酚试剂分光光度法测定室内甲醛实验报告
班级：130223 姓名：董子薇
一、 实验目的
1） 测定空气中甲醛浓度，掌握酚试剂分光光度法测甲醛原理； 2） 学会配置硫酸铁铵、酚试剂、标定甲醛等技能； 3） 学会使用分光光度计。
二、 实验原理
酚试剂，化学名称为盐酸-3-甲基-2-苯并噻唑酮腙，分子式为C 6H 4SN （CH 3）CNNH 2?HCI ，简称MBTH 酚试剂可与甲醛发生缩合反应（酚试剂作为甲醛吸收剂，显色剂）。 （该方法当采样体积为 10L 时，测定
浓度下限范围为 m 3?，mg/m 3）
甲醛在纯水中很不稳定， 当在%酚试剂吸收液中则可稳定 20h ，故甲醛标准稀溶液选用含
%酚试剂的
吸收液配制。
空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪（ A ），嗪与酚试剂的氧化物（B ）在酸性溶液中被高铁离子氧化
形成蓝绿色化合物，颜色深浅与甲醛含
量成正比，通过比色定量。反应方程式如上：
注意：酚试剂是过量的，其某一部分吸收甲醛形成
A ，剩下的酚试剂在高铁离子的氧化作用下，形
成中间体B ，A 与B 发生1:1定量加成反应，形成了蓝绿色的二缩合甲醛 -3-甲基-2-苯并噻唑酮腙。作为
氧化剂的硫酸铁铵在该反应中也是过量的，而且氧化反应和加成反应都需要一定的时间，这就是为什么 酚试剂吸收甲
醛，在加入硫酸铁铵后要等待
15min 后再测定的原因。
三、试验用试剂
H 3C
CH 3 酚试剂|
NH +CH 3
+出。
(A)嗪
H 3C
+ Fe 3
酚试剂
[O]
(A)+(B)
CH 3 N
N (B
)
+
Fe 3
[1
—NH
蓝绿色
---- A
CH 3 NH-N
蓝绿色化合物
N ~NH 2
+
N
N
说明：本法中所用水均为重蒸馏水或去离子交换水，所用试剂纯度一般为分析纯度。
⑴吸收液原液：称量酚试剂，加水溶解，倾于50mL容量瓶中，加去离子水至刻度。置于冰箱中保
存，可稳定三天；(酚溶液浓度 ml)
⑵吸收液：量取吸收原液 5mL，加95mL去离子水。采样时临用现配；(酚溶液浓度 5 X 10?-5g/ml
(3)1%硫酸铁铵溶液：称量 1.0g硫酸铁铵［NH4Fe(SO4)2 ? 12H2O］用L盐酸溶解(最大的吸收峰值的位置为盐酸溶液浓度为 L时)，并稀释至100mL ； ( ml
(4)甲醛标准贮备溶液：可取含量为 36%?38%甲醛溶液，放入 1L容量瓶中，加
蒸馏水稀释至刻度，
此溶液1mL约相当于1mg甲醛，其准确浓度用碘量法标定：
精确量取甲醛标准贮备溶液，置于250mL碘量瓶中，加L碘溶液和15mL1mol/L氢氧化钠溶液，放置15min,加入L硫酸溶液，再放置15min，用L硫代硫酸钠溶液滴定至淡黄色，加％淀粉溶液1mL，继续滴定至蓝色刚好褪去，记录消耗体积V,同时用水作试剂空白滴定。
反应原理：甲醛溶液中，加碱液使溶液呈碱性后，加入一定量过量的碘，甲醛被氧化：
HCHO + I2 + 3NaOH = HCOONa + 2Nal + 2H 20
放置15分钟，待反应完全后，用硫酸酸化，以为指示剂，用Na2S2O3标准溶液滴定过量|2:
I2 + 2Na 2S2O3 = 2NaI + Na 2S4O6
按下式(*)计算浓度：
V V M 15
(*)
20
式中：C——甲醛标准贮备溶液中甲醛的浓度，mg/ml ；
V1 ――滴定空白时消耗硫代硫酸钠溶液体积，ml ；
V2――滴定甲醛溶液时消耗硫代硫酸钠溶液体积，ml ；
M――硫代硫酸钠标准溶液的当量浓度；15――甲醛的当量20――所取甲醛标准贮
存液的体积，ml
二次平行滴定，误差小于，否则重新标定。
(5) 甲醛标准溶液：
临用时，从甲醛标准贮备溶液中移
取溶液，倾于
100ml 容量瓶中，定容至刻度
线；立即再取此溶液，加入
100mL 容量瓶中，加入 5mL 吸收原液，用水定容至
100ml (此溶液含 卩g 甲 醛)，放置30min 后，用于配制标准色列管
(此标准溶液(标准工作液)可稳定 24h)。
(5)上面用到的试剂：
① 碘溶液C(1/2l 2)=L 。碘贮备液，C (1/212) =L :称取碘(12)于烧杯中，加入 4g 碘化钾和去离子 水，搅拌至完全溶解后，用水稀释至
100mL,贮于棕色细口瓶中，暗处贮存。碘溶液
C(1 /2I 2)=L :量取
碘贮备液25mL ，用水稀释至250mL ，贮于棕色容量瓶中。
② 1mol/L 氢氧化钠溶液： 称量4g 氢氧化钠，溶于水中，稀释至 100mL ;
③L 硫酸溶液：取浓硫酸缓慢加入水中，冷却后稀释至 100ml ;
碘酸钾标准溶液[C(1/6KIO3)=L]:准确称量经105 C 烘干2小时的(优级纯)，溶解于水，移入 100ml 容量瓶中，再用水定溶至
100ml 。
L 盐酸溶液：量取浓盐酸加水稀释至
100ml 。
④硫代硫酸钠标准溶液 C ( Na 2S 2O 3) =L :配制方法：硫代硫酸钠贮备溶液，
C ( Na 2S 2O 3)=L :称
取硫代硫酸钠(Na 2S 2O 3? 5H 2O)溶解于1000mL 新煮沸并已冷却的水中，加无水碳酸钠，贮于棕色细口瓶 中，放置一周后标定其浓度，若溶液呈现浑浊，过滤后使用。
标定方法：吸取L 碘酸钾溶液，置于 250mL 碘量瓶中，加75mL 新煮沸并已冷却的水和 3g 碘化钾，
振摇至完全溶解后，加 L 盐酸溶液10mL ，立即盖好瓶塞，摇匀。于暗处放置 3min 后，用L 硫代硫酸钠
贮备溶液滴定至淡黄色，加淀粉溶液 1mL ，继续滴定至蓝色刚好褪去，记录消耗的硫代硫酸钠贮备溶液
的体积V ，按下式(**)计算浓度：
式中：C ( Na 2S 2O 3)――硫代硫酸钠贮备溶液的浓度 ,mol/L ;
V
滴定消耗硫代硫酸钠溶液体积，
ml 。
平行滴定所用去的硫代硫酸钠溶液体积之差应不超过。否则重新标定。 硫代硫酸钠标准溶液
C ( Na 2S 2O 3) =L :取标定后的L 硫代硫酸钠贮备溶液 50mL ，置于500mL 容
量瓶中，用新煮沸并冷却的水稀释至标线，摇匀，贮于棕色细口瓶中。
C Na 2S ?O 3
0.1000 10.00
V
(** )
⑤%淀粉溶液：将可溶性淀粉，用少量水调成糊状后，再加入 100ml沸水，并煮沸2~3min至溶液透明。冷却后，加入水杨酸或氯化锌保存；
四、仪器及设备
（1）大型气泡吸收管：岀气口内径为1mm，岀气口至管底距离等于或小于5mm ；
（2）分光光度计：在630nm测定吸光度；
（3）恒流采样器：流量范围0 — 1L/min ;（流量稳定可调，恒流误差小于2%，采样前和采样后使用皂
膜流量计校准采样器的流量，误差应小于5% ;）
（4）具塞比色管：10mL ;
五、采样
1.标准
我国国家标准《居室空气中甲醛的卫生标准》（GB/T16127-1995 ）规定：居民空气中甲醛的最高容
许浓度为mg/立方米。
酚试剂分光光度法（GB/ — 2000）中建议的采样时间是 20min。用一个内装5ml吸收液的大型气泡吸收管，以L/min的流量，采气10L，并记录采样时采样点的温度和大气压力（采样后样品在室温下应在 24h内分析）
2.标准曲线的绘制：取10mL具塞比色管，按表 1配制标准系列。
六、分析步骤
采样后，将5ml样品溶液全部转入10ml比色管中，向各管中加入的1%硫酸铁铵溶液，摇匀，室
温下显色30分钟。用10mm比色皿，在630nm波长下，以水作参比（未采样5ml的吸收液做试剂空白）以甲醛含量为横座标，吸光度为纵座标，绘制曲线，并计算回归斜率，以斜率倒数作为样品测定的计算因子Bg（微克/吸光度）。
采样后，将样品溶液全部转入比色管中，用少量吸收液洗吸收管，合并使总体积为5ml，加入硫酸
铁铵溶液，显色15min。测定吸光度（A）;在每批样品测定的同时，用5ml未采样的吸收液作试剂空白，测
定试剂空白的吸光度（A0）。
七、结果可靠性分析
标准工作曲线
甲醛含量/卩g/5ml 吸光度Abs
六、结果计算
1.将采样体积换算成标准状态下的采样体积:
测试养点甲醛含量
C= x 10? - 3/10=m3< mg/m3
结果可靠性分析：
1.采样体积引入的相对不确定度U rel ( V 0 )；
采样器流量引入的相对不确定度U rel ( Q ),
i.Q C - 1型采样器流量误差< 5%,按矩形分布，k = 3 ; U rel ( Q )=5%/ "?=0. 0 28
9；
ii.采样器时间定时引入的相对不确定度u r e l ( T )
Q C - 1型气采样时间误差< 1%,按矩形分布，k = 3, U rel ( T ) =1%/ V-?= 0. 00 5 7;
iii.温度计测量引入的相对不确定度U rel ( t )
-10?100 °C温度计大气误差为士 1C ,按矩形分布,k = 3, U rel ( t ) =1 / V?/( 27 3 + 25)=;
综上，采样体积引入的相对不确定度U rel ( V 0 )= v( ++ )=
2.制备10卩g / m丨甲醛标准溶液引入的不确定度
U rel (标准)
i.容量瓶引起的标准不确定度
标准溶液定容用容量瓶 1 00 m l ( A 级)，其相对标准不确定度为0. 000 577(国家技术监督局) ii.硫代硫酸钠标准溶液的不确定度
可由标准溶液证书得到，按矩形分布计算，标准不确定度为：0. 00015/ V? = 0.000 0 87,其相
对标准不确定度为：0. 000087 / 0 . 1099 = 0.000792。
iii.甲醛标准溶液的不确定度
标定时两次平行滴定的体积偏差为0 . 03 m l ,标定液的体积约为20 m l ,可按三角分布计算，标定的标准不确定度为0. 003 / 6 = 0.012,其相对标准不确定度为：0.012/20 = 0. 00061 。
合成上述分量得标准溶液制备引起的总的相对标准不确定度为:U rel (标液)=v( 0. 000 572++ )=
3.标定曲线不确定度：U rel =.02451
分光光度计吸光度读数相对不确定度
分光光度计吸光度分辨率为0. 0 01A ,因此其量化误差不确定度：U rel (仪)=0.001/ V3- 0. 3 17 5 =0. 00 1 82。
综上，空气样品中甲醛检测结果的相对标准不确定度为：U rel ( C) = V+ + + =
甲醛浓度测定的标准不确定度:因采样10 L ,
那么样品浓度为 m g / m3合成标准不确定度为U c ( c ) = x 0. 2568=
0 .01926m g / m3.
测定结果：本例空气中甲醛浓度为(0.00345 士 m g / m3.
讨论：由于实验测得的空气内甲醛浓度较小，所以其相对不确定度较高，归结为标准曲线相对不确
定度稍大。而该室内空气中甲醛不致对人体健康造成损害。
八、注意事项：
(1)绘制标准时与样品测定时温差不超过20 C；
( 2)标定甲醛时，在摇动下逐滴加入30% 氢氧化钠溶液，至颜色明显减退，再摇片刻，待退呈淡
黄色，放置应褪至无色？若见加入过量，则 5ml 盐酸溶液( 1:5)不足以使溶液酸化；
( 3)当与二氧化硫共存时，会使结果偏低，可以在采样时，使气体先通过装有硫酸锰滤纸的过滤器，排除干
扰。
>. 4 士卜
九、参考文献：
〔1 〕GB/T16127-1995 居室空气中甲醛的卫生标准〔S 〕 .
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〔3 〕 C N A S - G L 05 , 测量不确定度要求的实施指南〔 S 〕.
〔4 〕J J F1059 -1 999, 测定不确定度评定与表示〔S 〕 .
〔 5 〕倪蓉 , 杨龙彪 , 张燕 . 比色法测定空气中三氧化铬的不确定度〔 J 〕 . 中国卫生检验杂志 , 2005 , 15 ( 8) : 975 .
酚试剂分光光度法检测室内空气中甲醛浓度的注意事项 摘要：酚试剂分光光度法(GB /T 18204.2-2014)和《民用建筑工程室内环境污染控制规范》GB 50325-2010 (2013版)在某些方面未做出明确说明或规定模糊，给实际检测工作带来诸多困惑。在查阅国内一些文献的基础上，结合工作实践提出适当的解决方法和建议。 关键词：酚试剂 GB50325 分光光度法注意事项 1、前言 甲醛（formaldehyde）是无色、具有强烈刺激性气味的气体,易溶于水、醇和醚,是室内环境的主要污染物之一。对人体的健康有很大危害，如：接触甲醛后对皮肤有强烈刺激作用；长期 接触低浓度甲醛蒸气，可引起鼻腔、口腔、鼻咽、咽喉、皮肤和消化道的癌症。甲醛已被世 界卫生组织列为可疑致癌和致畸形物质。甲醛的环境污染已引起人们的高度重视。随着国家 标准《民用建筑工程室内环境污染控制规范》GB 50325-2010的制订和实施,规定了室内有害 气体氡、甲醛、氨、苯和总挥发性有机化合物的浓度及相应的测定方法。其中,酚试剂分光光 度法(GB /T 18204.2-2014) 在常温下显色快速,检测灵敏度高,检测结果准确,是室内环境甲醛控 制检测的仲裁方法。 但是，酚试剂分光光度法未对部分试剂使用有效期、显色温度等做出明确说明,而《民用建筑工程室内环境污染控制规范》GB 50325-2010 (2013版)在某些方面规定模糊，给实际检测工作带来诸多困惑。在查阅国内一些文献的基础上，结合工作实践提出适当的解决方法和建议。 2、检测简要流程 （1）根据委托信息中的工程概况，按照GB 50325-2010 (2013版)6.0.12～6.0.15要求布点。（2）按照GB/T 18204.2-2014要求配制吸收液。 （3）对采用集中空调的民用建筑工程，采样在空调正常运转时进行；对采用自然通风的民 用建筑工程，采样在对外门窗关闭1小时后进行。装饰装修工程中完成的固定式家具，应保 持正常使用状态。 （4）采样时，检测点应距内墙面不小于0.5m，距地面高度0.8～1.5m。检测点应均匀分布，尽量避开通风道和通风口。记录采样点位置、温度、湿度、大气压力、恒流采样器编号及现 场状况。同时在室外上风向采大气作为空白。 （5）按照GB/T 18204.2-2014要求，对样品进行分析并做标准曲线（该工作可以在此之前完成）。计算结果，判定是否合格，出具检测报告。 3.注意事项 下面将从仪器、试剂、配制试剂、校正恒流采样器、显色温度、显色时间、空白检验、样品 保存时间、选择采样时间这些GB/T 18204.2-2014 和GB 50325-2010 (2013版) 未做出明确说明 或规定模糊的方面进行依次阐述。 3.1仪器、试剂 酚试剂分光光度法的灵敏度、配制溶液的准确性直接影响标准曲线的不确定度,是样品浓度测定相对标准不确定度的主要贡献因素[1]。工欲善其事,必先利其器。酚试剂分光光度法主要仪器为分光光度计和恒流采样器，应由具有CMC资质的厂家出产。而万分之一天平最好使用进口的，因为它们比国内的稳定可靠，如德国赛多利斯（BTC603）天平。所有仪器（包括玻璃 仪器）要有产品合格证和在计量部门检定的合格证书，并在计量检定有效期内使用。
福林(Folin)-酚试剂法测定蛋白质的浓度 一、原理 蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸，在碱性条件下，可使酚试剂中的磷钼酸化合物还原成蓝色（生成钼蓝和钨蓝化合物）。蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比，可用比色法测定。 二、实验仪器 分光光度计,试管,移液管,容量瓶，分析天平，烧杯 三、实验试剂 1.Folin-酚试剂甲：碱性铜溶液 甲液：取Na2CO32g溶于100ml0.1mol/l氢氧化钠溶液中 乙液：取CuSO4.5H2O晶体0.5g，溶于1%酒石酸钾100ml。 临用时按甲：乙=50：1混合使用。 2.Folin-酚试剂乙：将10g钨酸钠、2.5g钼酸钠、70ml蒸馏水、5ml85%磷酸继10ml浓盐酸置于150ml的磨口圆底烧瓶中，充分混匀后，接上磨口冷凝管，回馏1小时，再加入硫酸锂15g，蒸馏水5ml及液溴数滴，开口煮沸15分钟，在通风橱内驱除过量的溴。冷却，稀释至100ml，过滤，滤液成微绿色，贮于棕色瓶中。临用时，用1mol/l的氢氧化钠溶液滴定，用酚酞作指示剂，根据滴定结果，将试剂稀释至相当于1mol/L的酸。 标准蛋白质溶液：称取1g牛（人）血清蛋白片溶于0.9%氯化钠溶液中，并稀释至1000ml
四、实验步骤 1.标准曲线的绘制 取7支干燥洁净的试管，编号，按下表加入试剂，比色后，以光密度为纵坐标，蛋白质浓度为横坐标作图。 各管加入1mlFo1in 酚试剂乙后，立即摇匀，放置15分钟后比色，在500nm 处记下各管光密度，以0号管为对照，以吸光度为纵坐标，标准蛋白质溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线 2.样品测定 准确吸取样液于干燥的试管中，同样按下表加入试剂，测出光密度值后，对照标准曲线求出样液的蛋白质浓度。 室温放置10分钟后，再各加1毫升Fo1in 酚试剂乙，立即摇匀，放置15分钟，在500nm 处测定光密度值。 五、实验结果 管号 试剂 1 2 样液（ml ） 1.0 1.0 Folin-酚试剂甲 5.0 5.0 （ml ）
酚试剂分光光度法比较装修后不同时间室内甲醛含量 【摘要】酚试剂可以与空气中的甲醛反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化生成蓝绿色化合物二缩合甲醛-3-甲基-2-苯并噻唑酮腙。可以用分光光度计测得标准液与样品液的吸光程度，得出样品液中甲醛含量。 【关键词】甲醛酚试剂分光光度法 【前言】甲醛是一种无色、具有强烈刺激性气味的挥发性气体，是一种具有较高毒性的化合物，在我国有毒化学品优先控制名单上位居第二，已经被世界卫生组织确定为致癌和致畸性物质[1]。随着人们生活水平的提高，大量可挥发处有害物质甲醛的各种建筑材料、装饰材料等民用化工产品进入室内，使人们接触甲醛的机会大大增多[2]。人们应该在房屋装修多长时间后入住，才能保证健康，免受甲醛污染呢？本实验将用酚试剂分光光度法[3]测定甲醛含量，比较装修后不同时间室内甲醛含量，为房主寻找最佳入住时间。 【实验部分】 1.实验目的：研究装修后不同时间室内甲醛含量差异 2.实验材料与方法 2.1实验材料 2.1.1实验药品 3-甲基-2-苯并噻唑酮腙（分析纯）、硫酸铁铵溶液（pH=1.5）、重蒸馏水、甲醛标准品（国家二级以上） 2.1.2实验仪器 电子天平（可称至0.01g，读至0.001g）、称量纸、100ml烧杯、10ml量筒（分度值0.1ml，读至0.01ml）、玻璃棒、10ml具塞比色管、100ml容量瓶、胶头滴管、比色皿、分光光度计 2.2实验方法 酚试剂可以与空气中的甲醛反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化生成蓝绿色化合物二缩合甲醛-3-甲基-2-苯并噻唑酮腙。 反应式如下：
3.实验构想：利用酚试剂分光光度法，测定空气中甲醛的含量 4.测定对象：小区内三幢刚装修过的房子（提前联系房主，确保房子保持密闭，在实验时间允许操作者进入房内） 5.实验步骤 5.1 检验实验仪器 检验电子天平和分光光度计能否正常使用，检验100ml容量瓶是否漏水。 5.2 配置吸收原液（3-甲基-2-苯并噻唑酮腙溶液） 在电子天平上放一张称量纸并调零。利用电子天平，准确称量0.10g3-甲基-2-苯并噻唑酮腙固体粉末，将称取的3-甲基-2-苯并噻唑酮腙置于100ml烧杯中，加入重蒸馏水溶解。将3-甲基-2-苯并噻唑酮腙溶液用玻璃棒引流至100ml容量瓶中，用重蒸馏水润洗100ml烧杯，将润洗液也引流至100ml容量瓶中。加入重蒸馏水，液面接近标定线处停止，待冷却至室温后，用胶头滴管定容至100ml，盖上容量瓶瓶塞，将配置好的吸收原液摇匀，用时要20倍 稀释。 5.3稀释吸收原液 用清洁干燥的量筒量取5.0ml吸收原液，当吸收原液液面接近量筒5.0ml刻度线时改用胶头
酚试剂分光光度法测甲醛 摘要： 本文研究了室内空气中痕量甲醛的测定方法一一酚试剂分光光度法，考察了该法的测定原理，并选择了最佳实验条件。 甲醛： 甲醛是无色，具有强烈刺激性气味的气体，易溶于水、醇和醚。是室内环境的主要污染物之一。甲醛具有较高毒性，在我国有毒化学品优先控制名单上甲醛高居第二位。甲醛已经被世界卫生组织确定为致癌和致畸形物质，是公认的变态反应源，也是潜在的强致突变物之一。随着国家标准氓用建筑工程室内环境污染控制规莎GB50325—2001(2006腑的制订和实施，规定了室内<公共场所卫生标准检验方法>GB／T18204．26—2000中酚试剂分光光度法的测定结果为准。 国家对不同场所空气中甲醛含量作了相应的规定；公共场所甲醛≤0．12 mg／m3，居室内甲醛≤0．08 mg／m3 酚试剂分光光度法测甲醛 酚试剂分光光度法测定室内空气中的甲醛浓度具有良好的线性关系，操作简便快捷，灵敏度高于其他比色法，其相对标准偏差小，回收率为95％以上。为室内空间环境检测甲醛的主要方法。因此，我们选用此方法测定甲醛含量。 主要检验仪器及试剂 可见光分光光度计； 大型气泡吸收管：有5ml，10ml刻度线 空气采样器：流量范围0一lL／min 10ml比色管 吸收原液(0．1％)：0．10 g酚试剂(C6H．SN(CH3)C：NH2·HCl，简称MBTH)，用水定容至100ml： 吸收液(O．005％)：另取5ml吸收原液，加95ml蒸馏水，采样时现用现配。； 硫酸铁铵溶液(显色剂)(1％)：1．O g硫酸铁铵(NH4Fe(SO4)2·12H2O)，用O.1 moL ／L盐酸溶液定容至100 mL： 甲醛标准贮备液(1 mg／mL)：：取2．8ml甲醛溶液(A．R．含量36％一38％)。放人lL溶量瓶中加蒸馏水稀释至翔度，其准确浓度用碘量法标定。； 甲醛标准工作液(1ug／mL)：：临用时，将甲醛标准贮备溶液用蒸馏水稀释成1．00ml含10ug甲醛，立即再取此溶液10．OOml加入100ml容量瓶中，用水定容至lOOml，加入5ml吸收原液。此溶液1．00ml含1．00ug甲醛。放置30min后，用于绘制标准曲线。；实验所用试剂均为分析纯，实验用水为2次蒸馏水。 测定原理 空气中的甲醛与3一甲基-2-苯并噻唑酮腙(简称酚试剂)反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物。颜色深浅与甲醛含量成正比，通过比色定量。反应中，Fe3+为氧化剂和显色剂，一般采用硫酸铁铵的酸性溶液。
实验五：空气中甲醛的测定（酚试剂分光光度法） 实验目的： 掌握甲醛测定方法； 熟练掌握大气采样器和分光光度计的使用； 实验原理： 甲醛的测定方法：分光光度法、气相色谱法、酚试剂分光光度法、乙酰丙酮分光光度法； 空气中的甲醛与3-甲基2-苯并噻唑酮腙酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物，颜色深浅与甲醛含量成正比，物质的最大吸收波长为630nm，通过比色定量。当采样体积为10L时最低检出质量浓度为0.01mg／m3。 实验仪器： 分光光度计（在630nm测定）；大气采样器；具塞比色管（10ml）；分析天平；滴定管；容量瓶；量筒；移液管等 1、吸收液原液:称量0.10g酚试剂[C6H4SN(CH3)C:NNH2·HCl,简称NBTH]，加水溶解，倾于100ml具塞量筒中，加水到刻度。放冰箱中保存，可稳定三天。吸收液：量取吸收原液5ml，加95ml水，即为吸收液。采样时，临用现配。 2、1%硫酸铁铵溶液 3、碘溶液[C（1/2I2）=0.1000mol/L] 4、1mol/L氢氧化钠溶液 5、0.5mol/L硫酸溶液：取28ml浓硫酸缓慢加入水中，冷却后，稀释至1000ml。 6、硫代硫酸钠标准溶液[C（Na2S2O3）=0.1000mol/L] 0.5%淀粉溶液：将0.5g可溶性淀粉，用少量水调成糊状后，再加入100ml沸水，并煎沸2～3min至溶液透明确。 7、甲醛标准贮备溶液：取2.8ml含量为36～38%甲醛溶液，放入1L容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液1ml约相当于1mg甲醛。其准确浓度用下述碘量法标定。 实验步骤： 1、样品采集：用一个内装5ml吸收液的大型气泡吸收管，以0.5L/min流量，采气10L。并记录采样点的温度和大气压力。采样后样品在室温下应在24h内分析。 2、甲醛标准贮备溶液的标定：精确量取20.00ml待标定的甲醛标准贮备溶液，置于250ml 碘量瓶中。加入20.00ml[C（1/2I2）=0.1000mol/L]碘溶液和15ml 1mol/L氢氧化钠溶液，放置15min，加入0.5mol/L硫酸溶液，再放置15min，用[C（Na2S2O3）=0.1000mol/L]硫代硫酸钠溶液滴定，至溶液呈现淡黄色时，加入1ml 5%淀粉溶液继续滴定至恰使兰色褪去为止，记录所用硫代硫酸钠溶液体积（V2），ml。同时用水作试剂空白滴定，记录空白滴定所用硫化硫酸钠标准溶液的体积（V1），ml。甲醛溶液的浓度用公式（1）计算：甲醛溶液浓度（mg/ml）=（V1-V2）×N×15/20 (1) 式中：V1――试剂空白消耗[C（Na2S2O3）=0.1000mol/L]硫代硫酸钠溶液的体积，ml； V2――甲醛标准贮备溶液消耗[C（Na2S2O3）=0.1000mol/L]硫代硫酸钠溶液的体积，ml；N――硫代硫酸钠溶液的准确当量浓度； 15――甲醛的当量； 20――所取甲醛标准贮备溶液的体积，ml。 二次平行滴定，误差应小于0.05ml，否则重新标定。 绘制标准曲线： 用1.00μg/ml甲醛标准溶液，按下表制各标准色列管
蛋白酶活力测定: 参照中华人民共和国专业标准SB/ T10317-1999蛋白酶活力测定方法( Asha 等, 2007)。 纤维素酶DNS酶活力测定方法 DNS, 活力, 纤维素酶, 测定 1 定义" |0 `. y6 t9 b" ^ 2 x 1g固体酶粉在40℃和pH值4.2条件下，每分钟水解纤维素生成1微克葡萄糖的量为1个酶活力单位，以u/g表示。 2 原理 纤维素酶分解纤维素，产生纤维二糖、葡萄糖等还原糖，纤维二糖、葡萄糖等还原糖能将3，5二硝基水杨酸中的硝基还原成橙黄色的氨基化合物，利用比色法测定其还原物生成量，表示酶的活力。! Y" m& p' q; I& K B& e$ T( B4 } 3.试剂和溶液 3.1 1％葡萄糖标准溶液（同β－葡聚糖酶酶活测定） 3.2 羧甲基纤维素钠(CMC)溶液 取1g羧甲基纤维素钠（粘度300～600厘泊）,加入pH4.2的磷酸氢二钠－柠檬酸缓冲液(甲液414ml和乙液586ml并用pH计校正至pH为4.2)混合均匀,水浴加热至溶,冷却后用2M 盐酸或氢氧化钠调节pH到4.2,定溶至100ml,再用二层纱布过滤，此溶液在4℃冰箱贮存，有效期3天。取滤液100ml，20ml，蒸馏水40ml，混匀，贮冰箱备用。4 C) c+ }( l2 R( M( p! L 3.3 DNS 试剂（同β－葡聚糖酶酶活测定）; h1 a. l3 Z3 k6 t2 | 4仪器和设备 4.1恒温水浴锅(40℃±0.2℃) 4.2分光光度计 含10mm比色皿，可在550nm处测量吸光度。$ ]1 h& A) p) K 5测定步骤 5.1 标准曲线绘制. [* |! P6 u* G& u2 ^6 J4 Q 分别吸取1%葡萄糖标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml于50ml容量瓶中，用蒸馏水制成每ml分别含有葡萄糖0、200、400、600、800、1000、1200mg的稀标准液。各取不同浓度的稀标准液0.5ml于试管中，加入CMC溶液1.5ml、DNS试剂3.0ml，于沸水浴中沸腾7min，取出后立即加入蒸馏水10ml混匀。冷却后，用10mm比色皿，在波长550nm处用分光光度计分别测定其吸光度。以吸光度为纵坐标，相对应的葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线或计算回归方程。1 H, `% F/ `7 X/ U. W 5.2待测酶液的制备（同β－葡聚糖酶酶活测定） 1 L- {5 h8 W; q+ V4 u2 Y 5.3 比色测定 精确吸取经待测稀释酶液0.5ml，40℃预热5min，加入经40℃预热的CMC液1.5ml（每个样品同时作3支平行试管），于40℃水浴精确反应10min，立即加入DNS试剂3.0ml终止反应，以后按标准曲线制作步骤测定样品吸光度。 同时进行空白对照测定，取稀释酶液0.5ml，先加入DNS试剂3.0ml，再加入CMC液1.5ml，其余步骤同于样品测定。 6.计算0 W+ i$ S: }( _1 o7 ], R5 m( N
空气中甲醛检测方法-----酚试剂分光光度法 1．原理 空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化成蓝绿色化合物，根据颜色深浅，比色定量。 2．仪器设备 2.1气泡采样管(5)或多孔玻板采样管； 2.2 QC-2A大气采样(2)仪或TMP1500电子控时采样器； 2.3 10mL具塞比色管(10)； 2.4 723型可见分光光度计。 3．药品试剂 本法中所用水均为重蒸馏水或去离子交换水，所用试剂纯度均为分析纯。 3.1吸收原液(C(MBTH)=0.001g/mL)：称量0.050g酚试剂(MBTH)，用水溶解后稀释至50mL(贮于 冰箱中可稳定三天)。 3.2吸收液(C(MBTH)=0.00005g/mL)：量取5 mL吸收原液，用水稀释至100mL(采样时，临用现配)。 3.3 0.1mol/L盐酸：量取浓盐酸(C摩(mol/L)=C质(%)×ρ总(g/mL)×1000/M(g/mol)=12mol/L)8.33mL，用水稀释 至1000mL。 3.4 1%硫酸铁铵溶液：称量1.0g硫酸铁铵，用0.1mol/L盐酸溶解后稀释至100mL。 3.5碘溶液(C(1/2I2)=0.1000mol/L)：以下两种方法二选其一，若有可能，则优先采取3.5.2的方法。 3.5.1准确称量40g碘化钾，溶于25mL水中，加12.7g碘，用水溶解后稀释至1000mL(移入棕色瓶 中，暗处贮存)； 3.5.2外购试剂进行当量换算：精确量取外购碘溶液V取(mL)=100/C摩(mol/L)(BR(1/2I2)浓度C摩(mol/L)见说明书，C摩(mol/L)≥0.1000mol/L)，用水稀释至1000mL(移入棕色瓶中，暗处贮存)。
酚试剂分光光度法测定室内甲醛实验报告 班级：130223 姓名：董子薇 一、 实验目的 1） 测定空气中甲醛浓度，掌握酚试剂分光光度法测甲醛原理； 2） 学会配置硫酸铁铵、酚试剂、标定甲醛等技能； 3） 学会使用分光光度计。 二、 实验原理 酚试剂，化学名称为盐酸-3-甲基-2-苯并噻唑酮腙，分子式为C 6H 4SN （CH 3）CNNH 2?HCI ，简称MBTH 酚试剂可与甲醛发生缩合反应（酚试剂作为甲醛吸收剂，显色剂）。 （该方法当采样体积为 10L 时，测定 浓度下限范围为 m 3?，mg/m 3） 甲醛在纯水中很不稳定， 当在%酚试剂吸收液中则可稳定 20h ，故甲醛标准稀溶液选用含 %酚试剂的 吸收液配制。 空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪（ A ），嗪与酚试剂的氧化物（B ）在酸性溶液中被高铁离子氧化 形成蓝绿色化合物，颜色深浅与甲醛含 量成正比，通过比色定量。反应方程式如上： 注意：酚试剂是过量的，其某一部分吸收甲醛形成 A ，剩下的酚试剂在高铁离子的氧化作用下，形 成中间体B ，A 与B 发生1:1定量加成反应，形成了蓝绿色的二缩合甲醛 -3-甲基-2-苯并噻唑酮腙。作为 氧化剂的硫酸铁铵在该反应中也是过量的，而且氧化反应和加成反应都需要一定的时间，这就是为什么 酚试剂吸收甲 醛，在加入硫酸铁铵后要等待 15min 后再测定的原因。 三、试验用试剂 H 3C CH 3 酚试剂| NH +CH 3 +出。 (A)嗪 H 3C + Fe 3 酚试剂 [O] (A)+(B) CH 3 N N (B ) + Fe 3 [1 —NH 蓝绿色 ---- A CH 3 NH-N 蓝绿色化合物 N ~NH 2 + N N
实验一 Folin-酚比色法测定蛋白质含量 一. 目的 学习Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法 二. 原理 Folin-酚法，又名Lowry法，所用的试剂由两部分组成：试剂甲为碱性硫酸铜溶液，相当于双缩脲试剂，可与蛋白质中肽键起双缩脲反应，生成Cu2+-蛋白质络合物；试剂乙为磷钨酸-磷钼酸混合物，在碱性条件下极不稳定，易被上述络合物以及酪氨酸和色氨酸残基还原成钨蓝和钼蓝。 在一定蛋白质浓度范围内，钨蓝和钼蓝在500nm波长处的光吸收与蛋白质含量成正比，以此可测定蛋白质的含量。 该方法灵敏度高，测定范围为25μg～250μg，比双缩脲法灵敏100倍，用作一般浓度的测定较为适宜，且操作简便、快速，所以是一般实验室中经常使用的方法之一。 注意，酚类物质、柠檬酸、甘氨酸、EDTA、各种糖以及各种还原剂等对测定均有干扰作用。 三. 实验材料及设备 1. 材料 绿豆芽 2. 仪器 分光光度计电子天平 3. 器材 普通试管：20mL×8 容量瓶：100mL×1 移液管：1mL×4 5mL×1 烧杯：250mL×1 50mL×1 滤纸：φ11cm 滴管： 2 洗耳球： 2 坐标纸 研钵、漏斗、洗瓶、试管架、移液管架、玻棒：各1 四. 试剂的配制 1. 牛血清白蛋白标准液（250μg/mL） 精确称取0.0250g牛血清白蛋白，用蒸馏水溶解后定容至100mL。
2. Folin-酚试剂甲 ●溶液A：Na2CO310g NaOH 2g 用蒸馏水溶解后定容至500mL； 酒石酸钾钠0.25g ●溶液B：CuSO4·5H2O 0.05g 用蒸馏水溶解后定容至10mL； ●使用前，将溶液A和溶液B以50:1相混合。该混合液只能保持一天。 3. Folin-酚试剂乙 ●在1500mL容积的磨口烧瓶中，加入100g钨酸钠(Na2WO4·2H2O)、25g钼酸钠 (NaMoO4·2H2O)及700mL蒸馏水，再加入50mL 85%正磷酸和100mL浓盐酸，充分混合后，接上回流冷凝管，以小火回流10小时。 ●回流结束后，趁热加入150g硫酸锂、50mL蒸馏水及数滴液体溴，再继续开口沸腾 15分钟，以驱除过量的溴，冷却后溶液呈黄色。 （若仍呈绿色，须重复滴加液体溴，再沸腾15分钟，直至呈黄色。） ●用蒸馏水定容到1000mL；过滤；用棕色试剂瓶保存。 ●使用前稀释1倍，使其最终浓度相当于1N酸。 五. 操作步骤 1. 样品液的制备 (1) 取材：称取新鲜绿豆芽下胚轴2g左右，准确记录其质量。 (2) 研磨：将取得的材料置于研钵中，研磨成匀浆。 (3) 过滤：将匀浆转移至垫有滤纸的漏斗中过滤，收集滤液； 用约10mL蒸馏水分三次洗涤研钵，洗涤液也过滤并收集其滤液。 (4) 定容：将滤液用蒸馏水定容到100mL，作为样品待测液。 2. 标准曲线制作及样品测定 取8支试管，按下表所示顺序操作。
酚试剂分光光度法测定室内甲醛实验报告 班级：130223 学号：13022103 姓名：董子薇
一、 实验目的 1） 测定空气中甲醛浓度，掌握酚试剂分光光度法测甲醛原理； 2） 学会配置硫酸铁铵、酚试剂、标定甲醛等技能； 3） 学会使用分光光度计。 二、 实验原理 酚试剂，化学名称为盐酸-3-甲基-2-苯并噻唑酮腙，分子式为C 6H 4SN （CH 3）CNNH 2?HCI , 简称MBTH 。酚试剂可与甲醛发生缩合反应（酚试剂作为甲醛吸收剂，显色剂） 。（该方法当 采样体积为10L 时，测定浓度下限范围为 0.01mg/m 3?0.015 , mg/m 3） 甲醛在纯水中很不稳定，当在 0.005%酚试剂吸收液中则可稳定 20h ，故甲醛标准稀溶 液选用含0.005%酚试剂的吸收液配制。 空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪（ A ）,嗪与酚试剂的氧化物（ B ）在酸性溶液中被高 铁离子氧化形成蓝绿色化合物，颜色深浅与甲醛含 量成正比，通过比色定量。反应方程式如上： 注意：酚试剂是过量的，其某一部分吸收甲醛形成 A ,剩下的酚试剂在高铁离子的氧化 作用下，形成中间体B , A 与B 发生1:1定量加成反应，形成了蓝绿色的二缩合甲醛 -3-甲基 -2-苯并噻唑酮腙。作为氧化剂的硫酸铁铵在该反应中也是过量的，而且氧化反应和加成反 应都需要一定的时间，这就是为什么酚试剂吸收甲醛，在加入硫酸铁铵后要等待 15min 后 再测定的原因。 三、试验用试剂 说明：本法中所用水均为重蒸馏水或去离子交换水，所用试剂纯度一般为分析纯度。 ⑴吸收液原液：称量 0.05g 酚试剂，加水溶解，倾于 50mL 容量瓶中，加去离子水至刻 度。置于冰箱中保存，可稳定三天； （酚溶液浓度0.001g/ml ） ⑵吸收液：量取吸收原液 5mL ，加95mL 去离子水。采样时临用现配； （酚溶液浓度5 x 10?-5g/mI , i.e.0.005%） (B) (A)嗪 + Fe 3 (A)+(B) ------------- [O] 蓝绿色 L 厂N H 蓝绿色化合物 H ——N 酚试剂 H 3C N S N ■ _ NH 2 [O] CH 3 CH 3 / N NH +CH 3 +H2° N ? —N NH 2 N CH 3
FHZHJDQ0028 环境空气 甲醛的测定 酚试剂分光光度法 F-HZ-HJ-DQ-0028 环境空气—甲醛的测定—酚试剂分光光度法 1 范围 5mL 吸收液中含有0.2μg 甲醛应有0.079±0.012吸光度，检出限为0.05μg/5mL 。当采样10L 时，最低检出浓度为0.01 mg/m 3。 若用5mL 样品溶液，其测定范围为0.1～2μg 甲醛。当采样体积为10L 时，则可测浓度范围为0.02～0.4mg/m 3。 20μg 酚、2μg 乙醛以及二氧化氮在一般情况下，对本法无干扰；但乙醛（＞2μg ）和丙醛与MBTH 反应也产生蓝色染料。此时所测得样品溶液中醛的含量，是以甲醛表示的总醛量。二氧化硫的干扰，可将气样先通过硫酸锰滤纸过滤，予以排除（硫酸锰滤纸的制法见9.2）。 2 原理 空气中甲醛被酚试剂溶液吸收，反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物，分光光度法定量。 3 试剂 3.1 吸收原液：称量0.1g 酚试剂 ［盐酸-3-甲基-2苯并噻唑酮腙，C 6H 4SN （CH 3）C ：NNH 2·HCl ，简称MBTH ］加水溶解，倾于100mL 具塞量筒中，加水至刻度。放冰箱保存。可稳定三天。 3.2 吸收液：吸量5mL 吸收原液，加95mL 水。混匀，即为吸收液。采样时，临用现配。 3.3 0.1mol/L 盐酸溶液：量取8.2mL 盐酸加水稀释至1L 。 3.4 10g/L 硫酸铁铵溶液：称量1.0 g 硫酸铁铵［NH 4Fe （SO 4）2·12H 2O 优级纯］ ，用0.1mol/L 盐酸溶液溶解，并稀释至100mL 。 3.5 碘溶液[c （1/2I 2）＝0.1 mol/L]：称量12.7g 升华碘和30g 碘化钾，加水溶解，稀释至1L 。 3.6 碘酸钾标准溶液[c(1/6KIO 3)＝0.1000mol/L]：准确称量3.5668g ，经105℃烘干2h 的碘酸钾（优级纯），溶解于水，移入1L 容量瓶中，再用水稀释刻度。 3.7 5g/L 淀粉溶液：称量0.5g 可溶性淀粉，用少量水调成糊状后，再加刚煮沸的水至100mL ，冷却后，加入0.1g 水杨酸保存。 3.8 硫代硫酸钠标准溶液［c （Na 2S 2O 3） ＝0.1000 mol/L ］：称量26g 硫代硫酸钠（Na 2S 2O 3·5H 2O ）,溶于新煮沸冷却的水中，加入0.2g 无水碳酸钠，再用水稀释至1L 。贮于棕色瓶中，如混浊应过滤。放置一周后，标定其准确浓度。 标定方法：准确量取25.00mL 0.1000mol/L 碘酸钾标准溶液，于250mL 碘量瓶中，加入 75mL 新煮沸冷却的水，加3g 碘化钾及10mL 冰乙酸溶液，摇匀后，暗处放置3min ，用待标定的0.1moI/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定析出的碘，至淡黄色。加入1mL 5g/L 淀粉溶液，呈蓝色。再继续滴定至蓝色刚刚褪去，即为终点。记录所用硫代硫酸钠溶液体积（V , mL ）。重复滴定两次，两次所用硫代硫酸钠溶液体积误差不超过0.05mL 。其准确浓度用下式计算： V L mol 00.251000.0)/×=硫代硫酸钠溶液浓度（ 3.9 甲醛标准溶液 3.9.1 贮备溶液：量取2.8mL 含量为36%～38%甲醛溶液，放入1L 容量瓶中，加水稀释至 刻度。此溶液1mL 约含1mg 甲醛。其准确浓度用下述碘量法标定。此液可稳定三个月。 标定方法：准确量取20.00mL 待标定的甲醛储备溶液，于250mL 碘量瓶中，加入20.00mL 碘标准溶液，15mL 1mol/L 氢氧化钠溶液，放置15min 。加入20mL 0.5mol/L 硫酸溶液，再放置15min ，用0.1000mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定，直至溶液呈现淡黄色时，加入1mL 5% 淀粉溶液，继续滴定至恰使蓝色褪尽为止。记录所用硫代硫酸钠标准溶液体积（V 2，mL ） 。同时，用水作试剂空白滴定，记录空白滴定所用硫代硫酸钠标准溶液体积（V 1，mL ）。样品
非水液中滴定巴比妥类药物，其目的是( ) 答案A 醋酸氟地松中氟的测定采用() 答案C 古蔡法检查药物中微量的砷盐，在酸性条件下加入锌粒的目的是() 答案C 用溴酸钾法测定异烟肼的依据是( ) 答案B 异烟肼比色法测定法甾体激素类药物的含量时，对()更有专属性。 答案A 关于亚硝酸钠滴定法的叙述，错误的有( ) 答案A 少量氯化物对人体是没有毒害作用的，药典规定检查氯化物杂质主要是因为它()答案D 抗生素类药物的活性采用()。
答案C 用永停滴定法指示亚硝酸钠滴定法的终点，所用的电极系统为( ) 答案B 下列说法不正确的是( ) 答案B 利用药物和杂质在化学性质上的差异进行特殊杂质的检查，不属于此法的检查法是() 答案E 干燥失重检查法主要是控制药物中的水分，其他挥发性物质，对于含有结晶水的药物其干燥温度为() 答案B 复方APC片中扑热息痛的含量测定方法为( ) 答案C 有关维生素E的鉴别反应，正确的是() 答案A
在碱性条件下检查重金属，所用的显色剂是() 答案B 用差示分光光度法检查异烟肼中的游离肼，在叁比溶液中需加入( ) 答案E 药物的纯度是指() 答案B 中国药典采用( )法指示重氮反应的终点。 答案B 醋酸氟地松中氟的测定采用() 答案C 肾上腺素中酮体的检查，所采用的方法为( ) 答案D 异烟肼加水溶解后，加氨制硝酸银试液，即有黑色浑浊出现。此反应称为银镜反应。答案对
青霉素可用碘量法测定含量，是由于青霉素分子消耗碘。 答案错 复方APC片中，咖啡因的含量测定方采用非水滴定法。 答案错 甾体激素中“其他甾体”的检查采用高低浓度浓度对比法。 答案对 庆大霉素为一复合物的硫酸盐。 答案对 水杨酸酸性比苯甲酸强，是因为水杨酸分子中羟基与配为羟基形成分子内氢键。答案对 由于甾体激素类药物结构复杂，红外吸收光谱是鉴别该类药物的可靠手段。 答案对 药典中规定，乙醇未标明浓度者是指75％乙醇。 答案错
酚试剂分光光度法测定甲醛的含量 1实验原理 空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化成蓝绿色化合物。根据颜色深浅，比色定量。 2试剂 本法中所用水均为重蒸馏水或去离子交换水：所用的试剂一般为分析纯。 2.1称量0.10g酚试剂，加水溶解，倾于100ml具塞量筒中，加水至 刻度。放入冰箱中保存，可稳定三天。 2.2吸收夜：量取吸收原液5ml，加95ml水，即为吸收液。采样时，临用现配。 2.31%的硫酸铁铵溶液：称量1.0g硫酸铁铵，用0.1mol/L盐酸溶解， 并稀释至100ml。 2.4 碘溶液：称量40g碘化钾，溶于20ml水中，加入12.7g碘。待 碘完全溶解后，用水定容至1000ml。移入棕色瓶中，暗处储存。 2.5 1mol/L氢氧化钠溶液：称量40g氢氧化钠溶于水中，并稀释至1000mL。 2.6 0.5mol/L硫酸溶液：量取28ml浓硫酸缓慢加入水中，冷却后， 用水稀释至1000mL。 2.7 硫代硫酸钠标准溶液(C(Na2S2O3)=0.1000mol/L) 2.8 0.5%淀粉溶液：称量0.5g可溶性淀粉，用少量水调成糊状后， 加入100mL沸水，并煮沸2~3min至溶液透明。冷却后，加入 0.1g水杨酸或氯化锌保存。 2.9 甲醛标准贮备溶液：量取2.8mL含量为36%~38%甲醛溶液，放 入1L容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液1ml约相当于1mg 甲醛。其准确浓度用下述碘量法标定。 甲醛标准贮备溶液的标定：精确量取20.00mL待标定的甲醛
标准贮备溶液，置于250mL碘量瓶中。加入20.00mL0.1N碘 溶液(C(1/2I2)=0.1000mol/L)和15mL 1mol/L氢氧化钠溶液， 摇匀后放置15min。加入20mL 0.5mol/L硫酸溶液，再放置 15min。用硫代硫酸钠标准溶液滴定，至溶液呈现浅黄色时， 加入1mL0.5%淀粉溶液继续滴定至恰使蓝色褪去为止，并记 录所用硫代硫酸钠标准溶液体积(V2)，mL。同时用水作试剂 空白滴定，记录空白滴定所用硫代硫酸钠标准溶液体积(V1)， mL。甲醛溶液的浓度用公式计算： 甲醛溶液浓度（mg/mL） =(V1-V2)×C1×15/20 式中：V1—试剂空白消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL， V2—甲醛标准储备溶液消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL， C1—硫代硫酸钠溶液的准确物质的量浓度， 15—甲醛的当量； 20—所取甲醛标准储备溶液的体积，mL。 两次平行滴定，误差应小于0.05mL，否则重新标定。 2.10甲醛标准溶液：临用时将甲醛标准溶液用水稀释至 1.00mL含 10ug甲醛、立即再取此溶液10.00mL，加入100ml容量瓶中， 加5mL吸收原液，用水定容至100mL，此液1.00ml含1.00ug 甲醛，放置30min后，用于配制标准色列管。此溶液可稳定 24h。 4仪器和设备 4.1 大型气泡采样管：出气口内径为1nm，出气口至管底距离等于或小于5nm。 4.2 恒流采样器：流量范围0-1L./min。流量稳定可调，恒流误差小于2%，采样前和采样后应用皂沫流量计标准采样系列流量，误差小于5%。 4.3 具塞比色管：10mL 4.4分光光度计：在波长630nm测定吸光度。
酚试剂法测甲醛 1实验原理： 酚试剂法是利用空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高价铁离子氧化成蓝绿色化合物，根据颜色深浅，比色定量。 2主要仪器与试剂： 2.1主要仪器： 大气采样器；比色管；WFZ UV-2000型紫外可见分光光度计；数显恒温水浴锅；干燥箱；碘量瓶。 2.2主要试剂： 甲醛溶液（37%-40%）；浓硫酸（95.0%-98%）；Na2S2O3·5H2O；重铬酸钾；可溶性淀粉；碘化钾；碘；NaOH试剂；蒸馏水：酚试剂[C6H4SN(CH3):HNH2·HCL];硫酸铁铵盐，以上试剂均为分析纯。 3准备工作： 3.1甲醛溶液的标定： 3.1.1 Na2S2O3标定： ①取0.15g K2C2O7溶于25mL水中，再称取2g碘化钾加入其中，取20mL20%的H2SO4加入其中，充分混匀且避光保持15min左右，使碘离子完全被氧化以碘的形式析出； ②再加100mL去离子水稀释（一为降低酸度，二为使终点时溶液中的Cr3+离子不致颜色太深，影响终点观察；另外KI浓度不可过大，否则I2与淀粉所显颜色偏红紫，也不利于观察终点）；用Na2S2O3滴定成淡黄色（I2颜色）。 反应为：Na2S2O3+I2==NaI+Na2S2O6 ③再加0.5%淀粉3ml（如过早加入淀粉：开始I2太多，被淀粉吸附得过牢，就不易被完全夺出，并且也难以观察终点，因此必须在滴定至近终点时方可加入淀粉溶液。）；终点由蓝色变成绿色（终点的颜色为Cr3+颜色）。 3.1.1.1 Na2S2O3标定数据处理 表格1硫代硫酸钠标定数据 组号开始体积终点体积消耗体积 第一组V始=0.00ml V终=31.5mlΔV1=31.5ml 第二组V始=0.00ml V终=31.3mlΔV2=31.3ml 第三组V始=0.00ml V终=31.0mlΔV3=31.0ml 平均值ΔV平均=31.27ml
[模拟] 临床医学检验技士(临床化学)24 以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案，请从中选择一个最佳答案。 第1题： 长期饥饿时，维持血糖正常水平的主要途径是 A.糖酵解 B.糖醛酸途径 C.合成糖原 D.糖异生 E.磷酸戊糖途径 参考答案：D 第2题： I型高脂蛋白血症时，患者的血浆外观特征是 A.奶油样表层，下层透明 B.透明 C.混浊 D.透明或轻度混浊 E.奶油样上层，下层混浊 参考答案：A 第3题： Ⅱa高脂蛋白血症患者空腹血浆中升高的脂蛋白为 A.CM B.VLDL C.LDL和VLDL D.LDL E.CM和VLDL 参考答案：D 第4题： 目前我国测定TC的参考方法是
A.电泳法 B.匀相测定法 C.超速离心法 D.HPLC法 E.聚乙烯硫酸盐沉淀法 参考答案：D 第5题： 急性炎症性疾病时血浆蛋白质出现低下的是 A.C反应蛋白 B.铜蓝蛋白 C.α1抗胰蛋白酶 D.α1酸性糖蛋白 E.前白蛋白 参考答案：E 第6题： 关于β2微球蛋白叙述错误的是 A.存在于所有有核细胞表面 B.炎症及肿瘤时血浆中浓度可降低 C.肾移植后如发生排斥反应，尿液中β2微球蛋白可出现增高 D.急性白血病有神经浸润时，脑脊液中β2微球蛋白可增高 E.尿液β2微球蛋白主要用于监测肾小管功能 参考答案：B 第7题： 可用于贫血的诊断和治疗监测的血浆蛋白质是 A.白蛋白 B.前白蛋白 C.C反应蛋白 D.免疫球蛋白 E.转铁蛋白 参考答案：E
相关标准和依据 本方法主要依据GB/ 《公共场所空气中甲醛测定方法》。 原理 空气中的甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物。根据颜色深浅，比色定量。 测量范围 测定范围为 ~ μg，采样体积为10L时，可测浓度范围 ~ mg/m3。试剂 本法中所用水均为重蒸馏水或去离子交换水；所用的试剂纯度一般为分析纯。 H.2.4.1 吸收液原液：称量0.10g酚试剂[C6H4SN（CH3）C：NNH2·H Cl，简称MBTH]，加水溶解，置于100mL容量瓶中，加水至刻度。放冰箱中保存，可稳定三天。 H.2.4.2 吸收液：量取吸收原液5mL，加95mL水，即为吸收液。采样时，临用现配。 1%硫酸铁铵溶液：称量1.0g硫酸铁铵（NH4Fe(SO4) 2·12H 2O）用L 盐酸溶解，并稀释至100mL。
L碘溶液：称量40g碘化钾，溶于25mL水中，加入12.7g碘。待碘完全溶解后，用水定容至1000mL。移入棕色瓶中，暗处贮存。 1mol/L氢氧化钠溶液：称量40g氢氧化钠，溶于水中，并稀释至1 000mL。 L硫酸溶液：取28mL浓硫酸缓慢加入水中，冷却后，稀释至1000 mL。 H.2.4.7 硫代硫酸钠标准溶液[c（Na2S2O3）=L]：可购买标准试剂配制。 %淀粉溶液：将0.5g可溶性淀粉，用少量水调成糊状后，再加入1 00mL沸水，并煮沸2~3 min至溶液透明。冷却后，加入0.1g水杨酸或0.4g氯化锌保存。 H.2.4.9 甲醛标准贮备溶液：取含量为 36 %~38 %甲醛溶液，放入1L容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液1mL约相当于1mg甲醛。其准确浓度可按方法标定。 H.2.4.10 甲醛标准溶液：临用时，将甲醛标准贮备溶液用水稀释成含10μg甲醛溶液，立即再取此溶液，加入100mL容量瓶中，加入5 mL吸收原液，用水定容至100mL，此液含μg甲醛，放置30min后，用于配制标准色列。此标准溶液可稳定24h。 仪器和设备
1、基因：是遗传的物质基础，是DNA 或者RNA分子中携带遗传信息的特定核苷酸序列。 2、基因组：是指单倍体细胞核、细胞器或病毒粒子所含的全部DNA 或RNA分子，每个生物的基因组携带者构成和维持该生物体生物形式所必需的所有生物信息。 3、逆转录：以RNA为模板，由反转录酶催化四种dNTP聚合，产生DNA的过程。 4、聚合酶链反应：是一种由引物介导利用DNA聚合酶在体外扩增目的基因的方法，也叫基因扩增技术。 5、限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链的核酸内切酶。 6引物：是一种与DNA模板链互补的线性核苷酸变短，其3’末端为游离的-OH，细胞内复制所需的引物是一小段RNA。催化游离dNTP之间相互聚合。 7、TaqDNA聚合酶：从一种嗜热菌株中分离得到的耐热的DNA聚合酶。 8、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程成为退火。 9、启动子：是位于转录起始点附近，且为转录所必需的序列元件。 10、DNA变性：当DNA收到某些理化因素作用时，DNA双链互补碱基对之间的氢键和相邻碱基之间的堆积力受到破坏，DNA分子被解开成单链，逐步形成为无规则线团的构象，不涉及核苷酸间共价键的断裂。
1、RT-PCR的基本原理 将RNA反转录与PCR过程结合的一种PCR技术，在反转录酶的作用下，以mRNA为模板，反转录生成DNA，再以cDNA为模板进行PCR扩增。 2、DNA电泳的基本原理，按照支持物不同可以分为几类 基本原理：核酸是两性电解质，在中性或偏碱性的pH溶液中均带负电，在电场中向正极泳动，不同的核酸在相对分子质量、分子形状等方面各有不同，在凝胶的空隙中泳动时电泳迁移率各不相同，因此借助电泳即可使其得到分离。 分类：1琼脂糖凝胶电泳AGE 2聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGE 3 毛细管电泳 3、总RNA提取后，如何鉴定RNA的纯度 （1）紫外分光光度法：先通过A260与A280的比值判断核算的纯度，纯RNA的A260与A280的比值等于2.0，比值升高或降低均表示样品不纯。 (2)琼脂糖凝胶电泳法：基因组DNA的分子量远远大于RNA，两者之间电泳迁移率存在很大差别，用荧光染料EB为示踪剂的AGE即可观察到RNA分子中是否含有DNA，细胞RNA的琼脂糖凝胶电泳一般可见三条条带，条带模糊比例不合适及弥散明显说明RNA有严重降解。
室内空气甲醛的测定酚试剂分光光度法 1. 原理 空气中的甲醛与酸试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物。根据颜色深浅，比色定量。 2. 测量范围 测定范围为0.1~1.5μg，采样体积为10L时，可测浓度范围0.01~0.15mg/m3。 3. 试剂 本法中所用水均为重蒸馏水或去离子交换水；所用的试剂纯度一般为分析纯。 3.1 吸收液原液：称量0.10g酚试剂，简称MBTH，加水溶解，置于100ml容量瓶中，加水至刻度。放冰箱中保存，可稳定3d。 3.2 吸收液：量取吸收原液5ml，加95ml水，即为吸收液。采样时，临用现配。 3.3 1%硫酸铁铵溶液：称量l.0g硫酸铁铵（NH4Fe (SO4)2·12H2O)用0.1mol/L盐酸溶解，并稀释至100ml。 3.4 0.1000mol/L碘溶液：称量40g碘化钾，溶于25ml水中，加人12.7g碘。待碘完全溶解后，用水定容至1000ml。移入棕色瓶中，暗处贮存。 3.5 lmol/L氢氧化钠溶液：称量40g氢氧化钠，溶于水中，并稀释至1000ml。3.6 0.5mol/L硫酸溶液：取28ml浓硫酸缓慢加人水中，冷却后，稀释至1000ml。 3.7 硫代硫酸钠标准溶液[c(Na2S2O3)=0.1000mol/L]：可购买标准试剂配制。 3.8 0.5%淀粉溶液：将0.5g可溶性淀粉，用少量水调成糊状后，再加人100ml 沸水，并煮沸2~3min至溶液透明。冷却后，加人0.1g水杨酸或0.4g氯化锌保存。 3.9 甲醒标准贮备溶液：取2.8ml含量为36% ~ 38%甲醛溶液，放人1L容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液lml约相当于lμg甲醛。 3.10 甲醛标准溶液：临用时，将甲醛标准贮备溶液用水稀释成1.00ml含10μg 甲醛溶液，立即再取此溶液10.00ml，加入100ml容量瓶中，加人5ml吸收原液，用水定容至100ml，此液1.00ml 含l.00μg甲醛，放置30min后，用于配制标准色列。此标准溶液可稳定24h。 4. 仪器和设备