Full Terms & Conditions of access and use can be found at
https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,/action/journalInformation?journalCode=kmab20
Download by: [University of California, San Diego]
Date:
30 May 2016, At: 00:45
mAbs
ISSN: 1942-0862 (Print) 1942-0870 (Online) Journal homepage: https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,/loi/kmab20
The therapeutic monoclonal antibody market
Dawn M Ecker, Susan Dana Jones & Howard L Levine
To cite this article: Dawn M Ecker, Susan Dana Jones & Howard L Levine (2015) The therapeutic monoclonal antibody market, mAbs, 7:1, 9-14, DOI: 10.4161/19420862.2015.989042To link to this article:
https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,/10.4161/19420862.2015.989042
Accepted author version posted online: 20Dec 2014.
Published online: 20 Dec 2014.
Submit your article to this journal
Article views: 4415
View related articles
View Crossmark data
Citing articles: 51 View citing articles
The therapeutic monoclonal antibody market
Dawn M Ecker,Susan Dana Jones,and Howard L Levine*
BioProcess Technology Consultants,Inc.;Woburn,MA USA
Introduction
The commercial development of therapeutic monoclonal anti-bodies commenced in the early 1980s,and by 1986the ?rst ther-apeutic monoclonal antibody,Orthoclone OKT3,was approved for prevention of kidney transplant rejection.Since the approval of OKT3,therapeutic monoclonal antibodies and antibody-related products such as Fc-fusion proteins,antibody fragments,and antibody-drug conjugates (collectively referred to hereafter as monoclonal antibody products)have grown to become the dominant product class within the biopharmaceutical market.Monoclonal antibody products today are approved for the treat-ment of a variety of diseases,ranging from those that treat patient populations of a few thousand or less for such orphan indications as paroxysmal nocturnal hemoglobinuria or the cryopyrin-associated periodic syndromes to those treating hundreds of thousands of patients for some cancers and multiple sclerosis or even millions of patients for diseases such as asthma and rheuma-toid arthritis.
Growth of the Monoclonal Antibody Market
Following the approval of the ?rst monoclonal antibody prod-uct in 1986,sales growth and approval of additional products was slow until the late 1990s when the ?rst chimeric monoclonal antibodies were approved.With the approval of these products,followed by the approval of humanized and then fully human monoclonal antibodies,the rate of product approvals and sales of monoclonal antibody products has increased dramatically so that
in 2013,global sales revenue for all monoclonal antibody prod-ucts was nearly $75billion,1representing approximately half of the total sales of all biopharmaceutical products.The continued growth in sales of the currently approved monoclonal antibody products,along with the over 300monoclonal antibody product candidates currently in development,many for multiple indica-tions,1,2will result in continued growth in sales of monoclonal antibody products in the coming years and will continue to drive the overall sales of all biopharmaceutical products.
As shown in Figure 1,the number of monoclonal antibody products approved for commercial sale in the US and Europe has grown steadily,with three to ?ve new products approved per year for the last several years.While a total of ?fty-eight monoclonal antibody products have been approved in Europe and/or the US since 1986,eleven of these products have been withdrawn for various reasons,leaving forty-four approved monoclonal anti-body products currently on the market (Table 1).Of the forty-seven monoclonal antibody products approved and marketed in the United States and Europe as of November 10,2014,1,3,4three are produced in E.coli while all of the other products are produced in mammalian cells.Of the products produced in mammalian cell culture,thirty-one are full-length naked mono-clonal antibodies;one is a bispeci?c antibody,two are antibody-drug conjugates,one is a radio-labelled antibody conjugate,one is an antigen-binding fragment (Fab),and eight are Fc ?fusion proteins containing the antibody constant region fused to another non-antibody-related protein domain.Two of the three products produced in E.coli are Fabs while the third is an Fc-fusion protein.Of the full length monoclonal antibodies,we con-sider Prolia and Xgeva as two separate products even though they are manufactured from the same biologically active substance.This decision is based on the fact that Prolia and Xgeva are pre-sented in different formulations and container/closure systems,and separate Biological License Applications (not Supplemental Applications)were ?led in the US for each.The list of forty-seven approved monoclonal antibody products also includes the ?rst biosimilar monoclonal antibodies approved in Europe,In?ectra and Remsima.The bulk monoclonal antibody used to produce these biosimilars is manufactured by a single supplier (Celltrion),however,we consider them as separate products since the ?nal drug product for each is manufactured by a separate entity and two separate manufacturers are responsible for ?nal batch release of the products.Furthermore,separate European Marketing Authorization Applications were submitted for each product.Based on a review of historical success and turnover rates (i.e.,the length of time required for a product to move from one stage of development to the next)of biopharmaceutical product devel-opment candidates,?26%of the monoclonal antibody
products
https://www.doczj.com/doc/2415045401.html, 9
mAbs
mAbs 7:1,9--14;January/February 2015;?2015BioProcess Technology Consultants,Inc.
REVIEW
D o w n l o a d e d b y [U n i v e r s i t y o f C a l i f o r n i a , S a n D i e g o ] a t 00:45 30 M a y 2016
entering Phase 2human clinical trials in recent years will ulti-mately achieve market approval with an average time from the start of Phase 2clinical trials to approval of ?seven years.5-7Given the large number of monoclonal antibody candidates cur-rently in development,we expect that the number of products approved each year for the coming years will be approximately the same or more than it has been for the last several years.In fact,as of November 10,six monoclonal antibody products were granted ?rst approvals in 2014,with approval decisions for at least two additional products likely to be announced by the end of this year.Based on an approval rate of approximately four monoclonal antibody products per year,we anticipate that there will be 70or more monoclonal antibody products on the market by 2020.
Along with a higher approval rate than other biopharmaceuti-cal products,global sales of monoclonal antibody products have grown faster than these other products for the past ?ve years.Figure 2shows the breakdown of sales for monoclonal antibody products based on the product type (e.g.,full length antibody,antibody conjugate,antibody fragment,etc.)and production sys-tem (e.g.,mammalian cell culture,microbial fermentation).As seen from these data,sales of all monoclonal antibody products,regardless of the production system,have grown from ?$39bil-lion in 2008to almost $75billion in 2013,a 90%increase.By comparison,sales of other recombinant protein therapeutics have only increased ?26%in the same time period.
Corresponding to the increasing sales of monoclonal antibody products,there has been an increase in the total quantities of these products produced annually to meet the market demand.As shown in Figure 2,nearly 10metric tons of monoclonal anti-body products were produced in 2013compared to ?8.6metric
tons of all other recombinant protein products.The demand for monoclonal antibody products has resulted in a signi?cant amount of global manufacturing capacity devoted to their pro-duction as well as to signi?cant improvements in methods and approaches to monoclonal antibody manufacturing process design and optimization.8-12
The forty-seven monoclonal antibody products on the market in the US and Europe as of November 10,2014are listed in Table 1.In 2013,eighteen of these monoclonal antibody prod-ucts (Humira,Remicade,Enbrel,Rituxan,Avastin,Herceptin,Lucentis,Erbitux,Synagis,Eylea,Soliris,Tysabri,Stelara,Xolair,Orencia,Simponi,Actemra,and Xgeva)achieved annual sales of over $1billion,while six of these products (Humira,Remicade,Enbrel,Rituxan,Avastin,Herceptin)had sales of greater than $6billion.Humira,recorded sales of nearly $11billion,the high-est sales ?gure ever recorded for a biopharmaceutical product.To further highlight the growth in sales of monoclonal anti-body products during the last ten years,the sales growth pro?les of the top six selling monoclonal antibody products (Humira,Remicade,Enbrel,Rituxan,Avastin,Herceptin)are compared to those of the two top-selling,recombinant protein products pro-duced in mammalian cell culture (the cytokines Avonex and Rebif)in Figure 3.The average compound annual growth rate for these six monoclonal antibody products over this period is 20%while that of the two mature recombinant protein products was essentially ?at.
Based on a review of historical sales data,company annual reports,and sales projection data collected by BioProcess Tech-nology Consultants in our proprietary bioTRAK òdatabase,we forecast that the monoclonal antibody market will continue to grow at a CAGR of 8%or more for the next several years.At this growth rate,sales of currently approved monoclonal antibodies plus sales from new products approved in the coming years will drive the world-wide sales of monoclonal antibody products to ?$94billion by 2017and nearly $125billion by 2020.Our pro-jections are consistent with those of others,such as a recent report from BCC Research that predicts the market for monoclonal antibody products will be nearly $90billion by 2017.13
Factors Contributing to Growth of the Monoclonal
Antibody Market
The continued interest in antibody product development is partially driven by the rapid advancement of our understanding of disease at a molecular level.Although failing to meet some observers’initial high expectations,genomics,proteomics and other systems biology tools continue,in fact,to provide impor-tant new targets for modulating disease.14Monoclonal antibody products often provide the most rapid route to a clinical proof-of-concept for activating,inhibiting,or blocking these new tar-gets.Since the production of most monoclonal antibody prod-ucts is easily amenable to ef?cient platform-based approaches and antibodies are generally well-tolerated and highly speci?c,the risk of unexpected safety issues in human clinical trials of monoclonal antibody products is lower than with many
other
Figure 1.Annual approvals of monoclonal antibody products.3,4The number of monoclonal antibody products ?rst approved for commercial sale in the US or Europe each year since 1982is shown.The totals include all monoclonal antibody and antibody-related products.Prod-ucts approved but subsequently removed from the market are denoted in blue;products currently marketed are denoted in green.2014total as of November 10,2014.
10Volume 7Issue 1
mAbs D o w n l o a d e d b y [U n i v e r s i t y o f C a l i f o r n i a , S a n D i e g o ] a t 00:45 30 M a y 2016
T a b l e 1.M a r k e t e d t h e r a p e u t i c m o n o c l o n a l a n t i b o d y p r o d u c t s
B r a n d n a m e (I N N )
O r i g i n a l B L A /M A A A p p l i c a n t C o m p a n y R e p o r t i n g U S S a l e s C o m p a n y R e p o r t i n g E U S a l e s Y e a r o f F i r s t A p p r o v a l 2013G l o b a l S a l e s ($M )a
A b t h r a x (r a x i b a c u m a b )H u m a n G e n o m e S c i e n c e s G l a x o S m i t h K l i n e N /A b
201223A c t e m r a (t o c i l i z u m a b )R o c h e R o c h e R o c h e 20091,119A d c e t r i s c (b r e n t u x i m a b v e d o t i n )S e a t t l e G e n e t i c s S e a t t l e G e n e t i c s T a k e d a P h a r m a c e u t i c a l C o .2011253A l p r o l I X d (F a c t o r I X F c f u s i o n p r o t e i n )B i o g e n I d e c B i o g e n I d e c N /A 2014N o M e
A r c a l y s t f (r i l o n a c e p t )R e g e n e r o n P h a r m a c e u t i c a l s R e g e n e r o n P h a r m a c e u t i c a l s N /A 200817A r z e r r a (o f a t u m u m a b )G l a x o S m i t h K l i n e G l a x o S m i t h K l i n e G l a x o S m i t h K l i n e 2009117A v a s t i n (b e v a c i z u m a b )G e n e n t e c h R o c h e R o c h e 20046,748
B e n l y s t a (b e l i m u m a b )H u m a n G e n o m e S c i e n c e s G l a x o S m i t h K l i n e G l a x o S m i t h K l i n e 2011228
C i m z i a g (c e r t o l i z u m a b p e g o l )U C B U C B U C B 2008789C y r a m z a (r a m u c i r u m a b )E l i L i l l y a n d C o .E l i L i l l y a n d C o .N /A 2014N o M e
E l o c t a t e h (
F a c t o r V I I I F c f u s i o n p r o t e i n )B i o g e n I d e c B i o g e n I d e c N /A 2014N o M e
E n b r e l i (e t a n e r c e p t )I m m u n e x A m g e n P ?z e r 19988,325E n t y v i o (v e d o l i z u m a b )T a k e d a P h a r m a c e u t i c a l s U .S .A .,I n c T a k e d a P h a r m a c e u t i c a l C o .T a k e d a P h a r m a c e u t i c a l C o .2014N o M e
E r b i t u x (c e t u x i m a b )I m C l o n e S y s t e m s B r i s t o l -M y e r s S q u i b b M e r c k K G a A 20041,926E y l e a j (a ?i b e r c e p t )R e g e n e r o n P h a r m a c e u t i c a l s R e g e n e r o n P h a r m a c e u t i c a l s B a y e r H e a l t h c a r e P h a r m a c e u t i c a l s 20111,851G a z y v a (o b i n u t u z u m a b )G e n e n t e c h R o c h e R o c h e 20133H e r c e p t i n (t r a s t u z u m a b )G e n e n t e c h R o c h e R o c h e 19986,559H u m i r a (a d a l i m u m a b )A b b o t t L a b o r a t o r i e s A b b V i e A b b V i e 200210,659I l a r i s (c a n a k i n u m a b )N o v a r t i s P h a r m a c e u t i c a l s N o v a r t i s P h a r m a c e u t i c a l s N o v a r t i s P h a r m a c e u t i c a l s 2009119I n ?e c t r a k l (i n ?i x i m a b [b i o s i m i l a r ])H o s p i r a N /A H o s p i r a 2013<1m
K a d c y l a n (a d o -t r a s t u z u m a b e m t a n s i n e )G e n e n t e c h R o c h e R o c h e 2013252K e y t r u d a (p e m b r o l i z u m a b )M e r c k &C o .M e r c k &C o .N /A 2014N o M e
L e m t r a d a (a l e m t u z u m a b )G e n z y m e T h e r a p e u t i c s N /A S a n o ?20133L u c e n t i s o (r a n i b i z u m a b )G e n e n t e c h R o c h e N o v a r t i s P h a r m a c e u t i c a l s 20064,205N p l a t e p (r o m i p l o s t i m )A m g e n A m g e n A m g e n 2008427N u l o j i x q (b e l a t a c e p t )B r i s t o l -M y e r s S q u i b b B r i s t o l -M y e r s S q u i b b B r i s t o l -M y e r s S q u i b b 201126O r e n c i a r (a b a t a c e p t )B r i s t o l -M y e r s S q u i b b B r i s t o l -M y e r s S q u i b b B r i s t o l -M y e r s S q u i b b 20051,444P e r j e t a (p e r t u z u m a b )G e n e n t e c h R o c h e R o c h e 2012352P r o l i a s (d e n o s u m a b )A m g e n A m g e n G l a x o S m i t h K l i n e 2011824R e m i c a d e (i n ?i x i m a b )C e n t o c o r J o h n s o n &J o h n s o n M e r c k &C o .19988,944R e m o v a b t (c a t u m a x o m a b )F r e s e n i u s B i o t e c h N /A N e o P h a r m G r o u p 20095R e m s i m a k l (i n ?i x i m a b [b i o s i m i l a r ])C e l l t r i o n N /A C e l l t r i o n 2013<1m
R e o P r o u (a b c i x i m a b )C e n t o c o r L i l l y N /A 1994127R i t u x a n (r i t u x i m a b )G e n e n t e c h R o c h e R o c h e 19977,500S i m p o n i /S i m p o n i A r i a (g o l i m u m a b )C e n t o c o r O r t h o B i o t e c h J o h n s o n &J o h n s o n M e r c k &C o .20091,432S i m u l e c t (b a s i l i x i m a b )N o v a r t i s P h a r m a c e u t i c a l s N o v a r t i s P h a r m a c e u t i c a l s N o v a r t i s P h a r m a c e u t i c a l s 199830v
S o l i r i s (e c u l i z u m a b )A l e x i o n P h a r m a c e u t i c a l s A l e x i o n P h a r m a c e u t i c a l s A l e x i o n P h a r m a c e u t i c a l s 20071,551S t e l a r a (u s t e k i n u m a b )J a n s s e n -C i l a g I n t e r n a t i o n a l J o h n s o n &J o h n s o n J o h n s o n &J o h n s o n 20091,504S y l v a n t (s i l t u x i m a b )J a n s s e n B i o t e c h J o h n s o n &J o h n s o n J o h n s o n &J o h n s o n 2014N o M e
S y n a g i s (p a l i v i z u m a b )A b b o t t L a b o r a t o r i e s A s t r a Z e n e c a A b b v i e 19981,887T y s a b r i (n a t a l i z u m a b )B i o g e n I d e c B i o g e n I d e c B i o g e n I d e c 20041,527V e c t i b i x (p a n i t u m u m a b )A m g e n A m g e n A m g e n 2006389X g e v a s (d e n o s u m a b )
A m g e n A m g e n A m g e n 20101,030
(c o n t i n u e d o n n e x t p a g e )
https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,
11
mAbs
D o w n l o a d e d b y [U n i v e r s i t y o f C a l i f o r n i a , S a n D i e g o ] a t 00:45 30 M a y 2016
T a b l e 1.M a r k e t e d t h e r a p e u t i c m o n o c l o n a l a n t i b o d y p r o d u c t s (C o n t i n u e d )
B r a n d n a m e (I N N )
O r i g i n a l B L A /M A A A p p l i c a n t C o m p a n y R e p o r t i n g U S S a l e s
C o m p a n y R e p o r t i n g E U S a l e s Y e a r o f F i r s t A p p r o v a l
2013G l o b a l S a l e s ($M )a
X o l a i r (o m a l i z u m a b )G e n e n t e c h R o c h e N o v a r t i s 20031,465Y e r v o y (i p i l i m u m a b )B r i s t o l -M y e r s S q u i b b B r i s t o l -M y e r s S q u i b b B r i s t o l -M y e r s S q u i b b 2011960Z a l t r a p w (z i v -a ?i b e r c e p t )S a n o ?A v e n t i s S a n o ?S a n o ?201270Z e v a l i n x (i b r i t u m o m a b t i u x e t a n )
I D E C P h a r m a c e u t i c a l s
S p e c t r u m P h a r m a c e u t i c a l s S p e c t r u m P h a r m a c e u t i c a l s 200229
a
S a l e s i n f o r m a t i o n o b t a i n e d f r o m c o m p a n y a n n u a l r e p o r t s a n d o t h e r p u b l i c a l l y a v a i l a b l e s o u r c e s .b
N /A d e n o t e p r o d u c t n o t a v a i l a b l e i n t h i s r e g i o n .c A n t i b o d y -D r u g C o n j u g a t e ,M M A E .d F c F u s i o n P r o t e i n ,F c -F a c t o r I X .e P r o d u c t a p p r o v a l i n 2014;n o s a l e s i n 2013.f F c F u s i o n P r o t e i n ,F c -I L 1R .g F a b C o n j u g a t e ,P E G (p r o d u c e d b y m i c r o b i a l f e r m e n t a t i o n ).h F c F u s i o n P r o t e i n ,F c -F a c t o r V I I I.i F c F u s i o n P r o t e i n ,F c -T N F R (p 75).j F c F u s i o n P r o t e i n ,F c -V E G F R (1,2).k B i o s i m i l a r A n t i b o d y ,R e m i c a d e O r i g i n a t o r .l I n ?e c t r a a n d R e m s i m a a r e c o n s i d e r e d a s t w o i n d i v i d u a l p r o d u c t s ;s e e t e x t .m P r o d u c t a p p r o v a l i n l a t e 2013;n o a n n u a l s a l e s d i s c l o s e d ,b i o T R A K òe s t i m a t e o f g l o b a l s a l e s .n A n t i b o d y -D r u g C o n j u g a t e ,D M 1.o F a b (p r o d u c e d b y m i c r o b i a l f e r m e n t a t i o n ).p F c F u s i o n P r o t e i n ,F c -T P O -R b i n d i n g p e p t i d e (p r o d u c e d b y m i c r o b i a l f e r m e n t a t i o n ).q F c F u s i o n P r o t e i n ,F c -C T L A -4w i t h a m i n o a c i d s u b s t i t u t i o n s .r F c F u s i o n P r o t e i n ,F c -C T L A -4.s P r o l i a a n d X g e v a a r e c o n s i d e r e d a s t w o i n d i v i d u a l p r o d u c t s e v e n t h o u g h t h e y c o n t a i n t h e s a m e b u l k m o n o c l o n a l a n t i b o d y ;s e e t e x t .t B i s p e c i ?c ,T r i -f u n c t i o n a l A n t i b o d y .u S a l e s d a t a n o t d i s c l o s e d ,s m a l l p a t i e n t m a r k e t ,b i o T R A K òe s t i m a t e o f g l o b a l s a l e s .v F a b ,p r o d u c e d b y p a p a i n d i g e s t i o n o f f u l l l e n g t h m o n o c l o n a l a n t i b o d y .w F c F u s i o n P r o t e i n ,F c -V E G F R .x A n t i b o d y C o n j u g a t e ,Y -90.
12
Volume 7Issue 1
mAbs
D o w n l o a d e d b y [U n i v e r s i t y o f C a l i f o r n i a , S a n D i e g o ] a t 00:45 30 M a y 2016
types of therapeutic products.Therefore,for many of these novel targets,mono-clonal antibody products are often the ?rst product candidates advancing to clinical trials.If the initial proof-of-concept studies with these products are successful,they can move rapidly towards commercialization,providing a “?rst-to-market”advantage.
Also fueling the growth in monoclo-nal antibody product sales is the global market expansion of the pharmaceutical market in general resulting from the increasing and aging worldwide popula-tion and the increasing standard of living in emerging markets.15In addition,the continued evaluation of monoclonal antibody products in new and expanded clinical indications results in continued demand for product for clinical studies subsequent sales in newly approved indications.
As the biopharmaceutical industry matures,the number and types of diseases that will be economically treated with monoclonal antibody
products will increase.Driven in part by the need for cost-effective supply of large quantities of products for such cost-sensitive indications as
rheumatology and asthma,16recent improvements in mono-clonal antibody production technologies have substantially improved process yields and reduced actual manufacturing costs.17-20As a result,there is an ever-increasing opportu-nity for these products to penetrate more cost-sensitive indi-cations and markets.
As the patents providing exclusive rights to many of the high-pro?le and blockbuster monoclonal antibody products expire,there has been a growing interest in the development of biosimilars.In September 2013,the ?rst biosimilar mono-clonal antibodies,sold under the brand names Remsima and In?ectra,were approved for commercial sale in Europe.These biosimilar versions of the blockbuster monoclonal anti-body product Remicade are the ?rst of many biosimilar monoclonal antibodies that will undoubtedly be approved for commercial sale in the US and Europe.Although the current impact of these and other biosimilar monoclonal antibody products in US and European biopharmaceutical marketplace cannot be gauged at this early stage,we anticipate modest acceleration of the sales growth of all monoclonal antibodies as these biosimilar products gain market acceptance.There is also a surging interest in biosimilar monoclonal antibodies in the global markets of Latin America,China,Southeast Asia,India,and Russia,with several monoclonal antibody products already approved in these regions.The introduction of biosi-milars in these markets is likely to have a very large impact on the global sales of monoclonal antibody products as biosi-milar monoclonal antibodies are approved in geographies that are currently unable to access expensive innovator
products.
Figure 2.Sales of biopharmaceutical products by product type.Total annual sales of biopharmaceuti-cal products are shown as a function of product type.Note that recombinant proteins produced by microbial fermentation include recombinant human insulin products which represent nearly 50%of
the sales and >90%of the material produced in this
category.Figure 3.Annual sales of monoclonal antibody products.Annual sales of
the top six selling monoclonal antibodies compared to the non-antibody
recombinant proteins Avonex and Rebif for the period 2004to 2013.
Each monoclonal antibody product had 2013sales of greater than $6.5billion.Sales information was obtained from company annual reports and other publically available sources.
https://www.doczj.com/doc/2415045401.html, 13
mAbs D o w n l o a d e d b y [U n i v e r s i t y o f C a l i f o r n i a , S a n D i e g o ] a t 00:45 30 M a y 2016
Conclusion
As the development and commercialization of monoclonal antibody products continues with no limit in sight,lessons learned from the early monoclonal antibody product develop-ment,along with the use of advanced and novel technologies for their production and the increasing familiarity of global
regulatory authorities with therapeutic monoclonal antibody products,will contribute to their continued dominance as the major class of biopharmaceutical products worldwide.
Disclosure of Potential Con?icts of Interest
No potential con?icts of interest were disclosed.
References
1.Bioprocess Technology Consultants [Internet].Woburn (MA):Bioprocess Technology Consultants,Inc.bioTRAK òdatabase;2014[cited 2014September 14];[about 2screens].Available from:https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,/pipeline-databases.php
2.Pharmaceutical Research and Manufacturers of Amer-ica.Medicines in development:Biologics 2013Report [Internet].Washington,DC:Pharmaceutical Research and Manufacturers of America;2013Mar [cited 2014September 14].87p.Available from:https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,/sites/default/?les/pdf/biologics201
3.pdf 3.Drugs@FDA [Internet].Silver Spring (MD):U.S.Food and Drug Administration,Center for Drug Eval-uation and Research.1939-[cited 2014September 14].Available from:https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,/scripts/cder/drugsatfda/index.cfm
4.European public assessment reports,human medicines [Internet].London:The European Medicines Agency.1995[cited 2014September 14].Available from:http://www.ema.europa.eu/ema/index.jsp?curl=pages/medicines/landing/epar_search.jsp&mid=WC0b01ac058001d124
5.Ecker DM,Ransohoff TC,Jones SD,Levine HL.The state of mammalian cell culture biomanufacturing.Woburn (MA):BioProcess Technology Consultants,Inc;2011Dec 12;150p.Available from:https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,/ECommerce/Reports.
6.DiMasi JA,Feldman L,Seckler A,Wilson A.Trends in risks associated with new drug development:success rates for investigational drugs.Clin Pharmacol Ther 2010;87(3):272-7;PMID:20130567
7.Pavlou AK,Reichert JM.Recombinant protein thera-peutics-success rates,market trends and values to 2010.
Nat Biotechnol 2004;22(12):1513-9;PMID:15583654
8.Greb E,Drakulich A.Platform technologies.Pharma-ceutical Technol 2012;36(3):46-52.
9.
Rameez S,Mostafa SS,Miller C,Shukla AA.High-throughput miniaturized bioreactors for cell culture process development:reproducibility,scalability,and control.Biotechnol Prog 2014;30(3):718-27;PMID:24449637
10.
Bhambure R,Kumar K,Rathore AS.High throughput process development for biopharmaceutical drug sub-stances.Trends in Biotech 2011;29(3):127-35;PMID:21255855
11.
Chollangi S,et al.Accelerating puri?cation process development of an early phase MAb with high-throughput automation.Part 1.Bioprocess Int 2014;12(3):48-52.
12.
Chollangi S,et al.Accelerating puri?cation process development of an early phase MAb with high-throughput automation.Part 2.Bioprocess Int 2014;12(4):32-41.
13.
BCC Research.Biologic therapeutic drugs:technolo-gies and global markets.Wellesley (MA):BCC Research,LLC;2013Jan.142p.Available from:https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,/market-research/biotech nology/biologic-therapeutic-drugs-markets-bio079b.html
14.
Bilello JA.The agony and ecstasy of "OMIC"technolo-gies in drug development.Curr Mol Med 2005;5(1):39-52;PMID:15720269
15.
United Nations Development Programme.Human development report 2013:The rise of the South:Human progress in a diverse world [Internet].NY
(NY):United Nations Development Programme;c2013[cited 2014September 14].216p.Available from:https://www.doczj.com/doc/2415045401.html,/sites/default/?les/reports/14/hdr2013_en_complete.pdf
16.
Wurm FM.Production of recombinant protein thera-peutics in cultivated mammalian cells.Nat Biotechnol 2004;22(11):1393-8;PMID:15529164
17.
Lu F,Toh PC,Burnett I,Li F,Hudson T,Amanullah A,Li J.Automated dynamic fed-batch process and media optimization for high productivity cell culture process development.Biotechnol Bioeng 2013;110(1):191-205;PMID:22767053
18.
Yang WC,Lu J,Kwiatkowski C,Yuan H,Kshirsagar R,Ryll T,Huang YM.Perfusion seed cultures improve biopharmaceutical fed-batch production capacity and product quality.Biotechnol Prog 2014;30(3):616-25;PMID:24574326
19.
Povey JF,O’Malley CJ,Root T,Martin EB,Montague GA,Feary M,Trim C,Lang DA,Alldread R,Racher AJ,Smales CM.Rapid high-throughput characteriza-tion,classi?cation and selection of recombinant mam-malian cell line phenotypes using intact cell MALDI-ToF mass spectrometry ?ngerprinting and PLS-DA modelling.J Biotechnol 2014;20(184):84-93.20.
Liu B Spearman M,Doering J,Lattov a E,Perreault H,Butler M.The availability of glucose to CHO cells affects the intracellular lipid-linked oligosaccharide dis-tribution,site occupancy and the N-glycosylation pro-?le of a monoclonal antibody.J Biotechnol 2014;170:17-27;PMID:24286971
14Volume 7Issue 1
mAbs D o w n l o a d e d b y [U n i v e r s i t y o f C a l i f o r n i a , S a n D i e g o ] a t 00:45 30 M a y 2016
单克隆抗体的制备及应用 单克隆抗体是由淋巴细胞杂交瘤产生的、只针对复合抗原分子上某一单个抗原决定簇。单克隆抗体技术(monoclonal antibody technique)：一种免疫学技术，将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞杂交，获得既能产生抗体，又能无限增殖的杂种细胞，并以此生产抗体。是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体，对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞制造出来的一种抗体。 1 单克隆抗体的优点与局限性： 单克隆抗体的优点：(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代，只要不发生细胞株的基因突变，就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。(2)可以用相对不纯的抗原，获得大量高度特异的、均一的抗体。(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体，所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法，如IRMA和ELISA等。(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能，可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。 总体来说，即：高特异性、高纯度、重复性好、敏感性强、成本低和可大量生产等。 单克隆抗体的局限性：(1)单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应，所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。 (2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。(3)制备技术复杂，而且费时费工，所以单克隆抗体的价格也较高。 2 单克隆抗体的制备： 单克隆抗体的制备原理：应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一，得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性，它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性，用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群，可制备抗一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。 单克隆抗体的制备过程：抗原准备、动物的选择与免疫、细胞融合、选择杂交瘤细胞及抗体检测、杂交瘤的克隆化、杂交瘤细胞的冻存与复苏、单克隆抗体的纯化等步骤。 抗原准备 抗原，是指能够刺激机体产生（特异性）免疫应答，并能与免疫应答产物抗体和致敏淋巴细胞在体外结合，发生免疫效应（特异性反应）的物质。抗原的基本特性有两种，一是诱导免疫应答的能力，也就是免疫原性，二是与免疫应答的产物发生反应，也就是抗原性。很多物质都可以成为抗原，抗原的具体分类可以参见抗原，在进行单克隆抗体制备过程中，很多物质都可以成为抗原，在常规的科研实验中，科研者经常选用每只小鼠/大鼠每次注射10~50ug 重组蛋白、偶联多肽、偶联小分子等作为抗原产生特异性的单克隆抗体。 动物的选择与免疫
史堡丛遑遁生苤查垫！！生鱼旦筮！』鲞箜§塑￡ｈ纽Ｉ基ｈ！Ｈ幽！吐』女盟垫！！，ｙＱ！：！￡盟Ｑ：§ 抗磷脂综合征诊断和治疗指南 中华医学会风湿病学分会 １概述 抗磷脂综合征（ａｎｔｉｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＡＰＳ）是一种非 炎症性自身免疫病，ｌ临床上以动脉、静脉血栓形成，病态妊娠 （妊娠早期流产和中晚期死胎）和血小板减少等症状为表现， 血清中存在抗磷脂抗体（ａｎｔｉｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄａｎｔｉｂｏｄｙ，ａＰＬ），上述 症状可以单独或多个共同存在。 ＡＰＳ可分为原发性ＡＰＳ和继发性ＡＰＳ，继发性ＡＰＳ多见 于系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）或类风湿关节炎（ＲＡ）等自身免疫 病（悉尼标准建议不用原发性和继发性ＡＰＳ这一概念，但目 前的文献多仍沿用此分类）。此外，还有一种少见的恶性ＡＰＳ （ｃａｔａｓｔｒｏｐｈｉｃＡＰＳ），表现为短期内进行性广泛血栓形成，造成 多器官功能衰竭甚至死亡。原发性ＡＰＳ的病因目前尚不明 确，可能与遗传、感染等因索有关。多见于年轻人。男女发病 比率为１：９，女性中位年龄为３０岁。 ２临床表现 ２．１动、静脉血栓形成：ＡＰＳ血栓形成的临床表现取决于受 累血管的种类、部位和大小，可以表现为单一或多个血管累 及，见表１。ＡＰＳ的静脉血栓形成比动脉血栓形成多见。静脉 血栓以下肢深静脉血栓最常见，此外还可见于肾脏、肝脏和 视网膜。动脉血栓多见于脑部及上肢，还可累及肾脏、肠系膜 及冠状动脉等部位。肢体静脉血栓形成可致局部水肿，肢体 动脉血栓会弓ｌ起缺血性坏疽，年轻人发生脑卒中或心肌梗死 应排除原发性ＡＰＳ可能。 ２．２产科表现：胎盘血管的血栓导致胎盘功能不全，可引起 习惯性流产、胎儿宫内窘迫、宫内发育迟滞或死胎。典型的 ＡＰＳ流产常发生于妊娠ｌＯ周以后，但亦可发生得更早，这与 抗心磷脂抗体（ａｎｔｉｃａｒｄｉｏｌｉｐｉｎａｎｔｉｂｏｄｖ，ａＣＬ）的滴度无关。ＡＰＳ 孕妇可发生严重的并发症，早期可发生先兆子痫，亦可伴有 溶血、肝酶升高及血小板减少，即ＨＥＬＬＰ综合征。 ２．３血小板减少：是ＡＰＳ的另一重要表现。 ２．４ＡＰＳ相关的肾病：主要表现为肾动脉血栓／狭窄、肾脏缺 血坏死、肾性高血压、肾静脉的血栓、微血管的闭塞性肾病和 相关的终末期肾病统称为ＡＰＳ相关的肾病。 ２．５其他：８０％的患者有网状青斑，心脏瓣膜病变是晚期出 现的临床表现，严重者需要做瓣膜置换术。此外，ＡＰＳ相关的 神经精神症状包括偏头痛、舞蹈病、癫痫、吉兰一巴雷综合征、 一过性球麻痹等，缺血性骨坏死极少见。 ３实验室检查 ３．１ａＰＬ的血清学检查 ＤＯＩ：１０．３７６０１ｃｍａ．Ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－７４８０．２０１１．０６．０１２ ?４０７? ?诊治指南?表１ＡｌａＳ血栓的临床表现 ３．１．１狼疮抗凝物（ＬＡ）：ＬＡ是一种ｌｇＧ／ＩｇＭ型免疫球蛋白。作用于凝血酶原复合物（Ｘａ、Ｖａ、Ｃａ２＋及磷脂）以及Ｔｅｎａｓｅ复合体（因子ＩＸａ、Ｖｉａ、Ｃａｚ＋及磷脂），在体外能延长磷脂依赖的凝血试验的时间。因此检测ＬＡ是一种功能试验，有凝血酶原时间（ＰＴ）、激活的部分凝血活酶时间（ＡＰＴＩ＇）、白陶土凝集时间 （ＫＣＴ）和蛇毒试验，其中以ＫＣＴ和蛇毒试验较敏感。３．１．２ａｃＬ：目前标准化的榆测方法是以心磷脂为抗原的间 接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法，国际上对Ｉ如和Ｉ州型的ａＣＬ的检测结果的表述单位为ＧＰＬ（１斗咖ｌ纯化的ＩｇＧ型ａＣＬ的结合抗原活性）和ＭＰＬ（１¨加ｎｌ纯化的ＩｇＭ型ａＣＬ的
原发性抗磷脂综合征 【概述】 抗磷脂综合征（Anti-phospholipid syndrome, APS）是一种非炎症性自身免疫病，临床上以动脉、静脉血栓形成、习惯性流产和血小板减少等症状为表现，血清中存在抗磷脂抗体（aPL），上述症状可以单独或多个共同存在。 APS可分为原发性抗磷脂综合征（PAPS）和继发性抗磷脂综合征（SAPS），SAPS多见于系统性红斑狼疮或类风湿关节炎等自身免疫病。此外，还有一种少见的恶性抗磷脂综合征（Catastrophic APS），表现为短期内进行性广泛血栓形成，造成多器官功能衰竭甚至死亡。PAPS的病因目前尚不明确，可能与遗传、感染等因素有关。多见于年轻人，男女发病比率为1:9，女性中位年龄为30岁。 【临床表现】 一、动、静脉血栓形成 APS血栓形成的临床表现取决于受累血管的种类、部位和大小，可以表现为单一或多个血管累及（见表1）。APS的静脉血栓形成比动脉血栓形成多见。静脉血栓以下肢深静脉血栓最常见，此外还可见于肾脏、肝脏和视网膜。动脉血栓多见于脑部及上肢，还可累及肾脏、肠系膜及冠状动脉等部位。肢体静脉血栓形成可致局部水肿，肢体动脉血栓会引起缺血性坏疽，年轻人发生中风或心肌梗死应排除PAPS可能。 二、产科 胎盘血管的血栓导致胎盘功能不全，可引起习惯性流产、胎儿宫内窘迫、宫内发育迟滞或死胎。典型的APS流产常发生于妊娠10周以后，但亦可发生得更早，这与抗心磷脂抗体（aCL）的滴度无关。APS孕妇可发生严重的并发症，早期可发生先兆子痫，亦可伴有溶血、肝酶升高及血小板减少，即HELLP（Hemolysis, Elevated Liver enzymes and Low platelets）综合症。 三、血小板减少 血小板减少是APS的另一重要表现。 四、其他 80%的病人有网状青斑，心脏瓣膜病变是后出现的临床表现，严重的需要做瓣膜置换术。此外可有神经精神症状，包括偏头痛、舞蹈病、癫痫、格林-巴利综合征、一过性球麻痹等，缺血性骨坏死极少见。 表1 APS的血栓临床表现 累及血管临床表现 静脉 肢体深静脉血栓 脑中枢静脉窦血栓 肝脏 小静脉肝肿大；转氨酶升高 大静脉Budd-Chiari综合征 肾脏肾静脉血栓 肾上腺中央静脉血栓；出血、梗死，Addison’s病 肺肺血管栓塞；毛细血管炎；肺出血；肺动脉高压大静脉上/下腔静脉综合征
单克隆抗体制备过程中筛选杂交瘤细胞的原理和方法单克隆抗体制备过程中，有两次筛选过程，第一次是选出杂交瘤细胞（用选择培养基），第二次是进一步选出能产生我们需要的抗体的杂交瘤细胞。 第一次筛选的原理和方法： 细胞融合后，杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中家次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷酸。其一居室细胞中的DNA合成油两条途径： 一条途径是生物合成途径（“D途径”），即由氨基酸及其其他小分子化合物合成氨基酸，为DNA分子的合成提供原料。再此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而HAT培养液中氨基蝶呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断DNA合成的D途径。 另一条途径是应急途径（“S途径”），她是利用次黄嘌呤——鸟嘌呤磷酸核苷转移酶和胸腺嘧啶核苷激酶催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。 因此，在HAT培养液中，未融合的效应B 细胞核两个效应B细胞融合的D途径被氨基蝶呤阻断，随S途径正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10天左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言，由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型细胞，因此自身没有S途径，且D途径又被氨基蝶呤阻断，所有在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡。只有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的S途径，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HAT培养液中选择性存活下来，并不断增殖。 第二次筛选的原理和方法： 在单克隆抗体的生产过程中，由于效应B细胞的特异性是不同的，经HAT培养液第一次筛选出的杂交瘤细胞产生的抗体存在差异，必须对杂交瘤细胞进行第二次筛选，
1 单克隆抗体药物----科普知识 单克隆抗体药物 2009-10-19 15:47 1986年，美国FDA批准了第一个单克隆抗体药物上市，距今已经整整20年了。截止到现在，全世界共有21个治疗用抗体药物被批准上市，实现300亿美元的销售额，在国际，也在国内形成了抗体药物开发热潮。巨大的市场前景和现存的技术问题及壁垒并存的现实不可避免地引发抗体药物新一轮技术革命。而其结果又将毫无疑问地改变抗体药物的市场格局。抗体药物的研究开发能否真能成为中国生物技术药物开启国际市场大门的新钥匙？什么是我们首选的切入点，又如何形成我们自己的特色和竞争优势？回顾国际抗体药物20年风雨飘摇的发展经历，总结其中的经验教训无疑会给我们一些有益的启示。 1986年，美国FDA批准上市了第一个抗体药物Orthoclone，用于治疗移植物抗宿主病（GVHD），翻开了生物医药历史崭新的一页。时隔8年，美国才批准了第二个抗体药物上市。进入21世纪，抗体药物研发上市的速度明显加快。20年后的今天，全球共批准上市21个抗体药物。进入临床验证的数量也直线上升，从上个世纪80年代的70个，到90年代新增140个，以及2000年至2005年6月又增加的130个，预计2010年将再增 240个【1】，显示抗体药物研究异常活跃。目前共有150余个抗体药物正在临床评估中，其中16个已进入III期临床【2】。 抗体药物研发进展迅速及竞争激烈的主要原因是1）抗体药物具有高度特异性，是靶向治疗的基础，在这一方面远优于小分子药物；2）虽然在世界范围内20年仅仅批准上市了21个抗体药物，事实上其淘汰率仍明显低于小分子药物，临床转化率以及批准成功率都较高，以治疗癌症的抗体药物为例，其批准成功率为29％；3）抗体药物即使在专利保护到期后，由于其生产条件的复杂性，也很难受到通用名药价格的威胁；4）更为重要的是已上市的抗体药物具有很高的市场回报率，大大刺激了投资热情。目前，上市抗体药物中已盈利的有8个，其中4个已经成为年销售额10亿美元以上的“重磅弹”，5个销售总额超过30亿美元【3】。预计2005-2010年抗体药物销售的平均增长率为20％，年销售额将超过300亿美元，市场潜力巨大。 但具有讽刺意味的是，从药物经济学的角度看，抗体药物并非很好的药物候选者。首先，单克隆抗体是大分子糖蛋白，结构复杂、不利储存、不能口服、进入体内5-7天才能到达靶位置。其次，抗体药物研发费用较高，达10－18亿美元，高于小分子药物平均研发费的9亿美元。第三，目前抗体药物的单剂用量大，药物的质量标准高，生产成本高昂，导致价格昂贵，以致被喻为“经济负作用”。以治疗肿瘤的抗体药物Avastin为例，单个病人年度费用高达5万美元【4】。然而，正在形成的巨大市场是抗体药物研发的不竭驱动力。 我国在单克隆抗体技术起步非常早，80年代曾出现过研究热潮，但产业化成就还微不足道。目前，受国际抗体研发进展的影响，又出现了新一轮的“抗体热”，北京、上海、广州等纷纷成立了由研究机构、企业和投资商的联合抗体研发中心和公司。面对国际抗体药物竞争的新态势，我国抗体药物产业是否遇到了真正的机遇？我们选择的切入点是什么，又如何形成自己的特色和竞争优势？抗体药物的研究开发能否成为中国生物技术药物开启国际市场大门的新钥匙？回顾国际抗体药物20年风雨飘摇的发展经历，总结其中的经验教训无疑会给我们一些有益的启示，这是本文的主要目的。 一、上市抗体药物的发展现状 从第一个抗体药物上市至今20年内，全球共批准了21个抗体药物，其中美国18个（包括9个被欧盟
什么是抗磷脂抗体综合征 在我们的生活中，有各式各样的疾病，他们也有很多学名，也许我们看到这样的病知道他是什么症状，但是让你叫出他的学名，估计没多少人能叫出来。还有些人去药店买药，医师问他需要什么药，连他自己也不知道要买什么药，说不出具体药的名称，所以呢，只好跟医师说了发病的症状，医师就根据他所说的症状给他开了药。那什么是抗磷脂抗体综合征?怎么治? 什么是抗磷脂抗体综合征?怎么治?经调查，知道这个学名的人寥寥无几，也没多少人关注这个，但是他跟我们的生活息息相关，下面是医学界给出我们这样的概念，什么是抗磷脂抗体综合征?怎么治? 抗磷脂抗体综合征(antiphospholipid syndrome，APS)是指由抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody，APL抗体)引起的一组临床征象的总称。APL抗体是一组能与多种含有磷脂结构的抗原物质发生免疫反应的抗体，主要有狼疮抗凝物(lupus anti-coagulant，LA)、抗心磷脂抗体(anti-cardiolipid antibody，ACL抗体)、抗磷脂酸抗体和抗磷脂酰丝氨酸抗体等。与APL抗体有关的临床表现，主要为血栓形成、习惯性流产、血小板减少和神经精神症状等，APS是SLE病人中常见的临床表现
从上述的概念中我们可以知道什么是抗磷脂抗体综合征了，那么怎么治呢?下面我们详细介绍： 1.西医治疗治疗的主要目标是抑制血栓形成包括抗血小板、抗凝、促纤溶等。 (1)抗血栓形成治疗：急性期为阻断血栓形成可用肝素治疗。对有动静脉血栓者可口服抗凝剂对已用足量华法林抗凝仍有反复血栓形成者可皮下注射足量肝素，2次/d，使PTT 延长至正常值的1.5～2倍，或采用免疫抑制剂(环磷酰胺)、激素、肝素和华法林抗凝联合治疗。 (2)针对流产治疗：每天小剂量阿司匹林(60～80mg)口服和肝素5000～10000单位皮下注射，2次/d可使APS中的妊娠得以改善。为防止长期肝素治疗所致的骨质疏松，辅以维生素D和钙剂;对肝素无效或副作用明显者， 可每月按0.4g/(kg?d)静脉滴注γ球蛋白4～5天，同时口服小 剂量阿司匹林;泼尼松20～60mg/d加小剂量阿司匹林能成功地 防止流产但只是在其他治疗失败时用。长期大剂量激素对妊娠、胎儿不利。流产一旦确诊为APS所致后以小量阿司匹林，疗效明显。 2.中医治疗中医治疗抗磷脂抗体综合征主要是辨证论治， 分型治疗。常见有气虚血瘀、气滞血瘀和寒凝血瘀三型。分别应用益气养血活血化瘀、舒肝理气活血化瘀和温经补肾活血化瘀法
副肿瘤综合征 概述 副肿瘤综合征（paraneoplastic syndrome）是发生在某些恶性肿瘤患者体内，在未出现肿瘤转移的情况下即已产生能影响远隔自身器官功能障碍而引起的疾病。它并不是由肿瘤直接侵犯该组织或器官而产生的一组症状。副肿瘤综合征可影响到体内的许多组织和器官，造成相应的临床表现，如关节炎、皮疹、内分泌功能紊乱等。影响的远隔自身器官如在神经系统则称之为神经系统副肿瘤综合征(neurologic paraneoplastic syndrome)，如肌病、神经肌肉接头病、神经根病变、周围神经病变、脊髓以及大脑的病变等。中枢神经系统副肿瘤综合征的发生率比较低，较转移瘤少见（1-2%）。但由此综合征所造成的损害，而出现的临床表现要较肿瘤本身更早，并更为严重，因而，在临床上需要对此有高度的重视，这对恶性肿瘤的早期诊断也具有重要的意义。 早在1888年，Oppenheim描述了1例恶性肿瘤合并周围神经病的病例。此年他又描述了1例淋巴肉瘤合并球麻痹，认为是第一例中枢神经系统的远隔效应。Auche （1890年）报道了胃、胰腺、子宫的恶性肿瘤合并周围神经病。Guichara （1956年）提出了副肿瘤综合征这一名词。从此后在国内、外陆续有许多文献报道副肿瘤的各种不同的临床类型。 神经系统副肿瘤综合征可累及神经系统的任何部位，因此，在临床上会有许多种神经系统副肿瘤综合征的临床表现。它可以累及中枢神经系统产生弥漫性灰质脑病、小脑变性、癌性脊髓病及边缘系统脑炎等，可以累及周围神经系统产生多发性神经病、复合性单神经炎以及累及神经肌肉接头而产生重症肌无力、Lambert-Eaton肌无力综合征、神经性肌强直及皮肌炎/多发性肌炎等。副肿瘤综合征可以仅累及单一神经或肌肉中的某一结构（如小脑的蒲肯野氏细胞，肌肉的胆碱能突触）出现单一的临床表现，前者表现为小脑性共济失调，后者为肌无力综合症。有时临床表现为一单独的神经系统损害，但是其病理改变却比较广泛，不过仍以其中一个结构损害的症状为主要突出的表现。 病因和发病机制 副肿瘤综合征的病因和发病机制目前并不十分清楚。以前普遍认为可能由于癌肿分泌某些直接损害神经系统的物质，如分泌激素样物质（hormone-like substances）和细胞因子（cytokines）。肿瘤产生的激素样物质可引起高钙血症、无力以及行为异常。肿瘤产生的异位ACTH造成的Cushing’s Syndrome和行为异常。白细胞介素-1和肿瘤坏死因子可造成肌肉萎缩和无力。 目前认为免疫因素肯定是十分重要的发病因素之一。肿瘤抗原引起对肿瘤本身的抗原抗体反应，产生大量的抗体。这种抗体可以与神经系统内的某些类似抗原性的成分发生交叉性免疫反应，这种交叉性免疫反应既抑制肿瘤的生长，使肿瘤变小或生长缓慢，但也损害了神经系统，造成神经功能障碍。如Lambert-Eaton 肌无力综合征的患者中大约有2/3的患者同时合并有小细胞性肺癌，因肿瘤产生的特异性免疫球蛋白IgG与小细胞肺癌细胞的钙通道，以及与胆碱能突触处的钙通道均能产生免疫反应。故在胆碱能突触处的IgG与钙通道的反应，阻止了动作电位到达突触时的钙内流，使乙酰胆碱释放减少，产生肌无力症状群。血浆置换后Lambert-Eaton肌无力综合征患者血清中的IgG被去除，患者症状得以恢复。此血浆直接接种于实验动物也可造成肌无力。 副肿瘤综合征患者血清和脑脊液中可发现某些抗体，这些抗体与癌肿或损
单克隆抗体制备中筛选杂交瘤细胞的原理 标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]
单克隆抗体制备过程中筛选杂交瘤细胞的原理和方法 单克隆抗体制备过程中，有两次筛选过程，第一次是选出杂交瘤细胞（用选择培养基），第二次是进一步选出能产生我们需要的抗体的杂交瘤细胞。 第一次筛选的原理和方法： 细胞融合后，杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中家次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷酸。其一居室细胞中的DNA合成油两条途径： 一条途径是生物合成途径（“D途径”），即由氨基酸及其其他小分子化合物合成氨基酸，为DNA分子的合成提供原料。再此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而HAT培养液中氨基蝶呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断DNA合成的D途径。 另一条途径是应急途径（“S途径”），她是利用次黄嘌呤——鸟嘌呤磷酸核苷转移酶和胸腺嘧啶核苷激酶催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。 因此，在HAT培养液中，未融合的效应B细胞核两个效应B细胞融合的D途径被氨基蝶呤阻断，随S途径正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10天左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言，由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型细胞，因此自身没有S途径，且D途径又被氨基蝶呤阻断，所有在HAT培养液中也不能增殖而很快死亡。只有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的S途径，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HAT培养液中选择性存活下来，并不断增殖。 第二次筛选的原理和方法： 在单克隆抗体的生产过程中，由于效应B细胞的特异性是不同的，经HAT培养液第一次筛选出的杂交瘤细胞产生的抗体存在差异，必须对杂交瘤细胞进行第二次筛选，选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。二次筛选通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，是每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖，然后检测各孔上清液中的细胞分泌的抗体，上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，继续进行有限
单克隆抗体制备与应用 姓名：王志豪学号：10073485 班级：工优070 关键词：单克隆抗体，人抗体，杂交瘤细胞 摘要：1975年德国学者Kohler和英国学者Milstein成功地将骨髓瘤细胞和产生抗体的B淋巴细胞融合为杂交瘤细胞,其分泌的抗体是由识别一种抗原决定簇 的细胞克隆所产生的均一性抗体,称之为单克隆抗体。从鼠源单抗之后,单抗历经了鼠源性抗体、嵌合抗体、人源化抗体、人源性抗体4个发展阶段。随着分子生物学和细胞生物学的发展,单抗理论几乎应用到生物学研究的每一个区域。 1975 年, Kohler 和Milstein 创立了杂交瘤技术制备单克隆 抗体,此后单克隆抗体迅速广泛地应用于生物学和医学的各个领域。单克隆抗体可用于分析抗原的细微结构及检验抗原抗体未知的结构 关系;生产出针对复杂生物混合物中的特定分子的抗体,可用于分离、分析及纯化该特定分子抗原;其试剂可用于临床诊断和治疗,或用于 以单抗为弹头的“生物导弹”药物等。但单克隆抗体技术自问世以来,在临床治疗方面进展缓慢,主要原因是目前单克隆抗体大多是鼠源性的,而鼠源单抗应用于人体治疗时存在诸多问题:鼠源单抗在人体中 常不能有效激活补体和Fc 受体相关的效应系统;被人体免疫系统所 识别,产生人抗鼠抗体(HAMA) 反应;且在人体循环系统中很快被清除。因此,在保持对特异抗原表位的高亲和力的基础上人源化和全人化的改造,减少异源抗体的免疫原性成为单抗研究的重点。此外,传统杂交瘤技术还存在制备周期较长,成本较高,杂交瘤细胞不稳定抗性会丢
失等缺陷。近年来,随着分子生物学技术的发展,出现了嵌合单克隆抗体和由转基因小鼠、噬菌体展示技术、核糖体展示技术及共价展示技术所制备的单克隆抗体。这些技术可有效解决传统杂交瘤技术所存在的问题,为单克隆抗体的应用提供更广阔的空间。 1994 年, 美国Cell Genesys 公司和Genpharm公司宣布转基因小鼠作为生产全人抗体的载体问世。这项技术是将人抗体基因微位点转入小鼠体内,产生能分泌人抗体的转基因小鼠。其前提是人的抗体基因片段在小鼠体内进行重排并表达,并且这些片段能与小鼠细胞的信号机制相互作用,即在抗原刺激后,这些片段可被选择、表达并活化B 细胞分泌人抗体。这些转基因小鼠的不足之处在于转移基因片段较小,仅30kb 左右,因此这种抗体库在面对抗原多样性时,其抗体应答显得单薄而不足。此后,Green 等人利用基因打靶技术将编码人抗体轻重链的基因片段大约18Mb 的DNA 全部转到自身抗体基因位点已被灭活的小鼠基因组中,再经过繁育筛选,建立了稳定的转基因小鼠品系。这样得到的转基因小鼠对特异的抗原能产生高亲和力的人抗体。用传统的杂交瘤技术,将表达特异抗体的转基因小鼠B 细胞和骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细胞系,产生人源抗体。利用转基因小鼠技术已获得了一系列抗IL8 、TNFα以及EGFR 的人单克隆抗体,这些细胞因子在肿瘤或其他疾病中起着重要的作用,因此其单克隆抗体作为导向剂具有重要的临床治疗意义。目前生产的单抗大多是鼠源性的，但其在临床应用方面还存在着很大的弊端，主要是鼠源单抗与NK 等免疫细胞表面Fc 段受体亲和力弱,产生的抗体依赖性细胞介导的细胞毒
原发性抗磷脂综合征诊疗指南 【概述】 抗磷脂综合征（Anti-phospholipid syndrome, APS）是一种非炎症性自身免疫病，临床上以动脉、静脉血栓形成、习惯性流产和血小板减少等症状为表现，血清中存在抗磷脂抗体（aPL），上述症状可以单独或多个共同存在。 APS可分为原发性抗磷脂综合征（PAPS）和继发性抗磷脂综合征（SAPS），SAPS多见于系统性红斑狼疮或类风湿关节炎等自身免疫病。此外，还有一种少见的恶性抗磷脂综合征（Catastrophic APS），表现为短期内进行性广泛血栓形成，造成多器官功能衰竭甚至死亡。PAPS的病因目前尚不明确，可能与遗传、感染等因素有关。多见于年轻人，男女发病比率为1:9，女性中位年龄为30岁。 【临床表现】 一、动、静脉血栓形成 APS血栓形成的临床表现取决于受累血管的种类、部位和大小，可以表现为单一或多个血管累及（见表1）。APS的静脉血栓形成比动脉血栓形成多见。静脉血栓以下肢深静脉血栓最常见，此外还可见于肾脏、肝脏和视网膜。动脉血栓多见于脑部及上肢，还可累及肾脏、肠系膜及冠状动脉等部位。肢体静脉血栓形成可致局部水肿，肢体动脉血栓会引起缺血性坏疽，年轻人发生中风或心肌梗死应排除PAPS可能。 二、产科 胎盘血管的血栓导致胎盘功能不全，可引起习惯性流产、胎儿宫内窘迫、宫内发育迟滞或死胎。典型的APS流产常发生于妊娠10周以后，但亦可发生得更早，这与抗心磷脂抗体（aCL）的滴度无关。APS孕妇可发生严重的并发症，早期可发生先兆子痫，亦可伴有溶血、肝酶升高及血小板减少，即HELLP（Hemolysis, Elevated Liver enzymes and Low platelets）综合症。 三、血小板减少 血小板减少是APS的另一重要表现。 四、其他 80%的病人有网状青斑，心脏瓣膜病变是后出现的临床表现，严重的需要做瓣膜置换术。此外可有神经精神症状，包括偏头痛、舞蹈病、癫痫、格林-巴利综合征、一过性球麻痹等，缺血性骨坏死极少见。 表1 APS的血栓临床表现 累及血管临床表现 静脉 肢体深静脉血栓 脑中枢静脉窦血栓 肝脏 小静脉肝肿大；转氨酶升高 大静脉Budd-Chiari综合征 肾脏肾静脉血栓 肾上腺中央静脉血栓；出血、梗死，Addison’s病 肺肺血管栓塞；毛细血管炎；肺出血；肺动脉高压 大静脉上/下腔静脉综合征 皮肤网状青紫；皮下结节 眼视网膜静脉血栓 动脉 肢体缺血性坏死
单克隆抗体制备过程中经过两次筛选 单克隆抗体制备过程中，总共有两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，两次筛选的原理和方法是不相同的。 第一次筛选的原理与方法：细胞融合后，杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶核苷酸（T）。其依据是细胞中的DNA合成有两条途径：一条途径是生物合成途径（“D途径”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为DNA分子的合成提供原料。在此合成过程中，叶酸作为重要的辅酶参与这一过程，而HAT培养液中氨基喋呤是一种叶酸的拮抗物，可以阻断DNA合成的“D途径”。另一条途径是应急途径或补救途径（“S途径”），它是利用次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，两种酶缺一不可。因此，在HAT培养液中，未融合的效应B细胞和两个效应B细胞融合的“D途径”被氨基喋呤阻断，虽“S途径”正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10d左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以及自身融合细胞而言，由于通常采用的骨髓瘤细胞是次黄嘌呤—鸟嘌呤磷酸核苷转移酶缺陷型（HGPRT）细胞，因此自身没有“S途径”，且“D途径”又被氨基喋呤阻断，所以在HA T培养液中也不能增殖而很快死亡。惟有骨髓瘤细胞与效应B细胞相互融合形成的杂交瘤细胞，既具有效应B细胞的“S途径”，又具有骨髓瘤细胞在体外培养液中长期增殖的特性，因此能在HA T培养液中选择性存活下来，并不断增殖。 第二次筛选的原理和方法：在实际免疫过程中，由于采用连续注射抗原的方法，且一种抗原决定簇刺激机体形成相对应的一种效应B淋巴细胞，因此，从小鼠脾脏中取出的效应B淋巴细胞的特异性是不同的，经HA T培养液筛选的杂交瘤细胞特异性也存在差异，所以必须从杂交瘤细胞群中筛选出能产生针对某一预定抗原快定簇的特异性杂交瘤细胞。通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔的细胞培养板上，使每一孔含一个或几个杂交瘤细胞（理论上30%的孔中细胞数为0时，才能保证有些孔中是单个细胞），再由这些单细胞克隆生长，最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。因此，单克隆抗体制备过程中，两次筛选的原理和方法是不相同的。 单克隆抗体制备的基本原理与过程 原理： B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。 过程： 1）免疫脾细胞的制备制备单克隆抗体的动物多采用纯系Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。 2）骨髓瘤细胞的培养与筛选在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT 的活性（恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活）。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养，融合前24h换液一次，使骨髓瘤细胞处于对数生长期。 3）细胞融合的关键: 1技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。 2融合试验最大的失败原因是污染，融合成功的关键是提供一个干净的环境，以及适宜的无菌操作技术。 4）阳性克隆的筛选应尽早进行。通常在融合后10天作第一次检测，过早容易出现假阳性。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质，以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有RIA法、ELISA法和免疫荧光法等。其中ELISA法最简便，RIA法最准确。阳性克隆的筛选应进行多次，均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。 5）克隆化克隆化的目的是为了获得单一细胞系的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的，有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的杂交瘤细胞株。克隆化的方法很多，而最常用的是有限稀释法。 （1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。 （2）有限稀释法：将对数生长期的杂交瘤细胞用培养液作一定的稀释后，按每孔1个细胞接种在培养皿中，细胞增值后成为单克隆细胞系。第一次克隆化时加一定量的饲养细胞。由于第一次克隆化生长的细胞不能保证单克隆化，所以为获得稳定的单克隆细胞株需经2～3次的再克隆才成。应该注意的是，每次克隆化过程中所有有意义的细胞都
单克隆抗体的制备 摘要:单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具,在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用。近年来,随着分子生物学技术的发展,出现了嵌合单克隆抗体和由转基因小鼠、噬菌体展示技术、核糖体展示技术及共价展示技术所产生的单克隆抗体。这些技术将有效解决单克隆抗体的鼠源性等问题。下面主要讲述制备单抗的实验过程。 关键词：抗体，单克隆，肿瘤，细胞融合，淋巴细胞 现代生物技术制药工业始于1971年，现已创造出35个重要治疗药物，全球大约有2500多家公司，主要产品有重组蛋白质药品、重组疫苗和诊断、治疗用的单克隆机体三大类。我国自80年代在采用现代生物技术改造传统生物技术制药产业方面已取得初步成果。但我国生物技术诊断试剂、酶工程、动植物细胞工程医药产品、现代生物技术支撑技术、后处理技术和制剂技术等方面与国外还存在差距。 1．国外现代生物技术产业发展的现状 自1971年Cetus公司成立至今，现代生物技术制药工业已走完了二十五年的路程，创造出35个重要的治疗药物，目前已在治疗癌症、多发性硬化症、贫血、发育不良，糖尿病、肝炎、心力衰竭、血友病、囊性纤维变性和一些罕见的遗传性疾病中取得良好效果。在医药工业中，传统生物技术（包括近代生物技术）已为人类提供了许多重要药品，在保障人类生命健康和推动社会进步中发挥了巨大作用；现代生物技术以其特有的高新技术又为人类提供了传统生物技术难以获得的极微量的珍贵药品。由于这一系列现代生物技术新型药物的出现，使过去无法治疗的疑难疾病得到了治疗。同时，应用现代生物技术DNA重组，细胞融合以及细胞大规模培养等现代生物技术发展和提高传统生物技术的生产水平，为抗生素、氨基酸、维生素以及基体激素等药品的生产，构建了高产新菌株，创造新工艺，提高生产能力，降低生产成本，促进生产发展。
抗磷脂综合征最新诊断标准 临床标准 1.血管栓塞:至少有一次经影像学、超声多普勒或组织学证实的任何脏器或器官的动脉、静脉或小血管血栓形成发作 2.怀孕异常 (1)至少1次不能解释的孕10周或10周以上的胎儿死亡，或 (2)至少1次因先兆子痫、子痫或严重胎盘功能不全导致孕34周或34周以上的早产（新生儿形态正常），或 (3)3次或3次以上的孕10周前自发流产 实验室标准 1.抗心磷脂抗体：2次中高滴度的IgG或/和IgM型抗体阳性（间隔至少12周） 2.狼疮抗凝物：2次阳性（间隔至少12周） 3.抗β2GPI抗体：2次高滴度IgM或IgG型抗体阳性（间隔至少12周） 至少1条临床标准和至少1条实验室标准即可确诊 附原文： Diagnostic Criteria for APS Clinical criteria 1．Vascular thrombosis：At least one episode of arterial, venous, or small-vessel thrombosis in any tissue or organ confirmed by imaging, Doppler ultrasound, or histopathology 2．Pregnancy morbidity (1)At least one unexplained fetal death at or beyond 10 wk, or (2)At least one premature birth of morphologically normal neonate at or beyond 34 wk due to preeclampsia, eclampsia, or severe placental insufficiency, or (3)Three or more spontaneous pregnancy losses before 10 wk of gestation Laboratory criteria 1.Anticardiolipin antibodies: medium- or high-titer IgG and/or IgM on two occasions at least 12 wk apart 2.Lupus anticoagulant: on two occasions at least 12 wk apart 3.Detection of anti-β2GPI antibodies: high-titer IgM or IgG on two occasions at least 12 wk apart
妊娠合并抗磷脂抗体综合症 抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome，APS）是由抗磷脂抗体（antiphospholipid antibody，APA）引起，主要表现为血栓形成、血小板减少、习惯性流产、早发型重度子痫前期等一组临床症候群。临床上根据有无合并其他自身免疫性疾病，将APS分为原发性抗磷脂综合征（primary antiphospholipid syndrome，PAPS）和继发性抗磷脂综合征（secondary antiphospholipid syndrome，SAPS）。SAPS多见于系统性红斑狼疮患者，还可以继发于类风湿性关节炎、干燥综合征、强制性脊柱炎等其他自身免疫性疾病。另外还有一种较少见的APS，称为暴发性抗磷脂综合征（catastrophic antiphospholipid syndrome，CAPS），在APS中的发病率低于1％，常在短期内出现多器官功能衰竭，病死率高于50％。 一、诊断： 1、病史：反复流产，胎儿生长受限，妊娠中、晚期原因不明的胎死宫内，早发型重度子痫前期，血小板减少，血栓形成，自身免疫疾病或胶原病，自身抗体阳性等。当存在以上情况上应怀疑是否存在APS。 2、诊断标准：血管内血栓形成和产科不良结局中具有任何一项和实验检测见狼疮抗凝物质及中到强滴度的抗心脂抗体IgG或IgM。 血管内血栓形成指任何器官或组织中发生不明原因的静脉、动脉或小血管内血栓形成。 产科不良结局是指孕10周后的≥1次原因不明的胎儿流失、孕10周后的≥3次复发性流产或孕34周前因重度子痫前期或胎盘功能低下而引起的早产。 实验检测需间隔6周的两次结果相同。 二、治疗： 妊娠期间的APS患者需在产科、风湿免疫科医师的共同管理下，严密随诊母体病情变化及胎儿的发育情况，加强监护。在孕28周之前至少每月复查一次，孕28周至36周至少每2周复查一次，36周之后每周复查，每次产检常规监测患者血压、体重、尿蛋白。治疗主要以防止血栓形成，对症处理为主，主要措施包括抗凝治疗、糖皮质激素、免疫抑制剂、丙种球蛋白等。 1、抗凝治疗：对出现血栓而血小板< 100 ×109/L，患者抗凝治疗应慎重。血小板< 50 ×109/L 的患者禁用抗凝治疗，可以应用激素联合大剂量丙种球蛋白静脉注射治疗，血小板上升后再予抗凝治疗。 （1）阿司匹林：对APA阳性，既往有胎儿生长受限、胎死宫内的孕妇，于妊娠12周以后
抗磷脂综合征 ACA是抗磷脂抗体（antiphospholipikantibodies，APA）的成份之一。APA抗体是一组能与多种含有磷脂结构的抗原物质发生反应的抗体，其中包括狼疮抗凝物（lupusanticoagulant，LA)，抗磷脂酸抗（anti-phosphatidi cacidantibody)和抗磷脂酰丝氨酸抗体（anti-phosphatidylserineantibody)等。 抗心磷脂是pangborn 1941年从牛的心肌中分离出来的一种具有肮原性的磷脂，并加以命名，其在哺乳动 物肌中含量最高，每个心磷脂分子包含4个不饱和的脂肪酸，极易氧化。ACA是与心磷脂分子中带负电荷的磷酸二酯基团结合，但这种结合必须要有心磷脂分子中的甘油酯部分，如果以苄环取代引甘油酯部分，心磷脂的抗原性则消失。ACA分子中的脂肪酸部分为其抗原性的必需成分；ACA与其它分子中带负荷的磷酸二酯基团并不结合，而只与磷脂分子中的该成分起反应。近年Hotkko等研究发现，ACA仅与已氧化的心磷脂结合，而并不能进行氧化的还原性的心磷脂类似物结合。Koike认为心磷脂与ACA的IgG结合需ACA的辅因子β2糖蛋白I（β2－GPI）的存在。Harris建立的ACA固相放射免疫法（RLA）所检出的ACA现认为是针对心磷脂与β2－GPI的复合体该法具有较高的敏感性，以后经Loizou等改良成与放射免疫法效果相同而更为方便的ELISA法。由于该法具有高度敏感性，可定量、可检测抗体类及亚类、易于标准化等优点，目前已成为定量测定ACA的世界性标准。ACA 的免疫学分型有IgG和IgA和IgM三类，ACA的发生率男女无明显差异。研究证实，许多因素与ACA产生密切相关，常见的原因有： （1）自身免疫性疾病：如系统性红斑狼疮（SLE)、类风湿性关节炎（RA）的硬皮病等； （2）病毒感染：如腺病毒、风疹病毒、水痘病毒、腮腺炎病毒等感染； （3）其它疾病：如支原体系统疾病等； （4）口服某些药物：如氯丙嗪、吩噻嗪等； （5）少数无明显气质性疾病的正常人，特别是老年人。 抗磷脂综合征概述 抗磷脂综合征抗磷脂综合征（anti-phospholipid s yndrome,APS）是指由抗磷脂抗体（APL抗体）引起的一组临床征象的总称，主要表现为血栓形成，习惯性流产，血小板减少等。在同一患者可仅有上述一种表现，也可同时有多种表现。APS是一种自身免疫性疾病，目前公认的诊断标准是病人具有下列临床特点之一：全身各脏器动、静脉血栓：复发性流产；胎儿死亡以及由于胎儿宫内窘迫提前分娩致新生儿死亡；自身免疫性血小板减少，上述临床表现同时伴有病人血清中出现APL包括抗心磷脂抗体（ACA）和狼疮凝血因子（LA）。在临床上由于抗心磷脂抗体的特异性更强，与上述临床表现关系更密切，因而也称为抗心磷脂综合征（anti-cardiolipin s yndrome, ACS)。APL是一组对机体带磷脂负电荷的蛋白复合物产生的特异性自身抗体，机体内某些血浆蛋白如β2糖蛋白（β2－GPI)的分子上带有ACA的抗原决定簇，ACA与β2-GPI结合后能识别带负电荷的磷脂复合物，并使β2－GPI的表面结构发生变化而出现被ACA识别的表位，β2－GPI具有抑制凝血酶原、抑制二磷酸腺苷（ADP）等引起的血小板聚集及其表面生成凝血酶、并阻滞磷脂依赖性凝血反应，当ACA与其反应后易形成血栓。因此，当A CL结合到细胞上通过蛋白上的结合磷脂诱发促凝活性，磷脂在APS栓塞的发生机理中起到系统性红斑狼疮（SL E）中出现这种综合征时称为继发性抗磷脂综合征，而在非SLE患者中出现者称为原发性磷脂综合征。 抗磷脂综合征临床表现 1、血栓形成 抗磷脂综合征中最突出表现是血栓形成，可以发生在动脉，也可在静脉。其中最常见是反复深静脉血栓、包括肾，视网膜和下腔静脉血栓，但对患者威胁更大是动脉血栓。在ACA阳性的SLE患者组织病理中发现非炎性阻塞性血管病变呈节段性，病变虽少，却很严重。心肌内动脉有纤维性血栓形成，并引起心肌梗塞，毛细血管和小动脉被纤维性物质阻塞，这些病理改变很可能都是APL抗体作用的结果。