实验1 植物组织渗透势的测定（质壁分离法）
一、实验目的
观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。
二、实验原理
当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。
当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。代入公式即可计算出春渗透势。
三、实验仪器、试剂、材料等
显微镜；载玻片及盖玻片；镊子；刀片
配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。
称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1m0le/L（母液）。再配制成下列各种浓度：
0.50mol/L：吸母液25ml+水25ml
0.45mol/L：吸母液22.5ml+水27.5ml
0.40mol/L：吸母液20.0ml+水30.0ml
0.35mol/L：吸母液17.5ml+水32.5ml
0.30mol/L：吸母液15.0ml+水35.0ml
0.25mol/L：吸母液12.5ml+水37.5ml
0.20mol/L：吸母液10.0ml+水40.0ml
0.15mol/L ：吸母液7.5ml+水42.5ml
0.10mol/L ：吸母液5.0ml+水45.0ml
四、实验方法
将带有色素的植物组织（叶片），一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物，也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。撕取下表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，5—10分钟后，从0.5mol/L 开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的相对程度。实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。
在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次，直至有把握确定为止。在此条件下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。
将结果记录下表。
测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液最低浓度和不能引起质壁分离的最高浓度平均值之后，可按下列公式计算在常压下该组织细胞质液的渗透势。
RTiC s =-?
s ?-为细胞渗透势。
R 为气体常数=0.083×105/L·Pа/mol·K。
T 为绝对温度，单位K ，即273℃+t ，t 为实验湿度。
I为解离系数，蔗糖为1。
C为等渗溶液的浓度，单位为mol/L。
-=0.083×105×(273℃+t)×1×C
则：s?
实验人时间材料名称实验时室
五、实验作业：
1、叙述细胞渗透作用的原理。
2、测定并计算不同植物组织的渗透势。
实验2 植物组织水势的测定（小液流法）
一、实验目的
了解植物组织中水分状况的另一种表示方法及用于测定的
方法和它们
的优缺点。
二、实验原理
将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。因溶液的浓度是已知的，可以根据公式算出其渗透压，取其负值，为溶液的渗透势（ψπ），即代表植物的水势（ψw）（waterpotential）。
ψw＝ψπ＝－P＝－CRT（大气压）
三、实验仪器、试剂、材料等
（一）材料：小白菜或其它作物叶片
（二）仪器设备：1.带塞青霉素小瓶12个；2.带有橡皮管的注射针头；3.镊子；4.打孔器5.培养皿。
（三）试剂：1.0.05、0.10、0.15、0.20、
0.25、0.30mol/L蔗糖溶液；2.甲烯蓝粉末。
四、实验方法
1、取干燥洁净的青霉素瓶6个为甲组，各瓶中分别加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液约4ml（约为青霉素瓶的2／3处），另取6个干燥洁净的青霉素瓶为乙组，各瓶中分别加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液1ml和微量甲烯蓝粉末着色，上述各瓶加标签注明浓度。
2、取待测样品的功能叶数片，用打孔器打取小圆片约50片，放至培养皿中，混合均匀。用镊子分别夹入5～8个小圆片到盛
有不同浓度的甲烯蓝蔗糖溶液的青霉素瓶中（乙组）。盖上瓶塞，并使叶圆片全部浸没于溶液中。放置约30～60min，为加速水分平衡，应经常摇动小瓶。
3、经一定时间后，用注射针头吸取乙组各瓶蓝色糖液少许，将针头插入对应浓度甲组青霉素瓶溶液中部，小心地放出少量液流，观察蓝色液流的升降动向。（每次测定均要用待测浓度的甲烯蓝蔗糖溶液清洗几次注射针头）。如此方法检查各瓶中液流的升降动向。若液流上升，说明浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小（即植物组织失水）；表明叶片组织的水势高于该浓度糖溶液的渗透势；如果蓝色液流下降则说明叶片组织的水势低于该糖溶液的渗透势，若蓝色液流静止不动，则说明叶片组织的水势等于该糖溶液的渗透势，此糖溶液的浓度即为叶片组织的等渗浓度
4、将求得的等渗浓度值代入如下公式：
ψw＝ψπ＝－CRTi×1.013×0.1。式中：ψw＝植物组织的水势（单位：Mpa）ψπ＝溶液的渗透势C ＝等渗浓度（mol/L）R＝气体常数（0.008314MPa/L/mol/K）T ＝绝对温度i＝解离系数（蔗糖＝1，CaCl2＝2.60）1大气压＝
1.013＝0.1MPa。
五、实验作业
用小液流法测定植物组织的水势与用质壁分离法测定植物细胞的渗透势都是以外界溶液的浓度算出的溶质势，它们之间的区别何在？
实验3 蒸腾速率的测定（快速称重法）
一、实验目的
学会用快速称重法测定植物的蒸腾速率，加深对植物水分代谢的认识。
二、实验原理
植物蒸腾失水，重量减轻。因此，用称重法测得一定面积或一定重量的蒸腾器官在一定时间里的失水量，即可测得其蒸腾速率。
三、实验仪器、试剂、材料等
精度为10mg 的扭力天平1架；枝剪1把；剪刀1把；铅笔1支；线1根；坐标方格纸1张；标签1个；尺子1把；各种树木的带叶枝条。
四、实验方法
1、将扭力天平放在被测树木附近的平稳处，调平，然后在被测植株上选一重约10g 左右且有代表性的枝条，在其基部挂上标签，并缚一细线。在绑线处上方1~2cm 处将、枝条剪下，立即称重（记为W 1，精确至0.001g ），并在读数时准确计时（t 1）。
2、迅速将枝条用线悬挂原处，使其在原环境中蒸腾，约15min 后，取下枝条，第二次称重（记为W 2，精确至0.001g ），并准确计时（t 2）。两次所称重量只差即是这段时间内枝条蒸腾部位的鲜重。
3、 求算叶面积或蒸腾部位的鲜重。
（1）用称纸法求算叶面积 用尺量出坐标纸边长，算出全纸面积，称出全纸重，精度同上。摘下叶子，平摊在坐标纸上，在坐标纸上用铅笔绘出叶子轮廓，剪下叶形，称重，精度同上。按下式计算叶面积（S ）：
S(cm 2)＝剪下的叶形纸重（g ）×）
全纸重（）全纸面积（g cm 2 （2）求算蒸腾部位的鲜重 剪下枝条上的叶片和嫩梢，称枝重（W 3），精度同上，W 1减去W 3即为蒸腾部分的鲜重：
蒸腾部位的鲜重=W 1-W 2
4、计算蒸腾速率。
蒸腾速率［g ／（m 2·h 1）］＝
)(min)()(6010000))((12221t t cm S g W W -???- 或：
蒸腾速率［mg ／(g·min)］＝
)(min)
())(())((122131t t g W W mg W W -?-- 五、实验作业
计算所测植物的蒸腾强度。
实验4 单盐毒害及离子间拮抗现象
一、实验目的
通过简单试验说明培养液中各种离子平衡（各种离子及其浓度）的重要性。
二、实验原理
离子间的拮抗现象的本质是复杂的，它可能反映不同离子对原生质亲水胶粒的稳定度、原生质膜的透性，以及对各类酶活性调节等方面的相互制约作用，从而维持机体的正常生理状态。
三、实验仪器、试剂、材料等
烧杯；纱布；石蜡； 0.12mol/L KCl；0.06mol/L CaCl2；
0.12mol/L NaCl
（所用药品均需用AR）
四、实验方法
实验前3—4天选择饱满的小麦种子100粒浸种，在室温下萌发，待根长1cm时即可用作材料。
取4个小烧杯，依次分别倒人不列盐溶液：
（1）0.12mol／L KCI
（2）0.06 mol／L CaCl2
（3）0.12 mol／L NaCI
（4）0.12 mol／L NaCl 100 ml＋0.06 mol／L CaCl2 1 ml十0.12mol／L KCl 2.2 ml小烧杯用涂石蜡的纱布盖上。挑选大小相等及根系发育一致的小麦幼苗10株或20株，小心种植在纱布盖的孔眼里，使根系接触到溶液，在室温下培育2—3星期后，即可看出在单盐溶液中，小麦幼苗生长，特别是它们的根部出现畸形。
五、实验作业
比较小麦在不同盐溶液中的生长情况并加以解释。
实验5 叶绿体色素的提取和分离（纸层析法）
一、实验目的
了解叶绿体色素提取分离的原理以及它们在光合作用中的意义。
二、实验原理
叶绿体色素是植物吸收太阳光能进行光合作用的重要物质，主要由叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。从植物叶片中提取和分离色素是对其认识和了解的前提。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性，可用丙酮提取。
分离色素的方法有多种，纸层析是其中最简便的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时，由于混合物中各成分在两相（即流动相和固定相）间具有不同的分配系数，它们的移动速度不同，使样品中的混合物得到分离。
三、实验仪器、试剂、材料等
大试管台天平
研钵量筒
烧怀漏斗
软木层新华滤纸
丙酮四氯化碳
无水硫酸钠碳酸钙
石英砂
四、实验方法
1、称取新鲜叶子 2 g，放入研钵中加丙酮 5ml，少许碳酸钙和石英砂，研磨成匀浆，再加丙酮 5 ml，然后以漏斗过滤之，即为色素提取液。
2、取准备好的滤纸条（2×2 cm），将其一端剪去两侧，中间留一长约1.5cm，宽约0.5cm的窄条。
3、用毛细管取叶绿素溶液点于窄条的上方，注意一次所点溶液不可过多。如色素过淡，用电吹风吹干后再点1一2次。
4、在大试管中加入四氯化碳3—5ml及少许无水硫酸钠。然后将滤纸条固定于软木塞上，插入试管内，使窄端浸入溶剂中（色素点要略高于液面，滤纸条边缘不可碰图到试管壁），盖紧软木塞，直立于阴暗处进行层析。
5、经过0.5一1小时后，观察分离后色素带的分布。最上端橙黄色为胡萝卜素，其次黄色为叶黄素，再下面蓝绿色为叶绿素a，最后的黄绿色为叶绿素b。
五、实验作业
提取叶绿素时为什么要加少量的碳酸钙，加多了会出现什么问题？
植物组织水势的测定实验报告 一、实验目的和要求 了解植物组织中水分状况的另一种表示方法及用于测定的方 法和它们的优缺点。 二、实验原理 小液流法测定新鲜白萝卜的组织水势。植物细胞是一个渗透系统。当组织水势低于溶液渗透势，组织吸水，溶液变浓，比重增加，小液流下沉。当组织水势高于溶液渗透势，组织失水，溶液变稀，比重下降，小液流上浮。当组织水势等于溶液渗透势，组织与溶液达到水分进出动态平衡，溶液浓度和比重不变，小液流不动。 压力室法测定海桐叶片组织水势,植物叶片通过蒸腾作用产生蒸腾拉力。导管中的水分由于内聚力的作用而形成连续的水柱。因此，对于蒸腾着的植物，其导管中的水柱由于蒸腾拉力的作用，使水分连贯地向上运输。当叶片或枝条被切断时，木质部中的液流由于张力解除迅速缩回木质部。将叶片装入压力室钢筒，切口朝外，逐渐加压，直到导管中的液流恰好在切口处显露时，所施加的压力正好抵偿了完整植株导管中的原始负压。 三、主要仪器设备 小液流法：白萝卜、打孔器、10ml离心管、小刀、镊子、注射器、1mol/L蔗糖溶液、甲基橙压力室法：压力室 四、操作方法和实验步骤
小液流法： 1、用1mol/l的蔗糖溶液配制0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50M一系列不同浓度的蔗糖溶液(10mL)，用力混匀。 2、分别取4ml不同浓度的溶液到另一组相应的试管中。每管加入厚度约为1mm的萝卜圆片，加塞放置30min。期间晃动（3-4次）。 3、用针蘸取少量甲基橙放入每支试管，混匀。 4、用注射器取少许黄色溶液，伸入对应浓度的蔗糖溶液中部，缓慢挤出一滴小液滴，观察小液滴移动方向并记录。 Ψw(Mpa) = -iCRT = -0.0083×(273+toC) ×浓度 压力室法： 根据植物材料选取枝条（或叶片）型的压力室盖→将试样装入压力室盖的孔（或槽）中夹紧，压入压力室并顺时针旋转紧固。打开钢瓶阀门，使控制阀朝向加压，缓慢打开测定阀，使加压速率达0.1bar,仔细观察伸出压力室盖的植物样品，一发现木质部转湿润液体溢出，立即关闭测定阀，记录压力表读数。 组织Ψw(Mpa) = -0.1×压力室压力表读数 五、实验数据记录和处理 小液流法测定结果： 其他两个小组的实验结果： 根据公式计算得到萝卜组织液浓度 Ψw(Mpa) = -iCRT = -0.0083×(273+t℃) ×浓度= -0.0083×(273+16 ) ×0.1=-0.240Mpa
实验一、植物组织渗透势的测定 （质壁分离法） 一、实验原理： 将植物组织分别投入一系列浓度梯度的溶液中，使细胞将要产生初始质壁分离的浓度，就等于细胞液的浓度，根据浓度可计算出渗透势。 【注：：典型植物细胞水势(Ψw)组成为：ψw=ψs+ψp+ψm （ψs 为渗透势，ψp为压力势，ψm为衬质势）。 渗透势（osmotic potential，ψs）：由于溶质的存在而使水势降低的值称为渗透势或溶质势（solute potential，ψs），以负值表示。 渗透势值按公式ψs=-iCRT来计算（C为溶液的摩尔浓度；T为绝对温度，即实验温度+273；R为气体常数，R=0.0083；i为渗透系数，表示电解质溶液的渗透压非电解质溶液渗透压的倍数，如蔗糖i=1，NaCl i=1.8）。 压力势（pressure potential，ψp）：由于细胞吸水膨胀时原生质向外对细胞壁产生膨压（turgor），而细胞壁向内产生的反作用力——壁压使细胞内的水分向外移动，即等于提高了细胞的水势。由于细胞壁压力的存在而引起的细胞水势增加的值叫压力势，一般为正值。当细胞失水时，细胞膨压降低，原生质体收缩，压力势则为负值。当刚发生质壁分离时压力势为零。 衬质势（matrix potential, ψm）：衬质势是细胞胶体物质亲水性和毛细管对自由水的束缚而引起的水势降低值，如处于分生区的细
胞、风干种子细胞中央液泡未形成。对已形成中心大液泡的细胞含水量很高，ψm只占整个水势的微小部分，通常一般忽略不计。因此一个具有液泡的成熟细胞的水势主要由渗透势和压力势组成,即ψw=ψs+ψp 】。 将细胞置于纯水或稀溶液中，外液水势高于细胞水势，外侧水分向细胞内渗透，细胞吸水，体积变大；外液水势等于细胞水势，水分进出平衡，细胞体积不变；将植物置于浓溶液中，外液水势低于细胞水势，水从细胞内向外渗透，细胞失水，体积变小。 将植物材料（带色洋葱表皮组织）置于浓溶液中，由于细胞壁的伸缩性有限，而原生质层的伸缩性较大，当细胞继续失水时，原生质层便和细胞壁慢慢分离开来，这种现象被称为质壁分离。把发生了质壁分离的细胞浸在水势较高的稀溶液或清水中，外液中的水分又会进入细胞，液泡变大，原生质层很快会恢复原来的状态，重新与细胞壁相贴,这种现象称为质壁分离复原。 质壁分离质壁分离复原当外界溶液的渗透势略低于细胞液的渗透势时，原生质刚刚从细胞角隅上脱离细胞壁，即为初始质壁分离。刚发生质壁分离时，
植物组织水势的测定（小液流法） 实验目的： 1. 了解测定植物组织水势的方法及其优缺点 2. 学习用小液流法测定植物组织水势的方法 实验原理： 实验原理 1、当植物组织与外液接触时发生水分交换： 植物组织的水势低于外液的渗透势（溶质势），组织吸水，外液浓度变大；ψ植物<ψS 植物组织的水势高于外液的渗透势（溶质势），组织失水，外液浓度变小；ψ植物> ψS 若两者相等，则水分交换保持动态平衡，外液浓度保持不变；ψ植物＝ψS 2、同一种物质浓度不同时其比重不一样，浓度大的比重大，把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时，液滴下沉；反之则上升。 3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度 实验仪器与试剂 试管架试管打孔器毛细管镊子青霉素瓶蔗糖溶液甲烯蓝粉末 操作步骤 1. 配制不同浓度的蔗糖溶液
2.用打孔器在绣球花的不同部位打100-200片，混匀，每个青霉素瓶各放入15-20片，（打孔要迅速，避开叶脉，选边缘整齐无破损的叶片） 3.从配制好的试管中各取2ml（量准确？）到相应的青霉素瓶或称量瓶中（用一只移液管由低高，不要润洗）。放置20—30min，期间摇动数次，以加速水分平衡。 4. 染色：用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶中，摇匀，溶液变蓝。（干燥针头先用蒸馏水湿润，加入的甲烯蓝量一定少，使各瓶中颜色基本一致） 5.观察液滴升降： 用毛细吸管取青霉素瓶有色液插入相应试管中部缓慢从毛细吸管尖端横向放出一滴蓝色溶液，轻轻取出滴管，观察蓝色液滴的移动方向并记录。（用白纸划一直线置于试管背面，方便观察）6.分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水分势相当的浓度，根据原理公式计算出组织的水势。 实验结果
实验5 植物组织水势的测定（小液流法） 一、原理 当植物组织与外液接触时，如果植物组织的水势低于外液的渗透势（溶质势），组织吸水、重量增大而使外液浓度变大；反之，则组织失水、重量减小而外液浓度变小；若两者相等，则水分交换保持动态平衡，组织重量及外液浓度保持不变。根据组织重量或外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度，然后根据公式计算出溶液的渗透势，即为植物组织的水势。溶液渗透势的计算： Ψs = - iCRT （ 6 – 1 ） 式中：Ψs ——溶液的渗透势，以 MPa 为单位。 R ——气体常数，为0.008314 MPa · L/ （mol · K ）。 T ——绝对温度，即273 + t ℃。 C ——溶液的质量摩尔浓度，以 mol/kg 为单位。 i ——为解离系数， CaCl 2 为 2.6 。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 植物叶片或洋葱鳞茎。 （二）试剂 1 ．甲烯蓝粉末。 2 ． CaCl 2 溶液：包括 0.10 、 0.15 、 0.20 、 0.25 、 0.30 、 0.35 、 0.40 、 0.45 mol/kg 8 种不同质量摩尔浓度的溶液。 （三）仪器设备 大试管 8 支 , 小试管 8 支，青霉素小瓶 8 支，移液管（ 5mL ），毛细吸管 8 支，培养皿，打孔器，剪刀 l 把，镊子 1 把，解剖针 1 支。 三、实验步骤
1. 编号贴标签取干燥洁净的大试管 8 支，小试管 8 支，青霉素小瓶 8 支，毛细吸管 8 支，编号贴标签，按序号排好。 2. 打取、浸泡叶片取待测样品的功能叶数片，用打孔器打取小圆片约 60 片，放在培养皿中，混合均匀。用镊子分别把 5 ～ 8 个小圆片放到盛有 4 mL 不同质量摩尔浓度 CaCl 2 溶液的青霉素小瓶中，浸没叶片，盖紧瓶塞，放置 30 min ，并不断轻摇小瓶，以加速水分平衡（如温度低时可延长放置时间）。 3. 染色到预定时间后，用解剖针尖蘸取微量甲烯蓝粉末，加入各青霉素小瓶中，并摇动，使溶液染色均匀。 4. 测定把试管中的不同浓度的系列标准液分别倒入相同编号的小试管中，用毛细吸管吸取相同编号青霉素小瓶内的有色溶液少许，插入相同编号的小试管溶液中部，轻轻挤出有色溶液一小滴，小心取出毛细管（勿搅动有色液滴），观察有色液滴的升降情况，并记录于表 6 –1 中。若有色溶滴上升，表示浸过叶片的溶液浓度变小（即植物叶片组织中有水排出），说明叶片组织的水势大于该浓度溶液的溶质势；若有色液滴下降，则说明叶片组织的水势小于该浓度的溶质势；若有色小液滴静止不动，说明叶片组织的水势等于该浓度溶液的溶质势。若在前一浓度溶液中下降，而在后一浓度中上升，则植物组织的水势可取二种浓度溶液的溶质势的平均值。 分别测定不同浓度中有色液滴的升降，找出与组织水势相当的浓度。记录实验时的温度，根据原理中公式（ 6 – 1 ）计算出组织的水势。 表 6-1 小液流法现象观察记载表 [ 注意事项 ] 1. 所取材料在植株上的部位要一致，打取叶圆片要避开主脉和伤口。 2. 取材以及打取叶圆片的过程操作要迅速，以免失水。 3. 带结晶水的甲烯蓝不易溶于 CaCl 2 溶液，可在100 ℃下烘干成无水甲烯蓝粉末使用。 4. 毛吸管尖端弯成直角，以保证从中出来的液滴不受向下力的影响。 [ 思考题 ] 用小液流法测定植物组织水势时，为什么应强调所用试管、毛吸管应保持干燥，打取小圆片并投入试管中时动作应迅速，加入甲烯蓝不能太多？
实验1 植物组织渗透势的测定（质壁分离法） 一、实验目的 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。 二、实验原理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。代入公式即可计算出渗透势。 三、实验仪器、试剂、材料等 显微镜；载玻片及盖玻片；镊子；刀片 配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。 称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1m0le/L（母液）。再配制成下列各种浓度： 0.50mol/L：吸母液25ml+水25ml 0.45mol/L：吸母液22.5ml+水27.5ml 0.40mol/L：吸母液20.0ml+水30.0ml 0.35mol/L：吸母液17.5ml+水32.5ml 0.30mol/L：吸母液15.0ml+水35.0ml 0.25mol/L：吸母液12.5ml+水37.5ml 0.20mol/L：吸母液10.0ml+水40.0ml 0.15mol/L：吸母液7.5ml+水42.5ml 0.10mol/L：吸母液5.0ml+水45.0ml 四、实验方法 将带有色素的植物组织（叶片），一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物，也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。撕取下表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，5—10分钟后，从0.5mol/L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的相对程度。实验中必须
实验一植物组织水势的测定（小液流法） 1、实验目的 了解植物组织中水分状况的一种表示方法及用于测定的方法及其优缺点。 2、实验原理 植物组织的水分状况可用水势来表示。植物体细胞之间、组织之间以及植物体与环境之间的水分移动方向都由水势差决定。将植物组织放在已知水势的一系列溶液中，如果植物组织的水势（Ψcell）小于某一溶液的水势（Ψout），则组织吸水，反之组织失水。若两者相等，水分交换保持动态平衡。组织的吸水或失水会使溶液的浓度、密度、电导率以及组织本身的体积与质量发生变化。根据这些参数的变化情况可确定与植物组织等水势的溶液。 液体交换法测定水势的方法有很多种，本实验练习用小液流法测定植物组织的水势，并初步观察其变化情况。 小液流法测定水势的原理 判据 △Ψ=Ψout-Ψcell 组织的 水分得失 外液的密度变化 △Ψ>0吸水升高 △Ψ<0失水降低 △Ψ=0平衡不变 使用器材用滴管测定外液的密度变化 适用的材料叶片或碎的组织 3、仪器和试剂 试管，试管架，移液管，滴管，打孔机或单面刀片，镊子，解剖针，棉花，吸水纸； 0.05-0.4mol/L CaCl2溶液，甲烯蓝； 土豆 4、实验步骤 ①将16支试管清洗干净，分为两组（实验组和对照组）按编号顺序倒置于试管架上，控净水分。 ②配制一系列不同浓度的氯化钙溶液（0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3、0.35、0.4mol/L），分别注入八支实验组试管中，各10ml左右（体积约为试管的2/3处）。再将实验组各试管溶液的2/3倒入对应编号的对照组试管中。两组试管均加盖棉塞。 ③将土豆用单面刀片切成0.5cm见方的小块。将植物组织混匀，分成八份，放入实验组各试管中。放置20min以上，期间多次摇动实验组试管，以促进水分平衡。 ④用解剖针沾取甲烯蓝粉末给实验组各试管染色，摇匀，用滴管由低浓度向高难度顺序
实验二植物组织水势和细胞渗透势的测定 项目一植物组织水势的测定 一、原理 将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。因溶液的浓度是已知的，可以根据公式算出其渗透压，取其负值，为溶液的渗透势（ψπ），即代表植物的水势（ψw）（water potential）。 ψw＝ψπ＝－P＝－CRT（大气压） 二、材料、仪器设备及试剂 （一）材料：小白菜、菠菜或其它作物叶片 （二）仪器设备：1.带塞青霉素小瓶12个；2.带有橡皮管的注射针头；3.镊子；4.打孔器5.培养皿。（三）试剂：1. 0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30 mol/L蔗糖溶液；2. 甲烯蓝粉末。 三、实验步骤 （一）取干燥洁净的青霉素瓶6个为甲组，各瓶中分别加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液约4 mL（约为青霉素瓶的2／3处），另取6个干燥洁净的青霉素瓶为乙组，各瓶中分别加入0.05～0.30 mol/L蔗糖溶液1mL 和微量甲烯蓝粉末着色，上述各瓶加标签注明浓度。 （二）取待测样品的功能叶数片，用打孔器打取小圆片约50片。用镊子分别夹入5～8个小圆片到盛有不同浓度的甲烯蓝蔗糖溶液的青霉素瓶中（乙组）。盖上瓶塞，并使叶圆片全部浸没于溶液中。放置约30～60min，为加速水分平衡，应经常摇动小瓶。 （三）经一定时间后，用注射针头吸取乙组各瓶蓝色糖液少许，将针头插入对应浓度甲组青霉素瓶溶液中部，小心地放出少量液流，观察蓝色液流的升降动向。（每次测定均要用待测浓度的甲烯蓝蔗糖溶液清洗几次注射针头）。如此方法检查各瓶中液流的升降动向。 若液流上升，说明浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小（即植物组织失水）；表明叶片组织的水势高于该浓度糖溶液的渗透势；如果蓝色液流下降则说明叶片组织的水势低于该糖溶液的渗透势，若蓝色液流静止不动，则说明叶片组织的水势等于该糖溶液的渗透势，此糖溶液的浓度即为叶片组织的等渗浓度。 四、结果计算 将求得的等渗浓度值代入如下公式：ψw＝ψπ＝－CRTi×1.013×0.1。 式中：ψw＝植物组织的水势（单位：Mpa），ψπ＝溶液的渗透势，C＝等渗浓度（mol/L），R＝气体常数（0.008314MPa.mol/L-1.K-1），T＝绝对温度，i＝解离系数（蔗糖＝1，CaCl2＝2.60），1大气压＝1.013 bar ＝0.1MPa。 五、思考题 小液流法测定植物组织水势的原理如何？
实验 3 植物细胞渗透势的测定（质壁分离法） 植物细胞的渗透势主要取决于液泡的溶质浓度，因此又称溶质势。渗透势与植物水分代谢、生长及抗逆性等有密切关系。已知在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力，而在一定程度上维持细胞膨压，保障细胞的生长和气孔的开放，这种现象叫做渗透调节作用。渗透调节能力的大小可以用逆境条件下细胞的渗透势的降低值来表示，在水分生理与抗逆性生理研究中经常需要测定。 一、原理 将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖溶液中，经过一段时间，植物细胞与蔗糖溶液间将达到渗透平衡状态。如果在某一溶液中细胞脱水达到平衡时刚好处于临界质壁分离状态，则细胞的压力势（Ψ p ）将下降为零。此时细胞液的渗透势（Ψs ）等于外液的渗透势Ψs 0 。此溶液称为该组织的等渗溶液，其浓度称为该组织的等渗浓度，即可计算出细胞液的渗透势（Ψs ）。实际测定时，因为临界质壁分离状态难以在显微镜下直接观察到，所以一般均以初始质壁分离作为判断等渗浓度的标准。处于初始质壁分离状态的细胞体积，比吸水饱和时略小，故细胞液浓缩而渗透势略低于吸水饱和状态时的渗透势称基态渗透势。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 洋葱鳞茎、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等。 （二）试剂 1 ． 1 mol/kg 蔗糖水溶液：称取预先在 60 ～ 80 ℃下烘干的蔗糖 34. 2 g 溶于 100 g 蒸馏水中，即为 1 质量摩尔浓度的蔗糖溶液。 2 ． 0.0 3 ％中性红溶液。 3 ．蔗糖系列标准液：取干燥洁净的小试剂瓶 9 支编号，用 1 mol/kg 蔗糖水溶液依据 C 1 V 1 =C 2 V 2 公式配制 0.30 mol/kg 、 0.35 mol/kg 、 0.40 mol/kg 、 0.45 mol/kg 、 0.50 mol/kg 、 0.55 mol/kg 、 0.60 mol/kg 、 0.65 mol/kg 、 0.70 mol/kg 等一系列不同浓度的蔗糖水溶液（具体范围可根据材料不同而加以调整），贮于试剂瓶中，瓶口加塞以防蒸发浓缩。 （三）仪器设备 显微镜，载玻片，盖玻片，温度计，尖头镊子，刀片，小培养皿（直径为 6 cm ），试剂瓶，烧杯，容量瓶，量筒，吸管，吸水纸等。 三、实验步骤 1 ．取干燥、洁净的培养皿 9 套编号，将配制好的不同浓度的蔗糖溶液按顺序加入各培养皿，使之成一薄层，盖好皿盖备用。 2 ．用镊子撕取（或用刀片刮取）供试材料的表皮，大小以 0.5 cm 2 为宜，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，每一浓度 4 ～ 5 片。同时记录室温。为了便于观察，可先将切片于 0.03% 中性红内染色 5 min 左右，吸去水分，再浸入蔗糖溶液中，但如不染色即能区别质壁分离时，仍以不染色为宜。 3 ． 5 ～ 10 min 后，取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的相对程度。如果在两个相邻浓度的切片中，一个切片没有发生质壁分离，另一个切片发生质壁分离的细胞数超过 50 ％，则这两个浓度的平均值为其等渗浓度。每一制片观察的细胞不应少于 100 个。检查时可先从中间浓度开始。
植物组织渗透势的测定 质壁分离法 Pleasure Group Office【T985AB-B866SYT-B182C-BS682T-STT18】
一、实验目的 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。 二、实验原理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。代入公式即可计算出春渗透势。 三、实验仪器、试剂、材料等 显微镜；载玻片及盖玻片；镊子；刀片 配成—L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。 称蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1m0le/L（母液）。再配制成下列各种浓度： L：吸母液25ml+水25ml L：吸母液+水 L：吸母液+水 L：吸母液+水 L：吸母液+水 L：吸母液+水 L：吸母液+水 L：吸母液+水 L：吸母液+水 四、实验方法 将带有色素的植物组织（叶片），一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物，也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。撕取下表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，5—10分钟后，从L开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的相对程度。实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。
植物细胞死活的鉴定和植物组织渗透式的测定 中文摘要：植物活细胞是一个渗透系统，通过渗透的性质及现象可以鉴定一个植物细胞的死活。当植物细胞或组织放在外界等渗溶液中时，组织与外界溶液的水分交换达到动态平衡，植物细胞处于初始质壁分离状态，细胞压力势为零，此时溶液的渗透势就等于所测植物的渗透势。 英文摘要：Plants living cells is a osmosis system, we through permeating the nat ure and phenomena can be id entified a plant cell anyway. When the plant cell or tissue on external etc, organization and infilt ration solution when the moisture exchange reach outsid e solution dynamic balance, plant cells in its initial qualitative wall separated, the cellular pressure potential zero, then solution penetration of potential is measured the pl ant penetration of potential. Part I 植物细胞死活的鉴定 实验原理：植物细胞是一个渗透系统。当细胞处于比其水势低的高渗透溶液中时，细胞由于失水而使原生质体体积缩小，从而引起质壁分离。当提高细胞外溶液的水势，使其大于细胞内的水势时，细胞重新吸水，原生质体体积膨胀，可见质壁分离复原。 活细胞与死细胞的膜在性质上有许多差别，特别是透性的变化最为明显；因此活细胞在高渗溶液中能产生质壁分离，而死细胞不能产生质壁分离现象，即可以此鉴定。 实验目的：利用质壁分离现象验证植物细胞的死活. 实验器材和试剂 植物材料:洋葱鳞茎 实验器材:显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、刀片、酒精灯、滤纸、滴管、移液管、小培养皿 实验试剂:1mol/L蔗糖溶液 实验步骤 1取洋葱鳞片内表皮一小块，放在有1-2滴蒸馏水的载玻片上，盖上盖玻片并在显微镜下观察其自然状态，并绘图示细胞状态。 2在盖玻片的一边加上2-3滴1mol/L的蔗糖溶液，同时在对边用滤纸片吸去水分，使植物材料换入蔗糖溶液中。在显微镜下连续观察细胞有何变化，并绘图示细胞状态。 3观察后，即可从载玻片的一边小心加蒸馏水数滴，同时用滤纸缓慢的从另一边吸蔗糖溶液，反复进行数次以洗去蔗糖溶液，将材料又换入蒸馏水中。在显微镜下观察细胞又有何变化？并解释其原因。 4另取洋葱鳞片内表皮一小块，放在已加有数滴蒸馏水的载玻片上。先在酒精灯火焰上小心加热2-3分钟把植物细胞杀死。待冷却后于载玻片上加2-3滴1mol/L蔗糖溶液，盖上盖玻片进行镜检，看是否发生质壁分离。 Part II 植物组织渗透势的测定 实验原理：在一系列预先准备好的试液中寻找能引起生活组织里约一半的细胞发生质壁分离的溶液。即把一组同一目的的样品放置在一系列按照渗透势逐渐减低排列的蔗糖溶液里，并浸泡30分钟，然后转移到放有1-2滴同一浓度溶液的载玻片上，观察质壁分离发生的情况。镜检约50个细胞。若发生质壁分离，计算初始质壁分离细胞占镜检细胞数的百分比；若达50%，则细胞液的渗透势等于该浓度溶液的渗透势。或确定刚刚引起初始质壁分离和其相邻的尚不能引起质壁分离时溶液浓度的平均值，作为等渗浓度，代入公式ψs=-iCRT中计算出植物组织渗透势。 实验目的：利用质壁分离现象测定植物组织的渗透势。
一植物组织中ETH（乙烯）释放量的测定 测定原理：ACC是乙烯合成的直接前体，为了更好地了解乙烯对植物的调节作用，有必要测定植物中ACC的含量，在冷却的Hg+存在下，NaClO专一地使ACC转化成乙烯。 ACC：1-氨基环丙烷-1-羧酸 测定中气相色谱仪用的是氢火焰检测器FID。 色谱仪包括固定相和流动相。由于固定相和流动相对各种物质的吸附或溶解能力不同，因此各物质的分配系数不一样。当待测样（含ETH混合气体）加入固定相以后，不断通以流动相（通常为氮气、氢气）待测物不断再分配，最后按照分配系数大小顺序依次被分离，并进入检测系统被检测，检测信号的大小，反映出物质含量的多少，在记录仪上呈现色谱图。 判断气相色谱仪氢火焰检测器是否点燃的3种方法？如何判断检测器已工作？ 1、将不锈钢镊子接触到检测器的喷扣处，若镊子上有水珠证明氢气已被点燃； 2、根据记录笔的位置来判断； 3、微电流放大器的“引燃开关”切换“引燃”时，检测器如发出扑声火焰已被点燃。 结果分析：经冷冻的苹果ETH释放速率低于常温的乙烯释放速率。经低温处理ACC合成酶的形成受到损伤和影响，从而降低乙烯的合成与释放。 3大温度3大气流量：基线成一直线表明稳定了 柱温80度进样器温度120度检测器温度140度 N2 流量35微升每分钟400 H2 流量45 微升每分钟55千帕空气流量350 微升每分钟 40 千帕 二植物组织中脂肪氧化酶活力测定 原理根据基质浓度一定，反应体系中溶解氧浓度的变化与酶活力大小呈线性相关原理进行测定。LOX氧化多元不饱和脂肪酸生成具有共轭双键的过氧化物时消耗氧气，溶液中氧浓度的减少速率与酶活力大小成正比，用氧电极可精确的测定酶活力。 结果：经过干旱处理的小麦组织中LOX活力低（受干旱条件的诱导LOX基因的表达） 注意事项：1测定时，维持温度恒定，氧电极对温度变化非常敏感; 2 反应杯中不应有气泡，否则会造成信号不稳 3 进行试验时要保持磁转子的转动，以平衡氧气浓度 4 电极使用一段时间后，在阳极上形成一层氧化膜，使电极的灵敏度下降，需要用清洁剂清洁阳极。 三半伤害温度的求算 1 以伤害度为纵坐标，温度为横坐标，制作曲线，50%伤害对应的温度即半伤害温度； -BT) 生长曲线方程拟合LogisticY=K/(1+Ae2 以Y 伤害度（相当于胁变）K 最大外渗量 T 温度（相当于胁强）A，B 常数 据Logistic方程，以Ln（（K/Y）-1）为纵坐标，以T为横坐标作图，的一直线，直线与横轴交点即半伤害温度。 半伤害温度的生理意义，半伤害温度通常可用来表示植物对高温或低温抗性的大小。在高温伤害情况下，若半伤害温度高，说明对高温伤害抗性强；在低温伤害时，则半伤害温度越低，植物对低温伤害抗性强。对于其他逆境，具有相应的生理意义。 但是对于高温伤害，同样以Ln（（K/Y）-1）为纵坐标，以T为横坐标作图，发现做出的不是直线而是S型曲线。 四蒸汽压渗透压计测植物组织渗透势蒸汽压渗透压计的工作原理 1 原理对于一种溶液来说，溶质颗粒数的增加改变了溶剂分子的自由度，导致溶剂分子主所以称他们为这些溶液特征的相对变化与溶液中粒子的增加量呈线性相关，要特征的改变。．
植物组织水势的测定( 小液流法) 一、目的学会用小液流法来测定植物组织水势。 二、原理当植物组织浸入外界溶液中时，若植物的水势小于外液的水势，则细胞吸水, 使外液浓度变大；反之, 植物细胞失水，外液浓度变小，若细胞和外液的浓度相等，则外液浓度不发生变化。溶液浓度不同其比重也不同，不同浓度的两溶液相遇，稀溶液比重小而会上升，浓溶液比重大而会下降。根据此理, 把浸过植物组织的各浓度液滴滴回原相应浓度的各溶液中，液滴会发生上升、下降或基本不动的现象。如果液滴不动，说明外液在浸过组织后浓度未变，那么就可根据该溶液的浓度计算出其水势。此水势值也就是待测植物组织水势。小液流法就根据这个原理，把植物组织浸人一系列不同浓度的煎糖液中, 由于比重发生了变化，通过观察滴出小液滴在原相应浓度中的反应而找出等渗浓度，从而就可算出溶液的水势。 三、材料指管木架、指形管( 带软木塞)、弯头毛细吸管( 带橡皮头)、小镊子、移液管、温度计、打孔器、不同浓度的蔗糖液(0.2～ 0.6mol/L)、甲烯蓝( 亚甲基蓝)、叶片。 四、方法与步骤 1、配制一系列不同浓度的蔗糖溶液0.05、0.1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0.6 mol/l 各10ml 注入7支试管编号按顺序排列作为对照组。2、另取7支试管 编号按顺序排列作为试验组。然后从对照组的各试管中分别取溶液5ml移入相同编号的试验组试管中。 3、用打孔器在马铃薯上打孔 然后用刀片将马铃薯切成厚薄相等的
小块若干片。向试验组的每一试管中加20片马铃薯小块，摇动数次放置30分钟，后向每一试管中各加甲烯蓝粉末少许并振荡此时溶液变成蓝色。 4、用毛细滴管从试验组的各试管中依次吸取蓝色的液体少许，然后伸入对照组相同编号试管的液体中部。缓慢从毛细管尖端横向放出一滴蓝色试验溶液 观察小液滴移动的方向。如果小液滴向上移动说明溶液从细胞液中吸出水分而被冲淡，比重比原来小了。如果有色液滴向下移动则说明细胞从溶液中吸了，水溶液变浓比重变大。如果液滴不动(扩散均匀) 则说明试验溶液的密度等于对照溶液，即植物组织的水势等于溶液的渗透势。 5、记录每一试管中蓝色小液滴移动的方向 并记录液滴不动的试管中蔗糖溶液的浓度 6、按-ψw=RTiC 计算水势: 其中ψw为细胞水势 R(气体常数)= 8300L*Pa/mol*K。T 为绝对温度 单位K 即273℃+t t 为实验温度 记为25℃ 。i 为解离系数 蔗糖为1。 C 为等渗溶液的浓度 单位为mol/L。 五注意事项 1、准确配制蔗糖梯度溶液 正确使用移液管。 2、土豆块大小厚薄均一 每管个数相同。 3、实验中多次摇动试管 使反应充分进行。 4、甲烯蓝放少许 否则会影响溶液浓度。
实验四植物组织水势的测定 植物体内的生理生化活动与其水分状况密切相关，而植物组织的水势是表示植物水分状况的一个重要生理指标。目前，植物组织水势的测定主要有几种方法：小液流法、折射仪法、压力室法、露点法、热电偶法。前两种方法虽然简便，但精确性差。压力室法较适于测定枝条或叶柄导管的水势。露点法、热电偶法较适宜测定柔软叶片的水势，且精确度高，可在一定范围内重复测定叶片的水势，是较好的水势测定方法。植物的水势可作为制定灌溉的生理指标。 Ⅰ、小液流法 一、目的 通过实验，掌握用小液流法测定植物组织水势的原理和方法。 二、原理 水势代表水的能量水平，水总是从水势高处流向低处。水进入植物体内并分布到各组织器官中的快慢或难易由水势差来决定，水势越高，植物组织的吸水能力越差，而供给水能力越强。当植物组织与一系列浓度递增的溶液接触后，如果植物组织水势大于（或小于）外液的水势，则组织失水（或吸水），使外液浓度变低（或变高），密度变小（或变大）。如果植物组织的水势等于外液的水势时，植物组织既不失水也不吸水，外液浓度不变。当取浸泡过植物组织的溶液的小滴（亦称小液流，为便于观察应先染色），分别放入原来浓度相同而未浸泡植物组织的溶液中部时，小液流就会因密度不同而发生上升或下沉或不动的情况。小液流在其中不动的溶液的水势（该溶液为等渗浓度），即等于植物组织的水势。 三、材料、设备及试剂 1.材料：植物叶片；马铃薯块茎等。 2.仪器设备：试管；小瓶；小塞子；打孔器(直径0.5㎝)；尖头镊子；移液管（1ml、5ml、10ml）；注射针钩头滴管；刀片。 3.试剂：1mol·L－1蔗糖液；甲烯蓝粉。 四、实验步骤 1.系列糖浓度配制 1.1取干燥洁净试管6支，贴上标签，编号，用1mol·L－1蔗糖母液配成0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.30 mol·L－1浓度的糖液，各管总量为10ml，并塞上塞子（防止浓度改变），作为甲组。 1.2另取干燥洁净的小瓶6个，标明0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mol·L－1浓度,分别从甲组取相应浓度糖液1ml盛于小瓶中，随即塞上塞子，作为乙组。 2.取样及测定 2.1选取生长一致的叶片，用直径为0.5cm的打孔器钻取圆片，在玻璃皿内混匀，然后用镊子把圆片放进乙组小瓶中，每瓶放15～20片，（若采用植物块茎如马铃薯，先用打孔器钻取圆条，然后切成约1mm厚圆片，每瓶放5片），立即塞紧塞子，放置40min左右，其间轻轻摇动几次，以加速平衡。 2.2到预定时间后，各小瓶加入几粒甲烯蓝粉染色，摇匀，取6支干燥洁净的注射针钩头滴管，分别从乙组中取出溶液，插入甲组原相应浓度蔗糖溶液的中部，轻轻挤出钩头滴管内
植物组织渗透势的测定 一、实验目的 1. 观察植物组织的细胞质壁分离过程及其原理和方法的掌握。 2. 学会用质壁分离法测定植物细胞渗透势的方法。 二、实验原理 渗透势是指因溶质溶解而使水的自由能降低(与纯水相比)的数值，降低的值与溶质的浓度成正比，纯水的水势最大(值定为零)，当水中具有溶质，水势便降低，此时的水势称为渗透势，故是负值(渗透势的绝对值等于溶质的渗透压，渗透压为正值)。渗透势的单位以巴表示，1巴 = 0.985大气压(或1大气压 = 1.013巴)。植物成熟的细胞都具有液泡，液泡中具有各种溶质，故具有一定的渗透势，液泡外面包裹着活的原生质，原生质外面有细胞壁包围，细胞壁可看作是层透膜，活的原生质具有选择性，所以整个细胞类似一个渗透系统。可用质壁分离法测量细胞渗透势。 质壁分离法当细胞放在一种渗透势比其细胞液渗透势低的溶液中时，细胞液中的水向外渗，液泡体积缩小，原生质的胞壁也跟着向内收缩，如水分继续外渗，液泡体积缩小，而胞壁弹性有限，不能继续收缩，原生质就和细胞壁脱离，这就是质壁分离现象。 当细胞放在某一溶液中，细胞内外水分交换达到平衡，即处于渗透平衡状态，此时细胞内的压力势为零，那么细胞液的渗透势就等于该溶液的渗透势，该溶液浓度称为等渗浓度。利用一系列梯度浓度的溶液，观察质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离现象时(即细胞只是角偶上与胞壁分离)的浓度和与其相邻的尚不能引起质壁分离浓度梯度之间的溶液浓度。代人公式Ψ= - RTiC即可算出其渗透势。 s 三、实验用品 （一）材料洋葱鳞茎或紫鸭跖草叶片。 （二）器材显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片。 （三）试剂 1 mol/L蔗糖溶液。 四、实验操作 1．以1 mol/L的蔗糖溶液作母液，用蒸馏水配成0.10，0.20，0.25，0.30，0.35，0.40，0.45，0.50，0.60 mol/L的一系列浓度的蔗糖溶液各10 ml。各溶液分别装入具塞子试管中，按浓度梯度递减的次序排成一行，并在试管壁上贴上
植物组织水势的测定实验报告 植物组织水势的测定实验报告 一、实验目的和要求了解植物组织中水分状况的另一种表示方法及用于测定的方法和它们的优缺点。 二、实验原理小液流法测定新鲜白萝卜的组织水势。植物细胞是一个渗透系统。当组织水势低于溶液渗透势，组织吸水，溶液变浓，比重增加，小液流下沉。当组织水势高于溶液渗透势，组织失水，溶液变稀，比重下降，小液流上浮。当组织水势等于溶液渗透势，组织与溶液达到水分进出动态平衡，溶液浓度和比重不变，小液流不动。 压力室法测定海桐叶片组织水势, 植物叶片通过蒸腾作用产生蒸腾拉力。导管中的水分由于内聚力的作用而形成连续的水柱。因此，对于蒸腾着的植物，其导管中的水柱由于蒸腾拉力的作用，使水分连贯地向上运输。当叶片或枝条被切断时，木质部中的液流由于张力解除迅速缩回木质部。将叶片装入压力室钢筒，切口朝外，逐渐加压，直到导管中的液流恰好在切口处显露时，所施加的压力正好抵偿了完整植株导管中的原始负压。 三、主要仪器设备小液流法：白萝卜、打孔器、10ml 离心管、小刀、镊子、注射器、1mol/L 蔗糖溶液、甲基橙压力室法：压力室 四、操作方法和实验步骤 小液流法： 1、用1mol/l 的蔗糖溶液配制0.05 、0.10 、0.20 、0.30 、0.40 、0.50M 一系列不同浓度的蔗糖溶液(10mL) ，用力混匀精选文库
2、分别取4ml 不同浓度的溶液到另一组相应的试管中。每管 加入厚度约为1mm勺萝卜圆片，加塞放置30min。期间晃动 ( 3-4 次)。 3、用针蘸取少量甲基橙放入每支试管，混匀。 4、用注射器取少许黄色溶液，伸入对应浓度勺蔗糖溶液中部，缓慢挤出一滴小液滴，观察小液滴移动方向并记录。 ①w(Mpa) = -iCRT = - 0.0083 X (273+toC) X 浓度压力室法： 根据植物材料选取枝条(或叶片)型的压力室盖-将试样装入 压力室盖勺孔(或槽)中夹紧，压入压力室并顺时针旋转紧固。打开钢瓶阀门，使控制阀朝向加压，缓慢打开测定阀，使加压速率达0.1bar, 仔细观察伸出压力室盖的植物样品，一发现木质部转湿润液体溢出，立即关闭测定阀，记录压力表读数。 组织①w(Mpa) = -0.1 X压力室压力表读数 五、实验数据记录和处理小液流法测定结果：其他两个小组的实验结果：根据公式计算得到萝卜组织液浓度 ①w(Mpa) = -iCRT = - 0.0083 X (273+t C) X 浓度=- 0.0083X(273+16 ) X0.1= -0.240Mpa 萝卜组织液浓度约为 0.1mol/L ，水势约为-0.240Mpa 压力室法测定结果： 室温16C，测出出水压力读数为13,水势-1.3Mpa 六、实验结果与分析 1、比较多组的实验结果发现，各组实验数据差别较大，经分析认为通过小液流法测量的水势误差较大。 2、经分析认为萝卜切片厚薄和总质量不同、在空气中放置的时间不同、萝卜片在溶液中的放置时间不同，均有可能造成小液流法实验数据的偏差。 3、通过小液流法测得的植物组织水势只是一个范围，如要得到更精确的实验结果，需要缩小梯度之间的浓度差，在 0.5mol/L~0.2 mol/L 之间设多个测量点。 七、讨论、心得
实验题目：植物组织水势的测定(小液流法) 教师：XXX 实验类型：基础 学时：4 (参考) 内容： 一、实验目的 1.学习用小液流法测定植物组织水势的方法 2.了解不同组织的水势的大小。 二、实验原理 水势表示水分的化学势，象电流由高电位处流向低电位处一样，水从水势高处流向低处。植物体细胞之间、组织之间以及植物体和环境之间的水分移动方向都由水势差决定。 当植物细胞或组织放在外界溶液中时，如果植物的水势小于溶液的渗透势，则组织吸水而使溶液浓度变大；反之，则植物细胞内水分外流而使溶液浓度变小；若植物组织的水势与溶液的渗透势相等，则二者水分保持动态平衡。 当植物材料浸入不同浓度的溶液中时，由于细胞与溶液之间发生水分交换，使原来的溶液浓度发生改变，浓度的改变又引起了溶液比重的改变。若将已浸过植物材料的溶液用毛细管吸入一部分，然后移入与原来浓度相同的溶液时，由于其溶液比重的改变。就会使移入的小液流向上或向下移动或者不移动。这样，就可以根据小液流的移动情况，求出植物组织的水势。 三、试剂与器材 1.材料：菠菜叶片或马铃薯 2.试剂：1mol／L蔗糖溶液、甲烯蓝。 3.器材：试管、移液管、毛细滴管(出口处弯成直角)、打孔器。 四、操作方法 1.配制不同浓度的蔗糖溶液。 2.试验组8支试管，对照组8支试管,分别编好号。 3.选取实验材料进行实验。 4.观察现象，记录液滴不动的试管中蔗糖溶液的浓度。 5.计算水势：фW =-RTiC 式中фW为细胞水势，R为气体常数0．083×105L·Pa／mol·K，T为绝对温度即273℃+ t(t为实验温度)，i为解离系数(蔗糖为1)，C为等渗溶液的浓度。 五、关键步骤与注意事项 1.毛细管尖端弯成直角，试验时从尖端缓慢地横向放出一滴蓝色试验溶液，这样才能观察小液滴上下移动的方向，否则有时小液滴无法从直的毛细滴管尖端放出。 2.不同浓度的溶液都要使用不同的移液管和毛细滴管，微小的浓度变化都会对实验结果造成严重影响。 3.亚甲基蓝粉末应在浸透之后再放入，以防加入太早影响溶液渗透势。 六、思考题 1.测定同一植物上部及下部叶片的水势有何差别? 2.本实验做起来常不能得到完满结果，你认为要做好本实验应注意哪些方面?
实验1植物组织渗透势的测定（质壁分离法） 一、实验目的 观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及其用于测定植物组织渗透势的方法。 二、实验原理 当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。该溶液的浓度称为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的深液浓度。代入公式即可计算出春渗透势。 三、实验仪器、试剂、材料等 显微镜；载玻片及盖玻片；镊子；刀片 配成0.5—0.1mol/L梯度浓度的蔗糖溶液各50ml。 称34.23g蔗糖用蒸馏水配成100ml，其浓度为1m0le/L（母液）。再配制成下列各种浓度： 0.50mol/L：吸母液25ml+水25ml 0.45mol/L：吸母液22.5ml+水27.5ml 0.40mol/L：吸母液20.0ml+水30.0ml 0.35mol/L：吸母液17.5ml+水32.5ml 0.30mol/L：吸母液15.0ml+水35.0ml 0.25mol/L：吸母液12.5ml+水37.5ml 0.20mol/L：吸母液10.0ml+水40.0ml 0.15mol/L：吸母液7.5ml+水42.5ml 0.10mol/L：吸母液5.0ml+水45.0ml 四、实验方法 将带有色素的植物组织（叶片），一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮、紫鸭跖草、苔藓、红甘蓝或黑藻、丝状藻等水生植物，也可用蚕豆、玉米、小麦等作物叶的表皮。撕取下表皮，迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中，使其完全浸入，5—10分钟后，从0.5mol/L 开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上，盖上盖玻片，于低倍显微镜下观察，如果所有细胞都产生质壁分离的现象，则取低浓度溶液中的制片作同样观察，并记录质壁分离的相对程度。实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。 在找到上述浓度极限时，用新的溶液和新鲜的叶片重复进行几次，直至有把握确定为止。在此条件下，细胞的渗透势与两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。