遂昌县中医院 临床微生物室
标准操作程序
SOP
临床微生物室标准操作程序（SOP）目录
1.标本采集与送检原则标准操作程序----------------------WSW-SOP-1
2.血液及骨髓标本的采集标准操作程序——————————WSW-SOP-2
3.呼吸道标本留取标准操作程序—————————————WSW-SOP-3
4.尿液标本留取标准操作程序——————————————WSW-SOP-4
5.脓及创伤感染标本留取标准操作程序——————————WSW-SOP-5
6.生殖道分泌物标本采集标准操作程序——————————WSW-SOP-6
7.粪便标本采集标准操作程序——————————————WSW-SOP-7
8.穿刺液标本留取标准操作程序--------------------------WSW-SOP-8
9.脑脊液、胆汁标本采集标准操作程序——————————WSW-SOP-9
10.组织标本的采集标准操作程序—————————————WSW-SOP-10
11.静脉道管标本采集标准操作程序————————————WSW-SOP-11
12.眼、耳及乳突分泌物标本采集标准操作程序———————WSW-SOP-12
13.样本接收、核对、接种、培养标准操作程序———————WSW-SOP-13
14.菌株的纯化、鉴定、药敏流程标准操作程序———————WSW-SOP-14
15.普通MicroScan板接种培养流程标准操作程序——————WSW-SOP-15
16.判读普通革兰阳性板标准操作程序----------------------WSW-SOP-16
17.判读普通革兰阴性板标准操作程序----------------------WSW-SOP-17
18.普通Microscan 板报告标准操作程序--------------------WSW-SOP-18
19.常见标本培养结果解释标准操作程序--------------------WSW-SOP-19
20.KB法药敏试验标准操作程序----------------------------WSW-SOP-20
21.超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测标准操作程序——————WSW-SOP-21
22.β-内酰胺酶检测标准操作程序-------------------------WSW-SOP-22
23.革兰染色标准操作程序————————————————WSW-SOP-23
24.抗酸染色标准操作程序————————————————WSW-SOP-24
25.解脲/人型支原体培养标准操作程序---------------------WSW-S O P-25
26.AccuStep衣原体抗原检测标准操作程序------------------WSW-SOP-26
27.ATB FUNGUS2真菌药敏标准操作程序--------------------WSW-SOP-27
28.培养基的制备标准操作程序-----------------------------WSW-SOP-28
29.触酶试验标准操作程序---------------------------------WSW-SOP-29
30.氧化酶试验标准操作程序-------------------------------WSW-SOP-30
31.芽管试验标准操作程序---------------------------------WSW-SOP-31
32.临床微生物实验室安全标准操作程序---------------------WSW-SOP-32
遂昌中医院
临床微生物实验室 标本采集与送检原则
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
正确采集和处理标本是实验室取得正确结果的前提，必须予以重视。但对标本采集的方法和时间，标本的来源，实验室常不能加以控制，实验室人员有责任通过各种方式，指导医师和护士正确采集标本。特制定以下原则，以便统一标准执行。【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【基本原则】
1.送检报告单应注明被检人的姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验
目的、抗生素使用情况，使实验室正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。
2.尽量在抗生素使用前采集标本。
3.在采集血液、脑脊液、穿刺液等标本时，应严格无菌操作，避免杂菌污染。
4.标本采集后应立即送到实验室，床边接种可提高病原菌的检出率。
5.以拭子采集的标本如咽拭子、伤口拭子或肛拭子等，最好采用运送培养基送
检，应采用吸水性好、不宜干燥的材料取样。
6.混有正常菌群的标本，如痰、尿、伤口拭子、不可置肉汤培养基送检。
7.盛标本容器需经灭菌处理，但不得使用消毒剂。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 血液及骨髓标本的采集
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导血液及骨髓标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.一般采血部位为肘静脉，疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为
宜。切忌在静脉滴注药物处（或一手滴药，另一手采血）采集血标本； 2.选择体温上升时才血可提高阳性率。对正在使用抗菌药物而又不能停药的患
者，应在下次投入抗菌药物前采集标本。
3.采集部位先以70%酒精擦拭。再用棉签沾取2%碘酊涂于欲作穿刺处，让其干
后再用70%酒精擦拭。
4.全部手续再作一此（如必要）。
5.采血量以培养液体积的1/10为宜,成人每次采血5-10ml,婴幼儿每次采血
1-5ml;
6.骨髓采集:严格消毒后抽取骨髓0.5-1ml
7.血液或骨髓抽出后过火，立即注入双相血培养瓶，马上充分混匀后，及时送
检。
8.每列至少采血两次，间隔时间据病情而定，以利于提高阳性率和区别感染菌
和皮肤污染菌。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 呼吸道标本留取
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导呼吸道标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.痰液标本的采集以清晨为好，因此时痰量多，含菌量大。标本收集前，病人
必须用清水漱口数次，除去口腔内大部分杂菌。然后用力自气管深部咳出痰液于无菌器皿内，及时送检。咳痰时应尽量防止唾液及鼻咽部的分泌物混入，以减少污染。
2.痰量极少者可用45℃10%氯化钠雾化吸入导痰，一般以清晨第一口痰为好
3.检查结核菌时，必要时可收集24小时痰液，以提高阳性率。
4.支气管分泌物内含的细菌常能正确地反映出下呼吸道中的病理变化，标本的
采集应由专科医生利用支气管镜直接从患者支气管内采取。
5.咽拭采集:嘱病人在留取标本之前,用清水反复漱口以减少正常菌群的污染,
将拭子越过舌根到咽后壁或悬壅垂后侧,反复涂抹数次,注意避免拭子接触口腔和舌拈膜,置无菌容器中尽快送检。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 尿液标本留取
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导尿液标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.正常人尿液是无菌的，而尿液细菌培养最大的问题是杂菌污染。正常人外尿
道有大肠杆菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌又是尿路感染中常见的病源菌。
因此要作好尿液细菌学检查，首先应注意标本收集问题。
2.中段尿采集：是临床上最常用的方法。女病人先用肥皂水或0.1%高锰酸钾水
溶液冲洗外阴部及尿道口,用无菌纱布擦拭,最后用手指将阴唇分开排尿;男病人应翻转包皮冲洗，用肥皂水或2％红汞或0.1%新洁尔灭消毒尿道口，再用无菌纱布或干棉球拭干，叫病人排尿。将尿液分成三段，第一段排掉，收集中段尿3～5ml留入试管中，立即加塞盖好送检。
3.婴儿则先消毒其阴部，将无菌小瓶直接对准尿道以胶布粘上固定于皮肤，待
排尿后立即送检。
4.导尿管采集尿液：一般用无菌导尿管取得尿液10～15ml，盛3-5ml于无菌试
管中，不能混入消毒剂，否则影响细菌生长。虽该可减少污染，但由于导尿有将微生物引入膀胱的危险，因此除非必要，应避免用此法。
5.对于留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用无菌注射器斜穿管
壁抽吸尿液，或消毒后解开接口，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本。
6.做结核菌培养的尿液标本，应收集24小时全部尿液，并将沉淀部分盛于洁
净瓶内送检。
7.婴幼儿中段尿采集困难或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤穿刺采集
无污染的膀胱内尿液。
8.送检标本以晨尿为佳，但室温较高时，应采集即时尿液，但尿液在膀胱内至
少置留了4小时以上。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 脓及创伤感染标本留取
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导脓及创伤感染标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.应首先用无菌生理盐水清洗脓液及病灶的杂菌，再采集标本，以免影响检验
结果。
2.一般用棉拭子采取脓液及病灶的深部的分泌物，瘘管也可以无菌手续采取组
织放入无菌试管内送检。
3.脓肿标本以无菌注射器抽取为好，也可在切开排脓时，以无菌棉拭子采取，
也可以将沾有脓汁的最内层敷料放人无菌平皿中送检。
4.厌氧菌感染的脓液常有腐臭应予注意。采集和运送标本是否合格，对厌氧培
养是否成功至关重要，特别要注意两点：1.避免正常菌群所污染；2.由采集至接种前尽量避免接触空气。标本采取完毕应立即送往细菌室检测。如一时来不及送，应在室温内作暂短保存，一般认为不要冷藏，因冷藏对某些细菌有害，而且在低温时氧的溶解度较高。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 生殖道分泌物标本采集
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导生殖道分泌物标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.尿道及尿道口标本:生理盐水清洗局部后,将无菌棉拭子插入尿道口1-2cm,
停留10余秒,轻轻旋转采集标本,置无菌容器中尽快送检;
2.外阴糜烂、溃疡标本: 用无菌盐水和手术刀清除溃疡面,暴露出溃疡基底,渗
出物积聚较明显时,用拭子或吸管采集,置无菌容器中尽快送检;
3.宫颈标本:用无菌盐水湿润窥阴镜暴露宫颈,清除阴道和宫颈分必物,弃之,
轻压宫颈使分必物流出用拭子采集,或用拭子插入宫颈管1—2cm，转动并停10—30s再取出,置无菌容器中尽快送检;
4.阴道标本：先清除阴道表面的分泌物，弃之，然后在后穹窿或阴道上端采集
粘膜分泌物。
5.前列腺液:有医生通过前列腺按摩获取,置无菌容器中尽快送检。
6.用于除去宫颈外粘液的拭子不宜作微生物培养，因其含有大量的阴道菌群。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 粪便标本采集
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导粪便标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.粪便标本采集时应挑取有脓血、粘液部分的粪便2—3g；液状粪便取絮状物
1-2ml，盛于灭菌的广口瓶中或腊状纸盒中，并及时送检和接种。
2.在无法获得粪便时，可用无菌生理盐水或增菌液湿润直肠，将棉拭子插入肛
门4～5cm深处(小儿2～3cm)，轻轻转动一周擦取直肠表面的粘液后取出，盛入无菌试管或保存液中送检。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 穿刺液标本留取
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导穿刺液（胸、腹水、心包液、关节液）标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.各种穿刺液标本的留取应由临床医生以无菌穿刺术抽取，胸腹水抽取量一般
约为5一l0ml，心包液、关节液等一般抽取量为1～5m1，将所得穿刺液盛于含有无菌的试管中，立即送检。
2.对易自凝的标本可用已添加抗凝剂的无菌试管，充分混匀，立即送检。
3.也可将5-10ml的穿刺液无菌操作注射到双相血培养瓶中送检。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 脑脊液、胆汁标本采集
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导脑脊液、胆汁标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
脑脊液、胆汁标本的采集方法应由医生亲自严格无菌操作，留在无菌试管内，注意保温，以防细菌死亡并立即送细菌室培养。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 组织标本的采集
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导组织标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术
切除。对窦道和痰管应刮取深部管壁组织。
2.深部组织标本可经皮穿刺或手术切除。标本置无菌容器并加少量生理盐水以
保湿度；或置肉汤增菌液，或置血平皿送检。
3.尸体标本应予死后20小时内采取，以防肠道菌侵入引起污染。
4.作病原体分离的组织标本不可用福尔马林固定。疑有污染的组织块可用烧红
的烙铁烧灼其表面，或置沸水中5-10秒钟使其表面变白消除污染后，再用无菌器械切开组织，取中间部位组织送检。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 静脉道管标本采集
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
指导静脉道管标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.从病人体内拔出静脉插管，用无菌技术剪去导管体外部分，体内段导管立即
置血平皿上作滚动涂布接种。不能作床边接种者，将导管置含少量生理盐水的无菌试管内送检。
2.也可将剪下的导管体内段置肉汤内增菌，但不能区分导管感染菌与少量定植
菌。
3.有些标本的微生物学检验在诊断感染或指导治疗上无多大价值，如Foley导
管的尖端、恶露、呕吐物、结肠造口术的渗出物等，一般不进行培养。
4.口腔及牙周损伤处、褥疮及静脉曲张处、烧伤、浅层坏死及肛周脓肿等部位
标本，应先彻底清疮后在取组织送检。
5.冲洗用的道管、静脉导管及动脉导管应在进入部位的皮肤消毒后，小心取出，
以无菌方法切区去皮肤外的短部，其余部分送检。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 眼耳及乳突分泌物标本采集
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2006—1
第 1页，共1页
【目的】
指导眼、耳及乳突分泌物标本的正确采集。
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.以无菌棉拭子采集眼分泌物、尤其是脓性分泌物及耳部脓汁置无菌试管中及
时送检;
2.乳突炎患者标本在手术时采集。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 样本接收、核对、接种、培养
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
标本的质量是检验结果准确性与有效性的基础，为使标本从病人到实验室这一过程受控，保证准确可靠的检验结果，特制定本程序。
【适用人员】
临床微生物实验室检验人员
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.接收样本：
核对各样本号与申请单联号是否一致，如不一致马上与病房联系以便作出相应的处理，如退单或重送样本等，并做好联系情况的记录。核查各送检样本是否符合要求。
1)痰液样本：先看外观、再直接涂片镜检， 低倍镜下见白细胞>10个/LP，上
皮细胞<25个/每个视野，为合格痰液。
2)无菌体液样本：检查各种无菌体液样本的盛放器皿是否符合要求。
3)容易干燥的样本：对一些容易干燥的样本如大便、咽拭子、脓液拭子、泌尿
生殖道拭子等是否已经干燥。
对不符合要求的样本必需与临床联系，以便作出相应处理，方法如联号不符的样本。做好记录。对符合的样本进行接种，并注明日期。
2.样本接种：
1)大便致病菌、三线，分区划线接种于麦康凯平板；
2)血液、骨髓按要求采集直接注射于法国梅里埃双相血培养瓶送检；
3)支原体培养+药敏，按支原体操作规程接种于支原体专用培养基；
4)衣原体检测,按衣原体操作规程操作；
5)其它标本(痰液、咽拭子、脑脊液、各种无菌体液、脓液分泌物)分别接种血
平皿、麦康凯平板，分三区划线接种；
对脓液、脑脊液等在接种的同时应对其沉渣进行革兰染色，如有细菌立刻通知临床，并做记录。
4 样本培养：
移种过的血平板、麦康凯平板、血液增菌培养瓶及支原体培养条板均置于35.0℃的培养箱（HH.B11.420型）。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 菌株的纯化、鉴定、药敏流程
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共1页
【目的】
明确菌株纯化、鉴定、药敏流程，指导检测人员正确进行菌株的纯化、鉴定、药敏操作。
【适用人员】
临床微生物实验室检验人员
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1.查对昨天移种平板申请单，确定标本移种是否正确。
2.观察血液增菌培养瓶，如发现有细菌生长，马上涂片革兰染色，将细菌的染
色特性及形态报告给临床，并做好记录，同时将阳性的血液增菌瓶移种到血平板与麦康凯平板上,且用无菌棉签沾取该阳性增菌液涂于MH培养基，依革兰染色，按NSSLS贴药敏纸片，培养18-24小时（临时报告）。
3.观察平板，挑取可疑菌落涂片革兰染色，并将菌落纯化于血平板；
4.将前一天分纯的细菌严格按照美国德灵MicroScan细菌分析系统操作手册配
制菌悬液、加样、置培养箱。
5.对一些不适合用仪器检测药敏的细菌，改用标准的K-B法进行检测。 碰到
异常的耐药模式应要慎重，需重复试验或送上一级单位确认后方可发出报告， 如碰到耐万古霉素的葡萄球菌、粪肠球菌，耐泰能的大肠埃希菌、克雷伯菌属、肠杆菌属等。并加做特殊的药敏纸片，并改用纸片法加以比较。
6.真菌用ATB FUNGUS2真菌药敏条进行耐药性检测，严格按操作规程操作。
7.大便培养，对可疑菌用抗血清做凝集试验，阳性的再做生化鉴定和药敏试验，
需血清凝集试验与生化鉴定相符方可报告，否则要慎重。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 普通MicroScan板接种培养流程
标准操作程序
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共2页
【目的】
明确普通G+、G-MicroScan板接种培养流程，指导检测人员正确进行普通G+、G-MicroScan板接种培养的操作流程。
【适用人员】
临床微生物实验室检验人员
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员
批准签字：专业主管、科主任。
【步骤】
1、标本按微生物室标准操作程序所推荐的方法进行收集、运送和初步离培养。
2、染色：挑取纯培养细菌进行革兰氏染色
1)革兰氏阴性杆菌、弧菌：进行氧化酶实验，记下实验结果，选用阴性板 NC21
2)革兰氏阳性球菌：进行触酶实验，区分链球菌科（-）和微球菌科（+），记
下实验结果，选用阳性板 PC12
3、接种：
①.接种的准备：
a)用取种针去接触纯菌落3、4次，让顶端凹槽填满菌，用CAP帽子抹去
多余菌，放接种水中盖紧，充分混匀，备用。
b)挑选琼脂平板上，形态相同的菌落移种于M-H液体培养基中，置350C
温箱中孵育4小时，用生理盐水稀释至相当于0.5麦氏浊度标准，或用
接中环挑取菌落，悬浮于生理盐水中振荡混匀后与标准化浊管比浊，调
整浊度至相当于0.5麦氏浊度标准，吸100ul菌悬液于25ml接种水中，
备用；
②. Microscan板的水化与接种：
要用的干板取出室温平衡后，用无菌吸嘴吸取115ul菌悬液于相应的
Microscan板中。
4、加石蜡油：于孔下划有一横线的孔滴加2、3滴石蜡油。
阴性板NC21：7个孔（GLU URE LYS H
2
S ARG ORN DCB）
阳性板PC12：2个孔（URE ARG）
5、贴封口胶纸：对革兰氏阴性板，氧化酶（+）的板右上角9个孔贴封口胶（空 位为DCB孔）
CIT TAR OF/G
MAL ACE OF/B
ONPG CET DCB
6、孵育：测试板上盖一块空板，35℃非CO
2
培养箱孵育16-24小时。
7、检查：从培养箱取出板
①检查C孔（控制孔）须澄清；G孔（生长孔）混浊，有菌长。
（如不满足上述条件，则不要判药敏结果）
②革兰氏阳性板：
a PGT孔（+）黄色
b以下9孔，有任意三个以上为（+）黄色
RAF LAC TRE
MNS SOR ARA
RBS INC MAN
★以上两个条件，任意一个符合即可加试剂叛读结果。若以上两个条件均不符合，则需再孵育15-24小时。药敏MIC结果需在16-24小时内判读。
③革兰氏阴性板：
a葡萄糖发酵菌： 1）GLU=深黄色 2）SUC=黄色或SOR=黄色
b葡萄糖非发酵菌：1）ARG=紫色和OF/G=黄色 3）LYS=紫色
2）ARG=紫色和CET=混浊 4）ORN=紫色
★符合以上条件之一则可加试剂叛读结果。若不符合，则需再孵育15-24小时。药敏MIC结果需在16-24小时内判读。
8、加试剂：
革兰氏阴性板：VP-40%KOH(VP1)，5%α-萘酚（NIT2）各一滴。
NIT-0.8%对氨基苯磺酸（NIT1），0.5%α-萘酚（NIT2）各一
滴。（5分钟后判读）。 TDA-10%Fec13(TDA)一滴。
IND-柯凡奇试剂（IND）3滴。
革兰氏阳性板：VP-40%KOH(VP1), 5%α-萘酚（VP2）各一滴。
NIT-0.8%对氨基苯磺酸（NIT1），0.5%α-萘酚（NIT2）各一
滴。 （5分钟后判读。） PYR-肽酶试剂（PET）2滴。
★如果VP（-）须等到20分钟后再确定VP是否真为阴性
9、拿掉封口剂。
10、人工判读,将生化反应和药敏结果记录在相应的Microscan结果记录纸上。
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日
遂昌中医院
临床微生物实验室 判读普通革兰阳性板
标准操作程序
编号：WSW-SOP-16
日期：05年 9月 5日
版号：2004—1
第 1页，共2页
【目的】
指导检测人员正确进行普通革兰阳性（G+MicroScan）板的结果判读，保证检验结果。
【适用人员】
临床微生物实验室检验人员
【该SOP变动程序】
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【普通G+MicroScan板阳性对照色卡】
VP1、VP2各一滴20分钟
NIT1、NIT2各一滴5分钟 PEP二滴2分钟
【步骤】
一、35℃非CO
2
培养箱孵育16-24小时后，C孔（控制孔）须澄清；G孔（生长孔）混浊，有菌长,并符合以下条件之一则可加试剂判读结果：
a PGT孔（+）黄色有沉淀
b以下9孔，有任意三个以上为（+）黄色
RAF LAC TRE
MNS SOR ARA
RBS INC MAN
二、以上两个条件均不符，则先判读所有药敏结果。记录鉴定药敏或生长试验
CV、MS、NOV、NaCL、BAC和IDX、PHO、BL实验结果，其它生化反应试验再孵育15-24小时后判读。
三、普通G+MicroScan板生化结果判断：
试验孔名称 阳性结果 阴性结果
CV MS NaCL 有生长（混浊） 无生长（清）
OPT NOV BAC
PGR PHO PGT 黄色（孔中有一点黄色即可）无色
（与NOV作对照)
试验孔名称 阳性结果 阴性结果
IDX 蓝色，灰色沉淀 无色或白色沉淀
VP 粉红至红色 无色至褐色或极淡粉色
试验孔名称 阳性结果 阴性结果
BE 暗棕色至黑色 无色至亮棕色
PYR 红色或橙红色 黄色至橙色
ARG 微球菌属 橙色，粉红/红色 黄色至橙黄色
链球菌属 粉红/红色 黄色至橙色
URE 粉红色（24H） 黄色至橙色
RAF LAC SOR RBS INU 黄色 橙色至红色
PRV TRE ARA MNS MAV
BL 无色 兰色至黑色
NIT 粉红至红色 无色或淡粉色
HEM β-溶血 无β-溶血
LOC 仪器识别反应板类型用
四、MIC药敏结果的判读：
1.所有的药敏，CV、MS、NOV、NaCL、OPT和BAC的结果以黑色为背景判读；
2.以最开始出现生长抑制的最低浓度孔记录为MIC；
3.当所有孔均不出现细菌生长，MIC记录为小于等于最低浓度；
4.当所有孔均出现细菌生长,MIC记录为大于最高浓度；
5.当不出现细菌生长的浓度孔出现于细菌生长的浓度孔梯度孔中，譬如，细菌
在1、2、和8ug/ml浓度孔中生长，但在4ug/ml孔中不生长，此孔则称为跳
孔，这个浓度孔结果应被忽略。
五、生化和药敏结果均记录在手工记录纸上：
Microscan 阳性复合板 PC12 结果记录：
病人： 床号： 记录时间：
鉴定结果：
PBS
BAC
NaCL
LAC
VP BE PGT
4 CV NOV
2 MS PGR OPT PYR URE TRE SOR INU PRV
ARG MAN MNS ARA RAF HEM
PHO
1 NIT
IDX
鉴定值
药敏结果：
T/S Rif Ox Aug Te Imp
Am P Cf Va E Cla
Cfz Cd Gm Cft Cp Nxn
Fd TFG STS GMS β-Lac
编 写 人 批 准 人 生 效 日 期 傅石明 2005年9月5日