丹参酮ⅡA对血小板活化钙信号的影响及机制的研究
袁彬1，吴鸿2
（1.河南中医学院2011级硕士研究生，郑州 450008；2.河南中医学院细胞成像实验室，郑
州 450002）
摘要目的:总结丹参酮ⅡA对血小板活化钙信号的影响及机制。方法：通过调研和检索文献概述丹参酮ⅡA对血小板活化钙信号的影响及机制。结果：丹参酮ⅡA是活血化瘀类中药丹参的脂溶性成分之一，具有广泛的生物活性,如改善微循环、清除氧自由基、抗血小板聚集等。丹参酮ⅡA的以上生物学活性与抑制血小板活化有关；血小板活化在血栓形成的过程中起着重要重用。而其活化的标志是血小板胞质内钙离子浓度升高。钙离子与细胞传导信号密切相关，可以作为配体直接与受体结合启动信号转导，也可以作为第二信使偶联信号转导参与调节大多数的细胞活动，包括血小板活化。血小板胞质内钙离子浓度升高取决于细胞外血小板膜外基质中的钙内流和血小板细胞内钙池的钙释放。结论：丹参酮ⅡA 通过影响钙离子通道的开闭而阻止血小板胞质内钙离子浓度的升高，从而发挥抗血小板活化的作用。
关键词丹参酮ⅡA；血小板活化；钙信号
心、脑血管疾病包括缺血性冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病) 、脑卒中和(或) 周围血管病,是导致人类死亡的主要病因[1]。血小板活化在动脉粥样硬化、止血、血栓形成、炎症、伤口愈合、免疫力、肿瘤转移的过程中发挥着要作用[2]。丹参酮ⅡA（Tanshinone ⅡA，Tan ⅡA）是活血化瘀类中药丹参的脂溶性成分之一，具有广泛的生物活性,具有改善微循环[3]、清除氧自由基[4]、具有抑制血小板聚集[5]、抗血栓形成[6]等作用，其作用与防止血小板内钙离子超载[7]或通过减少巨核细胞数量而减少血小板生成有关[8]等作用。血小板的活化主要标志是血小板胞质内钙离子浓度（intracellular calcium concentration, [Ca2+]i）升高[9]，有报道称[10]TanⅡA可能是作用于钙离子通道而发挥作用。
1 钙信号在血小板活化过程中的作用
G蛋白耦联受体所介导的细胞信号通路有钙离子(calcium ion，Ca2+)的参与[11, 12]。Ca2+可以作为配体直接与血小板磷脂膜上的G蛋白偶联受体
(G-Protein–Coupled Receptors ,GPCRS)结合启动信号传导，也可以作为第二信使耦联信号传导参与调节大多数的细胞活动。包括血小板活化[13]。血小板胞质内钙离子浓度([Ca2+]i)升高取决于细胞外血小板膜外基质中的钙内流和血小板细胞内钙池的钙释放[14]。影响血小板胞内钙离子浓度的离子通道有：受体门控钙通道（ROC）和钙池控制钙通道（SOCC）[15]。有实验证实[16]使用钙通道阻滞剂能显著抑制血小板的聚集、ADP和血栓素A2的释放，但不能完全阻断。在GPCRs家族中有不同受体在血小板活化过程中发挥着信号传导作用[17]。GPIIb/IIIa复合体就是其中之一，起着内外活化信号的传递作用[18],同时也具有使血小板稳固聚集的信号传导作用[19]。使用GPIIb/IIIa受体阻滞剂[20]或破坏GPIIb/IIIa受体能阻断活化信号的进一步下传。血小板膜GPCRs激活后，G蛋白亚体活性成分激活磷脂酶C （PLC），将二磷酸磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate，PIP2）水解成肌醇三磷酸（Inositol triphosphate，IP3）和甘油二酯（diglyceride，DAG）。IP3作用于内质网（endoplasmic reticulum ，ER）膜上IP3受体，触发Ca2+释放，引起[Ca2+]i升高。同时通过血小板膜钙池控制钙通道引发钙内流（store-operated calcium channels，SOCE）[21]，钙池细胞器膜上Ca2+传感器分子（STIM1）和血小板膜上跨膜蛋白（Orai1），两种蛋白分子共同发挥SOCE效应[22, 23]。血小板聚集需要活化放大,而放大过程则需要二磷酸腺苷(Adenosine diphosphate ，ADP)参与[24, 25], 但是其发挥作用离不开GPIIb/IIIa受体的前一阶段活化信号[26]。与ADP特异性结合的是血小板膜受体P2Y1,and P2Y12，这两个特异性受体帮助血小板将活化信号放大[27]。有实验证实，阻断这两个受体与ADP的结合不能完全阻断血小板的聚集，这也说明血小板的聚集是由多途径参与的生物学行为[28]。钙离子通过调控磷脂酶D(Phospholipase D;NAPEPLD ;PLD) 催化生成磷脂酸的反应，间接影响细胞膜流动性,从而影响血小板的伪足伸出、变形[29]。钙调素（calmodulin，CaM）由单一肽链构成，具有四个钙离子结合部位。结合钙离子发生构象改变，可激活钙调素依赖性激酶（CaM-Kinase）。但是阻断钙调素的活化不能阻断血小板的活化[30, 31]。
2 Tan ⅡA对钙信号的影响的机制
Tan ⅡA是从多途径、多角度对钙信号的传导产生的影响的。不但能够通过减少巨核细胞数量而减少血小板生成[8]而且还从如下角度影响血小板的活化。1、
血小板的活化需要血小板膜上的GPIIb/IIIa复合体的参与，而降低其含量能够影响活化信号的传递，研究证实Tan ⅡA可使血小板GPIIb/IIIa含量降低，具有较温和的抑制GPIIb/IIIa复合物活性的作用[32]。2、ADP、凝血酶和胶原等物质是强烈的致聚剂，同时也是活化信号放大、稳固已活化血小板的关键物质，干扰ADP、凝血酶和胶原等物质诱发的大鼠血小板聚集过程表明，Tan ⅡA有明显的抑制该过程的作用，且呈剂量依赖关系[33]；3、如前所述，胞外钙离子内流是血小板活化的前提条件，其内流通道被阻断能够显著影响血小板活化过程，Tan ⅡA[34]主要可能影响ROC和SOCC，但至于其如何影响血小板细胞中受体介导的钙通道开放导致胞外钙离子大量流入胞内，目前还没有明确的答案。4.环磷酸腺苷(cAMP)是血小板活化的抑制性第二信使，干扰胞内cAMP浓度能够明显影响信号的传递。其浓度增高能够抑制PLC的活性，抑制PIP2分解成IP3和DAG的过程，而有研究表明[35]Tan ⅡA能够使胞内cAMP浓度升高，从而证明其有影响该信号的传递过程。在前述的的血小板活化机制中CaM发挥着重要作用，而现在尚未见到报道Tan ⅡA对其有影响、如何影响。
结语
现有的临床及实验研究表明,血小板活化状态在血栓形成过程中具有重要作用,是血栓形成的重要环节。Tan ⅡA作为中药提取物,因其具有抗血小板、抗凝、无毒副作用等特点,且在抑制血栓形成的同时不易引起出血。血小板活化是由多种物质触发、由Ca2+参与的复杂的生物学过程，是血小板膜表面受体构象、活性发生改变引发[Ca2+]i浓度变化的结果。但如前研究仅限于描述性研究，对Tan ⅡA 抗血小板活化的多个环节分子机制不清、对钙信号的影响调节的受体靶点不明的问题仍有待深入研究。
参考文献
[1] 梁勇，羊裔明，袁淑兰. 丹参酮药理作用及临床应用研究进展[J]. 中草药,2000,31(4):304-306.
[2] Leslie M. Cell biology. Beyond clotting: the powers of platelets[J]. Science,2010,328(5978): 562-564.
[3] 梁卉. 丹参抗脑缺氧缺血/再灌注损伤机制的实验研究进展[J]. 辽宁药物与临床,2004(2):103-1 05.
[4] 张中林，王卉. 硒与丹参酮IIA磺酸钠对兔心肌缺血再灌注损伤血NO、SOD、GSH-PxMDA 的影响[J]. 中华中医药学刊.2008:812-816.
[5] 周敏，李晓静，李晓辉，等. 丹参酮ⅡA对免疫性血管炎、血小板及凝血功能影响的实验研究[J]. 血栓与止血学,2009,15(1):8-12.
[6] 张恩户，郭冬，刘珍，等. 丹参酮ⅡA、丹参素、川芎嗪和阿魏酸抑制血小板聚集的相互作用类型及配比关系研究[J]. 陕西中医.2007:743-745.
[7] Takahashi K, Ouyang X, Komatsu K, et al. Sodium tanshinone IIA sulfonate derived from Danshen (Salvia miltiorrhiza) attenuates hypertrophy induced by angiotensin II in cultured neo natal rat cardiac cells[J]. Biochem Pharmacol,2002,64(4):745-749.
[8] 王孝铭，徐长庆，刘泰范，等. 丹参酮Ⅱ-A对豚鼠单个心室肌细胞跨膜电位及L-型钙电流的影响[J]. 中国病理生理杂志,1997(1):43-47.
[9] Li Z, Delaney M K, O'Brien K A, et al. Signaling during platelet adhesion and activation [J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol,2010,30(12):2341-2349.
[10]郑智，王照华，梁黔生，等. 丹参酮对肥厚心肌L-型钙电流的影响[J]. 高血压杂志.2006.
[11] Fujimoto T, Fujimura K, Kuramoto A. Electrophysiological evidence that glycoprotein IIb-IIIa complex is involved in calcium channel activation on human platelet plasma membrane[J]. J Biol Chem,1991,266(25):16370-16375.
[12] Andrews R K, Lopez J A, Berndt M C. Molecular mechanisms of platelet adhesion and activation[J]. Int J Biochem Cell Biol,1997,29(1):91-105.
[13] Li Z, Delaney M K, O'Brien K A, et al. Signaling during platelet adhesion and activation [J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol,2010,30(12):2341-2349.
[14] Goto S, Tamura N, Ishida H, et al. Dependence of platelet thrombus stability on sustaine
d glycoprotein IIb/IIIa activation through adenosin
e 5'-diphosphate receptor stimulation and cycli
c calcium signaling[J]. J Am Coll Cardiol,2006,47(1):155-162.
[15] Berridge M J. Elementary and global aspects of calcium signalling[J]. J Physiol,1997,499 ( Pt 2):291-306.
[16] Salam S R, Saxena R, Saraya A K. Effect of calcium channel blocker (diltiazem) on plat elet aggregation[J]. Indian J Exp Biol,1991,29(5):484-485.
[17] Kiefer T L, Becker R C. Inhibitors of platelet adhesion[J]. Circulation,2009,120(24):2488-2 495.
[18] Fujimoto T, Fujimura K, Kuramoto A. Functional Ca2+ channel produced by purified plat elet membrane glycoprotein IIB-IIIA complex incorporated into planar phospholipid bilayer[J]. Thromb Haemost,1991,66(5):598-603.
[19] Goto S, Tamura N, Ishida H, et al. Dependence of platelet thrombus stability on sustaine
d glycoprotein IIb/IIIa activation through adenosin
e 5'-diphosphate receptor stimulation and cycli
c calcium signaling[J]. J Am Coll Cardiol,2006,47(1):155-162.
[20] Smyth S S, Woulfe D S, Weitz J I, et al. G-protein-coupled receptors as signaling targets for antiplatelet therapy[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol,2009,29(4):449-457.
[21] Parekh A B, Putney J J. Store-operated calcium channels[J]. Physiol Rev,2005,85(2):757-8 10.
[22] Yano K, Subkhankulova T, Livesey F J, et al. Electrophysiological and gene expression p rofiling of neuronal cell types in mammalian neocortex[J]. J Physiol,2006,575(Pt 2):361-365. [23] Tolhurst G, Carter R N, Amisten S, et al. Expression profiling and electrophysiological st udies suggest a major role for Orai1 in the store-operated Ca2+ influx pathway of platelets an
d megakaryocytes[J]. Platelets,2008,19(4):308-313.
[24] Born G V. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal[J]. N
ature,1962,194:927-929.
[25] Haslam R J. Role of adenosine diphosphote in the aggregation of human blood-platelets b y thrombin and by fatty ACIDS[J]. Nature,1964,202:765-768.
[26] Takasaki J, Kamohara M, Saito T, et al. Molecular cloning of the platelet P2T(AC) ADP receptor: pharmacological comparison with another ADP receptor, the P2Y(1) receptor[J]. Mol Pharmacol,2001,60(3):432-439.
[27] Jin J, Daniel J L, Kunapuli S P. Molecular basis for ADP-induced platelet activation. II. The P2Y1 receptor mediates ADP-induced intracellular calcium mobilization and shape change in platelets[J]. J Biol Chem,1998,273(4):2030-2034.
[28] Gachet C. Regulation of platelet functions by P2 receptors[J]. Annu Rev Pharmacol Toxic ol,2006,46:277-300.
[29] Shen M Y, Hsiao G, Fong T H, et al. Expression of amyloid beta peptide in human plat elets: pivotal role of the phospholipase Cgamma2-protein kinase C pathway in platelet activatio n[J]. Pharmacol Res,2008,57(2):151-158.
[30] Hartung H P. Acetyl glyceryl ether phosphorylcholine (platelet-activating factor) mediates heightened metabolic activity in macrophages. Studies on PGE, TXB2 and O2- production, spre ading, and the influence of calmodulin-inhibitor W-7[J]. FEBS Lett,1983,160(1-2):209-212. [31] White G N, Raynor S T. The effects of trifluoperazine, an inhibitor of calmodulin, on pl atelet function[J]. Thromb Res,1980,18(1-2):279-284.
[32] 罗海明，符德玉，任敏之，等. 通心络胶囊对冠心病人血小板GPⅡb/Ⅲa复合物活性影响的临床研究[J]. 中成药,2005,27(2):181-183.
[33] 冯洁，王嗣岑，等. 复方丹参滴丸对大鼠血小板聚集功能的影响[J]. 中国误诊学杂志,2006, 6(12):2261-2263.
[34] 王照华，梁黔生，郑智，等. 丹参酮对肥厚心肌L-型钙电流的影响[J]. 高血压杂志,2006,14(6): 450-454.
[35] 杨佳，秦彩玲，等. 复方丹参方及丹参、三七对血小板功能影响的研究概况[J]. 中国实验方剂学杂志,2003,9(2):59-62.
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 丹参酮药理作用及临床应用研究进展△丹参酮药理作用及临床应用研究进展△ 中草药 2019 年第 4 期第 31 卷综述与专论作者： 梁勇羊裔明袁淑兰单位： 华西医科大学附属第一医院血液内科成都 610041 关键词： 丹参酮；药理作用；临床应用摘要从中药丹参中提取的有效成分丹参酮不仅具有天然抗氧化、心血管药理作用及抗菌消炎作用，而且还具有明显的抗肿瘤作用。 丹参酮在临床非肿瘤领域已得到广泛应用。 从 1934 年至 1976 年间，国内外对丹参进行了大量研究工作，先后从中分离得到 15种成分，测定了结构式，并依次命名为丹参酮(tanshinone, Tan)Ⅰ 、Ⅱ A、Ⅱ B，隐丹参酮，异丹参酮Ⅰ 、Ⅱ A，异隐丹参酮，羟基丹参酮Ⅱ A，丹参酸甲酯，miltirone,salviol,二氢丹参酮Ⅰ ，丹参新醌甲、乙和丙［1］。 研究表明，丹参酮类均含有邻醌或对醌结构。 由于醌类成分易被还原为二酚类衍生物，后者再被氧化又易转变为醌，在转变过程中起电子传递作用；同时，它们在生物体内的代谢产物容易参与机体的多种生物化学反应，并作为生物反应的辅酶对某些生化反应起促进或干扰作用，因此表现出多种药理作用，如抗癌、抗菌、抗病毒等［2］，笔者拟对这方面的研究现状作一综述。 1 / 10
1 Tan 的药理活性 1.1 天然抗氧化作用： Tan Ⅱ A 是一种新的有效的细胞内脂质过氧化产物与 DNA 相互作用的抑制剂。 它对 DNA 的保护作用很可能是通过消除脂类自由基而阻断脂质过氧化的链式反应，抑制 DNA 加成物的生成，从而减少了后者的细胞毒性［3］。 Tan 能消除心肌线粒体膜脂质过氧化过程中产生的脂类自由基，使线粒体呼吸功能不受影响［4］。 1.2 心血管药理作用 1. 2.1 抗动脉粥样硬化作用： 采用原位杂交技术探讨了Tan Ⅱ A 磺酸钠(简称 DS-201)对血管平滑肌细胞增殖相关基因 c-myc 表达的影响，发现巨噬细胞源性生长因子可明显促进平滑肌细胞 c-myc 高表达，导致平滑肌细胞增殖，而 DS-201 能阻止这种作用，使 c-myc 表达水平下降，抑制平滑肌细胞增殖。 提示 DS-201 可能通过阻止血管平滑肌细胞增殖而起到抗动脉粥样硬化作用［5］。 1.2.2 缩小心肌梗死面积： 利用结扎狗冠状动脉前降支的心肌梗死模型，静注 DS-201，结果心肌梗死范围缩小，疗效非常显著。 冠状动脉内给药后同样显著缩小狗心肌梗死面积，其疗效与潘生丁相当［6］。 1.2.3 降低心肌耗氧量：
有关丹参酮Ⅱa磺酸钠注射液严重不良反应分析患者基本情况：略 不良反应情况：患者因“冠心病、房纤、心衰”4月27日静滴丹参酮时出现寒颤、咳嗽咳痰，呼吸困难，四肢冰冷，汗出。查体：BP 66/33mmHg，双肺可闻及干罗音，气管听诊区明显，心率110次/分，房颤率。考虑药物过敏性休克，立即给予高流量吸氧，地塞米松5mg静推，肾上腺素1mg皮下注射，参附针静注，氨茶碱静脉点滴，异丙嗪肌注，同时给予心电监测，经上述处理后，患者呼吸困难逐渐缓解，无寒颤，症状逐渐好转。 分析：1、由于此不良反应的发生与丹参酮Ⅱa磺酸钠注射液存在时间关联性，丹参酮Ⅱa磺酸钠说明书存在过敏性休克的不良反应，故考虑此不良反应的怀疑药品为丹参酮Ⅱa磺酸钠注射液。 2、丹参酮I I A磺酸钠注射液是采用现代制药技术从丹参中提取的植物单体，经磺化后增强药物的水溶性，使其吸收快，该药可增加冠状动脉血流量，改善缺血区心肌的心前区支循环及局部供血，改善缺氧心肌的代谢紊乱，提高心肌耐缺氧能力，抑制血小板聚集及抗血栓形成，缩小缺血心肌梗死面积，也能增强心肌收缩力。临床上可用于冠心病，心绞痛，心肌梗死，也可用于室性早搏，其不良反应为偶见皮疹，发热等过敏性反应，但引起过敏性休克较少见[1]。 3、引起过敏性休克的原因可能与注射液中含有少量杂质及注射液提取过程中的树脂残存物有关[1] 。 4、措施：建议临床使用此药时应仔细询问患者有无药物过敏史或过敏性体质，首次使用此药时应注意滴注速度不宜过快，并仔细观察患者的反应。以避免丹参酮I I A磺酸钠注射液引发过敏性休克，当出现此不良反应时，首先停药，同时给予对症治疗。 文献：[1]雷殷华.丹参酮I I A磺酸钠注射液致过敏性休克.内蒙古中医药，2008，2（1）：28.
丹参酮的药理作用 丹参酮，用于化脓性和外科感染;用于痤疮;用于宫颈糜烂;用于麻风。下面来介绍丹参酮的药理作用。 丹参酮的药理作用1.抑菌作用体外实验丹参酮对金黄色葡萄球菌的抗菌作用比小檗碱强，对结核杆菌H37RV株(最低抑菌浓度可达 1.5mg/ml以下)对两种毛发癣菌也有抑制作用。 2.抗炎作用大白鼠经灌胃给丹参酮有明显的抗炎症作用。在炎症第一期模型上对组织胺所致毛细血管通透性增高有明显的抑制作用;对蛋清、角叉菜胶和右旋糖酐所致急性关节肿有抑制作用;对渗出性甲醛腹膜炎有抑制作用。在炎症第二期模型上，对明胶所致小白鼠的白细胞游走有明显的抑制作用;对亚急性甲醛性关节肿有明显的抑制作用。对第三期炎症模型，棉球肉芽肿实验无抑制作用(即慢性期无作用)。丹参酮能使大白鼠血中PGF2α和PGE水平降低，可能与丹参酮的抗炎作用机制有关。 3.抗凝血作用丹参酮有抗凝作用。作用较原儿荼醛强。 4.其他作用丹参酮能提高小鼠在低压缺氧下的存活率或延长生存时间。丹参酮有抗雄激素作用，降低皮脂产生，有抗痤疮丙酸杆菌作用，减轻由细菌代谢所加剧的炎症。可用于治疗痤疮。丹参酮对伤寒菌苗致热的家兔有解热作用。小鼠实验表明丹参酮有较温和的、通过卵巢起作用的雌激素活性。
5.体内过程观察丹参酮经十二指肠给药后药物进入肝脏并由胆汁排出的情况，结果表明，大鼠十二指肠给药后一般在1h左右即可测得胆汁中有微量丹参酮排出，其排出高峰在给药后3h左右。不同结构的丹参酮在肝内排泄速度不相同。此外实验中还发现在用氯仿提胆汁的丹参酮后，胆汁的水溶液部分有变性蛋白析出，其含量与不同给药组之间有一定联系。 丹参酮的简介丹参酮亦称总丹参酮。是从中药丹参(唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bunge根)中提取的具有抑菌作用的脂溶性菲醌化合物，从中分得丹参酮I、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮、异隐丹参酮等10余个丹参酮单体，其中隐丹参酮、二氢丹参酮Ⅱ，羟基丹参酮、丹参酸甲酯、丹参酮ⅡB 5个单体具有抗菌作用，尚有抗炎、降温作用。丹参酮ⅡA的磺化产物丹参酮ⅡA磺酸钠能溶于水，经临床试用证明治疗心绞痛效果显著，副作用小，为一治疗冠心病的新药。总丹参酮有抗菌、消炎、活血化瘀、促进伤口愈合等多方面作用，长期服用未见有明显副作用。 丹参的不良反应个别患者在丹参使用过程中，会出现胃痛、食欲减少，口咽干燥，恶心呕吐，与丹参能抑制消化液的分泌有关，宜停药，并可口服胃舒平、普鲁苯辛等药，重者可皮下注射阿托品。个别晚期血吸虫肝脾肿大患者在服用大剂量丹参后会发生上消化道出血，应停用丹参，并给予止血剂、维生素等。丹参可引起过敏反应，表现为全身皮肤瘙痒、皮疹、寻麻疹，有的还伴见胸闷憋气，呼吸困难，甚则恶寒、头晕，恶心呕吐，烦躁不安，随即面色苍白、肢冷汗出、
丹参酮IIA的研究进展 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 作者：李玉萍，顾兵，刘建涛，熊向源，周春丽，吴光杰【摘要】丹参是一种中国传统草药，丹参酮IIA是丹参的主要活性成分之一，是发挥药理活性的基础。该文章就近5年来国内外有关丹参酮IIA的提取、含量测定和生物活性的研究成果进行综述，为全面开发利用丹参提供参考。 【关键词】丹参酮IIA; 提取; 测定; 药理作用 丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎，主产于河北、安徽、江苏、四川等地。其化学成分分为脂溶性和水溶性两部分，前者以丹参酮型的二萜类化合物为主，主要有丹参酮I、丹参酮IIA(tanshinone IIA )、丹参酮IIB、隐丹参酮、羟基丹参酮、丹参羟甲酯、二氢丹参酮I，以及异丹参酮I、异丹参酮II、异隐丹参酮、二氢异丹参酮I;后者主要为酚酸类化合物，包括丹参素(丹参酸甲)，原儿茶醛，丹参酸乙、丹参酸丙、丹酚酸A、丹酚酸C和迷迭香酸等[1]。其中丹参酮IIA是脂溶性成分的代表，集中分布在丹参根的皮部，木质部的分布甚微或没有，通过韧皮部纵向运输，不能横向运输到木质部中去[2,3]。本文就近年来国内外对丹参酮IIA
的研究现状作一综述，为丹参的进一步开发利用提供理论依据。 1 丹参酮IIA的理化性质 丹参酮IIA又称丹参醌II, 丹参醌IIA，为一种樱红色针状结晶，mp 209～210℃;不溶或微溶于水，易溶于二甲基亚砜 (25 mg/ml)、乙醇 (5 mg/ml) 、丙酮、乙醚和苯等有机溶剂;丹参酮IIA乙醇溶液和水溶液随温度升高稳定性下降，其标准品稳定易得[4];丹参酮IIA 含有醌型结构，电子行为活跃，易被氧化还原，可参与机体的多种生化反应而有多种生物活性。其结构式见图1。图1 丹参酮IIA化学结构 2 丹参酮IIA的提取 丹参酮IIA的充分浸出提取是含量准确测定的前提，因此提取方法的研究对于丹参酮IIA的含量测定非常重要，但是有关提取方法的系统研究报道尚不多见。现将主要的提取方法概括如下。 2.1 醇提法由于丹参酮IIA不溶于水，多用乙醇提取，包括乙醇渗滤法和回流法。①渗滤法：黄琳等[5]采用正交实验考察了4因素(乙醇浓度、浸泡时间、提取时间和温度)对丹参酮IIA提取率的影响，提取温度、浸泡时间、提取时间、醇浓度(70%～90%)和乙醇用量对提取率均有影响。使用高浓度(90%)的醇溶剂、加温(80～87℃)、浸泡时间延长(6 h)可相应缩短提取时间(2 h)，可获得丹参酮IIA 4.451 0 mg/g。但因丹参脂溶性成分对热不稳定，醇提后处理工序(贮放、回收乙醇、浓缩、干燥)是丹参酮IIA热降解损失的主要工序，因此加热时间范围内应控制在2～4 h[6]。②回流法：于纯淼等[7]采用
丹参酮的提取及应用进展 摘要:丹参是一种中国传统草药, 丹参酮IIA是丹参的主要活性成分之一,是发挥药理活性的基础。该文章就近5年来有关丹参酮的提取、含量测定和生物活性的研究成果和药理研究现状及其在临床上的应用进行综述，为全面开发利用丹参提供参考。 关键词: 丹参酮IIA；提取及测定；临床应用；药理作用 Abstract：Salvia is a traditional Chinese herbal medicine, Tan IIA is one of the main active ingredient in Salvia, is to play a fundamental pharmacological activity. This article summarize about the extract of Tan、content determination、the research results of biological activities and pharmacological status quo for clinical application related to the nearest five years, To provide a reference for the comprehensive development and utilization of Salvia. Keywords: Tan; extract measurement; clinical application; pharmacologic action 丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrh iza Bge。的干燥根及根茎,主产于河北、安徽、江苏、四川等地。其化学成分分为脂溶性和水溶性两部分,前者以丹参酮型的二萜类化合物为主,主要有丹参酮I、丹参酮IIA ( tan IIA )、丹参酮IIB、隐丹参酮、羟基丹参酮、丹参羟甲酯、二氢丹参酮I,以及异丹参酮I、异丹参酮II、异隐丹参酮、二氢异丹参酮I;后者主要为酚酸类化合物, 包括丹参素 (丹参酸甲 ), 原儿茶醛, 丹参酸乙、丹参酸丙、丹酚酸A、丹酚酸C和迷迭香酸等[ 1 ]。其中丹参酮IIA是脂溶性成分的代表, 集中分布在丹参根的皮部, 木质部的分布甚微或没有, 通过韧皮部纵向运输, 不能横向运输到木质部中去[ 2,]。本文就近年来国内外对丹参酮IIA的研究现状及药理作用以及临床应用作一综述,为丹参的进一步开发利用提供理论依据。 1、丹参酮 IIA 的提取 参酮IIA 的充分浸出提取是含量准确测定的前提,因此提取方法的研究对于丹参酮IIA的含量测定非常重要, 但是有关提取方法的系统研究报道尚不多见。现将主要的提取方法概括如下。 1.1 醇提法： 由于丹参酮IIA不溶于水,多用乙醇提取,包括乙醇渗滤法和回流法。①渗滤法: 黄琳
丹参酮局部注射治疗口腔黏膜下纤维性变的疗效观察 发表时间：2013-08-22T09:49:23.547Z 来源：《世界临床医学》2013年第3期供稿作者：王璇[导读] 同时采用视觉类比量表(visual analogue scale，V AS)对患者治疗前和治疗后的疼痛程度进行评分。王璇 东莞市东华医院 511230 摘要：目的深入研究采用丹参酮局部注射法对口腔黏膜下纤维性变的临床治疗效果。方法随机将2006 年7 月至2010 年6 月在我科就诊的口腔黏膜下纤维性变病例60 例，随机分为 A、 B、 C 三组，并分别进行治疗，所有患者均治疗1 疗程，并在停止治疗后的第3 个月复诊，记录分析诊治结果。结果 A 组患者有治疗效率为95%，明显高于B 组患者（85%）和C 组患者（70%）。结论加入丹参酮治疗口腔黏 膜下纤维性变治疗效果最佳，明显高于加入丹参治疗方式和普通治疗方式，有利于提高口腔黏膜下纤维性变治愈率，减轻患者痛苦，值得临床广为推广。 关键词：丹参酮；局部注射；口腔黏膜下纤维性变 Abstract: objective In-depth study using tanshinone local shots on oral submucous fibrous variable clinical therapeutic effect. Methods Random will be in July2006 to June2010 in my family complaining of oral submucous fibrous variable cases60 cases were randomly divided into A，B， C three groups， and respectively treatment， all patients were treatment1 treatment， and in the end the treatment of after3 months return visit，record analysis make A diagnosis and give treatment results. Results A group of patients for treatment efficiency of 95%， much higher than group B patients (85%) and C group of patients (70%). Conclusions Join tanshinone treatment of oral mucosa next fibrous variable treatment effect best， much higher than join salvia miltiorrhiza treatment and common treatments，which is beneficial to improve the oral submucous fibrous change cure rate and reduce the pain of patients， it is worth clinical widely promotion. Key words：Tanshinone；Local injection；Oral submucous fibrous variable 口腔黏膜下纤维性变（Oral submucous fibrosis， OSF）的发病原因与咀嚼摈榔有着密切的关系，其病理特征为口腔内微血管的病变与胶原堆积。OSF属于慢性进行性疾病，且具有癌变倾向，因此需及时治疗[1-3]。目前医界治疗OSF 的主要方式有两种，手术治疗方式和药物治疗方式，但因手术治疗风险较大，因此，药物治疗方式成为了治疗OSF 的主要治疗途径。临床采用口服或局部注射丹参制剂类药物在治疗OSF 中已取得了一定的治疗效果，但目前为止尚未有丹参酮ⅡA磺酸钠用于治疗OSF 的临床应用研究报道[4]。我科自2006 年7 月-2010 年6 月共收治了60 例OSF患者，其中20 例患者采用了丹参酮ⅡA磺酸钠治疗OSF，取得了令人满意的临床治疗效果，治疗效果现报道如下。 1 资料与方法 1.1 一般资料 采用简单随机化分组法随机将2006年7月至2010年6月在我科就诊病例60 例，男52 例，女8 例；平均年龄30 岁（22-38 岁），平均病程12 月（2-24 月）。随机将60 例OSF患者分为A、B、C 三组，A、B、C 三组患者均为20 例。所有患者临床及病理诊断为OSF；所有患者均存在槟榔咀嚼史，而后在食用刺激性食物时，往往出现口腔疼痛或水疱；所有患者舌、软腭、翼下颌韧带区、双颊等部位的黏膜均可见灰白色板状变化，且所有患者均存在不同程度的张口受限；所有患者均无其他服药史。 1.2 方法 A组患者采用曲安奈德注射液（昆明积大制药厂；规格为1mL： 40mg）2mL与利多卡因（常州康普药业有限公司；规格为5mL：0.1g） 1mL配制成混合药液，同时采用丹参酮ⅡA磺酸钠注射液（上海第一生化药业有限公司；规格为2mL：10mg）2.0mL与利多卡因（同上） 1.0mL配制成另一混合药液，对患者进行局部注射治疗。注射方式为：先后将两支混合药液注入患者病损区黏膜下，用量根据患者损伤面积按照1mL/cm2 注射，如患者病变范围较大，则可采用多点注射方式注射进行注射，1 次/周，10次为一疗程。B 组患者采用曲安奈德注射液（同上）2mL与利多卡因（同上）1mL配制成混合药液，同时采用复方丹参注射液（上海第一生化药业有限公司；规格为2mL：丹参 2g、降香2g）2.0mL与利多卡因（同上）1.0mL配制成另一混合药液，对患者进行局部注射治疗，注射方案同A组患者。C 组患者采用曲安奈德注射液（同上）4mL与利多卡因（同上）2mL配制成混合药液，对患者进行局部注射治疗，注射方案同A组患者。三组患者均治疗1 个疗程，在1 个疗程治疗后停止治疗并在3 个月后进行复诊，观察并记录患者口腔的损害范围、张口度、疼痛程度，以及患者的不良反应情况。 1.3 诊断标准 对患者损害范围、张口度，以及不良反应情况分别计分，并对患者进行综合评价，评价分值为0-3 分，3 分：患者口腔黏膜损害范围>15cm2，张口受限度≥Ⅲ度；2分：患者口腔黏膜损害范围为5-15cm2，张口受限度在Ⅱ度-Ⅲ度之间；1 分：患者口腔黏膜损害范围小于5cm2，张口受限度在Ⅰ度-Ⅱ度之间；0 分：患者口腔黏膜无损害，张口正常，黏膜正常。评定结果分为：显效（综合评价为0 或1）、有效（综合评分出现明显下降）、无效（综合评分不变或增加）三种。同时采用视觉类比量表(visual analogue scale，VAS)对患者治疗前和治疗后的疼痛程度进行评分。 1.4 统计学处理 本文所有数据均采用IBM SPSS 20.0 统计软件进行处理，计量资料采用X2 检验，P<0.05 有统计学意义。 2 结果 A、B、C 三组患者经1 疗程治疗后停止治疗，3 个月后复查结果显示，A组患者有效率为95%，明显高于B 组（85%）合C 组（70%）患者，如表1 所示。 表1 A、B、C 三组患者治疗结果对比表组别例数显效有效无效有效率 A组 20 19 1 1 95% B 组 20 16 5 3 85% C 组 20 9 5 6 70%
312 对照品溶液的制备 另取人参二醇与人参三醇 加无水乙醇分别制成每1m l 含1m g 的混合液。313 展开剂制备 氯仿2乙醚(1 1)。 314 实验方法 取样品溶液和对照品溶液各10Λl ,分别点样于同一硅胶G 薄层板上,用展开剂展开至约15c m ,晾干,喷以硫酸甲醇溶液(1→2),在105o C 烘干约10分钟,置紫外灯(365nm )下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。见图3 。 11颐和春胶囊 21人参二醇、人参三醇 图3 供试品及人参二醇、人参三醇对照品色谱图 315 阴性对照试验 取川牛膝、锁阳、淫羊藿、蛇床 子、沙参、冰片、覆盆子、熟地黄、韭菜子(炒)、附子(制 ) 路路通等药材按处方比例混合研细,取细粉, 按以上样品溶液制备方法制得溶液作为样品液,取此液及上述对照品溶液各10Λl ,分别点样于同一硅胶G 薄层板上,同上实验方法,此样品液未见与对照品溶液相同位置斑点。见图4 。 11未加人参的药材混合粉末 21人参二醇、人参三醇 图4 未加人参药材及人参二醇、人参三醇色谱图 4 讨论 按此方法对3个批号的颐和春胶囊进行有效成分鉴定,结果都呈正反应,显色明显,本方法可作为该药品的鉴别实验。 不同产地丹参药材中丹参酮 A 及丹参素的含量比较 Ξ 严 红,高 扬,郭 伟,程 筠 (天津中医学院第一附属医院,天津 300193) 摘 要 目的:研究不同产地的丹参药材中丹参酮 A 及丹参素的含量。方法:高效液相色谱法。结果:不同产地丹参药材中的水溶性成分丹参素及脂溶性成分丹参酮 A 含量差异很大,两种成分之间无一定关系。结论:建议《中国药典》增加丹参水溶性成分的定量指标,为保证丹参制剂的疗效,应根据制剂的工艺特点,进行相应定量指标检验。 关键词 丹参,丹参酮 A ,丹参素,高效液相色谱 中图分类号:R 927.2 文献标识码:A 文章编号:100625687(2003)0320010203 丹参为唇形科植物S alv ia m iltiorrh iza Bge 干燥根 及根茎,临床用于治疗冠心病、心绞痛、缺血性中风、栓塞、肝脾肿大、化脓性感染等疾病。现代药理学研究表明,丹参的有效成分分为脂溶性的菲醌类衍生物和水溶性的酚酸类成分,前者为抗菌抗炎的主要成分,其中丹参酮 A 还能增加冠脉流量、改善心肌功能、降低血小板聚集而抗血栓形成。后者以丹参素、原儿茶醛为代表,具有抗氧化、抗凝抗血栓、抗心肌缺血及调血脂作用,对多种实验性心、肝、脾的损伤均具有保护作用,被认为是丹参治疗冠心病、栓塞、中风的主要成分,因此, 二者均为评价丹参质量与疗效的重要指标。丹参酮 A 已被作为评价丹参质量的指标成分,收载于《中国药典》2000版一部丹参的含量测定项下。但在临床上广泛使用的丹参注射液、复方丹参注射液、丹参口服液、复方丹参口服液及丹参粉针剂等,在制备工艺中丹参的提取方法大多沿用传统的水提醇沉法。有实验表明,采用水提法,主要提出丹参的水溶性成分,脂溶性的有效成分丹参酮 A 仅提出2.6%[1],对于丹参药材的质控标准,如仍采用测定丹参酮 A 的含量是否有意义,为此,研究测定了几种不同产地丹参药材中丹参酮 A 01天津药学 T ianjin Phar m acy 2003年6月 第15卷第3期 Ξ
高效液相色谱法对丹参中丹参酮ⅡA ，丹参酮Ⅰ和 隐丹参酮的同时测定 摘要 本实验采用高效液相色谱法对中药材丹参中丹参酮ⅡA ，丹参酮Ⅰ和隐丹参酮三种成分采用外标定量法进行同时测定，根据其色谱图相应保留时间的谱峰与标准曲线进行对比，可知其三种成分在该样品中的含量，通过测定可知样品中丹参酮ⅡA ，丹参酮Ⅰ和隐丹参酮三种成分的百分含量分别为0.1011%、0.0259%、0.0155%。 关键词 HPLC 丹参 参酮ⅡA 丹参酮Ⅰ 隐丹参酮 外标法 1、引言 丹参酮ⅡA 、丹参酮Ⅰ和隐丹参酮是从唇形科鼠尾草属植物丹参的根部提取的脂溶性二萜类物质。 其分子结构、分子式、分子量如下： O H 3C C H 3 C H 3O O O O O O O O C 18H 12O 3 294.33 C 18H 12O 3 276.29 C 19H 20O 3 296.36 丹参酮ⅡA 丹参酮Ⅰ 隐丹参酮 本实验将采用高效液相色谱法对丹参中的三种脂溶性提取物（丹参酮ⅡA 、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮）进行同时测定。 高效液相色谱分析包括两种洗脱方式：等度洗脱和梯度洗脱。梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗提，即在分离过程中使两种或者两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变他们之间的比例，从而使流动相的强度、极性、pH 值或离子强度相应地变化，达到提高分离效果，缩短分离时间的目的。梯度洗脱可以使一个复杂样品中性质差异较大的组分，都能在各自适宜的分离条件（容量因子k 适宜）
下实现分离。 色谱定量分析的依据是各分析组分的质量或者浓度与检测器的响应信号(色谱图上表现为峰面积A或峰高h)成正比，即m=f’错误！未找到引用源。A(f’称为定量校正因子)。色谱法中常用的定量分析方法有归一化法，内标法和外标法。外标法是应用待测组分的纯物质来制作标准曲线，即配置不同质量分数（浓度）的标准溶液，取固定量标准溶液进样分析，从所得的色谱图上测出响应信号（峰高或峰面积），然后绘制峰高或峰面积对含量(质量或浓度)的标准曲线。 本实验采用反相化学键合相色谱法，以十八烷基硅烷键合相为固定相，0.1%磷酸溶液-甲醇为流动相分离丹参中脂溶性提取物，并通过外标法对三种待测物质进行定量分析。当组分在固定相和流动相间进行分配时，极性大的物质在流动相中的溶解度较大，而极性小的物质在流动相中的溶解度较小，组分的流出顺序是极性大的化合物在前，极性小的化合物在后，最终实现各物质的分离。 2、实验部分 2.1实验仪器与试剂 日本岛津LC-20A高效液相色谱仪（配备SPD-20A紫外检测器、SIL-20A自动进样器、LC-20AB输液泵、CTO-10AS柱温箱、脱气机）、色谱柱：Diamonsil C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）、电子天平、超声波清洗仪、溶剂过滤器、微孔滤膜（0.45μm，无机相和有机相）、50 ml具塞三角瓶、25.00 mL移液管、定量滤纸、漏斗、漏斗架、一次性针筒过滤器（脂溶性）、微量注射器。 丹参酮ⅡA标准品，丹参酮Ⅰ标准品，隐丹参酮标准品，甲醇（色谱纯），乙醇（分析纯），磷酸（分析纯），超纯水，丹参粉末。 2.2实验方法 2.2.1前处理精密称取0.2010g干燥的样品粉末，置于具塞三角瓶中，准确加入25.00mL 80%乙醇，称重，超声提取25min，补重，摇匀过滤，得到待测液。 2.2.2色谱条件1．色谱柱：C18柱（150mm×4.6mm，5 μm） 2．流动相：泵A：0.1% 磷酸水溶液；泵B：甲醇 泵B浓度：0~40 min，70%~75%；40~45 min，75%
皮肤病与性病 2018年10月第40卷第5期 J Dermatology and Venereology ,Oct 2018,V ol. 40,No ,5 696·临床研究· 异维A 酸胶囊联合丹参酮治疗中重度痤疮的临床疗效观察赵卫华 （惠州市皮肤病防治研究所皮肤性病科，广东 惠州 516001） 【摘要】 目的 观察异维A 酸胶囊（泰尔丝）联合丹参酮治疗中重度痤疮的临床疗效。方法 选取2015年3月～2017年6月我 院76例中重度痤疮患者，随机数字表法分组，各38例。对照组予以异维A 酸胶囊，实验组在对照组基础上予以丹参酮，治疗3个疗程。对比两组治疗效果、炎性丘疹、粉刺、脓疱等症状改善情况、不良反应。结果 实验组治疗有效率为94.74%（36/38），高于对照组71.05%（27/38），差异有统计学意义（P ＜0.05）；治疗后实验组粉刺、脓疱、炎性丘疹分值低于对照组，差异有统计学意义（P ＜0.05）；实验组不良反应发生率（13.15%∶26.31%）与对照组相比，差异无统计学意义（P ＞0.05）。结论 异维A 酸胶囊联合丹参酮治疗中重度痤疮患者可改善临床症状，提高治疗效果，且安全性较高。【关键词】 中重度痤疮；异维A 酸胶囊；丹参酮 中图分类号：R751.05；R758.73+ 3 文献标志码：B doi ：10.3969/j.issn.1002-1310.2018.05040 【收稿日期】2018-04-25 中重度痤疮以青少年居多，进入青春期后机体内雄激素水平快速上升，促使皮脂生成，加以毛囊皮脂腺导管角化可阻塞导管，导致皮脂排出障碍，从而形 成粉刺[1] 。若未及时处理， 可趋化炎症细胞，加重炎症反应，影响患者正常生活与工作。异维A 酸胶囊作为临床常用药物，可有效抑制皮脂腺活性、减轻炎症反应，但由于痤疮致病因素复杂，病程较长，单一治疗疗效欠佳。丹参酮提取于中药丹参，具有消炎、抗菌、促使伤口愈合等作用，长期使用无明显副作用，适用于治疗宫颈糜烂、痤疮、扁桃体炎、麻风等疾病[2] 。本研究联合丹参酮与异维A 酸胶囊治疗， 观察其在中重度痤疮中应用效果，报告如下。1 资料与方法 1.1 临床资料 选取2015年3月～2017年6月我 院76例中重度痤疮患者，按随机数字表法分组，各38例。对照组男21例，女17例，年龄（16～32）岁，平均年龄（24.11±4.18）岁，病程（1～8）年，平均病程（4.52±1.33）年，受教育程度：10例初中及以下，15例高中，13例大专及以上；实验组男23例，女15例，年龄（17～33）岁，平均年龄（23.67±4.33）岁，病程（1～10）年，平均病程（5.17±1.86）年，受教育程度：12例初中及以下，14例高中，12例大专及以上。对比两组一般资料，差异无统计学意义（P ＞0.05），可比性良好。本研究征得医院伦理委员会审核通过。 1.2 方法 对照组予以异维A 酸胶囊（上海信谊延安药业有限公司，国药准字H10930210），10mg/次，3次/d ，口服；实验组在对照组基础上予以 障，对中枢镇静作用较轻。地氯雷他定为新型H 1受 体拮抗剂，其有较高选择性、长效性和高效性。依匹 斯汀也同样属于新型H 1受体拮抗剂， 对变态反应具有较强的抵抗作用。采用口服方式给药，可提高吸收速度还可降低不良反应发生率，直接减少风团的出现。另外地氯雷他定和依匹斯汀均有较好的安全性，用药过程中不良反应发生率较低，与其他药物相互作用较少，同时减少患者心脏毒性。 本次研究对照组患者采用依匹斯汀治疗，观察组患者采用地氯雷他定治疗，两组临床治疗总有效率和不良反应率均无显著性差异。说明依匹斯汀与地氯雷他定治疗慢性荨麻疹的疗效相当，依匹斯汀和氯雷他定均不经过肝脏P450酶系统代谢，安全性均好， 这与相关研究结果[7] 基本相符合。 临床医生在开具处方时不但应遵循有效、安全的原则，还应遵循治疗经济的原则。成本效果分析是药物经济学评价治疗药物成本的重要方法和手段，其结果受到临床医生和患者所认可。从药物经济学角度分析，应用地氯雷他定的观察组患者成本效率比更低，提示地氯雷他定与依匹斯汀比较在取得相同治疗效果上费用更低，因此应用地氯雷他定的观察组患者 能节约治疗成本，能合理利用医疗资源，是更好的治 疗方案。本研究样本量有限，可能对研究结果造成偏差，将进一步增大样本量进行研究，以为临床提供参考价值。 参考文献： ［1］ 林光越.地氯雷他定与依匹斯汀治疗慢性荨麻疹的成本-效果分 析[J].中国当代医药,2013,20(13):149-150. ［2］ 薛姣,赵兴虎.地氯雷他定与依匹斯汀对慢性荨麻疹的治疗成本 效果[J].中西医结合心血管病杂志,2018,6(1):173-174. ［3］ 胡伟,马慧群,闫小宁,等.左西替利嗪联合地氯雷他定治疗儿童 慢性荨麻疹多中心临床观察[J].中国皮肤性病学杂志,2015,29(5): 481-482. ［4］ 戴安琪.温针灸治疗血虚风燥型慢性荨麻疹的临床研究[D].广 州:广州中医药大学,2014. ［5］ 刘佳,农祥.凝血机制参与慢性荨麻疹发病的研究进展[J].国际皮 肤性病学杂志,2016,42(1):33-36. ［6］ 林中方,何斌,熊超.枸地氯雷他定片联合匹多莫德分散片治 疗慢性荨麻疹的疗效及对T 细胞亚群的影响[J].实用医学杂志,2014,30(15):2490-2491. ［7］ 叶艳芬.地氯雷他定与依匹斯汀对慢性荨麻疹的治疗成本及效果 比较[J].包头医学院学报,2017,33(4):42-43.
不同产地丹参主要有效成分的含量比较研究进展 【摘要】目的：比较分析了不同产地丹参中主要有 效成分的含量，以更为清晰而全面的了解丹参药效成分，为其进一步开发利用提供文献依据和研究思路。方法：通过近十几年来国内外相关文献对不同产地丹参主要有效成分含 量的报道，进行整理、归纳、分析与比较。结果：丹参的主要活性成分为以酚酸类为主的水溶性成分和以二萜醌类化 合物为主的脂溶性成分。采用不同的检测方法，对不同产地的丹参药材品种主要有效成分进行检测、分析。结论：不同产地丹参药材品种中酚酸类成分和二萜醌类化合物的含量 存在一定差异，为丹参药材采购及临床选用时提供参考依据。 【关键词】丹参不同产地成分含量 丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge 的干燥根和根茎，味苦，微寒，具有活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈之功效，用于胸痹心痛，脘腹胁痛，?Y瘕积聚，热痹疼痛，心烦不眠，月经不调，痛经经闭，疮疡肿痛等症状[1]。丹参作为一传统中药在我国沿用己久，始载于《神农本草经》，被列为上品。《神农本草经》有记载“主心腹邪气，肠鸣幽幽如走水，寒热积聚，破症除瘾，止烦满，益气”， 在其后的历代本草中均有记载。丹参的有效成分主要包括水
溶性成分[2-3]，以酚酸类成分为主，如原儿茶酸（protocatechuic acid，PA ）、原儿茶醛（protocatechualdehyde，PD）、丹参素（danshensu，DSS）、咖啡酸（caffeic acid，CA）、紫草酸（lithospermic acid，LA）、迷迭香酸（rosmarinic acid，RA）、丹酚酸A（salvianolic acid A ，SaA ）、丹酚酸B（salvianolic acid B ，SaB）和丹酚酸C （salvianolic acid C，SaC ）等，和脂溶性成分，以丹参酮类成分为主，如隐丹参酮（cryptotanshinone，cTN ）、二氢丹参酮I（dihydrotanshinone I ，dTNI）、丹参酮I（tanshinone I，TNI）、丹参酮II a （tanshinoneII a，TNII a）等。2010版中国药典规定丹参商品药材，丹酚酸B含量不低于3. 0%，丹参酮II a含量不低于0.2%。 由于受产地、气候和生态环境等因素的影响，不同丹参药材所含主要成分差异较大。在参考2010版中国药典和相关文献的基础上，本文对河北、山东、安庆、甘肃、江苏等地的丹参主要有效成分的含量进行综述，为进一步丹参药材的质量控制提供理论依据。现结果如下报道。 1 丹参水溶性成分 1.1 丹参酸B 丹参水溶性成分以丹参酸B为主，具有广泛地药理活性，具有抗肝损伤、肝纤维化作用；能防治动脉粥样硬化；对心脏、脑有保护作用；同时还具有一定的抗肿瘤作用[3]。对不
『药物研究』 丹参酮ⅡA 的药理研对近年来丹参酮ⅡA 药理作用研究最新进展进行总结，包括抗肿瘤，对心血管的药理作用，抗肝纤维化、护肝和抗肝癌作用，性激素样活性，抗炎作用等，其多方面药理作用，值得进一步研究开发。 关键词丹参酮ⅡA ；药理作用；进展 丹参酮(t anshi none Tan)是中药丹参(s al i va m i |t i or r hi zabge)根的脂溶性成分，均含有邻醌或对醌结构，总称丹参酮类化合物。包括丹参酮I 、丹参酮ⅡA 、丹参酮ⅡB 、隐丹参酮、二氢丹参酮I 、异丹参酮I 、异丹参酮Ⅱ、羟基丹参酮、丹参酸甲酯、隐异丹参酮、丹参醌A 、B 、C 等。其中丹参酮ⅡA (T a ns hi none 11 A )。对心脑血管疾病、肿瘤、白血 病等具有潜在的治疗作用，表现出多种生物活性。现就其近年来药理学研究进展进行综述。 1抗肿瘤 研究表明。肿瘤的发生不仅与肿瘤细胞增殖加快有关，而且与肿瘤细胞死亡受抑制密切相关。诱导肿瘤细胞凋亡是一条有效的肿瘤治疗途径，比杀伤肿瘤细胞的治疗有明显的优越性，寻求高效低毒的肿瘤细胞凋亡诱导剂已成为目前肿瘤治疗的研究热点。 …1 究! 文／苏玲刘启德’ 沈隽【，】等，研究发现丹参酮ⅡA 对H eL a 细胞(人子宫颈腺癌传代细胞系)增殖的抑制作用呈剂量依赖性。它能促使H e L a 细胞发生凋亡，用药48h 后B c l -2基因m R N A 的表达水平明显降低，而bax 基因的表达贝U 无明显变化。 周晓_【zJ 等，实验采用不同浓度的丹参酮ⅡA S 外干预SG C 一7901胃腺癌细胞，发现丹参酮ⅡA 对体外培养的SG C 一7901人胃腺癌细胞的生长有明显的抑制作用，并呈剂量依赖性。丹参酮ⅡA 作用后胃腺癌细胞表现为凋亡特征性的形态改变，可时间依赖性地 诱导肿瘤细胞凋亡。其可能的机制为丹参酮ⅡA 可将细胞阻滞于G 0／G 1期，使其不能进入S 期，从而抑制D N A 合成和细胞增殖。 祝绚【3】等，研究云芝、丹参有效组分单体以及复方对E A C 荷瘤小鼠的抗肿瘤和免疫调节作用，云芝糖肽、丹参酮ⅡA 及其复方药物通过降I "[王C D K 4表达。 V o l 3．No ．3，M a rc h 2009
RP-HPLC测定制萎扶胃丸中隐丹参酮和丹参酮ⅡA含量 目的采用反相高效液相色谱法测定制萎扶胃丸中隐丹参酮和丹参酮ⅡA 的含量。方法采用十八烷基键合硅胶柱分离隐丹参酮和丹参酮ⅡA,以乙腈-0.2%磷酸(60∶40)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长262 nm。结果隐丹参酮和丹参酮ⅡA分别在0.081 4～0.407 2 µg(r＝0.9997)、0.163 6～0.818 µg(r＝0.999 5)范围内呈线性关系,平均回收率分别为99.70%(RSD＝1.37%)、99.22%(RSD＝0.94%)。结论本法简便、快速,可用于该产品的质量控制。 Abstract：Objective To establish the method for determining the content of cryptotanshinone and tanshinone ⅡA in Zhiwei Fuwei Wan. Methods The determination of cryptotanshinone and tanshinone ⅡA was performed on Symmetry C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.2% phosphate (60∶40) at flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 262 nm. Results The linear ranges of cryptotanshinone and tanshinone ⅡA were 0.081 4－0.407 2 µg (r＝0.999 7) and 0.163 6－0.81 8 µg (r＝0.999 5) respectively, the average recoveries were 99.70% (RSD＝1.37%) and 99.22% (RSD＝0.94%) respectively. Conclusion The method is simple and rapid for the quality control of the product. Key words：Zhiwei Fuwei Wan；cryptotanshinone；Tanshinone ⅡA；RP-HPLC 制萎扶胃丸是本院院内制剂,由乌梅、山楂、白芍、麦芽、神曲、丹参等14味中药组成,具有健胃、滋补气阴、消导除湿、活络定痛之功效,主用于慢性萎缩性胃炎、慢性浅表性胃炎及多种消化不良、食欲减退等病症的治疗。本试验采用反相高效通讯作者：焦正花,E-mail：939410984@https://www.doczj.com/doc/3012965886.html,液相色谱法(RP-HPLC)[1]对本品中隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量测定进行研究,以控制制萎扶胃丸的质量。１仪器与试药 美国Waters 1525高效液相色谱仪,Waters 2487紫外检测器,Bree色谱工作站；天津HS6150型超声波清洗器,METTLER AE240电子天平。含量。结果见表3。表3 克疣纳米乳中冰片和薄荷脑含量测定结果(mg/mL,n＝3)批号冰片薄荷脑20111220 5.626 3 5.725 320111223 5.622 2 5.648 420111225 5.589 7 5.681 23 讨论 薄荷脑、冰片是克疣纳米乳的有效组份,故选为评价克疣纳米乳质量的检测指标。结果表明,本试验采取内标法测定薄荷脑、冰片的含量,方法简单、稳定、专属性强。 本试验制备的克疣纳米乳为O/W型,处方中的脂溶性成分为内相,在定性鉴别、含量测定时应先破乳。本试验选用了盐酸法、氯化钠法、无水硫酸钠法等常用的破乳方法,最终选用无水硫酸钠法破乳,并对无水硫酸钠用量及破乳温度进行
高效液相色谱测定丹参酮ⅡA含量 【原理】利用各组分在两相中的分配系数的不同而获得分离。 反相色谱柱；棕色瓶（25ml，【仪器与试剂】1.仪器：液相色谱仪；微量注射器；C 18 50ml）；吸量管（2ml）；超神提取器。 2.试剂：甲醇（色谱纯）；蒸馏水。 3.试药：丹参酮ⅡA对照品，单身药材。 【实验内容】 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（73：27）为流动相；检测波长为270 nm，理论塔板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2000. 对照品溶液的制备取丹参酮ⅡA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含16.25ug的溶液，即得。 供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称定，置具塞棕色瓶中，精密加入甲醇100 ml，密塞，称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，置棕色瓶中，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。 【实验数据及处理】
运用外标法定量分析，分别精密量取一定量的对照品和试样，分别进样相同体积的对照品溶液和试样溶液，在完全相同的色谱条件下进行色谱分析，测的峰面积，用下式可以计算出供试品的浓度。 C供/C对=A供/A对 => C供=（A供/A对）*C对 20片总重量：0.6025g C对=16.25μg/ml A供=2999.47（mv/sec） A对=1088.09（mv/sec）
C供=（A供/A对）*C对 =（2999.47/1088.09）*16.25 =44.80μg/ml W（%）=（M丹参酮ⅡA/M药材）×100% =（44.80×10-6g/0.6025g）×100%=0.744% 20片复方丹参片中含丹参酮ⅡA量：4.48mg。 每片含丹参酮ⅡA量：0.224mg。