 用干净的量筒量取浓HCl 4.5mL，倒入1000mL试剂瓶中，用蒸馏水稀释至1000mL，盖上瓶塞，摇匀。 (二)0.05 mol·L－1（NaOH）溶液的配制 用干净的量筒量取澄清的50％NaOH 2.8mL，倒入1000mL试剂瓶中，用无CO2蒸馏水稀释至1000mL，用橡皮塞塞紧，摇匀。 溶液配好后，贴上标签，标签上应注明试剂名称、专业、班级、姓名和配制日期，留待以后实验用（以上酸、碱标准溶液，由两个同学共同配制）。 (三)比较滴定 将酸、碱标准溶液分别装入酸式和碱式滴定管中(注意赶气饱和除去管尖悬挂的液滴)，记录初读数，由碱式滴定管放出约20mLNaOH溶液于锥形瓶中，加入甲基红指示剂1～2滴，用HCl溶液滴至溶液由黄色变为橙色，即为终点。若滴定过量，溶液已经变红，可以用NaOH溶液回滴至溶液变为黄色，再用HCl溶液滴至橙色。准确记录酸式、碱式滴定管的终读数，计算酸碱溶液的体积比（或）。 平行测定三次，每次滴定前，都要把酸式、碱式滴定管装到“0” 刻度或“0”刻度稍下的位置。要求三次测定结果的相对均差小于0.2％。 五、数据记录及计算结果
化学实验室安全使用操作规程 为了顺利地做好化学实验，保证实验成功，保护实验仪器设备，维护师生的安全，防止一切实验事故，特制订本实验室安全操作规程。 一、未进实验室时，就应对本次实验进行预习，掌握操作过程及原理，弄清所有药品的性质。估计可能发生危险的实验，在操作时注意防范。 二、实验开始前，检查仪器是否完整无损，装置是否正确稳妥。 实验进行时，应该经常注意仪器有无漏气、碎裂，反应进行是否正常等情况。 三、灯火加热时要注意安全。在酒精灯快烧尽、灯火还没熄灭时，千万不能注入燃料；酒精灯熄灭时，要用灯帽来罩，不要用口来吹，防止发生意外；不要用一个酒精灯来点燃，以免酒精溢出，引起燃烧。点燃的火柴用完后立即熄灭，不得乱扔。 四、使用氢气时，要严禁烟火，点燃氢气前必须检查氢气的纯度。使用易燃、易爆试剂一定要远离火源。 五、要注意安全用电，不要用湿手、湿物接触电源，实验结束后应及时切断电源。 六、加热或倾倒液体时，切勿俯视容器，以防液滴飞溅造成伤害。给试管加热时，切勿将管口对着自己或他人，以免药品喷出伤人。 七、嗅闻气体时，应保持一定的距离，慢慢地用手把挥发出来的气体少量地煽向自己，不要俯向容器直接去嗅。 八、凡做有毒和有恶臭气体的实验，应在通风橱内进行。 九、取用药品要选用药匙等专用器具，不能用手直接拿取。 十、未经许可，绝对不允许任意混合各种化学药品，以免发生意外事故。
十一、稀释浓酸（特别是浓硫酸），应把酸慢慢地注入水中，并不断搅拌。 十二、使用玻璃仪器时，要按操作规程，轻拿轻放，以免破损，造成伤害。 十三、使用打孔器或用小刀割胶塞、胶管等材料时，要谨慎操作，以防割伤。 十四、实验剩余的药品既不能放回原瓶，也不能随意丢弃，更不能拿出实验室，要放回指定的容器内。 十五、严禁在实验室内饮食，或把餐具带进实验室，更不能把实验器皿当作餐具。 十六、实验结束，应整理好桌面，把手洗净再离开实验室。
天然药物化学实验 Document number【AA80KGB-AA98YT-AAT8CB-2A6UT-A18GG】
实验一天然产物化学成分系统预试验 天然产物中所含的化学成分种类很多，在深入研究之前应首先了解其中含有哪些类型的化学成分，如生物碱、皂苷、黄酮类等等。这就需要进行各类化学成分的系统定性预试验。或根据研究的需要进行单项预试法来初步判断。 一、实验目的与要求 掌握未知成分的天然产物是怎样初步提取分离的，熟悉各主要成分的试管试验、沉淀反应和纸层析、薄层层析的方法并根据试验结果判断含有什么类型的化学成分。 二、基本原理 利用各类成分的颜色反应和沉淀反应，对天然产物的提取液进行检查可以初步判断其中的化学成分。由于提取液大多数颜色较深，影响对颜色变化的观察，可以使用薄层层析（TLC）或纸层析（PC）等方法对天然产物的提取液进行初步分离，再进一步检查。 三、实验内容： 利用不同成分在各种溶剂中的溶解度的不同，一般可采用以下3种溶剂分别提取，试验。 1．水浸液：取中草药粗粉5 g加水60 ml，在50~60℃的水浴上加热1小时，过滤，滤液进行下列试验。
*在试管进行，△在滤纸或硅胶CMC-Na薄层板上进行，下同。 糖鉴定 （1）α-萘酚一硫酸试剂检查还原糖。 ①溶液I：10％α-萘酚乙醇溶液。溶液II：硫酸。取1ml样品的稀乙醇溶液或水溶液，加入溶液I 2滴～3滴，混匀，沿试管壁缓缓加入少量溶液II，二液面交界处产生紫红色环为阳性反应。 （2）斐林试剂检查还原糖。 溶液I：6．93g结晶硫酸铜溶于100ml水中。溶液II：34．6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于100ml水中。取1ml样品热水提取液，加入4滴～5滴用时配制的溶液I、II 等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性反应。如检查多糖和苷，取1ml样品水提液，加入1m110% 盐酸溶液，在沸水浴上加热10min，过滤，（成盐去除杂质）再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查还原糖。 或者直接用高效液相色谱看色谱图。 酚类鉴定试剂 （1）三氯化铁试剂检查酚类化合物、鞣质1％～5％三氯化铁水溶液或乙醇溶液，加盐酸酸化。取1ml样品的乙醇溶液，加入试剂1滴～2滴，显绿、蓝绿或暗紫色为阳性反应。作色谱显色剂用，喷洒后，显绿或兰色斑点为阳性。 2．乙醇提取液 取中草药粗粉5 g，加5~12倍量95%乙醇，在水浴上加热回流提取1小时，过滤，滤液留2 ml作（1）项试验，其余回收乙醇至无醇味，并浓缩成浸膏状，浸膏分为二部分，一部分加少量2% HCL振摇溶过滤。分出酸液，作（2）项式验，附于滤纸上的一部分再以少量乙醇溶解，溶液作（3）项试验；
中国药科大学 天然药物化学学习指南 一、说明--天然药物化学简介及知识模块构成 《天然药物化学》涉及中药及天然产物化学成分的提取、分离、结构鉴定、结构修饰、活性研究。本课程以有机化学、分析化学、波谱解析等学科为基础，是中药学、药学、中药资源与开发专业本科生的核心专业基础课程（4学分，理论68学时、实验68学时）。根据学校的培养目标结合上述专业培养要求，本课程定位于在学生完成基础课学习的前提下，遵循传统中药理论和现代有机化学、分析化学的技术和方法紧密结合的教学理念，从分子水平向学生传授中药及天然药物生物活性的物质基础，用现代科学的观点和方法揭示传统中药的作用机制。 《天然药物化学》课程由四大知识模块构成： 第一部分，天然药物化学成分提取、分离和纯化的方法和技术（4学时）； 第二部分，天然药物化学成分的结构鉴定方法和技术概述（2学时）。该部分的主要内容由本教研室承担的大二下学期《波谱解析》课程（共34学时）进行传授； 第三部分，是本课程的重点内容，即各类成分的提取、分离和结构鉴定（60学时）； 第四部分，天然药物化学研究的新技术、新方法和新进展（2学时）。 课程计划136学时，其中理论教学和实验教学各半，均为68学时。 二、课程的基本要求 依据药学类本、专科的培训目标，本课程要求学生掌握天然药物化学的相关理论、天然有机化合物的物理化学性质，以及生物活性成分的提取、分离、纯化和结构鉴定的基本方法和实验技能，初步具有从事与天然药物的生产和研究相关工作的能力。在工作实践中，能够运用现代科学理论与研究的方法，为继承和发扬祖国的传统药学事业，使我国独特的中药实现现代化打下坚实的理论和实践基础。 根据本课程的四大知识模块，重点讲授主要天然化学成分的结构类型、理化性质、提取、分离、纯化以及检识方法，介绍各主要类型天然化合物的生物活性，主要类型天然化学成分结构测定的物理方法，重点讲授波谱方法在黄酮类化合物结构测定中的应用。同时适当介绍天然药物的构效关系、天然药物化学在中药制剂和分析中应用实例以及主要类型天然化合物研究的最新发展。
化学实验室安全操作规 程 LEKIBM standardization office【IBM5AB- LEKIBMK08- LEKIBM2C】
化学实验室安全操作规程 化学药品中，有很多是易燃、易爆、易腐蚀性和有毒性的。在实验前应充分了解本实验中的安全注意事项，严格遵守操作规程，才能避免事故的发生。假如由于各种原因而发生事故，应立即紧急处置。实验室的安全操作规程如下： 一、水、电、煤气一经使用完毕立即关闭。 二、实验室内严禁饮食、吸烟。实验完毕，必须洗净双手。 三、实验室内严禁任意混合各种化学药品，以免发生意外事故。 四、钾、钠和白磷等暴露在空气中易燃烧。所以钾、钠应保存在煤油中，白磷则可保存在水中。取用它们时要用镊子。一些有机溶剂(如乙醚、乙醇、丙酮、苯等)极易引燃，使用时必须远离明火，用毕立即盖紧瓶塞。 五、不纯氢气遇火易爆炸，操作时必须严禁接近烟火。在点燃前，必须先检验并确保纯度。银氨溶液不能保存，因久置后也易爆炸。某些强氧化剂(如氯酸钾、硝酸钾、高锰酸钾等)或其混合物不能研磨，否则将引起爆炸。 六、浓酸、浓碱具有强腐蚀性，切勿使其溅在皮肤或衣服上，眼睛更应注意。稀释它们时(特别是浓硫酸)，应将它们慢慢倒入水中，而不能相反进行，以避免迸溅。
七、能产生有刺激性或有毒气体的实验必须在通风橱内进行。 八、有毒药品(如重铬酸钾、钡盐、砷的化合物、汞的化合物、特别是氰化物)不得进入口内或接触伤口。剩余的液也不能随便倒入下水道。 九、金属汞易挥发，它通过人的呼吸而进入体内，逐渐积累会引起慢性中毒。所以不能把汞洒落在桌上或地上。一旦洒落，必须尽可能收集起来，并用硫磺粉盖在洒落的地方，使汞转变成不挥发的硫化汞。 十、充分熟悉安全用具如灭火器材、砂箱以及急救药箱的放置地点和使用方法，并妥善爱护。安全用具和急救药品不准移作它用。 十一、实验室所有药品不得携出室外。用剩的有毒药品应交还给教师。
化学实验指导
实验一粗食盐的提纯 【实验目的】 1、学习提纯粗食盐的原理和方法； 2、掌握溶解、沉淀、常压过滤、减压过滤、蒸发浓缩、结晶等基本操作； 3、了解Ca2+、Mg2+、SO42-等离子的定性鉴定； 4、掌握普通漏斗、布氏漏斗、吸滤瓶、蒸发皿、真空泵的使用； 5、通过粗食盐提纯实验，了解盐类溶解度知识和沉淀溶解平衡原理的应用。 【仪器及试剂】 仪器：烧杯（100mL）、量筒（100mL）、三角架、漏斗架、酒精灯、石棉网、台秤、点滴板、表面皿、蒸发皿、普通漏斗、减压过滤装置一套（布氏漏斗、吸滤瓶、真空泵）、试管、试管架、滤纸、pH试纸； 试剂：HCl(3 mol·L-1)、BaCl2(1 mol·L-1)、NaOH(2 mol·L-1)、Na2CO3(1 mol·L-1)、(NH4)2C2O4(0.5 mol·L-1）、镁试剂、粗食盐、亚硝酸钴钠。 【实验原理】 粗食盐中含有不溶性杂质（如泥沙等）和可溶性杂质（主要是Ca2+、Mg2+、Ba2+、SO42-等），不溶性杂质粗食盐溶解后可过滤除去，可溶性杂质则要用化学沉淀方法除去。处理的方法是：在粗食盐溶液中加入稍过量的BaCl2溶液，溶液中的SO42-便转化为难溶解的BaSO4沉淀而除去。反应方程式为： 2+2- Ba+SO= BaSO↓ 44 然后将溶液过滤，除去BaSO4沉淀。再在溶液中加入NaOH和Na2CO3的混合溶液，Ca2+、Mg2+及过量的Ba2+便生成沉淀。 2+2- Ca+CO= CaCO↓ 33 2+2- Ba+CO= BaCO↓ 33 2+-2- 2Mg+2OH + CO= Mg(OH) CO↓ 3223 过滤后Ba2+和Ca2+、Mg2+都已除去，然后用HCl将溶液调至微酸性以中和OH-和除去CO32-。 -+ OH+H=H O 2
天然药物化学实验讲义目录 一、芦荟粗多糖的提取及鉴定 二、大黄中蒽醌苷元的提取、分离与鉴别 三、槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离与鉴别 四、八角茴香挥发油的提取及鉴别 五、黄柏中生物碱的提取、分离和鉴别 六、茶叶中咖啡因的提取 前言 《天然药物化学实验》是一门实践性很强的课程，理论教学与实验教学是一个不可分割的完整体系。通过实验课的学习使学生能印证并加深理解课堂讲授的理论知识，掌握由天然药物中提取、分离、精制有效成分，并对其进行鉴别的基本方法和技能，提高学生独立动手、观察分析、解决问题的能力，培养学生严谨的科学态度和良好的科研作风。
实验一芦荟粗多糖的提取及鉴定 一、实验目的 1、水提醇沉法提取多糖的原理和方法 2、掌握高速冷冻离心机、旋转蒸发器等仪器的用法 3、了解芦荟多糖在医药中的应用 二、实验原理 芦荟的多糖类可增强人体对疾病的抵抗力，治愈皮肤炎、慢性肾炎、膀胱炎、支气管炎等慢性病症，抑制、破坏异常细胞的生长的作用，从而达到抗癌目的。植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖，所以本实验采用水提醇沉法提取芦荟中的粗多糖。 三、试剂、材料及仪器 1、试剂：盐酸、无水乙醇、丙酮、乙醚、葡萄糖对照品、苯酚、浓硫酸 2、材料和仪器：芦荟叶、烧杯、移液管、量筒、容量瓶、玻璃棒、旋转蒸发仪、电子天平、真空泵、电热恒温水浴锅、紫外-可见分光光度计、高速离心机、真空冷冻干燥机。 四、实验方法与步骤 1、取芦荟鲜叶50g，洗净，去掉叶尖和叶底，在蒸馏水水中浸泡0.5h,已除去由表面滲出的黄色液体。然后切去表皮，将内层凝胶（匀浆后）置于烧杯中，加入三倍蒸馏水，置于55℃恒温水浴锅中加热浸提4h。 2、浸提液离心分离（2500r/min，5min）并过滤（直接6层纱布过滤），将所得液汁减压浓缩（至30ml），用6mol/L的盐酸调pH值3.2左右，向经过调酸处理的芦荟凝胶浓缩汁中缓慢加入6倍量的95％乙醇，边加边搅拌大约需要15～30min，室温下静置2h，离心分离(2500r/min，7min)得多糖沉淀。依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤，然后真空干燥（通风橱干燥），最终得到的沉淀即为芦荟多糖粗品。 3、芦荟多糖的鉴定 对芦荟多糖的鉴定利用改进的苯酚一硫酸法。苯嘞一硫酸试剂能与芦荟多糖中的己糖起显色反应，在一定波长下其吸光度的变化与多糖含量呈线性关系。采用苯酚一硫酸显色法鉴定芦荟多糖，芦荟中的多糖在硫酸的作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，然后和苯酚缩合成有色化合物共轭酚在490nm处有最大波长，由此可以鉴定出芦荟中的多糖(图1)。
中药化学实验教学大纲 一、实验课程名称 中药化学 二、课程编码 1002371 三、课程性质 必修课 四、学时学分 课程总学时：104 总学分：6.5 实验学时：44 五、适用专业 中药学专业 六、本实验课的配套教材、讲义与指导书 天然药化教研室编. 天然药物化学实验讲义. 七、实验课的任务、性质与目的 中药化学是一门实践性很强的学科，中药化学实验是中药化学课程的重要组成部分，学生必须在学好理论知识的同时高度重视实验课，通过实验课的学习使学生能印证并加深理解课堂讲授的理论知识，掌握由中药中提取、分离、精制有效成分，并对其进行鉴别的基本方法和技能，提高学生独立动手、观察分析、解决问题的能力，培养学生严谨的科学态度和良好的科研作风。 八、实验课的基本理论 1. 掌握各类主要中药化学成分(如生物碱、糖苷类、黄酮、蒽醌、苯丙素、萜类、强心苷、皂苷等)的基本结构类型、结构特征；了解各类主要化学成分中的重要中药； 熟悉各类主要化学成分中的重要生物活性成分。 2. 掌握各类主要化学成分的物理化学性质，理化性质与化学成分分子结构之间的相 互关系；熟悉不同的理化性质在提取方法的设计和化学结构鉴定中的重要作用。
3. 掌握各类生物活性成分常用的提取分离方法的原理和技术；了解提取分离方法和 处理条件对化学成分结构的影响及后生产物形成的可能性。 4. 了解各类主要化学成分的波谱特征；了解化学成分结构研究中典型的降解反应及衍生物的制备；掌握各主要类型化学成分的特征定性反应、化学结构鉴定研究的步骤和采取的主要方法。 九、实验方式与基本要求 每次实验课以小组进行教学：每组24人，由1位教师指导进行实验操作或课堂讨论。对中药化学实验中重要的操作技能和方法采取首先观看教学录像或操作动画，同时指导教师详细讲解每一步的操作方法和原理，然后再由学生自己动手操作，老师点评。 十、考核方式与评分方式 根据平时实验成绩和实验考试综合评定。平时实验70%，实验考试30%。
化学实验室安全操作规程 化学药品中,有很多是易燃、易爆、易腐蚀性和有毒性的。在实验前应充分了解本实验中的安全注意事项,严格遵守操作规程,才能避免事故的发生。假如由于各种原因而发生事故,应立即紧急处置。实验室的安全操作规程如下: 一、水、电、煤气一经使用完毕立即关闭。 二、实验室内严禁饮食、吸烟。实验完毕,必须洗净双手。 三、实验室内严禁任意混合各种化学药品,以免发生意外事故。 四、钾、钠和白磷等暴露在空气中易燃烧。所以钾、钠应保存在煤油中,白磷则可保存在水中。取用它们时要用镊子。一些有机溶剂(如乙醚、乙醇、丙酮、苯等)极易引燃,使用时必须远离明火,用毕立即盖紧瓶塞。 五、不纯氢气遇火易爆炸,操作时必须严禁接近烟火。在点燃前,必须先检验 并确保纯度。银氨溶液不能保存,因久置后也易爆炸。某些强氧化剂(如氯酸钾、硝酸钾、高锰酸钾等)或其混合物不能研磨,否则将引起爆炸。 六、浓酸、浓碱具有强腐蚀性,切勿使其溅在皮肤或衣服上,眼睛更应注意。 稀释它们时(特别是浓硫酸),应将它们慢慢倒入水中,而不能相反进行,以避免迸溅。 七、能产生有刺激性或有毒气体的实验必须在通风橱内进行。 八、有毒药品(如重铬酸钾、钡盐、砷的化合物、汞的化合物、特别是氰化物)不得进入口内或接触伤口。剩余的液也不能随便倒入下水道。
九、金属汞易挥发,它通过人的呼吸而进入体内,逐渐积累会引起慢性中毒。所以不能把汞洒落在桌上或地上。一旦洒落,必须尽可能收集起来,并用硫磺粉盖在洒落的地方,使汞转变成不挥发的硫化汞。 十、充分熟悉安全用具如灭火器材、砂箱以及急救药箱的放置地点和使用方法,并妥善爱护。安全用具和急救药品不准移作它用。 十一、实验室所有药品不得携出室外。用剩的有毒药品应交还给教师。
药用植物学实验指导 适用专业：（本科）药学、药物制剂 （专科）药物制剂技术 郑州华信学院医学院药学系 药学教研室
目录 实验一显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造 (2) 实验二植物细胞后含物——淀粉粒、草酸钙结晶体 (5) 实验三保护组织和分泌组织 (7) 实验四机械组织和输导组织 (9) 实验五根的显微构造 (11) 实验六单子叶植物地上茎和地下茎观察 (13) 实验七双子叶植物茎的初生构造和次生构造 (14) 实验八大黄、甘草、人参的鉴定 (16)
实验一显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造 一、实验目的： 1.了解显微镜的基本构造并掌握显微镜的正确使用方法和保养。 2.掌握撕取表皮的制片方法。 3.掌握植物细胞的基本构造。 二、实验仪器与材料 1.仪器：生物显微镜。 2.用具：镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、擦镜纸、棉布块。 3.材料：洋葱鳞茎的磷叶或大葱磷叶。 4.试液：蒸馏水、稀碘液、10%硝酸钾溶液。 三、实验内容： （一）显微镜的构造 1.机械部分次部分是显微镜的骨架，是安装光学部分的基座。 包括：镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调焦装臵等。 （1）基座是显微镜的底座，支持整个镜体，使显微镜放臵平稳。 （2）基柱镜座上面直立的短柱，支持镜体上部的各部分。 （3）镜臂弯曲如臂，下连镜柱，上连镜筒，为取放镜体时手握的部分。直筒显微镜的镜臂下端与镜柱连接处有一活动关节，可使镜体在一定范围内后倾，便于观察。 （4）镜筒上端臵目镜，下端与物镜转化器相连。 （5）物镜转换器连接于镜筒下端的圆盘，可自由转动，盘子有3－4个安装物镜的螺旋孔。当旋转转换器时，物镜即可固定在使用的位臵上，保证物镜与目镜的光线合轴。 （6）载物台放臵玻片标本的平台，中央有一通光孔，两侧有压片夹或机械移动器，既可固定玻片标本，也可以前后左右各方向移动。 （7）调焦装臵调节物镜和标本之间的距离，得到清晰的物像。在镜臂两侧有粗细调焦螺旋各1对，旋转时可使镜筒上升或下降，大的一对为粗调焦螺旋，旋转一圈可使镜筒移动2mm左右。小的一对为细调焦螺旋，旋转一圈可使镜筒移动0.1mm。 （8）聚光器调节螺旋镜柱一侧，旋转它时可使聚光器上下移动，借以调节光线德鄂强弱。 2.光学部分包括：物镜、目镜、反光镜、聚光器 （1）物镜安装在镜筒前端物镜转化器上的透镜。利用光线使被检标本第一次
天然药物化学实验报告 一、实验题目：槐米中槲皮素的提取分离及结构鉴定 二、实验目的: 通过对该选题进行资料查阅、方案设计、试验、结果分析等，让我自己学到一套系统、完整的槐米药效成分芦丁和槲皮素进行基源鉴定、提取、分离和结构鉴定的方法，并通过此项训练，提高自己的动手操作能力及综合运用自己所学知识的能力，培养自己独立思考、分析问题、解决问题的能力。 掌握槐米中槲皮素的提取及提取方法 了解槲皮素的药理作用及应用价值 掌握槲皮素的纯度检测 掌握槲皮素的结构鉴定的方法 三、实验基本原理： 本实验主要利用黄酮类化合物虽然有一定的极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀析出。以槐米为原料，采用煎煮法提取槐米有效成分芦丁，然后酸溶液水解获得槲皮素粗品，乙醇重结晶获得槲皮素精品。 四、实验所用试剂、仪器的型号及生产厂家： （一）实验试剂，见下表： 序号名称数量规格生产厂家 1 95%乙醇溶液25ml 500ml／瓶 AR 天津天力 2 浓H2SO4 12ml 500ml／瓶 AR 天津天力 3 甲醇10ml 500ml／瓶 AR 天津天力 4 无水乙醇43ml 500ml／瓶 AR 天津天力 5 纯净水1500ml 18L/桶万家纯水 6 硅胶GF254 30g 500g／瓶 青岛海浪 薄层层析
（二）实验仪器，见下表： 序号名称数量型号生产厂家 1 电子天平1台IM-B200 2 余姚市纪铭称量校验设备有 限公司 2 圆底烧瓶1个GG-17 1000ml 蜀牛 3 烧杯1个GG-17 1000ml 蜀牛 4 烧杯1个 GG-17 500ml 环球 5 烧杯1个GG-17 250ml Jing Xing 6 量筒1个100ml BOMEX 7 量筒1个10ml 旌湖 8 直型冷凝 管 1个BOMEX 9 75?弯管1个 10 橡胶管2条 11 移液管1个10ml 12 玻璃棒1个直径7mm 长40cm 高邮亚泰 13 尾接管1个BZ24129 HENG TAJ 14 布氏漏斗1个 15 抽滤瓶1个GG-17 500ml 蜀牛 16 滤纸1张 17 玻璃漏斗1个 18 研钵1套 19 胶头滴管1个 20 薄层板10个 21 展开缸1个P-1 100×100 上海信谊仪器 厂 22 紫外光谱 仪 1台 UV-8三用紫外分 析仪 无锡科达仪器 厂 23 熔点测定 仪 1台 X-6显微熔点测定 仪 北京泰克仪器 有限公司 24 真空泵1台SHD-III型循环水 式多用真空泵 保定高新区阳 光科教仪器厂 25 电热套1台98-1-C型数字控 温电热套 天津市泰斯特 仪器有限公司
天然药物化学实验指导 药化教研室 天然药物化学实验指导 一．说明 天然药物化学是一门实验学科，实验教学占重要地位，通过实验要达到以下目的。 1．能检验学生在课堂上所学的理论知识。使学生对理论知识的理解更加深入，掌握的更加牢固。 2．训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作和实际工作的基本训练。 3．使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。 实验中，重点是加强对学生基本技能的训练。 二．实验须知 1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。若发生事故应立即采取措施并报告指导老师。 2．实验前做好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法。安排的实验计划，争取准时结束，实验过程中应养成及时记录的习惯，凡是观察到的现象和结果及有关数据，应随时如实地记录。实验完毕，要认真总结，写好实验报告，实验所得的提纯物要包好，贴上标签，交给老师。 3．实验室内应保持安静，不得大声喧嚷，不许抽烟。进入实验室必须穿工作服，实验过程中，不许随便离开。 4．实验台前应保持整洁，与实验无关的物品不得放在台前。实验中废弃的固体物，要丢入废物桶内。 5．爱护仪器，节约药品，仪器损坏后应填写报损单，注明原因，由指导教师按规定处理。 6．实验过程中要节约用水、用电。 7．每次实验结束后，值日生应将实验室打扫干净，倾倒废物桶，关好水、电、门窗，方可离去。 实验一虎杖蒽醌类成分及白黎芦醇苷的提制和鉴定 虎杖系蓼科蓼属植物polyganum cuspidetum siebet zucc.（即Reynoutrin japonica Houobluyn）的根茎。又名阴阳莲。民间用于消炎、杀菌、利尿、通经和镇痛。近年来用于烫伤、止血、消结石和降血脂均有疗效。虎杖根茎中含有大量的蒽醌类成分和二苯乙烯类成分。后者具有降血脂的作用。 一、部分已知成分的物理性质 1．大黄酚（chrysophanol） O HO OH CH3 O
实验室操作规程 一、实验室的安全工作是关系到人身和财产安全的头等大事。实验室教师对实验室安全负责，坚持“安全第一，预防为主”“谁主管谁负责”的原则。 二、各实验室应根据各自特点，制定出具体的安全条例和安全操作规程，并张挂在实验室明显地方，严格贯彻执行。实验室工作人员及参加实验的人员必须认真学习有关条例和操作规程。 三、实验室的电源、火源、水源等方面情况要经常进行检查，每周末要对实验室的电源、火源、水源等方面的情况进行严格的检查，对发现的隐患要及时处理，解决不了的要及时上报。学校进行不定期的实验室安全检查，并对存在的问题进行及时处理。 四、关于实验室危险化学品安全的管理. 1. 危险化学品的范围：危险化学品系指易燃、易爆、剧毒、放射性及其它带有危险性的物品。. 2. 危险化学品的申请及购置：凡需使用危险化学品，应提交危险化学品使用申请报告，经审批同意后，由学校后勤按相关规定统一组织采购。 3. 危险化学品的管理对易燃、易爆及其它危险化学品，必须指定专人保管。做好详细的领料和使用记录。对存放地点和危险物品要经常检查，及时排除不安全隐患。 4. 危险化学品的使用 （1）做危险性实验时必须经主管领导批准，有两人以上在场方可进
行，节假日和夜间严禁做危险性实验。 （2）做有危害性气体的实验必须在通风橱里进行。. 五、关于实验室安全用电的管理 1. 实验室内的用电线路和配电盘、板、箱、柜等装置及线路系统中的各种开关、插座、插头等均应经常保持完好可用状态，熔断装置所用的熔丝必须与线路允许的容量相匹配，严禁用其他导线替代。室内照明器具都要经常保持稳固可用状态。 2. 实验室应有严格的用电管理制度并认真落实，对进实验室工作或学习的学生、教师、实验技术及其他人员，应经常进行安全用电教育，把安全用电制度落到实处。 六、实验室内不得使用明火取暖，严禁抽烟。必须使用明火实验的场所，经批准后，才能使用。 七、对违反操作，玩忽职守，忽视安全而造成火灾、污染、中毒等人身重大损伤，精密、贵重仪器和大型设备损坏、被盗等重大事故，实验室要保护好现场，并立即报告。 2017年9月 魏家楼中学