当前位置:文档之家› 姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤时NF_B_ICAM_1的影响

姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤时NF_B_ICAM_1的影响

姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤时NF_B_ICAM_1的影响
姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤时NF_B_ICAM_1的影响

收稿日期:2009-02-19

基金项目:浙江省自然科学基金(Y205200)

作者简介:庄荣(1972-),男,主治医师,硕士研究生,E-mail:zrong

0576@https://www.doczj.com/doc/272660618.html,

通讯作者:李军(1968-),男,汉,教授,硕士生导师,E-mail:lijun0068

@https://www.doczj.com/doc/272660618.html,

姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤时NF-κB 、ICAM-1的影响

庄荣1,林孟相1,宋秋英2,李军3(温州医学院附属第二医院1重症监护科,2中医科,3麻醉科,浙江温州325007)

摘要:目的观察大鼠脑缺血再灌注损伤时海马神经元NF-κB 及ICAM-1随再灌注时间表达变化,探讨姜黄素脑保护的分子机制。方法制作SD 大鼠全脑缺血再灌注损伤模型。实验分为S 组、IR 组、Cur 组及SC 组。HE 染色观察海马锥体细胞形态改变、免疫组化观察海马NF-κB 蛋白的表达,酶联免疫吸附试验测定海马组织ICAM-1蛋白含量。结果

IR 组细胞轮廓消失,大部分细胞出现核固缩、碎裂。Cur 组70%细胞边界基本清楚,核形状基本规则。Cur 组海马CA1

区在再灌注后各时间NF-κB 的表达水平均低于相应时间点IR 组(P <0.05)。Cur 组海马ICAM-1蛋白含量均低于IR 组及SC 组,其中在1d 和3d 有显著差异(P <0.05)。结论姜黄素可能通过抑制ICAM-1、NF-κB 的表达减轻缺血再灌注神经元损伤。

关键词:姜黄素;脑缺血再灌注损伤;NF-κB ;ICAM-1中图分类号:R378

文献标识码:A

文章编号:1673-4254(2009)06-1153-03

Effects of curcumin on the expression of nuclear factor -κB and intercellular adhesion molecular 1in rats with cerebral ischemia -reperfusion injury

ZHUANG Rong 1,LIN Meng-xiang 1,SONG Qiu-ying 2,LI Jun 3

1

Department of Intensive Care Unit,

2

Department of Traditional Chinese Medicine,

3

Department of Anesthesiology,Second Affiliated

Hospital of Wenzhou Medical College,Wenzhou 325007,China

Abstract:Objective To investigate the effects of curcumin on the expression of nuclear factor-κB (NF-κB)and intercellular adhesion molecular 1(ICAM-1)in rats with cerebral ischemia-reperfusion (IR)injury.Methods A total of 160SD rats were randomized equally into sham-operated group,IR model group,curcumin treatment group and solvent control group.Global cerebral ischemia/reperfusion injury was induced in the latter 3groups with subsequent corresponding treatment.At 6h and 1,3,and 7days after the injury,10rats from each group were sacrificed,and brain sections were prepare for HE staining,immunohistochemical staining for NF-κB,and enzyme-linked immunosorbent assay for ICAM-1expression.Results In the IR model group,the contour of the pyramidal cells in hippocampal CA1region was almost indistinguishable after the injury,whereas more than 70%of the pyramidal cells retained distinct cell contour and nuclear boundary in curcumin treatment group.At 6h and 1,3,and 7days after the IR injury,the expression of NF-κB in curcumin treatment group showed significantly reduction in comparison with that in the IR model and solvent control groups (P <0.05),and the content of ICAM-1protein was also reduced,which was especially obvious at 1and 3days (P <0.05).Conclusion Curcumin can ameliorate cerebral pathological changes in the event of IR injury by suppressing the expressions of NF-κB and ICAM-1.Key words:curcumin;cerebral ischemia-reperfusion injury;nuclear factor-κB;intercellular adhesion molecular 1

炎症损伤及氧化应激可加重急性脑缺血再灌注后的损伤[1]。再灌注时的炎症反应促进了继发性脑损害,是脑缺血再灌注损害的主要原因之一。调节和控制核因子kappa-B (NF-κB)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的活性将可能通过多重环节影响缺血再灌注过程,从而减轻全脑缺血再灌注损伤。姜黄素在脑缺血损伤中的作用越来越得到大家的认可,现通过观察ICAM-1与NF-κB 的表达来探讨姜黄素在全脑缺

血再灌注损伤中的作用机制。

1材料与方法1.1动物及分组

选用雄性SD 大鼠160只,体质量200~250g ,清洁级,由温州医学院实验动物中心提供。随机分为假手术组(S 组)、缺血再灌注组(IR 组)、姜黄素预处理组(200mg/kg )及溶剂对照组(SC 组)共4组。各组按再灌注时间再随机分为6h 组、1d 组、3d 组及7d 组,每组10只。

1.2动物模型建立及给药

参照Pulsinelli 四血管阻断法建立短暂性全脑缺

血模型[2]。以大鼠出现翻正反射消失、四肢僵直、眼球

2009;29(6)南方医科大学学报(J South Med Univ)

1153··

与S 组相比,*P <0.01,与IR 组相比,▲P <0.05,与SC 组相比,

#

P <0.05

表1各组海马ICAM-1蛋白的比较(n =5,pg/mg)

S 组

IR 组SC 组Cur 组Ir 6h 35.5±5.349.7±10.2*47.6±8.2*47.1±6.9*Ir 1d 38.3±4.2157.0±33.6*156.0±30.5*115.1±24.2*▲#Ir 3d 37.4±4.8104.3±20.8*103.2±19.7*67.4±13.6*▲#Ir 7d 31.8±2.0

34.9±7.2

34.6±6.230.0±5.2

图1光镜细胞形态观察(HE ×400)

A B

C D

S 组海马CA1区IR 组海马CA1区SC 组海马CA1区Cur 组海马CA1区

苍白、瞳孔散大等缺血体征判断缺血模型的可靠性。假手术组分离双侧颈总动脉并电凝椎动脉,但不结扎双侧颈总动脉。姜黄素组于缺血前20min 腹腔注射姜黄素。对照组给予相同体积的生理盐水。

1.3样品制备和蛋白测定

将各组大鼠再分成两个亚组,每组5只。一组在大鼠缺血15min 再灌注后6h 、1d 、3d 、7d 断头取双侧海马。将海马置入手动玻璃匀浆器,按1∶10(mg ∶μl )加入预先冷冻的匀浆液,4℃离心3000/min ,10min 后取上清,分装置-80℃冰箱备用。另一亚组在各时间点多聚甲醛固定后断头取脑,常规石蜡包埋,连续切片,片厚4μm ,备HE 染色、免疫组织化学检测。

1.4HE 染色组织学观察

切片常规脱腊至水化后,苏木素轻度染色,伊红复染,脱水、透明、中性树胶封片,光镜观察海马CA1区锥体细胞的形态变化。

1.5NF-κB 免疫组化检测

兔抗NF-κB 多克隆抗体由Santa Cruz 提供。二步法免疫组化检测试剂盒(PV9000)由北京中杉金桥

公司提供。标本切片常规脱蜡、水化,按试剂盒提供的实验步骤进行操作,DAB 显色,光镜下观察,胞核出现深染为阳性着色。高倍镜下(400倍)在皮质和海马区随机各取5个视野。

1.6酶联免疫吸附试验测定海马组织ICAM-1含量

使用双抗体夹心法Elisa 测定大鼠海马组织匀浆

液中ICAM-1。大鼠ICAM-1Elisa 检测试剂盒购自美国eBioscience 公司,其有效测定范围为39~5000

pg/ml 。ICAM-1标准品倍比稀释后浓度分别为5000、2500、1250、625、312.5、156.25、78.125、39.0625pg/ml 。参考说明书操作,用OriginPro 8.0软件作出标

准曲线。

1.7统计学处理

采用SPSS 13.0统计软件分析,所有计量数据均

以均数±标准差表示,用Student-Newman-Keuls 检验(SNK-q 检验)样本总体均数是否相等,组间比较采用单因数方差分析(ANOVA )。当P <0.05表示有显著性统计学差异。

2结果

2.1光镜细胞形态学观察

S 组海马各区锥体细胞排列整齐,边界清楚,核膜边界清晰,核仁深染、清晰。I/R 组细胞轮廓消失,大部分细胞出现胞浆固缩,核固缩、碎裂。Cur 组70%细

胞边界基本清楚,核形状基本规则,核边界基本清晰,但少数细胞出现核染色变深,胞浆部分消失等变性表现(图1)。

2.2NF-κB 表达的变化

S 组各时间点海马CA1区无NF-κB 的阳性细胞表达。IR 组在缺血再灌注6h 后,大鼠缺血脑细胞内

可见NF-κB 的表达(17.56±4.62),再灌注1d 其表达值达最高峰(49.52±10.28),3d 时表达明显较前两时点减少(36.52±8.71),7d 时则更低(12.68±3.06)。与假手术组比,各时间点均有显著性差异(P <0.05)。Cur 组NF-κB 的表达规律与IR 组相似,且各时间点表达水平均明显低于IR 组及SC 组(P <0.05)。

2.3ICAM-1蛋白含量

假手术S 组各时间点海马区ICAM-1蛋白有少

量表达,缺血再灌注后6h 蛋白含量开始增加,1d 时含量达高峰,3d 还保持较高水平,7d 迅速降低达基

础水平,与S 组比较,6h ,1d ,3d 有显著差异(P <0.01)。再灌注后各时间点Cur 组海马ICAM-1蛋白含量均低于IR 组及SC 组,其中在1d 和3d 时间点有显著差异(P <0.05,表1)。

3讨论

南方医科大学学报(J South Med Univ)第29卷

1154··

NF-κB 是一种快反应转录因子,广泛存在于神

经元、神经胶质细胞和血管内皮细胞胞浆中。静息状态下,NF-κB 通常与I κB 结合成无活性的形式存在于胞质中,不具有调节基因转录的能力。当NF-κB 激活后,可以控制许多基因的表达,这些基因可以通过经典与非经典的途径调节一系列的病理生理过程[3]。

大量研究证明NF-κB 激活在脑缺血灌注中可加重脑损伤过程。Schneder 等[4]利用P50基因敲除大鼠进行研究,发现与野生型鼠相比,P50基因敲除大鼠在局灶性脑缺血损伤后,其梗死体积、脑组织水含量及神经功能缺损均明显减轻。应用NF-κB 抑制剂

MIN519后能显著减轻神经元和星形胶质细胞变性、

减小皮层梗死体积、促进神经功能恢复。我们研究发现,假手术组各时间点海马CA1区无NF-κB 的阳性细胞表达。IR 组在缺血再灌注6h 后,大鼠缺血脑细胞内可见NF-κB 的表达(17.56±4.62),并随再灌注时间而表达逐渐增多,再灌注1d 其表达值达最高峰(49.52±10.28),其后逐渐回落。表明NF-κB 在早期(6h)即可被激活,并在1d 内达到高峰,也可能比这出现的更早,有研究显示高峰可能出现在再灌注后

12h 左右[5]。NF-κB 早期表达,可能与诱导炎症分子,

促进炎症反应有关。缺血再灌注后氧自由基增加,同时钙离子激活细胞内物质,可触发大量前炎性因子的表达,如细胞活素类、生长因子、细胞粘附分子等,而这些基因的表达受NF-κB 的调控[6]。从实验中我们推测,如果能在缺血再灌注发生后尽早(6h 内)给予

NF-κB 抑制剂治疗,可能减轻脑损伤的疗效会更显著。

研究表明[7],ICAM-1在缺血灌注后2h 几乎不

表达,但再灌注后10h 已大量表达,并随时间逐渐增加,36h 达到高峰。各种原因引起的颅脑损伤中炎症反应的前提条件是炎症细胞黏附于血管内皮细胞[8],其中起核心作用的是ICAM-1,可介导多种炎性因子与血管内皮细胞的黏附。有研究发现,在急性脑梗塞区域微血管内ICAM-1的表达及粒性白细胞蓄积的量远远多于无缺血损伤侧半球。表明ICAM-1与白细胞的黏附密切相关[9]。因此抑制ICAM-1的表达,可有效减轻再灌注后炎症反应。

我们研究发现,假手术S 组各时间点海马区

ICAM-1蛋白有少量表达,缺血再灌注后6h 蛋白含量开始明显增加,1d 时含量达高峰,3d 蛋白含量仍保持较高水平,7d 迅速降低达基础水平。我们发现,ICAM-1随着时间呈动态变化,并在再灌注后早期大

量表达,并持续较长时间,提示ICAM-1在缺血再灌注早期即参与脑损伤过程。

姜黄素具有抗氧化、抗炎、抗细胞凋亡及调节神经递质和受体等作用

[10-11]

。我们研究还发现,应用姜

黄素预处理后,海马CA1区70%细胞边界基本清楚,核形状基本规则,很显然姜黄素具有保护神经元细胞、减轻脑组织缺血再灌注损伤的作用。同时我们也发现,应用姜黄素治疗后,缺血再灌注各时间点海马区NF-κB 、ICAM-1表达水平均明显低于相应时间点

IR 组及SC 组;表明全脑缺血再灌注后,姜黄素对海

马区神经元的保护作用可能与抑制NF-κB 、ICAM-1的表达,抑制炎症反应及细胞凋亡有关。参考文献:

[1]

Shin DH,Bae YC,Kim-Han,et al.Polyphenol amentoflavone affords neuroprotection against neonatal hypoxic-ischemic brain damage via multiple mechanisms [J ].J Neurochem,2006,96(2):561-72.

[2]Ulsinelli WA,Brierley JB,Plum F.Temporal profile of neuronal damage in a model of transient forebrain ischemia [J ].Ann

Neurol ,1982,11:491-8.

[3]Gilmore TD.Introduction-to-NF-κB:players,pathways,perspectives

[J ].Oncogene,2006,25:6680-84.

[4]Schneider A,Marlin-Villalba A,Weih F,et a1.NF-kappaB aclivaled

and promotes cell death in focal cerebral ischemia [J ].Nal Med,1999,5(5):554-9.

[5]Lao L,Chen X,Qin Z,et al.Could NF-κB and caspase-3be markers

for estimation of post-interval of human traumatic brain injury [J ]?Forensic Sci Int ,2006,162:174-7.

[6]Mattson MP,Camandola S.NF-kappa B in neuronal plasticity and

neurodegenerative disorders [J ].Clin Invest,2001,107:247-54.[7]Schneck MJ,Origitano TC.Hemicraniectomy and durotomy for

malignant middle cerebral artery infarction [J ].Neurosurg Clin N Am,2008,19:459-468.

[8]Lee H,Lin CI,Liao JJ,et al.Lysophospholipids increase ICAM-1

expression in HUVEC through a Gi-and NF-B-dependent mechanism [J ].Am J Physiol Cell Physiol,2004,287(6):C1657-66.[9]

Stenberg PE,Shuman MA,Levine SP,et al.Redistribution of alpha-granules and their contents in thrombin-stimulated platelets [J ].Cell Biol,1984,98:748-60.

[10]黄燕芬,洪行球,袁小凤.姜黄素水解衍生物对肝癌细胞增殖和

凋亡调控因子的影响[J ].中华中医院学刊,2008,26(8):

1757-59.

[11]Londeau N ,Laur Itzen I ,Widmann C ,et al.A potent protective role

of lysophospholipids against global cerebral ischemia and glutamate excitotoxicity in neuronal cultures [J ].Cereb Blood Flow Metab ,2002,22(7):821-34.

庄荣,等.姜黄素对大鼠脑缺血再灌注损伤时NF-κB 、ICAM-1的影响

第6期1155··

姜黄素的药理研究进展 - 药学论文

本科生毕业论文 论文题目:姜黄素的药理研究进展学校:徐州医学院 院部:药学院 专业:药学 学号:09XXXXXXXX 姓名:XXX 指导教师:刘毅 实习单位:徐州医学院论文工作时间:2012年09月至2012年10月

目录 摘要 (3) ABSTRACT (3) 正文 (5) 致谢 (97)

姜黄素的药理研究进展 实习生:荣礼(0916111009)药学院药学专业 指导教师:刘毅徐州医学院药学院 摘要 目的:探究姜黄素的药理研究进展。方法:本文对姜黄素的国内外的研究现状进行了深入的探究,查阅近年来国内外对于姜黄素的抗氧化、降血脂、杭凝血及抗肿瘤作用的研究概况。结果:本文对姜黄素的国内外的研究现状进行了深入的探究,查阅近年来国内外对于姜黄素的抗氧化、降血脂、杭凝血及抗肿瘤作用的研究概况。结论:本文对姜黄素的国内外的研究现状进行了深入的探究,查阅近年来国内外对于姜黄素的抗氧化、降血脂、杭凝血及抗肿瘤作用的研究概况。 关键词:姜黄素;抗氧化;降血脂;抗凝;抗肿瘤 Jiang Huangsu's progress in pharmacological research Student: Rong Li(0916111009) Pharmacy Speciality, Xuzhou Medical College Tutor: Liu Yi School of Pharmacy,Xuzhou Medical College ABSTRACT Objective: Research progress in pharmacological research of Curcumin. Methods: This article on Jiang Huangsu's research status at home and abroad have done deep research at home and abroad in recent years, access to Jiang Huangsu's antioxidant, hypolipidemic, hang coagulation and anti tumor effects of. Results: This article on Jiang Huangsu's research status at home and abroad have done deep research at home and abroad in recent years, access to Jiang Huangsu's antioxidant, hypolipidemic, hang coagulation and anti tumor effects of. Conclusion: This article on Jiang Huangsu's research status at home and abroad have done deep research at home and abroad in recent years, access to Jiang Huangsu's antioxidant, hypolipidemic, hang coagulation and anti tumor effects of. KEY WORDS: Antioxidant; blood lipid; anticoagulation; anti tumor

中药清半夏的功效

中药清半夏的功效 清半夏是中药中常见的一种药物,这个清半夏的主旨功能很多人表示不解,不知道清半夏到底可以用来治疗何种疾病,也不知道这个清半夏主要的功能到底有哪些,清半夏很多人用来止咳化痰,在患上了肺炎这个疾病的时候就会想到用这个清半夏的方法来治疗,足以见证这个清半夏的功效还是相当不错的,那么中药清半夏的功效有哪些呢? 清半夏为在南星科植物半夏(Pinellia ternata(Thunb.)Breit.)的块茎。 其它名称:地文,水玉,清半夏,示姑,羊眼半夏,和姑,蝎子草,地珠半夏,麻芋果,三步跳,泛石子,地鹧鸪,老和尚头,野芋头,天落星等 干燥块茎呈圆球形、半圆球形或偏斜状。表面白色,或浅黄色,未去净的外皮呈黄色斑点。上端多圆平,中心有凹陷的黄棕色的茎痕,周围密布棕色凹点状须根痕,下面钝圆而光滑,质坚实,致密。纵切面呈肾脏形,洁白,粉性充足;质老或干燥过程不适宜者呈灰白色或显黄色纹。粉末嗅之轮呛鼻,味辛辣,嚼之发粘,麻舌而刺喉。以个大、皮净、色白、质坚实、粉性足者为

佳。 性味与归经:辛,温,有毒。入脾、胃经。 功用主治:燥湿化痰,降逆止呕,消痞散结。治湿痰冷饮,呕吐,反胃,咳喘痰多,胸膈胀满,痰厥头痛,头晕不眠。外消痈肿。 用法用量:内服:煎汤;或入丸、散。外用:研末调敷。 宜忌:一切血证及阴虚燥咳、津伤口渴者忌服。 ①生半夏为类圆球形或扁圆球形,大小不一,白色或浅黄色,粉质,味辛辣,麻舌并刺喉。 ②清半夏为白色透明片状,质硬而脆,味微辣并涩。 ③法半夏为黄色或淡黄色,较为均匀的颗粒,质疏松,味甘淡。 ④姜半夏为淡黄色片状,质硬而脆,味辛辣。

这些就是关于中药清半夏的各种功效和作用,选择清半夏来熬制还有解毒的功效,大家如果患上了某种需要使用清半夏药物的疾病就要及时的利用这个清半夏的功效来给自己治病,当在使用清半夏来治病的时候要注意安全的用量,最好是严格的遵守医生的用药规则。

大鼠急性脑缺血及缺血再灌注中ERK5的表达情况

大鼠急性脑缺血及缺血再灌注中ERK5的表达情况 发表时间:2016-05-16T16:45:56.270Z 来源:《医药前沿》2016年4月第10期作者:谭中旭1 宋玉强(通讯作者)2 吕敬雷3 于力群1 [导读] 1青岛大学医学院山东青岛 266021) 2青岛大学医学院附属医院神经内科山东青岛 266003) (3青岛大学医学院附属医院神经功能检查科山东青岛 266003) 治疗急性脑缺血患者的最佳办法是能及时恢复脑组织血液供应, 然而恢复血流灌注给脑组织带来新的损伤, 即缺血再灌注损伤。 谭中旭1 宋玉强(通讯作者)2 吕敬雷3 于力群1 时圣桂1 (1青岛大学医学院山东青岛 266021) (2青岛大学医学院附属医院神经内科山东青岛 266003) (3青岛大学医学院附属医院神经功能检查科山东青岛 266003) 【摘要】目的:观察大鼠脑皮质中细胞外信号调节激酶5(ERK5)在缺血及缺血再灌的不同表达,探讨其在脑缺血再灌注损伤中的意义。方法:采用线栓法建立大脑中动脉闭塞( MCAO) 模型,所有大鼠随机分为假手术组、缺血梗死组和缺血再灌组。对各组大鼠行神经功能评分,TTC染色测定脑梗死体积,免疫组织化学法测定ERK5表达。结果:缺血再灌注组大鼠的神经功能缺损和脑梗死体积均比缺血梗死组大鼠严重。ERK5在缺血梗死组和缺血再灌组都表达,后者明显多于前者。结论:ERK5可能参与脑缺血再灌注损伤过程并起着重要作用。 【关键词】脑缺血;缺血再灌注损伤;细胞外信号调节激酶5(ERK5);表达 【中图分类号】R742 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2016)10-0172-02 Expression of ERK5 in rats cortex afer cerebral ischemia and reperfusion TAN Zhongxu1,SONG Yuqiang2,LV Jinglei3,YU Liqun1,SHI Shenggui11Qingdao University Medical College,Qingdao 266021,China.2Department of Neurology,the Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003,China .3 The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College,Qingdao 266003,China 【Abstract】Objective To observe the different expression of ERK5 in rats cortex in response to cerebral ischemia and ischemia/reperfusion, and investigate the significance in ischemia/reperfusion injury.Methods Blocking middle cerebral artery with intraluminal thread was used to build cerebral middle artery infarction model ( MCAO).All rats were randomly divided into sham operation group,ischemia groupand ischemia/reperfusion (I/R)group.The Longa score was used to evaluate revived rats and TTC staining was used to determine the infarct volumes.we investigated the activation and expression of ERK5 by immunohistochemistry.Results 24 hours after MCAO, neurological function scores were significant increased in I/R group compared with ISCH group. the infarct volume was in I / R group was larger.The activation of ERK5 was rapidly induced by ischemia, and I/R group were significantly higher than Ischemia group.Conclusion We hypothesize that ERK5 might participate in the pathogenesis of isehemic/reperfusion and play an important effect during ischemia/reperfusion injury. 【Key words】 Cerebral ischemia ;Ischemia/reperfusion injury; Extracellular signal regulated protein kinase(ERK5); Expression 1.前言 治疗急性脑缺血患者的最佳办法是能及时恢复脑组织血液供应, 然而恢复血流灌注给脑组织带来新的损伤, 即缺血再灌注损伤。目前研究证明,丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)参与脑缺血再灌注损伤的过程[1]。其中,细胞外信号调节激酶5(ERK5)是新发现的成员[2]。本实验通过采用线栓法构建大脑中动脉闭塞(MCAO) 模型,观察大鼠脑皮质ERK5在缺血及缺血再灌24h 的不同表达情况,探究其在缺血再灌损伤中的可能作用。 2.材料与方法 2.1 动物 选择8周龄成年健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠50只,体重220~260g, 由青岛市药物检验所实验动物中心提供。实验前将动物置于实验室1周适应环境,均自由饮水、进食,实验室室温(25±2)℃,相对湿度65%,自然光照。 2.2 方法 2.2.1动物模型的建立和分组大鼠制备局灶性脑缺血再灌注模型,采用Zea-Longa等的大脑中动脉线栓法[3]。具体步骤如下:采用2.0鱼线为栓线,以10%水合氯醛(300mg/kg)腹腔注射麻醉,仰卧固定,分离并暴露右侧颈总动脉(common carotid artery,CCA)、颈内动脉(internal carotid artery,ICA)和颈外动脉(external carotid artery,ECA),结扎并切断ECA及其分支,沿根部结扎ICA颅外分支翼腭动脉。由ECA残端插入一根鱼线,沿ECA、CCA分叉部和ICA轻轻推进,至ICA颅内分叉处时可阻断流入大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)的血流,进线长度为18~20mm。假手术组大鼠只暴露动脉,不进行插线操作。所有麻醉大鼠苏醒时间要求在术后2小时之内,未苏醒者剔除。待神经功能评分后,将符合实验要求的大鼠(即建模成功)随机分为缺血再灌组(I/R组)和缺血梗死组(ISCHE 组)。缺血再灌组:大脑中动脉阻闭2h后,抽出约10mm鱼线,恢复血流灌注24h;缺血梗死方法:大脑中动脉阻闭2h后不拔鱼线,继续阻塞24h。最后心脏灌注取脑,用4%的多聚甲醛灌注固定,制备石蜡切片。 2.2.2神经功能评分和脑梗死体积的测定参照Zea-Longa[3]、谢惠芳等[4]TTC染色法分别进行神经功能评分和测定脑梗死体积。 2.2.3免疫组织化学法(SABC法)检测ERK5蛋白表达石蜡切片脱蜡至水,0.01M PBS溶液洗2min×3次;3%H202室温lOmin灭活内源性酶;微波修复抗原;滴加5%BSA封闭液,室温孵育20min;滴加羊抗大鼠ERK5单克隆抗体(1: 200),4℃过夜;滴加生物素化二抗,37℃反应30min;用SABC免疫组化试剂盒染色,DAB显色。所有切片均在同一放大倍数下进行观察,每张切片先在低倍镜下随机选择梗死灶周围区4个象限视野,然后在高倍镜下(400倍)选择缺血灶周围5不连续的视野观察,计数阳性细胞,取其平均值。 2.3 统计学处理 采用SPSS 18.0软件包进行统计处理,数据均采用均值±标准差(x-±s)表示,各组间差异比较用方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。 3.结果 3.1 神经功能评分和梗死体积测定

姜黄素药理活性的研究进展

姜黄素药理活性的研究进展 关键词:姜黄素 活性 姜黄素(curcumin ,二阿魏酰基甲烷) 是从姜科姜黄属植物姜黄、莪术、郁金等的块根或根茎中提取精制得到的一种酚类色素,是一种天然的食品添加剂,是姜黄发挥作用的主要活性成分。姜黄素可溶于甲醇、乙醇、碱、醋酸、丙酮和氯仿等有机溶剂,微溶于苯和乙醚,不溶于水,是一种光敏性很强的物质, 需避光保存。其分子式为C 21H 20O 6, 结构见图1 。 图1 姜黄素结构式 近年的研究表明,姜黄素在抗肿瘤、抗炎、抗氧化、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗HIV 、抗菌等方面有很好的药理作用, 而且姜黄素毒性低, 具有良好的临床应用潜力。本文就姜黄素主要作用的研究进展作一综述。 1.抗肿瘤作用 1985年印度的Kuttan 等[1]首次提出姜黄和姜黄素具有抗肿瘤作用的可能性。自此以后, 众多学者对姜黄素抗肿瘤作用及其机制做了大量的研究, 证实了姜黄素可以抑制多种肿瘤细胞系的生长。美国国立肿瘤研究所已经将姜黄素列为第3 代癌化学预防药物,且已进入临床试验阶段[2]。 1.1 抗肝癌的作用 实验证实姜黄素具有体外抑制肝癌细胞的作用,孙军[3]通过姜黄素作用于人肝癌细胞株BEL- 7402 的实验研究证实,姜黄素可通过蛋白酶体途径减少人肝癌细胞HIF- 1α蛋白的表达。并且有学者根据姜黄素的药理特性及各种剂型的药代动力学特点,提出将较大剂量姜黄素与碘化油混合进行肝脏肿瘤的介入治疗[4]。厉红元等[5]报道了姜黄素可抑制肝癌细胞QGY 的生长。其抑瘤率与药物浓度和作用时间呈依赖关系。72h 的中效浓度(IC50)为49.50μmol/L ,流式细胞仪分析证实姜黄素能使QGY 细胞聚积在S 期,电镜观察发现姜黄素可导致细胞变性,坏死,诱导细胞凋亡。Chen 等[6]发现它可以抑制某些与入侵相关的基因的表达,包括基质金属蛋白酶14 (MMP14),神经元细胞结合分子,以及整合素Alpha 6 和Alpha 4;且可在mRNA 和蛋白水平上降低MMP14 的表达和MMP12 的活性。但有研究表明姜黄素在体内无抑制肝癌细胞的作用, 仅能延长机体的存活时间。其体内外作用机制的差异有待进一步研究。 1.2 抑制结肠癌的作用 姜黄素对结肠癌发生、发展的各个阶段均有抑制作用。在姜黄素对大鼠结肠癌的影响的研究中发现,姜黄素可以通过抑制转录因子Egr-1 与DNA 的结合活性,减低其对转录的诱导效应,而抑制癌症细胞中EGFR 基因的表达[7]。Kawamori 等[8]用雄HO H 3CO O O OH OCH 3

生姜的功效与作用以及禁忌

生姜的功效与作用以及禁 忌 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020

生姜的功效与作用以及禁忌 生姜属姜科,为多年生的宿根性草木植物,生产上通常作一年生种植。生姜是家庭常用调味品,同时又是一种常用中药。在药用方而,具有祛寒防暑等功效,“一杯清茶一片姜,御寒健胃是良方”。经过中医传统炮制的方法可将生姜变成干姜等不同作用的中药材。 具体说来,生姜的功效与作用包括: (1)抗肿瘤。鲜姜含有多元酸人参菇醇,不但可抑制癌细胞扩散,而且可防止癌细胞增殖,常服生姜可以抗癌。 (2)抗衰老。医学家观察发现,生姜的作用比维生素E更强,这种作用的机理是能防止脂肪食物的变质。同时,生姜的辛辣成分被人体吸收后,可抑制体内过氧化脂质的产生,从而达到的作用。现代科学研究表明,生姜中含有过氧化物歧化酶,它是一种抗衰老的物质。因此,民间有:“晨吃三片姜,赛过人参汤”之说,确有一定的科学道理。生姜中的有效成分能防止脂肪食物中的过氧反应,即可减慢其氧化变质的速度,生姜中的姜辣素进入体内吸收消化后,能产生一种抗衰老活性的抗氧化酶一过氧化物歧化酶,抑制体内脂质过氧化物和脂褐质色素一中老年斑的产生,延缓衰老的出现。 (3)止牙痛。生姜还含有姜醇、姜酚、姜油菇、姜稀、辣素、龙脑、柠檬醛等成分,这些物质还具有良好的杀菌、消炎、止痛作用,牙痛时嚼几片生姜,牙痛即可减轻。 (9)解芋头毒。芋头在手工剥皮过程中,手部皮肤奇痒难忍,如果用数片生姜涂擦痒处,痒感即可消退。此外,在煮芋头时,加入数片生姜,吃时舌头不会出现麻痒。 (5)预防胆结石。生姜中所含的大量的姜酚,能抑制前列腺素的过多分泌,减少胆汁中粘蛋白含V.,使胆汁中钙离子不至于因粘蛋白过多而与胆红素结合,从而可以预防胆结石的形成。此外,生姜中含有较多的油树脂,有较强的利胆作用,因此,胆囊炎患者常吃些生姜有益处。 (6)解毒和药用作用。生姜除解毒作用外,还有解表散寒、止呕祛痰的功效,用于治风寒引起的感冒、呕吐、咳嗽等症。

姜附御寒汤的功效与作用

姜附御寒汤的功效与作用 姜附御寒汤是一种纯天然的中药方剂,它是以几种生活中常见的中药材为主要原料,采用了药食同源的传统中医配方混合而成的。下面就来看一看姜附御寒汤有哪些功效吧。 【处方】 干姜(炮)1钱2分,半夏(汤洗)5分,柴胡(去苗)1钱, 防风(去芦)半钱,羌活1钱,藁本(去土)8分,人参(去芦)半钱,白葵花5朵(去心萼),甘草(炙)8分,升麻7分,郁 李仁(汤浸,去皮尖)半钱,当归身6分(酒制),桃仁半钱(汤浸,去皮尖,与郁李仁研如泥,入正药),黑附子(炮,去皮脐)4钱。 【功能主治】 中气不足,遇冬天寒气客于脾胃之间,相引两胁缩急而痛,善嚏,鼻中流浊涕不止,不闻香臭,咳嗽脑痛,上热如火,下寒如冰,头时作阵痛,或暴痛,两目中流火,视物(目荒)(目荒)然,或耳鸣耳聋,喜晴明,恶阴寒,夜不得安卧,胸中痰涎,膈咽不通,饮食失味,口中沃沃,牙齿动摇,不能嚼物,腰脐间及尻肾膝足胻冷,阴汗自出,行步失力,风痹麻木,小便数,气短喘喝,少气不足以息,卒遗失无度。妇人白带,阴户中大痛,上牵心而痛,

黧黑失色;男子控睾而痛,牵心腹阴阴而痛,面如赭色,食少,大小便不调,烦心,霍乱,逆气,里急,而腹皮白或黑,下气腹中腹鸣,膝下筋急,及腰背肩胛大痛,此阴盛阳虚之证。 【用法用量】 上(口父)咀,都作1服。水5大盏,煎至3盏,入黄耆1钱,橘皮5分,草豆蔻1钱,再煎至2盏,再入酒制黄柏3分,酒制黄连3分,枳壳3分,酒地黄2分(此4味锉碎,预1日先用新水多半盏浸1宿),蔓荆子2分(亦预先1日用新水各另浸),将前正药去滓,入此3味,再上火同煎至1盏,去滓,空心热服之,待少时以美膳压之。 【注意】 忌肉汤,宜食肉。 【摘录】 《东垣试效方》卷二 以上就是向大家介绍了关于姜附御寒汤的知识,相信大家看完之后对于姜附御寒汤的认识会更加清晰。姜附御寒汤对于一些疾病来说,帮助是很大的。多学习一些相关的知识对于自己的身体健康也是很有帮助的,要懂得调理身体。

常用中药品种论述之半夏与法半夏姜半夏清半夏

常用中药品种论述之半夏与法半夏姜半夏清半夏 半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternata (Thunb. )Breit. 的干燥块茎。又名:水玉、地文、三叶老、三步跳、老鸹头、泛石子、狗芋头、珠半夏、麻芋果、三叶半夏、小天老星、无心菜根、老和尚头、地珠半夏、羊眼半夏。原植物半夏除内蒙古、西藏尚未见野生的外,全国各地均有分布。其狭叶变型f. angustata (Schott )Makino 小叶狭披针形,产山东,总生物碱含量高于普通半夏。 本品药材性状:呈类球形,有的稍偏斜,直径1~1.5cm。表面白色或浅黄色,未去净的外皮呈黄色斑点,顶端多圆平,有凹陷的茎痕,周围密布棕色麻点状根痕;下面钝圆,较光滑。质坚实,纵切面呈肾脏形,断面洁白,富粉性,质老或干燥过程不适宜者呈灰白色或显黄色纹。气微,味辛辣,嚼之发黏,麻舌而刺喉。 本品味辛,性温,有毒;归脾、胃、肺经。功能:燥湿化痰,降逆止呕,消痞散结。中医临床用于湿痰寒痰,咳喘痰多,痰饮眩悸,风痰眩晕,痰厥头痛,呕吐反胃,胸脘痞闷,梅核气;外治痈肿痰核。法半夏(半夏炮制加工品)功能燥湿化痰,用于痰多咳喘,痰饮眩悸,风痰眩晕,痰厥头痛。姜半夏功能温中化痰,降逆止呕,用于痰饮呕吐,胃脘痞满。清半夏功能燥湿化痰,用于湿痰咳嗽,胃脘痞满,痰涎凝聚,咯吐不出。现代药理研究表明:本品具有镇

咳,祛痰,抑制唾液腺分泌,镇吐和催吐,抗生育,抑制肾上腺皮质功能,抑制胰蛋白酶水解,抗心律失常,抑制心功能,降低血压,催眠,抗惊厥,凝集红细胞,抗癌,促细胞分裂,抗白血病,激活免疫系统,兴奋迷走神经,抗溃疡,促进胆汁分泌,镇痛,解毒,利尿,抗矽肺等作用。注意:本品尚有致畸作用,生半夏长期给药可引起肾脏代偿性增大。 半夏为常用中药,始载于《神农本草经》,列为下品。谓“味辛,平。主伤寒寒热,心下坚,下气,喉咽肿痛,头眩,胸胀咳逆,腹鸣,止汗。一名地文,一名水玉。”《本草图经》曰:“半夏,生槐里川谷,今在处有之,以齐州者为佳,二月生苗一茎,茎端出三叶,浅绿色,颇似竹叶而光,江南者似芍药叶。根下相重生,上大下小,皮黄肉白。五月、八月内采根、以灰二日,汤洗暴干。一云五月采者虚小,八月采者实大。然以圆白,陈久者为佳。其平泽生者甚小,名羊眼半夏。又由跋绝类半夏,而苗高近一、二尺许,根如鸡卵大,多生林下,或云即虎掌之小者,足以相乱。半夏主胃冷呕哕,方药之最要。” 据胡世林考证,半夏之名始见于《礼记?月令》:“五月半夏生, 盖当夏之半。”入药则首见于《五十二病方》。张仲景《金匮要略》所创用的半夏泻心汤、半夏厚朴汤等十余个以半夏为主药的方剂至今仍为中医和日本汉方医所广泛使用。据558 个处方的微机分析结果,半夏在处方中出现频率位于第22 位。日本210 个法定汉方中含半夏者有46 个,占22%。由此可见,半夏在国内外防治疾病和中药市场上所处的重要地位。

脑缺血再灌注损伤机制及治疗进展

脑缺血再灌注损伤机制及治疗进展 西安交通大学医学院第二附属医院麻醉科710004 薛荣亮 脑缺血一定时间恢复血液供应后,其功能不但未能恢复,却出现了更加严重的脑机能障碍,称之为脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIR)。 脑缺血再灌注损伤与自由基的生成、细胞内钙超载、兴奋性氨基酸毒性、白细胞高度聚集和高能磷酸化合物的缺乏等有关。急性局灶性脑缺血引起的缺血中心区死亡以细胞坏死为主,目前认识的比较清楚,即脑缺血后5-7分钟内,细胞能量耗竭,K+通道受阻,膜电位降低,神经末梢释放谷氨酸,通过兴奋谷氨酸受体(包括NMDA 、AMPA和KA 受体)致使细胞膜上的Ca2+通道开放,引起Ca2+超载,高Ca2+可激活NOS,使NO和氧自由基的形成增加,引发脂质过氧化,引起膜结构和DNA的损伤;Ca2+还可活化各种酶类,加剧细胞损伤和能量障碍,引发缺血级联反应,结果细胞水肿、细胞膜破裂,细胞内酶和炎性介质释放,引起细胞坏死。 近年来认识到半暗带区域于再灌注数天后出现了迟发性神经元死亡(DND),DND常出现在缺血再灌注后2-4日,主要发生在海马、纹状体及皮质区域,DND需要数日时间、有新蛋白质合成的、需要消耗能量的、为无水肿的细胞自杀过程,称之为细胞凋亡(PCD)。脑缺血再灌注损伤既包括急性细胞坏死也包括细胞凋亡,对于DND的确切机制目前仍不清楚,尚需进一步深入研究。 现对脑缺血再灌注损伤机制的研究进展及保护措施简述如下:1.基因活化 脑缺血再灌注损伤后可出现大量基因表达,大约有374种基因出现

变化,绝大多数基因与凋亡有关,其中57种基因的蛋白表达是缺血前的 1.7倍,而34种基因的表达量出现下降,均发生在4小时到72小时, 包括蛋白质合成,基因突变,促凋亡基因,抑凋亡基因和损伤反应基因变化等,这些基因的相互作用最终决定了DND的发生。 2.兴奋性氨基酸毒性 兴奋性氨基酸毒性是指EAA受体活化而引起的神经元死亡,是脑缺血性损伤的重要触发物和介导物。EAA可活化胞内信号转导通路,触发缺血后致炎基因表达。CA1区神经细胞分布着大量的EAA受体,而抑制性氨基酸受体分布很小,这就为缺血后的兴奋性毒性提供了基础。另外,CA1区较CA3区对缺血损伤敏感是由于其兴奋性氨基酸受体的类型不同,CA1区以NMDA受体为主,CA3区以KA受体为主,而KA 受体对缺血敏感性较差,可能是造成DND发生的重要原因。 3.自由基及脂质过氧化 脑缺血再灌注期间产生大量自由基。其有害作用可概括为:①作用于多价不饱和脂肪酸,发生脂质过氧化。②诱导DNA、RNA、多糖和氨基酸等大分子物质交联,交联后的大分子则失去原来的活性或功能降低。③促使多糖分子聚合和降解。自由基可广泛攻击富含不饱和脂肪酸的神经膜与血管,引发脂质过氧化瀑布效应(oxygen burst),蛋白质变性,多核苷酸链断裂,碱基重新修饰,细胞结构的完整性破坏,膜的通透性、离子转运、膜屏障功能均受到严重影响,从而导致细胞死亡。自由基还能导致EAA释放增加,促使脑缺血后DND发生。 4.热休克蛋白表达紊乱 热休克蛋白是在多种应激原的作用下生成的分子量为7-200KD的

线栓法大鼠脑缺血再灌注模型的制备

线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型的方法研究 马贤德1孙宏伟1 柴纪严1 赵金茹1 (1 辽宁中医药大学,辽宁沈阳 110032;) 摘要①目的建立一种比较系统,操作简单,成功率高的大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注动物模型,达到只要读者根据本文所述的方法操作就能制作出MCAO再灌注模型的目的。 ②方法成年健康雄性 SD大鼠40只,参照Longa法并适当改进建立MCAO模型20只,假手术组20只。本文将详细叙述手术过程以及再灌注时间点的合理选择。最后利用行为学测试、四氮唑(TTC)染色对模型成功与否进行判定。③结论线栓法是一种操作简单的制备MCAO 再灌注动物模型的方法,并且此方法的再灌注效果较为明显。 关键词动物模型;脑缺血;再灌注;线栓法 Establishment a model of rat ischemia-reperfusion injury with intraluminal suture Ma Xian-de1 Sun Hong-wei1 Chai Ji-yan1 Zhao Jin-ru1 (1.Liaoning University of Chinese Traditional Medicine, Shenyang, 110032) Abstract: Objective To establish a model of rat ischemia-reperfusion injury, in terms of the model, the operation will be simple, and the achievement ratio will be high. Methods: 40 Male Sprague-Dawley ( SD ) rats were separated into two groups randomly: 20 were model of rat ischemia-reperfusion injury based on Longa method, and the other 20 were sham-operated group. The process of the operation and the selection of different time point following ischemic-reperfusion were discussed in the paper. What’s more , the model was appraised by behavioral test and Triphenyl Tetrazolium Choloride(TTC)Staining. Conclusion: The operation of intraluminal suture method is very simple for the establishment of model of rat ischemia-reperfusion, what’s more, the effect of reperfusion is very obvious. Key words: Animal Model, ischemia, reperfusion, intraluminal suture 脑缺血再灌注动物模型是研究缺血性脑血管病的一条重要途径,因为脑缺血再灌注动物模型具有很好的重复性并能最大程度模拟人类缺血性卒中的发生。早在1986年,日本学者Koizumi发明了线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型。1995年,我国也出现了相关的报道。目前人们比较公认的是Longa等建立的大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注动物模型。国内一些学者对此方法又进行了改进,但仍存在一些问题,例如:手术操作过程复杂,实验动物死亡率较高,而模型成功率较低,并且在所发表的文章中普遍存在一个缺点,就是对该模型的制作过程描述得过于简单,读者往往不能按照此类文献完成模型的制备工作。本文旨在前人研究的基础上,建立一种操作简单,成功率高的 MCAO再灌注模型,并将此方法图文并茂的展现给读者,使读者只要根据本文所述的方法操作就能制作出MCAO再灌注模型。 1 材料与方法 1.1 实验材料、动物及分组健康雄性SD大鼠40只,体重280-320g,由辽宁中医药大学实验动物中心提供。随机分为模型组和假手术组,每组20只。四氮唑红(TTC)染料,由沈阳市博尔美试剂公司提供。 1.2 栓塞线的制备栓塞线采用 2.5号钓鱼线,直径0.25-0.28mm。将其剪成4cm长,一端用细砂纸打磨成半球形(需在显微镜下筛选),再用记号笔分别在距打磨端0.6cm处、1.8cm

醋泡姜的功效与作用

醋泡姜的功效与作用 大家都知道生姜对于养生来说有很大的作用,但是当生姜和醋夹在一起的时候,又可以起到什么作用和功效呢?和醋混在一起,会不会使姜的作用大打折扣了呢?下面就来为大家介绍一下。醋泡姜的功效与作用: 醋泡生姜能促进血液循环,治感冒,增加抵抗力。也有辅助治疗关节炎的作用。 醋泡生姜做法 1.先把生姜切成薄片。最好使用鲜姜,鲜姜有非常好的药用功效,还可以增强血液循环、促进消化。姜片不用切得太厚,但一定要切得均匀。 2.把切好的姜放到瓶子里,随后把米醋倒入瓶里,注意,这个瓶子一定要洗干净,瓶子里面不能有油,以免生姜变质;米醋一定要没过姜片,不能让姜片露出来,随后把这瓶用米醋泡的姜片放到冰箱的冷藏室里储存。一周以后就可以每天早上吃2~4片鲜姜,有非常好的降血脂、辅助治疗关节炎的作用。 治胃寒的简单良方,一试果真效果不凡。此方如下:优质陈醋500毫升、老生姜100克。将醋倒入有盖的容器里,将生姜洗净切片,放入醋中,浸泡两天后即成。胃寒者每天吃泡好的生姜2~3次,每次2~3片,5天为一个疗程。醋泡生姜可治胃寒 醋泡姜,好吃又健康 醋泡生姜能促进血液循环,治感冒,增加抵抗力。也有辅助治疗关节炎的作用。 醋泡姜 功效:辛温解表,适用于风寒感冒 制作方法:将整块姜浸于老陈醋中,至少一个星期即可食用。 食用方法:吃姜2-3块,喝醋20—50ml (30ml最佳) 每日3次 生姜醋泡脚治失眠 每晚睡觉前,用三大片生姜加入小半盆水中,煮沸后加醋一勺,待水温适宜,浸泡双脚30分钟(其间可适量加热水以保温)。连续泡脚半月后失眠可愈。 醋泡姜祛瘊子 用生鲜姜(手掰开,不见铁器)泡在陈醋里,每天拿醋泡姜块摩擦患处三次以上.经过一周左右,瘊子 就消失了. 生姜既可作蔬菜,调味料,又可入药,用途非常广泛。民间流传有很多关于姜的歌谣,如“冬吃萝卜夏吃姜,不用医生开 中医认为,生姜味辛,性温,有发汗解表,温中止呕、解毒等功用,药理研究表明,生姜具有防氧化抗衰老功能。其所含挥发油能使血液循环加快,全身温暖、兴奋神经。姜辣素能刺激胃液分泌,有促进消化作用。

Sec22b及Ykt6在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用机制研究

Sec22b及Ykt6在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用机制研究中文摘要 Sec22b及Ykt6在大鼠脑缺血再灌注损伤中的 作用机制研究 中文摘要 第一部分Sec22b及Ykt6与脑缺血再灌注的相关性研究目的:研究大鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)后脑组织中Sec22b及Ykt6的蛋白表达水平及其分布的变化。 方法:①随机选取30只SD大鼠分为以下5组:假手术组、MCAO/R后6h、12h、24h、48h,每组6只大鼠。所有大鼠均在脑组织缺血再灌注后相应时间点被处死。取大鼠脑梗侧脑组织,通过Western blot分析及免疫荧光技术来检测Sec22b及Ykt6的蛋白水平及分布情况。②培养大鼠原代神经元细胞,随机分为以下5组:正常对照组、OGD/R后6h、12h、24h、48h。所有神经元细胞均在氧糖剥夺再灌注后相应时间点固定细胞,通过Western blot分析及免疫荧光技术来检测神经元内Sec22b及Ykt6的蛋白水平及分布情况。 结果:1、大鼠脑缺血再灌注后脑组织内的Sec22b水平呈先上升后下降的变化,以MCAO/R后24h组Sec22b蛋白水平上升最为显著(P<0.01);而Ykt6水平呈逐渐下降趋势,在所研究的时间点内以MCAO/R后48h组Ykt6蛋白水平下降至最低(P <0.05)。2、神经元氧糖剥夺再灌注后神经元内的Sec22b水平同样呈先上升后下降的变化,以OGD/R后24h组Sec22b蛋白水平上升最为显著(P<0.01);而Ykt6水平同样呈逐渐下降趋势,在所研究的时间点内以OGD/R后48h组Ykt6蛋白水平下降至最低(P<0.05)。3、体内免疫荧光结果显示Sec22b在脑缺血再灌注后24h细胞内的定位明显升高;体外免疫荧光结果显示氧糖剥夺再灌注后24h神经元细胞内Sec22b 主要聚集在神经元轴突的末梢。 结论:MCAO/R后Sec22b的表达水平明显升高,并且主要积聚在神经元轴突的末梢;而Ykt6的表达水平呈逐渐下降趋势。 关键词:脑缺血再灌注;氧糖剥夺再灌注;Sec22b;Ykt6。 I

姜黄中姜黄素的提取工艺研究

姜黄中姜黄素的提取工艺研究

————————————————————————————————作者:————————————————————————————————日期:

姜黄中姜黄素的提取工艺研究-工程论文 姜黄中姜黄素的提取工艺研究 姜黄中姜黄素的提取工艺研究 Study of the Extraction Process of Curcumin in Curcuma 牛睿NIU Rui;韩宁娟HAN Ning-juan;方欢乐FANG Huan-le;许乐XU Le (西安培华学院,西安710125) (Xi′an Peihua University,Xi′an 710125,China) 摘要:从中药材姜黄中提取主要成分姜黄素的提取工艺及最优实验条件的研究,选择回流提取法及超声波提取法进行比较,得出最优提取方案。采用乙醇加热回流法、超声波提取法进行四因素三水平正交实验。结果显示提取条件为浓度65%乙醇,提取两次,药材倍数为5—10倍,提取时间2小时;超声功率40W,温度控制在室温,料液比1:15,提取时间45min,采用75%的甲醇作为溶剂时,姜黄素提取率较高。因此适宜的提取条件可提高姜黄素的提取量,简化实验操作,节省物料。 Abstract: This article studies the extraction technology of curcumin in curcuma and the optimal experimental conditions. The refluxing extraction method and ultrasonic extraction method are compared to get the optimal extracting solution. It adopts ethanol heating reflux method and ultrasonic extraction method for four factors three levels orthogonal experiment. Results show that the extraction conditions are: concentration 65% ethanol, twice extraction, medicinal herbs multiples

姜半夏的功效与作用

姜半夏的功效与作用 用于痰多咳嗽:姜半夏性燥可化痰,其所化之痰,以脾不化湿,聚而成痰者为主,为治湿痰的要药,用于痰湿壅滞、咳嗽气逆等症,常与陈皮、茯苓等配伍;治痰多咳嗽,又常与贝母配伍应用。性温,也可治寒痰,可与白芥子、生姜等同用;因其化痰力佳,故又可治热痰与风痰,治热痰可与瓜蒌、黄芩等配伍;致风痰,宜与天南星等同用。 用于胸脘痞闷,胸痹,结胸:姜半夏有辛散温通、化痰、燥湿之效,可用于痰内阻、胸脘痞闷病症;如寒热互结,可配黄芩、黄连、干姜等同用,可收辛开苦降、散结除痞的功效(如半夏泻心汤)。此外,又常用于胸痹疼痛,配瓜蒌、薤白等同用;治结胸症可与瓜蒌、黄连等同用。 用于瘿瘤瘰历、疮疡肿痛、梅核气:姜半夏可化痰散结,可用以治疗痰湿结聚所致的瘿瘤、瘰历痰核、阴疽肿痛,或痰气互结的梅核气等病症。治瘿瘤瘰历痰核,可与海藻、黄独、贝母等配用。痈疽未溃者可用生半夏配生南星等同研,调醋外敷,有散结消肿的功效。用治梅核气,可配厚朴、紫苏等同用。 白术功效与作用 具有健脾益气,燥湿利水,止汗,安胎的功效。用于脾虚食少,腹胀泄泻,痰饮眩悸,水肿,自汗,胎动不安。《医学启源》记载:“除湿益燥,和中益气,温中,去脾胃中湿,除胃热,强脾胃,进饮食,止渴,安胎。” 与白术健脾益气功效相关的药理作用为调整胃肠运动功能、抗溃疡、保肝、增强机体免疫功能、抗应激、增强造血功能等作用;其燥湿利水功效与利尿作用有关;而安胎功效与抑制子宫收缩作用有关。白术还有抗氧化、延缓衰老、降血糖、抗凝血、抗肿瘤等作用,白术的抗氧化作用。能有效抑制脂质过氧化作用,降低组织脂质过氧化物的含量,避免有害物质对组织细胞结构和功能的破坏。白术有延缓老年肾脏衰老的作用,可使老龄的肾脏结构有明显改善。 炒白术功效很多,食用方法也很简单,但常常用于食疗,有预防的作用,炒白术属于中药,我们都知道中药一般无副作用,因此在日常生活中我们可以利用白术进行食疗,作用明显、取材方便,是值得推荐的食疗药材,体虚的人们都不妨试一下。 枳实是临床常用的中药,能够破气,散痞,泻痰,消积。临床常用于治胸腹胀满,胸痹,痞痛,痰癖,水肿,食积,便秘,胃下垂,子宫下垂,脱肛等等。响石潭下面详细说一下枳实的功效与作用。 为芸香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培变种或甜橙C.sinensisOsbeck的干燥幼果,主产于四川、江西、福建、江苏等地。5~6 月间采集自落的果实,自中部横切为两半,晒干或低温干燥,较小者直接晒干或低温干燥。用时洗净、闷透,切薄片,干燥。生用或麸炒用。 【药性】苦、辛、酸,温。归脾、胃、大肠经。 【功效】破气除痞,化痰消积。 【用法用量】煎服,3~9g,大量可用至30g。炒后性较平和。

第二十三讲缺血再灌注损伤概论修订版

第二十三讲缺血再灌注 损伤概论 Document number:PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998

第二十三章缺血-再灌注损伤 一、基本要求 1. 掌握自由基、活性氧、缺血-再灌注损伤、氧反常、钙反常、pH反常、钙超载、无复流现象和呼吸爆发的概念, 重点掌握缺血-再灌注损伤的发生机制。 2. 熟悉缺血-再灌注损伤的原因和条件, 熟悉缺血-再灌注损伤时机体的功能和代谢变化。 3. 了解防治缺血-再灌注损伤的病理生理基础。 二、知识点纲要 (一)缺血-再灌注损伤的概念 各种原因造成组织血液灌流量减少,可使细胞发生缺血性损伤。再灌注具有两重性,多数情况使缺血组织和器官的功能结构得以修复,患者病情得到控制。但是,部分患者或动物缺血后再灌注,不仅没使组织器官功能恢复,反而使缺血所致功能代谢障碍和结构破坏进一步加重,这种现象称为缺血-再灌注损伤。与之密切相关的概念,还有氧反常、钙反常和pH反常。缺血-再灌注损伤在不同种属和各种组织器官均可发生,具有普遍性。 ( 二 ) 缺血-再灌注损伤的原因和条件 再灌注损伤取决于缺血时间、侧支循环、需氧程度以及电解质浓度。 ( 三 ) 缺血-再灌注损伤的发生机制 1. 自由基的作用 (1) 自由基的概念、特性、类型、体内代谢和生物学意义 (熟悉和了解) (2) 缺血-再灌注时氧自由基生成增多的机制 (掌握) 1) 黄嘌呤氧化酶形成增多; 2) 中性粒细胞的呼吸爆发;3) 线粒体损伤,氧分子单电子还原增多;4) 儿茶酚胺增加,自氧化增强。 (2) 自由基的损伤作用(掌握) 1) 生物膜脂质过氧化增强导致①膜结构破坏──膜的液态性和流动性减弱,通透性增强;②抑制膜蛋白功能──离子泵失灵和细胞内信号传递障碍;③线粒体功能受损──ATP 生成减少。 2) 细胞内Ca2+超载源于自由基引起细胞膜通透性增强,膜上Na+-K+-ATP酶失活和线粒体功能障碍。 3) DNA 断裂和染色体畸变外面无组蛋白保护的线粒体DNA对氧化应激敏感。 4) 蛋白质变性和酶活性降低自由基可引起蛋白质分子肽链断裂,使酶的巯基氧化。 5) 诱导炎症介质产生自由基可导致脂质过氧化和胞内游离钙增加,激活磷脂酶,脂加氧酶及环加氧酶。 2. 钙超载 (1) .细胞内钙稳态调节 (熟悉和了解) (2) 再灌注时细胞内钙超载的机制 (掌握) 1) Na+-Ca2+交换异常;2) 细胞膜通透性增高;3) 线粒体功能障碍;4) 儿茶酚胺增多。 (3) 钙超载引起再灌注损伤的机制 (掌握)

相关主题
文本预览
相关文档 最新文档