基因工程药物发展的历史及启示
吴岚晓1,郭坤元1,秦 煜2
(11第一军医大学珠江医院血液科,广东广州510282;21第一军医大学南方医院创伤骨科,广东广州510282)
摘要:基因工程诞生20余年,运用于医药行业,研制和开发基因工程药物,已取得长足进展。迄今为止,已有近100
个基因工程新药上市,并有数百种正在研制和开发中。可以预计,基因工程药物的发展具有无比强大的生命力。
就基因工程药物发展史进行概述,会从中得到许多启示。
关键词:基因工程;药物;科学;技术
中图分类号:R-02 文献标识码:A 文章编号:1002-0772(2002)12-0011-03
Developing History and the E nlightenment of G enetic
E ngineering Drug
W U L an-xiao,GUO Kun-yuan,QIN Y u
(1.Depart ment of Hem atology,Zhujiang Hospital,First Military Medical U niversity,Guangz hou510282,China;2.
N anf ang Hospital,First Military U niversity,Guangz hou510282,China)
Abstract:G enetic engineering has made remarkable development in the area of drug production and research since it ap2
peared twenty years ago.More than100new geneitc engineering drugs have been used in clinic,and more drug-projects
are undergoing.It can be predicted that genetic engineering drug will make more and more influence in people’s life.A perspective view about genetic engineering drug developing history was made in this article and some philosophic opinions
inspired from it were discussed.
K ey Words:genetic engineering;drug;science;technology
1 基因工程原理和技术
基因工程是在分子水平上人工改造生物遗传性,创造世间新的生物物种技术,亦称DNA重组或分子克隆,包括基因和载体的制备、切割和连接,重组DNA的转移、表达及产物分离等。基因的制备方法有,多聚酶链反应、互补文库、基因组文库、染色体DNA的酶切分离、酶合成法和化学合成法等,迄今为止,已制备人胰岛素、人尿激酶、人生长激素、人α-干扰素及生长因子等多种药物的基因。载体是能将外源性目的基因运输至宿主细胞的小分子DNA,目前大抵有细菌质粒、嗜菌体DNA及病毒DNA构建人工载体,如pBR322、Charon系列、Cos2 mid、反转录病毒、腺病毒及其相关病毒的DNA,此外,尚有酵母人工染色体DNA,及哺乳动物人工染色体DNA等。载体和含目的基因的DNA分别经限制性内切酶切割后,两者混合通过连接酶连接构成重组DNA,经转化、转导、转染、激光打孔、微注射或基因枪等技术,可转移至宿主内,获得基因工程细胞,后者经培养和表达,即可产生相应的基因工程药物。近年来还发现不用载体也不重组,将编码完整的DNA片段或mRNA直接注射内实现完全表达,表明非重组DNA和mRNA可被细胞直接吸收和表达,既简化了基因操作程序,也修正了基因工程基本概念,又促进了基因工程药物的发展,同时还为基因治疗提供了新理论和新途径。
2 基因工程药物发展的历史
应用基因工程技术,研制和开发的药物称为基因工程药物。它是通过重组DNA技术将治疗疾病的蛋白质、肽类激素、酶、核酸和其他药物基因转移至宿主细胞进行繁殖和表达,最终获得相应药物。包括蛋白质类生物大分子、初级代谢产物,如苯丙氨酸及丝氨酸等以及次生代谢产物抗生素等。自20世纪70年代初基因工程药物诞生以来,基因工程药物发展十分迅速。
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医学与哲学2002年12月第23卷第12期总第259期
在研究基因工程药物中,基因制备技术、载体构建技术、宿主表达系统及细胞反应器均有较大进步。以往基因工程药物多采用大肠杆菌等微生物细胞作为表达宿主,目前已有不少产物采用高等生物细胞作为表达宿主,如中国地鼠卵细胞,C127细胞,及绿猴细胞等,还有以昆虫体为表达系统者,日本前田进将人α-干扰素基因与家蚕多角病毒DNA构成重组DNA,后者感染家蚕实现了表达,平均每条蚕体液可得到α-干扰素6×107单位,相当于3～5升血液或0.5升大肠杆菌工程菌发酵液,2～3条家蚕表达的产物足够一个病人治疗量。该技术是转基因动物的实例。表达系统有细胞发展到整体,也为基因防治提供了依据。该技术同样有希望用于蛋白质、肽类激素及病毒抗原疫苗等药物的生产。目前正在开发转基因动物及转基因植物,即利用动物体和植物作为生产基因工程药物的反应器[1]。
第二代基因工程药物是人工定向构建的特异功能非天然蛋白质类药物,包括蛋白质分子的主链切割、连接、分子内及分子间重新组合及策链修饰,主链的部分或全部人工设计合成或组装。克服了天然蛋白质药物的缺陷。为开发新药开辟了新途径,在医药工业领域中具有良好的应用价值和开发前景。
据统计,全世界已有2000多家生物技术公司,其中70%从事医药产品开发。2000年世界上生物技术产品的销售额可超过200亿美元,比1994年增加一倍多,2000年有100个医药生物技术产品上市(1991年只有18个),包括促红细胞生成素、生长激素、人胰岛素和粒巨噬细胞集落刺激因子等。随着对生物技术发展前景的普遍看好,世界各国特别是美、日、英、法等国纷纷强化生物技术领域,在政策、法规、资金和人才等方面给予支持,大力研制和开发医药生物技术产品[2]。
3 基因工程药物发展史的启示
311 科学与技术既相互依赖,又相互转化
基因工程药物的发展表现出大量的技术含量,基因工程药物发展的每一阶段都与分子生物学科学的突破相关联。1967年,Weiss发现了T4DNA连接酶,1970年,Smith HO发现了“核酸分子手术刀”———限制性内切酶,Temin发现了逆转录酶, 1977年英国的Sanger创造了双脱氧末端中止法测定DNA的序列,同时美国的Maxam和G ilbert发明的化学裂解法测定DNA序列,从此基因克隆和DNA测序技术便蓬勃发展起来了。分子生物学研究为基因工程技术开发提供了理论基础,另一方面,基因工程技术的发展又为分子生物学的发展提供了
新的研究课题、研究工具、探索手段和物化基础,技术上的需要更推动了分子生物学理论研究。如果没有现代分子生物学的进步,现代基因工程技术就会成为一句空话,如果离开了最先进的基因工程技术,现代分子生物学实验将无法进行。所以,在现代的社会条件下,作为知识体系的科学与作为人类生产活动手段的技术,二者之间的关系越来越密切,分界越来越模糊,科学和技术这种紧密结合,主要表现为“科学—技术—生产”的一体化,并成为加速科学向直接生产力转化的重要基础。
312 科技政策和体制对基因工程药物发展的作用我国在生物技术领域虽然起步较晚,基础较差,但一开始就受到党和国家的高度重视。为跟踪世界新技术革命迅猛发展的浪潮,1986年3月,我国一批著名科学家倡导起草了“高科技研究计划”———“863计划”,得到了党中央、国务院的批准,邓小平同志还专门为此作了批示,并将现代生物技术列为“863计划”最优先发展项目和“七五”、“八五”、“九五”的重点攻关项目,我国的这一重大决策为我国现代生物技术发展提供了良好的机会。1989年底,我国又制定了“医药工业生物技术近期、中期发展计划”,使我国生物技术药物研究、开发有了明确的方向和目标。经过广大科技工作者的努力,已取得了鼓舞人心的进展,一批基因工程产品的上游研究正在努力展开,一些产品正逐步进入开发阶段,不少产品已步入临床试验阶段,或已获得新药证书,进入产业化生产。
313 基因工程药物的发展需要物资条件和技术准备
基因工程药物的研究与开发,规模较大,常常需要多个单位间的合作,所需的人力、物力、资金较多,没有强大的生产力作后盾,将是寸步难行的。基因工作药物生产还依赖于许多精密的高级仪器,各种核酸测序仪、蛋白质纯化与分析设备和大规模生物反应器等,现代科学创造的技术手段,把基因工程技术推向了更高水平,先进仪器不仅作为工具,而且大大延伸了科学家的感官和大脑机能,使基因工程技术的质量和效率得到极大的提高。目前,我国的基因工程还较短缺,仪器设备落后,国内的有识之士应尽快瞄准仪器市场,研究人员可根据实验原理,设计制造出适用的仪器。
314 中试放大是影响我国基因工程药物产业化的重要因素
目前,我们常忽视可研究、开发、产业化、商品化的这个基本规律,有些科研成果尽管(下转第16页)
富心肌细胞再生与心脏修复理论的必然过程。
回顾心肌细胞再生理论形成、发展和变迁的过程,我们可以认识到心肌细胞再生理论复杂、多样,与许多未知因素的探求。正如目前神经细胞再生理论形成[9]的过程一样,现在所取得的理论结果仅仅是整个心肌再生理论的一小部分,不管现在还是将来都存在着许多未知的客观的内容尚待探索。对一切理论的认识要遵循理论科学自身的发生、发展的规律,要认识到科学理论的发展是一个不断完善、永无止境的过程,没有永远的真理。树立正确的认识观,不局限自己的思维,不盲目迷信权威的观点,勇于探索,敢于向传统挑战,只有如此才能真正地促进心肌细胞再生理论向前发展。
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作者简介:王晓明(1965-),男,陕西人,第四军医大学西京医院老年病科,主治医师、讲师,现是第四军医大学生理教研室博士研究生,研究方向为心血管疾病的基础与临床研究。
收稿日期:2002-04-08
(责任编辑:赵明杰)
(上接第12页)具有较高的学术水平,甚至技术路线也有很大突破,但如果按照这些实验室的科研成果数据来进行生产规模的设计,那是远远不够的,因为技术路线毕竟不是生产方法,实验步骤也不能代替工艺规程,实验室小样的数据也并不等于生产的产品规格,用这些数据来进行规模化生产设计,实施产业化是很难成功的,究其原因,是没有真正认识到开发研究是实验研究与工业生产的桥梁,通过中试放大从中取得工程放大的信息,是实验成果能够变成工业生产的保证。
基因工程药物产品的放大更具有特殊性和难度。放大技术是一项涉及动量传递、传热、传质以及反应动力学等基础学科的专门技术,它貌似简单而实际上却相当复杂,何况生物在发酵时,有生物特有的呼吸、代谢、热量的散发等诸多因素,很显然不可能是实验室的简单重复,一个基因工程药物产品从实验室推向生产,不仅是设备放大,建立生产流程,而且有许多物性数据、生物活性数据、产量收率、操作周期、检测控制、辅料回收、三废处理等一系列问题需解决。不然就不能达到高产量、低成本的合理工艺[3]。
315 对基因工程药物的正确评价
药品是一种特殊的商品,它直接关系到人民的健康,因此,在基因工程药物批准上市前,必须对药品进行严格的评价和认证。对某一特定药物,人们从不同的角度出发,就产生了不同的评价。从病人的角度,主要是看药物的有效性和安全性,从企业家的角度,主要看药物所带来的经济效益,从科学家的角度,主要偏重于技术的独创性和科学原理在技术中的应用水平,从社会学家的角度,则主要考虑基因工程技术的社会后果,如是否会造成环境污染或与人的伦理观相违背等。上述评价标准,虽各有其合理性,但不是从社会总体上进行的综合评价。对一种基因工程药物的评价,既要看它在技术上的创造性和先进性,又要看它是否满足社会的需要,是否具有经济效益,是否存在潜在的影响(包括对社会的积极作用和副作用),有时甚至需要好几十年的时间去观察和研究,才能作出全面而正确的评价。
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收稿日期:2002-08-08
(责任编辑:赵明杰)
基因工程药物发展进程 药剂3班张楠 07106330 学习了药学分子生物学后，我对基因工程药物产生了浓厚的兴趣，通过生物化学和分子生物学的学习以及课下翻阅相关资料，让我对基因工程药物有了新的认识： 1 基因工程药物 基因工程药物是先确定对某种疾病有预防和治疗作用的蛋白质，然后将控制该蛋白质合成过程的基因取出来，经过一系列基因操作，最后将该基因放入可以大量生产的受体细胞中去，这些受体细胞包括细菌、酵母菌、动物或动物细胞、植物或植物细胞，在受体细胞不断繁殖过程中，大规模生产具有预防和治疗这些疾病的蛋白质，即基因疫苗或药物。在医学和兽医学中应用正逐步推广。 以乙型病毒性肝炎（以下简称乙肝）疫苗为例，像其他蛋白质一样，乙肝表面抗原（HBSAg）的产生也受DNA调控。利用基因剪切技术，用一种"基因剪刀"将调控HBSAg的那段DNA剪裁下来，装到一个表达载体中，所谓表达载体，是因为它可以把这段DNA的功能发挥出来；再把这种表达载体转移到受体细胞内，如大肠杆菌或酵母菌等；最后再通过这些大肠杆菌或酵母菌的快速繁殖，生产出大量我们所需要的HBSAg（乙肝疫苗）。 目前有很多基因工程对人类的贡献典例。长期以来，医学工作者在防治乙肝方面做了大量工作，但曾一度陷于困境。乙肝病毒（HBV）主要由两部分组成，内部为DNA，外部有一层外壳蛋白质，称为HBSAg。把一定量的HBSAg注射入人体，就使机体产生对HBV抗衡的抗体。机体依靠这种抗体，可以清除入侵机体内的HBV。过去，乙肝疫苗的来源，主要是从HBV 携带者的血液中分离出来的HBSAg，这种血液是不安全的，可能混有其他病原体[其他型的肝炎病毒，特别是艾滋病病毒（HIV）]的污染。此外，血液来源也是极有限的，使乙肝疫苗的供应犹如杯水车薪，远不能满足全国的需要。基因工程疫苗解决了这一难题。与上述的血源乙肝疫苗相比，基因工程生产的乙肝疫苗，取材方便，利用的是资源丰富的大肠杆菌或酵母菌，它们有极强的繁殖能力，并借助于高科技手段，可以大规模生产出质量好、纯度高、免疫原性好、价格便宜的药物。在小孩出生后，按计划实施新生儿到六个月龄内先后注射三次乙肝疫苗的免疫程序，就可获得终身免疫，免受乙型肝炎之害。正是基于1996年我国已有能力生产大量的基因工程乙肝疫苗，我国才有信心遏制这一威胁人类健康最严重、流行最广泛的病种。这是基因工程药物对人类的贡献典例之一。 基因工程药物另一个重要应用就是干扰素的生产。当人或动物受到某种病毒感染时，体内会产生一种物质，它会阻止或干扰人体再次受到病毒感染，故人们把此种物质称为干扰素（Interfero,简称IFN），是1957年英国科学家多萨克斯（Lossaacs）和林德曼（Lindenmann）在研究流感病毒干扰现象时发现的。干扰素具有广谱抗病毒的效能，是一种治疗乙肝的有效药物，国际上批准治疗丙型病毒性肝炎的药物只有它。但是，通常情况下人体内干扰素基因处于"睡眠"状态，因而血中一般测不到干扰素。只有在发生病毒感染或受到干扰素诱导物的诱导时，人体内的干扰素基因才会"苏醒"，开始产生干扰素，但其数量微乎其微。即使经过诱导，从人血中提取1mg干扰素，需要人血8000ml，其成本高得惊人。据计算：要获取1磅（453g）纯干扰素，其成本高达200亿美元。使大多数病人没有使用干扰素的能力。1980
南街村发展历程及启示 南街村位于河南省临颍县城南隅，紧靠107国道，西临京广铁路和石武客运专线，东临京珠高速公路。全村有回、汉两个民族，共848户，3180口人，1000亩耕地，总面积1.78平方公里。 1980年，南街村集体办起了一个面粉厂和一个砖厂，这是在王宏斌的带领下，南街村致富的第一步。在集体筹资和集体拼命干劲下，一个日产20吨的面粉厂建成，接着王宏斌想出用“指山卖磨”的点子建成砖厂。这个地处省级贫困县的南街村当年就创造了一个令人惊羡的数字：40万元。 1984年，面临村里大量土地荒芜及面粉厂和砖厂承包者不发工资引起众怒的境况，南街村党支部决定：收回面粉厂和砖厂，继续由集体承包；将耕地逐步回收，进行集体经营。从此南街村开始走上了集体化发展的道路。当年村办企业的产值达70万元，1986年则高达320万元。在上世纪80年代，随着改革开放的步伐，乡镇企业、集体企业如雨后春笋般迅速发展起来。“那时候，随便做个什么生意基本上都能赚钱”，河南省社会科学研究院研究员刘倩对南方都市报说，“南街村的发展得益于中国从计划经济走向市场经济的大环境”。 1989年集体经济产值达到2100万元，南街村的成就引起了一些领导的关注，当地政府有关部门和银行开始大力扶持，大量的贷款开始涌入南街村。银行的巨额贷款为南街村的发展注入了强劲的动力，使得南街村迅速融入改革开放的浪潮。当时中国社会上涌动着一种思潮，“把改革开放说成是引进和发展资本主义”，认为和平演变的主要
危险来自经济领域。在这种政治氛围下，南街村不但坚持走集体主义道路，而且坚持用毛泽东教育人，正好符合当时中国的政治需求。据南街村公开的资料显示：1990年产值是4100万，1991年是1.01亿，1992年是2亿，1993年是4.2亿，1994年是8亿，1995年是12亿，1996年是15亿，1997、1998年是16亿。南街村高速崛起的动力在于巨额的银行贷款及大量廉价的外来劳动力。2000年，中国人民大学社会学系副教授冯仕政对南街村进行调研，通过对1985年-1998年南街村银行贷款数据分析后得出：第一，总产值和银行贷款增长趋势是完全一致的，增长幅度也差不多，在总产值翻番的同时，银行贷款也在翻番；第二，1991年及以后，银行贷款远远高于利税，到1998年已接近7倍。冯认为，南街村经济是典型的“高增长、低效率”，正是在巨额银行贷款的拉动下，南街村经济才能在效率低于全国平均水平的情况下，增长速度远远高于全国平均水平。再集体化之后，南街村集体企业开始大量雇佣外来劳动力，他们只能拿低工资——150-300元/月。 从2004年下半年到2005年上半年,南街村在连续7年销售收入逐年翻番的高速增长之后,进入了经济困难时期。2005年,南街村集团的销售收入急跌至10亿元,和1997年的巅峰数据16亿元相差极大。 导致南街村经济下滑的原因很多,首先是受全球金融危机的影响,市场经济下滑、市场萎缩;其次是政府宏观经济调整,紧缩银根,导致迅速扩张的南街村集团资金链断裂。艰难中的南街村也在积极求变,在金融部门“不输血”的情况下,他们发动职工集资、捐资;开发“红
基因工程药物发展的历史及启示 吴岚晓1,郭坤元1,秦 煜2 (11第一军医大学珠江医院血液科,广东广州510282;21第一军医大学南方医院创伤骨科,广东广州510282) 摘要:基因工程诞生20余年,运用于医药行业,研制和开发基因工程药物,已取得长足进展。迄今为止,已有近100 个基因工程新药上市,并有数百种正在研制和开发中。可以预计,基因工程药物的发展具有无比强大的生命力。 就基因工程药物发展史进行概述,会从中得到许多启示。 关键词:基因工程;药物;科学;技术 中图分类号:R-02 文献标识码:A 文章编号:1002-0772(2002)12-0011-03 Developing History and the E nlightenment of G enetic E ngineering Drug W U L an-xiao,GUO Kun-yuan,QIN Y u (1.Depart ment of Hem atology,Zhujiang Hospital,First Military Medical U niversity,Guangz hou510282,China;2. N anf ang Hospital,First Military U niversity,Guangz hou510282,China) Abstract:G enetic engineering has made remarkable development in the area of drug production and research since it ap2 peared twenty years ago.More than100new geneitc engineering drugs have been used in clinic,and more drug-projects are undergoing.It can be predicted that genetic engineering drug will make more and more influence in people’s life.A perspective view about genetic engineering drug developing history was made in this article and some philosophic opinions inspired from it were discussed. K ey Words:genetic engineering;drug;science;technology 1 基因工程原理和技术 基因工程是在分子水平上人工改造生物遗传性,创造世间新的生物物种技术,亦称DNA重组或分子克隆,包括基因和载体的制备、切割和连接,重组DNA的转移、表达及产物分离等。基因的制备方法有,多聚酶链反应、互补文库、基因组文库、染色体DNA的酶切分离、酶合成法和化学合成法等,迄今为止,已制备人胰岛素、人尿激酶、人生长激素、人α-干扰素及生长因子等多种药物的基因。载体是能将外源性目的基因运输至宿主细胞的小分子DNA,目前大抵有细菌质粒、嗜菌体DNA及病毒DNA构建人工载体,如pBR322、Charon系列、Cos2 mid、反转录病毒、腺病毒及其相关病毒的DNA,此外,尚有酵母人工染色体DNA,及哺乳动物人工染色体DNA等。载体和含目的基因的DNA分别经限制性内切酶切割后,两者混合通过连接酶连接构成重组DNA,经转化、转导、转染、激光打孔、微注射或基因枪等技术,可转移至宿主内,获得基因工程细胞,后者经培养和表达,即可产生相应的基因工程药物。近年来还发现不用载体也不重组,将编码完整的DNA片段或mRNA直接注射内实现完全表达,表明非重组DNA和mRNA可被细胞直接吸收和表达,既简化了基因操作程序,也修正了基因工程基本概念,又促进了基因工程药物的发展,同时还为基因治疗提供了新理论和新途径。 2 基因工程药物发展的历史 应用基因工程技术,研制和开发的药物称为基因工程药物。它是通过重组DNA技术将治疗疾病的蛋白质、肽类激素、酶、核酸和其他药物基因转移至宿主细胞进行繁殖和表达,最终获得相应药物。包括蛋白质类生物大分子、初级代谢产物,如苯丙氨酸及丝氨酸等以及次生代谢产物抗生素等。自20世纪70年代初基因工程药物诞生以来,基因工程药物发展十分迅速。 ? 1 1 ? 医学与哲学2002年12月第23卷第12期总第259期
2012年暑期河南考察报告与思考_考察报告2012年暑期河南考察与思考 湖北文理学院刘松 2012年暑期，我参加了省教育厅组织的赴河南考察活动。此行共有52位来自湖北省各高校思想政治教育理论课骨干教师。湖北工业大学受教育厅委托承办组织联络工作。从2012年7月23日到27日，历时一周，我们参观了河南林县红旗渠景区、安阳殷墟博物馆、安阳文字博物馆，与安阳师范学院两课教师进行了座谈交流、听取了殷商文化、甲骨文研究专家、安阳市政协副主席张坚教授所做的《灿烂的殷墟文明》专题报告，游览了焦作云台山风景区，并听取了导游介绍焦作城市战略发展历程，最后游览了漯河市临颍县红色亿元村——南街村，听取了南街村村党支书王宏斌的汇报。可以说这次参观考察是一次爱国文化之旅、绿色生态之旅、红色革命之旅，也是中国特色社会主义建设历程考察之旅，更是一次信仰追寻之旅。 在此行中，也引起了我对一些问题的思考。下面按照游览的顺序简要梳理一下。
一、现代青年需要革命传统文化教育吗？如何进行这方面教育？ 在河南林州市参观了红旗渠风景区。刚一下车就看到航天员刘洋（女）的巨幅照片，上书“中国刘洋林州的骄傲”背景就是红旗渠（刘洋刚于6月16-29日飞天返回，林州风景区就竖起巨幅宣传照片，7月28日《飞天嫦娥刘洋》励志图书在郑州首版发行，让我们感受到宣传的现代速度）。据导游宣传，刘洋就是喝着红旗渠的水、吃着这里的石碾小米长大的，所以身体倍棒，荣膺中国第一位飞天女航天员。红旗渠修在太行山山腰悬崖峭壁上，长约1500公里。据说当年10万人修了十年，没拿国家一分钱。在当时这确实是一项创举！特别在当年没有大型挖掘设备，人们缺粮少钱的时代，当时修建这段水利工程需要胆识和魄力的，我深深被红旗渠“自力更生、艰苦奋斗、团结协作、无私奉献”的精神所打动。 有老师也说，要在今天，让大家不用机器设备、不拿一分钱苦干十年，简直不可能！现在有了现代化的机械设备和科学办法，也不会再有这样的挖渠的做法了。言外之意：红旗渠精神一去不复返了！历史不可复制！那么，今天，当我们科学进步了，不需要人们肩扛背驼了，那么还需要这种艰苦奋斗的精神吗？我们思政课教学还需要学生们学习“红旗渠精神”吗？在“前人种树”所付出的代价后，需要乘凉的后人们再去效仿这种笨办法去开挖河渠吗？显然不需要了。但我们需要学习这种精神！那么，
基因工程药物 周长征 第一部分概述 一、基因工程药物 （一）基因工程药物的概念 基因工程药物是以基因组学研究中发现的功能性基因或基因的产物为起始材料，通过生物学、分子生物学或生物化学、生物工程等相应技术制成的、并以相应分析技术控制中间产物和成品质量的生物活性物质产品，临床上可用于某些疾病的诊断和治疗。基因药物类型广泛，包括重组蛋白质药物、人源化单克隆抗体、基因治疗药物、重组蛋白质疫苗、核酸药物等10多种类型。 生产基因工程药物的基本方法是：将目的基因用DNA重组的方法连接在载体上，然后将载体导入靶细胞（微生物、哺乳动物细胞或人体组织靶细胞），使目的基因在靶细胞中得到表达，最后将表达的目的蛋白质提纯及做成制剂，从而成为蛋白类药物或疫苗。若目的基因直接在人体组织靶细胞内表达，就称为基因治疗。 例如，乙肝表面抗原（HBSAg）的产生也受DNA 调控。利用基因剪切技术，用一种“基因剪刀”将调控HBSAg的那段DNA剪裁下来，装到一个表达载体中（所谓表达载体，是因为它可以把这段DNA的功能发挥出来）再把这种表达载体转移到受体细胞内，如大肠杆菌或酵母菌等；最后再通过这些大肠杆菌或酵母菌的快速繁殖，生产出大量我们所需要的HBSAg（乙肝疫苗）。把一定量的HBSAg注射入人体，就使机体产生对HBV抗衡的抗体。机体依靠这种抗体，可以清除入侵机体内的HBV。过去，乙肝疫苗的来源，主要是从HBV 携带者的血液中分离出来的HBSAg，这种血液是不安全的，可能混有其他病原体的污染。此外，血液来源也是极有限的，使乙肝疫苗的供应犹如杯水车薪，远不能满足全国的需要。基因工程疫苗解决了这一难题。 干扰素具有广谱抗病毒的效能，是一种治疗乙肝的有效药物，国际上批准唯一一种治疗丙型病毒性肝炎的药物。通常情况下人体内干扰素基因处于休眠状态，血中一般检测不到。只有在发生病毒感染或受到干扰素诱导物的诱导时，人体内的干扰素基因才会产生干扰素，但其数量微乎其微。即使经过诱导，从人血中提取1mg 干扰素，需要人血8000ml，其成本高得惊人。获取1磅（453g）纯干扰素，其成本高达200亿美元。1980年后，采用基因工程进行生产，其基本原理及操作流程与乙肝疫苗十分类似。现在要获取1磅纯干扰素，其成本不到1亿美元。 （二）基因工程药物的发展 1973年，Cohen等人首次将带有Tet r基因和链霉素抗性基因（Str r）的两种大肠杆菌质粒成功地进行了重组，获得了可以复制并只有双亲质粒遗传信息的重组质粒，拉开了基因工程研究的序幕。1974年他们对具有Amp r和红霉素抗性基因（Emp r）的金黄色葡萄球菌质粒
我国基因工程药物的发展现状 以基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程为代表的现代生物技术在近几十年来的发展中受到了全球科技界和企业界的普遍关注，有许多专家认为21世纪将是生命科学的世纪。现代生物技术之所以能受到各界的重视，一方面是由于现代生物技术发展迅速，用途广泛，生物技术的应用范围已遍及医药、农业、食品、能源、环保等各个领域；另一方面是由于现代生物技术可以解决人类发展所面临的许多难题，如人口膨胀、粮食短缺、资源枯竭、环境污染等。人们越来越认识到了生物技术在全球经济进程中的重要性和必要性。由于生物技术是以生物(动物、植物、微生物、培养细胞等)为基本资源，因此其原料具有再生性，同时生物系统生产产品产生的污染物少，对环境的破坏性很小或几乎没有，重组微生物甚至还可以消除环境中的污染物。 基因工程(genetic engineering )又称基因拼接技术和DNA重组技术。所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体 细胞内复制、转录、翻译表达的操作。 基因工程制药的出现是因为，许多药品的生产是从生物组织中提取的，受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。若利用基因工程将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物， 不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。
一、产业现状及地位 1989年，中国批准了第一个在中国生产的基因工程药物一一重组人干扰素，标志着中国生产的基因工程药物实现了零的突破。重组人干扰素是世界上第一个采用中国人基因克隆和表达的基因工程药物，也是到目前为止唯一的一个中国自主研制成功的拥有自主知识产权的基因工程一类新药。从此以后，中国基因工程制药产业从无到有，不断发展壮大。1998年，中国基因工程制药产业销售额已达到了7.2 亿元人民币。截止1998年底，中国已批准上市的基因工程药物和疫苗产品共计15种。国内已有30余家生物制药企业取得了基因工程药物或疫苗试生产或正式生产批准文号。 根据1997年对全国452从个事生物技术研究、开发和生产的单位进行的通讯调查结果，截止1996年底，中国已有8种基因工程药物和疫苗商品化（包括试生产），1996年基因工程药物和疫苗销售额约为2.2亿元人民币，仅占同期全国医药生物技术产品年销售额21.16亿元人民的10.4%。然而可喜的是，中国基因工程制药产业发展迅猛，年销售额已从1996年的2.2亿元人民币增长到1998年的7.2亿元人民币，年均增长率高达80%预计2000年中国基因工程药物销售额将达到22.8亿元人民币。 基因工程在制药业中具有广阔的发展前景，中国的基因制药行业 已经初具规模，但与世界发达国家存在差距，主要表现在具有自主知识产权的产品较少，产业规模小、经济效益低。基因制药产业面临着历史性的机遇，主要表现在政府支持、资源丰富、基因信息公开、国际交流
关于南街村、华西村、小岗村的实地调查和比较研究 【摘要】通过对比分析南街村、华西村、小岗村不同的发展历程和发展经验，可以使我们对农村基层组织的发展条件有一个较为清楚的认识，从而为我们的新农村建设提供一些理论上的启发。 【关键词】外方内圆集体经济规模优势 南街村、华西村、小岗村都是我国十大闻名村庄。但是，这三个村庄不仅有着不同的经济发展水平，也有着不同的发展模式和发展历程。认真考查它们各自的发展路径能够为我们对建设社会主义新农村提供一些新的启发。接下来，笔者就在描述三个村庄不同发展历程的基础上，进行有关制度经济学的分析。 一、南街村的发展历程和主要经验 河南省临颍县南街村改革开放以前只不过是一个人均收入不足百元的贫困村庄。然而，改革开放后经过短短数十年的时间，该村一跃成为河南省第一个红色亿元村。由于其如此惊人的经济发展速度和特殊的文化、管理理念，南街村受到很多学者的青睐和关注。1978年，党的十一届三中全会给南街村带来了新的变化，家庭联产承包责任制的施行，使得南街村将村里仅有的两个小砖厂和面粉厂承包给了个人，从此，南街村人结束了靠工分吃饭的生活。家庭联产承包责任制作为深化农村改革的一项重大举措，对促进广大农民摆脱贫困、解决温饱起到了重大作用，这一制度的最初实施，也给南街村人民带来了实惠，推动了农业生产的而发展。但是，随着改革开放力度的加大，这一制度遇到了新的问题和矛盾。这主要表现为随着农业生产边际效率的下降，农民的生产积极性受到影响，对农业的投入减少了，有的干脆把土地转包给亲朋好友，更有甚者让土地完全荒芜。到1985年粮食亩产量只有500多斤，农业陷入了全面萎缩的局面。不仅农业生产如此，南街村的工业生产也经历了从集体经营到个体承包再到集体经营的曲折过程。1981年，南街村把村里的两个小砖厂和面粉厂承包给个人。承包制的推行并没有起到预期的效果，企业承包使少部分人发家致富了，但广大人民群众连基本的工资都不能保证，村民怨声载道。 面对这种局面，以王宏斌为首的南街村党支部一班人进行了深入、细致的思考：为什么承包制不能取得预期的效果？为什么群众对党组织不满意？一个重要的原因在于党组织没有带领广大群众致富，而是把企业承包给了个人，这不仅伤害了群众的感情，也败坏了党组织的形象和声誉。经过认真反思，大家一致同意，终止个人对南街村企业的承包权，由南街村党组织施行集体承包。从1984年党组织集体承包以来，企业规模越来越大，产值、利税以连年翻番的速度递增：
基因工程制药
(一) 概述 (二) 基因工程药物生产的基本过程 (三) 目的基因的获得 (四) 基因表达 (五) 基因工程菌的稳定性 (六) 基因工程菌生长代谢的特点 (七) 基因工程菌发酵 (八) 基因工程药物的分离纯化 (九) 基因工程药物的质量控制 (十) 基因工程药物制造实例
表达系统：一个完整的表达系统通常包括配套的表达载体和表达菌株，如果是特殊的诱导表达还包括诱导 剂，如果是融合表达还包括纯化系统或者Tag检测等等。 表达载体：包括启动子，多克隆位点，终止密码，融合Tag（如果有的话），复制子，筛选标记/报告基因 等。表达菌株：不同的表达载体对应有不同的表达菌 株。
组成型表达：：表达载体的启动子为组成型启动子，也就是一 组成型表达 直努力不停表达目的蛋白的启动子，如pMAL系统。这类表达载体通常表达量比较高，成本低，但是不适合表达一些对宿主细菌生长有害的蛋白。 诱导型表达：：表达载体采用诱导型启动子，只有在诱导剂存 诱导型表达 在的条件下才能表达目的产物。这种方法有助于解决有毒蛋白或者过量表达对细胞的影响。另外也有启动子是组成型的，但是启动子所依赖的转录酶是诱导表达的，也属于诱导表达系统。
融合表达：表达载体的多克隆位点上有一段融合表达标签（Tag），表达产物为融合蛋白（有分N端或者C端融合表达），方便后继的纯化步骤或者检测。对于特别小的分子建议用较大的Tag（如GST）以获得稳定表达；而一般的基因多选择小Tag以减少对目的蛋白的影响。His-Tag是最广泛采用的Tag。 分泌表达：在起始密码和目的基因之间加入信号肽，可以引导目的蛋白穿越细胞膜，避免表达产物在细胞内的过度累积而影响细胞生长，或者形成包含体，而且表达产物是可溶的活性状态不需要复性。通常这种分泌只是分泌到细胞膜和细胞壁之间的周质空间。 可溶性表达：大肠杆菌表达效率很高，特别是强启动子，目的蛋白来不及折叠而形成不溶的包含体颗粒，包含体容易纯化但是复性效率不高。分泌表达可以得到可溶的产物，也有部分融合Tag 有助于提高产物的可溶性，比如Thio，pMAL系统。
基因工程药物研究与应用新进展 郭小周 生物技术药物(biotech drugs)或称生物药物(biopharmaceutics)是集生物学、医学、药学的先进技术为一体，以组合化学、药学基因（功能抗原学、生物信息学等高技术为依托，以分子遗传学、分子生物、生物物理等基础学科的突破为后盾形成的产业。现在，世界生物制药技术的产业化已进入投资收获期，生物技术药品已应用和渗透到医药、保健食品和日化产品等各个领域，尤其在新药研究、开发、生产和改造传统制药工业中得到日益广泛的应用，生物制药产业已成为最活跃、进展最快的产业之一。 摘要：自20 世纪70 年代基因工程诞生以来,以DNA重组技术为核心的现代生物技术一直是人们研究的热点，本文主要介绍了基因药物的定义、获得途径、一些前沿技术以及基因药物的应用与发展前景。 关键词:生物技术药物基因工程药物基因发展前景 1. 引言 近年来1953年Waston和Crick发现遗传物质DNA的双螺旋结构，给整个生物学乃至整个人类社会带来了一场革命。此后，一系列有关遗传信息即基因研究的成果很快的向应用和开发拓展。1972年，美国斯坦福大学P.Berg博士研究小组使用EcorRⅠ,第一次在体外获得了包括SV40 DNA和λ噬菌体DNA的重组DNA分子。1973年，S.Cohen等将两中分别编码卡那霉素和四环素的抗性基因相连，构建出重组的DNA分子，然后转化大肠杆菌，获得了既抗卡那霉素又抗四环素的转化子菌落，这是第一次成功的基因克隆实验，标志着基因工程的诞生。1977年Boyer首次获得生长激素抑制因
子的克隆，1982年第一个基因工程重组产品——人胰岛素被批准应用，进入市场。迄今为止，已有50多种基因工程药物上市，近千种处于研发状态。基因工程药物已经形成一个巨大的高新技术产业，产生了不可估量的社会效益和经济效益，由于基因药物的出现，可以大大改善人类的生命质量，对于一些重大疾病的治疗将会有新的突破。 2 基因工程 2.1 基因 基因是脱氧核糖核酸（DNA）分子上的一个特定片段。不同基因的遗传信息，存在于各自片段上的碱基排列顺序之中。基因通过转录出的信使使核糖核酸（mRNA），知道合成特定的蛋白质，使基因得以表达。 2.2 基因工程 基因工程是利用重组ＤＮＡ技术，在体外对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出需要的基因产物。 3 基因药物 基因工程药物又称生物技术药物,是根据人们的愿望设计的基因,在体外剪切组合,并和载体DNA 连接,然后将载体导入靶细胞(微生物、哺乳动物细胞或人体组织靶细胞) ,使目的基因在靶细胞中得到表达,最后将表达的目的蛋白质纯化及做成制剂,从而成为蛋白类药或疫苗。 基因工程药物的本质是蛋白质，生产基因工程药物的方法是：将目的基因连接在载体上，然后将导入靶细胞（微生物、哺乳动物细胞或人体组织靶细胞），使目的基因在靶细胞中的到表达，最后将表达的目的蛋白质提纯做成制剂，从而成为蛋白类药或疫苗。若目的基因直接在人体组织靶细胞表达，就称为基因治疗。 利用基因工程技术生产药品的优点在于：大量生产过去难以获得的生理活性物质和
基因工程药物的发展前景 周先建2003年4月12日 一、概况 自从DNA重组技术于1972年诞生以来，作为现代生物技术核心的基因工程技术得到飞速的发展。1982年美国Lilly公司首先将重组胰岛素投放市场，标志着世界第一个基因工程药物的诞生。目前，世界各国都将基因工程及其逐渐加速的产业化进程视为国民经济的新增长点，展开了激烈的市场竞争。到1999年底为止，全球至少已有近 3000家生物工程公司在从事生物药品与基因产品研究与开发。据不完全统计，在欧美诸国，已经上市的基因工程药品接近一百种，大约还有超过300种以上的药物处于临床试验阶段，约2000种在研究开发中，形成了一个巨大的高新技术产业，产生了不可估量的社会效益和经济效益。 基因工程药物的定义：将目的基因用DNA重组的方法连接在载体上，然后将载体导入靶细胞（微生物、哺乳动物细胞或人体组织靶细胞），使目的基因在靶细胞中得到表达，最后将表达的目的蛋白质提纯及做成制剂，从而成为蛋白类药或疫苗。这就称为基因工程药物。若目的基因直接在人体组织靶细胞内表达，就成为基因治疗，但目前尚没有基于基因治疗技术的药物被正式批准。 基因工程药物因为其疗效好，副作用小,应用范围广泛而成为各国政府和企业投资研究开发的热点领域，大量的基因工程药品连续问世，年产值达数十亿美元。自1982年问世以来，基因工程药物成为制药行业的一支奇兵，每年平均有3-4个新药或疫苗问世，开发成功的约五十多个药品已广泛应用于治疗癌症、肝炎、发育不良、糖尿病、囊纤维变性和一些遗传病上，在很多领域特别是疑难病症上，起到了传统化学药物难以达到的作用。其原因在于，基因工程制药物的研究与开发多是以对疾病的分子水平上的有了解为基础的，往往会产生意想不到的高疗效。 基因工程制造药行业在近二十年中的飞速发展是以分子遗传、分子生物、分子病理、生物物理等基础学科的突破，以及基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程和蛋白质工程等基础工程学科的高速进展为后盾的。基因工程药物的开发时间为5-7年，比开发新化学单体（10-12年）要短一些，当然这也与各国政府的支持有关。据报道，开发活性蛋白生物创新药的成功率按开发的5个阶段大致是：临床前的成功率为15%，一期临床为27%，二期临床为40%，三期临床为80%，注册登记为90%，总体成功率大大高于化学药。适应症不断延伸也是蛋白类药物的一大特点。例如，rhG-CSF，91年上市时批的适应症是化疗并发中性粒细胞减少，到95年11月13日止，又增加了骨髓移植，严重慢性中性粒细胞减少及外周及外周血干细胞移植等适应症。因此，基因工程生物药物发展包括新品种和新适应症两个方面。 二、美国基因工程药物的发展前景
基因工程药物的研究及进展 摘要：20世纪70年代，随着DNA重组技术的成熟，诞生了基因工程药物，高产值、高效率的基因药物给医药产业带来了一场革命，推动了整个医药产业的发展，医药产业进入了新的历史时期。本文以基因工程药物的发展为导向，简要的介绍了国内外基因工程药物的发展概况、研究现状、研究方向、发展方向。 关键词：基因工程，药物，现状，发展 1 基因工程药物的发展概况 20世纪70年代，随着DNA重组技术的成熟，诞生了基因工程药物，高产值、高效率的基因药物给医药产业带来了一场革命，推动了整个医药产业的发展，医药产业进入了新的历史时期。 基因药物经历了三个阶段：第一阶段是把药用蛋白基因导入到大肠杆菌等细菌中，通过大肠杆菌等表达药用蛋白，但这类药物往往有缺陷，人类的基因在低等生物的细菌中往往不表达或表达的蛋白没有生物活性。第二阶段是人们用哺乳动物的细胞代替细菌，生产第二代基因工程药物。但由于哺乳动物细胞培养条件相对苛刻，生产的药物成本居高不下。第一、二代基因药物的研制和生产已经成熟。从第一个反义核酸药物Vitrovene于1998年和1999相继在美国和欧洲上市以来，发展迅速。第三阶段是到了80年代中期，随着基因重组和基因转移技术的不断发展和完善，科学家可以将人们所需要的药用蛋白基因导入NN-~L动物体内，使目的基因在哺乳动物身上表达，从而获得药用蛋白。携带外源基因并能稳定遗传的这种动物，我们称之为转基因动物。由于从哺乳动物乳汁中获取的基因药物产量高、易提纯，因此利用乳腺分泌出的乳汁生产药物的转基因动物称为“动物乳腺生物反应器”。90年代中后期，国际上用转基因牛、羊和猪等家畜生产贵重药用蛋白的成功实例已有几十种，一些由转基因动物乳汁中分离的药物正用于临床试验，但还没有一例药品成功上市。 2 基因工程药物的研究现状 2.1国外基因工程药物研究现状 随着1971年第一家生物制药公司Cetus公司在美国的成立，1973年重组DNA技术的出现，生物医药即已显示出巨大的应用价值和商业前景。1976年，世界第一家应用重组DNA 技术开发新药的公司Genentech建立，l982年第一个基因重组药物——基因重组人胰岛素在美国投放市场以来，生物医药产业以一种前所未有的速度迅猛发展。如在基因重组制药产业中做出过卓越贡献的Genentech和Amgen公司，早期的几个“重型炸弹”的基因重组
齐河县晏城镇南北社区农机化发展情况调研报告 产业发展计财处 随着农村经济的发展和新农村建设的不断深入，农村城镇化进程不断加快，一些新兴的农村社区开始出现。为进一步探讨总结这些新兴社区中的机械化发展问题，我们对齐河县晏城镇南北社区农机化发展情况进行了调研。 一、调研概述 本次调研采用召开座谈会、发放调查表格的方式，从社区自然资源状况、农业机械化发展情况、农业机械化社会服务发展情况、新农村建设资金投入情况等方面对南街村、北街村、芦庄村等7个自然村近两年来的发展情况进行了调研。主要是调查了解农村新兴社区形成前后对农业机械化发展的影响和要求，调查了解农业机械化发展在农村城镇化建设中所发挥的作用，调查了解农民对未来农业机械化发展的需求，探索新农村建设中的农机化发展模式。本次调研得到了齐河县农机局的大力支持，为调研的顺利实施做了大量的工作。 二、基本情况 (一)自然状况。齐河县属黄河下游冲击平原，农田耕地土质肥沃，土壤质地以中、轻壤为主。气侯适宜，光照充足，年平均气温13.5℃，日照2678.9小时，无霜期217天，适宜各种农作物生长，水资源充裕，水质好。晏城镇南北社区位于齐河县城正北方，距离县城6公里，是2010年在原南北乡基础上，以晏城镇南街村为“圆心”，半径4公里内的南街村、北街村、芦庄等12个行政村合并而成。目前社区总人口4913人，主要以农业生产为主，拥有耕地1.5万亩。主要种植农作物有小麦、玉米、棉花、花生等，种植面积分别为小麦1.43万亩、玉米1.2万亩、棉花0.20万亩、花生0.04万亩。 （二）农业机械化发展情况。2000年以前，该地区农业机械化生产主要以12马力小四轮拖拉机为主导，配悬挂式小麦收割机、农田机耕、农田播种、肥料运输；195柴油机、7.5千瓦电机用于农田灌溉、粮食加工、畜牧铡草、小麦玉米脱粒等；近几年来，由于农机补贴政策的清理推动农业机械开始由“量”增加为“质”的提高，大动力、低能耗、一机多用机械得到快速发展，50马力、70马力、80马力以上拖拉机及配套机具、自走式联合收割机、挖掘机、农用运输车等专用机械逐年增加。目前，该社区拥有拖拉机883台，各类配套机具787台套，其中大中型拖拉机153台，配套农具207台套。小麦联合收割机30台，玉米联合收割机15台，秸秆还田机100台、旋耕机100台，保护性耕作机具20台。小型拖拉机主要从事田间运输作业，田间作业基本由大中型农业机械取代。农机装备水平不断提升，农机装备结构进一步优化。
尚珂 胡鹤 胡又佳 中国基因工程药物研究进展 有关作者： 尚珂博士，女，1980年生，现就职于上海医药工业研究院，创新药物与制药工艺国家重点实验室（筹），任助理研究员。2001年毕业于中国药科大学，2006年获上海医工院微生物与生化药学博士学位。主要研究方向：链霉菌基因工程；重大抗生素品种产生菌的基因工程改造。我国生物技术药物工业总产值至2006年为400~500亿元，仍然保持了高速的增长，新批准的进行临床研究和注册的基因工程药物及新剂型有17个，但其中大部分属于新剂型。创新药物的研究更多地体现在科研领域，尤其是在基因重组蛋白方面，无论是研究的创新性还是品种的多样性都体现了我国在基因工程药物研究领域所取得的长足进步。近年来有越来越多的研究结果发表在国外SCI收录的杂志上，引起了国际上广泛的关注。 1重组蛋白 1.1 活性多肽 1.1.1 志贺毒素抑制多肽 志贺毒素是痢疾志贺菌的主要毒力因子，是一种烈性蛋白质毒素。以制备的重组志贺毒素B亚单位(StxB)为靶标，利用噬菌体展示亲和淘选技术的4轮筛选，从随机十二肽库中筛选到与StxB结合的一批噬菌体克隆，对特异结合活性较高的27个噬菌体克隆的表面展示肽进行序列测定，克隆展示肽出现频率最高的A6噬菌体，在体外与志贺毒素孵育进行动物试验，动物存活率达33.3%，表明毒素的毒性得到部分抑制，A6短肽可能发展成为志贺毒素的拮抗剂[1]。 1.1.2 降钙素 降钙素是甲状腺滤泡旁细胞产生的一种多肽类激素，它是体内钙平衡和骨代谢的调节因子，鲑降钙素已经在临床上用于骨质疏松症，但需要反复多次的注射，且与人降钙素的同源性仅为50%，易产生抗体。将人降钙素在成肌细胞中进行表达，能持续表达人降钙素的细胞进行微囊包埋后仍能持续分泌重组人降钙素到培养液中，这为利用包埋的重组成肌细胞释放人降钙素以及进一步采用移植细胞来治疗绝经后骨质疏松提供了可能[2]。 降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide，CGRP)是从甲状腺髓样癌细胞中克隆发现的一种神经肽，由降钙素基因初级转录产物选择性剪接产生，属于降钙素(Calcitonin，CT) 超家族。CGRP 有两种分子异构肽：αCGRP和βCGRP。采用大肠杆菌偏爱的密码子人工合成hαCGRP 基因，构建了原核融合表达载体，对融合蛋白成功地进行了表达和纯化，Western免疫印迹验证该蛋白具有αCGRP 抗原性，为下一步hαCGRP 纯品的获得及动物实验的研究奠定了基础[3]。 1.1.3 葡萄糖依赖性促胰岛素多肽 GIP，即葡萄糖依赖性促胰岛素多肽或抑胃肽(glucose-dependent insulinotropic polypeptide or gastric inhibitory peptide)是由42个氨基酸组成的胃肠调节肽，具有广泛的临床应用价值。人工合成具有大肠杆菌偏爱密码子的编码GIP成熟肽的cDNA序列，利用pET32a(+)系统 进行原核表达。诱导表达的rhGIP占细胞总蛋白质的35%，纯化后的
乡村治理的方法论：总结与反思 孟军 摘要：从方法论的层面看，乡村治理研究主要有两个维度：一是宏观研究和微观研究；二是制度视角和行为视角的研究。而从反思的视角看，乡村治理研究中存在两个问题：一是过度借助西方的学术话语，基于本土的创新不多；二是宏观研究和微观研究的两难困境。因此，要深化和拓展乡村治理的研究，必须注重消化和吸收西方的理论，立足本土资源和乡土中国的传统，重视理论的创新和理论资源的本土化建构；与此同时应当在深入田野调查的基础上，加强宏观研究与微观研究的融合——中层理论的研究。关键词：宏观研究、微观研究、制度研究、行为研究、西方话语、本土创新 乡村治理的方法论研究：总结与反思 孟军 “三农”问题日益成为学术界的热点问题，乡村治理是一个重要的层面。自从80年代初期，人民公社逐渐解体之后，“三级管理、队为基础”的乡村管理模式逐渐消失。在很多农村地区的社会秩序、经济发展出现了新的问题。后来，人民公社改为乡镇、生产大队转变为村民委员会、生产小队转变为村民小组。国家政权的末梢收缩至乡镇，乡镇以下的村实行村民自治，从而确立了一种新的乡村治理模式——“乡政村治”格局，从而开始了新的乡村治理进程。不同学术背景的学者研究乡村治理著作、文章不胜枚举，但是从方法论层面对乡村治理的总结性和反思性研究尚少。本文探讨乡村治理研究中主要使用的方法，并在此基础上指出存在的问题，最后结合作者的反思提出解决的方案。 一、乡村治理研究方法论的两种维度——文献综述的视角 徐勇认为，在古代中国，农村、农业和农民并没有构成社会和政治问题。只是随着工业文明和现代化进程的推进，作为传统因子的“三农”问题才显得格外突出。在20世纪上半期，由于农村的衰败导致了农村和农民问题研究的第一次高潮，主要有以梁漱溟为代表的“乡村建设道路”、以毛泽东为代表的中国共产党人的探索和以费孝通为代表的学院派的研究。在1950-1970年代，国内的研究几乎停滞，国外的研究转向香港和台湾，进展缓慢。伴随着农村的改革进程加速和西方社会科学成果的大量引进，自1980年代以来，中国农村和农民问题研究的第二次高潮出现。[1]乡政村治格局的确立、乡村治理的多元化和复杂性大大刺激
红色亿元村 ——南街村 1、简介 2、发展制度 3、发展中的问 题及解决 4、总结
南街村简介： ?南街村是大家耳熟能详的全国十大名村，它是集体主义经济的代名词。在坚持集体主义的原则下，南街村几近实现了共同富裕，经济平稳发展，社会和谐，人们安居乐业。南街村成功的关键是实事求是，因地制宜，坚持集体主义。南街村是国家4A级景区，长期生活工作在南街村做出突出贡献的非南街村籍人士，被授予“荣誉村民”称号。南街村集团是南街村创建的集体经济实体，下属28个企业，产业涉及食品、饮料、酒类、印刷、包装、医药、工艺品雕刻、旅游等。
?小问题： ?南街村的经济体制是？ 南街村“共产主义的要素”的核心是独特的平均主义的经济体制，即实行计划体制。
经济发展制度：严格管理，外圆内方，做到制度规范化 ?南街村在发展过程中，逐步形成了一套特有的较为完善的管理制度，这种适合其经济发展模式的管理制度，是促进该村经济迅猛发展的一大因素。 ?（1）南街村有着明确的经营管理权。该村所有的土地资源、工厂企业都属于集体所有，坚持生产和经营的集体化，重视生产资料所有制关系、人与人之间的关系和分配关系。 ?（2）南街村“工资+供给”的分配制度，体现了社会主义按劳分配的原则，调动了农民的积极性，保证了共同富裕。
?（3）“外圆内方”的经营理念取得了实践的成功。所谓“外圆”，就是与外界的经济交往中采取灵活的态度，使南街村与外界市场顺利接轨，以便谋求发展。所谓“内方”，是指在内部管理中，严格遵守党和国家的方针政策，强调规范职工和民工的行为。其严格的内部管理对于“小社区”的党风和社会风气起到了重要作用。
基因工程药物的研究进展 摘要：于什么是基因工程药物，基因工程药物的研究进展，基因工程药物的研究热点及发展方向，我国基因工程药物研究现状，新型基因工程药物，用于临床的基因工程药物，基因工程药物的安全性及其伦理问题的讨论。 关键词；基因工程药物；发展方向；临床应用；安全性 随着时间和科技的发展，基因工程药物早已被人们所熟知，然而大部分人群只知道有这样的药物却不知道它具体是什么样的，有怎样的功能，怎样的疗效。现在科学又是怎样来看待基因药物的，基因工程药物又有怎样的发展，它能否被人们所接受。以下是对这些问题的讨论。 1 基因工程药物及现状 1.1 什么是基因工程药物 所谓基因工程药物就是先确定对某种疾病有预防和治疗作用的蛋白质，然后将控制该蛋白质合成过程的基因取出来，经过一系列基因操作最后将该基因放入可以大量生产的受体细胞中去(包括细菌、酵母菌、动物或动物细胞、植物或植物细胞)，在受体细胞不断繁殖，大规模生产具有预防和治疗这些疾病的蛋白质，即基因疫苗或药物。 1.2 基因工程药物现状 据不完全统计，欧美诸国目前已经上市的基因工程药物近100种，还有约300种药物正在临床试验阶段，处于研究和开发中的品种约2000个。值得注意的是，近两年基因药物上市的周期明显缩短。与一般药物研究开发相比，基因工程药物研究投入大。在美国，这种药物的研究经费是工业研究平均投入的近10倍，且呈逐年增加的趋势。一些大的跨国公司为垄断市场而冒险涉足，如美国强生公司为开发一个重组人红细胞生成素(EPO)产品，投资≥20亿美元，获利也十分丰厚。 2 基因工程的研究进展 2.1 基因工程药物的发展概况 20世纪70年代，随着DNA重组技术的成熟，诞生了基因工程药物，高产值、高效率的基因药物给医药产业带来了一场革命，推动了整个医药产业的发展，医药产业进入了新的历史时期。基因药物经历了三个阶段：第一阶段是把药用蛋白基因导入到大肠杆菌等细菌中，通过大肠杆菌等表达药用蛋白但这类药物往往有缺陷，人类的基因在低等生物的细菌中往往不表达或表达的蛋白没有生物活性。第二阶段是人们用哺动物的细胞代替细菌，生产第二代基因工程药物。第三阶段是到了80年代中期，随着基因重组和基因转移技术的不断发展和完善，科学家可以将人们所需要的药用蛋白基因导入到哺乳动物体内，使目的基因在哺乳动物身上表达，从而获得药用蛋白。 2.2 基因工程药物的开发方法 现有研制和生产基因工程药物的方法，是利用DNA重组技术生产蛋白质，对于蛋白新药的发现仍然局限于常规药物的发现模式，一个基因工程新药的产生是依靠对天然蛋白因子的结构改造后得到，只有那些人体内较高表达的蛋白质才较大可能地被发现和生产。