第十四、二十一章基因工程、分子生物学常用技术段里原理及其应用
复习测试
（一）名词解释
1．DNA重组
2．基因工程
3．限制性核酸内切酶
4．基因组DNA文库
5．cDNA文库
6．聚合酶链反应（PCR）
7．载体
8．转化
9．感染
10．核酸分子杂交
11．Southern印迹杂交
12．Northern印迹杂交
13．斑点印迹
14．原位杂交
15．DNA芯片
16．基因诊断
17．基因治疗
（二）选择题
A型题：
1．限制性核酸内切酶作用特点不包括：
A．在对称序列处切开DNA
B．DNA两链的切点常不在同一位点
C．酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端
D．DNA两链的切点常在同一位点
E．酶辨认的碱基一般为4～6个
2．限制性核酸内切酶：
A．可将单链DNA任意切断
B．可将双链DNA序列特异切开
C．可将两个DNA分子连接起来
D．不受DNA甲基化影响
E．由噬菌体提取而得
3．cDNA文库包括该种生物的：
A．某些蛋白质的结构基因
B．所有基因组
C．结构基因与不表达的调控区
D．内含子和调节区
E．内含子和外显子
4．下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的：
A．从特定组织或细胞中提取mRNA
B．将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中C．用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNA
D．用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNA
E．加S-腺苷甲硫氨酸（SAM），以使新生的DNA双链甲基化
5．限制性核酸内切酶的通常识别序列是：
A．粘性末端
B．RNA聚合酶附着点
C．回文对称序列
D．聚腺苷酸
E．甲基化“帽”结构
6．pUC系列是指：
A．经人工改造的大肠杆菌质粒
B．天然的大肠杆菌质粒
C．天然的酵母质粒
D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体
E．经人工改造的酵母质粒
7．用于转染哺乳类细胞的常用载体是：
A．质粒
B．噬菌体
C．逆转录病毒RNA
D．结构基因
E．乳糖操纵子
8．转化常指：
A．噬菌体感染
B．基因的转位
C．摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变
D．产生点突变
E．产生移码突变
9．基因工程的操作程序可简单地概括为：
A．载体和目的基因的分离、提纯与鉴定
B．分、切、接、转、筛
C．将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株
D．将载体和目的基因接合成重组体
E．限制性核酸内切酶的应用
10．用于基因治疗较为理想的载体是：
A．质粒
B．噬菌体
C．经改造的逆转录病毒
D．人类DNA
E．酵母质粒
11．常用质粒有以下特性：
A．是线形双链DNA
B．插入片段的容量比λ噬菌体DNA大
C．含有抗生素抗性基因
D．含有同一限制性核酸内切酶的多个切口
E．不随细菌繁殖而进行自我复制
12．在重组体中切出插入片段最常用的方法是：
A．以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出
B．用其它限制性酶将其切出
C．用S1核酸酶将其切出
D．用DNA酶将切出
E．用多种限制性内切酶将其切出
13．利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是：
A．反应体系内存在特异DNA片段
B．反应体系内存在特异RNA片段
C．反应体系内存在特异DNA引物
D．反应体系内存在特异RNA引物
E．反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用
14．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是：
A．大肠杆菌表达体系
B．原核表达体系
C．酵母表达体系
D．昆虫表达体系
E．哺乳类细胞表达体系
15．限制性核酸内切酶切割DNA后产生：
A．3′-磷酸基末端和5′-羟基末端
B．5′-磷酸基末端和3′-羟基末端
C．3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端
D．5′-羟基末端和3′-羟基末端
E．3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸
16．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：
A．小型环状双链DNA分子
B．携带有某些抗生素抗性基因
C．在细胞分裂时恒定地传给子代细胞
D．具有自我复制功能
E．获得目的基因
17．在分子生物学领域分子克隆主要是指：
A．DNA的大量复制
B．DNA的大量转录
C．DNA的大量剪切
D．RNA的大量剪切
E．RNA的大量反转录
18．在分子生物学领域重组DNA技术又称：
A．酶工程
B．蛋白质工程
C．细胞工程
D．发酵工程
E．分子克隆技术
19．在重组DNA技术中不涉及的酶是：
A．限制性核酸内切酶
B．DNA聚合酶
C．DNA连接酶
D．反转录酶
E．DNA解链酶
20．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：
A．平端末端
B．3′突出末端
C．5′突出末端
D．粘性末端
E．缺口末端
21．可识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为： A．限制性核酸外切酶
B．限制性核酸内切酶
C．非限制性核酸外切酶
D．非限制性核酸内切酶
E．DNA内切酶
22．cDNA是指：
A．在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA
B．在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA
C．在体外经转录合成的与DNA互补的RNA
D．在体外经反转录合成的与RNA互补的RNA
E．在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA
23．基因组代表一个细胞或生物体的：
A．部分遗传信息
B．整套遗传信息
C．可转录基因
D．非转录基因
E．可表达基因
24．在基因工程中通常所用的质粒存在于：
A．细菌染色体
B．酵母染色体
C．细菌染色体外
D．酵母染色体外
E．病毒DNA外
25．就分子结构而论质粒是：
A．环状双链DNA分子
B．环状单链DNA分子
C．环状双链RNA分子
D．线状双链DNA分子
E．线状单链DNA分子
26．聚合酶链式反应可表示为：
A．PEC
B．PER
C．PDR
D．BCR
E．PCR
27．在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是： A．化学合成法
B．基因组文库法
C．cDNA文库法
D．PCR
E．差异显示法
28．重组DNA的基本构建过程是将：
A．任意两段DNA接在一起
B．外源DNA接入人体DNA
C．外源基因插入宿主基因
D．目的基因接入适当载体
E．目的基因接入哺乳类DNA
29．EcoRⅠ切割DNA双链产生：
A．平端
B．5′突出粘端
C．3′突出粘端
D．钝性末端
E．配伍末端
30．催化PCR的酶是：
A．DNA连接酶
B．反转录酶
C．末端转移酶
D．碱性磷酸酶
E．TaqDNA聚合酶
31．将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属： A．同聚物加尾连接
B．人工接头连接
C．平端连接
D．粘性末端连接
E．非粘性末端连接
32．重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是：
A．DNA聚合酶
B．RNA聚合酶
C．DNA连接酶
D．RNA连接酶
E．限制性核酸内切酶
33．以质粒为载体，将外源基因导入受体菌的过程称：
A．转化
B．转染
C．感染
D．转导
E．转位
34．最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是：
A．营养互补筛选
B．抗药性筛选
C．免疫化学筛选
D．PCR筛选
E．分子杂交筛选
35．α互补筛选法属于：
A．抗药性标志筛选
B．酶联免疫筛选
C．标志补救筛选
D．原位杂交筛选
E．免疫化学筛选
36．下列常用于原核表达体系的是：
A．酵母细胞
B．昆虫细胞
C．哺乳类细胞
D．真菌
E．大肠杆菌
37．在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时，需采用：
A．反转录酶
B．多聚核苷酸激酶
C．引物酶
D．RNA聚合酶
E．末端转移酶
38．在分子生物学领域分子克隆专指：
A．细胞克隆
B．RNA克隆
C．DNA克隆
D．抗体克隆
E．mRNA克隆
39．用于重组DNA 的限制性核酸内切酶，识别核苷酸序列的：
A．正超螺旋结构
B．负超螺旋结构
C．α螺旋结构
D．回文结构
E．锌指结构
40．在基因工程中通常所用的质粒是：
A．细菌染色体DNA
B．细菌染色体以外的DNA
C．病毒染色体DNA
D．病毒染色体以外DNA
E．噬菌体DNA
41．构建基因组DNA文库时，首先需要分离细胞的：
A．染色体DNA
B．线粒体DNA
C．总mRNA
D．tRNA
E．rRNA
42．DNA连接酶是从T4 噬菌体感染大肠杆菌中分离的，这种连接酶： A．只能催化平末端连接，而不能催化粘性末端连接
B．即能催化单链DNA连接又能催化粘性末端双链DNA连接
C．双链DNA中不需一条完整的单链
D．单链中的切口位点可缺少几个核苷酸
E．切口存在相邻的5′-磷酸和3′-羟基末端，使其以磷酸二酯键连接
43．末端转移酶是合成酶类：
A．作用时不需模板
B．是从小牛胸腺中分离
C．能催化单链核苷酸转移到5′-磷酸上
D．需要带有5′-端磷酸的末端的ssDNA
E．需要有延伸5′-端磷酸的末端dsDNA
44．在基因工程中可用碱性磷酸酶：
A．防止DNA的自身环化
B．同多核苷酸激酶一起进行DNA3′-羟基末端标记
C．制备突出的3′-末端
D．特异切除DNA或RNA的3′-末端羟基
E．水解特异的核苷酸片段
45．以下哪种酶作用时需要引物：
A．限制性核酸内切酶
B．末端转移酶
C．反转录酶
D．DNA连接酶
E．碱性磷酸酶
46．S1核酸酶的功能是：
A．切割双链的DNA
B．切割单链的RNA
C．切割发夹环
D．切割单链DNA
E．以上有两项是正确的
47．在cDNA技术中所形成的发夹环可用：
A．限制性核酸内切酶切除
B．用3′外切酶切除
C．用S1核酸酶切除
D．用5′外切酶切除
E．碱性磷酸酶切除
48．下面有关限制性内切酶的叙述正确的是：
A．限制酶是外切酶而不是内切酶
B．限制酶在特异序列（识别位点）对DNA进行切割
C．同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的
D．一些限制酶在识别位点稍有不同的点切割双链DNA，产生粘性末端 E．一些限制酶在识别位点相同的位置切割双链DNA，产生平末端
49．限制性核酸内切酶可以特异识别：
A．双链DNA的特定碱基对
B．双链DNA的特定碱基序列
C．特定的三联码
D．双链RNA的特定碱基序列
E．双链RNA的特定碱基对
50．DNA聚合酶的主要用途：
A．利用它的3′→5′聚合活性，合成ds-DNA第二条链
B．对DNA的5′-端进行填补或末端标记
C．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移，制作DNA标志探针 D．DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序
E．TaqDNA聚合酶用于PCR
51．反转录酶：
A．是依赖于DNA的RNA聚合酶
B．用于真核DNA反转录生成mRNA
C．用于RNA探针的制备
D．用于RNA序列测定
E．是依赖于RNA的DNA聚合酶
52．基因工程中作为载体应具备以下特点：
A．能在宿主细胞中复制繁殖
B．容易进入宿主细胞
C．具有多克隆位点
D．容易从宿主细胞中分离出来
E．以上均是
53．下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大：
A．质粒
B．粘粒
C．酵母人工染色体
D．λ噬菌体
E．cDNA表达载体
54．pUC是一种改造型质粒，含有：
A．乳糖操纵子调节基因、启动子
B．多克隆位点
C．lacZ′基因
D．氨苄青霉素抗性基因
E．以上均有
55．质粒具有以下特点：
A．是位于细菌染色体外的RNA
B．不能自主复制
C．为单链环形DNA
D．大小在2～300kb之间
E．以上都不对
56．粘粒是一种人工建造的载体不具有以下特点：
A．可借cos位点将多个粘粒串联成大环
B．本身约4～6kb之间
C．进入受体细胞后可进行复制
D．可克隆DNA大片段
E．以上都不是
57．下面关于多克隆位点的描述不正确的是：
A．仅位于质粒载体中
B．具有多种限制性内切酶识别的位点
C．不同酶的识别序列可以重叠
D．一般是人工合成后添加到载体中
E．可位于不同载体中
58．下列筛选重组体的方法中不属于遗传学方法的是： A．限制性内切酶图谱法
B．PCR
C．Northern印迹法
D．Southern印迹法
E．抗药性标记基因
59．利用基因工程可以进行：
A．建立染色体基因文库
B．分析基因的结构与功能
C．疾病的发生、发展及治疗的分子机制
D．疾病的诊断和基因治疗
E．以上均可以
60．Southern印迹的DNA探针杂交：
A．只与序列完全相同的RNA片段
B．可与任何含有相同序列的DNA片段
C．可与任何含有互补序列的DNA片段
D．可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段
E．只与含有互补序列的RNA片段
61．下列哪个不是Southern印迹法的步骤：
A．用限制性核酸内切酶消化DNA
B．DNA与载体连接
C．用凝胶电泳分离DNA片段
D．DNA片段转移至硝酸纤维素膜上
E．用一个标记的探针与膜杂交
62．下列哪个不是Northern印迹法的步骤：
A．从细胞和组织中提取RNA
B．用凝胶电泳分离RNA
C．将RNA转移到支持物上
D．与核酸探针进行杂交
E．将RNA反转录合成DNA
63．原位杂交具有以下特点：
A．不需从组织或细胞中提取核酸
B．对靶序列有很高的灵敏度
C．可完整保护组织与细胞的形态
D．准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态 E．以上均是
64．下列哪项不是探针的特点：
A．要加以标记
B．应是双链DNA
C．只与靶核酸序列杂交
D．探针长度可以是十几个碱基到几千个碱基不等 E．高灵敏度
65．探针的种类包括：
A．基因组DNA探针
B．cDNA探针
C．寡核苷酸探针
D．RNA探针
E．以上均是
66．下面哪一步不是获得基因组DNA探针的步骤： A．从基因组文库筛选得到特定基因
B．克隆、扩增
C．纯化
D．连入表达载体
E．切取插入片段
67．RNA探针具有以下特点，但除外：
A．采用反转录方法可以得到
B．单链、杂交效率高
C．杂交体系稳定
D．不存在高度重复序列
E．特异性高
68．下面哪一步不是cDNA探针的步骤：
A．从相应组织细胞直接中分离特异的cDNA
B．从相应组织细胞中分离特异的mRNA
C．反转录合成cDNA
D．与载体连接
E．切割cDNA，分离纯化
69．常用的标记物有，但除外：
A．放射性核素
B．生物素
C．荧光素
D．地高辛
E．NTP
70．用于标记核酸探针的放射性核素主要有，但除外： A．32P
B．35S
C．3H
D．125I
E．14C
71．放射性核素标记物具有，但除外：
A．检测时间短
B．灵敏度和特异性高
C．可检出样品少于1000个分子的核酸量
D．半衰期短，稳定性差
E．污染环境
72．非放射性核素标记物包括，但除外：
A．生物素
B．地高辛
C．荧光素
D．酶
E．核酸
73．非放射性核素标记物具有，但除外：
A．灵敏度高于放射性核素
B．稳定
C．经济
D．实验周期短
E．安全、无污染
74．PCR反应体系包括，但除外：
A．基因组DNA（模板）
B．引物
C．dNTP
D．TaqDNA聚合酶
E．T4DNA连接酶
75．PCR技术主要应用于：
A．目的基因的克隆
B．基因表达与调控
C．DNA微量分析
D．遗传病与传染性疾病的诊断
E．以上均可以
76．以DNA为模板的PCR反应，具备以下条件：
A．反应体系一般选用50-100μl
B．引物、TaqDNA聚合酶
C．4种dNTP、模板DNA
D．缓冲液
E．以上均是
77．以mRNA为模板的PCR反应，具备以下条件：
A．需将mRNA反转录生成cDNA
B．反应体系一般选用20μl体积、4种dNTP、引物
C．需要RNA酶抑制剂、反转录酶
D．TaqDNA聚合酶
E．以上均是
78．关于PCR停滞的原因，取决于很多因素，但除外：
A．样品模板的拷贝数
B．PCR扩增效率
C．DNA酶种类及活性
D．dNTP的大量消耗
E．非特异性的竞争因素
79．用于核酸分子杂交的探针可以是放射性核素标记的：
A．核糖体
B．RNA
C．抗体
D．抗原
E．以上都不是
80．Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是： A．用RNA探针检测DNA片段
B．用RNA探针检测RNA片段
C．用DNA探针检测RNA片段
D．用RNA探针检测蛋白片段
E．用DNA探针检测蛋白片段
81．用免疫化学筛选重组体的原理是：
A．根据外源基因的表达
B．根据载体基因的表达
C．根据mRNA与DNA的杂交
D．根据DNA与DNA的杂交
E．根据RNA与RNA的杂交
82．原位杂交包括：
A．转膜杂交
B．斑点杂交
C．菌落杂交或噬菌斑杂交
D．直接对染色体或组织的杂交
E．以上均有
83．外源性DNA进入菌体的方式是：
A．转化
B．转录
C．翻译
D．半保留复制
E．以上都不是
84．要将无粘性末端的两种平端DNA片段结合在一起，可在： A．两种片段上都接上聚（dT）尾部
B．一种片段接聚（dT）尾部，另一种接聚（dA）尾部
C．两种片段都接上聚（dA）尾部
D．反应液中加以T4DNA连接酶
E．有两项是对的
85．用原核生物表达真核生物的基因存在的问题是：
A．大肠细菌只能表达克隆的cDNA
B．细菌不能切除原始转录物中相当于内含子的核苷酸序列 C．缺乏翻译后加工机制
D．表达的蛋白质常形成不溶性包涵体
E．以上都正确
86．常用载体有：
A．质粒
B．噬菌体
C．病毒DNA
D．大肠杆菌基因组DNA
E．有3项是正确的
87．构建cDNA文库时，首先需分离细胞的：
A．染色体DNA
B．线粒体DNA
C．总mRNA
D．tRNA
E．rRNA
88．构建DNA文库时，首先需分离细胞的：
A．染色体DNA
B．线粒体DNA
C．总mRNA
D．tRNA
E．rRNA
89．设计PCR的引物时，应考虑引物与模板的：
A．5ˊ端特定序列互补
B．5ˊ端任意序列互补
C．3ˊ端特定序列互补
D．3ˊ端任意序列互补
E．中间序列互补
90．用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是： A．抗药性选择
B．分子杂交选择
C．RNA反转录
D．免疫学方法
E．体外翻译
91．下列哪一步是DNA芯片技术的最关键的环节：
A．样品的准备与标记
B．芯片的制备
C．信号的检测
D．数据分析处理
E．杂交
92．基因诊断常用的技术方法有：
A．核酸分子杂交
B．单链构象多态性分析
C．DNA序列测定
D．DNA芯片技术
E．以上均是
B型题：
A．基因从原来位置转到基因组的另一位置
B．噬菌体或病毒DNA进入细胞中繁殖
C．外来DNA引起细胞生物学特性的改变
D．移码突变
E．非移码突变
1．感染是指：
2．转化是指：
3．转位是指：
4．结构基因中3个核苷酸的插入或丢失是指：
5．结构基因中1个核苷酸的插入或丢失是指：
A．抗药性选择
B．分子杂交选择
C．RNA转录
D．免疫学方法
E．体外翻译
6．用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是：
7．用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法：
8．利用目的基因表达产物的特异抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是：
A．限制性核酸内切酶
B．DNA连接酶
C．反转录酶
D．TaqDNA聚合酶
E．碱性磷酸酶
9．识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是：
10．用于聚合酶链式反应的是：
11．将目的基因与载体DNA进行连接的酶是：
12．特异切除DNA或RNA5ˊ端磷酸的酶是：
13．mRNA转录合成cDNA的酶是：
A．支原体
B．衣原体
C．噬菌体
D．细菌
E．酵母
14．常用作原核表达体系的是：
15．常用作真核表达体系的是：
A．基因组文库
B．cDNA文库
C．mRNA文库
D．tRNA文库
E．rRNA文库
16．分离细胞染色体可制备：
17．分离细胞总mRNA可制备：
A．抗药性选择
B．RNA反转录
C．免疫化学方法
D．体外翻译
E．PCR
18．对重组体内基因进行直接选择的方法是：
19．通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是：
A．RNA聚合酶
B．末端转移酶
C．碱性磷酸酶
D．反转录酶
E．核苷酸酶
20．切除DNA末端磷酸基需要用：
21．在DNA3′羟基末端进行同聚物加尾需要用：
22．合成cDNA需要用：
A．同聚物加尾连接
B．人工接头
C．粘性末端连接
D．缺口末端连接
E．平端连接
23．外源基因和载体DNA经限制性酶切后的连接属于：
24．在外源基因和载体DNA末端添加同聚物序列后再进行连接属于：
25．在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列，人为制造粘性末端再进行连接属于：26．需用适当的酶将DNA突出末端削平或补齐的连接属于：
A．将单链DNA任意切断
B．将双链DNA序列特异切开
C．将两个DNA分子连接起来
D．将缺口末端连接
E．切除DNA末端磷酸基团
27．限制性内切酶的作用是：
28．DNA连接酶作用是：
29．碱性磷酸酶作用是：
A．某些蛋白质的结构基因
B．所有基因结构
C．不表达的调控区
D．内含子和调节区
E．外显子和调节区
30．cDNA文库包括：
31．DNA文库包括：
32．真核mRNA包括：
A．DNA聚合酶
B．RNA聚合酶
C．DNA连接酶
D．RNA连接酶
E．限制性核酸内切酶
33．切除特异DNA片段：
34．连接两个DNA片段：
35．大量扩增DNA片段：
A．反转录酶
B．多聚核苷酸激酶
C．引物酶
D．RNA聚合酶
E．末端转移酶
36．催化ATP的磷酸转移到DNA或RNA的5ˊ端羟基上：
37．催化单核苷酸转移到DNA的3ˊ端羟基上：
38．合成cDNA：
（三）问答题
1．简述基因工程的主要过程。
2．什么是载体？可分为几类？它们各有什么特点？
3．pUC质粒有何特点？
4．采用哪些方法可获取目的基因？
5．目的基因与载体的连接有哪几种方法？简述其各特点？
6．重组体主要有哪些筛选与鉴定方法？
7．分子杂交的基本原理是什么？有哪些基本的方法？
8．简述标记核酸的核素和非核素有哪几种？各自有何特点？
9．何为PCR？简述其基本原理。
10．DNA芯片技术的基本原理及其应用。
参考答案
（一）名词解释
1．不同来源的DNA分子可以通过末端共价连接(磷酸二酯键)而形成重新组合的DNA分子，这一过程称为DNA重组。
2．利用重组DNA技术将目的DNA片段与载体DNA连接并导人宿主细胞，在受体细胞中复制、扩增、以获得单一DNA分子的大量拷贝。这种含有单一DNA重组体的无性系称为克隆。其中，将基因进行克隆，并利用克隆的基因表达、制备特定的蛋白或多肽产物，或定向改造细胞乃至生物个体的特性所用的方法及相关的工作统称为基因工程。
3．能够切割DNA多聚核苷酸链中磷酸二酯键的酶称为核酸酶，其中有选择地切割DNA分子特异序列的核酸酶，称为限制性核酸内切酶，简称限制性酶。
4．采用限制性酶将基因组DNA切成片段，每一DNA片段都与一个载体分子拼接成重组DNA。将所有的重组DNA分子都引入宿主细胞并进行扩增，得到分子克隆的混合体，这样一个混合体称为基因文库。
5．mRNA为模板，经反转录酶催化合成cDNA ，将cDNA的混合体与载体进行连接，使每一个cDNA分子都与一个载体分子拼接成重组DNA。将所有的重组DNA分子都引入宿主细胞并进行扩增，得到分子克隆的混合体，这样一个混合体就称为cDNA文库。
6．PCR又称基因体外扩增特定序列方法。是在反应体系中加入模板DNA、dNTP、特定设计的引物及耐热的DNA聚合酶，经多次变性、退火、延伸循环反应，使目的DNA呈指数形式合成的过程。
7．是携带外源基因，实现外源基因的扩增或表达所采用的DNA分子。常用克隆载体有质粒DNA、噬菌体DNA、粘粒DNA、病毒DNA等。
8．指将质粒或其它外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。转化常用的宿主细胞是大肠杆菌。
9．以噬菌体进入宿主菌、病毒进入宿主细胞中繁殖称为感染。用人工改造的噬菌体或病毒作为载体以其DNA与目的序列重组后，在体外用噬菌体或病毒的外壳，将重组DNA包装成有活力的噬菌体或病毒，就能以感染的方式进入宿主细菌或细胞。
10．核酸分子杂交是依据两条核酸单链之间碱基互补、变性和复性的原理，用已知碱基序列的单链核苷酸片段作为探针，检测待测样品中是否存在与其互补的同源核苷酸序列的方法。
11．指DNA与DNA的杂交，将经限制性内切酶消化和变性后电泳分离的待测DNA片段转印并结合到一定的固相支持物上，然后与标记的DNA探针杂交。
12．指将待测RNA样品经电泳分离后转移到固相支持物上，然后与标记的核酸探针进行杂交，检测RNA(主要是mRNA)的方法。其基本原理和基本过程与Southern印迹杂交基本相同。
13．将RNA或DNA变性后直接点样于硝酸纤维素膜或尼龙膜上，再与探针杂交，称为斑点印迹杂交。
14．核酸保持在细胞或组织切片中，经适当方法处理细胞或组织后，将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为原位杂交。原位杂交不需要从组织或细胞中提取核酸，对组织中含量极低的靶序列有很高的灵敏度，并可完整地保持组织与细胞的形态，更能准确地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。
15．DNA芯片技术是指将大量已知寡核苷酸或DNA探针按特定的排列方式固化在固相支持物表面，按碱基互补配对的原则，与标记的特异的单链DNA或RNA分子杂交形成双链，通过对杂交信号的检测分析，即可得出样品分子的数量和序列信息。
16．是以DNA和RNA为诊断材料，DNA反映基因的存在状态，RNA反映基因的表达状态，通过检查基因的存在、缺陷或表达异常，对人体状态和疾病作出诊断的方法和过程。
17．基因治疗是指以正常基因矫正、替代缺陷基因，或从基因水平调控细胞中缺陷基因的表达的一种治疗疾病的方法。
狭义的基因治疗是指目的基因导入靶细胞后与宿主细胞内的基因发生整合，成为宿主基因组的一部分，目的基因的表达产物起治疗疾病的目的。而广义的基因治疗则包括通过基因转移技术或反义核酸技术、核酶技术等，使目的基因得到表达、或封闭、剪切致病基因的mRNA，而达到治疗疾病的目的。
（二）选择题
A型题：
1. D
2. B
3. A
4. B
5. C
6. A
7. C
8. C
9. B 10. C
11. C 12. A 13. C 14. E 15. B
16. D 17. A 18. E 19. E 20. D
21. B 22. A 23. B 24. C 25. A
26. E 27. D 28. D 29. B 30. E
31. D 32. C 33. A 34. B 35. C
36. E 37. B 38. C 39. D 40. B
41. A 42. E 43. B 44. A 45. C
46. E 47. C 48. B 49. B 50. E
51. E 52. E 53. C 54. E 55. D
56. E 57. A 58. E 59. E 60. C
61. B 62. E 63. E 64. B 65. E
66. D 67. A 68. A 69. E 70. E
71. A 72. E 73. A 74. E 75. E
76. E 77. E 78. D 79. B 80. B
81. A 82. E 83. A 84. E 85. E
86. E 87. E 88. C 89. A 90. C
91. A 92. E
B型题：
1. B
2. C
3. A
4. E
5. D
6. A
7. B
8. D
9. A 10. D
11. B 12. E 13. C 14. D 15. E
16. A 17. B 18. A 19. C 20. C
21. B 22. D 23. C 24. A 25. B
26. E 27. B 28. C 29. E 30. A
31. B 32. A 33. E 34. C 35. A
36. B 37. E 38. A
（三）问答题
1．（1）目的基因的获取：通过化学合成或PCR的方法获取，也可从基因组DNA文库或cDNA文库筛选。
（2）克隆载体的选择与构建：常用载体有质粒、噬菌体、病毒DNA。
（3）目的基因与载体的连接：利用DNA连接酶将目的基因与载体DNA进行共价连接形成重组DNA分子。
（4）重组DNA分子导入受体细胞：目的基因与载体连接成重组DNA分子后，需将其导
第二章习题 一、单选题 1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（ B ） A．I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶 E. RNAase 2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B ) A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。 B. 它们的识别序列完全相同。 C. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。 D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。 E. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。 3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是（ A ） A. 37℃ B.30℃ C.25℃ D.16℃ E.33℃ 4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B ) A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。 B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。 C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP，S-腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。 D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性，II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。 E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。 5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D ) A. 1/44 B. 1/66 C. 1/64 D.1/46 E. 1/106 6. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C ) A. PH:2-4 B. PH:4-6 C. PH:6-8 D. PH:8-10 E. PH:4-10 7. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D ) A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。 B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。 C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。 D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。 E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA。 8. II类限制酶反应中必须的阳离子是（ C ）
基因工程测试题 姓名____________ 一、选择题 1．已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后， 这些线性DNA分子最多能 产生长度不同的DNA片段 种类数是( c ) A．3 B．4 C．9 D．12 2．下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是( c ) A．将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法钙离子处理法B．将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌普通质粒A和重组质粒都含有抗氨苄青霉素基因。都能生长因为目的基因在四环素 C．将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A 的细菌导入重组质粒的细菌不能生长，因为目的基因插在抗四环素基因中，抗四环素基因的结构被破坏。 D．目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质，即人的生长激素。 3．下列关于基因工程的叙述，错误的是（D ） A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达基因工程中目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物；常用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶；人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性,只有经过一定的物质激活以后,才有生物活性.载体上的抗性基因主要是有利于筛选含重组DNA的细胞,不能促进目的基因的表达.所以D错误. 4.将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是（C ） A、每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B、每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C、每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada不同的限制性核酸内切酶识别位点不同，不是每个限制性核酸内切酶的识别位点都能插入ada。 D、每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 5.北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是（B ）农杆菌转化法 A、过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序图中①是获取目的基因的过程，获取的目的基因，可用于基因工程，但不能用于比目鱼基因组测序，故A错误； B、多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白将多个抗冻基因编码区相连形成的能表达的新基因可能不再是抗冻基因，所以可能得不到抗冻性增强的抗冻蛋白，故B 正确；， C、过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选②是基因表达载体的构建过程，基因表达载体通常由启动子、目的基因、终止子和标记基因构成，其中标记基因的作用是筛选重组质粒，利用农杆菌转化法只能将质粒导入受体细胞，不能对重组质粒进行筛选，故C错误； D、应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达利用DNA探针技术检测目的基因是否导入到受体细胞，利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达出来，故D错误．6.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（A ） A 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸限制性核酸内切 酶只能识别DNA的核苷酸序列,并在特定的位点切割,而烟草花叶病毒的核酸是RNA,限制性核酸内切酶对其不能发挥作用. B 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C 将重组DNA分子导入原生质体 D 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞目的基因为抗除草剂 基因，所以成功导入目的基因的细胞具有抗除草剂的能力，筛选时应该用还有除草剂的培养基筛选转基因细胞 7.下列关于基因工程的叙述，正确的是: ( D ) A.基因工程往往以细菌抗药性基因为目的基因基因工程经常以抗菌素抗性基因为标记基因，便于重组质粒的筛选，A错误； B.重组DNA的形成和扩增是在细胞内完成的比如PCR技术在体外 C.基因工程育种能够定向地改造生物性状，快速形成新物种定向地改造生物的遗传性状，培育新的农作物优良品种的生物技术 D.限制性内切酶和DNA连接酶是构建重组DNA必需的工具酶8．下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是( B ) A．基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作基因工程和蛋白质工程都是分子水平操作，且直接操作对象都是基因。 B．基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质基因工程合成的是天然存在的蛋白质，而蛋白质工程合成的可以是自然界不存在的蛋白质，但不是只能合成天然不存在的蛋白质。 C．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）操作基因工程和蛋白质工程都是分子水平操作 D．基因工程完全不同于蛋白质工程蛋白质工程是以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。所以蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。 9．PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是( C ) A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键跟解旋酶的作用相同 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配 对原则完成 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸四种脱氧核糖核苷酸热稳定DNA聚合酶 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高 10.“工程菌”是指（C） A．用物理或化学方法诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系一般称为“工程菌” B．用遗传工程的方法，使同种不同株系的菌类杂交，得到的新细胞株系 C．用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系 D．从自然界中选取能迅速增殖的菌类 二、非选择题 11.为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 植 线性DNA分子的酶切示 意图
专题1 基因工程 1.4 基因工程的应用 一、植物基因工程硕果累累 1．植物基因工程主要用于提高农作物的____________能力（如抗除草剂、____________、____________、抗干旱和抗盐碱等），以及改良农作物的____________和利用植物____________等。 2．实例 （1）抗虫转基因植物：如棉、玉米、马铃薯、番茄等，用于杀虫的基因主要是_________________、____________________、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等。 （2）抗病转基因植物：如烟草花叶病毒的转基因烟草和抗病毒的转基因小麦、甜椒、番茄等。用于抗病的基因最多的是___________________、___________________。抗真菌转基因植物可使用 的基因有几丁质酶基因和___________________基因。 （3）抗逆转基因植物 ①抗逆基因：调节细胞_____________基因使作物抗碱、抗旱；鱼的抗冻蛋白基因使作物耐寒； 抗除草剂基因，使作物抗除草剂。 ②成果：烟草、大豆、番茄、玉米等。 （4）转基因改良植物品质 ①优良基因：必需氨基酸的蛋白质编码基因、控制番茄果实成熟的基因和植物花青素代谢有关 的基因。 ②成果：转基因玉米、转基因延熟番茄和转基因矮牵牛。 二、动物基因工程前景广阔 1．提高动物的生长速度 （1）生长基因：外源_______________基因。 （2）成果：转基因绵羊、转基因鲤鱼。 2．改善畜产品的品质 （1）优良基因：肠乳糖酶基因。 （2）成果：转基因牛______________含量少。 3．转基因动物生产药物 （1）基因来源：药用_______________基因+______________蛋白基因+启动子。 （2）成果：乳腺生物反应器。
基因工程练习题 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、基因工程中常用细菌等原核生物作受体细胞的原因不包括( ) A、繁殖速度快 B、遗传物质相对较少 C、多为单细胞，操作简便 D、DNA为单链，变异少 3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因可以用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、运用现代生物技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因整合到棉花细胞中，为检测实验是否成功，最方便的方法是检测棉花植株是否有( ) A、抗虫基因 B、抗虫基因产物 C、新的细胞核 D、相应性状 5、转基因动物转基因时的受体细胞是( ) A、受精卵 B、精细胞 C、卵细胞 D、体细胞 6、基因工程中常见的载体是( ) A、质体 B、染色体 C、质粒 D、线粒体 7、水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中Asp、Gly、Ser构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记，在转基因技术中，这种蛋白质的作用是( ) A、促使目的基因导入宿主细胞中B、促使目的基因在宿主细胞中复制 C、使目的基因容易被检测出来 D、使目的基因容易成功表达 8、运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，据以上信息，下列叙述正确的是( ) A、Bt基因的化学成分是蛋白质 B、Bt基因中有菜青虫的遗传物质 C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因 D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物 9、人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体进一步加工合成，通过转基因技术，可以使人的糖蛋白基因得以表达的受体细胞是( ) A、大肠杆菌 B、酵母菌 C、T 噬菌体 D、质粒DNA 4 10、不属于质粒被选为基因运载体的理由是（） A．能复制 B.有多个限制酶切点C．具有标记基因D．它是环状DNA
基因工程原理练习题及其答案 一、填空题 1．基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。 2．基因工程的两个基本特点是：(1)____________，(2)___________。 3．基因克隆中三个基本要点是：___________；_________和__________。 4．碱裂解提取溶液I中的葡萄糖的作用________________、_______________、______________________________。 5．同一质粒不同构型在电泳过程中迁移速率为。 6．部分酶切可采取的措施有：(1)____________(2)___________ (3)___________等。7．第一个分离的限制性切核酸酶是___________；而第一个用于构建重组体的限制性切核酸酶是_____________。 8．限制性切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是_________，它们属于_____________。 9．DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性：(1)____________；(2)________________的活性。10．为了防止DNA的自身环化，可用_____________去双链DNA__________________。11．EGTA是____________离子螯合剂。 12．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有_____________酶的活性，而没有_______酶的活性。 13．切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。 14．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常可采用_________或_______________。 15．反转录酶除了催化DNA的合成外，还具有____________的作用，可以将DNA- RNA杂种双链中的___________水解掉。 16．基因工程中有3种主要类型的载体：_______________、_____________、______________。 17．就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：_______________、_____________、______________。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 18．琼脂糖凝胶的分辨力与胶浓度的关系是。 19．如果改变反应条件就会影响酶的专一性和切割效率，称为________________。20．影响限制性切酶活性的因素________________、________________、________________、________________。 21．连接反应的实用温度为________________。 22．pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过 和两种质粒改造而来。它的复制子来自，Amp 抗性基因则是来自。
基因工程及其应用文件管理序列号：[K8UY-K9IO69-O6M243-OL889-F88688]
第2节基因工程及其应用（第1课时）知识链接及考试地位 本知识与“DNA分子的结构与复制”、“基因突变和基因重组”、“DNA 重组技术的基本工具”、“基因工程的基本操作程序”等内容相联系，考试过程中常设计基因工程的原理、基本工具等基础知识，多以个别填空或选择题的形式呈现。 知识回顾 1、DNA分子的结构特点是什么？ 2、什么是基因重组？ 学习目标 1、简述基因工程的诞生。 2、简述基因工程的原理及技术。要明确基因工程操作的基本步骤和最基本的工具。 重难点 1．教学重点 基因工程的基本原理。 2．教学难点 基因工程的基本原理 新知探究
传统育种的方法一般只能在生物中进行，很难将一种生物的优良性状移植到生物身上。基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿地改变生物，培育出。 一、基因工程的原理 基因工程又叫做或。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以，然后放到另一种生物细胞里，地改造生物的遗传性状。基因工程是在DNA上进行的 水平的设计施工，基因的剪刀是指，简称限制酶。其作用特点是一种限制酶只能识别一种序列。基因的针线是 指。目前常用的运载体有、和等。质粒存在于许多以及等生物中，是细胞染色体外能够自主复制的小型分子。 基因工程的操作步骤是：、目的基因与运载体结合，目的基因导入受体细胞、目的基因的和。 二、基因工程的原理、操作对象各是什么？ 三、限制性内切酶的分布、特点、作用部位和作用结果如何？ 四、作为基因的运载体，需具备哪些条件？ 五、DNA连接酶的作用对象、位置和结果如何？ 六、基因工程的优点是什么？ 七、基因重组与基因工程比较
《基因工程及其应用》习题 一、选择题 1、不属于基因工程方法生产的药物是（） A、干扰素 B、白细胞介素 C、青霉素 D、乙肝疫苗 2、质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是（） ①能自主复制②不能自主复制③结构很小④是蛋白质⑤环状RNA分子 ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居” A、①③⑤⑦ B、②④⑥ C、①③⑥⑦ D、②③⑥⑦ 3、1993年，我国科学工作者培育成的抗棉铃虫的转基因抗虫棉，其抗虫基因来源（） A、普通棉花的基因突变 B、棉铃虫变异形成的致死基因 C、寄生在棉铃虫体内的线虫 D、苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因 4、下图表示限制酶切割某DNA的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是（） A、CTTAAG，切点在C和T之间 B、CTTAAG，切点在G和A之间 C、GAATTC，切点在G和A之间 D、GAATTC，切点在C和T之间 5、切取牛的生长激素和人的生长激素基因，用显微注射技术将它们分别注入小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”，此项技术遵循的原理是（） A、基因突变：DNA→RNA→蛋白质 B、基因工程：RNA→RNA→蛋白质 C、细胞工程：DNA→RNA→蛋白质 D、基因重组：DNA→RNA→蛋白质 6、控制细菌的抗药性、固氮、抗生素基因存在于（） A、核区 B、线粒体 C、质粒 D、核糖体 7、科学家将含人的α-抗胰蛋白酶基因的DNA片段，注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的羊能分泌含α-抗胰蛋白酶的奶。这一过程没有涉及（） A、DNA按照碱基互补配对原则自我复制 B、DNA以其一条链为模板合成RNA
C、RNA以自身为模板自我复制 D、按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质 8、下列高科技成果中，根据基因重组原理进行的是（） ①我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻 ②我国科学家将苏云金杆菌的某些基因移植到棉花体内，培育出抗虫棉 ③我国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒 ④我国科学家通过体细胞克隆技术培养出克隆牛 A、① B、①② C、①②③ D、②③④ 9、下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（） A、基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因 B、基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 C、一种基因探针能检测水体中的各种病毒 D、原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良 10、上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带白蛋白的转基因牛，他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍。转基因动物是指（） A、提供基因的动物 B、基因组中增加了外源基因的动物 C、能产生白蛋白的动物 D、能表达基因信息的动物 二、非选择题 11、据调查，随着化学农药的产量和品种逐年增加，害虫的抗药性也不断增强，危害很严重，如近年来，棉铃虫在我国大面积爆发成灾，造成经济损失每年达100亿元以上。针对这种情况，我国科学工作者经研究发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金芽孢杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而此毒蛋白对人畜无害。通过科技攻关，我国科技工作者已成功地将该毒蛋白基因导入到棉花植株内并成功实现表达。由于棉铃虫吃了新品种“转基因抗虫棉”植株后会死亡，所以该棉花新品种在1998年推广后，取得了很好的经济效益。 请据上述材料回答下列问题： （1）“转基因”抗虫棉新品种的培育应用了新技术，毒蛋白对人畜无害，但能使棉铃虫致死，从蛋白质的特性看，蛋白质具有性。 （2）在培养转基因抗虫棉新品种过程中，所用的基因的“剪刀”是，基因的针线是，基因的运载工具是。
基因工程课程习题选择题 001 基因工程操作的三大基本元件是【Ａ】 I 供体II 受体III 载体IV 抗体V 配体 ＡI + II + III ＢI + III + IV ＣII + III + IV ＤII + IV + V ＥIII + IV + V 002 根据当今生命科学理论，基因工程的用途是【E】 I 分离纯化基因 II 大量生产生物分子 III 构建新型物种 IV 提高基因重组效率Ａ I + II + III Ｂ I + II + IV Ｃ I + III + IV Ｄ II + III + IV Ｅ I + II + III + IV 003 根据基因工程的定义，下列各名词中不能替代基因工程的是【A】 Ａ基因诱变 Ｂ分子克隆 Ｃ DNA重组 Ｄ遗传工程 Ｅ基因无性繁殖 004 基因工程的单元操作顺序是【B】 Ａ增，转，检，切，接 Ｂ切，接，转，增，检 Ｃ接，转，增，检，切 Ｄ检，切，接，增，转 Ｅ切，接，增，转，检 005 下列有关基因的叙述，错误的是【A】 Ａ蛋白质是基因表达的唯一产物 Ｂ基因是 DNA 链上具有编码功能的片段 Ｃ基因也可以是 RNA Ｄ基因突变不一定导致其表达产物改变结构 Ｅ基因具有方向性 006 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是【D】 Ａ修复自身的遗传缺陷
Ｂ促进自身的基因重组 Ｃ强化自身的核酸代谢 Ｄ提高自身的防御能力 Ｅ补充自身的核苷酸消耗 007 天然 PstI 限制性内切酶的来源是【D】 ＡBacillus amyloliquefaciens ＢEscherichia coli ＣHaemophilus influenzae ＤProvidencia stuartii ＥStreptomyces lividans 008 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是【D】 Ａ 2' -OH 和 5' -P Ｂ 2' -OH 和 3' -P Ｃ 3' -OH 和 2' -P Ｄ 3' -OH 和 5' -P Ｅ 5' -OH 和 3' -P 009若载体 DNA 用 M 酶切开，则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA 片段中，能直接与载体拼接的是【D】 M N Ａ A/AGCTT T/TCGAA Ｂ C/CATGG ACATG/T Ｃ CCC/GGG G/GGCCC Ｄ G/GATCC A/GATCT Ｅ GAGCT/C G/AGCTC 010下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是【B】 Ａ质粒是共价环状的双链 DNA 分子 Ｂ天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列 Ｃ质粒在宿主细胞内能独立于染色体 DNA 自主复制 Ｄ松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增 Ｅ质粒并非其宿主细胞生长所必需 011带有多个不同种复制起始区的质粒是【A】 Ａ穿梭质粒 Ｂ表达质粒 Ｃ探针质粒 Ｄ整合质粒 Ｅ多拷贝质粒
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第2节基因工程及其应用（第1课时） 知识链接及考试地位 本知识与“DNA分子的结构与复制”、“基因突变和基因重组”、“DNA重组技术的基本工具”、“基因工程的基本操作程序”等内容相联系，考试过程中常设计基因工程的原理、基本工具等基础知识，多以个别填空或选择题的形式呈现。 知识回顾 1、DNA分子的结构特点是什么？ 2、什么是基因重组？ 学习目标 1、简述基因工程的诞生。 2、简述基因工程的原理及技术。要明确基因工程操作的基本步骤和最基本的工具。 重难点 1．教学重点 基因工程的基本原理。 2．教学难点 基因工程的基本原理 新知探究 传统育种的方法一般只能在生物中进行，很难将一种生物的优良性状移植到生物身上。基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿地改变生物，培育出。 一、基因工程的原理 基因工程又叫做或。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以，然后放到另一种生物细胞里，地改造生物的遗传性状。基因工程是在DNA上进行的水平的设计施工，基因的剪刀是指，简称限制酶。其作用特点是一种限制酶只能识别一种序列。基因的针线是指。目前常用的运载体有、和等。质粒存在于许多以及等生物中，是细胞染色体外能够自主复制的小型分子。 基因工程的操作步骤是：、目的基因与运载体结合，目的基因导入受体细胞、目的基因的和。 二、基因工程的原理、操作对象各是什么？ 三、限制性内切酶的分布、特点、作用部位和作用结果如何？ 四、作为基因的运载体，需具备哪些条件？ 五、DNA连接酶的作用对象、位置和结果如何？ 六、基因工程的优点是什么？
基因工程的基本操作程序习题 一、选择题（每小题3分，共39分） 1.下列关于基因工程的叙述，错误的是( ) A．目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 2.下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是()。 A．一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B．限制性核酸内切酶的活性受温度影响 C．限制性核酸内切酶能识别和切割RNA D．限制性核酸内切酶可从原核生物中提取 3.如图是利用基因工程技术培育转基因植物，生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中PstⅠ、SmaⅠ、Eco RⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列说法错误的是()。 A．图示过程是基因工程的核心步骤 B．表达载体构建时需要用到限制酶SmaⅠ C．抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来 D．除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构 4.下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是() A．过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序 B．将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白 C．过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选 D．应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
5．下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是() A．①②③④B．①②④③C．①④②③D．①④③② 6．下列关于基因工程的叙述，不正确的是(多选)() A．基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B．细菌质粒是基因工程常用的运载体 C．通常用一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNA D．为培育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体7．天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是（） A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因B B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D.将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞 9.将ada（腺苷酸脫氨酶基因）通过质粒pET28b导人大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨 酶。下列叙述错误的是（） A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 10．下列叙述符合基因工程概念的是()。 A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 11．在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是()。A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C．将重组DNA分子导入烟草原生质体 D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 13．下列关于基因工程的叙述，错误的是()。 A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶
作业一： 一、名词解释： 1、基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。 2、基因组该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子 3、操纵子:原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代谢过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。 4、启动子:是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，包括至少一个转录起始点。在真核基因中增强子和启动子常交错覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。 5、增强子:是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp 的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100～200bp长度，也和启动子一样由若干组件构成，基本核心组件常为8～12bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。 6、基因表达：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。 二、简答题 1、说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 答：限制性内切核酸酶采用三字母的命名原则,即属名+种名+株名的各一个首字母,再加上序号. 基本原则: 3-4个字母组成,方式是:属名+种名+株名+序号; 首字母: 取属名的第一个字母,且斜体大写;第二字母: 取种名的第一个字母,斜体小写;第三字母: (1)取种名的第二个字母,斜体小写;(2)若种名有词头,且已命名过限制酶,则取词头后的第一字母代替.第四字母: 若有株名,株名则作为第四字母,是否大小写,根据原来的情况而定,但用正体. 顺序号: 若在同一菌株中分离了几种限制酶,则按先后顺序冠以I,Ⅱ,Ⅲ,…等,用正体. 2、什么是限制性内切核酸酶的星号活性受哪些因素影向 答：Ⅱ类限制酶虽然识别和切割的序列都具有特异性，但是这种特异性受特定条件的限制，即在一定环境条件下表现出来的特异性。条件的改变，限制酶的特异性就会松动，识别的序列和切割都有一些改变，改变后的活性通常称第二活性，而将这种因条件的改变会出现第二活性的酶的右上角加一个星号表示，因此第二活性又称为星号活性。 概括起来，诱发星活性的因素有如下几种： (1)高甘油含量(>5％, v／v)； (2)限制性内切核酸酶用量过高(>100U／ugDNA)； ；L)／mmol(<25 低离子强度(3)． (4)高pH以上)；(5)含有有机溶剂，如DMSO，乙醇等； (6)有非Mg2+的二价阳离子存在(如Mn2+，Cu2+，C02+，Zn2+等)。 3、影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些 答：（1）DNA的纯度（2）DNA甲基化的程度（3）酶切消化反应的温度（4）DNA的分子结构（5）核酸内切限制酶的缓冲液 4、什么是Klenow酶有哪些活性在基因工程中有什么作用 答：Klenow酶是1974年Klenow用枯草杆菌蛋白酶水解DNA聚合酶I，得到两个片段，其中大片段的分子量为75kDa，它具有5'-3'聚合酶和3'-5'外切核酸酶的活性，小片段具有5'-3'外切核酸酶活性。由于大片段失去了DNA聚合酶I中会降解5'引物的5'-3'外切核酸酶的活性，所以在
2019湖南高考生物知识点：基因工程及其应用 1.概念 按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 2.原理 基因重组 3.工具 A.基因的”剪刀”：限制性内切酶 ①分布：主要在微生物中。 ②作用特点：特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 ③结果：产生黏性未端(碱基互补配对)。 B.基因的”针线”：DNA连接酶 ①连接的部位：磷酸二酯键，不是氢键。 ②结果：两个相同的黏性未端的连接。 C.基因的”运载工具”：运载体 ①作用：将外源基因送入受体细胞。 ②具备的条件：a、能在宿主细胞内复制并稳定地保存。b、具有多个限制酶切点。 c、有某些标记基因。 ③种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。 ④质粒的特点：质粒是基因工程中最常用的运载体。
4.基因操作的基本步骤 ①提取目的基因：人们所需要的特定基因，如人的胰岛素基因、抗虫基因、抗病基因、干扰素基因等 ②目的基因与运载体结合(以质粒为运载体)：用同一种限制酶分别切割目的基因和质粒DNA(运载体)，使其产生相同的黏性末端，将切割下的目的基因与切割后的质粒混合，并加入适量的DNA连接酶，使之形成重组DNA分子(重组质粒) ③将目的基因导入受体细胞常用的受体细胞：大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞 ④目的基因检测与表达 检测方法如：质粒中有抗菌素抗性基因的大肠杆菌细胞放入到相应的抗菌素中，如果正常生长，说明细胞中含有重组质粒。 表达：受体细胞表现出特定性状，说明目的基因完成了表达过程。如：抗虫棉基因导入棉细胞后，棉铃虫食用棉的叶片时被杀死;胰岛素基因导入大肠杆菌后能合成出胰岛素等。
基因工程复习题 题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。 第一章绪论 1.名词解释： 基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。 遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。狭义：基因工程。 克隆：无性(繁殖)系或纯系。指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。 2．什么是基因克隆及基本要点? 3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。 A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。 4.基因工程研究的主要内容是什么？ 基础研究： 基因工程克隆载体的研究 基因工程受体系统的研究 目的基因的研究 基因工程工具酶的研究 基因工程新技术的研究 应用研究： 基因工程药物研究 转基因动植物的研究 在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究 第二章基因克隆的工具酶 1.名词解释： 限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。 回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。 同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。 同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列 黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。 平末端：DNA片段的末端是平齐的。 限制性核酸内切酶的酶活性单位（U）：在酶的最适反应条件下，在50μl容积中，60分钟内完全切割1μg λDNA所需的酶量为1个酶活性单位（unit 或U） 限制性核酸内切酶的星活性：指限制性内切酶在非标准条件下，对与识别序列相似的其它序列也进行切割反应，导致出现非特异性的DNA片段的现象。
基因工程习题及参考答案01 绪论部分 一、填空题 1．基因工程是年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的诞生，使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代，走向的时代。 2．随着基因工程技术的诞生和发展，人类可以通过、和等三种主要生产方式，大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋白，用于研究或治病。3．Cohen 等在年构建了第一个有功能的重组DNA 分子。 4．基因工程的两个基本特点是：(1) ，(2) 。 5．基因克隆中三个基本要点是：；和。6．年，美国斯坦福大学等在上发表了题为：“将新的遗传信息插入SV40 病毒DNA 的生物化学方法：含有λ噬菌体基因和E．coli 半乳糖操纵子的环状SV40 DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。这一工作具有划时代的意义，但是他们并没有。 7．克隆基因的主要目的有四：(1) ；(2)； (3) ；(4) 。 二、选择题(单选或多选) ( )1．因研究重组DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是 (a)A．Komberg (b)W．Gilbert (c) P．Berg (d)B．McClintock ( )2．第一个作为重组DNA 载体的质粒是( ) （a）pBR322 (b)ColEl (c)pSCl01 (d)pUCl8 ( )3．第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是( ) (a)EcoRI (b)EcoB (c)EcoC (d)EcoRⅡ ( )4．P Berg 构建SV40 二聚体时用了几种不同的酶，其中( )的作用是制造隐蔽的5’端。 (a)末端转移酶(b)λ外切核酸酶(c)外切酶Ⅲ(d)DNA 连接酶 三、简答题 1．为什么说基因工程技术是60 年代末70 年代初发展起来的? 2．重组DNA 的含义是什么? 3．如何理解基因工程的两个特点? 4．在Cohen 构建有生物功能重组体的第一步实验中，用EcoRI 切割了R6-5 质粒，然后转化E．coli C600，在卡那霉素抗性子板上筛选到了pSCl02，它是由R6-5 的三个EcoRI 片段组成，请推测这个质粒具有什么遗传特性? 5．什么是动物乳腺生物反应器? 四、问答题 1．S．N Cohen 于1973 年构建了三个重组体，pSCl02，pSCl05，pSCl09 请说明这三个重组体是如何获得的?各说明了什么? 2．基因克隆是如何使含有单个基因的DNA 片段得到纯化的? 五、概念题 1．遗传工程2．生物技术3．基因工程4．细胞工程5．细胞分泌工程 6．酶工程7．蛋白质工程8．发酵工程9．移动基因10．断裂基因 11．重叠基因12．假基因
按住Ctrl键单击鼠标打开教学视频动画全册播放 第三次生物练考题 命题人： 选择题答案： 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 答案 一、选择题（每小题5分，共计70分） 1、在基因工程中使用的限制性核酸内切酶，其作用是( ) A、将目的基因从染色体上切割出来 B、识别并切割特定的DNA核苷酸序列 C、将目的基因与运载体结合 D、将目的基因导入受体细胞 2、下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是（） ①② ③④A．①②B．②③C．③④D．②④ 3、基因工程是DNA分子水平的操作，下列有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA连接酶 D、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测 4、下列有关基因工程的叙述，正确的是：（） A．DNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外 D．常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等 5、下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是（） A. DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键 B. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖 C. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖 D. 同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端 6、实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。从大肠杆菌中提取的一种限制性内切酶EcorI，能识别DNA分子中的GAATTC序列，切点在G与A 之间。这是应用了酶的（） A.高效性 B.专一性 C.多样性 D.催化活性受外界条件影响 7、下列有关质粒的叙述，正确的是（） A．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 B．质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 C．质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制 T A G G C C A T T A C C G G T A 1
基因工程复习题 一、选择题 1、下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是（） A 一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B 限制性内切酶的活性受温度影响 C 限制性内切酶能识别和切割RNA D 限制性内切酶可从原核生物中提取 2、利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是（） A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白 3、采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的浮汁中。以下有关叙述，正确的是（） A.人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍 B.可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵 C.在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D.人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA 4、我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是（） A．基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少 B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染 D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 5、基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是（） A.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒 B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶 C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达 6、下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（） A.基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 C.一种基因探针能检测水体中的各种病毒 D.原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良 7、在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（） A.用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选D．由蛋白质的氨基酸序列推测密码子 9、通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关基因工程的叙述，错误的是（） A、采用反转录的方法得到的目的基因有内含子 B、马铃薯的叶肉细胞可用为受体细胞 C、基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的 D、用同一种限制酶，分别处理质粒和含目的基因的DNA，可产生粘性末端而形成重组DNA分子 10、以下有关基因工程的叙述，正确的是（） A.基因工程是细胞水平上的生物工程B．基因工程的产物对人类不是有益的 C．基因工程产生的变异属于人工诱变D．基因工程育种的优点之一是目的性强 11、下列技术依据DNA分子杂交原理的是 ①用DNA分子探针诊断疾病②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的杂交 ③快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子 A．②③B．①③C．③④D．①④ 12、质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小