培养细胞的细胞生物学
一、体内、外细胞的差异和分化
1、差异：细胞离体后，失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响，生活在缺乏动态平衡的相对稳定环境中，日久天长，易发生如下变化：分化现象减弱；形态功能趋于单一化或生存一定时间后衰退死亡；或发生转化获得不死性，变成可无限生长的连续细胞系或恶性细胞系。因此，培养中的细胞可视为一种在特定的条件下的细胞群体，它们既保持着与体内细胞相同的基本结构和功能，也有一些不同于体内细胞的性状。实际上从细胞一旦被置于体外培养后，这种差异就开始发生了。
虽然体外细胞与机体细胞存有差异，但并未失去研究的意义。且不论其有许多性状仍与体内相同（如体外培养的心肌细胞仍可博动），只从细胞遗传学（Cyto－genetics）的角度看，离体细胞仍带有全套的二倍体基因。细胞在培养中的表现，只不过是相应基因关闭／开启引起的现象，这并非是绝对缺陷。恰恰相反，在培养的细胞中某些特定功能的丧失，可为该基因的表达与调控提供线索。
2、分化；体外培养的细胞分化能力并未完全丧失，只是环境的政变，细胞分化的表现和在体内不同。细胞是否表现分化关键在于是否存在使细胞分化的条件，如Friend细胞（小鼠红白血病细胞）在一定的因素作用下可以合成血红蛋白，血管内皮细胞在类似基膜物质底物上培养时能长成血管状结构，杂交瘤细胞能产生特异的单克隆抗体，这些均属于细胞分化行为。
二、体外培养细胞的分型
（一）贴附型：大多数培养细胞贴附生长，属于贴壁依赖性细胞，判断细胞形态时不能接体内组织学标推判定，仅大致分成以下四型：
1、成纤维细胞型：胞体呈梭型或不规则三角形，中央有卵圆形核，胞质突起，生长时呈放射状。除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间充质起源的组织，如心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮等常呈本型状态。另外，凡培养中细胞的形态与成纤维类似时皆可称之为成纤维细胞。
2、上皮型细胞：细胞呈扁平不规则多角形，中央有圆形核，细胞彼此紧密
相连成单层膜。生长时呈膜状移动，处于膜边缘的细胞总与膜相连，很少单独行动。起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。
3、游走细胞型：呈散在生长，一般不连成片，胞质常突起，呈活跃游走或变形运动，方向不规则。此型细胞不稳定，有时难以和其他细胞相区别。
4、多型细胞型：有一些细胞，如神经细胞难以确定其规律和稳定的形态，可统归于此类。
（二）悬浮型；见于少数特殊的细胞，如某些类型的癌细胞及白血病细胞。胞体圆形，不贴于支持物上，呈悬浮生长。这类细胞容易大量繁殖。
三、培养细胞的生长和增殖过程
体内细胞生长在动态平衡环境中，而组织培养细胞的生存环境是培养瓶、皿或其它容器，生存空间和营养是有限的。当细胞增殖达到一定密度后，则需要分离出一部分细胞和更新营养液，否则将影响细胞的继续生存，这一过程叫传代（Passage或Subculture）。每次传代以后，细胞的生长和增殖过程都会受一定的影响。另外，很多细胞特别是正常细胞，在体外的生存也不是无限的，存在着一个发展过程。所有这一切，使组织细胞在培养中有着一系列与体内不同的生存特点。
（一）培养细胞生命期（Life Span of Culture Cells）
所谓培养细胞生命期，是指细胞在培养中持续增殖和生长的时间。体内组织细胞的生存期与完整机体的死亡衰老基本相一致。组织和细胞在培养中生命期如何？这要看细胞的种类、性状和原供体的年龄等情况。人胚二倍体成纤维细胞培养，在不冻存和反复传代条件下，可传30～50代，相当于150～300个细胞增殖周期，能维待一年左右的生存时间，最后衰老凋亡（Apoptosis）。如供体为成体或衰老个体，则生存时间较短；如培养的为其它细胞如肝细胞或肾细胞，生存时间更短，仅能传几代或十几代。只有当细胞发生遗传性改变，如获永生性或恶性转化时，细胞的生存期才可能发生改变。对此以后将详述。
正常细胞培养时，不论细胞的种类和供体的年龄如何，在细胞全生存过程中，大致都经历以下三个阶段：
1．原代培养（Primary Culture）期：
也称初代培养，即从体内取出组织接种培养到第一次传代阶段，一般持续1一4周。此期细胞呈活跃的移动，可见细胞分裂，但不旺盛。初代培养细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。细胞群是异质的（Heterogeneous），也即各细胞的遗传性状互不相同，细胞相互依存性强。如把这种细胞群稀释分散成单细胞，在软琼脂培养基中进行培养时，细胞克隆形成率（Cloning Efficiency）很低，即细胞独立生存性差。克隆形成率即细胞群被稀释分散成单个细胞进行培养时，形成细胞小群（克隆）的百分数。初代培养细胞多呈二倍体核型；由于原代培养细胞和体内细胞性状相似性大，是检测药物很好的实验对象。
2．传代期：
初代培养细胞一经传代后便改称做细胞系（Cell Line）。在全生命期中此期的持续时间最长。在培养条件较好情况下，细胞增殖旺盛，并能维持二倍体核型，呈二倍体核型的细胞称二倍体细胞系（Diploid Cell Line）。为保持二倍体细胞性质，细胞应在初代培养期或传代后早期冻存。当前世界上常用细胞均在不出十代内冻存。如不冻存，则需反复传代以维持细胞的适宜密度，以利于生存。但这样就有可能导致细胞失掉二倍体性质或发生转化。一般情况下当传代10～50次左右，细胞增殖逐渐缓慢，以至完全停止，细胞进入第三期。
3．衰退期：
此期细胞仍然生存，但增殖很慢或不增殖；细胞形态轮廓增强，最后衰退凋亡。在细胞生命期阶段，少数情况下，在以上三期任何一点（多发生在传代末或衰退期），由于某种因素的影响，细胞可能发生自发转化（Spontaneous Transformation）。转化的标志之一是细胞可能获得永生性（Immortality）或恶性性（Malignancy）。细胞永生性也称不死性，即细胞获持久性增殖能力，这样的细胞群体称无限细胞系（Infinite Cell Line），也称连续细胞系（Continuous Cell Line）。在早期文献中无限细胞系也称已建立细胞系（Established Cell Line），现已不用。无限细胞系的形成主要发生在第二期末，或第三期初阶段。细胞获不死性后，核型大多变成异倍体（Heteroploid）。细胞转化亦可用人工方法诱发，转化后的细胞也可能具有恶性性质。细胞永生性和恶性性非同一性状。
（二）组织培养细胞一代生存期
所有体外培养细胞，包括初代培养及各种细胞系，当生长达到一定密度后，都需做传代处理。传代的频率或间隔与培养液的性质、接种细胞数量和细胞增殖速度等有关。接种细胞数量大、细胞基数大、相同增殖速度条件下，细胞数量增加与饱和速度相对要快（实际上细胞接种数量大时细胞增殖速度比稀少时要快）。连续细胞系和肿瘤细胞系比初代培养细胞增殖快，培养液中血清含量多时细胞增殖比少时快。以上情况都会缩短传代时间。
所谓细胞“一代”一词，系仅指从细胞接种到分离再培养时的一段时间，这已成为培养工作中的一种习惯说法，它与细胞倍增一代非同一含义。如某一细胞系为第153代细胞，即指该细胞系已传代153次。它与细胞世代（Generation）或倍增〔Doubling）不同；在细胞一代中，细胞能倍增3～6次。细胞传一代后，一般要经过以下三个阶段：
1．潜伏期（Latent Phase）：
细胞接种培养后，先经过一个在培养液中呈悬浮状态的悬浮期。此时细胞胞质回缩，胞体呈圆球形。接着是细胞附着或贴附于底物表面上，称贴壁，悬浮期结束。各种细胞贴附速度不同，这与细胞的种类、培养基成分和底物的理化性质等密切相关。初代培养细胞贴附慢，可长达10～24小时或更多；连续细胞系和恶性细胞系快，10～30分钟即可贴附。细胞贴附现象是一个非常复杂和与多种因素相关的过程。支持物能影响细胞的贴附；底物表面不洁不利贴附，底物表面带有阳性电荷利于贴附。另外在贴附过程中，有一些特殊物质如纤维连接素（Fibronectin），又称LETS（Larger External Transformation Substance），细胞表面蛋白（Cell Surface Protein：CSP）等也参与贴附过程。这些物质都是蛋白类成分，它们有的存在于细胞膜的表面（如 CSP），有的则来自培养基中的血清（LETS）。近年又从各种不同组织和生物成分中提取出了很多促贴附物质。贴附是贴附类细胞生长增殖条件之一。
细胞贴附于支持物后，除先经过前述延展过程变成极性细胞，还要经过一个潜伏阶段，才进入生长和增殖期。细胞处在潜伏期时，可有运动活动，基本无增殖，少见分裂相。细胞潜伏期与细胞接种密度、细胞种类和培养基性质等密切相关。初代培养细胞潜伏期长，约24～96小时或更长，连续细胞系和肿瘤细胞
潜伏期短，仅6～24小时；细胞接种密度大时潜伏期短。当细胞分裂相开始出现并逐渐增多时，标志细胞已进入指数增生期。
2．指数增生期（Logarithmic growth Phase）：
这是细胞增值最旺盛的阶段，细胞分裂相增多。指数增生期细胞分裂相数量可作为判定细胞生长旺盛与否的一个重要标志。一般以细胞分裂（Mitotic Index：MI）表示，即细胞群中每1000个细胞中的分裂相数。体外培养细胞分裂指数受细胞种类、培养液成分、pH、培养箱温度等多种因素的影响。一般细胞的分裂指数介于0.1%～0.5%，初代细胞分裂指数低，连续细胞和肿瘤细胞分裂指数可高达3%～5%。pH和培养液血清含量变动对细胞分裂指数有很大影响。指数增生期是细胞一代中活力最好的时期，因此是进行各种实验最好的和最主要的阶段。在接种细胞数量适宜情况下，指数增生期持续3～5天后，随细胞数量不断增多、生长空间渐趋减少、最后细胞相互接触汇合成片。细胞相互接触后，如培养的是正常细胞，由于细胞的相互接触能抑制细胞的运动，这种现象称接触抑制（Contact Inhibition）。而恶性细胞则无接触抑制现象，因此接触抑制可作为区别正常与癌细胞标志之一。肿瘤细胞由于无接触抑制能继续移动和增殖，导致细胞向三维空间扩展，使细胞发生堆积（Piled up）。细胞接触汇合成片后，虽发生接触抑制，只要营养充分，细胞仍然能够进行增殖分裂，因此细胞数量仍在增多。但当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯竭和代谢物的影响，则发生密度抑制（Density Inhibition），导致细胞分裂停止。因此细胞接触抑制和密度抑制是两个不同的概念，不应混淆。
3．停滞期（Stagnate Phase）：
细胞数量达饱和密度后，细胞遂停止增殖，进入停滞期。此时细胞数量不再增加，故也称平顶期（Plateau）。停滞期细胞虽不增殖，但仍有代谢活动，继而培养液中营养渐趋耗尽，代谢产物积累、pH降低。此时需做分离培养即传代，否则细胞会中毒，发生形态改变，重则从底物脱落死亡，故传代应越早越好。传代过晚（已有中毒迹象）能影响下一代细胞的机能状态。在这种情况下，虽进行了传代，因细胞已受损，需要恢复，至少还要再传1～2两代，通过换液淘汰掉死细胞和使受损轻微的细胞得以恢复后，才能再用。结果反而耽误了时间，这是在实验中应特别注意的。
By smoking_cat
细胞通讯的方式 （1）细胞通过分泌化学信号进行细胞间通讯，这是多细胞生物普遍采用的通讯方式。 （2）细胞间接触依赖性的通讯，指细胞间直接接触，通过与质膜结合的信号分子影响其它细胞。 （3）动物相邻细胞间形成间隙连接以及植物细胞间通过胞间连丝使细胞间相互沟通，通过交换小分子来实现代谢耦联或电耦联。 细胞分泌化学信号可长距离或短距离发挥作用，其作用方式分为： （1）内分泌，由内分泌细胞分泌信号分子到血液中，通过血液循环运送到体内各个部位，作用于靶细胞。 （2）旁分泌，细胞通过分泌局部化学介质到细胞外液中，经过局部扩散作用于邻近靶细胞。在多细胞生物中调节发育的许多生长因子往往是通过旁分泌起作用的。此外，旁分泌方式对创伤或感染组织刺激细胞增殖以恢复功能也具有重要意义。 （3）自分泌，细胞对自身分泌的物质产生反应。自分泌信号常存在于病理条件下，如肿细胞合成并释放生长因子刺激自身，导致肿瘤细胞的持续增殖。 （4）通过化学突触传递神经信号，当神经元接受刺激后，神经信号以动作电位的形式沿轴突快速传递至神经末梢，电压门控的Ca2+通道将电信号转换为化学信号。 通过胞外信号介导的细胞通讯步骤 （1）产生信号的细胞合成并释放信号分子。 （2）运送信号分子至靶细胞。 （3）信号分子与靶细胞受体特异性结合并导致受体激活。 （4）活化受体启动胞内一种或多种信号转导途径。 （5）引发细胞功能、代谢或发育的改变。 （6）信号的解除并导致细胞反应终止。 核被膜所具有的功能
一方面，核被膜构成了核、质之间的天然选择性屏障，将细胞分成核与质两大结构与功能区域，使得DNA复制、RNA转录与加工在核内进行，而蛋白质翻译则局限在细胞质中。这样既避免了核质问彼此相互干扰，使细胞的生命活动秩序更加井然，同时还能保护核内的DNA分子免受损伤。 另一方面，核被膜调控细胞核内外的物质交换和信息交流。核被膜并不是完全封闭的，核质之间进行着频繁的物质交换与信息交流。这些物质交换与信息交流主要是通过核被膜上的核孔复合体进行的。 核被膜的结构组成及特点 （1）核被膜由内外两层平行但不连续的单位膜构成。面向核质的一层膜被称作内（层）核膜，而面向胞质的另一层膜称为外（层）核膜。两层膜厚度相同，约为7。5 nm。两层膜之间有20～40nm的透明空隙，称为核周间隙或核周池。核周间隙宽度随细胞种类不同而异，并随细胞的功能状态而改变。 （2）核被膜的内外核膜各有特点：①外核膜表面常附有核糖体颗粒，且常常与糙面内质网相连，使核周间隙与内质网腔彼此相通。从这种结构上的联系出发，外核膜可以被看作是糙面内质网的一个特化区域。②内核膜表面光滑，无核糖体颗粒附着，但紧贴其内表面有一层致密的纤维网络结构，即核纤层。内核膜上有一些特有的蛋白成分，如核纤层蛋白B受体。③双层核膜互相平行但并不连续，内、外核膜常常在某些部位相互融合形成环状开口，称为核孔，：在核孔上镶嵌着一种复杂的结构，叫做核孔复合体。核孔周围的核膜特称为孔膜区，它也有一些特有的蛋白成分。
细胞生物学概述 摘要：细胞生物学是以细胞为研究对象，从细胞的整体水平、亚显微水平、分子水平等三个层次，（斯。诺。美。A11-走在生物医学的最前沿）以动态的观点，研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的生活史和各种生命活动规律的学科。细胞生物学是现代生命科学的前沿分支学科之一，主要是从细胞的不同结构层次来研究细胞的生命活动的基本规律。从生命结构层次看，细胞生物学位于分子生物学与发育生物学之间，同它们相互衔接，互相渗透。 英文摘要：Cell biology is to cell as the research object, from the three levels of the overall level of the sub microscopic level, cells, molecular level (,. Connaught. Beauty. A11- in the forefront of biomedical) from the dynamic point of view, the structure and function of cells, cell and organelle of the life history and various life activities of the discipline. Cell biology is one of the frontier branch of modern life science, mainly is the basic rule to study cell from different hierarchy of life activities of cells. From the life structure and arrangement, and developmental biology is located between cell biology molecular biology, their mutual connection, mutual penetration. 关键字：细胞学说显微技术遗传物质 前言：细胞是生命的基本单位，细胞的特殊性决定了个体的特殊性，因此，对细胞的深入研究是揭开生命奥秘、改造生命和征服疾病的关键。在我国基础学科发展规划中，细胞生物学与分子生物学，神经生物学和生态学并列为生命科学的四大基础学科。 主体：细胞生物学(cell biology)是研究细胞结构、功能及生活史的一门科学。现代细胞生物学从显微水平，超微水平和分子水平等不同层次研究细胞的结构、功能及生命活动。细胞生物学是现代生命科学的前沿分支学科之一，主要是从细胞的不同结构层次来研究细胞的生命活动的基本规律。从生命结构层次看，细胞生物学位于分子生物学与发育生物学之间，同它们相互衔接，互相渗透。一、细胞生物学简史 从研究内容来看细胞生物学的发展可分为三个层次，即显微水平、超微水平和分子水平。i从时间纵轴来看细胞生物学的历史大致可以划分为四个主要的阶段：
2020-2021中科院细胞生物学考研招生情况、分数线、参考书目等信息汇总 本文将由新祥旭考研简老师对中科院细胞生物学专业考研进行解析，主要有以下几个板块：中科院的介绍，院系介绍，考研科目介绍，考研参考书目以及细胞生物学考研备考经验，细胞生物学专业院校排名情况等几大方面。 一、学校简介 动物研究所历史悠久，人才辈出，贡献卓著。1962年由昆虫研究所和动物研究所合并成为现在的动物研究所。动物研究所目前拥有三个国家重点实验室，即干细胞与生殖生物学国家重点实验室、膜生物学国家重点实验室、农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室；建立了动物生态与保护生物学院重点实验室和动物进化与系统学院重点实验室；有馆藏量近800万号的动物标本馆；还建立了国家动物博物馆，以及众多的野外观察研究台站和基地。研究所主要定位在围绕农业、生态、环境和人类健康及其人与自然协调并存等方面的重大需求和科学问题，在珍稀濒危动物保护、有害动物控制、资源动物可持续利用、动物疾病预警与防控、生殖与发育生物学、动物系统学和进化生物学等领域开展基础性、前瞻性、战略性研究。现有在学研究生600多人。
二、招生情况、考试科目071009 细胞生物学计划6人 071009 细胞生物学6 可接收推荐免 试生，可硕博连 读 1生态毒理学戴家 银 ①101政治理论②201英语③612生物化学与分子生物 学④852细胞生物学 2分子神经毒 理 伍一 军 欢迎医学背景 考生报考 3媒介昆虫与 病毒互作 郑爱 华 4细胞运动和 肌肉收缩 李向 东 ①101政治理论②201英语③612生物化学与分子生物学 或622动物学④852细胞生物学或853遗传学 5神经细胞与 昆虫行为 王琛 柱 ①101政治理论②201英语③612生物化学与分子生物学 或602高等数学（乙）④852细胞生物学或853遗传学 6昆虫社会行 为与神经调 节 周传同上 三、参考书目 612生物化学与分子生物学 《生物化学》（2002年第三版），上、下册王镜岩、朱圣庚、徐长法编著，高等教育出版社 《基因Ⅹ》（中文版），Benjamin Lewin，科学出版社。
中医护理的发展历史简介 中医护理同中医学一样有着悠久的历史，自从有了人类，有了疾病，就有了医和护，医护是同源的。中医护理学的发展史可分七个时期。 萌芽时期约距170万年前，我们的祖先为了生活和生存，在与疾病作斗争中，逐步积累了不少护理知识。如从西安半坡村发掘的带有门户通道房屋的遗址，说明上古人已懂得筑房可避狂风暴雨和野兽的袭击。用兽皮和树皮作衣可避寒防邪等护理。氏族公社后，随着部落间斗争，当受伤后采用泥土、树叶、草茎等涂裹伤口的外用护理法。定居下来后，通过对动、植物的长期观察和尝试，认识到更多的动、植物和药物，并用于病人，《史记》中记载有神农氏尝百草的例证。 护理学基本形成时期夏、商、周至春秋时期，随着社会生产力和文化的发展，护理学也得到相应发展。如河南安阳殷王墓中发掘出来的甲骨文中记载的“沐”字，很像人在盆中用水洗澡，说明当时人们已有定期沐浴的卫生习惯。周代，人们已懂得凿井和饮食护理。如《左传》记载：“土厚水深，居之不疾”和“土薄水浅……其恶易觏”的论述，说明当时已知水土等居住条件与人体健康的关系。并开始进行灭鼠、除虫、改善环境卫生等防病调护等活动。 春秋时期，人们已了解四时气候变化与疾病的关系，如《周礼》记载四季发病：“春时有病首疾，夏时有痒疥疾，秋时有疟寒疾，冬时有咳上气”说明四季气候变化影响人体的健康，气候失常导致疾病的流行。它提示人们要做好气象、起居等护理，顺应四时气候避免疾病的发生。从《周记?天官》中有：“凡民之疾病分而治之，死终则各书其所以而入医师。”说明当时已开始分科治疗和护理，并已建立了治疗、书写死亡报告等医疗文件的记录制度。这一时期护理学基本形成的另一标志，是护理和治疗病人不再求助于巫术占卜，而是通过客观检查和观察来判断疾病的吉凶。如《周记》记载以五音（角、徵、宫、商、羽五个音阶）、五声（呼、笑、歌、哭、呻）和五色（青、紫、蓝、白、黑）来判断疾病的吉凶。这是运用中医五音、五声和五色配肝、心、脾、肺、肾五脏的学说，通过声音和面色观察来推测五脏病变和吉凶。同时随着文化的发展，针药知识也得到发展，从而扩大了给药的途径和方法。 理论体系确立时期战国时期，七国争雄，新兴封建制度建立，思想文化领域中出现了“百家争鸣”的局面。我国最早医学理论专著《黄帝内经》，系统地总结了古代医学成就和护理经验，运用当时朴素的唯物论和辩证法思想对人体的生理、病理变化及疾病的诊断、治疗和护理等方面作了较全面的阐述，初步奠定了中医护理的理论基础。《黄帝内经》中有关护理的内容十分丰富，它不但提出了“寒者热之”、“热者寒之”“虚则补之”、“实则泻之”的正护原则，和“热因热
细胞生物学知识点总结 导读：细胞生物学知识点总结 细胞通讯的方式 （1）细胞通过分泌化学信号进行细胞间通讯，这是多细胞生物 普遍采用的通讯方式。 （2）细胞间接触依赖性的通讯，指细胞间直接接触，通过与质 膜结合的信号分子影响其它细胞。 （3）动物相邻细胞间形成间隙连接以及植物细胞间通过胞间连 丝使细胞间相互沟通，通过交换小分子来实现代谢耦联或电耦联。 细胞分泌化学信号可长距离或短距离发挥作用，其作用方式分为：（1）内分泌，由内分泌细胞分泌信号分子到血液中，通过血液 循环运送到体内各个部位，作用于靶细胞。 （2）旁分泌，细胞通过分泌局部化学介质到细胞外液中，经过 局部扩散作用于邻近靶细胞。在多细胞生物中调节发育的许多生长因子往往是通过旁分泌起作用的。此外，旁分泌方式对创伤或感染组织刺激细胞增殖以恢复功能也具有重要意义。 （3）自分泌，细胞对自身分泌的物质产生反应。自分泌信号常 存在于病理条件下，如肿细胞合成并释放生长因子刺激自身，导致肿瘤细胞的'持续增殖。 （4）通过化学突触传递神经信号，当神经元接受刺激后，神经 信号以动作电位的形式沿轴突快速传递至神经末梢，电压门控的Ca2+
通道将电信号转换为化学信号。 通过胞外信号介导的细胞通讯步骤 （1）产生信号的细胞合成并释放信号分子。 （2）运送信号分子至靶细胞。 （3）信号分子与靶细胞受体特异性结合并导致受体激活。 （4）活化受体启动胞内一种或多种信号转导途径。 （5）引发细胞功能、代谢或发育的改变。 （6）信号的解除并导致细胞反应终止。 核被膜所具有的功能 一方面，核被膜构成了核、质之间的天然选择性屏障，将细胞分成核与质两大结构与功能区域，使得DNA复制、RNA转录与加工在核内进行，而蛋白质翻译则局限在细胞质中。这样既避免了核质问彼此相互干扰，使细胞的生命活动秩序更加井然，同时还能保护核内的DNA分子免受损伤。 另一方面，核被膜调控细胞核内外的物质交换和信息交流。核被膜并不是完全封闭的，核质之间进行着频繁的物质交换与信息交流。这些物质交换与信息交流主要是通过核被膜上的核孔复合体进行的。 核被膜的结构组成及特点 （1）核被膜由内外两层平行但不连续的单位膜构成。面向核质的一层膜被称作内（层）核膜，而面向胞质的另一层膜称为外（层）核膜。两层膜厚度相同，约为7。5 nm。两层膜之间有20～40nm的
一、是非题：（20 题，每题 1.5 分，共30分。答“是”写“ +”，答“非”写“ -”。） 1. 成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核，但有转录活性。 2. 细胞质膜一侧面向细胞外环境而另一侧朝向细胞内环境，所以内外两侧的磷脂是不同的。而细胞器的膜处于细胞内，因此两侧的磷脂时相同的。 3. 酶偶连受体的下游是腺苷酸环化酶。 4. 直径约为15nm的核糖体的亚基是通过直径约为9nm的核孔运输到胞质中的。 5. B 细胞分化成熟过程中，抗体分子的重链基因重排早于轻链基因重排。 6. 病毒基因组可以是单链或双链DNA也可以是单链或双链RNA. 7. 原位杂交技术可以将特异核酸序列和蛋白质在细胞内定位。 8. 胚胎干细胞是在体内一直维持不分化的细胞群体。 9. 负责纤毛运动和内膜细胞器运输的动力蛋白（dynein ）是不同的。 10. 脂双层内的脂质能围绕其长轴旋转。 11. 细胞膜上载体协同运输系统可对分子进行同向转移和异向转移。同向转移的是相同的分子而异向转移的是不同的分子。 12. 直接来自有机体组织的细胞培养称为原代培养。 13. 与微管和微丝相似，中等纤维蛋白也在各种组织中广泛表达，与细胞的分化状态无关。 14. 接头蛋白中的SH2（Src homolog region 2 ）结构域可选择性地识别磷酸化的酪氨 酸残基，并与之结合。 15. 超速离心机可用来分离细胞器和生物大分子。 16. 线粒体的分裂有以下几种形式：间壁分离，收缩后分离和出芽。 17. 多数类型的动物细胞在离体培养时都能产生迁移运动。 18. 姐妹染色单体存在于整个细胞周期中。 19. Bcl-2 蛋白对细胞调亡有抑制作用。 20. 激光扫描共焦显微术利用激光切割细胞产生光切片（optical section ），从而得到该层的清晰图像。 二、选择题：（30题，每题 1.5 分，共45分。） 1 .导致非整倍体的不正常染色体分离发生在细胞分裂的_____________ . A. 前期 B. 中期 C. 后期 D. 末期 2. 光学显微镜最容易观察到的细胞器或细胞内结构是 A. 线粒体 B. 内质网 C. 细胞核 D. 微管 3. 细胞核不是哪一生命活动的场所： A. DNA合成 B. 蛋白质合成 C. RNA 合成 D. 核糖体亚基的装配 4. 桥粒与胞内的 _________ 相连。 A. 应力纤维 B. 微管 C. 中等纤维 D.胶原 5. 关于蛋白质核定位信号的论述哪一个是不恰当的： A. 含有碱性氨基酸 B. 核蛋白入核需要核定位信号 C）有核定位信号的蛋白质总时进入细胞核 D. 核蛋白入核后核定位信号不被切去
中医护理学基础：中医护理发展简史——形 成 中医护理学的初步形成阶段（战国──东汉时期）任何一门学科都要有理论作基础的，虽然我们认为护可能早于医，因为，原始人生了病，开始并没有医药，只有他的亲人照料他、看护他。后来有了医疗活动，但有关护理方面的知识均散在于各医家的著作中，没有护理专著。 《黄帝内经》奠定了中医护理学的基础 《皇帝内经》是我国第一部医学典籍，成书于战国至秦汉时期，全面总结了秦汉以前的医学成就。实为历代医家的经验总结和汇编。全书分《素问》、《灵枢》两部分。 基本观点有整体观、阴阳平衡观、邪正斗争观、重视预防观。 基本学说有阴阳五行学说、藏象经络学说、病因病机学说、诊法治则学说等。同时也论述了中医护理学的理论知识。 《神农本草经》与用药护理 《神农本草经》是我国现存最早的一部药物学重要典籍，和《内经》一样，非一时一人之手笔，大约是秦汉以来
许多医药学家不断搜集，直至东汉时期，才最后加工整理成书的。全书共分三卷，共收载药物365种，其中植物药252种，动物药67种，矿物药46种。根据药物性能、功效的不同，分为上、中、下三品。 本书概括地讲述了君、臣、佐、使的药物学理论，另外还有药物的七情合和、四气五味等理论，对药物的配伍、组成方剂有具体的指导意义，对临床护理观察药效和毒性反应也有指导价值。 《伤寒杂病论》开创了辨证施护的先河 《伤寒杂病论》是汉代医家张仲景所著。 张仲景继承了《黄帝内经》等古典医籍的基本理论，以六经论伤寒，以脏腑论杂病，提出了包括理、法、方、药在内的辨证论治原则，使祖国医学的基本理论与临床实践紧密地结合起来，不仅奠定了中医辨证论治的理论体系，也为临床辨证施护开了先河。本书强调服药护理、饮食护理对疾病的作用，并创建一些护理技术。 华佗-医疗体育的奠基人 华佗是我国后汉时期的名医，精通内、外、妇、儿、针灸等，以外科著称。首创麻沸散，创编了“五禽戏”。其在古代气功导引的基础上，模仿虎、鹿、猿、熊、鸟等五种动物的活动姿态，创编了一套保健体操，名叫“五禽戏”，使头、身、腰、四肢等各个关节都得到活动。认为“人体欲
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目录 2010年中国科学院852细胞生物学考研真题 (7) 2011年中国科学院852细胞生物学考研真题 (9) 2012年中国科学院852细胞生物学考研真题 (11) 2013年中国科学院852细胞生物学考研真题 (14) 2014年中国科学院852细胞生物学考研真题 (16) 2015年中国科学院852细胞生物学考研真题 (18) 2016年中国科学院852细胞生物学考研真题 (20) 2017年中国科学院852细胞生物学考研真题 (23) 2018年中国科学院852细胞生物学考研真题 (25) 2019年中国科学院852细胞生物学考研真题 (27) 2020年中国科学院852细胞生物学真题 (29) 2010年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (31) 2011年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (41) 2012年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (50) 2013年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (61) 2014年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (73) 2015年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (83) 2016年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (93) 2017年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (100)
2018年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (110) 2019年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (118) 2020年中国科学院852细胞生物学真题参考答案 (127)
1、何谓成熟促进因子（MPF）?包括哪些主要成分？如何证明某一细胞提取液含有MPF？ 成熟促进因子是指M期细胞中存在的促进细胞分裂的因子，是由两个不同亚基组成的异质二聚体，其一为调节亚基，有周期蛋白组成；其二为催化亚基，是丝氨酸/苏氨酸型蛋白激酶，其活性有懒于周期蛋白，故称为周期依赖性蛋白激酶。可以通过蛙卵细胞质移植实验证实MPF。成熟蛙卵细胞的细胞质可以诱导未成熟的蛙卵细胞提前进入成熟期。 2、简述微管、微丝和中间纤维的主要异同点？（顺序为微管、微丝、中间纤维） 直径：22nm、7nm、10nm；基本构件：α、β—微管蛋白，肌动蛋白，中间纤维丝蛋白；相对分子量（乘10的3次）：50，43，40~200；结构：13根原丝围成的α—螺旋中空管状，双股α—螺旋，多级螺旋；极性：有，有，无；单体蛋白库：有，有，无；踏车现象：有，有，无；特异性药物：秋水仙素、长春花碱，细胞松弛素B、鬼笔环肽，无；运动相关蛋白：驱动蛋白、动力蛋白，肌球蛋白，无；主要功能：细胞运动、胞内运输、支持作用，变形运动、形状维持、胞质环流、胞质分裂环的桶状结构，骨架作用、细胞连接、信息传递；细胞分裂：纺锤体，无，包围纺锤体。 3、为什么将内质网比喻“开放的监狱”？ KDEL信号序列为内质网驻守信号，如果内质网驻守蛋白被错误的包装进了COPII，并运输到顺面高尔基体，高尔基体膜上存在KDEL识别受体，能识别错误运输来的内质网驻守蛋白，并形成COP I小泡，将内质网驻守蛋白运输返回内质网。 4、在研究工作中分离得到一个与动物减数分裂直接相关的基因A，如果想由此获得该基因的单克隆抗体，请简要叙述实验方案及其实验原理。 英国科学家Milstein和Kohler因提出单克隆抗体而获得1984年诺贝尔生理学或医学奖。它是将产生抗体的单个B淋巴细胞同肿瘤细胞杂交，获得既能产生抗体又能无线增值的杂种细胞，并一次生产抗体的技术。其原理是：B淋巴细胞能够产生抗体，但在体外不能进行无限分裂；而肿瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代，但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。 实验方案：a、表达基因A的蛋白，免疫小老鼠，获得免疫的淋巴细胞；b、将经过免疫的小老鼠的淋巴细胞与Hela细胞融合；c、利用选择培养基对融合细胞进行培养筛选，只有真正融合的细胞才能继续生长；d、融合细胞的培养，抗体的纯化。 5、微管是体内膜泡运输的导轨，请分析体内膜泡定向运输的机制？ 微管是有极性的，微管的马达蛋白（动力蛋白和驱动蛋白）运输小泡也是单向的。动力蛋白向微管的负极运输小泡，驱动蛋白向微管的正极运输小泡。，另外，起始膜泡上有V-SNARE，靶膜上有T-SNARE。V-SNARE与T-SNARE选择性识别并定向融合。这两种因素共同导致了膜泡的定向运输。 6、简述细胞周期蛋白B的结构特点和动态调控机制？
中科院研究生院硕士研究生入学考试 《细胞生物学》考试大纲 本《细胞生物学》考试大纲适用于中国科学院研究生院生命学科口各专业的硕士研究生入学考试。要求考生全面系统地理解并掌握细胞生物学的基本概念、基本理论和研究方法, 能熟练运用细胞生物学知识分析生物学基本问题, 了解细胞生物学的最新进展。 一、考试内容 1．细胞生物学发展历史 1.1. 了解细胞的发现, 细胞学说的创立及其内容要点和意义 1.2. 了解细胞学经典发展时期: 原生质理论的提出, 细胞分裂和细胞器的发 现, 细胞学的建立 1.3. 了解实验细胞学时期: 细胞遗传学、细胞生理学、细胞化学 1.4. 了解细胞生物学的形成和当前与今后的发展方向--分子细胞生物学 2．细胞的基本结构与化学组成 2.1. 细胞的形态结构 ●了解形状、大小和种类的多样性 ●理解细胞是生命活动的基本单位 ●掌握动物细胞的一般结构模式 ●掌握植物细胞与动物细胞、原核细胞与真核细胞的主要结构差别 2.2. 细胞的化学组成及其意义 ●了解元素: 主要元素、宏量、微量和痕量元素 ●掌握有机小分子: 小分子糖类、氨基酸、核苷酸、脂质 ●掌握大分子: 核酸、蛋白质、大分子多糖 ●掌握水、无机盐和离子
2.3. 掌握细胞的共性, 细胞形态结构和化学组成与功能的相关性 附: 了解关于病毒与细胞的关系 3．细胞生物学研究技术和基本原理 3.1. 观察细胞形态结构的技术方法和仪器 3.1.1.光学显微技术 ●了解普通复式光学显微镜: 掌握分辨率及计算公式, 像差与复合透镜 ●了解观察样品的一般制备: 固定、切片、染色 ●了解荧光显微镜与观察样品的荧光染色 ●了解暗视野显微镜: 聚光器, 分辨率 ●了解相差显微镜: 用途、特有装置( 光栏、相版) , 原理 ●了解干涉显微镜: 用途、特有装置干涉器 ●了解激光共聚焦扫描显微镜及其原理、用途 ●了解计算机等技术在光学显微技术中的应用 3.1.2.电子显微镜技术 ●了解透射电镜: 基本构造, 成像原理, 分辨率; 超高压电镜 ●了解透射电镜观察样品制备: 超薄切片技术, 负染色和暗视场制片术 冰冻劈裂一复型技术和金属投影技术 ●了解扫描电镜和隧道电镜及其原理和用途 3.2. 细胞化学组成及其定位和动态分析技术 ●理解细胞和细胞器的分离: 如匀浆和差速离心技术等 ●理解基本生物化学和分子生物学技术 ●理解细胞化学、免疫荧光细胞化学、细胞光度和流式细胞分离技术 ●了解电镜细胞化学和电镜免疫细胞化学技术 ●了解显微放射自显影、分子原位杂交 3.3. 了解细胞培养、细胞工程、显微操作、活体染色等技术方法
细胞生物学重点总结 Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT
细胞生物学期末复习资料整理 第一章：1、细胞生物学cell biology：是研究细胞基本生命活动规律的科学， 是在显微、亚显微和分子水平上，以研究细胞结构与功能，细胞增殖、分化、 衰老与凋亡，细胞信号传递，真核细胞基因表达与调控，细胞起源与进化等为 主要内容的一门学科。P2 1、什么叫细胞生物学试论述细胞生物学研究的主要内容。P3-5 答:细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学,它是在三个水平(显微、亚 显微与分子水平)上，以研究细胞的结构与功能、细胞增殖、细胞分化、细胞衰 老开发商地亡、细胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等 为主要内容的一门科学。 细胞生物学的主要研究内容主要包括两个大方面：细胞结构与功能、细胞重要 生命活动。涵盖九个方面的内容：⑴细胞核、染色体以及基因表达的研究；⑵ 生物膜与细胞器的研究；⑶细胞骨架体系的研究；⑷细胞增殖及其调控；⑸细 胞分化及其调控；⑹细胞的衰老与凋亡；⑺细胞的起源与进化；⑻细胞工程； ⑼细胞信号转导。 2、试论述当前细胞生物学研究最集中的领域。 P5-6 答：当前细胞生物学研究主要集中在以下四个领域：⑴细胞信号转导；⑵细胞 增殖调控；⑶细胞衰老、凋亡及其调控；⑷基因组与后基因组学研究。人类亟 待通过以上四个方面的研究，阐明当今主要威胁人类的四大疾病：癌症、心血 管疾病、艾滋病和肝炎等传染病的发病机制，并采取有效措施达到治疗的目 的。 3.细胞学说(cell theory) p9 细胞学说是1838～1839年间由德国的植物学家施莱登和动物学家施旺所提出, 直到1858年才较完善。它是关于生物有机体组成的学说，主要内容有： ①细胞是有机体，一切动植物都是由单细胞发育而来，即生物是由细胞和细 胞的产物所组成； ②所有细胞在结构和组成上基本相似； ③新细胞是由已存在的细胞分裂而来； ④生物的疾病是因为其细胞机能失常。 4、细胞学发展的经典时期 P10 ⑴原生质理论的提出；⑵细胞分裂的研究；⑶重要细胞器的发现。 第二章：试论述原核细胞与真核细胞最根本的区别。 P35-37 答：原核细胞与真核细胞最根本的区别在于：①生物膜系统的分化与演变：真 核细胞以生物膜分化为基础，分化为结构更精细、功能更专一的基本单位—— 细胞器，使细胞内部结构与职能的分工是真核细胞区别于原核细胞的重要标 志；②遗传信息量与遗传装置的扩增与复杂化：由于真核细胞结构与功能的复
本人2014考生，考入中科院动物所，这是我当时亲自总结的免费奉献给大家了。还有好多 我自己总结的资料。大家可以登录 https://www.doczj.com/doc/3516497591.html,/item.htm?spm=686.1000925.1000774.16.bSIwNB&id=37954885616 因为好多都是我自己当时买别人的，花了不少钱，而我自己也不是高富帅，所以只希望能帮助学弟学妹的同事收回自己的成本。也可以直接联系QQ:549917517 买我资料的我也可以给大家提供考上的学长学姐的联系方式，及后续全程的服务。。。 中科院细胞生物学（852）历年大题 1994 1.有丝分裂与减数分裂异同P206 2.真核细胞分泌蛋白合成机制的信号假说P111 3.以细菌乳糖操纵子的转录调节为例，阐操纵子常说中的负调控机制 4.原核细胞和真核细胞区别 5.分泌颗粒（酶原颗粒）形成过程 1995 6.膜流动性的生理意义 7.受体介导的内吞作用的生理意义 8.阐述非组蛋白在染色质中所起的作用 9.什么是细胞周期？研究细胞周期意义何在？ 1996 10.简述细胞编程性死亡 11.试叙述运输蛋白在物质运输中的作用 12.以胰岛素为例阐明高尔基体的蛋白质改造功能 13.比较原核细胞和真核细胞基因转录和翻译过程中的异同点 1997 14.染色体结构与基因活性的关系
15.细胞周期调控有哪些因子？如何协同调节周期的运转？ 16.简述细胞编程性死亡或凋亡，及它与细胞衰老的关系 17.简述高尔基体的膜转化功能 1998 18.溶酶体和过氧化酶体的主要区别 19.细胞衰老的主要特征及其原因 20.简述线粒体和叶绿体的内共生假说及证据 21.真核细胞基因表达调控可以在哪些水平上发生？何谓转录前调控，它有哪几种主要方式，各发生在什么发育时期？举例 1999 1、细胞程序化死亡的显著特点及其生物学意义。 2、什么是Hayflick 界限，什么是端粒，两者关系如何。 3、细胞信号传导的机制有哪几种，其中哪些与肿瘤细胞发生有关。 4、用秋水仙素处理动物细胞，细胞内质网与高尔基体分布有什么改变，为什么？ 5、绘图并简要说明细胞内新蛋白质的合成转运途径。 2000 1、试述进化中线粒体和叶绿体的起源。 2、在细胞质中合成并进入内质网腔中的蛋白质主要有哪几种？ 3、染色体不同区域的复制是否同时进行？有何证据？ 4、从受精卵到发育成个体，其间细胞经历了种种分化过程，成为各种特化的细胞，分化了的细胞在基因水平上…… 2001 1、为什么在生理状态下，细胞膜内外的离子及电荷是不均等分布的？此不均等分布为什么是必须的？
中医护理学发展史及基本特点 时间：2015年5月6日地点：六楼会议室主讲人：姜艳华 主讲内容：中医护理学发展史 一、古代中医护理学得形成与发展 1、早在远古时代期，原始人类为了生存，以植物和野兽为食，用兽皮或树叶遮体，是过着“巢穴而居”的生活。在生活和劳动过程中，偶然受伤便设法涂裹包，身体疼痛不适便揉捏按压，天气变化则趋避寒温，并通过对动物、植物的长期观察和尝试，逐渐熟悉和认识了动、植物的营养、毒性和药用价值。原始人类这些本能的保护自身、减轻痛苦的自疗和互动活动，即是医护的开始。当人们发现一些本能的方法具有预防疾病和康复的作用，从而有目的地去实施时，即形成了护理学的萌芽。 2、战国至东汉时期，随着科学文化的迅速发展，为中医护理学理论体系的逐步形成奠定了基础。初步建立了中医学的理论体系。 《皇帝内经》、《难经》、《神农本草经》和《伤寒杂病论》等医学典籍相继问世，标志着中医学理论体系的初步形成，也为中医护理的发展奠定了理论基础。 3、杰出医家华佗是我国后汉时期外科和医疗体育的奠基人，他不仅创造性地使用酒服麻沸散作为外科手术的麻醉剂，还吸取前人“引导”的精华，模仿虎、鹿、熊、猿、鸟的姿态，创造了五禽戏，使头、身、腰等各个关节都得到运动，认为“人体欲得劳动，但不当使极耳。动摇则谷得消，血脉流通，病不得生，譬犹户枢不朽是也”，把体育和医疗护理结合起来。 这是最早的康复护理的方法，也对体育保健事业的发展具有重要的意义。 4、晋隋唐时期是中医护理理论和专科护理全面发展的时期，这一时期医学理论和技术得到迅速发展，出现了众多名医著作，促进了中医药理论体系的进一步发展 5、东晋葛洪所著的《肘后救卒方》集中医急救、传染病、内、外、妇、五官、精神、骨伤各科之大成，书中对各科护理均有详细的阐述 6、唐代孙思邈所著的《千金翼方》和《备急千金要方》是两本以记载处方和其他各种治病手段为主的方书 《备急千金要方》一书载方5300首，较系统地总结和反应了自《皇帝内经》以后至唐代初期的医学成就，并详细论述了临床各科的临证护理、投药、食疗及养生、婴幼儿保健、护理等内容，对妇女怀孕、养胎、分娩乃至产褥期的护理作了详细的叙述，同时还记载了许多小儿喂养和护理方法 7、宋金元时期是中医学百家争鸣、百花齐放的时期医学发展迅速，流派纷呈 8、元代宫廷饮膳太医忽思慧编撰的《饮膳正要》是这一时期饮食营养学得代表作 9、明清时期是中国医药学深化发展时期 这一时期的诸多医家在丰富的临床经验的基础上，结合哲学研究成果，经过反复探讨，提出了许多创见，
线粒体： 1.呼吸链（电子传递链）Respiratory chain一系列能够可逆地接受和释放H+和e-的化学物质所组成的酶体系在线粒体内膜上有序地排列成互相关联的链状。 2.化学渗透假说（氧化磷酸化偶联机制）：线粒体内膜上的呼吸链起质子泵的作用，利用高 能电子传递过程中释放的能量将H+泵出内膜外，造成内膜内外的一个H+梯度（严格地讲是离子的电化学梯度），ATP合酶再利用这个电化学梯度来合成ATP。 3.电子载体:在电子传递过程中与释放的电子结合并将电子传递下去的物质称为电子载体。 参与传递的电子载体有四种∶黄素蛋白、细胞色素、铁硫蛋白和辅酶Q，在这四类电子载体中，除了辅酶Q以外，接受和提供电子的氧化还原中心都是与蛋白相连的辅基。 4.阈值效应：突变所产生的效应取决于该细胞中野生型和突变型线粒体DNA的比例，只有突变型DNA达到一定数量（阈值）才足以引起细胞的功能障碍，这种现象称为阈值效应。 5.导向序列：将游离核糖体上合成的蛋白质的N-端信号称为导向信号，或导向序列，由于 这一段序列是氨基酸组成的肽，所以又称为转运肽。 6.信号序列：将膜结合核糖体上合成的蛋白质的N-端的序列称为信号序列，将组成该序列 的肽称为信号肽。 7.共翻译转运：膜结合核糖体上合成的蛋白质通过定位信号，一边翻译，一边进入内质网， 由于这种转运定位是在蛋白质翻译的同时进行的，故称为共翻译转运。 8.蛋白质分选：在膜结合核糖体上合成的蛋白质通过信号肽，经过连续的膜系统转运分选才 能到达最终的目的地，这一过程又称为蛋白质分选。 核糖体： 1.原核生物mRNA中与核糖体16S rRNA结合的序列称为SD序列(SD sequence) 。 2.核酶：将具有酶功能的RNA称为核酶。 3.N-端规则(N-end rule): 每一种蛋白质都有寿命特征，称为半衰期(half-life)。研究发现多肽链N-端特异的氨基酸与半衰期相关，称为N-端规则。 4.泛素介导途径：蛋白酶体对蛋白质的降解通过泛素(ubiquitin)介导,故称为泛素降解途径。 蛋白酶体对蛋白质的降解作用分为两个过程:一是对被降解的蛋白质进行标记,由泛素完成;二是蛋白酶解作用,由蛋白酶体催化。 细胞核： 1.核内膜：有特有的蛋白成份（如核纤层蛋白B受体），膜的内表面有一层网络状纤维蛋白质，即核纤层（nuclear lamina），可支持核膜。 核外膜：靠向细胞质的一层，是内质网的一部分，胞质面附有核糖体 核周隙：内、外膜之间有宽20~40nm的腔隙，与粗面内质网腔相通 核孔复合体：内、外膜融合处，物质运输的通道 核纤层：内核膜内表面的纤维网络，支持核膜，并与染色质、核骨架相连。 2.核孔复合体：是细胞核内外膜融合形成的小孔，直径约为70 nm，是细胞核与细胞质间物 质交换的通道。 3.核孔蛋白：参与构成核孔的蛋白质，可能在经核孔的主动运输中发挥作用。 核运输受体：参与物质通过核孔的主动运输。 核周蛋白: 是一类与核孔选择性运输有关的蛋白家族，相当于受体蛋白。 5.输入蛋白：核定位信号的受体蛋白, 存在于胞质溶胶中, 可与核定位信号结合, 帮助核蛋白进入细胞核。 输出蛋白：存在于细胞核中识别并与输出信号结合的蛋白质, 帮助核内物质通过核孔复合
细胞生物学教案 . 第一章绪论 教学目的 1 掌握本学科的研究对象及内容； 2 了解本学科的来龙去脉（发展史及发展前景）； 3 掌握与本学科有关的重大事件和名词。 教学重点本学科的研究对象及内容 第一节细胞生物学研究内容与现状 一、细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科 1.细胞学（Cytology）：是研究细胞的结构、功能和生活史的科学 2.细胞生物学（Cell Biology）：运用近代物理学和化学的技术成就以及分子生物学的概念与方法，从显微水平、亚显微水平和分子水平三个层次上，研究细胞的结构、功能及各种生命活动规律。 二、细胞生物学的主要研究内容 1. 细胞核、染色体及基因表达基因表达与调控是目前细胞生物学、遗传学和发育生物学在细胞和分子水平相结合的最活跃领域。 2.生物膜与细胞器的研究膜及细胞器的结构与功能问题（“膜学”）。 3. 细胞骨架体系的研究胞质骨架、核骨架的装配调节问题和对细胞行使多种功能的重要.性。 4. 细胞增殖及调控控制生物生长和发育的机理是研究癌变发生和逆转的重要途径（“再教育细胞”）。 5. 细胞分化及调控一个受精卵如何发育为完整个体的问题。（细胞全能性） 6 .细胞衰老、凋亡及寿命问题。 7. 细胞的起源与进化。 8. 细胞工程改造利用细胞的技术。生物技术是信息社会的四大技术之一，而细胞工程又是生物技术的一大领域。目前已利用该技术取得了重大成就（培育新品种，单克隆抗体等），所谓21世纪是生物学时代，将主要体现在细胞工程方面。 三、当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域 1. 染色体DNA与蛋白质相互作用关系； 2. 细胞增殖、分化、凋亡的相互关系及其调控； 3 .细胞信号转导的研究； 4 .细胞结构体系的装配。 第二节细胞生物学发展简史 一细胞生物学研究简史1.细胞学创立时期 19世纪以及更前的时期（1665—1875），是以形态描述为主的生物科学时期； 2. 细胞学经典时期20世纪前半世纪（1875—1900），主要是实验细胞学时期； 3. 实验细胞学时期（1900—1953）； 4. 分子细胞学时期（1953至今）。
1.根据与细胞膜的结合方式，膜蛋白可分为哪三类？如何通过实验区分它们？ 膜蛋白分类（5分） 1.膜周边蛋白（依靠离子键或其它非共价相互作用与膜表面的蛋白质或脂分子相连） 2.膜内在蛋白（跨膜蛋白） 3.脂锚定膜蛋白（依靠共价相互作用于膜相连） 实验区分（5分） 4.膜周边蛋白（通过改变溶液的离子强度或提高温度可从膜上分离） 5.膜内在蛋白（需要表面活性剂破坏膜结构后才能从膜上分离） 6.脂锚定膜蛋白（需要表面活性剂破坏膜结构后才能从膜上分离；需要脂酶处理才能去除脂部分；蛋白胶上跑的位置不同） 2.胚胎干细胞与类胚胎干细胞 1）胚胎干细胞潜在的主要应用有哪些？ 定向分化为功能性组织或器官用于临床移植治疗重大疾病（2分） 定向分化为特定细胞用于药物筛选（1分） 体内无法进行的胚胎发育研究（1分） 2）类胚胎干细胞与胚胎干细胞相比有何不同？可望解决目前胚胎干细胞研究及应用中的哪些问题？ 不同之处（5分） 1.来源不同：胚胎干细胞来自胚胎发育至囊胚期的内部细胞团（Inner Cell Mass），而类胚胎干细胞来自工程化的体细胞 2.培养条件不同：人胚胎干细胞需要饲养层细胞（Feeder Cell Layer）才能维持其全能性，类胚胎干细胞不需要 3.分化潜力不同：目前尚缺乏足够的证据显示类胚胎干细胞具有胚胎干细胞同等的全能分化能力 4.类胚胎干细胞含有病毒载体成分，产生新的安全性问题 5.其它不同处：若有道理可适当给分 解决问题（5分） 1.伦理道德问题（基本没有克隆人的问题） 2.免疫排斥问题 3.卵子来源不足问题 4.其它问题：若有道理可适当给分 3）从理论上，要证明某种细胞具有人胚胎干细胞的全能性，需证明它能分化为人体中的所有细胞种类(200多种），有无捷径？ 只需要证明该种细胞能分化为外胚层、中胚层及内胚层每个胚层中的至少一种细胞（3分） 3.围绕蛋白质表达的全过程（包括转录、翻译、翻译后加工及到达正确的作用位点），结合细胞内结构特点，简要阐述真核细胞与原核细胞的差异 转录（7分） 1.真核细胞中有DNA存在于多重包装结构的染色质中，要先解聚才能用于转录 2.真核细胞中转录所需的酶及其它因子需要从细胞质透过核膜转运到核内 3.转录机器（酶、转录因子、启动子/增强子等DNA调控系列）在真核细胞和原核细胞中完全不同 4.真核细胞的基因中通常有内含子，需要RNA剪切，而原核细胞基因一般没有
春2周细胞膜 1.细胞膜的化学组成及其特性：膜脂；膜蛋白；膜糖。 2.细胞膜的分子结构模型：流动镶嵌模型，脂筏模型。 3.细胞膜的生物学特性：不对称性；流动性（膜流动性的影响因素）。 1.脂质体（liposome）：当脂质分子被水环境包围时，自发聚集，疏水尾在内， 亲水头在外，出现两种存在形式：球状分子团、形成双分子层，为防止两端尾部与水接触，游离端自动闭合，形成充满液体的球状小泡称为脂质体。 2.细胞外被（cell coat）或糖萼（glycocalyx）：质膜中的糖蛋白和糖脂向外表面 延伸出的寡糖链构成的糖类物质。 3.脂筏（lipid raft）：膜双层内含有特殊脂质和蛋白质组成的微区，微区中富含胆 固醇和鞘脂，其中聚集一些的特定种类的膜蛋白。由于鞘脂的脂肪酸尾部比较长，这一区域比膜的其他部分厚，更有秩序且较少流动，称脂筏。 1.细胞膜的基本结构特征与生理功能？ 1)脂类：包括磷脂、胆固醇、糖脂，构成细胞膜主体，与膜流动性有关。 2)蛋白质：可分为内在蛋白和外在蛋白，是膜功能的主要体现者，如物质运输、 信号转导等。 3)糖类：包括糖脂和糖蛋白，对细胞有保护作用，在细胞识别起作用。 2.影响膜脂流动性的因素？ 1)脂肪酸链的饱和程度（不饱和流动性大）。 2)脂肪酸链的长短（短链流动性大）。 3)胆固醇的双重调节（相变温度以上降低，相变温度以下提高）。 4)卵磷脂和鞘磷脂的比值（比值高的流动性大）。 5)膜蛋白的影响（膜蛋白越多，流动性越差）。 6)极性基团、环境温度、pH、离子强度。 春3、4周细胞内膜系统、囊泡转运 1.细胞内膜系统的概念、组成。 2.粗面内质网功能：蛋白质的合成；蛋白质的折叠装配；蛋白质的糖基化；蛋白 质的胞内运输。 3.滑面内质网的功能：参与脂质物质的合成运输；参与糖原代谢；参与解毒；参 与储存和调节Ca2+；参与胃酸、胆汁的合成分泌（内质网以葡萄糖-6-磷酸酶为标志酶）。 4.信号肽假说：新生肽链N端有独特序列称为信号肽，细胞基质中存在SRP能 识别并结合信号肽，SRP另一端与核糖体结合，形成复合结构，然后向内质网膜移动，与内质网膜上SRP-R识别结合，并附着于移位子上，然后SRP解离，肽链延伸。当肽链进入内质网腔时，信号肽序列会被内质网腔信号肽酶切除，肽链继续延伸至终止。 5.高尔基体是高度动态、具有极性的细胞器，以糖基转移酶为标志酶，主要功能 有：糖蛋白合成；参与脂质代谢；是大分子转运枢纽；加工成熟蛋白。 6.溶酶体酶的形成：①在内质网中合成、折叠和N-连接糖基化修饰，形成N-连 接的甘露糖糖蛋白，运送至高尔基体；②溶酶体酶蛋白在高尔基体中加工时甘露糖残基磷酸化为甘露糖-6-磷酸（M-6-P），为分选重要信号；③溶酶体酶分选并以出芽方式转运到前溶酶体。 7.溶酶体以酸性磷酸酶为标志酶，主要功能为：细胞内的消化作用；细胞营养功 能；机体防御和保护；激素分泌的调控；个体发生和发育的调控。 8.过氧化物酶体（peroxisome）又称微体，特点：①内有尿酸氧化酶结晶，称作 类核体；②模内表面界面可见一条称为边缘板的高电子致密度条带状结构。以过氧化物酶为标志酶。主要功能：清除细胞代谢所产生的H2O2及其他毒物； 对细胞氧张力的调节作用；参与脂肪酸等高能分子物质的代谢。 9.三种了解最多的囊泡：①网格蛋白有被囊泡：来源于反面高尔基体网状结构和 细胞膜，介导蛋白质从反面高尔基网状结构向胞内体、溶酶体和细胞膜运输； 在受体介导的胞吞作用过程中，介导物质从细胞膜向细胞质或从胞内体向从溶酶体运输；②COP Ⅰ有被囊泡：主要产生于高尔基体顺面膜囊，主要负责回收、转运内质网逃逸蛋白返回内质网及高尔基体膜内蛋白的逆向运输；③COP Ⅱ有被囊泡：产生于粗面内质网，主要介导从内质网到高尔基体的物质转运。