1、名词解释
基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。
基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。
C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg(10-12克) 或Mb表示。
C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。
主要表现为：
☆ C值不随生物的进化程度和复杂性而增加
☆亲缘关系密切的生物C值相差很大
☆高等真核生物具有比用于遗传高得多的C值。
基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。
基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。
超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。
半保留复制：DNA复制过程中，新合成的子代DNA分子中，一条链是新合成的，另外一条链来自亲代，这种复制方式称为半保留复制。
回环模型：DNA polII以异二聚体形式催化DNA双螺旋两条链同时进行复制，在复制叉处滞后链模板以一个催化中心形成一个环，使滞后链方向颠倒，但催化方向不变，以适应双链同步进行复制。
SOS反应：许多能造成DNA损伤或抑制DNA复制的过程能引起一系列复杂的诱导效应，这种效应称为应急反应。
同义突变（synonymous mutation ）：指突变改变了密码子的组成，但由于密码子的简并性没有改变所编码的氨基酸序列的突变。
错义突变（ missense mutation ）：指基因突变改变了所编码氨基酸的序列，不同程度地影响蛋白质和酶的活性。
无义突变（ nonsense mutation ）：指基因改变使代表某种氨基酸的密码子变为终止密码子，导致肽链合成过早终止。
同源重组（homologous recombination）:又称一般性重组，指发生在两条同源DNA分子之间，通过配对、链断裂和再连接，而产生片段交换过程。重组产物称为重组体。
Holliday中间体:同源重组中，两条同源的DNA分子经过配对、断裂和再连接，形成的连接分子，称为Holliday中间体。
转座子：转座元件(transposon or transposable element):基因组上中可以
移动的DNA片段。转座子由基因组的一个位置转移到另一个位置的过程叫转座。
启动子：位于转录起始点附近，且为转录起始所必需，可被RNA聚合酶特异性识别、结合，并起始转录的一段保守DNA序列，其本身不被转录。
强终止子：无需其他蛋白质因子的帮助，而是依靠转录产物形成特殊的二级结构就可以终止转录，这种终止子被称为内部终止子。
TATA框又称Goldberg-Hogness框:常在常位于真核生物启动子II的基本启动子的起始位点上游-30bp左右，长度7bp，其一致序列是：
T95A87T93A85A63A83A50，与Inr一起构成核心元件。
剪接（splicing）：真核生物RNA前体去除内含子，连接外显子的过程。
剪接体（spliceosome）：在mRNA前体内含子的剪接过程中，由多个核内小分子核糖核酸（snRNA）和蛋白质组装形成催化剪接反应的复合体。
自我剪接 (self-splicing) ：内含子的切除不需要酶和蛋白质参与，自身形成特殊结构完成剪接的方式。
RNA编辑（editing）是指转录后的RNA在编码区发生碱基的插入、丢失或替换等现象。
GU-AG规则，mRNA前体中内含子的的边界序列高度保守，5’端开始的2个核苷酸均为GU，3’端结束的2个核苷酸均为AG，决定内含子边界。转录因子：真核生物RNA聚合酶起始转录需要的蛋白质辅助因子。
开放阅读框架(open reading frame, ORF)：从mRNA 5’端起始密码子AUG到3’端终止密码子之间的核苷酸序列，按照三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链。
密码子的简并性：同一种氨基酸具有两个或更多密码子的现象。对应于同一种氨基酸的不同密码子称为同义密码子。
密码子的变偶性：tRNA的反密码子与mRNA密码子之间不严格遵守常见的碱基配对规律，可以在一定范围内变动的现象。
氨基酸的活化是指氨基酸与tRNA相连，形成氨酰-tRNA的过程。
SD序列：在起始密码子AUG上游9-13个核苷酸处，有一段可与核糖体16S rRNA配对结合的、富含嘌呤的7个核苷酸的共同序列，一般为AGGAGGU。
核糖体循环：肽链延长是以上3步在核糖体上连续性循环式进行，每次循环增加一个氨基酸。
操纵子（operon）：是原核生物在分子水平上基因表达调控的单位，由调节基因、启动子、操纵基因和结构基因等序列组成。
安慰诱导物（gratutious inducer）：又称义务诱导物：能高效诱导酶的合成，但不是酶作用底物，与酶底物结构类似的分子。
CAP：
反式作用因子：通过扩散到与其编码基因不在同一个DNA分子上的靶位置，识别、结合而调节基因表达的分子。如转录因子、RNA聚合酶。顺式作用元件：通常只在原位影响与其处于同一个DNA分子上的、物理上紧密相连、被表达的基因序列。通常不编码蛋白，多位于基因旁侧或内含子中。如启动子、终止子、增强子、操纵基因、MAR。
管家基因（housekeeping genes）：在生物体几乎所有的细胞中始终表达的基因，表达产物大致以恒定水平始终存在于细胞内，是维持细胞最低限度功能所不可缺少的基因，是细胞生存所必须的。
奢侈基因（luxury genes）：只在特定的细胞类型或细胞生长发育特定时间表达的基因。
高速泳动蛋白（HMG）：活性染色质中含有两种高度丰富的小分子非组蛋白，这些蛋白具有异常高的电荷，在凝胶电泳中移动快。
核基质结合区（matrix associated region ，MAR ）：30nm染色质纤维以特定的DNA序列结合在核基质上，这些特定DNA序列称为MAR，它使纤维状的染色质DNA形成数以万计的环状结构域。
座位控制区(locus control region ，LCR)：是一种远距离顺式元件，为相连接的基因提供了一个可以活化的染色体环境，可能是DNaseI的超敏感位点和许多转录因子结合位点，可促进基因转录。
CpG岛：真核生物基因组中，常见富含的CpG的区域，常位于转录调控区及其附近，其甲基化程度直接影响转录活性。
增强子：指能使基因转录频率明显增加的DNA远端调控序列。
基因工程: 利用重组技术，在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对各种生物的核酸（基因）进行改造和重新组合，然后导入微生物或真核细胞内进行无性繁殖，使重组基因在细胞内表达，产生出人类需要的基因产物，或者改造、创造新的生物类型。
2、填空题
1. 分子生物学的研究内容主要包括结构分子生物学、基因表达与调
控、DNA重组技术。
2. 核糖体阅读mRNA密码子是从5’向3’方向进行，肽链合成是从N-端
向C端方向进行的。
3. 真核生物DNA序列类型单拷贝序列、低度重复序列、中度重复序
列和高度重复序列。
4. 原核生物和真核生物DNA复制最主要的形式双向复制。
5. DNA修复包括直接修复、切除修复、错配修复、重组修复、易错修
复和SOS应急反应
6. RNA酶的剪切分为自体催化和异体催化两种类型。
7. 原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、IF-2和IF-3
8. 启动子中的元件通常可以分为两种核心启动元件和上游启动元
件。
9. PCR的基本反应过程包括变性、退火和延伸三个阶段。
10. 随着研究的深入第一代抗体称为多克隆抗体、第二代单克隆抗
体、第三代基因工程抗体。
11. 细菌的DNA复制方式是θ型复制，F因子的DNA复制方式是滚环复
制，线粒体的DNA复制方式是D环复制
环复制。
12. 在分裂期间呈现着色较深的异染色质状态的失活X染色体，也叫作
巴氏小体。
13. 端粒酶由RNA和蛋白质两种组分组成，具有逆转录酶的活性。
14. 构成真核生物染色体的最基本单位是核小体，是由DNA和组蛋白构
成。
3、选择题
1. 标出以下所有正确的表述（C）
A.转录是以半保留方式获得序列相同的两条DNA链的过程
B.依赖DNA的DNA聚合酶是多亚基酶，它负责DNA的转录
C.细菌的转录（mRNA）是多基因的
D. σ因子指导真核生物hnRNA的转录后加工，最后形成mRNA
2. 细菌的错配修复机制可以识别复制时新旧DNA链之间错误配对的碱
基，这是因为（C）
A.新DNA链含有错误的碱基
B.旧DNA链更倾向于含有错误碱基
C.旧DNA链在特殊位点含有甲基化基团
D.新DNA链在特殊位点含有甲基化基团
3. 控制基因产物数量的最关键的步骤是（B）
A.复制的起始
B.转录的起始
C.翻译的调控
D.mRNA 向细胞质的转运
4. 下面那一项是对三元转录复合物的正确描述（C）
A.σ因子、核心酶和双链DNA形成
B.全酶、TFI和解链DNA双链形成
C.全酶、模板DNA和新生RNA形成
D.σ因子、核心酶和促旋酶形成的复合物
5. 下面叙述不正确的是（A）
A.共有20个不同的密码子代表遗传密码子
B.色氨酸和甲硫氨酸都只有一个密码子
C.每个核苷酸三联体编码一个氨基酸
D.不同的密码子可能编码同一个氨基酸
6. 核糖体的E位点是（B）
A.真核mRNA加工位点
B.tRNA离开原核生物核糖体的位点
C.核糖体中受EcoR I 限制的位点
D.电化学电势驱动转运的位点
7. 典型的操纵子结构中没有（A）
A.增强子
B.启动子
C.操纵基因
D.调节基因
8. 下面关于原核生物蛋白质翻译的叙述中不正确的是（）
A.核糖体的小亚基能直接同mRNA作用
B.IF-2与含GTP的复合物的起始tRNA结合
C.多肽链的第一个肽键的合成不需要 EF-G
D.细菌所有蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸
9. 以下哪项不属于翻译后修饰的机制（B）
A.蛋白糖基化
B.DNA甲基化
C.磷酸化
D.去磷酸化
10. 端粒酶与真核生物线状DNA末端的复制有关，它具有（B）
A.RNA聚合酶活性
B.逆转录酶活性
C.核酸酶活性
D.核糖核酸酶活性
4、选择题
（×）1.在先导链上DNA沿5′→3 ′方向合成，在后随链上则沿3 ′→5′方向合成。
（×）2.DNA复制总是在连续不断进行。
（√）3.摇摆碱基位于密码子的第三位和反密码子的第一位。
（×）4.所有的基因都是DNA。
（×）5.真核生物起始氨基酸tRNA是tRNA i fMet。
（√）6.氨基酸-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性，被称为第二遗传密码
（×）7.真核生物rRNA前体中有大量的内含子需要在加工过程去除。（√）8.原核生物基因表达调控主要是适应性调节。
（√）9.真核生物转录后水平调控对基因表达也很重要。
（×）10.组蛋白甲基华丽与基因活化。
（×）11.用于转录的DNA单链称为编码链。
（√）12.DNA复制的方向都是5′→3 ′ 。
（√）13.基因主要位于染色体上，还有染色体外遗传物质。
（×）14.真核生物RNA前体中内含子都具有典型的AU—AG边界。（×）15.一种氨基酸只能由一种密码子编码。
（√）16.原核生物起始氨基酸tRNA是tRNA i fMet。
（×）17.细胞内葡萄糖浓度越高，cAMP浓度也越高。
（√）18.真核生物基因表达调控是多级机制。
（√）19.3 ′→5′外切活性赋予DNA聚合酶校对功能。
（√）20.DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。
5、问答题
1. 真核生物基因组有何特点?
答：（1）真核生物的基因组比较庞大，具有多个复制起始点。
（2）一个基因组包括多条线状染色体，每条染色体DNA上有多个复制起始点。
（3）真核生物的基因组DNA与蛋白质结合形成染色质的复杂高级结构，储存于细胞核内。
（4）真核细胞被核膜分隔成细胞核和细胞质，在基因表达中，转录和翻译在时间和空间上被分隔，不偶联。
（5）真核生物基因组存在着许多重复序列，重复序列单位长度不一，重复程度各异。
（6）真核生物的蛋白质基因一般以少拷贝形式存在，转录产物为单顺反子。
（7）存在着可移动的DNA序列。
（8）大多数真核生物基因含内含子，为断裂基因
2. 病毒基因组的结构特点
答：（1）与细菌相比，病毒基因组很小，大小相差较大。
（2）病毒基因组由DNA组成，也可以由RNA组成，每种病毒颗粒中只含有一种核酸，核酸结构可以是单链或双链、环状或线状。
（3）有重叠基因。
（4）大部分是用来编码蛋白质的，基因间的间隔序列较短。
（5）功能上相关的基因集中成簇，在基因组的特定的部位,形成一个功能单位或转录单元，转录产物为多顺反子，之后经过简单加工。（6）噬菌体的基因是连续的；而真核细胞病毒的基因是不连续的，具有内含子。
3. 细菌染色体基因组结构的一般特点
答：（1）细菌的染色体基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成，染色体相对聚集在一起，形成一个较为致密的区域，称为类核。（2）只有一个复制起点，数个相关的结构基因串联在一起，受同一调控区调节，合成多顺反子mRNA。
（3）具有操纵子结构。
（4）编码蛋白质的基因都是单拷贝，但rRNA基因是多拷贝。
（5）和病毒的基因组相似，非编码的DNA部份所占比例比真核细胞基因组少得多。
（6）基因组DNA中具有多种调控区如复制起始区、复制终止区、转录启动区和终止区等，还有重复序列，比病毒基因组复杂。
（7）具可移动的 DNA序列
4. 列表说明原核生物DNA复制需要的酶和辅助因子有哪些？它们各有
何功能？
蛋白质或酶功能
DnaA 识别起点序列链，在起点特意位置解开双链
解旋酶（DnaB）在特异性位点解开双链
DnaC帮助DnaB结合于起点
Hu 与DNA结合，促进起始
DNA聚合酶（DNA Pol)Pol I切除引物并填补空缺；pol III催化链延伸
引物酶（DnaG）合成引物RNA聚合酶促进复制起始
促旋酶（gyrase，TopoII型）引入负超螺旋，释放DNA解链过程产生的扭曲张力
单链DNA结合蛋白结合单链DNA
DNA连接酶连接冈崎片段
DNA甲基化酶甲基化起点GATC序列，调控复制起始
Tus识别ter序列,终止复制
拓扑异构酶IV切开相连的环状染色体
5.以Holliday模型为例简述同源重组的过程。
答：（1）两个同源染色体DNA排列整齐；
（2）两个DNA分子的同一部位各有一条链发生断裂引发重组
（3）断裂的单链游离末端彼此侵入到另一DNA分子中，与另一DNA 断裂链的游离末端连接，形成Holliday中间体；
（4）通过分支迁移产生异源双链DNA；
（5）Holliday中间体切开并修复，形成两个重组DNA。
6.简述原核生物蛋白质翻译过程
步骤过程
起始1.核糖体亚基的
拆离
起始因子IF1、IF3协助
2. mRNA在小
亚基上就位
30S小亚基与识别mRNA SD 序列、结合；
3.tRNAifmet的
结合形成30S复
合物
IF2协助GTP、tRNAifmet结合形成起
tRNAifmet-GTP-mRNA-30S-IF1-IF2-IF3复
合物称为30S复合物
4.50S大亚基结
合形成70s起始
复合物
50s大亚基结合，GTP水解，IF1、IF2、IF3
脱离，形成tRNAifmet--mRNA-30S-50S复
合物称为70S复合物，tRNAifmet位于P位
延伸1.进位延伸因子EF-Tu水解GTP协助下一个AA-
tRNA进入A位
2.转肽P位的氨基酸转到A位新氨基酸末端，形成
肽键，P位由无负载tRNA占据
3.移位在移位酶EF-G协助下，核糖体沿mRNA从
5’到3’移动一个密码子，A位变P位由肽-
tRNA占据，新A位空留,下一个AA进入，
新E位由空物负载tRNA占据，随即脱落
终止1.认别终止因子RF-1，RF-2，RF-3协助识别终止
密码子：UAA、UAG、UGA
2.水解肽链从肽酰-tRNA水解
3.解离GTP水解，核糖体与mRNA分离，tRNA、
RF脱落，核糖体解离为大、小亚基
7.试解释大肠杆菌在有葡萄糖和乳糖存在时，只利用葡萄糖作为碳源，
而不利用乳糖，只有在没有葡萄糖存在时，才利用乳糖作为碳源这一现象的分子机制。
答：当低葡萄糖而高乳糖时，部分乳糖在β－半乳糖苷酶作用下转变为异乳糖，异乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，不能结合O，RNA聚合酶顺利结合启动子，起始转录利用乳糖的酶；同时，由于没有葡萄糖存在，胞内cAMP浓度高，大量的cAMP－CAP复合物结合在CAP位点，极大的促进下游结构基因转录效率，β－半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量高，这时候，细菌就分解乳糖为葡萄糖和半乳糖，葡萄糖直接作为碳源，半乳糖利用gal操纵子调控的酶转变为葡萄糖，由于阻遏物不断合成，当乳糖被消耗完毕后，有活性的阻遏蛋白可重新建立阻遏状态，酶合成被抑制，经过一段延迟期后，逐渐被稀释；当高葡萄糖和高乳糖时，乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，不能结合O，RNA聚合酶可顺利结合P起始转录分解利用乳糖的酶；同时，但是由于葡萄糖存在，胞内cAMP浓度极低，没有cAMP－CAP结合在CAP位点，转录虽然可以起始但还是效率极低，β－半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量非常少，这时候，细菌就利用葡萄糖作为碳源，而不利用乳糖。
8.试解释在有色氨酸存在时，大肠杆菌利用外界提供的色氨酸，而很快关闭其体内色氨酸合成途径的分子机制。
答：当环境能提供足够浓度的色氨酸时，调节蛋白R与辅阻遏物－色氨酸结合，构象变化而活化，就能够与操纵基因Otrp特异性亲和结合，阻遏结构基因的转录起始。因此这是属于一种可阻遏的负调控操纵元，即操纵子通常是开放转录的，有效应物（色氨酸为辅阻遏物）作用时则阻遏关闭转录；同时，色氨酸浓度高，tRNAtrp-色氨酸浓度随之升高，核糖体沿mRNA翻译移动的速度加快，占据1和2区域，1和2、2和3配对的机会减少，3和4配对就形成具有终止结构C茎环，RNA聚合酶终止转录，于是即使已经开始的转录就减弱，这样，在有色氨酸存在时，大肠杆菌利用外界提供的色氨酸，而很快关闭其体内色氨酸合成途径，直接利用外界trp。在色氨酸浓度未达到能起阻遏作用时，调节蛋白R未与辅阻遏物－色氨酸结合，构象处于失活状态，不能与操纵基因Otrp特异性亲和结合，结构基因的转录就可起始进行。同时，Ptrp起始转录后，RNA聚合酶沿DNA转录合成mRNA，同时，核糖体就结合到新生成的mRNA核糖体结合位点上，开始翻译。tRNAtrp-色氨酸量也少，使核糖体沿mRNA翻译移动的速度慢，赶不上RNA聚合酶沿DNA移动转录的速
度，这时核糖体占据前导序列1区域，使不能生成发夹结构A ，于是2和3区域配对就形成发夹结构B ，阻止了C生成终止信号的结构，RNA聚合酶得以沿DNA前进，继续去转录，编码合成色氨酸的酶。
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开
现代分子生物学试题 邯郸学院12生技 Chapter 3 生物信息的传递——从DNA到RNA 一、名词解释： 1、Transcription 2、Coding strand (Sense strand) 3、Intron 4、RNA editing 5、Messenger RNA (mRNA) 二、判断正误： 1、基因表达包括转录和翻译两个阶段 2、mRNA是以有义链为模板进行转录的 3、转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生 4、σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始 5、聚合酶可以横跨40个碱基对，所以解旋的DNA区域也是40个碱基对 6、流产式起始是合成并释放2~9个核苷酸的短RNA转录物 7、启动子是有义链上结构基因5’端上游区的DNA序列 8、大肠杆菌基因中存在-10bp处的TTCACA区 9、-35区是指5’到3’方向-35区最后一个碱基离+1碱基为35个bp 10、真核基因几乎都是单顺反子 三、单选： 1、_______号帽子存在于所有帽子结构中 A、0号 B、1号 C、2号 D、以上全不是 2、在对启动子识别中起关键作用的是_______ A、α亚基 B、β亚基 C、σ因子 D、β’亚基 3、RNA聚合酶中提供催化部位的是_______ A、α+α B、α+β C、α+β’ D、β+β’ 4、_______是细胞内更新率极高不稳定的RNA A、mRNA B、rRNA C、tRNA D、snRNA 5、mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式是_______ A、5’端帽子 B、多聚腺苷酸尾 C、ρ因子 D、以上都不是 6、真核生物RNA聚合酶II所形成的转录起始复合物不包括_______ A、TBP B、TFIIA C、TFIIC D、TFIID 7、真核生物转录的所在空间是_______ A、细胞质 B、细胞核 C、核孔 D、线粒体 8、ρ因子本质上是一种_______ A、核苷酸 B、蛋白质 C、多糖类 D、碱基
答案完善版本，不要太爱我，我只是神一般的女子！ 第二章 一、填空题 1、由DNA 和组蛋白组成的染色质纤维细丝是许多核小体连成的念珠状结构。P30 2、核小体的形成是染色体中DNA压缩的第一阶段。P32 3、DNA的二级结构分两大类：一类是右手螺旋，另一类是左手螺旋。P37 4、如果DNA聚合酶把一个不正确的核苷酸加到3’末端，一个含有3’ 5’活性的独立催化 区会将这个错配碱基切去。这个催化区成为校正核酸外切酶。 5、原核生物中有三种起始因子分别是 IF-1 、 IF2和IF-3。P137 6、由于新合成的DNA分子中，都保留了原DNA的一条链因此叫半保留复制 p43 7、复制时，双链DNA要解开成两股链分别进行，所以，这个复制起始点呈现叉子的形式，被称为 复制叉.p43 8、为了解释DNA的等速复制现象，日本学者冈崎（okazaki）等提出了DNA的半不连续复制.p46 9、两条链均按5'到3'方向合成,一条链3'末端的方向朝着复制叉前进的方向,可连续合成,称前 导链。P46 10、环状DNA双链的复制可分为θ型、滚环形和D型几种类型.p47 11、真核细胞的DNA聚合酶和细菌DNA聚合酶基本性质相同，均以__dNTP___为底物，需要__Mg2+__ 激活，聚合时必须有 _模板链和_3’-OH末端_的引物链，链的延伸方向为5’→3’. (55页) 12、DNA聚合酶的α的功能主要是引物合成,即能起始前导链和后导链的合成.（P55） 13、DNA复制的调控主要发生在起始阶段_ ,一旦开始复制,如果没有意外的阻力,就可以一直复 制下去直到完成.(P56) 14、质粒DNA编码两个负调控因子_Rop蛋白______和反义RNA(RNA1),它们控制了起始DNA复制所 必须的_引物合成__。(P56) 15、染色体的复制与_细胞分裂_一般是同步的，但复制与_细胞分裂_不直接偶联。(P56) 16、转座子分为两大类:插入序列和复合型转座子。（书P62） 17、转座子存在于原核细胞和真核细胞内。（书P63） 18、玉米细胞内的转座子归纳为两大类：自主性转座子和非自主性转座子。（书P64） 19、转座作用可被分为复制型和非复制型两大类。（书P65） 20、插入序列是最简单的转座子，它不含有任何宿主基因。（书P62） 21、SOS反应广泛存在于原核和真核生物中，主要包括两个方面：DNA的修复；产生变异。P62 二、名词解释 C值反常现象：指C值往往与种系进化的复杂程度不一致，某些低等生物却有较大的C值p29 端粒：是真核生物线性基因组DNA末端的一种特殊结构，它是一段DNA序列和蛋白质形成的复合 体.p33 DNA变性与复性：当DNA溶液温度接近沸点或者pH较高时，互补的两条链就可能分开，称为DNA 的变性：但DNA双链的这种变性过程是可逆的，当变性DNA的溶液缓慢降温时，DNA的互补链又 可重新聚合，重新形成规则的双螺旋。p40 增色效应：当DNA溶液温度升高到接近水的沸点时，260nm的吸光度明显增加。p40 复制子：一般把生物体内能独立进行复制的单位称为复制子。p43 复制起始点：复制子中控制复制起始的位点称为复制起始点。p43 染色体水平调控：决定不同染色体或同一染色体不同部位的复制子按一定顺序在S期起始复制。 P57 DNA聚合酶:是一种天然产生的能催化DNA（包括RNA）的合成和修复的生物大分子。P53、P177 AP位点：所有细胞中都带有不同类型、能识别受损核酸位点的糖苷水解酶，它能特异性切除受损 核苷酸上的N-?糖苷键，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。p59 转座子：存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位（P62）
生命科学系本科2010-2011学年第1学期试题分子生物学（A）答案及评分标准 一、选择题，选择一个最佳答案（每小题1分，共15分） 1、1953年Watson和Crick提出（A ） A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B、DNA的复制是半保留的，常常形成亲本——子代双螺旋杂合链 C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D、遗传物质通常是DNA而非RNA 2、基因组是（D ） A、一个生物体内所有基因的分子总量 B、一个二倍体细胞中的染色体数 C、遗传单位 D、生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量 3、下面关于DNA复制的说法正确的是（D ） A、按全保留机制进行 B、按3＇→5＇方向进行 C、需要4种NTP加入 D、需要DNA聚合酶的作用 4、当过量的RNA与限量的DNA杂交时（A ） A、所有的DNA均杂交 B、所有的RNA均杂交 C、50%的DNA杂交 D、50%的RNA杂交 5、以下有关大肠杆菌转录的叙述，哪一个是正确的？（B ） A、-35区和-10区序列间的间隔序列是保守的 B、-35区和-10区序列距离对转录效率非常重要 C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处 6、真核生物mRNA转录后加工不包括（A ） A、加CCA—OH B、5＇端“帽子”结构 C、3＇端poly（A）尾巴 D、内含子的剪接 7、翻译后的加工过程不包括（C ） A、N端fMet或Met的切除 B、二硫键的形成 C、3＇末端加poly（A）尾 D、特定氨基酸的修饰
8、有关肽链合成的终止，错误的是（C ） A、释放因子RF具有GTP酶活性 B、真核细胞中只有一个终止因子 C、只要有RF因子存在，蛋白质的合成就会自动终止 D、细菌细胞内存在3种不同的终止因子：RF1、RF2、RF3 9、酵母双杂交体系被用来研究（C ） A、哺乳动物功能基因的表型分析 B、酵母细胞的功能基因 C、蛋白质的相互作用 D、基因的表达调控 10、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件（B ） A、含有复制原点，抗性选择基因 B、含有复制原点，合适的酶切位点 C、抗性基因，合适的酶切位点 11、原核生物基因表达调控的意义是（D ） A、调节生长与分化 B、调节发育与分化 C、调节生长、发育与分化 D、调节代谢，适应环境 E、维持细胞特性和调节生长 12、乳糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是（E ） A、与DNA结合影响模板活性 B、与启动子结合 C、与操纵基因结合 D、与RNA聚合酶结合影响其活性 E、与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA 13、Lac阻遏蛋白由（D ）编码 A、Z基因 B、Y基因 C、A基因 D、I基因 14、紫外线照射引起DNA损伤时，细菌DNA修复酶基因表达反应性增强，这种现象称为（A ） A、诱导 B、阻遏 C、正反馈 D、负反馈 15、ppGpp在何种情况下被合成？（A ） A、细菌缺乏氮源时 B、细菌缺乏碳源时 C、细菌在环境温度太高时 D、细菌在环境温度太低时 E、细菌在环境中氨基酸含量过高时
现代分子生物学复习题
现代分子生物学 一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染 小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′ 东隅已逝 2 桑榆非晚！
末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一 种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc 构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、 CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转 录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、 TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。 其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G 为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA 东隅已逝 3 桑榆非晚！
分子生物学复习题(有详细答案)
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绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了“脱氧核糖核苷酸的结构”的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术（基因工程） （1）可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; （2）可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; （3）可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化（时序调节），并随着内外环境的变化而不断加以修正（环境调控）。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） 一个生物大分子，无论是核酸、蛋白质或多糖，在发挥生物学功能时，必须具备两个前提： (1)拥有特定的空间结构（三维结构）； (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向： (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法？ (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性，决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学，是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。
(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质，它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中，成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容： (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕，两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧，3′,5′- 磷酸与核糖在外侧，彼此通过磷酸二酯键相连接，形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起，A与T相配对形成两个氢键，G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制，但根据碱基互补配对原则，当一条多核苷酸的序列被确定后，即可决定另一条互补链的序列。
现代分子生物学 复习提纲 第一章绪论 第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学：以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究 对象，从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控 等过程，也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术（基因工程） ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） ●基因组、功能基因组与生物信息学研究 第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间：19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一：肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二：噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括： ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑，标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系 思考 ?证明DNA是遗传物质的实验有哪些？ ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。 第二章染色体与DNA
分子生物学试题（一） 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（）片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为（）、（）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（）、（）和（）。 4．蛋白质的跨膜需要（）的引导，蛋白伴侣的作用是（）。5．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（）和（）。6．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（）、（）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（）、（）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（）、（）、（）。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（S1 ）开始。 12．DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（松弛型质粒）。 14．PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物（约20个碱基左右）。 b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15．PCR的基本反应过程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；
一、名词解释 1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因：遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学：是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学：对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列：低度重复序列是指在基因组中含有2～10个拷贝的序列 18、中度重复序列：中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万（<105）次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序，但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列：基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因：一种类似于基因序列，其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制：是指以原来DNA（母链）为模板合成新DNA（子链）的过程。或生物体以DNA/RNA
现代分子生物学复习题 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
现代分子生物学 一.填空题 的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部 分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两 个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法、可以减少蛋白质合成 过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc构型、 L构型。在电泳中最前面 的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别 是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下 几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA显微注射法、胚胎干细胞法。 聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、 B、E 。其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有%的T,则A为%_,G为%_和C为%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA‘TAQ 、引物、缓冲液、dNTP。 18.在琼脂糖电泳中，DNA会向正极移动。 19.染色体包括蛋白质、染色体两大部分。 20.环状DNA双链的复制主要可分为θ形、滚环形、D-环形三种类型。 21.转录的基本过程包括转录的起始、延伸、终止。 22.半乳糖对细菌有双重作用；一方面可以作为碳源供细胞生长；另一方面它又是细胞壁的成 分。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从 S2 开始，无G 时转录从 S1 开始。 重组技术也称为基因克隆或分子克隆。最终目的是把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤：
绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
分子生物学备选考题 名词解释: 1.功能基因组学 2.分子生物学 3.epigenetics 4.C值矛盾 5.基因簇 6.间隔基因 7.基因芯片 8.基序（Motifs） 9.CpG岛 10.染色体重建 11.Telomerase 12.足迹分析实验 13.RNA editing 14.RNA干涉（RNA interference） 15.反义RNA 16.启动子（Promoter） 17.SD序列(SD sequence) 18.碳末端结构域（carboxyl terminal domain，CTD） 19.single nucleotide polymorphism，SNP 20.切口平移（Nick translation） 21.原位杂交 22.Expressing vector 23.Multiple cloning sites 24.同源重组 25.转座 26.密码的摆动性 27.热休克蛋白嵌套基因 28.基因家族增强子 29.终止子 30.前导肽RNAi 31.分子伴侣 32.魔斑核苷酸 33.同源域 34.引物酶 35.多顺反子mRNA 36.物理图谱、 37.载体（vector） 38.位点特异性重组 39.原癌基因（oncogene） 40.重叠基因、 41.母源影响基因、
42.抑癌基因（anti-oncogene）、 43.回文序列（palindrome sequence）、 44.熔解温度（melting temperature, Tm） 45.DNA的呼吸作用（DNA respiration） 46..增色效应（hyperchromicity）、 47.C0t曲线（C0t curve）、 48.DNA的C值（C value） 49.超螺旋(superhelix) 、 50.拓扑异构酶（topoisomerase）、 51.引发酶(primase) 、 52.引发体(primosome) 53.转录激活(transcriptional activation) 54.dna基因(dna gene)、 55.从头起始(de novo initiation) 、 56.端粒（telomere） 57.酵母人工染色体（yeast artificial chromosome, YAC）、 58.SSB蛋白（single strand binding protein）、 59.复制叉(replication fork)、 60.保留复制(semiconservative replication) 61.滚环式复制(rolling circle replication)、 62.复制原点(replication origin)、 63.切口(nick) 64.居民DNA (resident DNA) 65.有义链(sense strand) 66.反义链(antisense strand) 67.操纵子(operon) 、 68.操纵基因(operator) 69.内含子(内元intron) 70.外显子(外元exon) 、 71.突变子(muton) 、 72.密码子（codon）、、 73.同义密码（synonymous codons）、 74.GC盒(GC box) 75.增强子(enhancer) 76.沉默子(silencer) 77.终止子(terminator) 78.弱化子（衰减子）(attenuator) 79.同位酶(isoschizomers) 、 80.同尾酶(isocandamers) 81.阻抑蛋白（阻遏蛋白）(repressor) 82.诱导物（inducer）、 83.CTD尾（carboxyl-terminal domain ） 84.载体（vector）、 85.转化体(transformant)
一名词解释 1缺口（gap）：DNA分子中，一条链上失去一段单链，称为gap。 切口（nick）：DNA分子中，一条链上失去一个磷酸二酯键称为nick。 DNA hellicase (DNA解链酶)：也叫DNA解螺旋酶，其通过水解ATP获得能量来解开双链DNA，每解开一对碱基，需水解2分子A TP→ADP+Pi(磷酸盐) 拓扑异构酶：细胞内一类催化DNA拓扑异构体（topoisomerase）相互转化的酶，其为topoisomerase，其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体，在DNA 双链骨架的3’，5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口，使DNA的多聚核苷酸 链得以穿越，通过改变DNA的连接数，而改变的分子拓扑结构。 3 无义突变(nonsense mutation)：DNA序列三联体密码子发生突变，导致AA密码子变为终 止密码子，称为无义突变，其导致翻译提前结束而常使产物失活 错义突变（missense mutation）：DNA序列三联体密码子发生突变导致pr中原来的AA被另一种AA取代。 4 转座子：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5转录单位：RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定起点（启动子），并在一终点处（终止子）终止，此转录区域称为转录单位。一个转录单位可是一个基因，也可是多个基因。转录因子：RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子称为转录因子。其作用或是认别DNA的顺式作用位点，或是识别其他因子，或是识别RNA聚合酶。 6 复制子：DNA的复制单位。 终止子（Terminator）：模板DNA上提供转录停止信号得DNA序列。 7. 单顺反子mRNA：编码1条多肽链的mRNA RNA编辑：是某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，其改变RNA的序列，而导致DNA所编辑的遗传信息改变。 8 起始tRNA：有一类能特异的识别MRNA摸板上起始密码子的tRNA 多顺反子mRNA：编码多条多肽链的mRNA。 9 RNA的再编码（RNA recoding）:mRNA在某些情况下不是以固定的方式被翻译，而可以 改变原来的编码信息，以不同的方式进行翻译，科学上把RNA编码和读码 方式的改变称为…… 同工tRNA：几种搬运相同AA的tRNA成为同工tRNA。 10通读（readthrough）：有些纵止子的作用被特异的因子所阻止，使酶得以越过终止子继续转录，这种现象称为通读 10 翻译跳跃(translation jumping)：翻译中读码框架发生位移，核糖体跳过一个碱基或一大段 mRNA（如50nt）后读继翻译。这一过程称tranlational jumping 1基因家族：真核生物基因中许多来源相同、结构相近、功能相关的基因按功能成套组合，这样的一组基因称为基因家族，其编码另一个蛋白质家族。 2拓扑异构酶：细胞内一类催化DNA拓扑异构体（topoisomerase）相互转化的酶，其为topoisomerase，其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体，在DNA双链 骨架的3’，5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口，使DNA的多聚核苷酸链得以 穿越，通过改变DNA的连接数，而改变的分子拓扑结构。 3基因突变：指DNA的碱基顺序发生突然而永久性地变化，从而影响DNA的复制，并使DNA 的转录和翻译也跟着改变，因而表现出异常地遗传特征。 4 DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5信号肽：在多肽链合成过程中，先合成的一段多肽序列，该序列引导后合成的多肽链进入
一、名词： 1.转座子 转座元件中的一种，具有完整转座元件的功能特征并能携带内外源基因组片段(单基因或多基因)。在基因组内移动或在生命体之间传播并可表达出新的表型。 2.p53 因编码一种分子质量为53 kDa的蛋白质而得名，是一种抗癌基因。其表达产物为基因调节蛋白（P53蛋白），当DNA受到损伤时表达产物急剧增加，可抑制细胞周期进一步运转。一旦p53基因发生突变，P53蛋白失活，细胞分裂失去节制，发生癌变，人类癌症中约有一半是由于该基因发生突变失活。 3.miRNA MicroRNAs（miRNAs）是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小长约20~25个核苷酸。成熟的miRNAs是由较长的初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的，随后组装进RNA诱导的沉默复合体，通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。 4.CpG岛海滩 基因组中长度为300～3000 bp的富含CpG二核苷酸的一些区域，主要存在于基因的5′区域。启动子区中CpG岛的未甲基化状态是基因转录所必需的，而CpG序列中的C的甲基化可导致基因转录被抑制。 5.系统生物学 以整体性研究为特征的一种大科学，是在细胞、组织、器官和生物体整体水平研究结构和功能各异的各种分子及其相互作用，并通过计算生物学来定量描述和预测生物功能、表型和行为。 6.基因组 基因组，Genome，一般的定义是单倍体细胞中的全套染色体为一个基因组，或是单倍体细胞中的全部基因为一个基因组。可是基因组测序的结果发现基因编码序列只占整个基因组序列的很小一部分。因此，基因组应该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部DNA分子。
分子生物学试题 一、名词解释 1、基因：能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。 2、基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。 3、端粒：以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。 4、操纵子：是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA 为多顺反子。 5、顺式作用元件：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 6、反式作用因子：是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。 7、启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 8、增强子：位于真核基因中远离转录起始点，能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游，也可相距靶基因较远。 9、基因表达：是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 10、信息分子：调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子；而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。11、受体：是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合，进而发生生物学效应的的特殊蛋白质。 12、分子克隆：在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，使其在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。 13、蛋白激酶：是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。 14、蛋白磷酸酶：是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子，与蛋白激酶相对应存在，共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。 15、基因工程：有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。 16、载体：能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA 分子。 17、转化：指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。 18、感染：以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。 19、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。 20、转染：指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。 21、 DNA变性：在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸分子中的所有共价键则不受影响。 22、 DNA复性：当促使变性的因素解除后，两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA 双螺旋结构。 23、退火：指将温度降至引物的TM值左右或以下，引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交