第二十五章病原性放线菌及检验
本章内容
一、放线菌属
二、诺卡菌属
放线菌
一群呈分枝状生长的G+杆菌。按对氧的需要可分为需氧性放线菌、兼性厌氧放线菌和厌氧性放线菌。
对人致病的放线菌可按是否含有分枝菌酸分为两大类，一类不含分枝菌酸，如放线菌属；另一类含有分枝菌酸，如诺卡菌属。
放线菌属——生物学特性
形态与结构
形态：分枝状无隔菌丝，但不形成空中菌丝。
有时断裂成短杆状或球状。
染色：G+；抗酸染色阴性。
特殊结构：无芽胞、荚膜和鞭毛。
培养特性
营养要求：培养困难。
气体环境：厌氧或微需氧。
菌落特点：初次分离加5%CO2可促进生长。
培养基（牛心脑浸液琼脂）：3～4d才能形成肉眼可见的，灰白色或瓷白色、表面粗糙而不规则的菌落。
液体培养基：37℃3～6d后，在下层或底部白色或灰白色生长。
放线菌属——微生物检验及鉴定
标本采集：主要采集脓液和痰液或活检组织。
形态学检查：
在患者病灶和脓汁中可找到肉眼可见的黄色小颗粒，称为“硫磺颗粒”，是放线菌在病灶组织中形成的菌落。镜检可见颗粒呈菊花状，中央为革兰阳性的丝状体，周围为粗大的革兰阴性棒状菌鞘，呈放射状排列。
分离培养
生化试验（鉴定）
放线菌属——致病性及临床意义
多为动物体表面，特别是口腔正常菌群的成员，少数可引起内源性感染。
衣氏放线菌是人类放线菌病最常见的菌种，牛放线菌主要引起牛放线菌病。
衣氏放线菌在机体抵抗力减弱或受伤时引起的内源性感染，导致软组织的化脓性炎症。若无续发感染则大多呈慢性无痛性过程，常出现多发瘘管，排出的脓性物质中含有硫磺颗粒，此即为放线菌病。
诺卡菌属——生物学特性
形态与结构
形态：与放线菌相似，但菌丝末端不膨大。
培养早期裂解为较多的球状或杆状，分枝状菌丝较少。
在病人脓、痰、脑脊液中本菌为纤细的分支状菌丝。
染色：G+；抗酸染色弱抗酸性。
培养特性
营养要求：不高。
气体环境：专性需氧。
菌落特点：
普通培养基或沙保培养基、脑心浸液琼脂：25～37℃培养均可生长，5～7d可见菌落表面干燥、有皱褶或呈颗粒状，不同种类可产生不同色素（黄、橙或红色等）。
诺卡菌属——微生物检验及鉴定
标本采集：采集痰液、支气管冲洗液、组织渗出液、脓液和脑脊液标本。
形态学检查：
如标本中有色素颗粒，取其用玻片压碎涂片，用革兰染色和抗酸染色检查。镜检有革兰阳性（有时染色性不定）纤细的菌丝体和长杆菌，抗酸染色具弱抗酸性，可初步确定为诺卡菌。
分离培养
诺卡菌属——致病性及临床意义
主要为外源性感染。
星形诺卡菌主要通过呼吸道引起人的原发性、化脓性肺部感染，产生类似肺结核的症状。也可引起脑脓肿、腹膜炎等。在病变组织或脓汁可见黄、红、黑等色素颗粒。
巴西诺卡菌可因外伤侵入皮下组织，引起慢性化脓性肉芽肿组织，表现为脓肿及多发性瘘管，好发于足、腿部，故又称为足分枝菌病。
经典例题
衣氏放线菌的特点不包括
A.抗酸染色阳性
B.在病灶组织中形成“硫磺颗粒”
C.在感染部位常形成瘘管
D.口腔中正常菌群
E.厌氧培养
『正确答案』A
『答案解析』衣氏放线菌抗酸染色阴性。
革兰阳性无芽孢厌氧杆菌，口腔正常菌群，可引起面颈部软组织化脓性感染，下列哪种病原体符合此特征
A.肺炎支原体
B.莫氏立克次体
C.星形诺卡菌
D.衣氏放线菌
E.结核分枝杆菌
『正确答案』D
『答案解析』肺炎支原体和莫氏立克次体革兰染色阴性，星形诺卡菌和结核分枝杆菌为需氧菌。
下列引起感染的病原微生物，可在伤口脓液中找到黄、红、黑等色素颗粒的是
A.结核分枝杆菌
B.军团菌
C.肺炎衣原体
D.肺炎支原体
E.星形诺卡菌
『正确答案』E
『答案解析』星形诺卡菌主要通过呼吸道引起人的原发性、化脓性肺部感染，产生类似肺结核的症状。
也可经肺部病灶转移到皮下组织，产生脓肿及多发性瘘管，或扩散到其他脏器，如引起脑脓肿、腹膜炎等。在病变组织或脓汁可见黄、红、黑等色素颗粒。
老年男性农民，因牙痛引起左颊部红肿。流脓已月余。体检发现左颊部软组织变硬，局部皮肤发黑，有一瘘管形成并不断排脓。经仔细检查脓液，发现有黄色小颗粒，压片镜检颗粒呈菊花状，由放射状排列菌丝组成，菌丝末端膨大呈棒状。该患者感染的是
A.衣氏放线菌
B.星形诺卡菌
C.着色真菌
D.申克孢子丝菌
E.白色念珠菌
『正确答案』A
『答案解析』由题干可知该患者是由牙痛引起的左颊部红肿。检查脓液，发现有黄色小颗粒，压片镜检颗粒呈菊花状。所以首先考虑是放线菌感染。又因为星形诺卡菌菌丝末端不膨大，所以该题选A选项。
A.BCYE培养基
B.碱性蛋白胨水
C.需氧培养，普通培养基
D.厌氧培养，初次分离加5%CO2
E.罗氏培养基
1.分离衣氏放线菌
『正确答案』D
『答案解析』衣氏放线菌培养比较困难，厌氧或微需氧。在有氧环境中一般不生长，初次分离加5%CO2可促进生长。
2.分离诺卡菌
『正确答案』C
『答案解析』诺卡菌为专性需氧菌，营养要求不高，在普通培养基或沙氏培养基上室温或37℃培养均可生长。
3.分离结核杆菌
『正确答案』E
『答案解析』结核分枝杆菌用罗氏培养基培养。
A.为人体正常菌群，可以引起内源性感染
B.机体抵抗力降低时，通过伤口感染
C.通过接触引起医源性感染的主要病原体
D.广泛存在于土壤中，以芽胞侵入伤口致病
E.广泛存在于土壤中，引起抵抗力低下者的外源性感染
1.衣氏放线菌
『正确答案』A
『答案解析』放线菌属的细菌是革兰阳性无芽胞厌氧杆菌，多为动物体表面，特别是口腔正常菌群的成员，少数可引起内源性感染。
2.破伤风梭菌
『正确答案』D
『答案解析』破伤风梭菌有周鞭毛，无荚膜。芽胞在菌体顶端，呈圆形，使整个细菌体呈鼓槌状。3.诺卡菌
『正确答案』E
『答案解析』诺卡菌主要为外源性感染。
第一章细菌检验基本技术 一、形态学检查 意义：1.为后续的进一步检验提供参考依据 2.迅速了解标本中有无细菌及菌量的大致情况 3.对少数具有典型形态特征的细菌可以做出初步诊断，为临床选用抗菌 药物治疗起重要的提示作用。 分为：染色标本和不染色标本的检查 1、不染色标本的检查：用于观察细菌的动力及运动情况。常用方法有压滴法和悬滴法。 2、染色标本检查：检查的内容：对标本合格与否进行评价；了解标本有无细菌及大致菌量；根据细菌形态、染色性质等对病原菌初步识别分类，决定进一步的生化反应鉴定血清学鉴定、并为临床选择用药提供帮助。 常用染色方法有：革兰染色（常用）、抗酸染色（结核病、麻风病）、荧光染色（结核、麻风、白喉、痢疾）、负染色（墨汁负染色法用于新型隐球菌检查）、特殊染色（鞭毛染色、荚膜染色、异染颗粒（白喉））。 二、培养与分离技术（关键） 目的：鉴定细菌的种类和保存菌种，为进一步确定细菌的致病性、药物敏感性提供依据。 牛肉膏无糖，可作为肠道细菌鉴别培养基的基础成分。 流感嗜血杆菌需要X因子和V因子。 理想的凝固物质具有的特性：本身不被细菌利用；在微生物生长温度范围内保持固体状态，凝固点的温度对微生物无害；不因消毒灭菌而破坏，透明度好，黏着力强。（琼脂最合适） 半固体培养基琼脂含量 0.3%~0.5%；固体培养基1.5%~2.0%。 培养基质量检验：1、无菌试验：将灭菌后的培养基置35℃温箱培养过夜，判定是否灭菌合格。2、效果检验：按不同的培养要求，接种相应菌种（符合要求的标准菌种），观察细菌的生长、菌落形态、色素、溶血及生化反应等特征，判断培养基是否符合要求。 制备好的培养基存放于冷暗处或4℃冰箱，一般不超过七天，如果用塑料袋密封。保存期可延长，但至多两周。 专性需氧：结核分枝杆菌、霍乱弧菌 微需氧菌（5%氧气、10%二氧化碳、85%氮气）：空肠弯曲菌，幽门螺杆菌兼性厌氧菌：大多数病原菌 专性厌氧菌：破伤风梭菌、脆弱拟杆菌 二氧化碳培养（5%~10%二氧化碳）：淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、布鲁菌 菌落是单个细菌在培养基上分裂繁殖而成的肉眼可见的细菌集落。 菌苔是由众多菌落连接而成的细菌群落。 三、生物化学鉴定技术 1、碳水化合物代谢试验 2、蛋白质和氨基酸代谢试验 3、碳源利用试验 4、呼吸酶类试验 5、其他
临床微生物学检验技术复习练习试题 厌氧性细菌及检验 选择题 A 型题 1．下列产生外毒素的细菌中哪种细菌产生的毒素引起食物中毒 A 霍乱弧菌 B 肉毒杆菌 C 白喉杆菌 D 链球菌 E 破伤风杆菌 2．预防和治疗破伤风的方法是: A 清创处理 B 有效抗生素治疗 C 注射破伤风抗毒素血清 D A+B E A+B+C 3．当一民工因铁钉深刺足底造成外伤送医院急诊时，医生应首先考虑给予注射 A．破伤风类毒素 B．破伤风抗毒素 C．白百破三联疫苗 D．丙种球蛋白 E．破伤风菌苗 4.王某，48岁，建筑工人；因牙关紧闭、四肢痉孪而入院。8天前，右脚被铁钉扎伤，伤口深，但几日后自愈。5日后右腿有些麻木和疼痛，且咀嚼不便，吞咽困难，最后全身抽搐，四肢痉挛。入院诊断为破伤风，请问下述哪项是最佳治疗原则 A 注射青霉素 B 注射破伤风抗毒素和白百破疫苗 C 注射破伤风抗毒素和青霉素 D 注射破伤风抗毒素 E 注射青霉素和白百破疫苗 5．鉴定破伤风杆菌有无致病性的最重要的根据是 A G+细长杆菌 B 顶端圆形芽孢 C 有周身鞭毛 D 专性厌氧生长 E 产生特异性外毒素 6．破伤风梭菌除致破伤风病外，还能引起何种疾病E A．菌血症 B．食物中毒
C．组织坏死 D．坏死性肠炎 E．以上均不是 7．下列搭配哪项不恰当： A 大肠杆菌EHEC组——出血性肠炎 B 炭疽杆菌——气性坏疽 C 破伤风杆菌——脐带风 D 淋球菌——尿道炎 E 脑膜炎球菌——流行性脑脊髓膜炎 8．不是肉毒梭菌特点的是 A 芽胞位于菌体次极端，菌体呈网球拍状 B 严格厌氧 C 致病物质主要是肉毒毒素 D 引起疾病主要是细菌性食物中毒 E 肉毒毒素作用机制是阻止神经组织释放乙酰胆碱 B型题 A 常因滥用抗生素所致的疾病 B 常经呼吸道所致的疾病 C 常经消化道所致的疾病 D 常经产道所致的疾病 E 常因战伤所致的疾病 1．假膜性肠炎 2．气性坏疽 3．肉毒中毒 X型题 1．可能引起食物中毒较常见的细菌有 A 金葡菌 B 伤寒杆菌 C 产气荚膜杆菌 D 破伤风杆菌 E 副溶血性弧菌 2．产气荚膜芽孢梭菌引起的疾病有 A 气性坏疽 B 坏死性肠炎 C 产褥热 D 食物中毒 E 伪膜性肠炎 3．有迁徙性生长现象的是 A 链球菌 B 变形杆菌
北 京 大 学 医 学 部 教 案 讲授题目：病原性球菌 授课对象：长学制基础医学、临床医学、口腔医学、预防医学及药学专业学生 课时数：1.5课时（75分钟） 教学要求教学内容表达方式时间分配 一、掌握致病性球菌的分类及主要致病性球菌的致病物质与所致疾病。 二、致病性球菌的实验室诊断与鉴别要点及防治原则1.葡萄球菌 2.链球菌 3.肺炎球菌 4.脑膜炎奈瑟氏菌 5.淋病奈瑟氏菌 1.ppt课件 2.双语教学 3.播放录像 4.板书 1.葡萄球菌20 分钟 2.链球菌20 分钟 3.肺炎球菌15 分钟 4. 脑膜炎奈瑟氏菌10分钟 5.淋病奈瑟氏菌10分钟 重点掌握的概念和知识 1.掌握葡萄球菌的重要致病物质及其所致疾病：①凝固酶（coagulase）、②葡萄球菌溶血素（staphylolysin）、③肠毒素（enterotoxin）、④表皮剥脱毒素（exfoliative toxin）、⑤毒性休克综合征毒素－I（toxic shock syndrome toxin 1,TSST-I）、⑥杀白细胞素（leukocidine）。 2.掌握链球菌的重要致病物质及其所致疾病。如①脂磷壁酸（lipoteichoic acid, LTA）M ②蛋白（M protein）③链球菌致热外毒素（streptococcal pyrogenic exotoxin, SPE），④链球菌溶血素O（streptolysin O, SLO）⑤链球菌溶血素S（streptolysin S, SLS）⑥透明质酸酶（hyaluronidase）⑦链激酶（streptokinase,SK）⑧链道酶（streptodornase,SD）。 3.掌握肺炎链球菌的重要致病物质及其所致疾病。掌握甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌鉴别要点。 4.掌握淋病奈瑟氏菌和脑膜炎奈瑟氏菌所致疾病与防治原则。 参考资料 1.朱万孚和庄辉. 医学微生物学, 第1版. 北京大学医学出版社, 2007年. 2.谷鸿喜和陈锦英. 医学微生物学, 第1版. 北京大学医学出版社, 2003年. 3.Jawetz, Melnick, & Adelberg’s Medical Microbiology, 23rd ed. The McGraw-Hill Companies, 1998.
微生物检验的基本操作技术 一、无菌操作技术 1、定义 是指在执行实验过程中，防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法； 无菌操作技术是微生物实验的基本技术，是保证微生物实验准确和顺利完成的重要环节。 2、内容 无菌操作技术主要包括两方面： 1）创造无菌的培养环境。包括提供密闭的培养容器、培养容器的灭菌、培养基的灭菌等； 2）在操作和培养过程中防止一切其它微生物的侵入的措施。包括紫外线杀菌、甲醛熏蒸、超净台的消毒与检测、操作工具、器皿灭菌、操作方法等。 3、无菌操作原则 1）在执行无菌操作时，必须明确物品的无菌区和非无菌区，接种时必须穿工作服、戴工作帽，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球将手擦干净； 2）在操作前20～30分钟要先启动超净台和紫外灯，进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼3次后使用。严禁用手直接拿无菌物品，如瓶塞等，而必须用消毒的钳、镊子等； 3）从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不能触及试管或平皿边； 4）接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒； 5）接种环或接种针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必须时还要烧到环和针与杆的连接处； 6）吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。倾倒平板应在超净台内操作，并且在开启和加盖瓶塞时需反复用酒精灯烧。 二、无菌操作的环境要求 1、无菌室 （1）无菌室的结构：更衣间、缓冲间、操作间；
第七章病原性球菌 一、单5选1 1. 关于金黄色葡萄球菌，下列哪项说法是错误的： A.耐盐性强 B.革兰阳性球菌 C.在血平板上形成完全透明的溶血环 D.不易产生耐药性，抵抗力强 E.引起局部化脓性感染时病变比较局限 2. 链球菌属与葡萄球菌属的主要鉴别试验是： A.触酶试验 B.氧化酶试验 C.O/F试验 D.溶血特性 E.革兰染色特性 3. 革兰阳性球菌，呈矛头状成双排列，有荚膜，宽端相对尖端向外的细菌最可能为： A.草绿色链球菌 B.葡萄球菌属 C.肺炎链球菌 D.肠球菌属 E.A群链球菌 4.SPA是： A.肠杆菌科的表面抗原 B.葡萄球菌细胞壁的蛋白成分 C.沙门菌的核心多糖 D.核蛋白抗原 E.链球菌M蛋白 5.关于凝固酶阴性葡萄球菌，说法错误的是： A.是人体皮肤黏膜正常菌群之一 B.是医院感染的主要病原菌 C.致病力强 D.引起静脉导管感染 E.引起人工关节感染 6.引起剥脱性皮炎的细菌是： A.肺炎链球菌 B.草绿色链球菌 C.粪肠球菌 D.金黄色葡萄球菌 E.脑膜炎奈瑟菌 7.关于脑膜炎奈瑟菌微生物学检查法，下列哪项是错误的： A.标本取材后应立即冷藏 B.瘀斑涂片有诊断意义 C.分离培养用巧克力色培养基 D.初次培养需5％～10％CO 2 E.标本可采取瘀斑穿刺液 8.引起风湿热的病原体是： A.A群溶血链球菌 B.B群溶血链球菌 C.D群溶血链球菌 D.甲型溶血链球菌 E.变异链球菌 9.关于血浆凝固酶，错误的是： A.玻片法测定结合型凝固酶 B.试管法测定游离的凝固酶 C.具有抗原性
D.具有抗吞噬作用 E.通过拮抗肝素的作用，而使血浆凝固 10.关于金黄色葡萄球菌，下列哪项说法是错误的： A.耐盐性强 B.在血平板上形成完全透明的溶血环 C.引起局部化脓性感染时病变比较局限 D.不容易产生耐药性，抵抗力强 E.革兰阳性菌 11.关于脑膜炎球菌，下列错误的是: A.营养要求较高，常用巧克力培养基培养 B.会存在正常人咽部，机体免疫力正常时不引起任何症状 C.对外界抵抗力较弱，尤其对寒冷、干燥等敏感 D.儿童因血脑屏障发育不完善，感染后均能引起脑脊髓膜炎 E.致病因素，主要是菌毛、荚膜和内毒素 12.葡萄球菌致急性肠胃炎的致病因素是： A.杀白细胞素 B.溶血毒素 C.肠毒素 D.血浆凝固酶 E.红疹毒素 13.下列哪项不是肺炎链球菌的特点 A.革兰阳性双球菌 B.胆汁溶菌试验阳性 C.可形成脐窝状菌落 D.有荚膜 E.β溶血环 14.金黄色葡萄球菌的培养特性是： A.营养要求高，必须在血平板上才能生长 B.均能产生金黄色色素 C.不分解葡萄糖 D.耐盐性强，可在含10%～15%NaCl的培养基中生长 E.专性需氧 15.关于A群乙型溶血链球菌，下列哪项是错误的： A.是链球菌属中致病力最强的 B.感染容易扩散 C.可引起超敏反应性疾病 D.营养要求不高，可在营养琼脂培养基上生长 E.对青霉素敏感 16.肺炎链球菌的致病因素主要是： A.侵袭性酶 B.外毒素 C.荚膜 D.菌毛 E.内毒素 17.在平板上培养48小时后出现中心凹陷的脐窝状菌落的细菌是： A.肺炎链球菌 B.草绿色链球菌 C.粪肠球菌 D.金黄色葡萄球菌 E.脑膜炎奈瑟菌 18.鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标是：
临床微生物学检验技术试题及答案 A1题型 1. 机体抵抗病原微生物的屏障结构包括 A、皮肤与粘膜 B、血脑屏障 C、胎盘屏障 D、免疫系统 E、A、B和C 答案E 2. 有关内毒素的描述哪项是错误的 A、均由革兰氏阴性菌产生 B、其化学成分为脂多糖 C、160℃，2~4小时才被破坏 D、毒害效应具有组织器官选择性 E、毒性作用较弱 答案D 3. 下列描述哪项是错误的 A、病原菌致病力的强弱度称为毒力 B、毒力主要由侵袭力和毒素所决定 C、破伤风毒素属于内毒素 D、侵袭力是指病原菌突破宿主机体的防御功能，并能在体内定居、繁殖和扩散的能力 E、以上均不是 答案C 4. 下列哪种成分不属于外毒素 A、脂多糖 B、痉挛毒素 C、肉毒毒素 D、表皮剥脱毒素 E、霍乱肠毒素
答案A 5. 下列哪种成分不属于外毒素 A、金黄色葡萄球菌肠毒素 B、产毒性大肠杆菌肠毒素 C、白喉毒素 D、表皮剥脱毒素 E、类脂A 答案E 6. 内毒素的毒性作用包括 A、发热反应 B、白细胞反应 C、内毒素血症与内毒素休克 D、以上都是 E、A和C 答案D 7. 慢性志贺菌感染的病程一般在（）以上 A、两周 B、一个月 C、两个月 D、六周 E、七周 答案C 8. 志贺菌随饮食进入体内，导致人体发病，其潜伏期一般为 A、一天之内 B、1-3天 C、5-7天 D、7-8天 E、8天以后 答案B 9. 下列关于结核分支杆菌描述正确的是
A、类脂质为胞壁中含量最多的成分 B、产生外毒素 C、产生内毒素 D、耐药性低 E、一般采用革兰氏染色 答案A 10. 我国的卫生标准中，每升饮用水中不得超过（）个大肠杆菌 A、1 B、3 C、5 D、7 E、8 答案B 11. 大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖（）为阳性 A、产酸 B、产酸产气 C、产酸不产气 D、产气不产酸 E、以上都不产生 答案B 12. 下列何种细菌为革兰氏阴性菌 A、脑膜炎奈瑟菌 B、结核分支杆菌 C、铜绿假单细胞 D、枯草芽孢杆菌 E、白喉棒状杆菌 答案C 13. 下列何种细菌为革兰氏阳性杆菌 A、大肠杆菌 B、铜绿假单细胞
2018年自学考试《病原生物学及检验》试题及答案 1、有关结核菌素试验,下述错误的是? A、属于皮肤迟发型超敏反应 B、可检测机体对结核杆菌的免疫状况 C、皮肤反应程度以局部红肿,硬结的直径为标准 D、可检测机体细胞免疫功能 E、12—18小时观察结果 正确答案：，，E 2、关于结核分枝杆菌抵抗力，错误的是? A、尘埃中保持传染性8~10天 B、干燥痰中可活2~8个月 C、直射日光下数小时死亡 D、耐热，63℃15分钟不死亡 E、对4%NaOH和6%H2S04有一定抵抗力 正确答案：，，D 3、结核杆菌侵入机体的途径,不可能的是? A、呼吸道 B、消化道 C、破损的皮肤 D、泌尿道 E、节肢动物的叮咬 正确答案：，，E
4、下列细菌中繁殖最慢的是? A、大肠埃希菌 B、丙型链球菌 C、脑膜炎奈瑟菌 D、结核分枝杆菌 E、肺炎链球菌 正确答案：，，D 5、与结核杆菌抗酸性有关的成分是? A、索状因子 B、磷脂 C、分枝菌酸 D、蜡脂D E、硫酸脑苷脂 正确答案：，，C 6、结核菌素试验为阳性反应,下述情况可能错误的是? A、表明机体已感染过结核杆菌 B、表明机体接种卡介苗成功 C、表明机体对结核杆菌有一定的特异性免疫 D、表明机体对结核杆菌有迟发型超敏反应 E、表明机体对结核杆菌无免疫力 正确答案：，，E 7、卡介苗是?
A、经甲醛处理后的人型结核杆菌 B、加热处理后的人型结核杆菌 C、发生了抗原变异的牛型结核杆菌 D、保持免疫原性,减毒的活的牛型结核杆菌 E、保持免疫原性,减毒的活的人型结核杆菌正确答案：，，D 8、细胞壁含脂类最多的细菌是? A、结核杆菌 B、白喉棒状杆菌 C、衣氏放线菌 D、霍乱弧菌 E、幽门螺杆菌 正确答案：，，A 9、百日咳杆菌的分离培养应采用? A、鲍金(B-G)培养基 B、巧克力培养基 C、伊红-美蓝培养基 D、罗氏培养基 E、亚碲酸钾培养基 正确答案：，，A 10、目前预防百日咳主要采用注射? A、类毒素
临床微生物学检验技术试题及答案A1题型 1、人类ABO血型抗原包括 A、A抗原 B、B抗原 C、O抗原 D、AB抗原 E、A抗原和B抗原 答案：E 2、ABO血型物质在人体中可引起哪几种Ab产生 A、抗B抗体 B、抗AB抗体 C、抗A抗体 D、抗O抗体 E、抗A和抗B抗体 答案：E 3、免疫耐受就是 A、非特异性无反应性 B、特异性无反应性 C、机体无反应性 D、免疫抑制性 E、对任何抗原都不反应 答案：B 4、迟发型皮肤过敏反应与下列哪种物质有关 A、IgE B、IgA C、活化B细胞 D、活化T细胞 E、活化NK细胞
答案：D 5、佐剂作用是 A、将Ag送入机体各部位 B、将Ag固定在局部 C、增强Ag免疫原性 D、赋予Ag免疫原性 E、增强机体对Ag的免疫应答 答案：E 6、下列哪种物质既有非特异性免疫也参与特异性免疫反应 A、IgG B、干扰素 C、IgA D、前列腺素 E、补体 答案：E 7、TDH 细胞是 A、产生Ab细胞 B、天然杀伤细胞 C、细胞毒细胞 D、迟发变态反应T细胞 E、依Ab杀伤T细胞 答案：D 8、关于霍乱弧菌是否侵入上皮细胞，下列说法正确的是 A、不侵入 B、侵入 C、在特定条件下侵入 D、具有侵袭基因的霍乱弧菌侵入 E、侵入后局限于上皮细胞内 答案：A 9、葡萄球菌能产生多种溶血素，其中最主要的是
A、α、β溶血素 B、α、γ溶血素 C、β、γ溶血素 D、δ、ε溶血素 E、α、γ溶血素 答案：A 10、与其他肺部感染病原菌相比较，铜绿假单胞菌的毒力特点是 A、产生外毒素 B、具有内毒素 C、产生溶血素 D、产生绿脓素 E、具有菌毛 答案：D 11、有荚膜的流感嗜血杆菌含有荚膜多糖抗原称作： A、V抗原 B、M抗原 C、A抗原 D、X抗原 E、S抗原 答案：B 12、下列关于铜绿假单胞菌叙述中，正确的是 A、革兰氏阳性球菌 B、革兰氏阳性杆菌 C、无芽孢 D、具有荚膜 E、无鞭毛 答案：C 13、下列何种微生物具有荚膜结构 A、军团菌 B、支原体
主要病原性球菌的致病性 名称致病物质所致疾病 金黄色葡萄球菌 血浆凝固酶、溶血素、 杀白细胞素、肠毒素、表皮 剥脱毒素、毒性休克综合征 毒素-1 局部或全身化脓性感染 毒素性疾病：食物中毒、 毒性休克综合征、烫伤样皮肤综 合征、假膜性肠炎 乙型溶血性链球菌 脂磷壁酸、M蛋白、 溶血素、致热外毒素、透明 质酸酶、链激酶、链道酶 局部或全身化脓性感染 毒素性疾病：猩红热 超敏反应性疾病：风湿热、 急性肾小球肾炎 肺炎链 球菌 荚膜、神经氨酸酶 大叶性肺炎、中耳炎、脑 膜炎 脑膜炎 奈氏菌 荚膜、菌毛、内毒素流行性脑脊髓膜炎(流脑) 淋病奈氏菌 内毒素、荚膜、菌毛、 外膜蛋白、IgAI蛋白酶 淋病、新生儿淋球菌性结 膜炎 二、致病性 名称形态与染色培养特性抵抗力金黄 色葡萄球菌G+，成堆排列 营养要求不高， 金黄色菌落，透明溶血 环 抵抗力强于 其他无芽胞菌 乙型 溶血性链球G+，链状排列 营养要求高，菌 落细小，透明溶血环 不强
菌 肺炎链球菌 G+，矛头状， 成双排列 营养要求高，菌 落细小，草绿色溶血环 弱 脑膜炎奈氏菌 G－，肾形，成 双排列，常位于中性 粒细胞内 营养要求高，巧 克力色培养基，露滴状 菌落 弱，对干燥、 寒冷、热、紫外线 等极敏感 淋病奈氏菌 G－肾形，成双 排列，常位于中性粒 细胞内 营养要求高，巧 克力色培养基 弱，对干燥、 寒冷、热、紫外线 等极敏感 一、单项选择题 1．下列对热抵抗力最强的细菌是：e A. 伤寒沙门菌 B. 大肠埃希菌 C. 结核分校杆菌 D. 乙型溶血链球菌 E. 金黄色葡萄球菌 2．引起毒性休克综合征的病原菌是：c A. 肺炎球菌 B. 脑膜炎奈氏菌 C. 金黄色葡萄球菌 D. 甲型溶血性链球菌 E. 乙型溶血性链球菌 3．与葡萄球菌感染易于局限化的有关物质是：c A. 溶血素 B. 杀自细胞素 C. 血浆凝固酶 D. 透明质酸酶
《病原微生物检验》教学大纲 供卫生检验专业用 一、课程基本信息 课程名称：病原微生物检验（Experimental Pathogenic Biology Technique）课程号： 课程属性：专业课 先修课程：病毒学检验、细菌学检验 学分：3 学时：72 理论学时：0 实验（实践）学时：72 二、教学目的要求 病原微生物检验是病毒学检验和细菌学检验的配套实验课程，是卫生检验重要的专业课程之一，也是卫生检验专业学生必修的考试课程。实验内容包括病毒学检验和细菌学检验的基本技能、分离培养及鉴定技术、血清学技术，以及分子生物学技术。通过实际操作训练，使学生加深对细菌学检验和病毒学检验基本理论、基本技能、检验方法、研究手段的理解和掌握，加深对常用分子生物学技术的认识和把握。在教学过程中，注重对学生实验操作规范性培养、实验现象和结果分析能力的培养，以及实验报告撰写能力的培养，全面提高学生分析和解决实际问题能力。 三、实验方式及基本要求 实验方式：整个实验课程要学生自己完成，每2个学生为一个实验单位，共同完成所有的实验内容。 基本要求：熟悉实验步骤，掌握实验关键点和影响因素，能正确的判断和分析实验结果。 四、实验报告 实验报告包括：实验目的，实验原理，主要试剂和仪器，实验步骤，结果，结论，讨论。 五、实验项目与内容提要 实验1 动物接种技术及动物标本采集 1、动物接种：小鼠的腹腔接种、尾静脉接种、脑内接种以及灌胃
2、动物标本采集：胸腺、肝脏、脾脏、摘眼球取血 要求：熟悉动物实验常用的接种途径和标本的采集 实验2 鸡胚培养、原代细胞培养 1、原代细胞培养：选用10日龄的鸡胚，进行鸡皮成纤维细胞的培养。 2、病毒的鸡胚培养：选用9~10日龄的鸡胚，采用尿囊腔途径接种病毒。 要求：熟悉原代细胞培养及尿囊腔接种病毒的操作要点及影响因素。 实验3 传代细胞培养 选择生长良好的MDCK细胞，通过消化、分散、分装后进行培养。 要求：熟悉传代细胞培养的操作、要点。 实验4 流感病毒分离培养 在长成单层的MDCK细胞上，接种病毒后进行培养，显微镜观察细胞形态的变化，及细胞病变的类型。 要求：熟悉病毒的细胞培养的操作、要点，以及判断病毒感染细胞的程度。 实验5 血凝试验及血凝抑制试验 本实验包括一个单位血凝素的滴定、一个单位血凝素的确定和正式试验。 要求：掌握血凝效价、血凝抑制效价的判断，熟悉实验的影响因素和操作要点。 实验6 RT-PCR检测流感病毒 利用RT-PCR技术检测致病微生物致病基因，通过凝胶电泳观察结果。 要求：熟悉RT-PCR技术的操作要点、影响因素及凝胶电泳的结果观察。 实验7 病毒学检验讨论 利用所学病毒学检验知识对病毒性感染的案例进行分组讨论。 要求：了解突发公共卫生事件的相关知识，熟悉判断疾病的病原的要点。 实验8 抗菌药物最小抑菌浓度测定 完成某抗菌药物最小抑菌浓度的测定。 要求：熟悉抗菌药物最小抑菌浓度测定的操作步骤、试验结果的判断以及试验的注意事项。 实验9 消毒剂的定量杀菌试验 完成某消毒剂定量杀菌的最小杀菌浓度和最小杀菌时间的测定。 要求：熟悉消毒剂定量杀菌试验操作技术及结果计算方法。
概论 1不属于与原核细胞型微生物的是 B病毒 A 细菌 B 病毒 C 立克次体 D支原体 E衣原体 2属于非细胞型微生物的是（病毒亚病毒朊粒） E HIV 3属于真核细胞型微生物的是（真菌原虫）D霉菌 4属于原核细胞型微生物的是 B 志贺菌 5下列叙述正确的是多选 ABCE A荷兰列文虎克发明显微镜 B 德国郭霍提出了郭霍法则 C 法国巴斯德有机物的发酵是因酵母菌的作用 D 英国医师琴纳创立了固体培养基分量细菌方法 E英国李斯特床用石炭酸喷洒手术室和煮沸手术用具消毒 备注：荷兰列文虎克发明显微镜、德国郭霍首创固体培养基提出了郭霍法则、英国医师琴纳发明牛痘预防天花、法国巴斯德创造了巴氏消毒法、英国李斯特床用石炭酸喷洒手术室和煮沸手术用具消毒、俄国伊凡诺夫斯基发现第一种病毒烟草花叶病毒、德国的细菌学家欧立希首先合成治疗梅毒的坤凡纳明、英国的细菌学家弗来明首先发现青霉素能抑制金黄色葡萄球菌的生长、法国巴斯德有机物的发酵是因酵母菌的作用 6有关正常菌群叙述正确的是：BCE B正常菌群对保持人体生态平衡和内环境的稳定有重要作用 C 正常菌群受到破坏会导致菌群失调 E 正常菌群在正常情况下是无害的
7属于非细胞型微生物是AE A HBV E流行性感冒病毒 B新生隐球菌C肺炎支原体D百日咳鲍特菌8检测某些细菌特征性酶：共用题干 1问快速检测沙门菌的酶 B辛酸酯酶 2问检查卡他莫拉菌最特异的酶 B丁酸酯酶 3问检查难辨梭菌特有的酶是 D 谷氨酸脱氢酶 4问检查白色念珠菌的酶是 E脯氨酸肽酶（及N-乙酰D半乳糖苷酶） 5问筛查O157：H7大肠埃希菌常用的酶 C葡葡糖醛酸酶 细菌感染及其检验技术 1用于化脓链球菌鉴定的抗生素敏感性试验是 D 0.04ug杆菌肽实验 2以抗毒素免疫为主的感染性疾病 C 破伤风梭菌感染 3 下列属于原核细胞微生物的是 B 细菌C 支原体 D立克次体 4 细菌致病强弱主要取决于细菌的 C 侵袭力 D毒力 5 细菌基本检验技术包括传统检验技术和现代检验技术 1问不属于传统检验技术的是 E免疫银光技术 2问不属于现代检验技术的是 A 染色标本技术 6细菌的致病性主要取决于三方面：细菌的毒力侵入的数量及侵入的途径 1问表示细菌致病性强弱程度的是 B毒力 2问有关致病性说法错误的是 B不同细菌所致疾病的过程大致相同 7细菌基本结构包括细胞壁细胞质细胞膜及核质等 1问革兰阳性和革兰阴性菌的细胞壁共同成分 E 肽聚糖
病原性球菌的检验 一、葡萄球菌属Staphylococcus ?广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。 ?致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中 毒等。 分类与分型 1）金黄色葡萄球菌(S. aureus)：多数致病。 （2）表皮葡萄球菌(S. epidermidis)：偶可致病。 （3）腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)：不致病。 （4）致病性菌株能产生黄色或柠檬色素。 （5）多数金黄色葡萄球菌可被相应噬菌体裂解，表皮葡萄球菌不敏感。 金黄色葡萄球菌的致病性 ?用噬菌体可将金葡萄菌分为4群23个型。 ?肠毒素型食物中毒由Ⅲ和Ⅳ群金葡萄菌引起，Ⅱ群菌对
抗生素产生耐药性的速度比Ⅰ和Ⅳ群缓慢很多。 ?造成医院感染严重流行的是Ⅰ群中的52、52A、80和 81型菌株。 ?引起疱疹性和剥脱性皮炎的菌株经常是Ⅱ群71型。 金黄色葡萄球菌的流行病学 ?作为人和动物的常见病原菌，其主要存在于人和动物的 鼻腔、咽喉、头发上，50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。金黄色葡萄球菌及其检验 ?革兰氏阳性球状，排列呈葡萄串状。无芽胞、鞭毛，大 多数无荚膜，个别形成荚膜。致病性葡萄球菌（金黄色葡萄球菌）菌体较小、约0.5~1um., 普通0.4~1.2um。培养及生化特性 1.在普通培养基上生长良好（需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃、pH7.4 ，对营养要求不高，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛。），在麦康凯琼脂平板不生长。 2. 血平板上生长更佳，致病菌株β溶血 3. 产生金黄色
色素 4. 高度耐盐: 可在7.5~15%NaCl肉汤中生长。 5. 分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产气，触酶阳性，致病菌株能分解甘露醇。 6. 金黄色葡萄球菌能产生的毒素和酶（致病因素P149）1）溶血毒素2）杀白细胞素 3）血浆凝固酶：区分葡萄球菌是否具有致病性的重要标志。4）脱氧核糖核酸酶：5）肠毒素6）溶纤维蛋白酶7）透明质酸酶 抗原性 1. 多糖抗原：具有群特异性，存在于细胞壁，借此可分群。 A群多糖抗原化学组成为磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺核糖醇残基（金黄色葡萄球菌）。 B群多糖抗原化学组成是磷壁酸中的N-乙酰葡糖胺甘油残基。 2. 蛋白质抗原：细胞壁的一种表面蛋白，人源菌株含SPA （Staphylococcus protein A)，能与多种哺乳动物IgG Fc片
2019 第二十五章病原性放线菌及检验 一、 A1 1、衣氏放线菌在患者病灶、脓汁标本中具有的特征是 A、肉眼可见黑色颗粒 B、肉眼可见白色颗粒 C、肉眼可见褐色颗粒 D、肉眼可见黄色颗粒 E、肉眼可见蓝色颗粒 2、对于衣氏放线菌形态与染色正确的叙述是 A、革兰染色阳性 B、革兰染色阴性 C、荚膜阳性 D、鞭毛阳性 E、芽胞阳性 3、衣氏放线菌引起的感染类型属于 A、急性感染 B、隐性感染 C、外源性感染 D、内源性感染 E、接触感染 4、诺卡菌属引起的感染多为 A、内源性感染 B、蚊虫叮咬感染 C、动物的咬伤 D、接触感染 E、外源性感染 5、放线菌的感染特点是 A、为非化脓性感染 B、脓汁黏稠 C、常为局部感染，不扩散 D、外源性感染 E、病灶常有瘘管形成，排出硫磺样颗粒 6、关于放线菌错误的是 A、有细长菌丝 B、革兰染色阴性 C、大多数不致病 D、属厌氧菌或微需氧菌 E、属原核细胞型微生物 第 1 页共 4 页
7、对放线菌的错误叙述是 A、革兰阳性、非抗酸阳性菌 B、为条件致病菌，引起内源性感染 C、临床特点为形成慢性肉芽肿并伴瘘管形成 D、诊断可取分泌物查找硫黄样颗粒压片镜检 E、病后可产生特异性抗体，获得免疫力 8、放线菌引起外伤性创伤感染，标本检查应首选 A、抗原检测 B、核酸检测 C、直接显微镜检查 D、分离培养 E、生化试验 9、放线菌引起的化脓性感染，其脓液特征是 A、黏稠，呈金黄色 B、稀薄，呈血水样 C、稀薄，呈蓝绿色 D、稀薄，呈暗黑色 E、可见到硫黄样颗粒 10、放线菌生长时，对气体的要求是 A、专性需氧 B、专性厌氧 C、需加 30%CO2 D、微需氧或厌氧 E、兼性厌氧 11、压片镜检可见到呈菊花状菌丝的是 A、放线菌 B、真菌 C、奴卡菌 D、链丝菌 E、链霉菌 答案部分 一、 A1 1、 【正确答案】 D 【答案解析】在患者病灶和脓汁中可找到肉眼可见的黄色小颗粒，称为“硫磺颗粒”，是放线菌在病灶组织中形成的菌落。 【该题针对“放线菌属”知识点进行考核】 【答疑编号100917569, 点击提问】 2、 【正确答案】 A 第 2 页共 4 页
肺放线菌病24例临床及影像学分析并文献复习 发表时间：2013-02-22T11:22:52.793Z 来源：《医药前沿》2012年第34期供稿作者：高万本[导读] 肺放线菌病是一种少见的慢性化脓性肉芽肿性疾病，属肺霉菌感染的一种。 高万本（绵阳市第三人民医院医学影像科四川绵阳 621000） 肺放线菌病是一种少见的慢性化脓性肉芽肿性疾病，属肺霉菌感染的一种。近年来由于抗生素、激素、细胞毒性药物和免疫抑制剂的大量应用，肺放线菌病的发病率有所增加。为探讨肺放线菌病的临床及影像学表现特点及诊断方法，结合我院近年诊治的1例肺放线菌病，以及国内近18年(1989～2006年)文献报道的肺放线菌病23例[1-18]进行综合分析并进行文献复习。 1 临床资料 24例肺放线菌病均径病理证实。其中男15例，女9例，年龄11~87岁，平均年龄49岁。临床表现：24例均有咳嗽、咳痰等呼吸道症状；其中伴胸痛者10例，伴发热者8例，咳痰带血者3例，痰中带黄色颗粒者2例，盗汗者1例。发病部位：病变位于左肺上叶8例，左肺下叶3例，位于右肺上叶6例，右肺中叶3例，右肺下叶2例，双肺均有病变2例。病程1个月～5年不等。影像学表现：12例表现为肺部实质性肿块或球形病灶，边缘有分叶，周围无卫星病灶；1例病变向上经胸廓入口侵犯至颈根部；5例表现为肺部片状阴影伴胸腔积液；3例表现为支气管扩张改变；2例肺部有空洞改变；1例表现为气管及纵隔向患侧移位。临床诊断及治疗：15例术前误诊为肺癌，2例误诊为结核球，4例误诊为肺化脓症，2例镜检确诊为本病，1例术中冰冻切片为恶性，术中行扩大切除，术后病检为放线菌病，术后半年复发，再次行手术扩大切除。20经例手术治疗，4例保守治疗，术后均作病理检查，确诊后给予大剂量青霉素静脉滴注。术中见患肺与胸壁粘连，尤以肿物处明显，肿物大小各不相同，形态各异，无包膜，质地坚硬，并与健肺粘连，浸润生长。标本大体所见：肿物部位成灰白色或灰黄色，实性，挤压有少量脓液溢出。光镜下见病变肺组织类似化脓性肉芽肿样改变，有大量中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞浸润，其间可见大小不等的坏死区，坏死区边缘可见成团粉染的无结构团块，其中大部分成蓝紫色，周围部分排裂成放射状，末端呈球形膨大，PAS染色团块无结构物阳性反应，病变周围的肺组织类似大叶性肺炎肉质性变及纤维化。其中7例光镜观察到硫磺颗粒，2例观察到放线菌丝，3例痰培养见霉菌生长。 2 讨论 肺放线菌病是由以色列放线菌感染所致，致病菌一般寄生于健康人龋齿及扁桃体小窝内，常因吸入口腔分泌物而得病。放线菌从支气管蔓延到肺，先引起支气管肺炎，后形成肉芽肿，并侵入胸膜或胸壁软组织，常形成脓胸或胸壁窦道，如并发其他细菌感染，病变常迁延不愈。肺放线菌病发病部位多变，病程复杂[18]。临床表现以肺部慢性炎性表现多见，偶有咳黄色颗粒者，症状不典型。影像学改变与肺炎、肺脓肿、肺结核、肺癌、支气管扩张相似，易误诊。本组病例除2例诊断正确，其余22例均误诊。据统计[10]，从1971~1988年日本征集到的43例肺放线菌病例中，有30例(占70%)是通过肺病理组织切片检查确诊的。本组有15例(占63%)初始疑为肺癌、肺结核或支气管扩张，治疗后症状和影像学表现均无改善，最后经纤支镜检查、手术肺叶切除、肺病理组织切片检查确诊。说明本病早期确诊困难，误诊率高。误诊原因有[17]：(1)多数临床医生和影像学医生认为放线菌感染较罕见，对其致病性重视不够，对病原菌缺乏认识。(2)在工作中，分离临床标本中的放线菌比较困难，因为正常菌群的拮抗作用，营养竞争，这需要有标准的培养技术，控制合适的生长条件和针对某些菌采用特殊的培养基。(3)使用不适当的检验方法导致检出率下降。由于放线菌培养需要厌氧环境，而目前大多数医院开展的痰培养均是需氧培养，加上培养前用药影响，故痰培养均未能分离出放线菌。(4)临床实验室仍未广泛应用检验放线菌较可靠的现代分类学方法[11]。放线菌并非真菌，而类似细菌，菌种的鉴定不能仅靠形态学，必须结合生化反应。如果标本在使用抗生素治疗前采集，临床上又有高度怀疑放线菌病时，可适当延长厌氧培养时间，以提高阳性培养结果。肺放线菌病可靠的诊断方法是作纤支镜活组织检查，检出放线菌或对咯出物及窦道流出物的涂片检查，找到硫磺颗粒，后者是一种简单易行的方法，但阳性率不高，本组阳性率为27%[17]。胸水中培养出放线菌也可确诊。 参考文献 [1]沙宝康，戴法召.肺放线菌病1例报告[J].内蒙古医学杂志.1989,9 (2):63. [2]张澜,崔忠厚.左下肺放线菌病误诊1例[J].中华胸心血管外科杂志,1995,11(3):118. [3]刁晓源,冯端兴,乐万祥,等.肺放线菌病2例[J].中华结核和呼吸杂志,1995,18(4):238. [4]左万里.肺放线菌病误诊为支气管扩张症1例[J].中国实用内科杂志,1997,17(10):595. [5]王军,王占东,吕建军.肺放线菌病1例[J].河北医科大学学报,1998,19(6):334. [6]全亚群.肺放线菌病误诊为肺肿瘤1例[J].山西医药杂志,1998,27 (6):502. [7]牟小芳,张进川.肺癌合并下呼吸道放线菌病1例[J].中华结核和呼吸杂志,1998,21(7):391. [8]王礼斌,熊健,汤服民.肺放线菌病误诊1例[J].实用医药杂志,1999,12(1):14. [9]张文,田新平,曾小峰,等.肺放线菌病1例[J].中华传染病杂志,1999,17(2):144. [10]王红霞,李敬孚.术后并发脓胸的肺放线菌病的治疗[J].国外医学.呼吸系统分册,1995,15(2):11. [11]阮继生,刘志恒,梁丽糯,等.放线菌研究及应用[M].北京:科学出版社,1990,393. [12]刘国媚,刘平，崔皖芳,等.原发生肺放线菌病临床分析[J].安徽医药,2001,5(1):41-42. [13]卑贵光,刘智明,马洁韬,等.肺放线菌病的CT诊断[J].中华综合医学,2002,3(5):447-448. [14]张光然.肺放线菌病2例误诊分析[J].临床经验荟萃,2002,P(5):25. [15]崔书安,徐宝亮,仲伟英.肺放线菌病1例[J].医学影像学杂志,2002,12(4):257. [16]线胤生,弓显凤.肺放线菌病例[J].中国抗感染化疗杂志,2004,4 (5):308—309. [17]李少文,马琼凤,李庆安.肺放线菌病11例临床分析并文献复习.Journal of postgraduates of Medicine(Medicine Edition),2004;27:32. [18]陈刚,张林,叶宏飞.肺放线菌病的诊断与治疗11例报告[J].中国医科大学学报,2005,34(2):187.
病原微生物的检验项目及结果解释 微生物检查包括：细菌、真菌、衣原体、支原体及病毒等。这对于查明致病原因和选择用药十分重要。但除细菌和真菌外，直接查找方法比较复杂。细菌培养，采集血、痰、咽试子、大便、小便、创面分泌物等标本进行培养，看有无致病菌生长，正常应为阴性或少量非致病菌；真菌检查，标本涂片或培养，检出真菌为不正常。 病原微生物的检验主要是检测与l临床患者致病性有关的病原性微生物，对感染性疾病进行快速、准确地诊断，密切结合临床提出及时有效的治疗方案，防止微生物产生耐药性和医院内感染的发生。 基础知识 1.什么是微生物?什么是病原微生物? 微生物是需借助光学显微镜或电-y：显微镜放大观察到的结构简单，个体微小的生物的总称。微生物的种类很多，医学微生物尤其是临床微生物主要有细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体等。 微生物在自然界中广泛存在，与人类和自然界其他生物共生共存，绝大多数对人类和自然界是有益的，只有少部分可以引起人类和动植物发生疾病，这部分微生物才称为病原微生物，比如结核分枝杆菌可引起结核病，痢疾杆菌可以引起痢疾等。 2.什么是细菌?细菌分哪几种? 细菌是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。其体积微小，以微米作为测量单位，无色半透明，只有经过染色才能观察到细菌的轮廓及其结构。经革兰染色，可将细菌分为两大类，即革兰阳性菌和革兰阴性菌。细菌主要由细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等部分构成，有的细菌还有夹膜、鞭毛、菌毛等特殊结构。根据形状则可分为三类，即：球菌、杆菌和螺旋菌(包括弧形菌)。 3.什么是病毒?病毒分哪几种?
病毒是结构最简单、体积最微小(纳米)的一类非细胞型微生物，介于生命和非生命之间的一种物质形式，其必须严格寄生在活细胞内，含有单一种核酸即脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)的基因组和蛋白质外壳，没有细胞结构，对抗生素不敏感，但对于干扰素敏感。按传播途径病毒可分为呼吸道病毒、胃肠道病毒、经性传播感染的病毒和狂犬病毒等。按感染部位与症状特征则分为肝炎病毒、出血热病毒、疱疹病毒、侵犯神经系统的病毒和肿瘤病毒等。 4.什么是真菌? 真菌是一大类具有细胞壁和典型细胞核，不含叶绿素，不分根、茎、叶的真核细胞型微生物。细胞核高度分化，有核膜和核仁，细胞内有完整的细胞器。 5.什么是支原体和衣原体? 支原体为没有细胞壁，呈高度多形态性，能通过滤器，可用人工培养基培养增殖的一类最小的原核细胞型微生物。由于这一类微生物没有细胞壁，能形成丝状与分支形状而称其为支原体。衣原体是一类专性细胞内寄生、有独特发育周期、能通过细菌滤器的原核细胞型微生物，多呈球状、堆状，有细胞壁。 6.人体内的正常茵群是指什么? 在人的皮肤表面体表、口腔、鼻咽、肠道等腔道黏膜中都存在着细菌，对人体无害甚至有益的细菌称为正常菌群，比如肠道菌群可以将不能吸收的食物残渣进行分解成为粪便排出体外，还可以制造维生索等对人体都有益处。 7.细菌检测和病毒检测，真菌检测各有哪些方法? 细菌可通过细菌形态结构、培养特性、生化反应、血清学试验等方法进行检测。 病毒的检测包括电子显微镜观察、抗原检测、核酸检测、病毒分离培养及抗体检测等途径。 真菌检测采用直接涂片法、培养法、免疫学试验及动物实验等方法。 8.支原体和衣原体检测有哪些方法? 衣原体检测可采用酶免法、直接免疫荧光法，核酸检测技术包括DNA探针法、聚合酶链式反应(PCR)、连接酶链式反应(LCR)等和细胞培养法等。支原体实验室检测方法有：形态学检查、支原体培养、抗原检测、血清学方法和分子生物学方法。 9.用于检测病原微生物的标本有哪些? 根据病人的症状，医生的初步考虑属于某个部位感染就留取此部位的样本进行细
[医学类试卷]临床医学检验技术初级（士）（微生物学及检验）模拟试 卷5 1 下列微生物中，属非细胞型微生物的是( ) （A）细菌 （B）支原体 （C）衣原体 （D）病毒 （E）放线菌 2 属于真核细胞型微生物的是( ) （A）病毒 （B）细菌 （C）支原体 （D）立克次体 （E）真菌 3 细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是( ) （A）形态微小，结构简单
（B）原始核，细胞器不完善（C）二分裂方式繁殖 （D）有细胞壁 （E）对抗生素敏感 4 真核细胞型微生物的特点是( ) （A）典型的核结构 （B）体积微小 （C）有细胞壁 （D）无完整细胞器 （E）对抗生素敏感 5 细菌的基本结构不包括( ) （A）细胞膜 （B）细胞质 （C）核质 （D）细胞壁 （E）菌毛
6 质粒是细胞的( ) （A）核质DNA （B）胞质DNA （C）核质RNA （D）胞质RNA （E）极体 7 下列不是细菌的特殊结构的是( ) （A）异染颗粒 （B）荚膜 （C）芽胞 （D）菌毛 （E）鞭毛 8 关于菌毛的叙述，错误的是( ) （A）多见于革兰阴性菌 （B）有普通菌毛与性菌毛 （C）在光学显微镜下看不到
（D）是细菌的运动器官 （E）普通菌毛与细菌的致病力有关9 血琼脂上的溶血环不包括( ) （A）δ溶血 （B）α溶血 （C）β溶血 （D）γ溶血 （E）双环溶血 10 细菌L型的特点错误的是( ) （A）对青霉素敏感性降低 （B）对表面活性剂敏感性增高（C）革兰染色均为阳性 （D）高度多形性 （E）抗原性改变 11 细菌按抗原结构不同而分为( ) （A）血清型
第二十五章病原性放线菌及检验 本章内容 一、放线菌属 二、诺卡菌属 放线菌 一群呈分枝状生长的G+杆菌。按对氧的需要可分为需氧性放线菌、兼性厌氧放线菌和厌氧性放线菌。 对人致病的放线菌可按是否含有分枝菌酸分为两大类，一类不含分枝菌酸，如放线菌属；另一类含有分枝菌酸，如诺卡菌属。 放线菌属——生物学特性 形态与结构 形态：分枝状无隔菌丝，但不形成空中菌丝。 有时断裂成短杆状或球状。 染色：G+；抗酸染色阴性。 特殊结构：无芽胞、荚膜和鞭毛。 培养特性 营养要求：培养困难。 气体环境：厌氧或微需氧。 菌落特点：初次分离加5%CO2可促进生长。 培养基（牛心脑浸液琼脂）：3～4d才能形成肉眼可见的，灰白色或瓷白色、表面粗糙而不规则的菌落。
液体培养基：37℃3～6d后，在下层或底部白色或灰白色生长。 放线菌属——微生物检验及鉴定 标本采集：主要采集脓液和痰液或活检组织。 形态学检查： 在患者病灶和脓汁中可找到肉眼可见的黄色小颗粒，称为“硫磺颗粒”，是放线菌在病灶组织中形成的菌落。镜检可见颗粒呈菊花状，中央为革兰阳性的丝状体，周围为粗大的革兰阴性棒状菌鞘，呈放射状排列。 分离培养 生化试验（鉴定） 放线菌属——致病性及临床意义 多为动物体表面，特别是口腔正常菌群的成员，少数可引起内源性感染。 衣氏放线菌是人类放线菌病最常见的菌种，牛放线菌主要引起牛放线菌病。
衣氏放线菌在机体抵抗力减弱或受伤时引起的内源性感染，导致软组织的化脓性炎症。若无续发感染则大多呈慢性无痛性过程，常出现多发瘘管，排出的脓性物质中含有硫磺颗粒，此即为放线菌病。 诺卡菌属——生物学特性 形态与结构 形态：与放线菌相似，但菌丝末端不膨大。 培养早期裂解为较多的球状或杆状，分枝状菌丝较少。 在病人脓、痰、脑脊液中本菌为纤细的分支状菌丝。 染色：G+；抗酸染色弱抗酸性。 培养特性 营养要求：不高。 气体环境：专性需氧。 菌落特点： 普通培养基或沙保培养基、脑心浸液琼脂：25～37℃培养均可生长，5～7d可见菌落表面干燥、有皱褶或呈颗粒状，不同种类可产生不同色素（黄、橙或红色等）。 诺卡菌属——微生物检验及鉴定 标本采集：采集痰液、支气管冲洗液、组织渗出液、脓液和脑脊液标本。