酶法测定膳食纤维的推荐方法：
试剂：1. 0.1M PBS, PH=0.6.
2. 4M HCl ; 4M NaOH
3. 95%乙醇，78%乙醇
4. 丙酮
酶：淀粉酶，蛋白酶，胰酶
步骤：1. 湿样品需要均质并冻干，所有样品都需要粉碎至粒径0.3mm。
2. 当脂肪含量大于6-8%时或者需要适当粉碎时，需要在室温下用石油醚抽脂15min。
3. 称取1g样品，精确到0.1mg，转移至锥形瓶。向其中加入25ml 0.1M的PBS，PH=6，充分悬浮样品。
4. 加入100ul 淀粉酶。用膜盖住锥形瓶顶部，沸水浴保温15min，偶尔摇晃一下。
5. 室温下放凉，加入20ml蒸馏水，用HCL调至PH=1.5，用少量蒸馏水冲洗电极。
6. 加入100mg 胃蛋白酶，顶部盖膜，40℃保温并搅拌60min.
7. 加入20ml蒸馏水，用NaoH调PH至6.8，少许蒸馏水冲洗电极。
8. 加入100ml 胰酶，顶部盖膜，40℃保温并搅拌60min.
9. 用HCl调PH至4.5.
10. 用干燥的称量过的G2坩埚（含0.5g硅藻土）作为辅助过滤设施。用20m蒸馏水分两次冲洗。
A. 滤液残留（不溶性膳食纤维）：
11. 用20ml 95%乙醇和20ml 丙酮分两次冲洗。
12. 105℃干燥至恒重，干燥器内冷却后称重（D1）。
13. 550℃灰化5h，干燥器内冷却后称重（I1）
B．滤液（可溶性膳食纤维）
14. 将滤液可冲洗水合并定容至100ml.
15. 加入微热（60℃）的95%乙醇400ml，沉淀1h（时间可以缩短）.
16. 用含有0.5g硅藻土的G2坩埚过滤。
17. 用20ml 78%乙醇、20ml 95%乙醇和20ml丙酮分别分两次冲洗。
18. 105℃烘至恒重，在干燥器内冷却后称重（D2）
19. 550℃至少灰化5h，干燥器内冷却后称重（I2）
空白：水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维空白值（B1和B2）的测定都是在没有添加样品的情况下进行。使用新的一批酶时，应该不定时检查空白值。
计算：W=样品质量（g）。D=干燥后的质量（g）。I=灰化后的质量（g）。B=无灰空白质量（g）
不溶性膳食纤维=D1-I1-B1
酶法测定膳食纤维的推荐方法： 试剂：1. 0.1M PBS, PH=0.6. 2. 4M HCl ; 4M NaOH 3. 95%乙醇，78%乙醇 4. 丙酮 酶：淀粉酶，蛋白酶，胰酶 步骤：1. 湿样品需要均质并冻干，所有样品都需要粉碎至粒径0.3mm。 2. 当脂肪含量大于6-8%时或者需要适当粉碎时，需要在室温下用石油醚抽脂15min。 3. 称取1g样品，精确到0.1mg，转移至锥形瓶。向其中加入25ml 0.1M的PBS，PH=6，充分悬浮样品。 4. 加入100ul 淀粉酶。用膜盖住锥形瓶顶部，沸水浴保温15min，偶尔摇晃一下。 5. 室温下放凉，加入20ml蒸馏水，用HCL调至PH=1.5，用少量蒸馏水冲洗电极。 6. 加入100mg 胃蛋白酶，顶部盖膜，40℃保温并搅拌60min. 7. 加入20ml蒸馏水，用NaoH调PH至6.8，少许蒸馏水冲洗电极。 8. 加入100ml 胰酶，顶部盖膜，40℃保温并搅拌60min. 9. 用HCl调PH至4.5. 10. 用干燥的称量过的G2坩埚（含0.5g硅藻土）作为辅助过滤设施。用20m蒸馏水分两次冲洗。 A. 滤液残留（不溶性膳食纤维）： 11. 用20ml 95%乙醇和20ml 丙酮分两次冲洗。 12. 105℃干燥至恒重，干燥器内冷却后称重（D1）。 13. 550℃灰化5h，干燥器内冷却后称重（I1） B．滤液（可溶性膳食纤维） 14. 将滤液可冲洗水合并定容至100ml. 15. 加入微热（60℃）的95%乙醇400ml，沉淀1h（时间可以缩短）. 16. 用含有0.5g硅藻土的G2坩埚过滤。 17. 用20ml 78%乙醇、20ml 95%乙醇和20ml丙酮分别分两次冲洗。 18. 105℃烘至恒重，在干燥器内冷却后称重（D2） 19. 550℃至少灰化5h，干燥器内冷却后称重（I2） 空白：水溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维空白值（B1和B2）的测定都是在没有添加样品的情况下进行。使用新的一批酶时，应该不定时检查空白值。 计算：W=样品质量（g）。D=干燥后的质量（g）。I=灰化后的质量（g）。B=无灰空白质量（g） 不溶性膳食纤维=D1-I1-B1
膳食纤维的测定方法 【摘要】膳食纤维被称为人体的第七营养素，对维持人体健康具有重要作用。膳食纤维通过发酵产物短链脂肪酸和对肠道菌群的调节作用从而影响肠道健康，本文对膳食纤维的测定方法进行了综述。 【关键词】膳食纤维；定义；测定 膳食纤维已被确认为与传统的六大营养素并列的“第七营养素”，对维持人体健康具有重要的生理作用。膳食纤维的理化特性概括起来是膨胀作用、持水能力、胶体形成、离子交换、改善胃肠微生物菌落和产生低热量等。这些特性产生的生理作用如下：使人产生饱腹感并抑制进食，从而预防肥胖；润肠通便，防治肠道疾病和便秘；调控血清胆固醇，降血压，防治冠状动脉硬化，胆石症和预防心脑血管疾病；降血糖，防治糖尿病等。 目前，结肠癌、炎症性肠炎和其他结肠紊乱疾病已经严重影响身体健康。膳食纤维为肠道微生物生长提供均衡的能量和营养，这是维持结肠生态系统平衡所必需的，另外，膳食纤维的发酵，特别是丁酸发酵，有利于结肠健康。目前国内外业已研究开发的膳食纤维共有6大类约30余种，其中实际生产和应用的不超过10种。 一、膳食纤维 膳食纤维（dietary fiber，df）被认为是食物中不被人体胃肠道消化酶水解，但能被肠道微生物消化的物质，特别是植物成分。膳食纤维包括非淀粉多糖，如纤维素、半纤维素、树胶、果胶，以及
木质素、抗性糊精和抗性淀粉。 二、膳食纤维的测定 世界卫生组织建议的总膳食纤维摄入量下限为每人每天27.0克，上限为每人每天40.0克。由此可见：膳食纤维检测结果的表示及产品标签标示等方面的问题应该作为膳食纤维研究中的又一个重要方面，而检测结果是由膳食纤维的检测方法和检测标准决定的，因此有必要建立统一的检测方法和标准。 df的不同测定方法因其测定原理不同结果差异较大。自20世纪60年代初以来，分析化学家们建立起大量的检测方法，具有代表性的几种方法为非酶重量法、酶-重量和酶-化学法。 （1）非酶重量法。非酶重量法又称粗纤维测定法，由einhof于1801-1809年建立。我国卫生部于1985发布了gb5009.10-85，一般用于测定粗纤维即纤维素和木质素、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维，以上四种方法多应用于饲料及宠物食品中的纤维分析。aoac 993.21也只适用于淀粉含量2%，且总膳食纤维含量10%的食物及加工食品。非酶重量法不能满足目前食物成分分析时对sdf和idf定量的需要。 （2）酶-重量法。酶重量法是20世纪80年代发展起来的，模拟df在人消化道内进行的化学反应进行检测，原理是分别用热稳定的α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化样品，用乙醇、丙酮冲洗，干燥后称重。该法适用于谷类、蔬菜、保健食品的测定，为aoac认可，是目前国际上应用最广泛的方法。
膳食纤维标准方法 膳食纤维是指人体无法消化吸收的碳水化合物类物质。膳食纤维对人体健康具有重要的作用，包括促进消化系统健康、调节血糖和胆固醇水平、预防便秘以及控制体重等。为了准确测量食物中的膳食纤维含量，需要进行标准方法的测定。 目前，国际通用的膳食纤维含量测定方法有两种：AOAC （Association of Official Analytical Chemists）方法和ISO （International Organization for Standardization）方法。 1. AOAC方法：AOAC方法是美国官方方法，也是国际上最常用的方法。根据AOAC 991.43或AOAC 985.29方法，首先将食物样品经过一系列处理，如酶解、水解等，获得可溶性和不可溶性纤维。然后，借助酶解、滴定、重量等技术手段，可以得到总纤维、不可溶性纤维和可溶性纤维的含量。 2. ISO方法：ISO方法是由国际标准化组织制定的方法，与AOAC方法相似。ISO 13904和ISO 15954方法是常用的ISO 方法。这些方法主要利用酶解、水解、甲弹法等技术，将膳食纤维分为不可溶性纤维和可溶性纤维，并使用滴定、重量等手段进行测定。 无论使用AOAC方法还是ISO方法，都需要进行样品的预处理、酶解、滴定等步骤，以获得准确的膳食纤维含量。这些方法在实验室条件下进行，需要仪器设备和专业操作人员进行操作。
需要注意的是，虽然AOAC和ISO方法都是国际通用的标准方法，但在具体的实验操作过程中，可能会存在一些差异，因此在测定过程中应当依据相应的方法详细操作，并遵循实验室的操作规程。
酶-重量法 1.原理： 样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。总膳食纤维（TDF）是先酶解，然后用乙醇沉淀，再将沉淀物过滤，将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗，干燥称重。不溶性和可溶性膳食纤维（IDF和SDF）是酶解后将IDF过滤，过滤后的残渣用热水冲洗，经干燥后称重。SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀，然后再过滤，干燥，称重。 TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。 2.适用范围 AOAC991.43 本方法适用于各类植物性食物和保健食品。 3.仪器 3.1烧杯：400或600ml高脚型。 3.2 过滤用坩埚：玻料滤板，美国试验和材料学会（ASTM）40-60μm，Pyrex 60ml （Corning No.36060 buchner，或同等的）。如下处理： （1）在灰化炉525℃灰化过夜。炉温降至130℃以下取出坩埚。 （2）用真空装置移出硅藻土和灰质。 （3）室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。 （4）用水和去离子水冲洗坩埚；然后用15ml丙酮冲洗然后风干。 （5）在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土，在130℃烘干恒重。 （6）在干燥器中冷却1小时，记录坩埚加硅藻土重量，精确至0.1mg。 3.3 真空装置： （1）真空泵或抽气机作为控制装置。 （2） 1L的厚壁抽滤瓶。 （3）与抽滤瓶相配套的橡皮圈。 3.4振荡水浴箱： （1）自动控温使温度能保持在98±2℃。 （2）恒温控制在60℃。 3.5 天平：分析级，精确至±0.1mg。 3.6马福炉：温度控制在525±5℃。 3.7干燥箱：温度控制在105和130±3℃。 3.8干燥器：用二氧化硅或同等的干燥剂。干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。
酶-重量法（百度文库方法） 1.原理：样品分别用α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖苷酶进行酶解消化以去除蛋白质和可消化的淀粉。总膳食纤维（TDF）是先酶解，然后用乙醇沉淀，再将沉淀物过滤，将TDF残渣用乙醇和丙酮冲洗，干燥称重。不溶性和可溶性膳食纤维（IDF和SDF）是酶解后将IDF过滤，过滤后的残渣用热水冲洗，经干燥后称重。SDF是将上述滤出液用4倍量的95%乙醇沉淀，然后再过滤，干燥，称重。TDF、IDF和SDF量通过蛋白质、灰分含量进行校正。 2.适用范围AOAC991.43 本方法适用于各类植物性食物和保健食品。 3.仪器 3.1烧杯：400或600ml高脚型。 3.2 过滤用坩埚：玻料滤板，美国试验和材料学会（ASTM）40-60μm，Pyrex 60ml（Corning No.36060 buchner，或同等的）。如下处理：（1）在灰化炉525℃灰化过夜。炉温降至130℃以下取出坩埚。（2）用真空装置移出硅藻土和灰质。（3）室温下用2%清洗溶液浸泡1小时。（4）用水和去离子水冲洗坩埚；然后用15ml丙酮冲洗然后风干。（5）在干燥的坩埚中加0.5g硅藻土，在130℃烘干恒重。（6）在干燥器中冷却1小时，记录坩埚加硅藻土重量，精确至0.1mg。 3.3 真空装置：（1）真空泵或抽气机作为控制装置。（2）1L的厚壁抽滤瓶。（3）与抽滤瓶相配套的橡皮圈。 3.4振荡水浴箱：（1）自动控温使温度能保持在98±2℃。（2）恒温控制在60℃。 3.5 天平：分析级，精确至±0.1mg。 3.6马福炉：温度控制在525±5℃。 3.7干燥箱：温度控制在105和130±3℃。 3.8干燥器：用二氧化硅或同等的干燥剂。干燥剂两周一次在130℃烘干过夜。3.9 PH计：注意温控，用pH4.0、7.0和10.0缓冲液标化。 3.10 移液管及套头：容量100μl和5ml。 3.11 分配器或量筒：（1）15±0.5ml，供分配78%的乙醇，95%的乙醇以及丙酮。（2）40±0.5ml，供分配缓冲液。 3.12. 磁力搅拌器和搅拌棒。 4. 试剂全过程使用去离子水，试剂不加说明均为分析纯试剂 4.1 乙醇溶液：（1）85%：加895ml95%乙醇在1L量筒中，用水稀释至刻度。（2）78%：加821ml95%乙醇在1L量筒中，用水稀释至刻度。 4.2 丙酮： 4.3 供分析用酶：在0-5℃下储存。（1）热稳定α-淀粉酶溶液：Cat. No. A3306，Sigma Chemical Co.，St. Louis，MO63178，或Termamyl 300L，Cat. No. 361-6282，Novo-Nordisk，Bagsvaerd，Denmark，或等效的酶。（2）蛋白酶：Cat. No. P3910，Sigma Chemical Co.，或等效的。当天用MES/TRIS缓冲液中现配50mg/ml酶溶液。（3）淀粉葡糖苷酶溶液：Cat. No. AMG A9913，Sigma Chemical Co.，或等效的。 4.4 硅藻土：酸洗（Celite 545 AW，No.C8656，Sigma Chemical Co.，或等效的）。 4.5 洗涤液：两者挑一。（1）铬酸：120g重铬酸钠Na2Cr2O7·2H2O，1000ml蒸馏水和1600ml浓硫酸。（2）实验室用液体清洁剂，预备急需清洗的（Micro，International Products Corp.，Trenton，NJ08016，或等效的）。用水配制2%溶液。 4.6 MES-TRIS缓冲液：0.05mol/L，温度在24℃时pH值为8.2。（1）MES：2-（N-吗啉代）磺酸基乙烷（No.M-8250，Sigma Chemical Co.或等效的）。（2）TRIS：三羟（羟甲基）氨基甲烷（No.T-1503，Sigma Chemical Co.或等效的）。在1.7L的蒸馏水中溶解19.52gMES和12.2gTRIS，用6mol/L NaOH调pH到8.2，用水定容至2L。（注意：24℃时的pH为8.2，但是，如果缓冲液温度在20℃，pH就为8.3，如果温度在28℃，pH为8.1。为了使温度在20-28℃之间，需根据温度调整pH值。） 4.7 盐酸溶液：0.561mol//L，加93.5ml6mol/L盐酸到700ml水中，用水定容至1L。 5. 操作方法 5.1. 样品制备：（1）固体样品：如果样品粒度＞0.5mm，研磨后过0.3-0.5mm（40-60目）筛。（2）高脂肪样品：如果脂肪含量＞10%，用石油醚去脂。每克样品用25ml，每次提取完静置一会儿再小心将烧杯倾斜，慢慢将石油醚倒出，共洗三次。（3）高碳水化合物样品：如果样品干重含糖＞50%，用85%乙醇去除糖份，每克样品每次10ml，共洗三次轻轻倒出，然后在40℃烘箱中不时翻搅干燥过夜，并研磨过0.5mm筛。 5.2. 样品消化（1）准确称取双份1.000±0.005g样品（M1和M2），置于高脚烧杯中。（2）在每个烧杯中加入40ml MES-TRIS缓冲液，在磁力搅拌器上搅拌直到样品完全分散。（防止团块形成，使受试物与酶能充分接触）。（3）用热稳定的淀粉酶进行酶解处理：加100μl热稳定的淀粉酶溶液，低速搅拌。用铝箔片将烧杯盖住，在95-100℃水浴中反应30分钟。（起始的水浴温度应达到95℃）。（4）冷却：所有烧杯从水浴中移出，凉至60℃。打开铝箔盖，用刮勺将烧杯边缘的网状物以及烧杯底部的胶状物刮离，以使样品能够完全的酶解。用10ml蒸馏水冲洗烧杯壁和刮勺。（5）用蛋白酶进行酶解处理：在每个烧杯中各加入100μl蛋白酶溶液。用铝箔盖住，在60℃持续摇动反应30分钟（开始时的水浴温度应达60℃），使之充分反应。（6）pH值测定：30分钟后，打开铝箔盖，搅拌中加入5ml0.561mol/L HCL至烧杯中。60℃时用1mol/L NaOH溶液或1mol/L HCL溶液调最终pH为4.0-4.7。（注意：当溶液为60℃时检测和调整pH，因为在较低温度时pH会偏高。）（7）用淀粉葡糖苷酶溶液酶解处理：搅拌同时加100μl淀粉葡糖苷酶溶液。用铝箔盖住，在60℃持续振摇反应30分钟，温度应恒定在60℃。 5.3 测定 5.3.1.总的膳食纤维测定（1）用乙醇沉淀膳食纤维：在每份样品中，加入预热至60℃的95%乙醇225ml，乙醇与样品的体积比为4∶1。室温下沉淀1小时。（2）过滤装置：用15ml78%乙醇将硅藻土湿润和重新分布在已称重的坩埚中。用适度的抽力把坩埚中的硅藻土吸到玻板上。（3）酶解过滤，用78%乙醇和刮勺转移所有内容物微粒到坩埚中。（注意：如果一些样品形成胶质，用刮勺破坏表面，以加速过滤。）
检测膳食纤维的方法 膳食纤维是指那些不能被人体的消化系统吸收和消化的多糖和木质素物质。膳食纤维对于保持肠道健康和预防心血管疾病等具有重要作用。因此，准确测定膳食纤维的含量对于我们了解食物的营养价值以及饮食指导至关重要。以下将介绍几种常用的检测膳食纤维的方法。 一、重量法（Gravimetric Method） 重量法是膳食纤维分析中最常用的方法之一。其基本原理是通过将样品持续加热至高温，使样品中的有机物燃尽，进而得到膳食纤维的含量。该方法的一个主要优点是可以同时测定膳食纤维的水溶性和不溶性部分。 二、酶解法（Enzymatic-Gravimetric Method） 酶解法是一种常用的分析膳食纤维的方法。该方法通过使用特定的消化酶来将非淀粉多糖和木质素水解为发酵产物，然后通过差异重量法测定发酵产物的重量来计算膳食纤维的含量。酶解法具有准确、重复性好的特点，被广泛应用于食品分析实验室。 三、液相色谱法（Liquid Chromatography） 液相色谱法是一种高效、准确的分析膳食纤维的方法之一。该方法通过将样品溶解于适当的溶剂中并经过色谱柱分离，运用不同的检测器来检测膳食纤维的含量。液相色谱法具有分离度高、准确性好以及可以获得更多关于多糖和木质素的组成信息的优点。
四、气相色谱法（Gas Chromatography） 气相色谱法也是一种常用的分析膳食纤维的方法之一。该方法通过将样品进行预处理，如提取和衍生化，然后通过气相色谱仪来分离和定量膳食纤维的成分。气相色谱法主要适用于分析低分子量的挥发性膳食纤维成分。 五、光学显微镜法（Optical Microscopy） 光学显微镜法是一种常用的视觉化分析膳食纤维的方法之一。该方法通过显微镜观察样品中的颗粒形态和纹理来判断膳食纤维的含量。光学显微镜法具有简便易行、成本低的优点，适用于快速初步判定膳食纤维含量。 需要指出的是，不同方法可能会对膳食纤维的不同成分产生不同的结果。因此，在实际应用中，常常需要结合多种方法来对膳食纤维进行综合分析，以提高测定结果的准确性。此外，不同国家和地区对膳食纤维的定义和测定方法也会有所不同，因此在进行测定时应该参考相应的标准和规范。
测量食品中膳食纤维的方法 测量食品中膳食纤维的方法有很多种，下面将简要介绍几种常用的方法。 1. 酶解-重结晶法： 这是一种常见的方法，用于测量食品中的可溶性和不可溶性膳食纤维。首先，将食品样品加入含有胰蛋白酶和淀粉酶的酶解液中进行酶解。酶解后，通过滤纸将不溶性物质分离出来。然后，将滤纸上的不溶性物质洗涤几次，最后将其干燥并称重。可溶性膳食纤维通过减去不溶性物质的质量来计算。 2. 遥感法： 这是一种非常便利的方法，可以用于大规模样品的测量。遥感法利用红外光谱仪来分析和测量食品中的膳食纤维含量。红外光谱仪发出红外线，不同的膳食纤维成分会吸收不同的红外光谱。通过分析吸收率，可以确定膳食纤维含量。 3. 酶解-HPLC法： 这是一种常用的高效液相色谱法，可以对食品中的膳食纤维进行测量。首先，将食品样品加入含有酶解液的容器中进行酶解。然后，通过HPLC分离和定量几种常见的膳食纤维成分，如纤维素、半纤维素和果胶。 4. 酶解-重结晶-GC法： 这是一种分析食品中总膳食纤维含量的方法。首先，将食品样品加入酶解液中进行酶解。然后，通过过滤和多次洗涤，将不溶性物质分离出来。接下来，将不溶
性物质进行重结晶，将其中的膳食纤维组分与其他物质分离开来。最后，使用气相色谱法（GC）对膳食纤维组分进行定量分析。 5. 倍半粗纤维法： 这是一种常用的简化方法，用于测量食品中的总膳食纤维含量。首先，将食品样品加入酸性和碱性溶液中，使其除去其他成分。然后，通过电子天平测量样品在空气和水之间的重量差。此差值代表食品中的总膳食纤维含量。 以上是几种常用的方法，用于测量食品中的膳食纤维含量。不同方法适用于不同的食品和实验目的。在实际应用中，可以根据需要，选择合适的方法进行测量。
食品中膳食纤维含量的测定与分析 随着人们健康意识的提升，越来越多的人开始关注食物中的营养成分，其中膳食纤维作为一种重要的营养物质备受关注。膳食纤维在维持肠道健康、调节血糖和血脂、预防肥胖等方面起着重要的作用。那么，如何准确测定食品中的膳食纤维含量呢？ 一、测定方法 目前常用的测定食品中膳食纤维含量的方法包括酶解-重量法（AOAC 985.29）和酶解-HPLC法（AOAC 991.43），其中HPLC法相对较为准确和简便。在使用HPLC法测定膳食纤维含量时，通常采用两种酶解方法，即使用α-淀粉酶和葡萄糖酸酶进行酶解。通过比较未酶解样品和酶解后样品中的膳食纤维含量，可以计算出样品中的膳食纤维含量。 二、食品中膳食纤维的分析 1.粗纤维含量的分析 粗纤维是指食物中不容易被消化吸收的纤维部分，一般包括纤维素、半纤维素和木质素等。粗纤维含量的分析是衡量食品中纤维素含量的一种方法，一般通过水解和洗涤的方式来进行。首先，将食品样品经过一定时间的水解，然后用水或酸进行洗涤，最后干燥并称重。所得的质量差值即为粗纤维的含量。 2.溶解性膳食纤维含量的分析 溶解性膳食纤维是指在水中可溶解的膳食纤维，如果胶、树胶等。溶解性膳食纤维含量的分析主要通过酶解-过滤的方法进行。首先，将食品样品经过一定时间的酶解，然后用滤液进行过滤，将溶解性膳食纤维从样品中分离出来。最后，将滤渣干燥并称重，所得的质量差值即为溶解性膳食纤维的含量。 3.不溶性膳食纤维含量的分析
不溶性膳食纤维是指在水中不溶解的膳食纤维，如纤维素、半纤维素等。不溶 性膳食纤维含量的分析主要通过酶解-过滤的方法进行。首先，将食品样品经过一 定时间的酶解，然后用滤液进行过滤，将溶解性膳食纤维从样品中分离出来。将滤渣干燥并称重，所得的质量即为不溶性膳食纤维的含量。 三、膳食纤维含量的参考范围 根据世界卫生组织的建议，成年人每天的膳食纤维摄入量应为25-30克。然而，现代人的饮食结构大部分偏向高脂肪、高糖分的食物，膳食纤维的摄入量普遍不足。为了增加膳食纤维的摄入，可以选择多吃富含膳食纤维的食品，如水果、蔬菜、全谷物等。 四、膳食纤维的补充剂 对于那些无法从日常饮食中摄入足够膳食纤维的人群，膳食纤维的补充剂可以 作为一种选择。膳食纤维的补充剂通常以粉末、胶囊或片剂等形式存在，可以在饭前或饭后服用。然而，选择膳食纤维补充剂时需要注意产品的质量和成分，最好咨询医生或营养师的建议。 总结起来，食品中膳食纤维含量的测定与分析是了解食品营养价值的重要方法 之一。通过准确测定食品中的膳食纤维含量，可以为人们合理搭配饮食提供参考，从而维持健康的生活方式。同时，多吃富含膳食纤维的食物和适当补充膳食纤维的补充剂也是保持健康的好方式。
食品中膳食纤维的测定 膳食纤维为植物的可食部分，不能被人体小肠消化汲取，对人体有健康意义，植物性食品中聚合度≥3的碳水化合物和木质素等聚合物的总和，包括纤维素、半纤维素、果胶、菊粉等。按照溶解性，膳食纤维被分为可溶性膳食纤维(insoluble dietary fiber，IDF)和不溶性膳食纤维(soluble dietary fiber，SDF)，其中不溶性膳食纤维在食物中含量最为丰盛，主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质等，谷物的麸皮、薯、豆类及蔬菜、水果等食品都是不溶性膳食纤维的良好来源；可溶性膳食纤维则富含于燕麦、大麦、水果和一些豆类中。食物中的膳食纤维含量与植物成熟度、食品加工程度有关。膳食纤维在维持人体健康、预防疾病方面所起的独特作用已被越来越多的讨论所证明，成为人类膳食中不行缺少的重要物质之一。自20世纪80年月以来，西方一些国家已间续将膳食纤维作为一种功能性食品原料用于食品工业，现在市场上标明富含膳食纤维的食物和保健食品越来越多。因此膳食纤维的测定对食品生产、食品开发以及食品养分价值评定等具有重要意义。膳食纤维的测定办法主要有非酶-分量法、酶-分量法和酶化学法。下面介绍酶-分量法测定食品中总的、可溶性和不溶性膳食纤维(依据 GB/T5009.88-2008)。 1.原理取干燥试样，经a-淀粉酶、蛋白酶和葡萄糖苷酶酶解消化以去除蛋白质和淀粉，酶解后样液用沉淀、过滤，残渣用乙醇和丙酮洗涤，干燥后物质称重即为总膳食纤维(total dietary fiber，TDF)残渣；另取试样经上述三种酶酶解后挺直过滤，残渣用热水洗涤，经干燥后称重，即得不溶性膳食纤维残渣；滤液用4倍体积的95%沉淀、过滤、干燥后称重，得可溶性膳食纤维残渣。以上所得残渣干燥称重后，分离测定蛋白质和灰分。总膳食纤维(TDF)、不溶性膳食纤维(IDF)和可溶性膳食纤维(SDF)的残渣扣除蛋白质、灰分和空白即可计算出试样中总的、不溶性和可溶性膳食纤维的含量。 2.结果计算 (1)空白的质量按下式计算：式中mB——空白的质量，mg mBR1、mBR2——双份空白测定的残渣质量，mg mpB——残渣中蛋白质 第1页共2页
酶一化学法 酶化学法最早在1969年由Southgate提出， 主要是从化学分析入手，通过测定其组成测其含 量．目前应用于分析的主要为AOAC994．13和Englyst方法． AOAC994．13即Uppsala方法，此方法将DF 定义为不能被淀粉酶消化的多糖和Klason木质 素．首先用热稳定一淀粉酶和淀粉葡糖苷酶除 去样品中的淀粉，然后通过80％乙醇沉淀SDF． 得到的SDF和IDF残渣经硫酸水解，比色法测定 葡糖醛酸，GLC(气液色谱)定量中性糖，最后用重 量法测定Klason木质素，即不含灰分、不溶于酸 的残渣．通过对中性糖、葡糖醛酸、Klason木质素 的定量，确定DF含量． Englyst方法将DF定义为植物性食物中 的非淀粉多糖(非一葡聚糖)．首先用二甲基二 硫亚砜(DMSO)溶解样品，经胰酶(pancreatin)和 支链淀粉酶(pullulanase)水解后除去淀粉，酶消 化液中加入乙醇后，形成不溶性沉淀(NSP)用硫 酸水解，生成的糖可用比色法(测定酸性糖和中 性糖)和GLC法(只测定中性糖)测定，最后定量 NSP(非淀粉多糖)．以上方法稍加改动，用磷酸缓 冲液浸提替代乙醇沉淀，即可测定不溶性NSP并 间接定量可溶性NSP． 与AOAC法相比，AOAC方法测定的DF包括 NSP、抗性淀粉(RS)中的一部分、树胶、粘胶和木 质素等成分，而Englyst将膳食纤维定义为非淀粉 多糖(NSP)，Uppsala测定的是非淀粉多糖和Kla—son木质素，因此AOAC法测定的DF值一般比Englyst和Uppsala法测定的DF值高．Peter¨。。用AOAC和Uppsala两种方法测定了不同实用真菌 中的膳食纤维含量，虽然两种方法的结果都无显 著差异，但是用AOAC法测得的DF含量比用up—psala法测得的DF含量值要高，与理论研究相 一致． Englyst法采用单试管操作，精确度高，重现 性好，可分别测定总、不可溶、可溶性的膳食纤维， 经过适当的变动还可测定纤维素及非纤维素的多 糖(NCP)，缺点是不能测定木质素和抗性淀粉．Uppsala法不仅测定了总膳食纤维的含量，同时也 测定了其化学组成，弥补了Englyst法的不足．但 该测定方法较为复杂，一般适合作为研究手段． 酶一化学法是建立在把膳食纤维定义为非淀 粉多糖的基础上，不能测定多酚化合物、纤维醇等
食品中膳食纤维含量的快速测定方法改进研 究 食品中膳食纤维含量的准确测定一直是食品科学领域中的一个重要研究方向。 膳食纤维是指食物中不能被人体消化酵素降解的多糖、寡糖和纤维素等成分。它在保持肠道健康、预防肥胖和糖尿病等慢性疾病方面扮演着重要的角色。然而，传统的膳食纤维测定方法常常耗时且繁琐，迫切需要一种快速、准确的测定方法来满足实际需求。 近年来，随着食品科学和技术的发展，一些新的快速测定方法开始被应用到膳 食纤维含量的测定中。其中，酶解法、色谱法和光谱法是目前较为常见的快速测定方法。 酶解法是一种常用的快速测定膳食纤维的方法。它利用一些特定的酶，如纤维 素酶和木聚糖酶，来降解食物中的纤维素和寡糖等成分。然后通过测定降解后的产物来计算食品中的膳食纤维含量。这种方法的优点是操作简单、耗时较短，但也存在一些缺点，比如受到食物基质的影响较大，且对于寡糖等特殊成分的测定效果较差。 色谱法是另一种常见的快速测定膳食纤维的方法。它利用高效液相色谱法或气 相色谱法分离和测定食物中的纤维素、赖氨酸和葡萄糖等成分。这种方法具有分离效果好、测定结果准确的优点，但也存在一些缺点，比如设备复杂、运行成本高等。 光谱法是近年来发展起来的一种新型快速测定膳食纤维的方法。它利用红外光 谱或近红外光谱等技术，通过测量食品样品吸收或散射光的强度来预测样品中的纤维素和葡萄糖等成分的含量。这种方法具有非破坏性、快速、简单的特点，适用于大规模样品的快速分析。与传统方法相比，光谱法有更高的分析效率和更低的成本，但也需要建立一个可靠的模型来校正和校验。
在食品科学领域中，各种方法的研究是不断进行的。比如，近年来一些学者开始利用纳米材料和生物传感技术来改进膳食纤维的测定方法。纳米材料具有较高的比表面积和化学反应活性，可以提高测定的灵敏度和准确性。生物传感技术则可以通过生物分子的特异性识别来实现对目标成分的快速测定。这些新技术和方法为快速测定膳食纤维提供了新的思路和途径。 总之，食品中膳食纤维含量的快速测定方法的改进研究是食品科学领域中的热点课题之一。目前，酶解法、色谱法和光谱法是常用的测定方法，但都存在一定的局限性。因此，需要进一步研究新的技术和方法，以实现膳食纤维的快速、准确测定，为食品科学和健康领域的研究提供更可靠的数据支持。同时，应注重多学科的跨界合作，整合各种资源和技术，共同促进膳食纤维测定方法的改进和创新。
食物中不溶性膳食纤维的国标测定 方法 【GB/T 12394—1990】 食物中不溶性膳食纤维的测定方法 1 主题内容与适用范围 本标准规定了食物中不溶性膳食纤维的中性洗涤剂测定方法。 本标准适用于各类植物性食物和含有植物性食物的混合食物中不溶性膳食纤维的测定。其最小检出限为0.1mg。 2 原理 在中性洗涤剂的消化作用下，样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解除去，不能消化的残渣为不溶性膳食纤维，主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等，并包括不溶性灰分。 3 试剂和材料 实验用水为蒸馏水。试剂不加说明为分析纯试剂。 3.1 无水亚硫酸钠。 3.2 石油醚：沸程30～60℃。 3.3 丙酮。 3.4 甲苯。 3.5 中性洗涤剂溶液：将18.61g EDTA二钠盐和6.81g四硼酸钠(含 O)置于烧杯中，加水约150mL，加热使之溶解，将30g月桂基硫酸钠10H 2 (化学纯)和10mL乙二醇独乙醚(化学纯)溶于约700mL热水中，合并上述二种溶液，再将4.56g无水磷酸氢二钠溶于150mL热水中，再并入上述溶液中，用磷酸调节上述混合液至pH6.9～7.1，最后加水至1000mL。 3.6 磷酸盐缓冲液：由38.7mL 0.1mol/L磷酸氢二钠和61.3mL 0.1mol/L磷酸二氢钠混合而成，pH为7。 3.7 2.5%α－淀粉酶溶液：称取2.5gα－淀粉酶(美国Sigma公司，VI－A型，产品号6880)溶于100mL，pH7的磷酸盐缓冲溶液中，离心、过滤，滤过的酶液备用。 3.8 耐热玻璃棉(耐热130℃，美国Corning玻璃厂出品，PYREX 牌。其他牌号也可，只需耐热并不易折断的玻璃棉)。 4 仪器和设备 4.1 实验室常用设备。 4.2 烘箱：110～130℃。 4.3 恒温箱：37±2℃。 4.4 纤维测定仪。 4.5 如没有纤维测定仪，可由下列部件组成： 4.5.1 电热板：带控温装置。
“粗纤维”一词最早用于营养学研究;并被认为是对人体不起营养作用的一种非营养成分..然而近年来分析技术的发展和对这种“非营养素”认识的提高;“粗纤维”也被“膳食纤维”所替代;而且赋予更丰富的内容..膳食纤维大致分为二类;一类为可溶性的;一类为不可溶性的;二者合并即为总的膳食纤维..它主要包括植物细胞壁的成分如纤维素、半纤维素、果胶、木质素、角质和二氧化硅等成分;最早曾有中型洗涤剂法和酸性洗涤剂法等;测定结果常不能包括全部..本章所介绍的Englist建立的、AOAC推荐的方法..它主要测定为可溶性的膳食纤维、不可溶性膳食纤维和总膳食纤维三种.. 膳食纤维实际上属于碳水化合物的范畴.. 膳食纤维的物化特性主要包括5个方面： 1很高的持水力.. 2对阳离子有结合和交换能力.. 3对有机化合物有吸附螯合作用.. 4具有类似填充剂的充盈作用.. 5可改变肠道系统中的微生物群系组成.. 膳食纤维的测定方法主要有三种;包括非酶－重量法、酶重量法和酶化学法..非酶重量法是一个比较古老的方法;只能用于粗纤维的测定..而中性洗涤剂法也只能测定不溶性的膳食纤维..酶重量法却可以测定总膳食纤维包括可溶和不可溶性膳食纤维;也是AOAC的标准方法..酶化学法是AOAC最新承认的另一个标准方法;但此法易受仪器条件的限制;不适用于普通实验室..目前国标采用的还是中性洗涤剂法;食物成分表中列出的数据都是不溶性膳食纤维;所以下文先介绍不溶性膳食纤维的测定方法.. 一中性洗涤剂法 1. 原理 在中性洗涤剂的消化作用下;样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解除去;不能消化的残渣为不溶性膳食纤维;主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等;并包括不溶性灰分.. 2. 适用范围 GB 12394—90适用于各类植物性食物和含有植物性食物的混合食物中
总膳食纤维（TDF）的国标测定方法 （符合AOAC） 总膳食纤维（TDF）的国标测定方法（符合AOAC） 空白实验应该在整个实验过程中进行，最后要从结果中扣除以去掉试剂等因素对结果的影响。将1克样品，称重精度到0.1毫克,在400毫升的烧杯中,混合到50毫升PH为6的磷酸缓冲溶液中,加磁力搅拌子,加100微生的热稳定的α-淀粉酶溶液,彻底混合,盖上铝箔。放到100度的水浴中，让样品温度保持在95—100度保持15分钟，控制好温度，然后从水浴中移出，冷却到室温。 用10毫升的0.275N 的氢氧化钠溶液调节PH到7.5,向GDE中添加冷水将温度降到60度,加100微升的蛋白酶溶液(50毫克放在1毫升磷酸盐缓冲液中).烧杯盖上滤箔连续搅拌的情况下在60度时培养30分钟。冷却到室温，用0.325N 的盐酸调节PH到4.0—4.6,用PH计控制PH值。添加300毫升的淀粉葡(萄)糖苷酶（葡萄糖淀粉酶）溶液，盖上铝箔在连续搅拌的情况下60度水浴培养30分钟。拿掉搅拌子，280毫升的95%的乙醇预热60度，在室温下沉降60分钟。完全干净的玻璃坩埚，放在525度的马弗炉烘干1小时，冷却到室温，用水清洗，在空气中晾干。添加0.5克的硅藻土,玻璃坩埚在130度的烘箱中恒重一个小时,精度0.1毫克。同硅藻土一起称重并放在CSF6 （FIWE6）的过滤器中，利用真空。用漏斗转移酶消解完的沉淀物，滤出液用导管进行收集。 用20毫升的78%的乙醇溶液洗涤沉淀物3次，10毫升的95%的乙醇溶液洗涤2次，10毫升的丙酮溶液洗涤2次。如果胶状的滤膜使的过滤能力下降，保持液体状态，用细微的空气来吹表面（仪器上操作），整个清洗过程需要半个小时。 在105度的烘箱中（70度的真空箱中）将玻璃坩埚连同沉淀物和硅藻土一起烘干一个晚上，冷却到室温，称重精度为0.1毫克。沉淀物的重量是最终的重量减掉坩埚的重量和硅藻土的重量（需要的重复样）。 其中一个沉淀物的样用凯氏方法分析不能消化的蛋白含量（N*6.25）,第二个沉淀物的样在525度的马弗炉中烘干5个小时,在干燥箱中冷却称重(精度0.1毫克),灰份的重量是前步的总重量减掉坩埚和硅藻土的重量后剩下的重量。 计算 %空白中的蛋白百分含量（SB）=空白中的蛋白含量/空白的残留量*100 %空白中灰分含量（CB）=空白中的灰分量/空白的残留量*100 空白量=空白中的残留物*[1-（PB+CB）/100] %样品的蛋白含量（SP）=样品中的蛋白量/样品残留物量*100 %样品灰分含量（SA）=样品中灰分量/样品残留物量*100 %TDF={残留物量-[（PC+CC）*残留物量/100]-空白量}/样品重量*100
酶重量法-液相色谱法测定食品中总膳食纤维 余枭然;余慧剑 【期刊名称】《河南科技》 【年(卷),期】2021(40)28 【摘要】本研究利用酶重量法-液相色谱法,测定含水溶性膳食纤维食品的总膳食纤维含量。采用酶重量法测定试样中不溶性膳食纤维(Insoluble Dietary Fiber,IDF)和高分子质量可溶性膳食纤维(Soluble Dietary Fiber,SDF)的含量,采用液相色谱法测定试样的低分子质量抗性麦芽糊精(Resistant Malto Dextrin,RMD)含量。液相色谱法的方法检出限为0.142%,定量限为0.474%,线性方程为y=1.207x+0.030,相关系数R^(2)为0.999,加标回收率为96.6%~99.7%,相对标准偏差(Relative Standard Deviation,RSD)为1.53%~1.69%(次数n=6)。精密度试验以酶重量法-液相色谱法测试样品6份,平均含量为65.78%,RSD为0.52%。实验结果表明,该方法灵敏度、准确率高,适用于添加抗性淀粉、含低分子质量的抗性糊精等水溶性膳食纤维的食品中总膳食纤维的测定。 【总页数】4页(P127-130) 【作者】余枭然;余慧剑 【作者单位】上海工程技术大学;劲研(上海)生物科技有限公司 【正文语种】中文 【中图分类】R151.3 【相关文献】
1.应用酶重量法测定全麦粉的总膳食纤维 2.酶——重量法测定食品中的膳食纤维 3.应用酶-重量法测定食物中的总膳食纤维 4.关于测定粮食中总纤维素的中性净化法和酶重量法的改良 5.食品中总的、不溶性及可溶性膳食纤维的酶-重量测定法 因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买
酶法制备芋头不溶性膳食纤维的研究 作者：黄雪邓天祥朱家琪李丽何莉萍 来源：《长江蔬菜·技术版》2018年第03期 摘要：为了避免芋头制成饮料后膳食纤维作为废弃物被浪费，采用酶法提取芋头不溶性膳食纤维，对酶解温度、料液比、pH值、加酶量进行单因素试验及正交试验分析。结果表明，酶法提取芋头不溶性膳食纤维的最佳工艺条件为酶解温度60 ℃，料液比1∶10，pH值6.0，淀粉酶用量0.18 g。经验证试验，得到芋头不溶性膳食纤维的平均提取率为4.125%。经60 ℃烘干的芋头不溶性膳食纤维呈淡黄色，可以直接用作食品配料。 关键词：芋头；膳食纤维；酶法 中图分类号：TS255 文献标志码：A doi：10.16693/https://www.doczj.com/doc/2919387016.html,ki.1671-9646（X）.2018.03.002 文章编号：1671-9646（2018）03a-0004-03 Abstract：In order to avoid taro beverage making，its dietary fiber was wasted. The taro IDF was extracted by enzyme method. The temperature，material liquid ratio，pH and enzyme amount were analyzed by single factor experiment and orthogonal test. The results showed that the best process of enzymatic extraction of IDF from taro was as follows the temperature of enzymatic hydrolysis 60 ℃，the ratio of material to liquid 1∶10，pH 6.0，and the amount of amylase 0.18 g. The average extraction rate of the insoluble dietary fiber of taro was 4.125%. The IDF of taro，which has been dried at 60 ℃，was light yellow and could be used as a food ingredient. Key words：taro；dietary fiber；enzyme method 0 引言 芋头（Colcasia esculenta（L.）Schott）别名芋魁、俗称芋艿，属天南星科植物。我国芋头种植资源丰富、品种多样，广泛种植于福建、广东、广西、湖南、湖北、山东等地。芋头加工成饮料后，其副产物的渣中含有一定量的不溶性膳食纤维，如何将这部分不溶性膳食纤维收集起来用于其他食品的生产，是课题研究的主要内容。膳食纤维是一种不被人体消化酶所消化的碳水化合物，被称为第七大营养素。膳食纤维具有防治结肠癌、冠心病、便秘、糖尿病、预防肥胖、降血压等功能，在抗肿瘤方面也有较好的效果[1]。目前，提取膳食纤维的方法主要有酸法、碱法、酶法、膜分离法等，其中酶法制备的过程，条件较温和，生产出来的膳食纤维色泽好，因此大部分食品用膳食纤维都采用酶法制备[2-3]。试验以芋头制得饮料后的副产物为原料，分别加入淀粉酶和蛋白酶水解，研究酶处理的相关参数，对生产工艺进行优化，以期能够