当前位置:文档之家› 免疫学检验

免疫学检验

免疫学检验
免疫学检验

1简述双抗体夹心法的原理。

DA连接于固相载体上的抗体和酶标抗体,与待检抗原上两个不同的抗原决定基结合,形成固相抗体一抗原一酶标抗体复合物。由于反应系统中固相抗体和酶标抗体的量相对于待检抗原是过量的,因此复合物的形成量与待检抗原的含量成正比。测定复合物中酶作用于加入的底物后生成的有色物质量,即可确定待检抗原含量。

2何谓金免疫测定技术?简述其技术类型及原理。

DA金免疫测定技术是指用胶体金颗粒作为标记物进行抗原抗体反应的一类免疫学测定技术,其主要技术类型有斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试验。1)斑点金免疫渗滤试验:在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中,依次滴加标本、免疫金及洗涤液,因微孔滤膜贴置于吸水材料上,故溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用,达到快速检测目的,阳性反应在膜上呈现红色斑点。2)斑点金免疫层析试验:是将胶体金标记技术和蛋白质层析技术相合的以硝酸纤维素膜为载体的固相膜免疫分析技术,滴加在膜一端的标本溶液受载体膜的毛细管作用向另一端移动,犹如层析一般,在移动过程中被分析物与固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合而被固相化,无关物则越过该区域而被分离,然后通过胶体金的呈色条带来判读实验结果。

3简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。

单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的,其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。

4简述抗原抗体反应的原理。

答:抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的,它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合

5简述抗原抗体反应的类型。

答:抗原抗体反应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应;②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应;③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应;④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应;⑤免疫标记的抗原抗体反应等。

6什么是带现象?

答:在抗原抗体反应等价带前后,由

于抗体或抗原过量(形成前带或后

带),上清液中可测出游离的抗体或

抗原,形成的沉淀物少,不出现可见

反应,这种现象在做血清学试验时称

为带现象。

7影响抗原抗体反应的环境条件有哪

些?在实验中如何控制这些条件因

素?

答:环境条件包括:电解质,酸碱度

和温度。稳定条件:①电解质:常用

O.85%氯化钠或各种缓冲液作抗原

及抗体的稀释液及反应液;②酸碱

度:pH过高或过低都将影响抗原与抗

体的理化性质,抗原抗体反应一般在

pH为6~8时进行;③温度:一般以15,

40℃为宜,最佳反应温度为37℃。

8试述免疫血清应如何进行纯化。

免疫血清的纯化主要是指提纯免疫

血清中的IgG并去除无关的杂抗体。

提纯IgG类抗体的方法有:硫酸胺盐

析法粗提、离子交换层析法和亲和层

析法,采用亲和层析法提取IgG时,

可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交

联sephamse 4B制成层析柱。另外,

还可通过吸附法获得单价特异性抗

血清。方法是将不含特异性抗原的杂

抗原与戊二醛等双功能试剂混合制

成固相吸附剂,以吸附免疫血清中的

杂抗体,或将杂抗原交联于sephamse

4B上,通过亲和层析去除杂抗体。

9叙述杂交瘤技术的基本原理。

杂交瘤技术是在细胞融合技术的基

础上,将具有分泌特异性抗体能力的

致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨

髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种

杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特

性,即既能够分泌抗体又能在体外长

期繁殖,经过克隆化后成为单个细胞

克隆,分泌的抗体即为单克隆抗体。

10简述间接血凝试验的基本原理。

间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗

体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家

兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞,

与相应抗体(或抗原)作用,在有电解

质存在的条件下,经过一定时间可出

现肉眼可见的红细胞凝集现象,又称

被动血凝试验

11何谓间接凝集反应?

将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶

联于与免疫无关大小适当的颗粒表

面,使之成为致敏载体颗粒,然后与

相应抗体(或抗原)作用,在适宜电

解质存在条件下,出现特异性的凝

集现象,称为间接凝集反应

12间接凝集反应如何进行分类?各

试验的原理是什么

根据致敏载体用的是抗原或抗体分

为正向间接凝集试验和反向间接凝

集试验;根据载体种类,分为间接血

凝试验和胶乳间接凝集试验;根据反

应方式分为间接凝集试验、间接抑制

凝集试验和协同凝集试验,间接凝集

试验是用抗原致敏载体检测标本中

的相应抗体。将可溶性抗原与载体颗

粒结合,再与标本中的抗体反应,通

过抗体桥联,形成肉眼可见的凝集颗

粒或凝集块,为阳性反应。反向间接

凝集试验选用已知特异性抗体致敏

载体检测标本中的相应抗原。用特异

性抗体致敏颗粒,与样品中的待检抗

原反应,通过抗原桥联,形成肉眼可

见的凝集为阳性。临床上用于检测

HbsAg、AFP 等。间接凝集抑制试验

诊断试剂为已知抗原致敏的颗粒载

体及相应的抗体,用于检测标本中与

致敏抗原相同的抗原。将标本与抗体

试剂相反应,然后加入致敏抗原,若

出现凝集现象,说明标本中不存在相

应抗原;如未出现凝集现象,则说明

待检标本中含有相应抗原,凝集反应

被抑制。同理,用抗体致敏载体颗粒

及相应抗原作为诊断试剂,检测标本

中的抗体,称为反向间接凝集试验。

协同凝集试验与间接凝集反应的原

理相似,但所用载体为金黄色葡萄球

菌,该菌细胞壁上的SPA 能与特异性

抗体的IgG 的Fc 段结合(IgG3除

外),抗体的F(abˊ)2 段暴露在葡

萄球菌的表面,仍能与相应抗原特异

性结合。当这种葡萄球菌与IgG 抗体

连接时,就成为抗体致敏的载体颗

粒,若与相应抗原接触,即出现反向

间接凝集反应。间接血凝试验是以红

细胞作为载体的间接凝集试验,用已

知的抗原或抗体致敏红细胞,然后与

样品中的抗体或抗原在适宜条件下

反应,出现红细胞凝集者为阳性。根

据红细胞凝集的程度判断阳性反应

的强弱。胶乳凝集试验是以聚苯乙烯

胶乳微粒作为载体的间接凝集试验。

13 HAT培养基筛选杂交瘤细胞的机

制是什么?

答:1.淋巴细胞:不能生长,5到7

天死亡;DNA的主要合成途径被A阻断

2.骨髓瘤细胞:不能生长,5到7天死

亡;HGPRT缺乏,DNA合成的旁路途经

受阻3.骨髓瘤细胞和脾细胞融合形

成杂交瘤细胞,可长期生长繁殖。利

用淋巴细胞的HGRT将H合成为嘌呤

碱并最终与T一起合成DNA从淋

巴细胞获得产生某种抗体的遗传信

息,从骨髓瘤细胞获得不断繁殖的能

14 简述免疫系统的三个生理功能。

答:免疫系统的三个生理功能为免疫

防御、免疫自稳、免疫监视免疫防御:是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。该功能正常时,机体可抵御病原微生物及其毒性产物的感染和损害,即抗感染免疫;异常情况下,反应过高会引起超敏反应,反应过低或缺失可发生免疫缺陷。免疫自稳:是机体免疫系统维持内环境稳定的一种生理功能。该功能正常时,机体可及时清除体内损伤、衰老、变性的细胞和免疫复合物等异物,而对自身成分保持免疫耐受;该功能失调时,可发生生理功能紊乱或自身免疫性疾病。免疫监视:是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感染细胞的一种生理功能。该功能失调时,有可能导致肿瘤发生,或因病毒不能清除而出现持续感染。

15 决定抗原抗体最佳配比的方法有几种?

(1)抗原稀释法:将可溶性抗原作一系列倍比稀释,然后向各管中加入一定浓度的适量抗血清,37℃反应后,产生的沉淀量随抗原量变化而不同,以沉淀物最多的管为最适比例管。(2)抗体稀释法:是将恒定量抗原与不同倍比稀释的抗体反应,出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。(3)棋盘格法:亦称方阵法。抗原抗体同时稀释,可一次完成抗原和抗体的滴定,并找出抗原、抗体的最适比。是前二法的结合

16 简述单向免疫扩散试验的基本原理和技术要点。(1)原理:待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成白色沉淀环,沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关。(2)技术要点:将抗体和热融化琼脂(约50%)混合,倾注成平板。待凝固后在琼脂板上打孔,孔中加入已稀释的抗原液,和不同浓度的抗原标准品,置37~12温箱,24~48h后观察孔周围沉淀环。量取沉淀环直径,通过抗原标准品,计算待测抗原的浓度。

17 在双向免疫扩散试验中,如何判定结果?

双向免疫扩散中,出现沉淀线,表明存在相应的抗原、抗体,不出现沉淀线则表明缺乏抗原或抗体。沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致,沉淀线靠近抗原孔,提示抗体含量高;靠近抗体孔,提示抗原含量较多18 免疫电泳技术的优点是什么?免疫电泳有哪些用途?

1)优点:免疫电泳技术是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析技术,既有抗原抗体反应的高度特异

性,又有电泳分离技术的快速、灵敏

和高分辨力,广泛应用于牛物医学领

域。(2)用途:①纯化抗原或抗体的

成分分析,分析其纯度;②正常及异

常体液中蛋白质成分的分析,如无丙

种球蛋白血症、冷球蛋白血症、多发

性骨髓瘤、白血病、系统性红斑狼疮、

肝病等病人的血清蛋白成分的分析,

多发性骨髓瘤血清M蛋白的检测和鉴

定;③免疫后不同抗体组分的动态变

化研究

19 对流免疫电泳时,抗体为什么流

向负极?

大部分蛋白质抗原在碱性溶液中带

负电荷,电泳时从负极向正极泳动,

而抗体IgG分子量大,暴露的极性基

团较少,在缓冲液中解离的也少,向

正极的泳动速度较慢,电泳时由电渗

引向负极的液流速度超过了IgG向正

极的泳动,带动抗体流向负极,使抗

原和抗体定向对流并发生反应,出现

肉眼可见的沉淀线。

20 简述火箭免疫电泳的原理和主

要用途。

(1)原理:火箭免疫电泳是将单向免

疫扩散和电泳相结合的技术。抗原在

电场作用下,在含有适量抗体的琼脂

糖凝胶中向正极泳动,逐渐形成梯度

浓度,在抗原抗体比例适当时形成沉

淀,随着抗原量的减少,沉淀带越来

越窄,形成火箭峰样沉淀,峰形高低

与抗原量呈正相关。用已知量标准抗

原作对照,绘制标准曲线,根据检测

样品沉淀峰的高度可算出待测抗原

的含量。(2)主要用途:①抗原蛋白

定量,如IgA、IgG、IgM和sIgA检测;

②C3、C4及其裂解产物检测;③AFP

等检测。

21 免疫浊度测定的基本原理是什

么?有哪些类型?

(1)基本原理:免疫浊度测定是将液

相内的沉淀试验与现代光学仪器和

自动分析技术相结合的一项分析技

术。当可溶性抗原与相应的抗体特异

结合,在二者比例合适、并有一定浓

度的电解质存在时,可以形成不溶性

的免疫复合物,使反应液出现浊度。

这种浊度可用肉眼或仪器测知,并可

通过浊度推算出复合物的量,即抗原

或抗体的量。(2)类型:按测量方式

可分为透射免疫比浊法和散射免疫

比浊法。按测定速度可分为速率比浊

法和终点比浊法。

22 散射免疫比浊法的基本原理是

什么?

沿水平轴照射的一定波长的光,在通

过溶液时,光线可被其中的免疫复合

物粒子颗粒折射,发生偏转,产生散

射光。根据Rayle培h散射方程,散射

光强度与粒子(免疫复合物)的浓度

和体积成正比,通过测量散射光的强

度,可计算出待测抗原的浓度。

23 速率散射比浊法中的“速率”是

指什么?

所谓速率是指单位时间内抗原与抗

体反应的速度。抗原与抗体结合形成

免疫复合物的速度,在每个单位时间

内是不相同的,在抗体过量的情况

下,随着反应时问的延长,免疫复合

物的总量逐渐增加,通常在25s时出

现一个反应最快的速率峰。峰值与抗

原量呈正相关。

24 免疫浊度测定的反应体系中,为

什么必须始终保持抗体过量

抗原和抗体的比例是浊度形成的关

键因素,抗原和抗体必须在一个适当

的浓度才会出现最高结合率。当抗原

过量时,由于钩状效应,形成的免疫

复合物分子小,而且会发生再解离,

使浊度下降,光散射减少。当反应液

中抗体过量时,免疫复合物的形成随

着抗原量的增加而递增,光散射的强

度也随之递增,因此,免疫浊度测定

的反应体系中必须始终保持抗体过

量,以保证免疫复合物的生成量与浊

度的改变一致,这是免疫浊度测定的

基本原则。

25 单向琼脂扩散试验有那些影响

因素?

单向扩散试验有下列影响因素:①

抗血清的亲和力、特异性、及效价。

要求亲和力强,特异性好、效价高。

注意存放的方法,防止效价下降。②

标准曲线必须在每次测定时同时制

作,绝不可一次作成,长期应用。③

测定时必须加测质控血清,以保证定

量的准确性。④有时出现扩散环呈

现两重的双环现象,这是出现了抗原

性相同的两个组分,其扩散率不同,

例如α重链病血清中出现的α重链

和正常的 IgA两种成分并存,皆与抗

IgA 抗体发生反应,就形成内外两重

环。⑤在单扩试验时,有时回出现

结果与真实含量不符,这主要出现在

Ig 测定中。如用单克隆抗体或骨髓

瘤纯抗原免疫动物获得的抗血清,都

存在单一结合价的现象,若用此作为

单扩试剂测量正常人的多态性抗原,

则抗体相对过剩,是沉淀圈直径变

小,测量值降低。⑥测得假阳性升

高现象与上面相反,如用多克隆抗体

测定单克隆病,则抗原相对过剩(单

一抗原决定簇),致使沉淀圈呈不

相关扩大,从而造成某一成分的伪性

增加。

26 沉淀反应可应用在那些方面?

沉淀反应主要应用于体液内包括血

液、尿液、脑脊液、胸水、泪液、关节腔液等内的蛋白质(如MW10000~50000,标本浓度为1mg/L~100g/L)测定,应用最广泛的是可以准确定量的免疫浊度法,也可用于药物的测定。

27 双向琼脂扩散试验的原理是什么?

双向琼脂扩散试验的原理为可溶性抗原和抗体在含有一定电解质的琼脂凝胶板的对应孔中各自向对方扩散,在最适当的比例处形成抗原抗体沉淀线,根据沉淀线的位置、形状及对比关系,可作出对抗原或抗体的定性分析

28 试对沉淀反应各类试验方法进行评价。

沉淀反应可分为单向免疫扩散试验、双向免疫扩散试验、絮状沉淀试验、免疫浊度测定

等试验。单向免疫扩散试验是一种稳定、简便、不需要特殊设备、一般试验室都可使用的常规方法。双向免疫扩散试验简单易行,结果可靠,特异性高,分辨率高于对流免疫电泳,成本低廉,结果可经染色干燥后长期保存;缺点是敏感性较低、扩散缓慢,不能精确定量。

免疫浊度法①快速、②敏感,最小检出量可达 ng 水平。③检测范围广④缺点是所用抗血清质量要求高,仪器须装电脑,价格较贵。絮状沉淀试验较实用、简便、不需要特殊设备一般试验室都可使用,但须稀释标本比较麻烦。

29 放射免疫分析技术有何应用?答:放射免疫技术由于其测定的灵敏度高,特异性强,精密度好,而且可对半抗原和抗原测定以及测定仪器设备条件要求不高,因此广泛用于生物医学检验。常用于各种激素、微量半抗原、肿瘤标志物、药物等微量物质的测定。由于大多数检验项目均有 RIA 或 IRMA 试剂盒供应,目前仍是基层单位对超微量物质测定的主要手段。

30 试述放射免疫分析与免疫放射分析。

答:放射免疫分析(RIA)是放射免疫技术最经典的模式。它是以放射性核素标记抗原与反应系统中未标记抗原竞争性结合特异性抗体为基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析方法。而免疫放射分析(IRMA)是用放射性核素标记的过量抗体与待检测抗原直接结合,采用固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争性放射免疫分析。二者的异同点如下:①标记物 RIA 以放射性核素标记抗原;IRMA 则是标记抗体。

②反应速率 IRMA 反应速度比RIA

快。③反应原理 RIA 为竞争抑制性

结合,反应参数与待检抗原量成反相

关;IRMA为非竞争结合,反应参数

与待检抗原成正相关。④特异性

IRMA 特异性较RIA高。⑤灵敏度和

检测范围 IRMA测定的灵敏度明显高

于RIA, IRMA标准曲线工作范围较

RIA宽1~2个数量级。⑥其他 RIA

所用抗体为多克隆抗体,对亲和力和

特异性要求较高,但用量很少;IRMA

为试剂过量的反应,对抗体亲和力的

要求不及 RIA,但用量大。此外,RIA

可以测量半抗原,但IRMA只能测定

至少有两个以上表位的抗原。

31 试述用于标记的荧光素应具备

什么条件?

DA用于标记的荧光素应符合以下要

求:①应具有能与蛋白质分子形成共

价键的化学基团,结合后不易解离,

而未结合者易清除;②荧光效率高,

与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧

光效率;③荧光色泽与背景组织的色

泽对比鲜明;④与蛋白质结合后不影

响蛋白质原有的生化与免疫学性质;

⑤标记方法简单、安全无毒;⑥与蛋

白质的结合物稳定,易于保存。

32 试述荧光免疫显微技术基本原

理。

DA荧光免疫显微技术是以荧光显微

镜为检测工具,用荧光素标记特异性

抗体或抗抗体,检测固定组织细胞上

的抗原或血清中的抗体,常用于定性

和定位检查的一门技术。

33 试述荧光免疫显微技术的临床

应用。

DA临床常应用于:①血清中自身抗体

的检测;②各种微生物的快速检查和

鉴定;⑧寄生虫感染的诊断;④白细

胞分化抗原的检测。

34 时间分辨荧光免疫测定法具有

哪些优点?

DA时间分辨荧光免疫测定法具有特

异性强,灵敏度高,标准曲线范围宽,

分析速度快,标记物制备较简便、有

效使用期长,无放射性污染等优点,

因此是很有发展前途的超微量物质

免疫分析技术。

35 目前临床检验中常用的荧光物

质有哪些?

DA目前临床检验中常用的荧光物质

有:四乙基罗丹明、异硫氰酸荧光素、

四甲基异硫氰酸罗丹明、Eu3+的螯合

物等。

36 简述荧光抗体的制备及纯化方

法。DA荧光抗体的制备方法纯化方法

有透析法、凝胶过滤法、有撑搅拌法

及透析法。

37 荧光抗体技术有哪些优缺点,在

临床上有哪些应用?

荧光抗体技术的优点:(1)能做到

快速、敏感、定位。(2)Ag 和Ab 的

特异性与形态的检查结合在一起;缺

点:⑴对组织细胞进行微细结构的观

察做不到;⑵标本不能永久保存,荧

光有自然消退现象,需及时观察及对

照相;⑶有非特异性荧光的干扰。荧

光抗体技术的应用:⑴病毒学方面:

病毒鉴定和病毒在感染cell内的定

位;⑵寄生虫学方面:用于寄生虫的

诊断(鉴定、分型);⑶免疫学方面:

研究、用于自身免疫病的诊断;⑷细

菌学方面:菌种鉴定和Ag结构的研

究。

38 用于标记的酶应符合哪些要求?

DA(1)酶活性高,能对低浓度底物产

生较高的催化反应率。(2)具有可与

抗原、抗体共价结合的基团,标记后

酶活性保持稳定,而且不影响标记抗

原与抗体的免疫反应性。(3)酶催化

底物后产生的信号产物易于判定或

测量,且方法简单、敏感和重复性好。

(4)酶活性不受样品中其他成分(内

源性酶、抑制物)的影响;用于均相

酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶

标抗原结合后,酶活性可出现抑制或

激活。(5)酶、辅助因子及其底物均

对人体无危害,理化性质稳定,且价

廉易得。

39 简述酶免疫技术的分类。

DA(1)酶免疫技术按实际用途,分为

酶免疫组化和酶免疫测定两大类。(2)

按抗原抗体反应后是否需将结合的

和游离的酶标记物分离,分为均相酶

免疫测定和异相酶免疫测定,异相酶

免疫测定又可分为固相酶免疫测定

和液相酶免疫测定。

40 简述均相酶免疫测定的原理。

DA酶标抗原(AgE)与Ab结合形成

AbAgE后,其中的酶(E)活性将减弱或

增强。因此,不需对反应液中的AbAgE

和AgE进行分离,直接测定反应系统

中总酶活性的变化,即可推算出被测

样品中Ag的含量。

41 斑点-ELISA有哪些优点?

DA(1)NC膜吸附蛋白力强,微量抗原

吸附完全,故检出灵敏度可较普通的

EusA高6~8倍;(2)试剂用量较EusA

省10倍;(3)操作简便,试验及结果

判断不需特殊设备条件;(4)吸附抗

原(抗体)或已有结果的NC膜可长期

保存(-20℃可达半年)。

42 简述ELISA的基本原理、方法类

型及应用。

DA(1)基本原理:抗原或抗体预先结

合到某种固相载体表面;测定时,将

受检样品(含待测抗体或抗原)和酶

标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物;反应终止时,固相载体上酶标抗原或抗体被结合量(免疫复合物)即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例;经洗涤去除反应液中其他物质,加入底物进行显色,最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中待测物质含量。(2)方法类型及应用:①双抗体夹心法:用于检测抗原,适用于检测两个或两个以上抗原决定基的多价抗原;②间接法:用于检测抗体;③竞争法:用于抗原和半抗原的定量测定,也可对抗体进行测定;④捕获法:用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定。

43 简述酶增强免疫测定技术的原理。

DA具抗原及酶活性的Ag-E与Ab结合形成AgAb后,所标的酶(E)因与Ab接触

紧密,空间位阻影响了酶的活性中心,酶活性受到抑制。加入未标记抗原(标准或样品

中的Ag)后,Ag即与Ab叫竞争结合反应系统中限量的Ab形成AgAb复合物,从而使反应液中AgAb*(酶活性被抑制)的比例减少,具酶活性的游离AgE 增多。最终测得的酶活性随着反应体系中未标记抗原(Ag)浓度升高而增强。

44 简述免疫印迹法的原理。

免疫印迹法由SDS-PAGE、蛋白质转印和酶免疫测定三项技术结合而成。抗原等蛋白样品经SDS处理后带负电荷,SDS-PAGE时从阴极向阳极泳动,分子量小者,泳动速度快;将凝胶中已经分离的蛋白质条带在电场作用下转移至硝酸纤维素膜上;将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用,加入能形成不溶性显色物的酶反应底物,使区带染色;根据电泳时加入的分子量标准,可确定各组分的分子量。45 免疫溶血试验的原理和用途。DA原理是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。免疫溶血试验所参与的成分有补体,抗原(SRBC)及抗体(溶血素),这三种成分中如有两种是已知的就可测知第三个成分,稀释该成分可测定其效价或含量。如溶血素的滴定,溶血空斑试验,CH50试验,补体结合试验,抗补体试验等。

1 单克隆抗体:是指仅识别单一抗原表位的B细胞杂交瘤产生的同源抗体,具有特异性强、效价高、生物活性单一、理化性状高度均一等特点。2佐剂:是指先于抗原或与抗原一起

注入机体,能够增强机体对该抗原的

免疫应答或改变免疫应答类型的物

质。

3 凝集反应:凝集反应是指细菌或

红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在

适当条件下结合形成凝集的现象。现

也指颗粒化抗原或抗体与相应抗体

或抗原的反应。

4 直接凝集反应:细菌、螺旋体和

红细胞等颗粒抗原,在适当电解质参

与下可直接

与相应抗体结合出现凝集,称为直接

凝集反应。

5 试管凝集试验:是在试管内颗粒

性抗原与相应抗体直接结合,在一定

条件下,会

出现肉眼可见的凝集现象。

6 间接凝集反应:将可溶性抗原先

吸附于适当大小的颗粒性载体表面,

然后与相应抗体(或抗原)作用,在适

宜的电解质存在的条件下,出现特异

性凝集现象

7 沉淀反应:沉淀反应是指可溶性

的抗原和抗体特异性结合后,所形成

的复合物以

沉淀的形式出现。

8 凝胶内沉淀试验:又称凝胶扩散,

是将可溶性抗原与相应抗体分别放

人凝胶内进

行扩散,两者在比例合适的位置形成

肉眼可见的沉淀线或沉淀环。

9 免疫电泳:是凝胶电泳和凝胶扩

散相结合。在电场作用下,位于琼脂

凝胶中的抗

原样品因各组分的电泳迁移率不同

而彼此分开形成不同的区带。电泳结

束后,在琼脂板中

间所挖的长形槽内加人相应的抗血

清,由于经电泳分离后的各种抗原成

分在琼脂中呈放射

状扩散,而抗体呈直线扩散,因而形

成的沉淀线多呈弧状。

10 对流免疫电泳:是在电场作用下

的免疫双扩散。抗原向阳极移动,而

抗体向阴极移动,在一定时间内,相

向移动的抗原和抗体在两孔间相遇,

在浓度比例适当处形成沉淀线。

11 带现象:在抗原抗体特异性反

应时,生成结合物的量与反应物的浓

度有关,当抗原与抗体达到最适比

时,沉淀物形成最多。如果抗原或

抗体极度过剩则无沉淀物形成,这

种现象称为带现象。出现在抗原过量

时,称为后带。出现在抗体过量时,

称为前带。

12 放射免疫分析:是该类技术最

经典的模式。它是以放射核素标记抗

原与反应系统中未标记的抗原竞争

特异性抗体的基本原理来测定待检

样品中抗原量的一种分析法。

13 荧光免疫技术:是将抗原抗体反

应的特异性与荧光物质检测的

敏感性和直观性结起来的一种

免疫分析技术。

14 荧光效率:是指荧光物质将吸收

的光能转变成为荧光的百分率。

15 荧光寿命:指荧光物质被一瞬时

光脉冲激发后产生的荧光随时间而

衰减到一定程度时所用的时间。

16 荧光的淬灭:指荧光分子在某些

理化因素作用下、荧光分子的辐射能

力受到激发光较长时间的照射后会

减弱的现象。

17 荧光素:是能产生荧光并能作为

染料使用的有机化合物。

18 荧光抗体:荧光素与特异性抗体

以化学共价键的方式结合而成,是免

疫荧光技术的关键试剂。

19 非均相荧光免疫测定法:在抗原

抗体反应后,先把Ab*Ag与Ab*分离,

然后测定

Ab*Ag或Ab*中的标记物的量,从而推

算出标本中的Ag量,该方法称非均相

荧光免疫测定法。

20 均相荧光免疫测定法:在抗原抗

体反应后Ab*Ag中的标记物失去荧光

特性,则不

需进行Ab*Ag与Ab*的分离,可以直接

测定游离的Ab*量,从而推算出标本

中的Ag量,

该方法称为均相荧光免疫测定法。

21 时间分辨荧光免疫测定:时间分

辨荧光免疫测定是用镧系稀土元素

螯合物(如

螯合物)标记抗体或抗原,检测标本

中的相应抗原或抗体的荧光免疫测

定技术

22 酶免疫技术:是指利用酶的高效

催化和放大作用与特异性免疫反应

结合而建立的

一种标记免疫技术。

23 封闭:是指在抗原或抗体包被

ELISA板后,用1%~5%牛血清白蛋

白或5%~20%小牛血清等再包被,

以防止非特异性吸附。

24 异相EIA:是指在酶免疫测定中,

抗原抗体反应后,需分离游离的和与

抗原(或

抗体)结合形成复合物的酶标记物,

然后对经酶催化的底物显色程度进

行测定,再推算

出样品中待测抗原(或抗体)的含量。

25 包被:是指将抗原或抗体固相化

的过程。

26 均相酶免疫测定:是指抗原抗体

反应平衡后,无需分离F和B,直接根

据反应前

后酶活性的改变进行待检物质的测定。

27封闭因子:一种小分子的多肽,可存在于肿瘤患者的血清中。体外培养时,它可抑制非特异性致有丝分裂因子,如植物血凝素或刀豆素A对淋巴细胞的转化

最新免疫学检验试题

章免疫学检验试题 一、选择题 1. SPA能特异性与下述哪种lg的Fc段结合? ( ) A. lgG B. lgA C. lgM D. lgD 2. 在人类血清的lg中,K链和入链之比为?( ) A. 1:1 B. 1:2 C. 1:3 D. 2:1 3. 56C 30分钟可使下列哪种I g丧失生物学 活性?( ) A. IgG B. IgA C. IgM D. IgE 4. 胎血中出现抗风疹病毒的何种lg,则表示子宫内感染?( ) A. lgG B. lgA C. lgM D. lgD 5. 补体系统的激活必须有下列哪种成分参与?( ) A. C2 B. B 因子 C. C1q D. C3 6. 补体不具备的作用是?( ) A. 中和作用 B. 促进中和及溶解病毒 C. 调理作用 D. 溶菌作用 7. 补体含量增高见于下列哪种疾病?( ) A. 肿瘤 B. 系统性红斑狼疮 C. 血清病 D. 肾小球肾炎 8. 关于旁路途径正确的叙述是:( ) A. 需要抗原抗体的识别和反应 B. 膜攻击单位与经典途径相同 C. 首先被活化的补体成分是C5 D. 需要经典途径的识别单位和活化单位的参与 9. 能引起恶液质的细胞因子是:( ) A. TNF- a B. TGF- 3 C. lFN-a D. lL-2 10. 下列英文缩写的中文含义错误的是:( ) A. lL ——白细胞介素 B. EPO ――血小板生成素 C. SCF ――干细胞生长因子 D. TNF ――肿瘤坏死因子 11. 关于MHC I类分子,下列哪项是正确的?( ) A. 存在于一切有核细胞上 B. 只存在于白细胞上 C. 只存在于淋巴细胞上 D. 只存在于巨噬细胞上 12. 下列哪种疾病与HLA-B27 抗原相关性显著:( ) A. 系统性红斑狼疮 B. 类风湿性关节炎 C. 重症肌无力 D. 强直性脊柱炎 13. 无血缘关系的同种器官移植中,急性排斥 反应难以避免的主要原因是:( ) A. HLA 系统的高度多态性 B. 受者的免疫功能常处于紊乱状态 C. 移植物供血不良 D. 受者体内已存在对移植物致敏的淋巴细胞 14. 粘附分子包括下列哪项?( ) A. 粘合素家族 B. 免疫球蛋白家族 C. 选择素家族 D. 以上全都是 15. 绵羊红细胞受体又称为:( ) A. CD2 B. CD3 C. CD4 D. CD8 16. 关于免疫细胞错误的叙述是:( ) A. B 淋巴细胞分化为浆细胞 B. NK 细胞引起ADCC 效应 c?单核吞噬细胞具有抗原递呈功能

医学免疫学实验教学大纲

《医学免疫学》实验教学大纲 实验名称:医学免疫学 学时:6学时 学分: 适应专业:护理学专业 执笔人:边藏丽 审定人:王恺兵 一、实验目的与任务 实验教学是医学免疫学教学的重要组成部分,通过实验教学加深对基础理论知识的理解,了解常用的免疫学检查方法,掌握免疫学基本实验技术(试管凝集、玻片凝集、对流免疫电泳、免疫细胞形态观察、淋巴细胞分离、ELISA等),培养学生严谨求实的科学态度以及观察、分析、综合能力、创造思维能力和初步的科研能力。 二、教学基本要求 医学免疫学实验对象多为具有传染性的材料,要求学生在实验教学中严格遵守实验室规则,牢固树立无菌观念,认真操作与观察实验结果,实事求是的记录实验结果,并对实验结果进行认真分析和讨论。 四、实验教学内容及学时分配 实验一凝集反应(试管凝集、玻片凝集) 3学时 1.目的要求 掌握体外抗原抗体反应的特点和影响因素;掌握凝集反应原理、方法和用途。 2.方法原理 颗粒性抗原与相应抗体在一定条件下特异性结合而出现肉眼可见的凝集现象。 3.主要实验仪器及材料 试管、玻片、水浴箱、吸管、伤寒杆菌“H”“O”诊断菌液、大肠埃希菌、大肠埃希菌

诊断血清等。 4.掌握要点 掌握凝集反应原理、方法和用途;血清效价;凝集现象的观察。 5.实验内容: (1)玻片凝集(抗原定性试验) (2)试管凝集(抗体定量试验) 实验二对流免疫电泳、血型鉴定 2学时1.目的要求 掌握沉淀的反应原理、方法和用途;了解对流免疫电泳的操作步骤,结果观察;掌握血型鉴定的反应原理、方法及结果判断。 2.方法原理 对流免疫电泳是将经典沉淀反应与电泳技术结合而设计的一项实验。沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体在一定条件下发生结合并出现肉眼可见的沉淀物的一种血清学反应。 带电的胶体颗粒可在电场中移动,其移动方向与胶体颗粒所带电荷有关。抗原在的缓冲带负电荷,将抗原加于琼脂板阴极端的小孔中,由阴极向阳极移动;抗体为球蛋因电渗作用而流向阴极。当抗原抗体在两孔间相遇时,在两者比例适当处形成白色沉淀线。此种在双向琼指扩散基础上加电泳的方法,称为对流免疫电泳。 血型鉴定属直接凝集反应。将已知标准抗A和抗B血型抗体分别与待测红细胞混合。如果抗原与抗体相对应,则引起红细胞凝集,反之则不凝集,据其凝集现象可判断血型。 3.主要实验仪器及材料 标准的抗A和抗B单克隆抗体(抗A为蓝色,抗B为黄色)、酒精棉球、采血针、载玻片、待测血清、甲胎蛋白诊断血清,肝癌病人阳性血清, L巴比妥缓冲液,琼脂对流免疫板、打孔器、加样器、电泳仪等。 4.掌握要点 (1)对流免疫电泳的操作步骤,结果观察; (2)血型鉴定的方法及结果判断。 5.实验内容: (1)讲述沉淀的反应原理、方法和用途;对流免疫电泳的操作步骤,结果观察;血型鉴定的反应原理、方法及结果判断; (2)对流免疫电泳的操作及结果观察; (3)血型鉴定的操作及结果观察; 实验三小鼠吞噬细胞及转化细胞形态观察 2学时 1.目的要求 观察吞噬细胞的吞噬现象;了解机体的非特异性免疫功能。观察转化细胞、淋巴母细胞的形态了解机体的特异性免疫功能。 2.方法原理 巨噬细胞可吞噬异种或异体细胞等体积较大的异物,中性粒细胞可吞噬多种细菌。观察这两类细胞的吞噬现象,可计算出吞噬异物的细胞数和吞噬细胞中吞入的异物数,用以评价机体的免疫状态。 淋巴细胞,在受抗原的刺激后,可转化为淋巴母细胞,淋巴细胞转化率的高低可反映机体细胞免疫水平。

免疫学检验试题(附答案)

免疫学检验试题(一) 1. 免疫监视功能低下时易发生()。 A.自身免疫病 B.超敏反应 C.肿瘤 D.免疫缺陷病 E.移植排斥反应 答案C 解析免疫系统的功能之一是对自身偶尔产生的有癌变倾向的细胞进行清除,此即免疫监视功能,免疫监视功能低下时易发生肿瘤。2. 免疫自稳功能异常可发生()。 A.病毒持续感染 B.肿瘤 C.超敏反应 D.自身免疫病 E.免疫缺陷病 答案D 解析免疫系统的功能之一是对自身衰老的组织细胞进行清除,此即免疫自稳功能,免疫自稳功能异常可发生自身免疫病。 3. 既具有抗原加工提呈作用又具有杀菌作用的细胞是()。A.树突状细胞 B.巨噬细胞

C.中性粒细胞 D. B细胞 E. T细胞 答案B 解析树突状细胞、巨噬细胞和B细胞都有抗原加工提呈作用,但只有巨噬细胞兼有吞噬杀菌作用。 4. 免疫应答过程不包括()。 A. T细胞在胸腺内分化成熟 B. B细胞对抗原的特异性识别 C.巨噬细胞对抗原的处理和提呈 D. T细胞和B细胞的活化、增殖和分化 E.效应细胞和效应分子的产生和作用 答案A 解析免疫应答过程指免疫系统针对抗原的反应过程,不包括免疫细胞的发育过程。 5. 关于外周免疫器官的叙述,不正确的是()。 A.包括淋巴结、脾和黏膜相关淋巴组织 B.发生发育的时间晚于中枢免疫器官 C.是免疫应答发生的场所 D.是免疫细胞发生和成熟的场所 E.是所有淋巴细胞定居的场所 答案D

解析免疫细胞发生和成熟的场所在中枢免疫器官,故D项不正确。 5. 在正常血清中,含量最高的补体成分是()。 A. C1 B. C3 C. C4 D. C5 E. C4Bp 答案B 解析在正常血清中含量最高的补体成分是C3。 7. 细胞因子不包括()。 A.单核因子 B.淋巴因子 C.生长因子 D.抗体 E.集落刺激因子 答案D 解析细胞因子是生物活性的小分子多肽,抗体不是。 8. 体内抗病毒、抗毒素、抗细菌最重要的抗体为()。 A. IgM B. IgA C. IgG D. IgE

《医学免疫学与病原生物学》

《医学免疫学与病原生物学》 课程实验教学大纲 [适用对象]中医学(骨伤)、针灸推拿学专业 [实验学时] 9 学时 一、实验教学任务和目的 《微生物与免疫学实验》是与《微生物与免疫学》理论课程密切结合的一门重要的、非单独设课的医学专业基础实验课程。课程学习的目的是让学生掌握本课程基本技能操作,为学习基础医学有关课程和临床医学课程、为学生将来从事医药相关工作和科研工作奠定基础。 二、实验教学基本要求 (1)训练学生掌握微生物学与免疫学最基本的操作技能。 (2)加深理解课堂讲授的微生物学与免疫学理论。 (3)培养学生观察、思考、分析问题、解决问题和提出问题的能力。 (4)培养学生实事求是、严肃认真的科学态度,以及敢于创新的开拓精神。 (5)培养学生树立勤俭节约、爱护公物的良好作风。 三、实验教学内容 实验一细菌的人工培养法 1、实验目的和要求 (1)掌握各种培养基接种技术。 (2)熟悉细菌在培养基中的生长现象;认识菌落、菌苔。 (3)了解常用的液体、固体和半固体培养基的成分、制备方法和用途。 2、实验内容 (1)分离培养法(平板划线法) (2)斜面培养基接种方法 (3)液体培养基接种法 (4)半固体培养基的接种法 (5)观察细菌在培养基上的生长情况:细菌各种培养物的示教;描述细菌

在各种培养基上的生长现象;观察大肠杆菌与痢疾杆菌在半固体培养基上的现象。 3、实验仪器 普通琼脂平板,普通琼脂斜面,半固体培养基,肉汤培养基,接种环,接种针,酒精灯,大肠杆菌24小时斜面培养物等。 4、实验学时 1学时 实验二细菌的分布及消毒与灭菌 1、实验目的和要求 掌握高压蒸气灭菌器的使用方法及注意事项;证实热力和紫外线的杀菌效果;证实常用消毒剂的消毒效果;证明细菌在自然界和正常人体的存在,为在医学实践中树立严格的“无菌观念”提供依据。 2、实验内容 (1)高压蒸气灭菌法 (2)干热灭菌器(干烤箱) (3)紫外线的杀菌实验 (4)热力对芽胞及繁殖体的作用 (5)药物敏感性试验 (6)化学消毒剂的杀菌的作用———手指皮肤消毒前后的细菌学检查 (7)空气中的细菌检查 (8)污水和净水中的细菌数检查 (9)皮肤表面的细菌检查 3、实验仪器 普通琼脂平板、1%高层琼脂,血琼脂平板,无菌试管,无菌吸管,无菌平皿,灭菌棉签,咽拭子,酒精灯等。 4、实验学时 2学时 实验三细菌形态与结构的检查法 1、实验目的和要求 (1)学会显微镜油镜的使用和保护方法。 (2)认识细菌的基本形态和特殊结构(荚膜、鞭毛、芽胞)。 (3)掌握革兰氏染色方法 (4)了解细菌的动力 2、实验内容 (1)显微镜油镜的使用 (2)观察细菌的形态结构 (3)动力试验 (4)革兰染色 3、实验仪器

(整理)常用免疫学检查参考值

常用免疫学检查参考值 血清免疫球蛋白分类Ig通常是指具有抗体活性和(或)抗体样结构的球蛋白。 应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分5类:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。 IgG:含量最多或最主要的Ig(75%),唯一能够通过胎盘的Ig。主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成与分泌。 IgA:约占10%,SIgA在局部免疫中起重要作用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。 血清免疫球蛋白 IgM:分子量最大,由5个IgM单体通过J链连接。是最早出现的Ig,是抗原刺激后最早出现的抗体,其杀菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比IgG高500-1000倍。 测定方法:单向免疫扩散法(RID)或免疫比浊法。 血清免疫球蛋白测定参考值 参考值:IgG:7.6-16.6g/L (RID法)IgA:710-3350mg/L IgM :0.48-2.12 g/L 临床意义 免疫球蛋白增高 多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病,如SLE、类风湿关节炎等。 单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。 免疫球蛋白降低:常见于各类先天性免疫缺陷病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长期使用免疫抑制剂的病人。 血清IgD测定 免疫扩散法:0-62mg/L 已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状腺抗体和抗“O”抗体等均属IgD,但活性甚低。 血清IgE:主要由鼻咽部、支气管、胃肠道等粘膜固有层的浆细胞分泌,为亲细胞抗体,能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜上的FceR结合,产生I型变态反应。 ELASA:0.1-0.9mg/L 临床意义: 1. I型变态反应 2. IgE型骨髓瘤、寄生虫感染等 3. 慢性肝炎、SLE、类风湿性关节炎等。 血清M蛋白测定(M protein,monoclonal immunoglobulins)是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的IgG分子或片段,一般不具有抗体活性。 参考值:蛋白电泳法,免疫电泳法:阴性 意义:1.多发性骨髓瘤(MM),占35%-65%,其中IgG型占60%左右;IgA型占20%左右;轻链型占15%左右;IgD、IgE型罕见。2.巨球蛋白血症。3.重链病(HCDs)。4.半分子病。5.恶性淋巴瘤。6.良性M蛋白血症。 血清补体测定 补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白,分3组:9种补体成分(C1-C9);B、D、P、H、I 因子;补体调节蛋白,如C1抑制物、C4结合蛋白、促衰变因子等。 总补体溶血活性(CH50)测定 参考值试管法:50000-100000U/L 意义:增高见于急性炎症、急性组织损伤、恶性肿瘤及妊娠。降低见于急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。

临床医学检验技术(中级)-临床免疫学和免疫学检验(B1型题)_1

临床医学检验技术(中级)-临床免疫学和免疫学检验 (B1型题) 1、既具有抗原吞噬能力又有抗原提呈能力的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 2、既不表达HLA-Ⅰ类抗原又不表达HLA-Ⅱ类抗原的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 3、应用CDC方法检测HLA-DR抗原所使用的待测细胞为 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞

E.单核细胞 4、PHA刺激法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 5、免疫比浊法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 6、流式细胞仪可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验

7、细胞毒试验可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 8、测定抗体生成细胞数 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 9、测定T细胞数量 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验

10、测定NK细胞的杀伤活性 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 11、测定非特异性细胞免疫功能 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 12、白血病儿童从骨髓库中得到别人捐献的骨髓,属 A.自体移植 B.同种移植 C.异种移植 D.同系移植 E.胚胎组织移植 13、试验性将猪心移植给猴,属

免疫学检验复习重点与难点

一、重点与难点 1.绪论:现代免疫的概念及功能(生理、病理) 2.抗原:抗原免疫原性的本质及决定抗原免疫原性的首要条件,什么决定抗原的特 异性,表位,TDAg。 3.抗体分子:Ig的分类、基本结构、多肽链的分区和功能、水解片段及功能、同种 型抗原、抗体生物学活性、各类Ig的特点。 4.补体:激活途径有哪些?各自的激活物主要是什么?在机体感染后各自什么时间 段参与溶菌杀菌作用?补体系统激活后的生物学作用 5.细胞因子:种类,生物学活性。 6.MHC:人类MHC是什么?位于哪里?经典MHCⅠ/Ⅱ类基因包括哪些?编码产物的 分布和生物学功能。 7.免疫器官:免疫系统的组成。中枢免疫器官的功能,胸腺和骨髓的功能。外周免疫器官的功能 8.免疫细胞:T细胞膜分子(CD、TCR、HIV受本、E受体),Th1/Th2、Tc的功能。B 细胞膜分子(CD、BCR、Fc受体、补体受体等)。NK细胞功能。专职APC的组成,APC 的免疫活性。 9.免疫应答:基本过程;T/B细胞对抗原的识别、活化信号;Th细胞对B细胞的辅助;初次应答和再次应答产生抗体的特点;介导体液免疫应答和细胞应答的细胞及 参与细胞。细胞免疫应答的生物学意义。 10.抗原抗体结合力的包括哪些?在什么条件下最大?抗原抗体反应的特点,影响因素。可溶性抗原抗体结合出现可见反应的条件。 11.McAb的制备原理。 12.凝集反应的概念与分类,各类凝集反应的原理与临床应用。 13.免疫标记技术的分类及基本原理。酶免疫技术常用标记酶;ELISA的常用载体、HRP常用底物、基本原理、各技术类型的原理及应用;把抗原抗体反应与酶促反应结合起来的是什么?ELISA试验中阳性、阴性和空白对照的作用。 14.标记物中,可循环应用的是什么? 15.荧光免疫技术:常用荧光素,荧光抗体技术直接法和间接法的原理及优缺点,荧光显微镜观察的注意事项;实验本身可避免自发荧光和激发光干扰的检测方法是什么?TrFIA的基本原理及常用标记物。 16.各类化学发光免疫分析与ELISA的异同点。 17.在固相标记免疫测定中,什么是非特异性吸附,其引起什么后果。洗涤的目的是什么。洗涤液中加0.05%吐温-20的作用是什么。 18.免疫浊度测定的基本原理、基本原则及影响因素。速率散射比浊法,免疫胶乳比浊法(胶粒子增强浊度测定法),免疫透射比浊法。

免疫学检验分析技术

生物医学技术论文 免疫学检验分析技术 姓名:陶晨宇 系部:16级医疗器械工程工程完成日期2017年5月14日

免疫学分析方法(immlmological assay,IA)是以抗原与抗体的特异可逆结合反应为基础的分析技术。它集高灵敏性和强特异性于一体,20世纪90年代开始应用于抗生素残留的检测中。IA主要包括酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentasssy,ELISA)、放射免疫分析法(radio immunological assay,RIA)和荧光免疫分析法(fluorescence immunnological assay,FIA)等。目前,应用于抗生素残留分析的主要是ELISA。IA具有特异性强,灵敏度高,操作简便、快速,能同时筛选大量的样品,检测费用低,不需要昂贵的仪器设备,适合推广应用等优点。但同时也存在假阳性和假阴性偏多,提取液中杂质成分对检测结果干扰大,通常一次实验仅能检测一种抗生素残留等不足。 目前,IA已用于β-内酰胺类、氨基糖苷类、氯霉素类、四环素类和磺胺类抗生素残留的检 测中。用氨苄青霉素作为半抗原通过戊二醛法合成免疫抗原,免疫兔子后获得多克隆抗体,可用于检测牛奶中青霉素类药物残留。应用商品化的cHARMⅡ放射免疫系统可检测动物血清、尿液和组织中青霉素类抗生素残留。应用EuSA检测牛奶和肾脏样品中新霉素、庆大霉素和链霉素残留,其回收率大于80%。以牛血 清白蛋白为载体蛋白合成磺胺甲基嘧啶人工抗原,免疫兔子获得多克隆抗体后,以ELISA可检测乳中磺胺甲基嘧啶残留,检测限为24ng/mL。 今后,抗生素残留免疫学检测技术的发展方向,至少包括以下几个方面:①需要进一步规范抗生素残留免疫检测方法的操作步骤以及实现试剂的标准化。②将免疫检测方法与其他常规方法相结合,发挥各自的优势。例如,先用免疫分析法对大量样品进行粗筛,再用HPLC等方法确证,或首先采用免疫亲和色谱柱对样品进行提取与净化,然后再进行仪器分析,这样可以大大减少分析的时间。③利用抗体蛋白质芯片技术或通用抗体技术实现抗生素多残留的同时分析。④采用基因工程技术制备人工抗体。 现代免疫学检验技术源于标记技术在免疫学中的应用。科技的进步推动免疫检验技术的迅速发展,正从单一的免疫诊断技术向单细胞、多基因、微量化等方面发展。而哮喘、器官和骨髓自身免疫性疾病、变态反应、淋巴细胞和浆细胞的恶性肿移植、瘤以及继发性和原发性免疫缺陷的临床诊断都客观要求免疫学检验技术更加精确,并且能够定量评价临床治疗的有效性。 酶联免疫斑点技术酶联免疫斑点技术是一种用于测定B细胞分泌免疫球蛋白、T细胞分泌细胞因子功能的分析技术,是定量酶联免疫吸附试验技术的发展和延伸。 酶联免疫斑点技术的原理是在微孔培养板底部植入抗CK或Ig的特异性单克隆抗体。待检测样本进入微孔板内培养时,在有丝分裂原或者特异性抗原的作用下,活化记忆型T细胞或B细胞,产生CK或Ig。细胞下方的固相单克隆抗体就会捕获CK或Ig物质。细胞被清洗后,加入生物素化的第二抗体,抗体和CK或 Ig物质结合后,再加以酶做标记的生物素或亲和素反应,以酶 荧光素标记抗体技术是建立在免疫荧光、免疫微球和流式细胞分析等实验技术基础上的一种新的血清学实验方法。利用荧光对抗体进行染色可电以获得所需信息的原理而研制的流式细胞仪,具有激光技术、子计算机技术和单克隆抗体技术特点,主要用于细胞表型、细胞内及核膜成分、DNA含量等领域的分析。它具有在同一试管中同步检测多种靶物质的潜在特征,受到许多临床检验学者的关注。迄今尚未进入临床应用。 四聚体分析技术该技术利用T细胞表面的TCR可与构建的四聚体的表位肽相

临床免疫学检验

单选题 1.ELISA双抗体夹心法最常用于检测:E A.大分子抗体 B.小分子抗体 C.半抗原 D.HLA抗原 E.二价或二价以上抗原 2.ELISA间接法中使用的酶标记物是:D A.酶标半抗原 B.酶标抗原 C.酶标抗体 D.酶标抗抗体 E.酶标抗原抗体复合物 3.ELISA竞争法中,待测管的颜色与标本中抗原、抗体关系是:B A.与抗原或抗体浓度成正比 B.与抗原或抗体浓度成反比 C.与抗原或抗体浓度无平行关系 D.与抗原则成正比,与抗体成反比 E.与抗原成反比,与抗体成正比 4.ELISA最常用的固相载体:C A.聚氯乙烯 B.聚乙烯 C.聚苯乙烯 D.葡聚糖 E.聚丙烯酰胺 5.检查ELISA孔板性能常用:A A.含人IgG的缓冲液 B.含抗人IgG的缓冲液 C.含人IgA的缓冲液 D.含兔IgG的缓冲液 E.含抗人IgA的缓冲液 6.ELISA实验中,包被最常用的缓冲液为:E A.PH6.8的PAS缓冲液 B.PH7.0的柠檬酸盐缓冲液 C.PH7.2的Tris缓冲液 D.PH8.6的巴比妥缓冲液 E.PH9.6的碳酸盐缓冲液 7.ELISA实验中,包被条件最好为:A A.4℃包被24小时或以上 B.37℃包被24小时 C.室温包被6小时 D.0℃包被24小时 E.4℃包被6小时 8.ELISA板孔包被后再行封闭的原因是:B

A.包被液中的蛋白浓度过高 B.包被液中的蛋白浓度偏低 C.包被液中的蛋白质不够纯 D.调节包被后PH值 E.增加板孔吸附力 9.ELISA板孔包被后再行封闭的作用是:D A.调节吸附蛋白浓度 B.调节PH值 C.增加吸附力 D.消除非特异吸附的干扰 E.消除杂质的干扰 10.ELISA实验中,封闭液常用:B A.1~5%牛血清 B.1~5%牛血清白蛋白 C.1~5%马血清 D.1~5%兔血清 E.1~5%兔血清白蛋白 11.HRP辅基在何处有吸收峰:C A.275nm B.300nm C.403nm D.520nm E.660nm 12.ELISA法中HRP应用最多的底物:A A.OPD B.TMB C.ABTS D.4-硝基酚磷酸盐 E.硝基酚半乳糖苷 13.HRP催化OPD(在H2O2存在下)使之呈:B A.蓝色 B.橙红色 C.黄色 D.深褐色 E.棕色 14.ELISA实验中,用AP为标志酶,其底物为:C A.OPD B.TMB C.P-NPP D.H2O2 E.ABTS 15.ELISA实验HRP为标记酶时,其终止剂为:D A.H2O2 B.NaOH

医学免疫学教案

第1次课教学整体设计

、课堂训练内容安排 (1)案例; (2)通过图片思考、根据情境设计展开讨论分析; (3)问题探讨,总结归纳; (4)培养学生创新思维。 三、课后作业与思考题:(根据课程内容适当设计巩固性作业、项目式作业、预习性作业、推荐参考书及网站) (1)项目式作业: 每小组针对每种类型超敏反应至少写出两种疾病和对应的治疗方案、护理注意事项(2)预习性作业: 案例角色扮演 教学后记:

教学过程(教学设计实施步骤及时间分配) 步骤1:师生互问好,考勤(3 分钟) 步骤2:复习,提问(4 分钟) 步骤3:图片展示,案例,学生分析(8 分钟) 步骤4:教师对知识点进行集中总结 一、概念 机体接受某些抗原刺激后,再次接触相同抗原时,发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。 二、类型 I型超敏反应:速发型 U型超敏反应:细胞毒型、细胞溶解型 川型超敏反应:免疫复合物型、血管炎型 W型超敏反应:迟发型 (一)1型超敏反应(10分钟) 1 、案例分析 过敏性休克:某男孩,15 岁,急性扁桃体炎,青霉素治疗。皮试为弱阳性,护士误作阴性处理,给患者静脉滴注青霉素,约半分钟后,患者出现胸闷、气急、呼吸困难,随即抽搐、昏迷、抢救不及而死亡。(时间短、症状重)步骤5:学生分析,回答(5 分钟) 2、常见疾病 过敏性鼻炎、荨麻疹、湿疹、哮喘、消化道上吐下泻等 3、变应原接触/吸入性变应原:花粉、室尘、动物皮毛等 食物变应原:鱼、虾、蛋、牛奶、海产品等药物:青霉素、异种免疫血清(TAT、普鲁卡因、VitB等 步骤6:视频播放(5 分钟)

(二)n型超敏反应(10分钟) 1 、案例分析 某产妇27岁,血型RH-,产下的RH+女婴浑身多处瘀斑,2天后死亡。诊断死于新生儿溶血症。 新生儿溶血的机制 步骤7:学生分析(5 分钟、 2、常见疾病 输血反应、新生儿溶血症、自身免疫性溶血性贫血、药物过敏性血细胞减少症、甲状腺功能亢进症 (三)川型超敏反应(10分钟) 1 、案例分析 某男8岁,因患白喉大量注射动物免疫血清,1 -2周后局部红肿、淋巴结肿大、皮肤出现皮疹、 发痒、面部及眼睑浮肿、关节疼痛、肾小球肾炎、尿中出现蛋白。为什么 步骤8:学生分析(5 分钟、 2、常见疾病 局部免疫复合物病、全身性免疫复合物病 (四)W型超敏反应(5分钟) 1 、案例分析 高校新生入学后,以0T试验普查对结核病免疫力。 1 、常见疾病 传染性迟发型超敏反应性疾病、接触性皮炎、同种异型移植排斥反应3、特点 (1 )发生较慢,常需24?72小时; (2)无抗体和补体参与。 (3)炎症反应与效应T 细胞和吞噬细胞及其产生的细胞因子或细胞毒性介质有关步骤9:临床案例,小组分析,讨论(10 分钟)

智慧树知到《临床免疫学检验技术》章节测试答案

智慧树知到《临床免疫学检验技术》章节测试答案第一章 1、免疫球蛋白的分类依据是: A.轻链恒定区 B.重链恒定区 C.轻链可变区 D.重链可变区 E.铰链区 正确答案:重链恒定区 2、IgG的补体结合位点位于: A.VH和VL B.CH1和CL C.CH2 D.CH3 E.CH4 正确答案:CH2 3、各种抗体单体分子共有的特性是: A.与靶细胞结合后能介导ADCC作用 B.具有两个完全相同的抗原结合部位 C.轻链与重链以非共价键结合 D.与抗原结合后能激活补体 E.与颗粒性抗原结合后能介导调理作用

正确答案:具有两个完全相同的抗原结合部位 4、以下哪种技术极大提高了免疫学检测的特异性? A.标记技术; B.单克隆抗体技术; C.计算机技术; D.分子生物学技术; E.细胞培养技术。 正确答案:标记技术; 5、最早用于标记免疫测定的标记物是 A.荧光素 B.放射性核素 C.酶 D.化学放光物质 E.胶体金 正确答案:荧光素 6、抗体的基本单位是: A.由2条不同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 B.由1条重链和1条轻链组成的二肽链结构 C.由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构 D.由2条相同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 E.由4条相同的肽链组成的四肽链结构 正确答案:由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构

7、木瓜蛋白酶能将抗体水解成: A.Fab和Fc B.F(ab’)2和Fc C.Fab和pFc’ D.Fab’和pFc’ E.F(ab’)2和pFc’ 正确答案:Fab和Fc 8、抗体中与抗原表位互补结合的部位: A.仅重链可变区 B.仅轻链可变区 C.重链恒定区 D.轻链恒定区 E.重链和轻链的高变区 正确答案:重链和轻链的高变区 9、血清中含量最高的抗体是: A.IgG B.IgM C.IgA D.IgD E.IgE 正确答案:IgG 10、机体再次免疫应答的主要抗体是:

临床免疫学检验 名词解释整理

抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。 抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力,其中疏水作用力最强,它是在水溶液中两个疏水基团相互接触,由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。 亲和性(affinity):是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位(AD)之间的结合强度,取决于两者空间结构的互补程度。 亲合力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。 抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性。 带现象(zone phenomenon):一种抗原-抗体反应的现象。在凝集反应或沉淀反应中,由于抗体过剩或抗原过剩,抗原与抗体结合但不能形成大的复合物,从而不出现肉眼可见的反应现象。抗体过量称为前带,抗原过量称为后带。 免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。免疫佐剂(immuno adjustvant):简称佐剂,是指某些预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。 半抗原(hapten):又称不完全抗原,是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性),而单独不能诱导抗体产生(无免疫原性)的物质。当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。 载体(carrier):结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。 载体效应:初次免疫与再次免疫时,只有使半抗原结合在同一载体上,才能使机体产生对半抗原的免疫应答,该现象称为~。 单克隆抗体(McAB):将单个B细胞分离出来,加以增殖形成一个克隆群落,该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,即~。 多克隆抗体(PcAb):天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位,以该抗原物质刺激机体免疫系统,体内多个B细胞克隆被激活,产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白,即~ 基因工程抗体(GEAb):是利用DNA重组及蛋白工程技术,从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配,经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。 凝集反应(agglutination reaction):是指细菌和红细胞或红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原(或抗体)的颗粒性载体与相应抗体(或抗原)特异性结合后,在适当电解质存在下,出现肉眼可见的凝集现象。 ①直接~:在适当电解质参与下,细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原直接与相应抗体结合后出现肉眼可见的凝集现象,称为~。 ②间接~:可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体(如正常人O型红细胞、细菌、胶乳颗粒等)的表面,然后与相应抗体(抗原)作用,在适宜的电解质存在条件下出现特异性凝集现象,称为~。其敏感度高于直接凝集反应和沉淀反应。 正向间接凝集反应:用可溶性抗原致敏载体以检测标本中的待检抗体。 反向间接凝集反应:用特异性抗体致敏载体以检测标本中的待检抗原。 间接凝集抑制反应:用抗原致敏的载体颗粒及相应的抗体作为诊断试剂,检测标本中是否存

免疫学检验试卷试题.doc

免疫学检验试题

章免疫学检验试题 一、选择题 1.SPA 能特异性与下 述哪种 Ig 的 Fc 段结合? ( ) A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD 2.在人类血清的 Ig 中,κ链和λ链之比为? ( ) A.1:1 B.1:2 C.1:3 D.2:1 3.56℃ 30 分钟可使下列哪种I g 丧失生物学活性? ( ) A.IgG B.IgA C.IgM D.IgE 4.胎血中出现抗风疹 病毒的何种 Ig,则表示子宫内感染? ( ) A.IgG B.IgA C.IgM D.IgD 5.补体系统的激活必须有下列哪种成分参与? ( ) A.C2 B.B因子 C.C1q D.C3 6.补体不具备的作用是? ( ) A.中和作用 B.促进中和及溶解病毒 C.调理作用 D.溶菌作用 7.补体含量增高见于下列哪种疾病? ( )

A.肿瘤文含义错误的是: ( ) B.系统性红斑狼疮 A.IL ——白细胞介素 C.血清病 B.EPO ——血小板生成 D.肾小球肾炎素 8. 关于旁路途径正确 C.SCF ——干细胞生长的叙述是: ( ) 因子 A. 需要抗原抗体的识别 D.TNF ——肿瘤坏死因和反应子 B.膜攻击单位与经典途11. 关于 MHC Ⅰ类分径相同子,下列哪项是正确 C.首先被活化的补体成的? ( ) 分是 C5 A. 存在于一切有核细胞D.需要经典途径的识别上 单位和活化单位的参与 B.只存在于白细胞上 9.能引起恶液质的细 C.只存在于淋巴细胞上 胞因子是: ( )D.只存在于巨噬细胞上 A.TNF- α12. 下列哪种疾病与 B.TGF- βHLA-B27 抗原相关性 C.IFN- α显著: ( ) D.IL-2 A. 系统性红斑狼疮 10. 下列英文缩写的中 B.类风湿性关节炎

临床免疫学检验技术考试题库及答案(四)

临床免疫学检验技术考试题库及答案 101.补体系统的调节因子包括( ) A.I因子 B.D因子 C.B因子 D.H因子 E.衰变加速因子(DAF) 答案:ADE 102.B细胞表达的CD分子包括( ) A.CD19 B.CD21 C.CD40 D.CD80/CD86 E.CD79a/CD79b 答案:ABCDE 103.免疫系统包括( ) A.胸腺 B.骨髓 C.淋巴结 D.脾 E.周围淋巴结 答案:ABCDE 104.下列关于PEG比浊法的描述,正确的是( ) A.PEG用于沉淀蛋白质具有可逆性,对蛋白质生物活性无影响 B.在pH、离子强度等条件固定时,蛋白质分子量越大,用以沉淀的PEG的浓度越小 C.PEG比浊法特异性强 D.不能反映小分子循环免疫复合物的情况 E.受温度变化影响大,重复性差

答案:ABDE 105.在淋巴细胞转化实验中,属于特异性刺激物的是( ) A.肿瘤抗原 B.PPD C.葡萄球菌毒素A、B、E D.ConA E.同种异体细胞 答案:ABCE 106.补体结合试验的正式试验应设立的对照有( ) A.血清对照 B.补体对照 C.抗原对照 D.溶血素对照 E.SRBC对照 答案:ABCDE 107.PEG比浊法检测非抗原特异性循环免疫复合物应注意的有( ) A.应空腹采血 B.温度、离心速度和时间应严格掌握 C.标本反复冻融可引起浊度增加 D.2%PEG只能沉淀较小分子的循环免疫复合物 E.温度每升高1℃,A值就下降0.02 答案:ABCE 108.关于CH50试验的方法学评价,下列正确的是( ) A.方法简便,快速,敏感性低 B.过量钙、镁离子可抑制溶血反应 C.补体的溶血活性与试验中反应体积成反比 D.缓冲液pH和离子强度增高,补体活性下降 E.过量钙、镁离子可促进溶血反应 答案:ABCD

(完整版)临床免疫学检验知识点

临床免疫学检验 1、免疫:是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。 3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组织 4、B细胞:通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg 表面标志:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。 成熟B细胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B细胞的mIg主要为mIgM和mIgD)同时检测CD5分子,可分为B1细胞和B2细胞。 B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。 5、T细胞:介导细胞免疫。共同表面标志是CD3(多链糖蛋白);辅助T细胞的标志是CD4;杀伤T细胞的标志是CD8;T细胞受体=TCR。 T细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体); CD3+CD4+CD8- = 辅助性T细胞(Th) CD3+CD4-CD8+ = 细胞毒性T细胞(Tc或CTL)(T细胞介导的细胞毒试验) CD4+CD25+ = 调节性T细胞(Tr或Treg) T细胞功能检测:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。增殖试验有:形态法、核素法。 T细胞亚群的分离:亲和板结合分离法,磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法 *E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验; 6、NK细胞:具有细胞介导的细胞毒作用。直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞) 表面标志:CD16(ADCC)、CD56。 测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。 7、吞噬细胞包括:单核-吞噬细胞系统(MPS,表面标志CD14,包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。(表达MHCⅡ类分子) 8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能):表面标志为CD1a、CD11c和CD83。 9、免疫球蛋白可分为分泌型(sIg,主要存在于体液中,具有抗体功能)及膜型(mIg,作为抗原受体表达于B细胞表面,称为膜表面免疫球蛋白) 10、免疫球蛋白按含量多少排序:IgG>IgA>IgM>IgD>IgE五类(按重链恒定区抗原性(CH)排序) 免疫球蛋白含量测定:单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。 11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于恒定区(CH、CL) 12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和VL(高变区)是抗原结合部位。

《医学免疫学》教学大纲

《医学免疫学》教学大纲 课程编号:03100030 课程名称:医学免疫学() 学分:2.5学分 总学时:45学时 理论学时:27学时 实验学时:18学时 先修课程:生物学、生物化学、生理学、病理学 适应专业:临床医学五年制 使用教材: 1.曹雪涛.医学免疫学(第6版),人民卫生出版社,2013. 2.高劲松、吴高莉. 病原生物免疫学实验教程.北京大学医学出版社,2014. 参考教材: 1.曹雪涛、何维.医学免疫学(第3版),人民卫生出版社,2015. 2.郝素珍.医学免疫学,人民卫生出版社,2010. 3.司传平、丁剑冰.医学免疫学,高等教育出版社,201 4. 4.柳忠辉、吴雄文.医学免疫学实验技术,人民卫生出版社,2014. 一、课程在培养方案中的地位、目的和任务 免疫学是研究机体防御系统——免疫系统的组织结构和生理功能的科学,主要包括三部分。基础免疫学从基因、分子、细胞和整体等不同水平研究免疫系统的结构与功能;抗原的特性;及免疫系统对抗原应答的机制与规律。临床免疫学包括免疫病理学和临床疾病免疫学。免疫病理学主要研究在疾病条件下,免疫系统的变化及对抗原应答的规律。免疫学技术主要包括免疫学诊断、预防、治疗技术原理,以及免疫学实验原理与技术操作。 医学免疫学还广泛渗入到医学各个领域,形成了众多分支学科,成为指导医学实践的理论基础。因此,医学免疫学是医学教育中的一门主干课程,是医学生必修的医学基础课程。本课程的任务是,通过教学使学生掌握免疫学的基础理论,基本知识和基本技能,为学习其他基础医学课程及临床医学课程奠定基础。 二、课程基本要求 1.基础理论与基本知识 (1)免疫学概论

常用免疫学检验技术的基本原理

常用免疫学检验技术的基本原理 免疫学检测即是根据抗原、抗体反应的原理,利用已知的抗原检测未知的抗体或利用已知的抗体检测未知的抗原。由于外源性和内源性抗原均可通过不同的抗原递呈途径诱导生物机体的免疫应答,在生物体内产生特异性和非特异性T 细胞的克隆扩增,并分泌特异性的免疫球蛋白(抗体)。由于抗体-抗原的结合具有特异性和专一性的特点,这种检测可以定性、定位和定量地检测某一特异的蛋白(抗原或抗体)。免疫学检测技术的用途非常广泛,它们可用于各种疾病的诊断、疗效评价及发病机制的研究。 最初的免疫检测方法是将抗原或抗体的一方或双方在某种介质中进行扩散,通过观察抗原-抗体相遇时产生的沉淀反应,检测抗原或抗体,最终达到诊断的目的。这种扩散可以是蛋白的自然扩散,例如环状沉淀试验、单向免疫扩散试验、双向免疫扩散实验。单向免疫扩散试验就是在凝胶中混入抗体,制成含有抗体的凝胶板,而将抗原加入凝胶板预先打好的小孔内,让抗原从小孔向四周的凝胶自然扩散,当一定浓度的抗原和凝胶中的抗体相遇时便能形成免疫复合物,出现以小孔为中心的圆形沉淀圈,沉淀圈的直径与加入的抗原浓度成正比。 利用蛋白在不同酸碱度下带不同电荷的特性,可以利用人为的电场将抗原、抗体扩散,例如免疫电泳试验和双向免疫电泳。免疫电泳首先将抗原加入凝胶中电泳,将抗原各成分依次分散开。然后沿电泳方向平行挖一直线形槽,于槽内加入含有针对各种抗原的混合抗体,让各抗原成分与相应抗体进行自然扩散,形成沉淀线。然后利用标准的抗原-抗体沉淀线进行抗原蛋白(或抗体)的鉴别。上述的方法都是利用肉眼观察抗原-抗体反应产生的沉淀,因此灵敏度有很大的局限。比浊法引入沉淀检测产生的免疫比浊法就是利用浊度计测量液体中抗原-抗体反应产生的浊度,根据标准曲线来计算抗原(或抗体)的含量。该方法不但大大提高了检测的灵敏度,且可对抗原、抗体进行定量的检测。

临床免疫学检验技术复习练习试题及答案(3)

临床免疫学检验技术复习练习试题及答案801.CFT的正式试验中抗体成分的效价是( ) A.4个单位 B.1个单位 C.2个实用单位 D.2个单位 E.3个单位 答案:A 802.免疫溶血法检测的是单个补体成分的( ) A.含量 B.分子量 C.活性 D.特异性 E.含量和活性 答案:C 803.Ⅰ类MHC分子穿过细胞膜插入胞质的部分是( ) A.α链的羧基端 B.α链的氨基端 C.β链的羧基端 D.β链的氨基端 E. 答案:A 二、多选题 26.关于胶体金结构和特性的正确描述( ) A.颗粒大小约为1~100nm B.包括一个基础金核 C.具有内正外负的以离子层 D.吸收峰波长随颗粒大小而改变

E.对电解质不敏感 答案:ABC 27.抗体的生物学活性包括( ) A.特异性结合抗原 B.介导各型变态反应 C.活化补体 D.调理吞噬作用 E.发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用答案:ACDE 28.细胞膜表面粘附分子的测定方法有( ) A.ELISA B.酶免疫组织化学染色方法 C.流式细胞仪测定方法 D.荧光免疫方法 E.时间分辨荧光免疫测定方法 答案:BCDE 29.补体的三条激活途经( ) A.MBL途径 B.内源性途径 C.经典途径 D.外源性途径 E.旁路途径 答案:ACE 30.常用的免疫电泳技术有( ) A.交叉免疫电泳 B.火箭免疫电泳 C.免疫电泳 D.免疫固定电泳 E.对流免疫电泳

答案:ABCDE 31.常用的荧光素是指( ) A.异硫氰酸荧光素 B.镧系稀土元素 C.四甲基异硫氰酸罗丹明 D.藻红蛋白 E.四乙基罗丹明 答案:ACDE 32.巨噬细胞的功能包括( ) A.分泌特异性抗体 B.产生溶酶体酶 C.分泌多种细胞因子 D.参与抗原加工、递呈 E.直接吞噬、杀伤病原体、肿瘤细胞 答案:BCDE 33.可用于破碎组织细胞制备可溶性抗原的方法有( ) A.超声破碎法 B.反复冻融法 C.超速离心法 D.酶处理法 E.表面活性剂处理法 答案:ABDE 34.肽链胞浆区具有ITAM结构的是哪些膜分子( ) A.CD3 B.CD154 C.FcεRⅠ D.Igα/Igβ E.CD80/CD86 答案:ACD

相关主题
文本预览
相关文档 最新文档