注：１为空白组，２为低剂量组，３为中剂量组，４为高剂量组，５为西药组，６为模型组
图１各组大鼠子宫内膜ＥＲ、ＰＲ及
整合素％、１３，蛋白表达
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注：ｌ为空白组，２为低剂量组，３为中剂量组，４为高剂量组，５为西药组，６为模型组；与空白组比较，＋Ｐ＜０．０５，与
模型组比较，叩＜０．０５；下图同
图２各组大鼠整合素１３，表达
ｌ
２
３
４
５
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图３各组大鼠整合素ｄ，表达
０．０１）；补肾助孕方各剂量组明显高于模型组（Ｐ＜
０．０５）。
３各组ＰＲ的表达（图４）模型组子宫内膜ＰＲ
蛋白水平表达高于空白组（Ｐ＜０．０５）；补肾助孕方低、中剂量组明显低于模型组（Ｐ＜０．０５）。
４各组ＥＲ的表达（图５）模型组子宫内膜ＥＲ
蛋白水平表达显著高于空白组（Ｐ＜０．０５）；中药各剂
量组明显低于模型组（Ｐ＜０．０５）。
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图４各组大鼠ＰＲ表达
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图５各组大鼠ＥＲ表达
讨论
近年来许多学者对垂体、卵巢分泌的激素及子宫内膜细胞ＥＲ、ＰＲ等与黄体功能关系开展了较多研究，发现血清Ｅ：与子宫内膜ＥＲ、ＰＲ表达呈正相关，血清Ｐ与子宫内膜ＥＲ、ＰＲ呈负相关，正常子宫内膜增生晚期在Ｅ，作用下ＥＲ、ＰＲ高表达，分泌期子宫内膜在Ｐ作用下ＥＲ、ＰＲ表达下降，ＬＰＤ患者由于分泌期Ｐ不足，ＥＲ、ＰＲ表达不下调。子宫内膜分泌中期由于孕激素水平升高，子宫内膜上皮细胞ＥＲ、ＰＲ的表达下调，认为这是胚泡着床的必要条件之一¨’。还有学者对不孕人群中着床期内膜ＰＲ与代表内膜容受性的整合素（仅，、Ｂ，和仅。、１３。）之间的关系进行研究，发现ＬＰＤ的患者着床期子宫内膜上皮ＰＲ表达水平显著高于其他对照组，整合素ｄ，、１３，的表达在ＬＰＤ组显著下降¨。。
子宫内膜容受性是指母体子宫内膜对囊胚的接受能力。其形成过程在人类相当于月经周期的第１９—２４
天，称为“着床窗口期”。子宫内膜容受性的形成除雌、孕激素外，还需要多种分子参与调节，包括细胞因子、酶、前列腺素、糖复合物、胎盘蛋白、同源框基因以及可能尚未发现的因素也在起作用。着床窗口期这些分子表达改变，导致子宫内膜形态学改变，包括：腺体增生并转化为分泌相，腔上皮细胞表面胞饮突形成，螺旋小动脉扩张，血管新生，通透性增加，间质水肿，从而营造利于囊胚着床的环境。其中胞饮突、整合素Ｑ，、１３，等是子
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补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜ER、PR及整合素α5、
β3蛋白表达的影响
作者：周惠芳， 李爱萍， 谈勇， ZHOU Hui-fang， LI Ai-ping， TAN Yong
作者单位：周惠芳,谈勇,ZHOU Hui-fang,TAN Yong(南京中医药大学,南京,210029)， 李爱萍,LI Ai-ping(南京医科大学)
刊名：
中国中西医结合杂志
英文刊名：CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
年，卷(期)：2009，29(7)
被引用次数：1次
参考文献(7条)
1.周惠芳"助孕汤"治疗黄体功能不全性不孕202例临床研究[期刊论文]-江苏中医 2001(01)
2.周惠芳助孕合剂治疗黄体功能不全性不孕流产的临床及实验研究[期刊论文]-中国中医药信息杂志 2001(03)
3.L essey BA.Yeh I.Castelbaum AJ Endometrial progesterone receptors and markers of uterine receptivity in the window of implantation 1996(03)
4.汪宏波.占海英.李红发黄体功能不全患者着床期子宫内膜雌孕激素受体的表达及超微结构改变[期刊论文]-中国妇幼保健 2004(11)
5.赵明智米非司酮对子宫内膜容受性的影响[期刊论文]-国外医学计划生育分册 2005(01)
6.Sun XX.Qi XY.Kristina GD Effects of mifepristone on expression of endothelial nitric oxide synthase in human endometrium during the implantation phase 2003(06)
7.Lessey BA Adhesion molecules and implantation 2002(1-2)
相似文献(2条)
1.期刊论文周惠芳.蒋凤荣.顿文亮.谈勇补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜及卵巢形态学的影响.-陕西中医
2009,30(1)
目的:观察补肾助孕方对SD大鼠胚胎着床期子宫内膜及卵巢的形态学变化,探讨补肾助孕方治疗黄体功能不全性不孕症的机理.方法:将SD雌性大鼠随机分成空白组、模型组、西药组和中药补肾助孕方低、中、高剂量组,西药组及中药低、中、高剂量组均预防性用药2个性周期,然后按雌、雄比例为
2:1配以同种雄鼠合笼,于妊娠第3d灌服米非司酮1mg/100g(10mg/kg),妊娠第5d颈总动脉取血3ml后处死,光镜观察子宫内膜及卵巢的形态,透射电镜观察卵巢黄体细胞的超微结构.化学发光法测定血清E2、P、LH、FSH的水平.结果:中药补肾助孕方中、高剂量组与模型组比,能明显促进胚胎着床期子宫内膜的生长及子宫内膜腺体的增生和发育;中药补肾助孕方中、高剂量组与模型组比,能明显促进胚胎着床期卵巢黄体细胞的发育.结论:中药补肾助孕方通过促进子宫内膜的生长、促进子宫内膜腺体的发育,使腺体和间质发育同步;促进卵巢黄体细胞的增生和改善黄体细胞的结构,从而提高子宫内膜的容受性、提高黄体功能,有利于胚胎着床和发育.
2.学位论文周惠芳补肾助孕方治疗黄体功能不全性不孕症的机理研究2008
目的：为了阐明名老中医经验方一补肾助孕方治疗黄体功能不全性不孕症的作用机理，进行了有关：(1)黄体功能不全(Luteal phase
defect，LPD)动物模型的研究；(2)补肾助孕方对模型大鼠卵巢、子宫内膜的形态结构的改变，血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)的变化，以及子宫内膜雌激素受体(estrogenreceptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)和整合素αvβ3的蛋白水平表达，以及对子宫内膜容受性影响的研究。探寻其作用机理，为临床应用补肾助孕方治疗LPD性不孕症提供更多的实验依据，明确补肾助孕方治疗LPD性不孕症的作用途径和靶点，为研究开发中医药提供科学依据。
方法：选用雌性SD大鼠90只，同种雄性SD大鼠45只。遵循随机的原则将雌鼠分为空白对照组、模型组、西药对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组
6组，每组15只，每日颗粒饲料喂养，自由饮水。适应性饲养3天后，分别观察每只雌鼠的性周期，剔除性周期差异大的雌鼠.空白对照组和模型组：灌服生理盐水，1ml/100g，1次/日，连续8日；西药组：动情期后灌服地屈孕酮，0.21mg/100g，1次/日，连续2日，间隔2日后，再灌服地屈孕酮
，0.21mg/100g，1次/日，连续2日。中药低剂量(含生药)0.98g/100g、中剂量组(含生药)1.96g/100g、高剂量组(含生药)3.92g/100g，动情期后分别灌服制备好的补肾助孕方浓缩液1次/日，连续2日。间隔2日后，再灌服制备好的补肾助孕方浓缩液1次/日，连续2日。
第9日晚起，按雌、雄比例为2:1各组随机予雄鼠每晚8:30合笼，次日晨7:30给雌鼠做阴道涂片，以发现精子或阴栓为妊娠第一天；于妊娠第三天，除空白对照组外，其余各组给米非司酮1mg/100g灌胃，共1次；妊娠第五天下午2:00称重、颈总动脉取血3 ml后处死，处死当天禁食、禁药不禁水。分离血清以化学发光法测定E2、P、LH、FSH。留取一侧卵巢及子宫标本病理检查；取另一侧子宫中段约1cm放入Eppendorf管后置-70℃冰箱保存，以Western
blot方法测定子宫内膜ER、PR、整合素Ov、β3的蛋白水平表达。取另一侧卵巢标本电镜观察。
结果：1、光镜观察可见：(1)子宫内膜：空白对照组：内膜上皮为柱状细胞，排列整齐，间质比较致密。间质和腺体发育同步，可见核空泡，间质蜕膜样变。模型组：内膜厚度明显变薄，间质以分泌期改变为主，疏松、水肿，部分间质致密。间质和腺体发育明显不同步，腺上皮变薄。腺体以增殖期改变为主，腺体小而直，数目少，可见核下空泡。本方低剂量组：内膜厚度变薄，间质疏松，水肿，部分间质致密，与模型组相似。中剂量组：内膜上皮排列整齐，间质比较致密，上皮厚度略变薄，腺体与间质发育同步，腺腔扩张，分泌物多，可见核下空泡，间质蜕膜样变，间质细胞核分裂相多见，与空白组、西药组相似。高剂量组：内膜上皮排列整齐，间质比较致密，与空白组、西药组相似。(2)卵巢标本可见：空白对照组：原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡，黄体数目较多。间质少，间质腺少见。模型组：卵泡，黄体较少，体积减小，有较多间质腺。中药低、中、高剂量组及西药对照组：黄体数目较多，间质少，间质腺少见。
>100ng/L，但两组之间有显著性差异(**P<0.01)，与空白对照组之间也有显著性差异(△P<0.01)；空白组、西药组、中剂量组、高剂量组的E2均值是30-40 ng/L，组间无显著性差异，而与模型组比均有显著性差异(**P<0.01)。
4、模型组子宫内膜整合素αv、β3蛋白的表达显著低于空白对照组和中药中剂量组、高剂量组；模型组子宫内膜PR、ER蛋白的表达显著高于空白对照组和中药低剂量、中剂量组、高剂量组；中药中剂量组、高剂量组子宫内膜整合素αv、β3蛋白的表达及PR、ER蛋白的表达与空白对照组之间无显著性差异。
结论：1、采用米非司酮诱导的黄体功能不全(LPD)的大鼠模型各参数符合模型要求，并对该模型的子宫、卵巢的形态学，子宫内膜的ER、PR及整合素
αvβ3的蛋白水平、子宫内膜的容受性，及血清E2、P、LH、FSH水平等方面进行了研究，结果与报道的LPD的指标相似，因此，可以认为本模型是一种理想的研究LPD的动物模型。
2、补肾助孕方高、中剂量组能明显促进子宫内膜的生长，促进腺体的发育，使腺体和间质发育同步，恢复到胚胎着床期正常的子宫内膜形态，提高内膜的容受性，为孕卵着床奠定基础。
3、补肾助孕方高、中、低剂量组均能明显促进卵巢黄体细胞的增生；改善线粒体肿胀；改善内质网排列的结构和增加其数量。因此说明本方可能就是通过促进卵巢黄体细胞的增生和改善黄体细胞的结构，增加黄体细胞分泌孕激素的功能，有利于胚胎着床和发育。
4、补肾助孕方能有效下调孕激素受体拮抗剂米非司酮所致大鼠胚胎着床期子宫内膜ER、PR的蛋白水平表达，同时并能显著升高大鼠胚胎着床期子宫内膜整合素αvβ3的蛋白水平表达。因而，可以说明补肾助孕方是通过下调LPD性不孕症患者胚胎着床期子宫内膜的ER、PR的水平，同时升高其胚胎着床期子宫内膜整合素αvβ3的蛋白水平，提高患者子宫内膜的容受性而改善不孕症提高受孕率的。
5、补肾助孕方能通过有效地下调胚胎着床期过高的E2水平，使P/E2值升高，营造有利于胚胎着床的内环境，从而使胚胎能够着床发育。
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下载时间：2010年12月31日