疾病诊断中心检测报告
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摘要............................................................................. .. (4) 【实验过程】 (5) PartⅠ. NDV 抗血清制备 (5) 一、实验原理 (5) 二、实验仪器、材料和试剂 (7) 1. 仪器 (7) 2. 材料 (7) 3. 试剂 (7) 三、方法和步骤 (7) （一）NDV 兔抗血清制备 (7) 1. 家兔捉拿方法 (7) 2. 家兔固定方法 (8) 3. 初次免疫 (9) 4. 二次免疫 (10) 5. 终末免疫 (10) 6. 试血 (10) 7. 颈动脉放血 (10) 8. 血清分离 (12)
9. 抗血清保存 (12) （二）NDV 鼠抗血清制备 (12) 1. 小白鼠的捉拿和固定 (12) 2. 初次免疫 (13) 3. 二次免疫 (15) 4. 终末免疫 (15) 5. 试血 (16) 6．放血 (18) 7．血清分离 (19) 8．抗血清保存 (19) Part Ⅱ. 琼脂双扩散实验检测抗体效价 (19) 一、基本原理 (19) 二、实验仪器、材料和试剂 (20) 1. 仪器 (20) 2. 材料 (20) 3. 试剂 (20) 三、方法和步骤 (20) 1. 灭活鸡新城疫病毒 Ulster 2C 株抗原提取 . 20 2. 1%琼脂糖配制 (20) 3. 倒平板 (21) 4. 打孔 (21) 5. 稀释抗血清 (22)
6. 加样 (22) 7. 孵育 (23) 8. 结果观察 (23) Part Ⅲ. 酶联免疫吸附试验测定 NDV 抗血清效价 (23) 一、基本原理 (23) 二、实验仪器、材料和试剂 (24) 1. 仪器 (24) 2. 材料 (24) 3. 试剂 (24) 三、方法和步骤 (25) 1. 鸡新城疫病毒 Ulster 2C 株灭活抗原提取 . 25 2、抗原包被 (25) 3. 封闭 (25) 4. 洗板 (25) 5. 稀释抗血清 (25) 6. 加抗血清 (26) 7. 洗板 (26) 8. 加酶标二抗 (26) 9. 洗板 (27) 10. 显色 (27) 11. 终止 (27) 12. 读数 (27)
血型抗体效价测定 目的了解血型抗体效价测定的操作方法。 原理将被检抗血清作倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集强度。以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个（+）凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。 器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。 试剂1.标准2%A型红细胞生理盐水悬液。 2．生理盐水。 标本被检者血清。 操作以抗A效价测定为例。 1．血清倍比稀释取10支小试管，每管加入生理盐水0.1ml。在第1管中加入0.1ml被检者血清，混匀后吸取0.1ml加入第2管，依此类推，至第 10管，最后弃去0.1ml。 2．加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml，混匀。 3．温育置15~20°C室温中温育15min。 4．离心和观察结果以1000r/min离心1min，以出现1个（+）凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。 注意事项 1．倍比稀释要准确，避免稀释不匀出现跳管现象。 2．离心后试管内上清液出现溶血，表明不仅有抗原抗体反应，而且有补体激活，具有重要临床意义。 血型抗体效价测定 目的了解血型抗体效价测定的操作方法。 原理将被检抗血清作倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集强度。以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个（+）凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。 器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。 试剂1.标准2%A型红细胞生理盐水悬液。 2．生理盐水。 标本被检者血清。 操作以抗A效价测定为例。 1．血清倍比稀释取10支小试管，每管加入生理盐水0.1ml。在第1管中加入0.1ml被检者血清，混匀后吸取0.1ml加入第2管，依此类推，至第10管，最后弃去0.1ml。 2．加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml，混匀。 3．温育置15~20°C室温中温育15min。 4．离心和观察结果以1000r/min离心1min，以出现1个（+）凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。 注意事项 1．倍比稀释要准确，避免稀释不匀出现跳管现象。
孕妇血清IgG抗体效价检测操作规程 [样本要求]：血样标本最好采用EDTA抗凝（也可以用枸橼酸钠等抗凝），用血清代替血浆进行检测时，用前离心，2000g×10min，防止纤维蛋白干扰反应结果。 [样品准备]： 试剂配制：用985ulPH7.4的PBS(或者生理盐水)溶解15ul二巯基乙醇（2-Me）,即为0.2M(2-Me)应用液,密封，避光，置2---6℃保存. 红细胞标本的制备：用生理盐水配置红细胞悬液，红细胞最终浓度为1%左右. 血清标本的制备：将被检者静脉血采入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中,10分钟后离心取上清;或者将被检者静脉血采入无抗凝剂试管中,4℃放置12小时,或37℃ 放置2小时后离心,2000Rpm,10分钟,取上清.该上清不得有 絮状物或沉淀； [配套试剂]：孕妇IgG抗体 效价卡，标准A、B、O红细 胞（取决于父亲血型）， 0.2M(2-Me)应用液 [实验步骤] 1、试剂卡室温平衡， 离心一次，标记编 号； 2、配制中和血浆：先取待检者血浆200微升与生理盐水600微升做4倍稀释，然后取稀释后的标本和 0.2M巯基乙醇(2-Me)应用液各200ul，混匀，37℃孵育30---60分钟，（充分破坏标本中IgM类抗体） 既得到孕妇的中和血浆。 3 4、在所有孔中加入50ul健康人O型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统以外IgG血型抗体)或所有孔 中加入50ul健康人A型或B型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统IgG血型抗体)，然后加入上述表格中稀释的中和血浆各50ul 5、把加有血浆和红细胞的微柱卡置37 ℃专用孵育器孵育15分钟； 6、用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟1500r/min3分钟）。判定结果。 [结果判定]效价值：产生3+凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。 [参考值] 1、RH系统抗体效价16有临床意义 2、ABO系统抗体效价64有临床意义 [注意事项] 1.据文献报道微柱凝胶法检测出的母体效价值比常规聚凝胺和抗人球蛋白试管法高出1-2个滴度 （根据P.L.Mollison所著教材《临床医学中的输血（Blood Transfusion in Clinical Medicine）》） 2. 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。如不 得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。
工会代表选举情况报告 篇一:关于职工代表的选举结果报告 关于职工代表选举结果的报告 公司首届职代会筹备领导组: 根据公司职代会筹备领导组的精神，我们于六月八日至九日进行了职工代表的选举，本次选举由队组提名代表候选人，经队组进行初步审查后合格后于十六日召开了代表选举大会，以无记名投票方式进行了差额选举，根据计票结果，张英明等3名得票领先的同志当选为我科室参加公司首届职代会的代表。 特此报告 年月日 篇二:工会选举结果的报告 关于旭阳光电工会第一届工会主席选举结果的报告 开发区总工会: 我们于2011年12月14日召开了全体工会会员(代表)大会，选举产生了九江市旭阳光电科技有限公司工会委员会第一届工会主席，全体会员(代表)103人;参加选举103人，参选人陈鹏以87票当选为旭阳光电工会委员会第一届工会主席，请审批。 具体得票数如下。 九江市旭阳光电科技有限公司工会委员会 2011 年 12 月 20 日 注:任期与同级工会相同。 关于旭阳光电工会第一届女职工委员会 推选结果的报告
开发区总工会: 我们于2011年12月19日召开了第一届委员会一次会议，通过了第一届女职工委员会，现将推选结果报告如下，请审批。 九江市旭阳光电科技有限公司工会委员会 2011 年 12 月 20 日 注:任期与同级工会相同。 篇三:工会委员选举结果报告范例 中共XX县XXX党支部 关于新一届工会委员会选举结果的报告 XXX总工会联合会: 经请示县总工会，依照基层工会选举办法，我XX于20XX年X月XX 日召开会员大会选举产生了新一届工会委员会。我单位工会会员应到选举人数XX人，实到XX人，根据《基层工会选举条例》的规定，符合选举，选举以无记名投票方式进行，发出选票XX张，收回选票XX张，其中:有效选票XX张，作废选票XX张，选举有效，其 结果如下: 工会主席:XXX，同意票XX张 工会委员:XXX 同意票XX张 XX，同意票XX张 XX同意票XX张 以上选举结果经工会会员代表现场监督，真实有效，请县总工会对我XXX新一届工会委员会按照《工会法》、《工会章程》的有关规定进行批准。 XXX党支部 二OXX年XX月XX日
抗体效价测定操作规程 操作步骤： 一.IgG 类 I.IgG类抗体效价滴定，须取适量血清200］加等体积2—Me溶液混合，封口，置37C水浴箱作用60分钟，先稀释血清：200L病人血清 600L 生理盐水备用，排列6 支试管按顺序编号。第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L，在第一管和第二管中各加入稀释血清200L，第二管混匀后移出200L转至第三管，以同样操作第六管，从第六管吸出200L 暂时保留在另一试管中（可做为第七管），以备必要时作进一步稀释。这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是 1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256 。 2.加红细胞悬液（自配红细胞悬液同反定型试剂）每管各加2％相应红细胞悬液200L，混匀。（如待检血清抗体为抗A,则加入A型标准红细胞悬液；如待检血清抗体为抗B,则加入B型标准红细胞悬液；如待检血清中既有抗A又有抗B,则倍量稀释两份血清，一份加入A 型标准红细胞悬液，另一份加入B型标准红细胞悬液；） 3.先直接观察离心结果，之后在每管分别加入凝聚胺试剂盒中的R1 液3d,混合30S均匀后，在各加R2液2滴，操作方法同凝聚胺交叉配血法，然后判读结果。通常以肉眼观察到的第一个“±”的凝集管作为判断的终点, 终点血清稀释度的倒数为效价（Titer ）,或称滴度。 二.IgM 1?血清连续倍量稀释法先稀释血清：100L病人血清+700L生理盐
水备用，排列6 支试管按顺序编号。第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L,第一管和第二管中各加入稀释血清200L,第二管混匀后移出200L转至第三管，以同样操作第六管，从第六管吸出200L 暂时保留在另一试管中（可做为第七管），以备必要时作进一步稀释。这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是 1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256 。 2. 加红细胞悬液（自配红细胞悬液同反定型试剂）每管各加2％相应红细胞悬液200L,混匀。（如待检血清抗体为抗A,则加入A型标准红细胞悬液；如待检血清抗体为抗B,则加入B型标准红细胞悬液；如待检血清中既有抗A又有抗B,则倍量稀释两份血清，一份加入A 型标准红细胞悬液，另一份加入B型标准红细胞悬液；）三．此类为IgM 类盐水抗体可立即离心后观察。 四． 五．（学习的目的是增长知识，提高能力，相信一分耕耘一分收获，努力就一定可以获得应有的回报）
标准血清效价测定 （一）凝集效价的测定 1．取小试管20 支，分两排放置于试管架上，前排标明 A ，后排标明 B ，再将各排由左而右注明号码。 2．各管均加生理盐水0．2 ml 。 3．吸取A 型被测血清0．2 ml ，加入A 排第1 管中，混匀，从第一管 中吸出0．2 ml 加入第2 管中，依次稀释至第10 管，从第10 管吸出 的0．2ml 弃掉，用同样的方法取B 型被测血清在B 排中稀释，最后两 排管的血清稀释倍数分别为1∶2 、1∶4 、1∶8 、1∶16 、1∶32 、1∶ 64 、1∶128 、1∶256 、1∶512 、1∶1024 。 4．A 排管各加B 型2 ％红细胞生理盐水悬液0．2ml；B 排管各加A 型 2 ％红细胞生理盐水悬液0．2ml，混匀。 5．放置室温（18 ～22 ℃）1 ～2 小时观察结果，以稀释倍数最高而 又显凝集者为其凝集效价。上述操作过程见下表。 表 A 型标准血清(抗B)效价测定
表 B 型标准血清(抗A)凝集效价测定 如被测血清在第七管仍显凝集，则其凝集效价为1∶128 。如第八管仍显凝集则其凝集效价为1∶256 。O 型标准血清抗A 、抗B 的凝集效价测定，可参照上述 （二）标准血清的质量要求 A 型（抗B）效价应在1∶64 以上， B 型（抗A）效价应在1∶128 以上，如果低于上述标准，不能使用。并要检查效价低的原因，重新制备，如果效价太高，可按效价规定加适量等渗盐水稀释。且不含其它血型抗体，不形成缗钱状的假凝集，冷凝集素效价＜1∶4 。 （三）亲和力的测定 所谓亲和力是指标准血清与相对应的红细胞混合后出现的凝集速度及凝集块的大小而言。测定方法如下： 取待测血清0．1ml 放于玻片或瓷板上，取对应的10 ％红细胞生理盐水悬液0．05 ml ，加于血清中混匀并涂成直径约1cm 的圆形，立即记时。观察出现凝集的时间。并继续转动玻片或瓷板，至3 分钟时观察凝集块的大小。标准血清亲和力的质量要求，在15 ～30 秒以内应出现凝集，3 分钟时凝集块应在1m- m2 以上，标准血清中不应含脂肪（脂肪可使效价迅速降低），不可污染细菌。
实验一抗体的制备及效价检测 实验目的：本实验是单克隆抗体技术的免疫阶段的过程，为单克隆抗体技术提供免疫淋巴细胞。了解免疫的原理，掌握免疫方法和抗血清的制备技术，掌握双向免疫扩散法测定抗体的效价。 一．实验原理 机体的特异性免疫反应是指机体受抗原物质刺激后产生体液免疫和细胞免疫的过程。一种抗原能否引发抗体反应，一方面取决于抗原分子表面有无特异性的化学结构---抗原决定簇，另一方面取决于机体有无相应的免疫活性细胞。当上述两个条件具备时，抗原进入机体经过一定的潜伏期，抗体效价逐步上升，达到高峰后，能维持一短暂的时期，以后又逐渐下降，但当第二次接触相同的抗原时，抗体的上升较前次为快，高峰时的效价也比前次为高。抗体持续的时间也较长，此也称为再次反应。 完全福氏佐剂的使用能够延长抗原在体内的存留时间，增加可溶性抗原的免疫性。通常制备抗体时常用完全福氏佐剂加强免疫。 抗原、抗体在合适的浓度和比例条件下，抗原和其相应的抗体在有固相支持的液相环境中各自发生扩散。分子双向扩散接触时形成肉眼可见的沉淀线反应。抗体的效价即时指与固定浓度的抗原发生沉淀反应时所需的最小抗体浓度。 二．实验步骤 1．动物的选择：选择2-3个月以上的小鼠。免疫作好标号。分笼饲养。 2．抗原的选择：将抗原（纤维素酶）稀释为4 mg/ml，即可与佐剂混合制成乳剂用于动物免疫。 3．佐剂和抗原乳剂的制备 佐剂完全福氏佐剂：轻矿物油（石腊油）8.5 ml；羊毛脂1.5 ml；灭活结核杆菌10 mg。 抗原乳剂制备（1）油剂：矿物油和羊毛脂按比例混合，高压8磅20分钟灭菌后作为油剂，使用前微火融化。（2）水剂：灭活结核杆菌1 mg/ml + 抗原4 mg/ml （均为终浓度）。（3）油剂和水剂1：1混合。混合方式：研磨或者注射器混合。 4．免疫方法：小鼠背部皮下多点注射，每点0.1ml。 第1次免疫：实验组小鼠加佐剂的抗原。 A组2只（1-2号）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml磷酸缓冲液。 B组4只（3-6号）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml加佐剂的抗原乳剂。 第2次免疫：第3周实验组小鼠不加佐剂抗原。 A组：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml磷酸缓冲液。 B组：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml2mg/ml抗原液。 第3次免疫：第二次免疫后1周，实验组小鼠不加佐剂抗原。 A组：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml磷酸缓冲液。 B组：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml2mg/ml抗原液。 5．抗血清的制备 第3次免疫一周后，眼眶取血或心脏取血。收集的血液置于室温下1h左右，凝固后，置4℃下，过夜（切勿冰冻）析出血清，离心，4000rpm,10min。在无菌条件，吸出血清，分装（0.05～0.2ml），贮于-40℃以下冰箱，或冻干后贮存于4度冰箱保存。
血型检查化验单怎么看 在了解血型检查化验单之前，让我们先了解下抗原与抗体的关系。 抗原是指病原体等异物侵入人体之后，引起人体产生抗体的物质（即病原体等异物）。 抗体指的是病原体侵入人体之后，刺激了淋巴细胞，淋巴细胞产生一种抵抗该病原体的特殊蛋白质，是一种可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。主要分布在血清中，也分布于组织液及外分泌液中。 圆规正传，接着就来了解下血型检查化验单到底应该怎么看吧！ 血型检查化验单上会出现孕妇及其配偶的血型，如，孕妇血型为O型，丈夫血型为A型，化验单上显示IgG抗A效价是1：4，大于1：64的参考值，也就是说ABO溶血检查结果正常，不会发生溶血现象；分母如果大于64，则表示有溶血的可能。 如报告单上显示，Rh（D）+也就是说孕妈妈的血型中含有Rh因子为阳性，绝大部分人的都是这样的数据；如果显示为RH（D）-，那么就有可能发生Rh溶血病，需做密切的观察和检查。 溶血化验单怎么看 关于溶血化验单主要分为两部分： 1、Rh血型不合 首先要知道Rh阴性血型在不同人群和种族中存在差异，在我国汉族中仅为0.34%，少数民族中则在5%以上。Rh血型共有六种抗原，即C和c，D和d，E和e，D抗原是最早发现的，所以临床上凡是D抗原阳性者称为Rh阳性，无D抗原者称为Rh阴性。Rh血型的抗原中以D抗原的抗原性最强，而Rh血型抗原的抗原性决定了溶血的严重程度。 Rh-血型的准妈妈，所怀第一胎为Rh+血型，那么胎儿则含有D抗原，准妈妈体内无D 抗原，因而准妈妈体内对抗D抗原的抗体还不够多，因此在第一胎时发生溶血病的可能性比较小。而在第二胎时，准妈妈因为在第一胎分娩时接触到了胎儿的D抗原，所以体内也产生了更多的D抗体，如果在第二胎所怀胎儿为Rh+血型的话，那么D抗体会增加，会与胎儿体内的抗原发生反应，抗体会透过胎盘把第二个婴儿的血液溶解，这样就会导致第二胎发生溶血病。
NDV抗血清制备及抗体效价测定 【实验目的】 1. 学习抗血清制备的基本原理，掌握兔和小鼠免疫注射方法、兔颈动脉放血、小鼠眼球采 血技术。 2. 学习双向琼脂扩散实验的基本原理，掌握的基本程序和结果判读方法。 3. 学习酶联免疫吸附实验（ELISA）的基本原理，掌握间接ELISA的基本程序和结果判读 方法。 4. 学习免疫印迹实验的基本原理，掌握免疫印迹记实验的的基本程序和结果判读方法。 PartⅠ. NDV抗血清制备 一、实验原理 将具有免疫原性的物质注入健康动物体内后，抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。待动物血清中存在大量抗体时，采集动物血液，分离析出血清，便得到所需的抗血清（免疫血清或抗体）。由于抗原性物质通常具有多个抗原决定簇，可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆，合成和分泌各种抗原决定簇的抗体，免疫血清中实际上是含有多种抗体的混合物，所以这种免疫法获得的免疫血清又称为多克隆抗体（Polyclonal antibody，PcAb）。多克隆抗体的制备是一个复杂的过程，为了获得特异性强，效价高的抗血清，除了抗原的因素外，还需注意动物品系的选择、抗原注射的浓度、剂量、次数、间隔时间及注射途径等。对于免疫原性较弱的可溶性抗原(如蛋白质类抗原)要加入佐剂，以增强免疫性。 本实验介绍新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）抗血清的制备过程。新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）又称亚洲鸡瘟病毒、伪鸡瘟病毒或禽肺脑炎病毒。在病毒分类学中的位置属于副黏病毒科（Paramyxoviridae）、副黏病毒属（Paramyxovirus）中的一个种。该病毒主要危害鸡、珠鸡和火鸡，在被侵袭的鸡群中迅速传播，强毒株可使鸡群全群毁灭。以新城疫病毒灭活疫苗（Ulster 2C株）灭活油剂苗多种途径免疫兔和小白鼠，制备新城疫病毒抗血清。 二、实验仪器、材料和试剂 1. 仪器
ABO 血型鉴定总结 -临床医学检验考试 1.AB0血型鉴定原理 常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗体,依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有:①正向定型:用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型:用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定:凡红细胞出现凝集者为阳性,呈散在游离状态为阴性。 2. 鉴定方法 (1生理盐水凝集法:①玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低, 则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。②试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密, 促进凝集作用,适于急诊检查。 红细胞亚型抗原性弱, 如抗 A 抗 B 标准血清效价低时, 易造成漏检或误定。如加用 O 型(抗 A 、 B 血清和反向定型,可避免此类错误医学 `教育网搜集整理。 玻片法凝集结果判断:红细胞呈均匀分布,无凝集颗粒,镜下红细胞分散。在低倍镜下凝集程度强弱判断标准:①呈一片或几片凝块, 仅有少数单个游离红细胞为(++++。②呈数个大颗粒状凝块,有少数单个游离红细胞为(+++。③数个小凝集颗粒和一部分微细凝 集颗粒,游离红细胞约占 1/2为(++。④肉眼可见无数细沙状小凝集颗粒。于镜下观察, 每凝集团中有 5~8个以上红细胞凝集为 (+ 。⑤可见数个红细胞凝集在一起,周围有很多的游离红细胞(±。⑥可见极少数红细胞凝集, 而大多数红细胞仍呈分散分布为混合凝集外观。⑦镜下未见细胞凝集,红细胞均匀分布为(-。 (2凝胶微柱法:是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗体,加入试剂、标本, 用专用离心机离心后可直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操作标准化,定量加样,确保结果准确性。 3. 抗 A 、抗 B 和抗 AB 标准血清标准
孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程 【原理】 新生儿溶血病HDN发生的主要原因在于母子血型不合，血型系统最主要的类型为ABO血型系统，本实验采用微柱凝胶检测孕妇血清中的抗A（B）IgG抗体效价。 【试剂】 6%牛血清白蛋白；生理盐水；凝胶卡 【标本采集】 孕妇静脉血3毫升，肝素钠抗凝，孕妇爱人静脉血3毫升，肝素钠抗凝。将孕妇标本制作成血清标本，孕妇爱人标本制成0.5%红细胞标本（用生理盐水洗涤后配制）。 【操作步骤】 1．取孕妇血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白，37度水浴温育30～60分钟；2．将血清倍比稀释成9管，依次为1：4、8、16、32、64、128、512、1024、2048管；3．将卡作好标记，在所有孔中加入经处理好的孕妇血清标本50ul； 4．然后在所有孔中加入50ul的孕妇爱人0.5%红细胞标本； 5．37度孵育15分钟（专用孵育箱）； 6．专用离心机离心5分钟；900rpm2分钟，1500rpm3分钟； 7．取出判定结果； 【结果判定】 阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中； 阴性结果：红细胞完全沉降到胶底部，在凝胶管底部形成红细胞扣。 【结果报告】 产生1+阳性凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。 【注意事项】 1．红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应，尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本试验。 2．血清标本：血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍红细胞沉淀，呈假阳性反应。 3．如在微柱凝胶中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所臻溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。 4．本凝胶卡价格不菲，成本较高，请您节约使用。 【临床意义】 有人观察1632例孕妇血清中IgG抗A（B）≥1：64者249例；ABO-HDN发生率随IgG抗A（B）效价升高而上升；HDN与妊娠史的频率有关，随着年龄上升，孕妇个体IgG抗A（B）抗体效价也随之上升。夫妇间ABO血型不合者应及时检查产前血型抗体水平，用于预防不良妊娠的发生；IgG抗A（B）效价的高低与HDN的发病率成正比；孕妇血清IgG抗A（B）效价≥1：64需定期检测抗体效价水平及时用药降低抗体效价，以预防新生儿溶血病的发生。
选举结果报告 导读：本文是关于选举结果报告的文章，如果觉得很不错，欢迎点评和分享！ 【篇一：中国共产党鱼峰区龙擎苑社区委员会选举结果报告】 中共鱼峰区五里亭街道工作委员会： 中国共产党鱼峰区龙擎苑社区第一次党员代表大会于20XX年XX月XX日召开。 这次大会应到会代表112名，因事因病请假的代表4名，实到会代表108名。大会按照《党章》和《中国共产党基层组织选举工作暂行条例》规定，经到会代表充分酝酿讨论并根据多数代表的意见确定候选人，采用无记名投票方式进行差额选举，选举产生了中国共产党鱼峰区龙擎苑社区委员会委员。 委员候选人选举计票结果： 文琴英103票、黄由102票、高景富100票、李志明91票、张丽平90票、陈桂英89票、陶琪89票、吕乐俊51票。 根据计票结果：前七位候选人的得票数超过到会代表的半数以上，当选为中国共产党鱼峰区龙擎苑社区第一届委员会委员。 根据中国共产党鱼峰区龙擎苑社区第一届委员会第一次全委会酝酿并投票选举书记、副书记的计票结果： 高景富7票李志明7票 根据计票结果：
高景富同志当选为中国共产党鱼峰区龙擎苑社区第一届委员会书记； 李志明同志当选为中国共产党鱼峰区龙擎苑社区第一届委员会副书记； 特此报告，请审批。 中国共产党鱼峰区龙擎苑社区委员会 （代章） 20XX年XX月XX日 【篇二：XX镇西塘党支部选举结果报告单】 **镇西塘村共有中共党员_____人，于_____年____月____日以“两推一选”的方式，进行了党支部的投票选举工作。参加投票的党员有______名，共发出选票_______张，收回选票_______张，其中有效票______张，废票______张，弃权票______张。本次选举应选支委成员5名，选举当选支委成员______名。当选人具体情况如下表：监票人：（签字） 唱票人：（签字） 计票人：（签字） **镇西塘村党支部（公章） 20____年____月____日 【篇三：关于分工会换届选举结果的报告】 校工会： 3月25日，后勤服务总公司举行分工会委员改选工作，应到人
实验一免疫抗体的制备及效价检测 一．教学目标：本实验是单克隆抗体技术的免疫阶段的过程，为单克隆抗体技术提供免疫淋巴细胞。了解免疫的原理，掌握免疫方法和抗血清的制备技术，掌握双向 免疫扩散法测定抗体的效价。 二．重点难点：给小鼠注射抗原的实验操作，小鼠心脏取血的实验操作。载玻片琼脂 凝胶板打孔实验操作。 三．授课方式与教学方法：讲解原理、实验操作示范或具体指导。 四．教学内容: 实验原理 机体的特异性免疫反应是指机体受抗原物质刺激后产生体液免疫和细胞免疫的过程。一种抗原能否引发抗体反应，一方面取决于抗原分子表面有无特异性的化学结构---抗原决定簇，另一方面取决于机体有无相应的免疫活性细胞。当上述两个条件具备时，抗原进入机体经过一定的潜伏期，抗体效价逐步上升，达到高峰后，能维持一短暂的时期，以后又逐渐下降，但当第二次接触相同的抗原时，抗体的上升较前次为快，高峰时的效价也比前次为高。抗体持续的时间也较长，此也称为再次反应。 完全福氏佐剂的使用能够延长抗原在体内的存留时间，增加可溶性抗原的免疫性。通常制备抗体时常用完全福氏佐剂加强免疫。 抗原、抗体在合适的浓度和比例条件下，抗原和其相应的抗体在有固相支持的液相环境中各自发生扩散。分子双向扩散接触时形成肉眼可见的沉淀线反应。抗体的效价即时指与固定浓度的抗原发生沉淀反应时所需的最小抗体浓度。 实验步骤 1．动物的选择：选择2-3个月以上的小鼠。免疫作好标号。分笼饲养。 2．抗原的选择：将抗原（纤维素酶）稀释为4 mg/ml，即可与佐剂混合制成乳剂用于动物免疫。 3．佐剂和抗原乳剂的制备 佐剂完全福氏佐剂：轻矿物油（石腊油）8.5 ml；羊毛脂1.5 ml；灭活结核杆菌10 mg。 抗原乳剂制备（1）油剂：矿物油和羊毛脂按比例混合，高压8磅20分钟灭菌后作为油剂，使用前微火融化。（2）水剂：灭活结核杆菌1 mg/ml + 抗原4 mg/ml （均为终浓度）。（3）油剂和水剂1：1混合。 混合方式：研磨或者注射器混合。 4．免疫方法：小鼠背部皮下多点注射，每点0.1ml。 第一次免疫：实验组小鼠加佐剂的抗原。 A组3只（头部有黄色）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml磷酸缓冲液。 B组3只（尾部有黄色）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml 2mg/ml纤维素酶液。 C组6只（中部有黄色）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml加佐剂的抗原乳剂。 第二次免疫：第3周实验组小鼠不加佐剂抗原。 A组3只（头部有黄色）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml磷酸缓冲液。 B组3只（尾部有黄色）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml 2mg/ml纤维素酶液。 C组3只（中部有黄色）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml2mg/ml纤维素酶液。 第三次免疫：第二次免疫后1周，实验组小鼠不加佐剂抗原。 A组3只（头部有黄色）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml磷酸缓冲液。
龙源期刊网 https://www.doczj.com/doc/2910305772.html, 禽流感免疫抗体效价检测 作者：何生 来源：《湖北畜牧兽医》2013年第07期 摘要：为掌握H5N1高致病性禽流感疫苗免疫效价，了解乌鲁木齐市米东区鸡群禽流感免疫抗体水平，对该地区不同鸡场进行了禽流感抗体检测。结果表明，40只免疫鸡，免疫抗体 效价合格数33只，总合格率为82.5%。说明近几年对高致病性禽流感采取的强制免疫措施达到了比较显著的效果。 关键词：禽流感；免疫；抗体效价；血凝试验；血凝抑制试验 中图分类号：S855 文献标识码：B 文章编号：1007-273X（2013）07-0029-02 禽流感是由禽流感病毒引起的一种禽类（家禽和野禽）的烈性传染病，被世界动物卫生组织（OIE）定为A类传染病。禽流感病毒感染后，呈现出较严重的全身性、出血性、败血性症状，死亡率较高。禽流感病毒不仅能引起禽类严重的疾病，而且对人类和哺乳类动物也能造成感染。在世界各种家禽和野生禽类中，按照血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）表面抗原来区分，已发现了数千种属于许多不同抗原亚型的病毒。各种品种和不同日龄的禽类均可感染高致病性禽流感。该研究为掌握H5N1高致病性禽流感疫苗免疫效价，了解本地区鸡群禽流感免疫抗体水平，对该地区鸡场进行了禽流感抗体检测，并对不其检测结果进行了对比分析。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 试验动物 40只鸡由米东区铁厂沟镇大草滩村养禽场提供。 1.1.2 试剂禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验抗原，禽流感病毒H5亚型血凝抑制试验阳性血清，1%鸡红细胞悬液。 1.1.3 仪器 96孔V型微量反应板、台式离心机，单道、多道微量可调移液器，吸嘴，微量振荡器，加样槽。 1.2 方法 1.2.1 血凝（HA）试验在微量反应板的1～12孔均加入0.025 mL的PBS，换滴头，吸取0.025 mL病毒悬液加入第1孔混匀，从第1孔吸取0.025 mL病毒液加入第2孔，混匀后吸取0.025 mL加入第3孔，依次倍比稀释至第11孔，从第11孔吸取0.025 mL弃之，换滴头，每孔再加入0.025 mL PBS。每孔均加入0.025 mL体积分数为1%的鸡红细胞悬液，充分混匀后加入。在微量振荡器上振荡2 min，在25 ℃恒温箱内静置40 min后观察结果。
选举结果报告模板 ******党总支（直属党支部）关于中共盐城工学院 第一次代表大会代表选举结果的报告 校党委： ******党总支（直属党支部）于年月日召开了全体党员大会。这次大会应到党员名，因事因病请假名，实到会名。按照《中国共产党基层组织选举工作暂行条例》和学校党委《关于做好我校第一次党代会代表选举工作的通知》，采用无记名投票差额选举的办法，选举产生了名出席中共盐城工学院第一次代表大会的代表。 代表如下（以姓氏笔划为序）： （此处为代表姓名） （盖章）党总支（直属党支部） 年月日 附：计票结果报告单
盐城工学院第一次党代会代表选举计票结果报告单 本次选举应到党员名，实到党员名，发出选票张，收回选票张，其中有效票张，无效票张。选举有效。 选举计票如下（以获得赞成票多少为序）： 总监票人： （盖章）党总支（直属党支部） 年月日
中国共产党盐城工学院第一次代表大会代表登记表
注：“代表类别”为：“在职教职工”、“离退休教职工”、“学生”。
中共盐城工学院第一次代表大会代表名册 注：代表候选人预备人选为学生党员的，请在“备注”栏注明“学生
表格填写说明 1．为便于统计和归档，请各选举单位一律按照《代表候选人预备人选名册》、《代表名册》及《代表登记表》样表的式样用计算机打印相关内容，并在报送时一并上交含有相应内容的软盘一张； 2．表格文件格式为WORD，纸张大小为A4，上下左右边距为2.3厘米； 3．请在《代表登记表》相应位置上粘贴彩色2吋标准照片一张； 4．相关表格可到组织部网页下载； 5．各选举单位在填写表格时，一定要认真核实有关内容，确保准确无误。 校党委组织部 2006年1月12日
3．ABO红细胞血型检测 波片法 原理: 根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型、及O型四种。可利用红细胞凝集试验即用已知抗A或抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原。 ABO抗体有天然和免疫两种。天然抗体是指未经可察觉的抗原刺激而产生的抗体。人在出生前尚未产生抗体，一般在出生几个月后才开始形成自己的抗体；到5-6岁时，具有较高的效价。 样本： 在操作前应先看说明书，有的厂商推荐用全血，有的厂商指定用盐水、血清或血浆悬浮的浓度较低的红细胞悬浮液。 试剂： 有卫生部颁发的生产许可证和批准文号的厂家生产的经中国药品生物制品检定所批批检定合格，并贴有防伪标签的试剂。 试剂盒组成： 1．有生产许可证的单克隆或多克隆抗A抗原抗体。 2．有生产许可证的单克隆或多克隆抗B抗原抗体。 3．有生产许可证的单克隆或多克隆抗A、B抗原抗体。 4．玻璃载波片或划分成小格的检测板。 5．蘸试剂棒。 操作步骤： 1．取清洁玻片，标明抗A、抗B、抗A、B, 2．在标记好的洁净波片上滴一滴抗-A 3．在另一标记好的洁净波片上滴一滴抗-B。 4．在每一波片的试剂上滴一滴已混匀的要检测的红细胞悬浮液（在盐水、血清或血浆）。 5．每一块波片用一个洁净的试剂棒将试剂和红细胞充分混匀，使混合物的面积大约为20mm x 40mm。 6．轻微倾斜波片2分钟。不要把波片放于发热的表面上。 7．判断，解释并记录所有的反应结果。 结果判读：见表： 红细胞的ABO定型 正向定型结果判读 抗A 抗B抗A,B O + + A + + B + + + AB 有明显的凝集块为阳性结果，2分钟后仍为均匀的红细胞悬液则为阴性结果。
试管法血型抗体效价测定 1. 检验目的 抗体效价测定是一种半定量检测抗体浓度的方法。把效价视为抗体的含量，在临床输血检验中主要用于鉴定标准血清效价、患者血清抗体检测及血清试剂的稀释等。 2. 检验方法 试管法（血凝法）。 3. 检验原理 将被检抗血清用生理盐水作倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集强度。以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现肉眼明显可见凝集的最高血清稀释倍数的倒数来表示抗体的效价。 4. 标本要求 4.1 采集患者EDTA抗凝静脉血2.0ml。 4.2 将不抗凝静脉血以3000r/min离心3分钟，分离上层血清4C保存。 5. 试剂 标准2%A1、B型标准红细胞悬液；0.9%生理盐水。 6. 器材 离心机、小试管、刻度吸管或加样器（50?200卩l ）37C水浴箱等。 7. 操作程序 7.1. 取20支小试管，分两排，编号1-10 号，第一排每管加生理盐水0.4ml。 7.2. 用加样器在第一排第一管中加入0.4ml 被检者血清，混匀，移0.2ml 至第二 排第 1 管，依此类推，至第10 管，最后弃去0.4ml。1?10管的稀释度分别为1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256、1:512。 7.2. 于第一排每管中加入2% A1 型标准红细胞悬液0.2ml ，混匀。 7.3. 于第二排每管加入2%B型标准红细胞悬液0.2 ml，混匀。
7.3. 室温孵育15分钟。 7.4. 以3000r/min 离心10秒，以出现（＋）凝集强度试管的血清稀倍数的倒数 为该抗血清的效价。 8. 结果判断 8.1. 一般盐水凝集试验可立即观察，或置室温1 小时观察结果。 82冷凝集素效价要置4 °C冰箱1小时观察结果。 8.3. 若出现低稀释凝集强度比高稀释凝集强度要强，说明有前带现象发生。 8.4. 对1 份血清重复滴定，结果可能不一样，如果只有一个稀释度的差别，是正常误差范围。 9. 注意事项 9.1 ．稀释操作时要准确，避免稀释不匀出现“跳管”现象。 9.2. 离心后试管内上清出现溶血外观，表明不仅有抗原抗体反应，而且有补体激 活，有重要临床意义。 9.3. 稀释液的容量越小，可能产生的误差越大。如果可能，可以增大稀释容量。 9.4. 如果一种血清分别和几种红细胞作用，要将血清做总稀释，然后分别取相同 的血清量到几个试管中，以减少误差。
实验目的： 实验材料： 1、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸二氢钾、十二水磷酸氢二钠、氯化钠、氯化钾、浓硫酸、Tween-20 、BSA等。 2、酶标抗小鼠IgG 3、TMB 溶液配制： 1、抗原包被液：PH9.6的碳酸盐缓冲液（0.05 M）批号： 称取： Na2CO3（分子量105.99） 1.59 g NaHCO3（分子量84.01） 2.9 g 加蒸馏水至1000ml，调PH值。滤膜（0.45 μm）过滤，4℃保存。 2、洗涤缓冲液(PBS-T) 批号： PBS缓冲液1000 ml Tween-20: 0.5 ml 调PH值至7.39。滤膜（0.45 μm）过滤，室温保存或4℃保存。 3、封闭液（1.0% BSA/PBS-T）批号： 洗涤缓冲液1000 ml BSA: 10 g 现用现配。 4、血清稀释液(pH7.4 PBS)：0.0067 M(PO4+) 5、洗涤用PBS (pH7.4), 0.15 M(PO4+) 批号： 称取： NaCl8.0 g Na2HPO4·12H2O 2.9 g KH2PO40.2 g KCl0.2 g 加蒸馏水至1000 ml，调PH值至7.39。滤膜（0.45 μm）过滤，室温或4℃保存。 6、二抗稀释液：同洗涤缓冲液 7、终止液：2M H2SO4批号： 水90ml 浓硫酸10.64ml 浓硫酸逐滴加入水中，不断搅拌，防止局部过热。4℃保存。 实验器材： 1、1 ml枪头；200 μl枪头；10 μl枪头，。
2、1.5 ml EP管。 3、移液器1 ml、200 μl、100 μl、20 μl、10 μl、2 μl。 4、96孔板（costor，美国）。 5、电子天枰。 6、酶标仪（Labsystems DragonMK3，芬兰）。 7、洗板机（BIORAD MODEL 1575，美国）。 8、电子pH计（SevenEasy S20）。 方法步骤： 1 包被抗原： 用μg/ml 的蛋白包被，每孔100μl。密封，4℃过夜。 2 洗板： 取出预先4℃包被过夜的96孔板，用PBS-T洗液300 μl/孔洗板5次，每次轻轻振荡，拍干。 3 封闭： 每孔加入封闭液300 μl/孔。封膜，37℃放置1 h。 5 洗板： 用PBS-T洗液300 μl/孔洗板5次，每次轻轻振荡，拍干。 6 加一抗： 96孔板上血清稀释倍数为1:100，1:200，1:400，1:800，1:1600，1:3200，1:6400，1:12800，共8个稀释梯度，具体操作如下： 血清在Ep管中稀释成100倍： 1：10 ： 5 μl原倍血清+ 45 μl血清稀释液； 1：100 ：30 μl10 倍血清+ 270 μl血清稀释液； 按设计加入96孔板相应位置，然后依次按倍比稀释至200倍、400倍、800倍、1600倍、3200倍、6400倍、12800倍： 1：400 ：100 μl 200 倍血清+ 100 μl血清稀释液； 1：800 ：100 μl 400 倍血清+ 100 μl血清稀释液； 1：1600 ：100 μl 800 倍血清+ 100 μl血清稀释液； 1：3200 ：100 μl 1600倍血清+ 100 μl血清稀释液； 1：6400 ：100 μl 3200倍血清+ 100 μl血清稀释液； 1：12800 ：100 μl 6400倍血清+ 100 μl血清稀释液； 所有样本加完后，封膜，37℃放置1 h。 7 洗板： 用PBS-T洗液300 μl/孔洗板5次，每次轻轻振荡，拍干。 8 加酶标二抗： 酶标抗小鼠IgG稀释5000倍：
ABO血型鉴定总结-临床医学检验考试 1.AB0血型鉴定原理 常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有：①正向定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散在游离状态为阴性。 2.鉴定方法 （1）生理盐水凝集法：①玻片法：操作简单，适于大量标本检查，但反应时间长；被检查者如血清抗体效价低，则不易引起红细胞凝集，因此，不适于反向定型。②试管法：由于离心作用可加速凝集反应，故反应时间短，而且，借助于离心力可以使红细胞接触紧密，促进凝集作用，适于急诊检查。 红细胞亚型抗原性弱，如抗A抗B标准血清效价低时，易造成漏检或误定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此类错误医学`教育网搜集整理。 玻片法凝集结果判断：红细胞呈均匀分布，无凝集颗粒，镜下红细胞分散。在低倍镜下凝集程度强弱判断标准：①呈一片或几片凝块，仅有少数单个游离红细胞为（++++）。②呈数个大颗粒状凝块，有少数单个游离红细胞为（+++）。③数个小凝集颗粒和一部分微细凝
集颗粒，游离红细胞约占1/2为（++）。④肉眼可见无数细沙状小凝集颗粒。于镜下观察，每凝集团中有5～8个以上红细胞凝集为（+）。 ⑤可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多的游离红细胞（±）。⑥可见极少数红细胞凝集，而大多数红细胞仍呈分散分布为混合凝集外观。⑦镜下未见细胞凝集，红细胞均匀分布为（-）。 （2）凝胶微柱法：是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗体，加入试剂、标本，用专用离心机离心后可直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操作标准化，定量加样，确保结果准确性。 3.抗A、抗B和抗AB标准血清标准 准血清均采自健康人，并应符合下述条件：医学教`育网搜集整理①特异性：只能与相应的红细胞抗原发生凝集，无非特异性凝集。②效价：我国标准抗A和抗B血清效价均在1：128以上。③亲和力：我国标准要求抗A对A1、A2及A2B发生反应开始出现凝集的时间分别是15s、30s和45s；抗B对B型红细胞开始出现凝集的时间为15s.凝集强度为3min时，凝块不小于1mm2.④冷凝集素效价：在1：4以下。⑤无菌。⑥灭活补体。 4.血型鉴定操作时注意事项 一般注意事项：①所用器材必须干燥清洁、防止溶血，凝集和溶血的意义一样。为避免交叉污染，建议使用一次性器材。标准血清从冰箱取出后，应待其平衡至室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存。