第三章鱼类营养学原理 第一节蛋白质的营养 蛋白质是生命的物质基础，没有蛋白质就没有生命。机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。那么在鱼类营养中，是不是饲料中的蛋白质水平越高就越好呢？为什么，在众多饲料蛋白源，一般鱼类对鱼粉的消化利用率比其它蛋白源饲料高呢？ （一）：蛋白质营养 1.蛋白质的组成 含C、H、O、N，部分蛋白质含少量Fe、P、S，蛋白质的平均元素含量：C 53%，H 7%，O 23%，N 16%，S+P <1% N平均含量为16%，这是概略养分分析法CP含量计算的理论依据。 CP=蛋白质含N量÷16%=蛋白质含N量×6.25 蛋白质的基本组成单位是氨基酸，主要由20种氨基酸组成。 2.蛋白质的生理功能 机体内蛋白质的种类很多，性质、功能各异，但都是由20种氨基酸按不同比例组成的，并在体内不断代谢与更新。 ①细胞原生质的重要组成成分；是碳水化合物和脂肪不可替代的，是除水外，含量最多的营养物质，占干物质的50%，占无脂固形物的80%。 ②组织生长、更新、修补的物质来源。动物体蛋白质每天约 0.25-0.3%更新，约6-12月全部更新。 ③参与构成酶、激素和部分维生素。酶的本质是蛋白质；含氮激素：生长激素、甲状腺素、肾上腺素、胰岛素、促肠液激素；含氮维生素：尼克酸 ④蛋白质是水生动物主要的能量来源，为鱼类提供能量，转化为脂肪和糖类：蛋白质的燃烧热值为5.654卡/克，生理热价4.4卡/克左右 ⑤参与机体免疫：抗体的成份绝大部分均为蛋白质 ⑥参与遗传信息的控制：DNA、RNA ⑦维持毛细血管的正常渗透压 ⑧运输功能：血红素 ⑨参与血凝和维持血液酸碱平衡。 3.鱼类对饲料蛋白质的利用 ①消化部位：主要在胃和小肠上部, 20%在胃,60-70%在小肠,其余在大肠。 ②吸收：部位在小肠上部，主动吸收 吸收的顺序： L-AA > D-AA Cys>Met>Try>Leu>Phe>Lys≈Ala>Ser>Asp>Glu
动物蛋白质的胃蛋白酶消化率（体外消化） 一、适用范围： 本方法适用于动物性原料品质的判定。 二、原理： 用脱脂的样本在一个热的胃蛋白酶溶液中，稳定地不断搅拌约16小时，予以消化。测定它的蛋白质含量。这种方法不能用于植物蛋白质饲料原料或混合饲料，因为，它们所含复杂的碳水化合物是不能被胃蛋白酶消化的。将溶解了的蛋白质全部作为可消化的，并用其对粗蛋白质的百分率来表示。 三、设备： 1、恒温水浴振荡器：45±2℃。 2、测定粗蛋白质的全套设备。 3、过滤装置。 4、索氏脂肪浸提器。 四、试剂： 除测定粗蛋白质用的试剂外，尚需以下试剂： 1、%胃蛋白酶溶液的配制：先稀释盐酸到1L。在使用前，现配%胃蛋白酶溶液。 2、所有胃蛋白酶应具有1：3000的活性。 3、加热稀盐酸至42—45℃，然后加入胃蛋白酶2g,轻轻地搅动，使其溶解（此时不要加热！）。即得在L盐酸中的%胃蛋白酶溶液。 五、测定步骤： 1、准确称取1g脱脂试样，放入300ml碘量瓶内，加入经过预热（42—45℃）的%胃蛋白酶溶液150ml，盖好塞子，在45℃下边搅拌边消化16小时，消化后用滤纸过滤，然后用温水洗净滤纸上的不消化物。将不消化物连同滤纸转入消化管中，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定不消化物中的粗蛋白质含量。 2、另取1份脱脂分析试样，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定其粗蛋白质含量。然后，根据消化的和不消化的粗蛋白质含量计算出试样的胃蛋白酶消化率。 六、测定结果计算与分析： 1、计算： 动物蛋白质胃蛋白酶消化率（%）= A-B ×100 A 式中：A—试样中粗蛋白质的含量（%）。 B—试样中的不消化物粗蛋白质的含量（%）。
饲料中蛋白质的消化吸 动物饲料中蛋白质的含量常以粗蛋白的形式表述，然而，粗蛋白的分析值并不能代表饲料中有效的蛋白质含量。如果饲料中粗蛋白含量高，但其蛋白质的有效利用率较低，未被消化吸收的蛋白积累过多，可能会引发肠道健康问题。 影响饲料蛋白质消化吸收的因素有很多： 1、动物因素 动物的个体差异、年龄阶段、不同品种等，对饲料中蛋白质的消化能力都会有影响。 2、饲粮因素 饲料中蛋白质的种类、纤维水平、酶抑制因子也会影响动物的蛋白消化率。如羽毛粉的蛋白含量高达80%，但其中仅有25%的蛋白可消化，因为羽毛粉中含量较大的角蛋白不易被消化利用；纤维物质能加速蛋白质在消化道排空，阻碍其消化，所以高纤维日粮饲料中蛋白消化率较低；一些农副产品中含有蛋白酶抑制因子，如生大豆中含有胰蛋白酶抑制因子、生马铃薯中含有的糜蛋白酶抑制因子能抑制蛋白酶活性，降低蛋白质的消化率。 3、加工因素 饲料加工生产过程中，粉碎、热处理、发酵、降解等程序可能影响蛋白质的理化性质，降低可消化吸收的蛋白含量。如粉碎不完全，蛋白酶与饲料作用的表面积小，可利用的蛋白质不能被充分水解，影响其吸收。
动物摄入的蛋白质经过消化以后，以小肽和氨基酸形式在小肠吸收，未能被消化分解的蛋白质会进入大肠被有害微生物分解利用，引起肠道微生物紊乱诱发腹泻，而通过有害微生物的发酵作用产生的大量有害物质如胺类、NH3等会被机体吸收，再通过肝脏的处理转化排出，使得原本用来维持机体生长和健康的能量被这个生理过程消耗，降低了蛋白质的营养质量。另外，由于未消化蛋白质带来 的环境污染问题也日益突出，因此，如何提供动物适宜的营养，提高消化率，最大程度地降低未消化蛋白进入后肠道应是动物营养研究的新方向。 因此，笔者认为可以从以下两个方面解决饲料中蛋白质的消化吸收问题： 1、适当降低蛋白浓度，配比平衡 随着理想氨基酸模式的研究推广，动物饲料配方中粗蛋白的含量已不能完全彰显配方的营养价值，很多厂家推出的低蛋白日粮逐渐被用户认可并得到良好的反响。低蛋白日粮虽然从表面看粗蛋白含量有所下降，但其中的可消化蛋白含量、氨基酸配比较之以前更为合理，而蛋白质与其他营养物质的含量也应遵循不同动物的生长需要合理配比。研究认为，在中低蛋白日粮中合理配比氨基酸和能量等，可以提高蛋白质利用率，降低饲料成本，减少污染物排放。 2、提高消化道前段蛋白质的消化率 提高动物对蛋白质消化率的主要手段除了适量，最重要的是质优，而质优则意味着价高，因此养殖低成本与饲料配方高品质的矛盾长期存在。于是，非常规、低品质原料的优化处理被提上日程，即在动物对营养物质的消化吸收过程中增加体外预消化过程，降解抗营养因子、大分子物质、提高原料消化性的同时赋予功能性，一举多得。另外，体外消化的效率要远远高于动物体内消化，对于幼龄动物、应激期动物作用更为显著。目前，饲料中应用的酶解蛋白、小肽类、生物发酵类原料都属于预消化原料的范畴，为饲料工业的可持续发展提供了新思路。
如图是食物经过人 体消化道时，糖类．蛋白质和脂肪被化学消化的程度，字母表示组成消化道各器官的排列顺序．请据图回答． （1）曲线甲是C的消化，曲线乙是A的消化，曲线丙是B的消化． A．糖类 B．蛋白质 C．脂肪 D．维生素 （2）字母C代表的器官是B A．食道B．胃 C．小肠D．大肠 （3）蛋白质在C中进行消化，其终产物是F A．A和B B．B和C C．C和D D．A和C E．葡萄糖 F．氨基酸 G．脂肪酸（4）胰腺分泌的胰液，肝脏分泌的胆汁从D进入消化道． A．E B．B C．C D．D （5）消化的终产物几乎全部在C处被吸收． A．F B．B C．D D．C． 考点：食物的消化和营养物质的吸收过程；各种消化腺的位置和功能． 分析：图示表示糖类、蛋白质和脂肪在经过人体消化道时被消化的程度，A、B、C、D、E、F依次代表消化道中的口腔、食道、胃、小肠、大肠、肛门． 解答：解：（1）淀粉（糖类）、蛋白质、脂肪的消化分别开始于口腔、胃和小肠，它们都在小肠内被彻底消化；分析图示中的曲线可知：曲线甲代表脂肪的消化过程，曲线乙代表糖类的消化过程，曲线丙代表蛋白质的消化过程． （2）消化系统由消化道和消化腺组成，消化道依次为口腔、咽、食道、胃、小肠、大肠、肛门；其中咽和食道对食物没有消化能力，因此图示中的C代表的器官应该是胃． （3）蛋白质的消化是从胃开始的，当食物中的蛋白质进入胃以后，在胃液的作用下进行初步消化后进入小肠，小肠里的胰液和肠液含有消化蛋白质的酶，在这些酶的作用下，蛋白质被彻底消化为氨基酸；即蛋白质在胃和小肠里进行消化，消化终产物是氨基酸． （4）肝脏分泌的胆汁和胰腺分泌的胰液都通过导管进入小肠的起始端十二指肠． （5）小肠是吸收营养物质的主要场所，能够吸收大部分的水、无机盐、维生素和全部的氨基
第六章消化和吸收 【习题】 一、名词解释 1.消化 2.吸收 3.机械性消化 4.化学性消化 5.胃肠激素 6.容受性舒张 7.胃排空粘液-碳酸氢盐屏障 二、填空题 1.食物的消化有_____和_____两种形式。 2.消化道平滑肌与骨骼肌相比较，兴奋性_____，收缩_____。 3.消化器官的绝大部分都受_____和_____神经双重支配。 4.支配消化器官的副交感神经主要是_____神经。其兴奋可使胃肠运动_____，胆囊，括约肌 _____，消化腺分泌_____。 5.胃肠道的内在神经丛由_____神经丛和_____神经丛组成。 6.胃肠道粘膜内的内分泌细胞分泌的激素，称为_____。 7.促胃液素的主要生理作用是：促进胃液_____；使胃窦_____；促进消化道粘膜及胰岛素的_____。 8.引起促胃液素释放的主要化学因素是在小肠上部和幽门的_____和_____。 9.促胰液素的主要生理作用有：促进_____和_____中HCO3-的分泌。 10.引起促胰液素释放的主要因素是_____。 11.缩胆囊素的主要生理作用有：引起_____收缩和_____分泌。 12.引起缩胆囊素释放的主要因素是小肠上部的_____。 13.内因子是胃腺_____细胞分泌的，其化学本质是_____，它能保护和促进_____的吸收。 14.可使胃蛋白酶原激活的物质是_____和_____。 15.胃运动形式有_____、_____和_____。 16.胰腺导管细胞分泌_____和_____；胰腺腺泡细胞分泌_____。 17.迷走神经兴奋引起胰液分泌的特点是：_____和_____含量很少，而_____的含量较丰富。 18.促进胰液分泌的体液因素主要有_____，_____和_____。 19.胆汁的主要作用是通过_____来实现的，其主要作用包括_____、_____。 20.小肠运动的形式有_____、_____、_____。 三、判断题 1.食物能够透过消化道的粘膜进入血液循环而被吸收。( ) 2.基本电节律能引起平滑肌收缩。( ) 3.消化道运动的主要作用在于完成对食物的机械性消化，它对化学性消化和吸收也有促进作用。 4.胃肠道消化液的分泌通常取决于消化道中食物的量，并不依赖摄入食物的性质。 ( ) 5.蠕动波的移行方向均朝向肛门 6.排使反射的初级中枢位于脊髓腰骶部。 7.三大营养物质消化和吸收的主要部位是在胃。 8.在食物的消化过程中，起主要作用的消化腺是胰腺。 9.在消化道的不同部位，吸收的速度是相同的，吸收速度并不取决于该部分消化道的组织结构以及食物的组成及在该部分停留时间。 10.胃肠激素在化学结构上都是蛋白质。 11.唾液分泌的调节是通过神经调节和体液调节来实现的。 12.三种营养物质在胃中排空速度的快慢顺序是脂肪、糖、蛋白质。 13.蛋白质具有强烈刺激胃液分泌的作用。 14.小肠液是所有消化液中最重要的一种。 15.脂肪吸收不良可导致B族维生素吸收不良。 16.维生素的吸收主要在小肠进行。 四、各项选择题 (一)单项选择
第四节蛋白质的消化吸收及代谢 一、蛋白质的消化 蛋白质未经消化不易吸收，有时某些抗原、毒素蛋白可少量通过粘膜细胞进入体内，会产生过敏、毒性反应。一般情况下，食物蛋白质水解成氨基酸及小肽后方能被吸收。由于唾液中不含水解蛋白质的酶，所以食物蛋白质的消化从胃开始，但主要在小肠。 (一)胃内消化 胃内消化蛋白质的酶是胃蛋白酶(pepsin)。胃蛋白酶是由胃粘膜主细胞合成并分泌的胃蛋白酶原(pepsinogen)经胃酸激活而生成的；胃蛋白酶也能再激活胃蛋白酶原生成新的胃蛋白酶。胃蛋白酶的最适宜作用的pH值为 1.5～2.5，对蛋白质肽键作用的特异性较差，主要水解芳香族氨基酸、蛋氨酸或亮氨酸等残基组成的肽键。胃蛋白酶对乳中的酪蛋白(casein) 有凝乳作用，这对婴儿较为重要，因为乳液凝成乳块后在胃中停留时间延长，有利于充分消化。 (二)小肠内消化 食物在胃内停留时间较短，蛋白质在胃内消化很不完全，消化产物及未被消化的蛋白质在小肠内经胰液及小肠粘膜细胞分泌的多种蛋白酶及肽酶的共同作用，进一步水解为氨基酸。所以，小肠是蛋白质消化的主要部位。蛋白质在小肠内消化主要依赖于胰腺分泌的各种蛋白酶，可分为两类：①内肽酶(endopeptidase)可以水解蛋白质分子内部的肽键，包括胰 蛋白酶、糜蛋白酶和弹性蛋白酶；②外肽酶(exopeptidase)可将肽链末端的氨基酸逐个水解，包括氨基肽酶(aminopeptidase)和羧基肽酶(carboxypeptidase)。 肠粘膜细胞的刷状缘及细胞液中还存在一些寡肽酶(oligopeptidase)，例如，氨基肽酶 及二肽酶(dipeptidase)等。氨基肽酶从肽链的末端逐个水解释放出氨基酸，最后生成二肽。二肽再经二肽酶水解，最终生成氨基酸。 二、蛋白质的吸收 (一)氨基酸和寡肽的吸收 经过小肠腔内和膜的消化，蛋白质被水解为可被吸收的氨基酸和2～3 个氨基酸的 小肽。过去认为只有游离氨基酸才能被吸收，现在发现2—3 个氨基酸的小肽也可以被吸收。 (二)整蛋白的吸收 在低等动物，吞噬是摄人大分子的基本方式。而在高等动物，只有在胚胎动物仍保持这种低级的原始机制。例如，母乳中的抗体可通过肠粘膜细胞的吞噬作用传递给婴儿。关于成年人对整蛋白吸收问题已有许多研究。有人将胰岛素和胰蛋白酶抑制剂同时注入大鼠的隔离肠袢，发现可引起血糖降低，说明有一部分胰岛素被吸收；人的血液中存在食物蛋白质的抗体，这说明食物蛋白质可进入血液而起抗原的作用。但一般认为，大分子蛋白质的吸收是微量的，无任何营养学意义，只是应当注意肠内细菌的毒素、食物抗原等可能会进入血液成为致病因子。 三、蛋白质的代谢 (一)蛋白质的分解与合成 1.蛋白质的分解进食正常膳食的正常人每日从尿中排出的氮约12g。若摄人的膳食蛋白质增多，随尿排出的氮也增多；若减少，则随尿排出的氮也减少。完全不摄入蛋白质或禁食一切食物时，每日仍随尿排出氮2～4g。这些事实证明，蛋白质不断在体内分解成为含氮废物，随尿排出体外。 2.蛋白质的合成蛋白质在分解的同时也不断在体内合成，以补偿分解。蛋白质合成经两个步骤完成。第一步为转录(transcription)，即生物体合成RNA 的过程，亦即将DNA 的碱基序列抄录成RNA 碱基序列的过程；第二步为翻译(translation)，是生物体合成mRNA 后，mRNA 中的遗传信息(DNA碱基顺序)转变成蛋白质中氨基酸排列顺序的过程，是蛋白质获
第六章消化和吸收 考纲解祈 1.掌握 (1)消化和吸收的概念。 (2)胃排空、胃液的成分和作用，蠕动。 (3)胰液、胆汁的成分和作用。 (4)吸收的部位和途径。 2.熟悉 (1)唾液的成分和作用。 (2)胃的运动形式和作用，胃黏膜屏障的概念。 (3)小肠的运动形式和作用。 (4)消化器官活动的神经调节。 3.了解 (1)大肠内细菌的作用，粪便的形成及排便反射。 (2)吸收的方式。 (3)胆囊收缩素、促胃液素、促胰液素、抑胃肽的作用及引起释放的因素。 第一节消化管各段的消化功能 知织归纳 一、消化和吸收概念 1.消化：指食物在消化管内被加工、分解的过程，包括化学性消化(消化酶作用)和机械性消化(消化管运动)。 2.吸收：指食物经过消化后的小分子物质以及维生素、无机盐和水透过消化管黏膜，进入血液或淋巴的过程。 二、口腔内消化 其余成分为无机盐和黏蛋白。 三、胃内消化
2.胃的运动。 (2)胃的排空。 ①定义：胃的内容物被排入十二指肠的过程，主要取决于胃和十二指肠的压力差。 ②排空速度：糖类>蛋白质>脂肪。 ③排空时间:4~6h。 四、小肠内消化
五、大肠的功能 大肠内细菌的作用。 排便 (1)粪便的形成：食物残渣在大肠内一般停留在10h以上，其中绝大部分水和无机盐被大 肠黏膜吸收，其余部分经细菌分解后，形成粪便。粪便中，除食物残渣外，还包括脱落的肠上皮细胞、大量细菌及由肝排出的胆色素衍生物等。 (2)排便反射初级中枢：脊髓腰骶段 (3)排便反射过程：当集团蠕动将粪便推入直肠后，直肠内压升高，刺激直肠壁内的感受器，传入冲动沿盆神经和腹下神经传至脊髓腰骶段的初级排便中枢，经脊髓上传至大脑皮质，产生便意。大脑皮质在一定程度上可控制排便活动，如果条件允许，即可发生排便反射，初级排便中枢通过盆神经发放冲动，使降结肠、乙状结肠和直肠收缩，肛门内括约肌舒张，同时抑制阴部神经使其传出冲动减少，肛门外括约肌舒张，将粪便排出体外。此外膈肌和腹肌收缩，增加腹内压，协助排便。 典型精讲 【例1】人体吸收胆盐、维生素B12的主要部位是 A.胃 B.小肠 C.食管 D.回肠 E。结肠 【解析】内因子和维生素B2结合形成复合物，促进其在回肠吸收。 【答案】D 【例2】正常情况下，人体胃黏膜不会被胃液所消化，是由于
动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定 Hessen was revised in January 2021
动物性蛋白质饲料 胃蛋白酶消化率的测定过滤法 参考标准：GB/T 17811-2008 一、适用范围 二、实验原理 已脱过脂的试样,用温热的胃蛋白酶溶液(酶液浓度和用量与酶解试样质量恒定),在恒温、持续不断地振摇或搅拌下消化16小时,过滤分离不溶性残渣,洗涤、干燥,测定残渣的粗蛋白质含量。同时测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白质含量。 三、实验用品
三、实验内容
照上法振摇和倒出。检查瓶子，并用丙酮再次洗涤。当全部液体通过滤纸后,用洗瓶以少量丙酮洗涤漏斗壁上残渣两次,并抽干。从布氏漏斗上小心取下载有残渣的滤纸(用滤纸将残渣包裹好),无损地移入100烧杯中并置于105℃烘箱内烘干。 5 粗蛋白质 的测定将上述已烘干的滤纸包无损地移入 凯氏烧瓶中，按《FOSS 定氮仪测 定饲料中粗蛋白含量的方法》测定 残渣粗蛋白质的质量分数（ω 2 ）。同时，称取脱脂风干的样品 0.3 g（精确至0.0002 g），直接 按《FOSS 定氮仪测定饲料中粗蛋 白含量的方法》测定脱脂未酶解的 样品中粗蛋白质的质量分数（ω 1 ）。 测定残渣粗蛋白质时应从每个 样品残渣粗蛋白质中减去酶液 的空白值。 6 计算X- 试样胃蛋白酶消化率，以质 量分数计（%）； ω 1 - 脱脂未酶解的样品中粗蛋 白质的质量分数（%）； ω 2 - 脱脂酶解后的残渣中粗蛋 白质的质量分数（%）。 重复性：1每个试样脱脂风干后取两份试料进行酶解，平行测定残渣粗蛋白质的质量分数，以其算术平均值为测定结果（保留三位有效数字），测定结果的相对≤6%； 2 每个试样脱脂风干后取两份试料进行平行测定粗蛋白质的质量分数，以其 粗蛋质含量允许相对偏差 >25% 1％ 10% 食物蛋白质消化率 食物蛋白质消化率(digestibility)是反映食物蛋白质在消化道内被分解和吸收的程度的一项指标；是指在消化道内被吸收的蛋白质占摄入蛋白质的百分数；是评价食物蛋白质营养价值的生物学方法之一。一般采用动物或人体实验测定，根据是否考虑内源粪代谢氮因素，可分为表观消化率和真消化率两种方法。(一)蛋白质(N)表观消化率[apparent protein(N)digestibilitvl即不计内源粪氮的蛋白质消化率。通常以动物或人体为实验对象，在实验期内，测定实验对象摄人的食物氮(摄入氮)和从粪便中排出的氮(粪氮)，然后按下式计算： 蛋白质(N)表观消化率(％)=(I-F)／I×100 式中l 代表摄入氮，F 代表粪氮 (二)蛋白质(N)真消化率[true protein(N)digestibility] 考虑粪代谢时的消化率。粪中排出的氮实际上有两个来源。一是来自未被消化吸收的食物蛋白质；二是来自脱落的肠粘膜细胞以及肠道细菌等所含的氮。通常以动物或人体为实验对象，首先设置无氮膳食期，即在实验期内给予无氮膳食，并收集无氮膳食期内的粪便，测定氮含量，无氮膳食期内的粪氮即粪代谢氮。成人24 小时内粪代谢氮一般为0.9～1.2g；然后再设置被测食物蛋白质实验期，实验期内摄取被测食物，再分别测定摄人氮和粪氮。从被测食物蛋白质实验期的粪氮中减去无氮膳食期的粪代谢氮，才是摄人食物蛋白质中真正未被消化吸收的部分，故称蛋白质(N)真消化率。计算公式如下： 蛋白质(N)真消化率(％)=I-(F-Fk)／I×100 式中I 代表摄入氮，F 代表粪氮，Fk 代表粪代谢氮由于粪代谢氮测定十分繁琐，且难以准确测定，故在实际工作中常不考虑粪代谢氮，特别是当膳食中的膳食纤维含量很少时，可不必计算Fk；当膳食中含有多量膳食纤维时，成年男子的Fk 值，可按每天12mgN／kg 体重计算。 食物蛋白质消化率受到蛋白质性质、膳食纤维、多酚类物质和酶反应等因素影响。一般来说，动物性食物的消化率高于植物性食物。如鸡蛋、牛奶蛋白质的消化率分别为97％、95％，而玉米和大米蛋白质的消化率分别为85％和88％。 实验一 鱼类饲料的总消化率及其 蛋白质消化率的测定 一、 实验目的 掌握用外源指示剂Cr 2O 3间接测量鱼、虾饲料消化率的基本方法。 二、原 理 与饲料均匀混合的外源指示剂Cr 2O 3，完全不被动物吸收而随粪便排出。根据指示剂及蛋白质(或其他营养成分)在食物及粪便中的含量变化，饲料的总消化率和蛋白质的消化率由如下两式给出： 饲料总消化率：D(％)=[1－'B B ] ×100 蛋白质消化率：D(％)=[1－ 'A A ×'B B ] ×100 A 、A’分别为饲料粪便中的粗蛋白含量； B 、B’分别为饲料和粪便中的Cr 2O 3 含量 三、实验材料 1．试验鱼 可根据实际情况选择实验鱼的种类。但用易驯化、习惯实验环境的鱼类(如金鱼、锦鲤、罗非鱼等)较好。体重20～25g ，每试验组10尾。 2．水族箱 每试验组配50～1001容积的水族箱2个，一个作投饲槽、一个作排泄槽。 3. 充氧设备 每水族箱配微型充气泵一台 4. 集粪工具 每组配虹吸管1支、漏斗2个及玻璃纤维若干 5. 小捞网1个 6. 100目分样筛1个 7. 100ml 凯式烧瓶2只 8. 100ml 容量瓶1个，10ml 容量瓶10个 9．刻度移液管l 套。 10．凯氏定氮装置1套。 11．分光光度计一台。 一、 试验饲料的制备 试验饲料的组成可用第二章表2—7的典型配方。但其中的酪蛋白和明胶用优质鱼粉代为简便起见，也可直接使用市售鱼用饲料，经重新粉碎后使用。 全部试验饲料要统—制作。所有干性原料要经粉碎，并通过100目筛。化学纯Cr 2O 3，也要经过100目筛。按每千克干饲料的1％准确称取Cr 2O 3，与少量的干性原料混合，分四级逐步扩大到全部干性饲料组分，充分混合均匀，混合操作可在大白搪瓷盆进行。因Cr 2O 3为绿色，所以从盆壁上是否留有团状绿色痕迹来判断混合的均匀程度，若有必要，可进行均匀度检查，变异系数要求小于5%。混合均匀程度决定试验的成败。平均每组制作200g 饲料。 二、 投饲与粪便采集 蛋白质消化率 蛋白质消化率是指一种食物蛋白质可被消化酶分解的程度。蛋白质消化率越高，被人体吸收利用的可能性越大，营养价值也越高。蛋白质消化率的计算方法：蛋白质消化率=蛋白质中被消化吸收的氮的数量/食物中含氮总量*100% 比如，在日常生活中，大豆类产品，如豆腐和豆浆中的蛋白质消化率都很高 2012年营养师报考条件最新更新https://www.doczj.com/doc/2a5491495.html, 世纪合众营养学院提供营养保健师报考条件点击了解营养保健师报考条件400-66.. 定氮仪/凯氏定氮仪https://www.doczj.com/doc/2a5491495.html, 上海勇规自主研发生产销售凯氏定氮仪,不外排SO2,为企业量身打造更经济适用! 百度推广食物蛋白质消化率(digestibility)是反映食物蛋白质在消化道内被分解和吸收的程度的一项指标;是指在消化道内被吸收的蛋白质占摄入蛋白质的百分数;是评价食物蛋白质营养价值的生物学方法之一.一般采用动物或人体实验测定,根据是否考虑内源粪代谢氮因素,可分为表观消化率和真消化率两种方法. 1蛋白质表观消化率[apparent protein(N) digestibility] 即不计内源粪的蛋白质消化率,通常以动物或人体为实验对象,在实验期内,测定实验对象摄入的食物氮和从粪便中排出的氮,然后计算:蛋白质表观消化率(%)=(I-F)/I*100 式中I代表摄入氮,F代表粪氮 2蛋白质真消化率[true protein digestibility] 考虑粪代谢时的消化率,粪中排出的氮实际上有两个来源.一是来自未被消化吸收的食物蛋白质;二是来自脱落的肠粘膜细胞以及肠道细菌等所含的氮.通常以动物或人体为实验对象,首先设置无氮膳食期,即在实验期内给予无氮膳食.成人24小时内粪代谢氮一般为0.9-1.2g;然后再设置被测食物蛋白质实验期,实验期内摄取被测食物,再分别测定摄入氮和粪氮.从被测食物蛋白质实验期的粪氮中减去无氮膳食期的粪代谢氮,才是摄入氮和粪氮.从被测食物蛋白质实验期的粪氮中减去无氮膳食期的粪代谢氮,才是摄入食物蛋白质中真正未被消 几种蛋白原料的体外消化率的测定方法的比较 摘要：试验分别采用胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法、肉食性鱼类（如鲈鱼）消化道粗酶提取液消化法和草食性鱼类（如草鱼）消化道粗酶提取液消化法测定了酪蛋白、鱼粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉等7种蛋白质原料的体外消化率。3种测定方法中，鱼粉的消化率差异不显著（P>0.05）；豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉用两步法和草鱼消化酶法测定的消化率无显著差异（P>0.05）；棉籽粕消化率用两步法测定值高于用消化酶法的测定值，差异极显著（P<0.01）；豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉的消化率用两步法比用鲈鱼消化酶测定的值高，差异极显著（P<0.01）；草鱼消化酶法和鲈鱼消化酶法对酪蛋白的消化率无显著差异（P>0.05），而对于豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉草鱼消化酶法测定值高于鲈鱼消化酶法的测定值，差异极显著（P<0.01）。结果表明，胃蛋白酶-胰蛋白酶两步体外消化法在测定鱼粉蛋白质消化率时可替代鱼类消化液粗酶消化法，对其它蛋白质原料使用该方法应慎重。 关键词：蛋白质饲料；体外消化率；测定方法 消化率是动物从食物中所消化吸收的部分占总摄入量的百分比，是评价饲料营养价值的重要指标之一。测定饲料消化率主要有两种方法：体外法和体内法。体内法测定的消化率能够比较真实的反映鱼类对饲料的消化情况。但体内法测定方法复杂、时间长、费用高，而且对外界环境的要求较高，季节、温度、光照等都会影响消化率测定值。体外消化法是利用精制的消化酶或研究对象的消化道酶提取液在试管内进行的消化试验，其测定值可近似反映鱼对饲料的消化率。此法能快速测定原料的相对利用率，为营养师制作配方提供参考[1]。然而，体外消化法无法反映体内消化的真实情况。Boisen和Eggum（1991）在胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法中利用标准过滤装置测得饲料蛋白质消化率与鼠和猪的真消化率十分接近，他们认为这种方法测得的蛋白质体外消化率经内源氮校正与回肠末端蛋白质表观消化率高度相关。我国饲料原料品种多，营养成分含量差异大，加工方式各异，饲料原料对不同鱼类的营养价值差异更大。由于鱼类生活在水中，测定鱼类饲料真消化率比测定畜禽的更加困难。所以寻找一种准确、简便、实用的消化率测定方法对评价鱼类饲料的消化率有着十分重要的意义。本试验采用胃蛋白酶-胰蛋白酶两步体外消化法以及从肉食性和草食性鱼类的消化道提取消化酶在体外消化饲料的方法，测定了7种常用蛋白质饲料原料的消化率，为饲料生产者配制鱼用饲料提供基础数据，同时为体外测定鱼用蛋白质原料消化率提供参照。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 饲料原料 酪蛋白、鱼粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉，均为经105℃烘干处理的样品，粉碎过60目筛后保存备用。 1.1.2 主要试剂 硫酸（GB 625—77）、硫酸铜（GB 665—78）、硫酸钾（HG 3—920—76）和氢氧化钠（GB 629—77），均为分析纯。 硼酸（GB 628-78）（分析纯）：2g溶于100ml水配成2%溶液（W/V）。 混合指示剂：甲基红（HG 3—958—76）0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3—1220—79）0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，阴凉处保存期三个月以内。0.05mol/l HCl溶液：取4.2ml浓盐酸，用蒸馏水定容至1L。 标定甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：取20 ml 0.1%甲基红酒精溶液，与20ml 0.5%溴甲酚绿酒精溶液，混匀。 收稿日期:2001-02-13 《淡水渔业》2001年第31卷第3期 草鱼对九种饲料的干物质、蛋白质和脂肪的表观消化率 罗 莉 林仕梅 叶元土 (西南农业大学水产系,重庆400716) 摘要 本试验采用外源指示剂(C r2O 3),测定了草鱼种对玉米、麦麸、次粉、米糠、标粉、小麦、大麦、玉米糟和稻谷九种能量饲料的干物质、粗蛋白和粗脂肪的表观消化率。试验结果表明:草鱼对九种能量饲料的干物质表观消化率大小顺序为:小麦(88.17%)>标粉(79.39%)>玉米(77.57%)>麦麸(62.67%)>玉米糟(62.61%)>次粉(61.64%)>大麦(59.97%)>稻谷(51.21%)>米糠(47.41%);粗蛋白表观消化率大小顺序为:小麦(87.06%)>米糠(76.36%)>麦麸(73.20%)>次粉(71.53%)>玉米糟(70.99%)>标粉(67.03%)>玉米(64.543%)>稻谷(64.33%)>大麦(59.36%);粗脂肪表观消化率大小顺序为:小麦(82.49%)>玉米糟(78.32%)>标粉(75.22%)>玉米(73.09%)>稻谷(58.99%)>次粉(53.22%)>麦麸(52.42%)>大麦(50.09%)。 关键词 草鱼 饲料原料 蛋白质 脂肪 消化率 消化率是指被动物消化吸收的养分占食入养分的百分率。无论对饲料原料,还是全价配合饲料,消化率都是评定其营养价值高低的重要参数之一。 在水产养殖业大力发展,和作为我国主要淡水经济鱼类的草鱼,其市场售价日益下降的今天,配制能满足草鱼需要的营养平衡饲料,并尽可能提高配合饲料的可消化性、可利用性,以降低饲料系数和草鱼养殖饲料成本,这便成了众多营养研究者、饲料生产者和养殖户共同关心的问题。然而,配制营养平衡的饲料的一个重要前提是要了解饲料原料的消化率。基于此,本试验测定了草鱼对九种饲料原料干物质,蛋白质和脂肪的表观消化率,希望能为草鱼饲料营养价值的评定,以及更合理地设计草鱼饲料配方提供一部分依据。1 材料和方法1.1 试验鱼 试验草鱼由本系试验渔场提供,体重为150～200g ,平均体重180±18g 1.2 试验用箱与试验用水 试验在20个循环流水的圆锥型玻璃钢材料水 族缸中进行。每个缸容积为0.25m 3(见图1),水源为曝气去氯后的自来水,每一水族缸配有一充气头充氧,每天换水量1/5。养殖用水每隔0.5小时循环一次,用80目筛网过滤去除饲料、粪便及脱落鳞片等残渣后,经沉淀池沉淀,再用生物膜去除氨氮。试验期间水质保持在溶解氧6mg /L 以上,pH6.5左右,水温23℃±1 ℃。 图1 单个养殖箱示意图 1.3 试验饲料的配制 试验饲料由70%的基础饲料和30%的被测饲料原料组成(见表1)。基础饲料由鱼粉、豆粕、菜粕、次粉和a -淀粉组成,其配方和营养成分见 单胃动物对粗蛋白质消化，是在消化道内地胃蛋白酶、胰蛋白酶、肠蛋白酶作用下 分解为氨基酸.大部分氨基酸是在小肠中被吸收进入血液地，随血液进入身体各种组织地细胞中.细胞根据需要将氨基酸合成体蛋白质或畜产品. 细胞根据需要将氨基酸合成体蛋白质或畜产品 未被细胞利用地氨基酸进行脱氨基作用，所产生地氨基[]或者再重新合成非必需氨基酸或者在肝脏中形成尿素随着尿液排出体外.氨基酸脱氨基后地碳架或者与氨基结合再度合成必需氨基酸或者氧化释放热量，或者合成体脂肪及时糖原.. 饲料中蛋白质在单胃动物体内消化代谢如图—所示 畜体对氨基酸地利用是有选择性地. 饲料蛋白质中氨基酸符合家畜地需要，[知觉地选择性] 合成畜体蛋白质或合成畜产品蛋白质地数量就多，此种蛋白质地营养价值高. 可见，饲料蛋白质地营养价值取决于构成它地氨基酸地种类. （二）氨基酸地种类 根据氨基酸在家畜体内能否合成地数量多少来分析，将氨基酸分为二类. 必需氨基酸必需氨基酸是拽在家畜体内不能合成或能合成地数量不能满足正常生长发育生产……地需要，必须由饲料供给地氨基酸. 家畜所处于地生理阶段不同，成年家畜维持生命需要八种氨基酸，即赖蛋色、苯丙缬苏亮异亮，精组..生长家畜除了上述八种氨基酸外，还需要精组氨基酸.对于雏禽来讲还需要甘氨酸共计种氨基酸.其他生长动物共需要种必需氨基酸. 非必需氨基酸在家畜体内能利用其他氨基酸转化或者利用氮源合成，不是必需由饲料供给地氨基酸，如丙氨酸、、天门冬氨酸、、瓜氨酸胱氨酸、、谷氨酸、、羟脯氨酸、、脯氨酸、、丝氨酸、、酪氨酸、、甘氨酸 （）丙氨酸 （）天冬氨酸：天冬氨基酸 （）胱氨酸： （）谷氨酸：谷氨基酸 （）脯氨酸： ＼∕ （）丝氨酸：丝氨基酸 （）酪氨酸 （）甘氨[ 酸甘氨基酸 例如日粮中胱氨基酸不足时，由蛋氨基酸转化；酪氨基酸不足时，由苯丙氨酸转化；；丝氨酸不足时，由甘氨酸转化.在生产上我们尽可能避免这一转化，不能忽视非必需氨基酸地重要，所以在日糖中应有一定地蛋白质水平. 蛋白质的生理功能 (1）构成和修复组织 蛋白质是构成机体组织、器官的重要成分，人体各组织、器官无一不含蛋白质。在人体的瘦组织中，如肌肉组织和心、肝、肾等器官均含有大量蛋白质；骨骼、牙齿、乃至指、趾也含有大量蛋白质；细胞中，除水分外，蛋白质约占细胞内物质的80％。因此，构成机体组织、器官的成分是蛋白质最重要的生理功能。身体的生长发育可视为蛋白质的不断积累过程。蛋白质对生长发育期的儿童尤为重要。 人体内各种组织细胞的蛋白质始终在不断更新。例如，人血浆蛋白质的半寿期约为10天，肝中大部分蛋白质的半寿期为1～8 天，某些蛋白质的半寿期很短，只有数秒钟。只有摄入足够的蛋白质方能维持组织的更。身体受伤后也需要蛋白质作为修复材料。 (2) 调节生理功能 机体生命活动之所以能够有条不紊的进行，有赖于多种生理活性物质的调节。而蛋白质在体内是构成多种重要生理活性物质的成分，参与调节生理功能。如核蛋白构成细胞核并影响细胞功能；酶蛋白具有促进食物消化、吸收和利用的作用；免疫蛋白具有维持机体免疫功能的作用；收缩蛋白，如肌球蛋白具有调节肌肉收缩的功能；血液中的脂蛋白、运铁蛋白、视黄醇结合蛋白具有运送营养素的作用；血红蛋白具有携带、运送氧的功能；白蛋白具有调节渗透压、维持体液平衡的功能；由蛋白质或蛋白质衍生物构成的某些激素，如垂体激素、甲状腺素、胰岛素及肾上腺素等等都是机体的重要调节物质。 (3) 供给能量 蛋白质在体内降解成氨基酸后，经脱氨基作用生成的仅一酮酸，可以直接或间接经三羧酸循环氧化分解，同时释放能量，是人体能量来源之一。但是，蛋白质的这种功能可以由碳水化合物、脂肪所代替。因此，供给能量是蛋白质的次要功能。 6、食物蛋白质的营养评价 （1）食物蛋白质含量 食物蛋白质含量是评价食物蛋白质营养价值的一个重要方面。蛋白质含氮量比较恒定，故测定食物中的总氮乘以蛋白质折算系数6.25，即得蛋白质含量。 （2）食物蛋白质消化率 食物蛋白质消化率是反映食物蛋白质在消化道内被分解和吸收的程度的一项指标；是指在消化道内被吸收的蛋白质占摄入蛋白质的百分数；是评价食物蛋白质营养价值的生物学方法之一。一般采用动物或人体实验测定，根据是否考虑内源粪代谢氮因素，可分为表观消化率和真消化率两种方法。 1) 蛋白质表观消化率 即不计内源粪氮的蛋白质消化率。通常以动物或人体为实验对象，在实验期内，测定实验对象摄人的食物氮(摄入氮)和从粪便中排出的氮(粪氮)，然后按下式计算：蛋白质(n)表观消化率(％)=(i-f)／i×100 式中l 代表摄入氮，f 代表粪氮 2) 蛋白质(n)真消化率 考虑粪代谢时的消化率。粪中排出的氮实际上有两个来源。一是来自未被消化吸收的食物蛋白质；二是来自脱落的肠粘膜细胞以及肠道细菌等所含的氮。通常以动物或人体为实验对象，首先设置无氮膳食期，即在实验期内给予无氮膳食，并收集无氮膳食期内的粪便，测定氮含量，无氮膳食期内的粪氮即粪代谢氮。成人24 小时内粪代谢氮一般为0.9～1.2g；然后再设置被测食物蛋白质实验期，实验期内摄取被测食物，再分别测定摄人氮和粪氮。从被测食物蛋白质实验期的粪氮中减去无氮膳食期的粪代谢氮，才是 胃、小肠(包括十二指肠、空肠、回肠)和大肠(包括盲肠、阑尾、结肠、直肠)。在临床上，常把消化道分为上消化道(十二指肠以上的消化道)和下消化道(十二指肠以下的消化道)。 (1) 人的胃中含有盐酸和胃蛋白酶。盐酸只是为胃蛋白酶的活性提供最佳PH值：1.5-2.5。盐酸不可能将多肽变为氨基酸！！ 胃蛋白酶不能使肽链分解为单个氨基酸，只能水解连接某几种氨基酸的肽键。如酪氨酸与苯丙氨酸之间的肽链等。也就是说，蛋白质在胃中水解非常有限，胃中更不存在氨基酸！蛋白质在胃中不存在吸收！！！ 蛋白质的彻底消化以及吸收全部是在小肠里。小肠中有胰腺分泌的胰蛋白酶，胰糜蛋白酶，和小肠分泌的氨基肽酶，二肽酶等，多种方式分步的将多肽链水解为氨基酸。 氨基酸的吸收是通过主动运输透过小肠绒毛上皮进入血液的。 (2) 消化在胃腔内开始，由小肠的上皮细胞最后完成。胃蛋白酶是胃内最重要的消化酶，也是人胃液中仅有的蛋白水解酶，在pH为2.0~3．O时活性最高，pH高于5．O时失活。正常胃液的pH使胃蛋白酶原迅速激活成为胃蛋白酶，激活后的胃蛋白酶又能激活胃蛋白酶原，生成更多的胃蛋白酶，通过这种正反馈作用，酶原变成酶的过程大大加快。胃蛋白酶消化的最重要的特点是能够消化胶原蛋白，胶原是肉类食物细胞间连接的主要成分，是一种不易被其他消化酶所影响的纤维蛋白。胃蛋白酶没有很强的专一性，除不能水解黏液蛋白外，能将各种水溶性蛋白质都水解成多肽。它主要水解由苯丙氨酸、酪氨酸及亮氨酸残基组成的肽键，从而生成大小不等的、分子量较小的多肽。胃蛋白酶的作用仅仅是蛋白质消化的初始阶段，食物中的蛋白质大约只有lO%~20%在胃中被转化成朊间质、蛋白胨和少量多肽。 食物中的大部分蛋白质是在十二指肠和空肠内经胰腺分泌的蛋白水解酶如胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧基肽酶和弹性蛋白酶等进行消化的。胰蛋白酶和糜蛋白酶能将蛋白质分子裂解为小的多肽，羧基肽酶能将多肽羧基末端的单个氨基酸水解，而弹性蛋白酶可消化肉类食物中的弹性纤维。在这个阶段仅有很小的一部分蛋白质能被水解成单个氨基酸，大部分被消化成二肽、三肽甚至更大的肽。 蛋白消化的最后阶段是在小肠肠腔内由分布在肠绒毛的肠上皮细胞完成，小肠上皮细胞的纹状缘有成千上万的微绒毛突向肠腔，每个微绒毛的表面都含有多种肽酶，以氨基肽酶和几种二肽酶最为重要，它们能将较大的多肽裂解为三肽，二肽甚至单个氨基酸，从而使之更容易被转运进入微绒毛的肠上皮细胞内。肠上皮细胞的胞质中含有多种能将氨基酸之间的肽键裂解的肽酶，可在几分钟之内将三肽、二肽消化成单个氨基酸，然后通过肠上皮细胞的基底部吸收入血。在通常情况下，蛋白质消化终产物的99%都是单个氨基酸，只有极少部分以肽的形式被吸收。 (一)蛋白质在胃中的消化 食物蛋白质的消化从胃中开始。胃液中的胃蛋白酶(pepsin)在胃液的酸性条件下特异性较低地水解各种水溶性蛋白质，产物为多肽、寡肽和少量氨基酸。胃蛋白酶还有凝乳作用，可使乳儿食人的乳液在胃中充分消化。胃蛋白酶原在胃酸以及自身作用被激活。 有还原烷基化蛋白质消化操作流程 1.将所选择的胶点用1.5mm切胶笔切下，置于eppendorf (EP) 管或96孔PCR板 中,并记录点号及相应的位置； 2.加50μL DD.H2O 洗两次，10min/次； 3.加50 mM NH4HCO3/乙腈=1：1溶液(考染脱色液)50μL，超声脱色5min或37℃ 脱色20min，吸干；(若为银染, 一般不需要脱色; 若必须脱色,使用15mM K3Fe(CN)6/50mM Na2S2O3 , 轻摇直到变为淡黄色透明,再用水反复洗至无色) 4.重复步骤3，直至蓝色褪去； 5.加乙腈50μL脱水至胶粒完全变白，真空抽干10min； 6.加10 mM DTT（10μL 1M DTT，990μL 25mM NH4HCO3配制） 20μL，56℃ 水浴1hr； 7.冷却到室温后，吸干，快速加55 mM IAM （55μL 1M IAM，945μL 25mM NH4HCO3配制）20μL，置于暗室45min； 8.依次用25 mM NH4HCO3 ( 2X10分钟)、25 mM NH4HCO3 +50％乙腈溶液( 2X10 分钟)和乙腈洗(10分钟)，乙腈脱水到胶粒完全变白为止，真空抽干10min； 9.将0.1μg/μL的酶储液以25 mM NH4HCO3稀释10~20倍，每EP管加2~3μL， 稍微离心一下，让酶液充分与胶粒接触，4℃或冰上放置30min，待溶液被胶块完全吸收，加25mM NH4HCO3 至总体积10-15μL置37℃，消化过夜； 10.加入甲酸终止反应，使甲酸终浓度为0.2％，振荡混匀，离心。 说明: 1.每加一次溶液都要漩涡振荡，胶粒要完全浸没在溶液中，进行下一步操作前要把溶液吸走。 2．如果胶粒超过1.5mm3,把胶粒分成约为1.5mm3大小再进行脱色，使用的各种溶液的量也相应增加。 3．实验过程中一定要注意使用的溶液和器具的洁净，防止角蛋白污染，并带 动物蛋白质饲料消化率地测定 适用范围 本方法适用于所有动物性蛋白质饲料，不适用于植物性蛋白质或混合饲料消化率地胃蛋白酶测定方法. 原理概要 脱过脂地试样，用温热地胃蛋白酶溶液，在恒温、持续不断地搅拌下消化，过滤分离不溶性残渣，洗涤、干燥，测定残渣地粗蛋白含量.同时，测定空白和脱脂未酶解试样地粗蛋白含量. .主要试剂和仪器 主要试剂 胃蛋白酶溶液(％)：将浓盐酸稀释至水中(溶液～)，加热至～℃，加入活性为∶生化级胃蛋白酶〔若活性不是∶，可使用活性∶生化级胃蛋白酶(不可使用非生化级胃蛋白酶)，应注意胃蛋白酶溶液中胃蛋白酶浓度应为每毫升〕，并缓慢搅拌直至溶解.勿在加热板上加热胃蛋白酶溶液或配制时过热.临用前配制. 乙醚；丙酮； 定氮试剂： 硫酸（含量，无氮）； 混合催化剂：硫酸铜（个结晶水），硫酸钾()或硫酸钠()，磨碎混匀； 氢氧化钠[水溶液（）]； 硼酸[水溶液（）]； 混合指示剂：甲基红乙醇溶液，溴甲酚绿乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月； 盐酸标准溶液：（邻苯二甲酸氢钾法标定，） 量取下述规定体积地盐酸，注入水中，摇匀. () 盐酸， 盐酸标准溶液（）盐酸注入蒸馏水中； 盐酸标准溶液（）：盐酸注入蒸馏水中； 蔗糖；硫酸氨（干燥）； 硼酸吸收液：硼酸水溶液（），加入溴甲酚绿乙醇溶液，甲基红乙醇溶液，氢氧化钠水溶液，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序）. 仪器 恒温式平转摇床：温控范围～℃，式或空气浴式均可，转速可调(水浴～) 实验室用样品粉碎机； 分样筛：孔径（目）； 分析天平：感量； 消煮炉或电炉； 滴定管：酸式，、； 凯氏烧瓶； 凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式；食物蛋白质消化率
实验一 鱼类饲料的总消化率及其
蛋白质消化率
几种蛋白原料的体外消化率的测定方法的比较
草鱼对九种饲料的干物质_蛋白质和脂肪的表观消化率_罗莉
单胃动物对粗蛋白质消化
蛋白质及消化率
蛋白质的消化吸收
蛋白消化流程
MM_FS_CNG_0236 动物蛋白质饲料消化率的测定
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