专题四生物技术的安全性和伦理问题
一、对转基因生物安全性的争论
1、对转基因生物安全性问题存在争论的原因是：
（1）由于科学发展水平的限制，目前科学家对、以及的了解相当有限。
（2）被转移的基因虽然都是的基因，但不少却是异种生物的基因。
（3）外源基因插入宿主基因组的部位往往是的，在转基因生物中会出现一些人们意想不到的后果。
2、转基因生物引发人们在、和三个方面发生了激烈的争论。
(1）转基因生物与食物安全
①反方观点：反对、出现滞后效应、出现新的、营养成分。
②正方观点：有、科学家负责的态度、无实例无证据。
(2)转基因生物与生物安全：转基因生物释放到环境中，可能会
对构成潜在的风险和威胁。①反方观点：扩散到种植区外，变成野生种类，破坏生态平衡；
有可能成为，威胁生态系统中其他生
物的生存；可能通过而进入杂草，成为
超级杂草；有可能与某些细菌或病毒杂交，从而
重组出对人类或其他生物有害的病原体。
②正方观点：生命力有限、存在、距离有限、花粉存活时间有限。
(3)转基因生物与环境安全：转基因生物可能会对和造成破坏。
①反方观点：会打破物种界限、二次污染、重组出有害的病原
微生物、某些______________或______________
会通过____________的传递进入其他动物或人体
内。
②正方观点：不会改变生物原有的分类地位；可以减少
_________________；保护农田土壤环境。
3、理性看待转基因技术
①正确的做法应该是，而不能。
②制定政策和法规，如我国制定的《基因工程安全管理办法》、为维护消费者对转基因产品的
和而颁布的《农业转基因生物标识管理
办法》。
二、生物技术的伦理问题
（一）克隆技术引发的伦理问题：多数人持否定态度。
1、克隆技术的分类：①（为了从胚胎中取出干细胞用于医学研究和治疗）
②（为了得到克隆人）
2、反对者观点：①克隆人严重违反了人类_______________，是克隆技术的滥用。②克隆人冲击了现有_____ _____等传统的伦理道德观念。③克隆人是在人为的制造在心理上和_______________上都不健全的人。④由于_____________尚不成熟，现在做克隆人很可能孕育出有_______________的孩子。
3、支持者观点
①克隆动物时的不成熟问题可以通过_____________、_____________和_____________等方法得到解决。②不成熟的技术也只有通过实践，才能使之成熟。
4、中国政府的态度
①禁止_______克隆人，一再重申四不原则：________、_______、________、_______任何生殖性克隆人的实验。②不反对_______________________。（二）设计试管婴儿引发的伦理问题
1、试管婴儿：是利用和等技术繁殖个体，其主要目的是为解决不孕夫妇的生育问题。
2、“设计试管婴儿”：实际上就是指受精卵形成的胚胎在植入子宫孕育前，根据人们的需要，对胚胎进行进行。当检测结果符合人们的需要时，再把胚胎植入母体孕育。一般我们听说的试管婴儿，不必经过这一步骤。试管婴儿与设计试管婴儿都是（有、无）性生殖。
3、设计试管婴儿引发的伦理问题
（1）反对者观点：
①把试管婴儿当作人体_______________，是对生命的不尊重。
②早期生命也有活下去的权利，抛弃或杀死多余胚胎，无异于“谋杀”。③有人滥用设计试管婴儿技术，如设计_______________。
（2）支持者观点：
①设计试管婴儿是为了救人，是救治患者的___________、__________的办法之一。②提供骨髓中_______________并不会对试管婴儿造成损伤。③脐带血为“身外之物”。
（三）基因“身份证”引发的伦理问题
1、基因“身份证”：记录了每个人的和
的特殊的磁卡。
2、反对者的理由：个人基因资讯的泄漏造成基因歧视，对人的就业、婚姻、保险、人际关系等造成不利的影响。
3、支持者的理由：通过基因检测可及早采取预防措施，适时进行治疗，达到挽救患者生命的目的。
三、生物武器
1、种类：，以及等。
2、散布方式：吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等。
3、特点：致命性、传染性强、面积效应大、危害时间长、难以发现等。
4、1998年6月27日，中美两国元首在关于议定书的联合声明中，重申了在任何情况下生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散。
专题五生态工程
一、生态工程的概念:是指人类应用应用生态学和系统学等学科的基本原理和方法，通过系统设计、调控和技术组装，对进行修复、重建，对造成和破坏的传统生产方式进行改善，并提高，从而促进人类社会和自然环境的和谐发展。二、生态工程建设的目的：就是遵循自然界的规律，充分发挥资源的，防止，达到与的同步发展。
三、生态工程的优点：生态工程是一类、、的工程体系。
四、生态经济：主要是通过实行的原则，使一个系统产生的，能够成为本系统或另一系统的，从而实现废弃物的资源化。其基本手段之一是。
五、生态工程的基本原理：
1、原理：理论基础：物质循环。
意义：可避免及其对系统稳定和发展造成的影响。实例：。
2、原理：理论基础：生态系统的稳定性。意义：生物多样性程度高，可提高系统的。
实例：“三北”防护林建设中的单纯林问题，珊瑚礁生态系统的生物多样性问题。
3、原理：理论基础：生物与环境的协调与平衡（协调：强调生物与环境的适应；平衡：种群的数量要与环境的承载力要平衡）。
意义：可避免系统的失衡和破坏。
实例：、西北防护林建设问题。
4、原理：理论基础：社会、经济、自然复合系统。
意义：统一协调各种关系，保障系统的平衡与稳定。
实例：林业建设中自然系统与社会、经济系统的关系问题。
5、原理：①系统的结构决定功能原理：理论基础：分布式优于集中式和环式。
意义：改变和优化以改善功能。实例：桑基鱼塘
②系统整体性原理：理论基础：整体大于部分。
意义：保持很高的。实例：珊瑚礁藻类和珊瑚虫的关系。
六、“生物圈2号”生态工程的实验及启示：
(1)设计目的：制造一个人工模拟的生命支持系统，以验证人类
在离开地球的情况下，利用人工生态工程，仅仅
依靠太阳能，能否维持生存。
(2)失败原因：温度失调；“大气和海洋”比例与地球相差甚远，
导致空气中CO2的含量猛增；O2量减少，不足以
维持人及动物的生存。
(3)启示：使人们认识到人与自然和谐共处的重要性，深化了对
自然规律的认识，尽管科学技术已很发达了，但人类
仍没有能力完全模拟出自然生态系统。
专题四生物技术的安全性和伦理问题答案
一、对转基因生物安全性的争论
1、（1）基因的结构基因间的相互作用基因的调控机制（2）功能已知（3）随机
2、食物安全生物安全环境安全（1）①实质性等同过敏源改变②安全性检测
(2)生物多样性①入侵的外来物种花粉传播②生殖隔离花粉传播
(3)生态系统稳定性人类生活环境①有毒蛋白过敏蛋白食物链②农药使用
专题四生物技术的安全性和伦理问题 一、对转基因生物安全性的争论 1、对转基因生物安全性问题存在争论的原因是： （1）由于科学发展水平的限制，目前科学家对、以及的了解相当有限。 （2）被转移的基因虽然都是的基因，但不少却是异种生物的基因。 （3）外源基因插入宿主基因组的部位往往是的，在转基因生物中会出现一些人们意想不到的后果。 2、转基因生物引发人们在、和三个方面发生了激烈的争论。 (1）转基因生物与食物安全 ①反方观点：反对、出现滞后效应、出现新的、营养成分。 ②正方观点：有、科学家负责的态度、无实例无证据。 (2)转基因生物与生物安全：转基因生物释放到环境中，可能会 对构成潜在的风险和威胁。①反方观点：扩散到种植区外，变成野生种类，破坏生态平衡； 有可能成为，威胁生态系统中其他生 物的生存；可能通过而进入杂草，成为 超级杂草；有可能与某些细菌或病毒杂交，从而 重组出对人类或其他生物有害的病原体。 ②正方观点：生命力有限、存在、距离有限、花粉存活时间有限。 (3)转基因生物与环境安全：转基因生物可能会对和造成破坏。 ①反方观点：会打破物种界限、二次污染、重组出有害的病原 微生物、某些______________或______________ 会通过____________的传递进入其他动物或人体 内。 ②正方观点：不会改变生物原有的分类地位；可以减少 _________________；保护农田土壤环境。 3、理性看待转基因技术 ①正确的做法应该是，而不能。 ②制定政策和法规，如我国制定的《基因工程安全管理办法》、为维护消费者对转基因产品的 和而颁布的《农业转基因生物标识管理
高中生物选修三专题一试 题 篇一：高中生物选修三专题一基因工程知识点 专题一基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位 的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。
黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的 磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ④对受体细胞无害。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有
专题二微生物的培养与应用 课题一微生物的实验室培养 ·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。 ·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。 ·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。 ·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。 ·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。 ·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 ·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。 ·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件 ·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面： ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
选修三知识点 一、基因工程 1、基因工程的四个步骤： 1）________________________________ 2）________________________________ 3）________________________________ 4）________________________________ 其中第________步为基因工程的核心步骤 2、获取目的基因的方法：_________________、_________________、_________________ 3、cDNA文库是提取一个细胞内全部的________，再通过________得到cDNA 4、限制酶所作用的化学键是________________ 5、DNA连接酶包括两种，分别是________________、________________ 6、运载体包括________________、________________、________________ 7、启动子是与________________的结合位点 8、转化是指目的基因在受体细胞内_______________________的过程 9、PCR所运用的原理是________________ 10、将目的基因导入植物细胞的方法：_________________、_________________、_________________ 11、将目的基因导入动物细胞的方法：_________________ 12、将目的基因导入原核生物的方法：用________处理，使之成为________________ 13、检测目的基因是否导入的方法：_________________ 检测目的基因是否转录的方法：_________________ 检测目的基因是否表达的方法：_________________ 除上述三种方法还需要进行_________，这是________水平的检测 14、基因工程的原理：_________________ 15、基因工程的育种优势：_________________ 二、细胞工程 （一）植物细胞工程 1、植物细胞融合的育种优势：_________________ 2、去壁需要使用_____________________，去壁后可得到__________ 3、诱导细胞融合的方法包括： 物理法：________、________、________； 化学法：用________（简称“________”）处理 4、植物细胞融合完成的标志：_______________________ 5、杂种细胞脱分化后得到__________，再分化后得到__________或__________ 6、脱分化和再分化都需要用___________和____________来进行诱导 7、植物组织培养的原理：____________________ 8、植物细胞融合的原理：____________________ 9、选取茎尖的__________进行植物组织培养，可以得到脱毒苗 10、培养愈伤组织是否需要光照？__________
专题2细胞工程单元检测 一、选择题 1.下图为植物组织培养得基本过程,则制作人工种子,及生产治疗烫伤、割伤得药物——紫草素,应分别选用编号就是得 ( ) A.④② B．③② C.③④ D.④③ ２．某同学在学习“细胞工程”时,列表比较了动植物细胞工程得有关内容， ?A 3.试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生物工程技术得杰出成果，下面对其 生物学原理及技术得叙述正确得就是() ?A.都属于无性生殖，能保持母本性状B．都就是细胞工程得技术范围 ?Ｃ.都充分体现了体细胞得全能性 D.都不会发生基因重组与变异 4.两个亲本得基因型分别为AＡｂb与ａaBB,这两对基因按自由组合定律遗传,要培育出基因型为aabb得新品种,最简捷得方法就是?( ） A.单倍体育种B．杂交育种Ｃ.人工诱变育种 D.细胞工程育种5．下列关于细胞工程得叙述中，错误得就是（） A、植物细胞融合必须先制备原生质体 B、试管婴儿技术包括人工授精与胚胎移植两方面 C、经细胞核移植培育出得新个体只具有一个亲本得遗传性状 D、用于培养得植物器官或组织属于外植体 6.下面关于植物细胞工程得叙述,正确得就是 () ?A、叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态得薄壁细胞 B.叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C、融合植物叶肉细胞时,应先去掉细胞膜 D.叶肉细胞离体培养时,可以表现出全能性 7.关于单克隆抗体得不正确叙述就是( ）?A、化学性质单一 B.用有性繁殖获得 C．特异性强 D.可用于治病、防病 ８．下列关于细胞工程得有关叙述,不正确得就是( ） ?A.利用花药离体培养得到单倍体植株,从紫草得愈伤组织中提取紫草素,利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株,都利用了植物组织培养技术,而利
高中生物选修3基础知识复习提纲(最新详细) 专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接 起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯 键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 （3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合 成法_。 3.PCR技术扩增目的基因 （1）原理：DNA双链复制 （2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 第二步：基因表达载体的构建 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。 （3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 第三步：将目的基因导入受体细胞_ 1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.常用的转化方法： 将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。 将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。 将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用 Ca2+ 处理细胞，使其成为感受态细胞，再将 重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。 第四步：目的基因的检测和表达 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。 2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－ 抗体杂交。 4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。 （三）基因工程的应用 1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。 2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。 3.基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。 （四）蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质） 转录翻译 专题2 细胞工程 （一）植物细胞工程 1.理论基础（原理）：细胞全能性 全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞 2.植物组织培养技术 （1）过程：离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体 （2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。
选修教材练习 一、选择题 1.（全国卷1）下列关于植物体细胞杂交或植物细胞质遗传的叙述，错误的是 A 利用植物体细胞杂交技术可以克服生殖隔离的限制，培育远缘杂种。 B不同植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程。 C两个不同品种的紫茉莉杂交，正交反交F1的表现型一致。 D两个不同品种的紫茉莉杂交，F1的遗传物质来自母本的多余父本的。 2（重庆）下表有关基因表达的选项中，不可能的是 D 基因表达的细胞表达产物 A 细菌抗虫蛋白基因抗虫棉叶肉细胞细菌抗虫蛋白 B 人A 酪氨酸酶基因正常人皮肤细胞人酪氨酸酶 C 动物胰岛索基因大肠杆菌工程菌细胞动物胰岛索 D 兔血红蛋白基因兔成熟红细胞兔血红蛋白 3．（浙江）用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性 4．（浙江）下列关于基因工程的叙述，错误的是 A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组 DNA 的细胞和促进目的基因的表达 5．（江苏）下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是 A．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B．胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割 C．胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点 D．胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取 6．（广东 B 卷）钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获 2008 年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知 A．该生物的基因型是杂合的 B．该生物与水母有很近的亲缘关系 C．绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达 D．改变绿色荧光蛋白基因的 1 个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光 二、非选择题：
选修3易考知识点背诵 专题1 基因工程 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有特异性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 DNA连接酶）的比较： (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T 4- ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 噬菌体，只能将双链DNA片段互 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于T 4 DNA连接酶能缝合两种末补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T 4 端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 （3）其它载体：噬菌体、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.目的基因是指：是人们所需要转移或改造的基因
2.获取目的基因的方法基因文库、人工合成、 PCR技术 3.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。 4.PCR技术扩增目的基因 （1）原理：DNA双链复制 （2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 第二步：重组DNA分子 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因+复制原点 （1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。 （3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 第三步：转化受体细胞 1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内 维持稳定和表达的过程。 2.常用的转化方法： 将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。 将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵。 将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用 Ca2+ 处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 3.重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。 第四步：目的基因的检测和表达 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术。 2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。
选修3《现代生物科技专题》知识点总结 1.1 DNA重组技术的基本工具 1、基因工程的概念 又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基 因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向改造生物的遗传性状。 优点：定向地改造生物的遗传性状； 实现基因在不同物种之间的转移，迅速培育出生物新品种 2、基因拼接的理论基础： （1）大多数生物的遗传物质是DNA （2）DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。 （3）双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构。 3、外源基因在受体内表达的理论基础： （1）基因是控制生物性状的独立遗传单位。 （2）遗传信息的传递都遵循中心法则。 （3）生物界共用一套遗传密码。 （一）基因工程的基本工具 1?“分子手术刀”一一限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是原核生物 （2）功能：能够识别双链DNA分子的特定的核苷酸序列，有特定的切割位点（专一性）。 （3）作用部位：磷酸二酯键 （3）结果：形成两种末端：黏性末端和平末端。 注意：用同种限制酶分别切割目的基因和载体，从而形成相同的黏性末端，然后用DNA连接酶将目的基因和载体连接起来 2?“分子缝合针” 一一DNA连接酶 ①作用：恢复磷酸二酯键。 ②种类：E?coliDNA连接酶：来源于大肠杆菌，连接黏性末端；
T4DNA连接酶：来源于噬菌体，连接黏性末端和平末端。 3. “分子运输车”--- 载体 (1)载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ④对受体细胞无害 (2)常用的载体：细菌的质粒、入噬菌体的衍生物、动植物病毒(天然质粒不能直接使用) 1.2 基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1. 目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。 2. 方法：①从基因文库中获取目的基因 (方法：根据基因的核苷酸序列、基因的功能在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性。) ②利用PCR技术扩增目的基因(适用于已知目的基因的一段核苷酸序列) ③通过化学方法人工合成(适用于目的基因较小，或已知目的基因核苷酸序列) 3. 基因组文库与cDNA文库的区别 4. PCR技术扩增目的基因 (1)PCR的含义：全称多聚酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 (2)目的：快速获取大量的目的基因 (3)原理：DNA M制 (4)使用的前提：已知目的基因的一段核苷酸序列 (5)条件：模板DNA、引物、热稳定DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸 (6)过程：第一步：变性，加热至90?95C DNA解链为单链，断裂氢键； 第二步：退火，冷却到55?60C,引物与两条单链DNA结合，形成局部双链DNA
镇巴中学2008—2009学年度第二学期第一次月考 高二生物试卷 （选修三专题一和专题二两部分，考试时间：90分钟） 一．选择题：（每小题只有一个选项最符合题意。请将正确答案的代号填入卷后的答题卡内。共40题。1.5×40=60分。） 1．下列关于基因工程的叙述，正确的是：（） A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B．细菌质粒是基因工程常用的运载体 C．通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA D．为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体2．与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是：（） A．反转录酶 B．DNA连接酶 C．RNA聚合酶 D．解旋酶 3．限制性内切酶的作用实际上就是把DNA上某些化学键打断，一种能对GAATTC 专一识别的限制酶，打断的化学键是：（） A．G与A之间的键 B．G与C之间的键 C．A与T之间的键 D．磷酸与脱氧核糖之间的键4．除下列哪一项外，转基因工程的运载体必须具备的条件是：（） A．能在宿主细胞中复制并保存 B．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接C．具有标记基因，便于进行筛选 D．是环状形态的DNA分子 5．下列关于染色体和质粒的叙述，正确的是：（） A．染色体只存在于真核生物细胞中，质粒只存在于原核生物细胞中 B．在基因工程中染色体和质粒均可以作为运载体 C．染色体和质粒均与生物的遗传有关 D．染色体和质粒的化学本质相同 6．苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞是否已表达，其检测方法是：（）A．是否有抗生素抗性 B．是否能检测到标记基因 C．是否有相应的性状 D．是否能分离到目的基因 7．如果科学家通过转基因工程，成功地把一名女性血友病患者的造血细胞进行改造，使其凝血功能恢复正常。那么，她后来所生的儿子中：（） A．全部正常 B．一半正常 C．全部有病 D．不能确定
生物选修3知识点 专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过_________________ 建议收藏下载本文，以便随时学习！ ，赋予生物以_____________，创造出__________________________。基因工程 是在_____________上进行设计和施工的，又叫做_____________。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——__________________________ （1）来源：主要是从_____________中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种_____ _的核苷酸序列，并且使每一条链中______ _部位的两个核苷酸之间的 _____________断开，因此具有_____ 性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： ________ _和_______ _ 2.“分子缝合针”——_________ (1)两种DNA连接酶（和）的比较 ： ①相同点：都缝合_______ __键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于_______ __，只能将双链DNA片段互 补的_______ 之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝 合_______ ，但连接平末端的之间的效率较_ 。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将______ ___加到已有的核 苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接____ _____ 的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——______ ___ （1）载体具备的条件：①___________________________。 ②___________________________。 ③___________________________。 （2）最常用的载体是___ __,它是一种裸露的、结构简单的、独立于，并具有_________ 能力的_____ ____DNA分子。 （3）其它载体：_______________________ ____ (二)基因工程的基本操作程序 第一步：_________________ _ 1.目的基因是指：。 2.原核基因采取获得，真核基因是______ ___。人工合成 目的基因的常用方法有________ _和______ ___。 3.PCR技术扩增目的基因 （1）原理：_______ __
选修三专题 4 生物技术的安全性和伦理问题 时间：01—23 编号：43 课标点击： 1.转基因生物的安全性（Ⅰ） 2.生物武器对人类的威胁（Ⅰ） 3.生物技术中的伦理问题（Ⅰ）知识梳理： 一、转基因生物的安全性 1、转基因生物存在安全性的原因 （1）目前对基因的结构、调控机制及基因间的相互作用了解有限。 （2）目的基因往往是异种生物的基因。 （3）外源基因往往是随机插入宿主细胞基因组的。 2、理性看待转基因生物 （1）转基因生物的优缺点 优点：①解决粮食短缺问题；②减少农药使用，减少环境污染；③增加食物营养，提高附加值； ④增加食物种类，提升食物品质；⑤提高生产效率，带动带动产业发展。 缺点：①可能产生新病毒或新过敏原；②可能产生抗除草剂的杂草；③可能使疾病的传播跨越 物种障碍；④可能会损害生物多样性；⑤可能干扰生态系统的多样性。 （2）对待转基因生物的正确态度是趋利避害，不能因噎废食。 二、生物技术中的伦理问题 1、克隆人（1）分类 类型 项目 治疗性克隆生殖性克隆 区别 目的治疗人类疾病用于生育，产生新个体水平细胞水平个体水平 联系都性无性繁殖，产生新个体，新组织，遗传信息相同。 （2）态度 中国政府的态度是禁止生殖性克隆，但不反对治疗性克隆。 2、试管婴儿与设计试管婴儿 （1）试管婴儿是利用体外受精和胚胎移植等技术繁殖个体，其主要目的是解决不孕夫妇的生育问题。 （2）设计试管婴儿与试管婴儿相比需要在胚胎移植前对胚胎进行遗传学诊断，以筛选符合特殊 要求的胚胎，进而生出特定类型的婴儿。 3、基因检测 （1）概念：指通过基因芯片对被检测者细胞中的DNA分子进行检测，分析邮被检测者所含的各种致病基因和疾病易感基因的情况的一种技术。 （2）争论焦点 ①基因检测能否达到预防疾病的目的。②是否引起基因歧视及其他危害。 三、生物武器 1、种类 种类例证 病菌炭疽杆菌 病毒天花病毒、动物痘病毒 生化毒剂肉毒杆菌毒素 经基因重组的致病菌通过转基因技术改造的蜡状杆菌、重组流感病毒 2、特点 （1）传染性强。（2）污染面广，危害时间长。直接喷洒的生物气溶胶，可随风飘到较远的地区，杀伤范围可达数百至数千平方千米。在适宜条件下，生物战剂存活时间较长，不易被发现。 （3）难以防治。（4）具有一定的潜伏期。（5）受自然条件影响大。 3、局限性 （1）生物武器主要指病原微生物，所以它们的生存、繁殖、死亡易受环境条件的影响。 （2）受地形、风向等多种条件影响。（3）生物武器使用不易控制，使用不当可危害本方安全。 选修三专题 5 生态工程
专题1 基因工程． 基因拼接的理论基础 (1)大多数生物的遗传物质是DNA。 (2)DNA的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸。 (3)双链DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构．外源基因在受体内表达的理论基础 (1)基因是控制生物性状的独立遗传单位。 (2)遗传信息的传递都遵循中心法则。 (3)生物界共用一套遗传密码。 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键 连接起来；而T4DNA连接酶来源T4噬菌体，能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较 低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二 酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 （3）其它载体：入噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步：目的基因的获取 1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因和某些具有调控作用的因子。 2.原核基因采取直接分离（从基因文库中获取）获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常 用方法有反转录法_和化学合成法_。 3.PCR技术扩增目的基因 （1）原理：DNA双链复制 （2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 （3）条件：模板，引物，热稳定DNA聚合酶（taqDNA聚合酶） 第二步：基因表达载体的构建（基因工程中的最关键步骤） 1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
高中生物选修3知识点填空习题 高中生物选修3知识点填空： 1.2基因工程的基本操作程序 【基础知识梳理】 基因工程的基本操作程序主要包括：_____________________、 _____________________、_____________________。 (一)目的基因的获取 1、概念：目的基因主要是指编码蛋白质的基因,也可以是一些具有调控作用的因子。 2、来源：(1)可以从自然界中已有_______________中直接分离 出来。 (2)从________________中获取目的基因。 3、基因文库：(1)概念：将含有某种生物不同基因的许多片段导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。 (2)种类：基因组文库――含有一种生物的 _____________________。 部分基因文库――含有一种生物的_____________________。(如cDNA文库) 4、获取目的基因的方法： (1)从基因文库中获取目的基因 根据目的基因的有关信息，如根据基因的__________序列，基因的功能、基因在_________上的位置、基因的转录产物__________， 以及基因的表达产物___________等特性来获取目的基因。
(2)利用PCR技术扩增目的基因：①原理：PCR技术是一项在生物体外复制_________片段的核酸合成技术。②前提条件：提供已知__________的核苷酸序列，根据这段序列合成_____________。③过程：目的基因DNA变性形成DNA单链，与结合，然后在__________的作用下延伸形成DNA。④特点：________扩增，即2n(n为扩增循环次数)。 (3)人工合成方法：当基因较小，核苷酸序列已知时，可以用人工方法合成(例如，通过______________直接合成)。 目的：使在受体细胞中稳定存在，并可以________________ (二)、基因表达载体的构建 基因表达载体的组成： 1.启动子：是一段有特殊结构的_____________________，位于基因的_____________________，是_____________________识别和结合的部位，能驱动基因_____________________，最终获得所需的_____________________。 2.终止子：也是一段有特殊结构的_____________________，位于基因的_____________________ 3.标记基因的作用：_____________________;常用的标记基因是_____________________ (三)、将目的基因导入受体细胞方法： 导入植物细胞的方法：_____________________ 导入动物细胞的方法：_____________________ 导入微生物的方法：_____________________ 1.将目的基因导入植物细胞的方法： a农杆菌转化法
生物选修3 知识点 （区别不同工程和不同操作水平） 专题1 基因工程 概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA 重组和转基因技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 基本原理：让目的基因在受体细胞内稳定且高效的表达 理论基础：DNA 是生物遗传物质的发现，DNA 双螺旋结构，遗传信息传递方式 核心：构建重组DNA 分子 （1）基本工具（技术基础） Cf 工具&工具酶 1.限制性核酸内切酶 （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的 （不切割自身 DNA 的原因：原核生物中无该限制酶的识别序列或其已被修饰）（2）功能：识别和切割 DNA 分子内一小段特殊的脱氧核苷酸序列（偶数碱基对回文序列）特异性表现：识别特定片段、切割该片段中的特定位点、形成一种末端 Cf —G↓GATCC— & —↓GATC— （3）结果：DNA 片段末端形成末端碱基互补的黏性末端或平末端 ①用切割（质粒） ②根据目的基因的位置或剪辑序列来确定限制酶的种类 ③切割后的片段要画全 2.DNA 连接酶 （1）功能：连接具有末端碱基互补的 2 个 DNA 片段，形成重组 DNA 分子 Cf DNA 聚合酶：只能将单个脱氧核苷酸逐个添加到已有的脱氧核苷酸链之后， 需模板 DNA，连接磷酸二酯键 3.载体 （1）条件：①能在受体细胞中稳定保存并大量复制，基本不影响受体细胞正常生命活动 ②一至多个限制酶酶切位点（必须在所需标记基因外），供外源 DNA 片段插入 ③标记基因，便于筛选含有重组 DNA 分子的受体细胞 ——往往需要根据需求改造天然载体 （2）功能：①作为运载工具将目的基因转移到受体细胞内 ——载体选质粒的原因：具有环状结构，能够携带目的基因 ②利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制和转录/表达 （3）质粒（最常用的载体） 一种能够自主复制，在细菌(或酵母菌)中独立于染色体之外存在的双链环状 DNA 分子（4）其它载体：噬菌体、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步：获取目的基因 1.目的基因：人们所需要的编码蛋白质的结构基因 2.方法 (1)序列已知 ①化学合成法——较长 DNA 单链合成过程中容易出现碱基缺失 如反转录法（e.g 获取 mRNA 逆转录成 cDNA 再用 DNA 聚合酶生成双链） ②聚合酶链式反应(PCR)扩增Polymerase Chain Reaction
专题一基因工程基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） （1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶（E·coli DNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：E·coli DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的 磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效 率较低。 (2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是 （1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 ④对受体细胞无害。 （2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 （3）其它载体：λ噬菌体的衍生物、动植物病毒
专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养
四、制作牛肉膏蛋白胨固体培养基 （1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。（2）倒平板操作的步骤：
2.涂布平板操作的讨论 课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
二、统计菌落数目 （1）直接计数法：常用显微镜直接技术法，一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。 （2）间接计数法：常用稀释平板计数法，平板培养基上长出一个菌落就代表原待测样品中一个微生物个体。 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统 计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此， 统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。 采用此方法的注意事项：1.一般选取菌落数在30~300之间的平板进行计数 三、设置对照 设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。对照实验是指除了被测试的条件以外，其他条件都相同的实验，其作用是比照试验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。 四、实验设计 实验设计包括实验方案，所需仪器、材料、用具和药品，具体的实施步骤以及时间安排等的综合考虑 四、疑难解答 （1）如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？ 每克样品中的菌落数=（C/V）*M 其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml），M代表稀释倍数 注：统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均 值