杨晓达部分
一绪论、冻干技术和酶法合成
1.什么是生物技术和生物技术药物？
生物技术：（杨版）指利用微生物（如细菌和酵母等）或者生物产物（如酶等），来完成独特的工业和制造业的过程。应用于生产特殊药物、合成激素、或者大量粮食，也包括有机废物的转化等。
（曾版&教材版）生物技术是应用自然科学及工程学原理，依靠微生物、动物、植物体作为反应器，将物料进行加工
以提供产品来为社会服务的技术，他是微生物学、生物化学和化学工程等多学科密切相关的交叉学科生物技术药物：系指应用基因工程、细胞工程、蛋白质工程等生物技术获得微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料，制备用于人类疾病的预防、治疗和诊断的药物。
2.生物技术的核心和关键技术是什么？
生物技术的核心是生物转化
关键技术包括生物转化技术、基因工程技术、工业生物反应器技术、冷冻干燥技术等。（杨课件上标key字样的）
3.什么是合成生物学？未来的影响有哪些？
基于系统生物学的遗传工程，从基因片段、人工碱基DNA分子、基因调控网络与信号传导路径到细胞的人工设计与合成，将工程学原理与方法应用于遗传工程与细胞工程等生物技术领域
通过联合不同的成分部分创造新功能、通过工程学提高对于现有生物系统的认识，在未来50年内引发第三次工业革命
4.青蒿素的前体药物的生物制备过程如何？
5.基于细胞的生物制备的基本流程如何？
6.基于生物酶的生物制备的基本流程如何？
7.什么是代谢工程改造？
通过影响酶的活性、运输性质和常规功能干预细胞代谢活动
8.基因工程在生物技术中的作用有哪些？
提高产量和生产率、生产新化合物、扩大酶的底物范围、发展可以替代传统化学方法的新的生物合成途径
改良细胞性能
9.工业生物制备和实验室条件的差别是什么？
实验室：小型反应器，旋转器和摇瓶
工业生物制备：工业生物反应器，大容量，
更高的培养基多相性，更大的湍流强度和局部切变应力
（往届复习资料里说）通过更长的混合时间所引起的培养媒介的多相性，来使微生物和细胞的局部环境变化达
到一个更宽的范围。此外，通过增加反应器的规模，湍流强度和局部切变应力也会被加强。这种局部等级的强
烈变动会引起对微生物和细胞的应激
10.什么是冷冻干燥，其过程是什么？为什么是是生物技术产品制备的基本关键技术？
冷冻干燥技术是把含有大量水分的物料预先进行降温，冻结成固体，在真空条件下，使冰直接升华，以水蒸汽的形式除去，从而得到干燥品德一种技术。可以避免常规干燥过程中热不稳定的生物制品在高温条件下变质。
冻干箱空箱降温-40~-50℃，放入产品预冻。
油泵抽真空。
第一步加热，温度不超过共熔点，使冰大量升华。
第二步加热，以提高干燥程度，一般温度控制在40℃以下
1冷冻至固体2抽真空3升温，大剂量水升华除去4升温，进一步升华，结合水、吸附水除去（可能会画图分析）
11.生物制备对酶特性的要求有哪些？
高效性、专一性、更稳定、耐热，抗抑制、抗蛋白酶水解、抗原性减少或消除。（所谓专一性）有一定的区域和立体选择性，但对底物的要求不要太高，选择性不要太强，能够催化不同的底物。
12.举例说明酶法合成手性氨基酸（举例）？
13.为什么需要酶固定化，有哪些方法？
原因：（往届资料说）提高效率、提高稳定性、易于分离、可重复使用
（貌似是课堂笔记说）酶稳定性差，易变性失活；酶和底物只能反应一次，难于回收利用，成本高且难于连续化生产；反
应液中混入酶蛋白，使产品的分离纯化复杂化
固定方法：（教材版）
载体结合法：a物理吸附法：是以固体表面物理吸附为依据，使酶与水不溶性载体相接触而达到酶吸附的目的
b离子吸附法：通过离子效应，将酶分子固定到含有离子交换基团的固相载体上
c螯合法：利用螯合作用将酶直接螯合到表面含过渡金属化合物的载体上，具有较高的操作稳定性
d共价结合法：通过酶分子上的官能团，与载体表面上的反应基团发生化学反应形成共价键的固定
方法
共价交联法：通过双功能或多功能试剂在酶分子间或酶分子和载体间形成共价键的连接方法
包埋法：将酶包埋在高聚物凝胶网格中或高分子半透膜中的固定方法。前者又称凝胶包埋法，后者则称微囊法
二免疫分析法
14.什么是抗体？其结构特征是什么？怎么由基因编码一个抗体？
抗体：机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白
两条重链两条轻链，两个Fab段一个Fc段，VL、CL，VH、CH段
2个基因决定一个蛋白质
15.什么是抗原决定簇？一个抗原分子是否只有一个抗原决定簇？
决定抗原性的特殊化学基团
一个抗原分子上可能有数个抗原决定簇
每個抗原决定簇至少誘生一种专一性抗体
蛋白质抗原的决定簇含有六个以上氨基酸
16.抗体与抗原结合的特异性如何？为何有如此高的特异性？
与抗原的结合力强，高度专一性
17.抗体有哪些应用？
18.什么是抗体的Fab片段和Fc片段？其结构分别是如何？
19.什么是单抗和多抗？分别是如何制备的？哪一种抗体的特异性高？为什么？
多克隆抗体（polyclonal antibody）指由不同B细胞产生的针对多种抗原决定簇的多种抗体混合物，如免疫血清。
制备：抗原做成乳剂，注入实验动物体内，多次免疫后，得到传统的抗血清
单克隆抗体（monoclonal antibody）指由一种 B 细胞生产，针对某一抗原决定簇的单一抗体。
制备：抗原注入实验动物体内，形成杂交瘤细胞，用ELISA方法分离鉴定合适的杂交瘤细胞，培养该细胞得到抗体
20.什么是抗体库？
抗体库技术是将某种动物的所有抗体可变区基因克隆在质粒或噬菌体中表达，利用不同的抗原筛选出携带特异抗体基因的克隆，从而获得相应的特异性抗体。
21.什么是单链抗体？什么是ScFv？如何制备单链抗体？单链抗体有何应用？
在重链与轻链之间加上一段连接肽，连成一条单链
如果仅是两条链的可变区，称为ScFv
22.什么是二抗？二抗与一抗如何结合的？如何选择使用二抗？
二抗的Fab段VL部位结合于一抗的Fc段
23.什么是Protein A？Protein A结合于抗体的什么部位？
Fc段
24.什么是免疫分析？有哪些特点
免疫分析：利用抗原与抗体之间高特异性反应实现对抗体、抗原或相关物质进行检测的分析方法。
高灵敏，高特异性，高准确性
25.有哪些主要类型的免疫分析？
根据标记物的不同，可分为：放射免疫分析法（RIA）、荧光免疫分析法（FIA）、酶免疫分析法（EIA）、化学发光免疫分析法（CLIA）重要方法：FIA、RIA、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫染色法、免疫印迹法（Western blot）等
26.免疫分析有几种实验设计方式？
a用标记抗体与待测抗原结合，再加捕获抗体（二抗），检测复合物浓度（ELISA双夹心法）
b用标记抗体与待测抗原结合，再加捕获抗原与剩余抗体结合，检测捕获抗原-标记抗体复合物浓度
c加入抗体与标记抗原，通过标记抗原与待测抗原的竞争结果，推断待测抗原浓度（RIA法）
27.抗体标记有哪些种类和方法？
放射性同位素标记、荧光标记（有机分子荧光标记，绿色荧光蛋白标记，稀土荧光标记）、酶标记、通用标记
28.什么是RIA，其分析方法的原理和要点有哪些？
放射免疫分析是以放射性同位素为示踪物，与免疫反应相结合的一种分析方法。
其基本原理是利用待测抗原和标记抗原同特异性抗体之间存在着竞争性的结合，通过对竟争后剩余标记抗原及标记抗原-抗体复合物的测定推断待测抗原
要点：1制作标准曲线：恒量的Ag*（标记抗原）、Ab加入反应管中，加入待测抗原标准品（已知浓度），37℃或4℃温育，加入分离剂分离结合抗原抗体复合物及游离抗原，测定以总放射性为分母，测定Ag*Ab为分子，计算结合%，以结合率为纵坐标，浓度为横坐标，制作标准曲线 2待测抗原用同上发法测定结合率，带入标准曲线求浓度
29.什么是ELISA？其分析原理和要点是什么？
Enzyme Linked Immunosorbent Assay酶联免疫吸附法
使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高敏感度。
常见方法用途及主要步骤：
（一）双抗体夹心法
双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：
（1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。
（2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
（3）加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。
（4）加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或定量。
根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。
（二）双位点一步法
在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步（图15-5）。这种双位点一步不但简化了操作，缩短了反应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。
在一步法测定中，应注意钩状效应（hookeffect），类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。
30.什么是荧光偏振免疫分析？原理是什么？
荧光偏振免疫分析法(fluorescence polarization immunoassay，FPIA)是一种定量免疫分析技术，其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后，吸收光能跃入激发态，随后回复至基态，并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。偏振荧光的强弱程度与荧光分子的大小呈正相关，与其受激发时转动的速度呈反相关。FPIA最适宜检测小至中等分子物质，常用于药物、激素的测定。
荧光偏振免疫分析常用于测定半抗原的药物浓度。反应系统内除待测抗原外，同时加入一定量用荧光素标记的小分子抗原，使二者与有限量的特异性大分子抗体竞争结合。当待测抗原浓度高时，经过竞争反应，大部分抗体被其结合，而荧光素标记的抗原多呈游离的小分子状态。由于其分子小，在液相中转动速度较快，测量到的荧光偏振程度也较低。反之，如果待测抗原浓度低时，大部分荧光素标记抗原与抗体结合，形成大分子的抗原抗体复合物，此时检测到的荧光偏振程度也较高。荧光偏振程度与待测抗原浓度呈反比关系。我们测定待测抗原标准品后制标准曲线。通过检测反应系中偏振光的大小，从标准曲线上就可以精确地得知样品中待测抗原的相应含量。
31.什么是时间分辨荧光免疫分析？用什么标记物？
时间分辨荧光免疫分析（Timeresolved Fluoroimmunoassay,TRFIA）是一种非同位素免疫分析技术，它用镧系元素标记抗原或抗体，根据镧系元素螯合物荧光寿命很长的特点，用时间分辨技术测量荧光，同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨，可有效地排除非特异荧光的干扰，极大地提高了分析灵敏度。与FPIA相比克服了酶标不稳定，化学发光仅能一次，易受环境干扰的缺点。
解离增强镧系元素荧光免疫分析（DELFIA）是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂，使其一端与铕（Eu）连接，另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接，形成EU标记的抗体/抗原，经过免疫反应之后生成免疫复合物。
由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱，因此加入一种增强剂，使Eu3+从复合物上解离下来，自由Eu3+同增强剂中的另一种螯合剂螯合形成一种胶态分子团，这种分子团在紫外光的激发下能发出很强的荧光，信号增强了百万倍。因为这种分析方法使用了解离增强步骤，因此称为解离增强镧系元素荧光免疫分析。
32.什么是免疫细胞/组织染色？
用标记（一般采用荧光、冷光物质或者酶标记）的抗体对细胞或组织内的相应的抗原进行定性，定位或定量检测。经过组织化学的呈色反应而呈现醒目的阳性色彩，用显微镜，荧光显微镜或电子显微镜观察。凡是能作为抗原、半抗原的物质，如蛋白质，多肽、核酸、酶、激素、磷脂、多糖、受体及病原体等都可用相应的特异性抗体在组织、细胞内应用免疫组织化学方法可准确的定位。
33.Western Blot的原理和要点是什么？
（教材版）免疫印迹法（Western Blot）是将凝胶电泳与固相免疫结合，把用电泳分区的蛋白质转移至固相载体，再用酶免疫、放射免疫或染色等技术测定。该法能分离分子大小不同的蛋白质并确定其分子量，常用于检测多种病毒的抗体或抗原。
免疫印迹法分三个阶段进行.第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):抗原等蛋白样品经SDS处理后带阴电荷,在聚丙烯酰胺凝胶中从阴极向阳极泳动,分子量越小,泳动速度就越快.此阶段分离效果肉眼不可见(只有在染色后才显出电泳区带).第二阶段为电转移:将在凝胶中已经分离的条带转移至硝酸纤维素膜上,选用低电压(100V)和大电流(1～2A),通电45min转移即可完成.
此阶段分离的蛋白质条带肉眼仍不可见.第三阶段为酶免疫定位:（此处采用酶标显色法）将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜(相当于包被了抗原的固相载体)依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用后,加入能形成不溶性显色物的酶反应底物,使区带染色.常用的HRP底物为3,3'-二氨基联苯胺(呈棕色)和4-氯-1-萘酚(呈蓝紫色).阳性反应的条带清晰可辨,并可根据SDS-PAGE时加入的分子量标准,确定各组分的分子量
答题要点:(我总结归纳的)1SDS-PAGE法使蛋白质按分子大小不同分离2用电转移法将已分离的条带转移到硝酸纤维素膜上3加入染色标志抗体、酶标抗体显色或者一抗特异结合，标志二抗显色
三ADMET研究
34.什么是ADMET研究，在药物发现中的作用是什么？有什么特点?
A：Absorption ：药物从作用部位进入体循环的过程
D：Distribution ：药物吸收后通过细胞膜屏障向各组织、器官或者体液进行转运的过程
M：Metabolism（Biotransformation）：药物在体内受酶系统或者肠道菌丛的作用而发生结构转化的过程
E ：Excretion：药物以原型或者代谢产物的形式排出体外的过程
T：Toxcity：药物对机体的毒性
ADMET就是对药物的吸收、分布、代谢、排泄和毒性进行全面的研究。其中ADME是药物代谢动力学（Pharmacokinetics,PK）的研究内容
作用：药物筛选（Drug screening）药物设计（Drug design）药物合成（Drug synthesis）评价制剂（Drug formulation/Biopharmaceutics）中草药研究（TCM herbs research）
特点：1基于细胞或生物大分子的分析方法：小样品、高内涵和高通量分析能力；能够阐明药物性质的分子机理；建立结构-药物性质定量构效关系2人源材料的应用
35.什么是BCS？
BCS（biopharmacertics classification system）即生物药剂学分类系统
FDA制定的BCS评价指南，主要包括下列三个方面：药物的生物渗透能力（permeability）、药物的溶解能力（Solubility）、制剂的快速溶出能力(Immediate Release)。这些性质符合要求的药物/制剂可以在药审时得到生物豁免
36.药物消化道吸收的机制有哪些？
经细胞连接的被动扩散、穿细胞被动扩散、代谢转化、外流、药物转运
分为细胞旁路通道和经细胞转运通道又分为被动扩散、主动转运、促进扩散、膜孔转运、胞饮和吞噬
37.什么是Caco-2模型？如何从Papp判断药物的吸收能力？
Caco-2细胞模型是一种人克隆结肠腺癌细胞，结构和功能类似于分化的小肠上皮细胞，具有微绒毛等结构，并含有与小肠刷状缘上皮相关的酶系。可以用来进行模拟体内肠转运的实验。（答题到此即可，以下为背景知识）在细胞培养条件下，生长在多孔的可渗透聚碳酸酯膜上的细胞可融合并分化为肠上皮细胞，形成连续的单层，这与正常的成熟小肠上皮细胞在体外培育过程中出现反分化的情况不同。细胞亚显微结构研究表明，Caco-2细胞与人小肠上皮细胞在形态学上相似，具有相同的细胞极性和紧密连接。胞饮功能的检测也表明，Caco-2细胞与人小肠上皮细胞类似。由于Caco-2细胞性质类似小肠上皮细胞，因此可以在这段时间进行药物的跨膜转运实验。
作用：1研究药物吸收的潜力2研究药物转运的机制，包括吸收机制和排除机制3研究药物、营养物质、植物性成分的肠道代谢
判断方法：P app（表观渗透系数）
P app>2*10-6属于吸收好的药物
如Testosterone(睾酮):1.0*10-5cm/s Propranolol（普奈洛尔）:2.86*10-5cm/s
P app<10-6属于吸收差的药物
如Mannitol(甘露醇):1.0*10-7 cm/s Atenolol（阿替洛尔）:4.55*10-7 cm/s
38.血脑屏障与消化道屏障有何异同？
同：1消化道屏障和血脑屏障的组成中均有毛细血管及基底膜的结构2屏障中细胞间的紧密连接是屏障的重要内容3转运机制类似，都具有外排4作用屏障的作用均为有选择性的从一侧到另一侧转运相关物质，阻止有害物质进入
39.药物排出有几个途径，决定性因素分别是什么？
主要途径是经肾排出和经胆汁排出，另外还有经泪液、唾液、乳汁和呼吸道排出等
决定性因素：
肾排泄：（杨课件版）PPB和Papp（生物药剂书版）药物脂溶性、PKa、血浆蛋白结合率，尿液PH、尿量等
胆汁排泄：肠肝循环：分子量300以上并有极性基团的药物主要从从肝进入胆汁排泄。胆汁排泄对于因为极性太强而不能在肠内重吸收的有机阴离子和阳离子是重要的消除机制。从胆汁排泄进入小肠的药物中，某些具有脂溶性的药物可被重吸收，
葡糖苷酸结合物则可被肠道微生物的β-葡糖苷酸酶所水解并释放出原形药物，然后被重吸收，这就是肝肠循环。
（生物药剂书版）分子量、极性、取代基以及解离状态和脂溶性，种属差异、代谢状况、蛋白质结合率、疾病和老化等40.有哪些重要的药物运输蛋白？其作用和作用机制分别是什么？
肝脏中：Organic anion transporter：NTCP、OA TPs、OATP2、OA T2
Primary active transporter：MRPs、MDR1、BCRP、BSEP/SPGP等等
41.如何分析药物的肝代谢稳定性？三种肝制品模型各有什么特点？
96-孔板中定量加入待测化合物→加三种肝制品模型之一→培养→分离→LC-MS分析→定量分析原型化合物消除量→计算消失率[原药消失率%=(1-代谢反应物浓度Ct/原始药物浓度Co)*100%]
特点：全肝细胞：包括所有代谢酶和转运蛋白；费用高，不易储存
S9肝匀浆液：包括1、2相代谢酶；分析容易操作、费用低；匀浆液保存不稳定
肝微粒体：仅包括1相代谢酶；分析操作容易、费用低；易于保存
42.如何测定药物的毒性？
基本方式-细胞活力分析：细胞生长；细胞能荷；线粒体活性-MTT分析；细胞氧化还原状态---谷胱甘肽含量分析；细胞特征性功能（蛋白质合成，核酸合成，吞噬、排除外来分子能力等）；细胞膜完整性---胞浆酶活性分析
MTT法原理：线粒体酶将探针分子MTT*还原成为一种蓝色脂溶性染料formazan（吸收波长550nm），线粒体活性越高，转化能力越强实验方法：将MTT加入到细胞培养液中，反应一段时间后，用有机溶剂溶解产生的formazan，然后用酶标仪测定550 nm 吸光度. 特点：方法简单可靠，费用低，高通量
96-孔板中定量加入化学物质→加入肝细胞→37℃温孵→分析细胞活性（用活力分析法之一，常用MTT法）→确定LD50，IC50，EC50
43.有哪些药物-药物相互作用？
药物-药物相互作用：排出抑制型相互作用、代谢抑制型相互作用、代谢诱导型相互作用
44.黄酮的吸收代谢机制是什么？如何提高食物中黄酮的生物利用率？
（图：UGT是UDP-依赖葡糖醛酸基转移酶，SulT是硫酸转移酶）
黄酮的吸收和代谢的速度更多是取决于肠内代谢水平和从细胞中向外转运的速度，而不是被动扩散的速度。故可采用混合黄酮制
剂和/或者苷元羟基甲基化的黄酮制剂可以增加黄酮的生物利用率
高中生物选修三测试题二 2012.2.29 班级姓名 一共六大题，50个空每空2分，共100分，时间50分钟，要求答案要认真推敲，力求准确 1．据报道，美国佛罗里达大学的亨利·丹尼尔教授利用基 因工程，研制出转基因莴苣，可用其中的有效药物成分制造胰岛 素胶囊来治疗糖尿病。如图所示是获得转基因莴苣的技术流程， 请据图回答下列问题： (1)①过程需要的酶有________________。 (2)为了便于筛选，质粒A上应具有________。 (3)接受重组质粒的受体细胞C1可能有三种情况：如果受体 细胞是土壤农杆菌，则导入它的目的是为了________________， 以便于得到大量的含目的基因的土壤农杆菌，然后用土壤农杆菌 侵染受体细胞C2，受体细胞C2可以是________或其他细胞，然 后应用组织培养技术，经________和________过程，形成转基因莴苣。 (4)这种药物是从转基因莴苣中提取制得的，也必须制成粉末状，装入胶囊后才能使用，因为服 用剂量必须仔细加以控制。如果服用的量太大，可能导致患者出现________症状。 2．人工种子的培育过程如图所示，请回答下列问题： (1)人工种子依据的原理是______________________，经过__________________技术培育而成的。 (2)包埋胚状体的胶质可以看作是种子的哪部分结构？ ________________________________________________________________________。 (3)某二倍体植物基因型有DdTt，利用这种生物技术采用花药离体培养的方法，可培育成“花粉胚”，也可制成人工种子，这种种子萌发形成的个体为__________________，基因型为______________________。 (4)如果外植体为植物的茎尖，通过①的处理可使细胞彼此分离，可加入下列哪种试剂。 ( ) A．15%的盐酸B．淀粉酶 C．果胶酶D．胰蛋白酶 (5)②表示脱分化过程，其实质是______________________________________________； ③表示再分化的过程，其实质是______________________________________________。
现代分子生物学试题 邯郸学院12生技 Chapter 3 生物信息的传递——从DNA到RNA 一、名词解释： 1、Transcription 2、Coding strand (Sense strand) 3、Intron 4、RNA editing 5、Messenger RNA (mRNA) 二、判断正误： 1、基因表达包括转录和翻译两个阶段 2、mRNA是以有义链为模板进行转录的 3、转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生 4、σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始 5、聚合酶可以横跨40个碱基对，所以解旋的DNA区域也是40个碱基对 6、流产式起始是合成并释放2~9个核苷酸的短RNA转录物 7、启动子是有义链上结构基因5’端上游区的DNA序列 8、大肠杆菌基因中存在-10bp处的TTCACA区 9、-35区是指5’到3’方向-35区最后一个碱基离+1碱基为35个bp 10、真核基因几乎都是单顺反子 三、单选： 1、_______号帽子存在于所有帽子结构中 A、0号 B、1号 C、2号 D、以上全不是 2、在对启动子识别中起关键作用的是_______ A、α亚基 B、β亚基 C、σ因子 D、β’亚基 3、RNA聚合酶中提供催化部位的是_______ A、α+α B、α+β C、α+β’ D、β+β’ 4、_______是细胞内更新率极高不稳定的RNA A、mRNA B、rRNA C、tRNA D、snRNA 5、mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式是_______ A、5’端帽子 B、多聚腺苷酸尾 C、ρ因子 D、以上都不是 6、真核生物RNA聚合酶II所形成的转录起始复合物不包括_______ A、TBP B、TFIIA C、TFIIC D、TFIID 7、真核生物转录的所在空间是_______ A、细胞质 B、细胞核 C、核孔 D、线粒体 8、ρ因子本质上是一种_______ A、核苷酸 B、蛋白质 C、多糖类 D、碱基
《现代生物学基础》期末考试卷及答案（ B 卷） 班级学号姓名 出卷人审卷人评审人 一、填空题（每空 1 分，共30 分） 1、细胞是由原生质构成的，原生质又分化为________、________、________等部分。 2、植物细胞壁对细胞有_________、_________作用。 3、核酸是由________、_________、_______、_________、________等元素组成的。 4、调节新陈代谢各种化学反应的酶都是___________。 ________、________、________和_______，一般以 ________的含量最多，所 10、叶绿体里含有四种色素： 以植物体呈绿色。 __________和１３、有氧呼吸是指植物细胞在 ________的参与下，把糖类等有机物彻底氧化分解，产生出 ________，同时释放出大量 _______的过程。 16、光合作用是绿色植物通过_______，利用 _______，把 ________和______合成储藏 ________的有机物， 并且释放出 _______的过程。 38、组成脱氧核苷酸的含氮碱基有四种，它们分别是______（A）、_______（G）______（C）、和_____（T）。 二、单项选择题（每题 2 分，共 30 分） 1、构成细胞膜的主要成分是（） A、蛋白质和淀粉 B、淀粉和脂肪 C、蛋白质和葡萄糖 D、蛋白质和脂类 2、生物体进行生命活动的主要能源物质（） A、脂类 B、糖类 C、核酸 D、蛋白质
3、生物的遗传物质是（） A、核酸 B、核苷酸 C、蛋白质 D、碱基 4、构成蛋白质的基本单位是（） A、葡萄糖 B、脂肪酸 C、核苷酸 D、核酸 5、系列哪种物质是动物细胞不具备的（） A、细胞壁 B、细胞膜 C、细胞质 D、细胞核 6、一般绿色植物以哪种色素含量最多（） A、叶绿素 a B、叶绿素 b C、胡萝卜素 D、叶黄素 7、在果树栽培中，常用优良品种的芽进行嫁接，这属于（） A、出芽生殖 B、断裂生殖 C、分裂生殖 D、营养生殖 8、麦田中小麦与杂草之间的关系是（） A、竞争 B、共生 C、捕食 D、寄生 9、为延长水果的仓贮时间，向贮仓中加入N2 和 CO2 的目的是（）。 A、抑制无氧呼吸 B、促进无氧呼吸 C、抑制有氧呼吸 D、促进有氧呼吸 16 天，其中一种生长正常，另一种10、将大小两种草履虫分开培养，都能正常生长，若将两者放在一起培 养则全部死亡，此现象在生物学上称为（）。 A、种内互助 B、种内斗争 C、竞争 D、捕食 11.连续进行有丝分裂的细胞间期的特点是（）
现代生物技术概论复习题 一、名词解释 1、生物技术：也称生物工程，是人们以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其 他基础科学的科学原理,按照预先的设计,改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。 2、基因组ＤＮA文库:将某一种基因DNA用适当的限制酶切断后，与载体DNA重组，再 全部转化宿主细胞，得到含全部基因组DNA的种群,称为基因组DＮA文库。 3、蛋白质工程是指:利用基因工程的手段,在目标蛋白的氨基酸序列上引入突变，从而改变 目标蛋白的空间结构，最终达到改善其功能的目的。 4、基因工程:在体外将外源基因进行切割并与一定的载体连接,构成重组ＤNＡ分子并导入 相应受体细胞，使外源基因在受体细胞中进行复制、表达，使目的基因大量扩增或得到相应基因的表达产物或进行定向改造生物性状。简单概括,就是将外源目的基因与载体重组后再进入宿主细胞的过程。 5、发酵工程: 是发酵原理与工程学的结合,是研究由生物细胞（包括动植物、 微生物)参与的工艺过程的原理和科学,是研究利用生物材料生产有用物质，服务于人类的一门综合性科学技术。 6、基因和基因组DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因（gｅne)。一个生 物体的全部DNA序列称为基因组(gｅnoｍe） ５、载体：把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖或表达的工具称为载体。 6、cDNA文库:即由mＲＮA经过反转录成cＤNA，然后来构建文库，构建的文库不包含内 含子。 7、转化:外源DＮA导入宿主细胞的过程称之为转化。 8、重叠基因：一个基因序列中，含有另一基因的部分或全部序列。 9、基因组文库:把某种生物基因组的全部遗传信息通过载体贮存在一个受体菌克隆子群体中,这个群体即为这种生物的基因组文库。 1０、细胞工程：以生物细胞、组织或器官为研究对象,运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状,生产生物产品,为人类生产或生活服务的科学。 １1、.外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。 12、愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。 13、体细胞杂交:（原生质体融合)指在人工控制条件下不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。 14、悬浮培养:是将植物游离细胞或细小的细胞团,在液体培养基中进行培养的方法。 1５、原生质体:指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。 １6、传代：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。 17、原代培养:也称初代培养期。从体内取出组织接种在培养瓶中培养到第一次传代前阶段，一般持续1-４周。 18、细胞系:经过再培养后而形成的具有增殖能力、特性专一、类型均匀的培养细胞。 1９、细胞株：将所得到的纯净细胞群,以一定的密度接种在lmｍ厚的薄层固体培养基上,进行平板培养，使之形成细胞团,尽可能地使每个细胞团均来自一个单细胞，这种细胞团称为“细胞株”。 20、干细胞：干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，它可以化成多种功能细胞。
现代分子生物学复习题
现代分子生物学 一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染 小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′ 东隅已逝 2 桑榆非晚！
末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一 种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc 构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、 CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转 录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、 TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。 其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G 为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA 东隅已逝 3 桑榆非晚！
2011 现代生物技术期末试卷 一填空题 1 在基因工程实践中，常用的载体有（质粒），（噬菌体）和（腺病毒载体） 质粒是细菌染色体外能够自主复制的环形双链的DNA分子。质粒DNA不仅能在细菌中复制，并且在添加真核复制信号和启动子后，可以构建出能在原核和真核细胞中均可复制的穿梭质粒，并在真核细胞中表达， 载体的特点：1、至少有一个复制起点，因而至少可在一种生物体中自主复制。2、至少应有一个克隆位点，以供外源DNA插入。3、至少应有一个遗传标记基因，以指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞。4、具有较小的分子量和较高的拷贝数。 2 （限制性内切酶）酶和（DNA连接酶）酶的发现和应用，才真正使DNA分子的体外切割与连接成为可能。 3 根据质粒复制控制类型，可将质粒分为（严紧型质粒）和（松弛型）质粒。 根据载体功能划分：1）. 普通型载体，2）、表达型载体. 表达外源基因以产生大量外源基因产物用于构建cDNA 文库 4 1993年美国科学家（Kary Mullis ）因发明PCR技术而获得诺贝尔奖。 5 一切生物生命活动的结构和功能单位是（细胞），其可分为（）和（）两大类 细胞分裂的方式:无丝:最简单的细胞分裂方式,只出现在低等生物或动植物的器官和组织内有丝:是细胞分裂的主要形式,其实质是染色体经过复制变成双份,再平均分配到两个子细胞中,从而保持遗传物质的稳定传递.有丝分裂过程包括间期,前期,中期,后期和末期. 细胞的分裂是通过细胞周期来实现的。S期，DNA合成的时期. 从S 期到有丝分裂期(M期)为G2期从M期结束到S期开始之前称为G1期. 6 人工种子由（种皮）、（胚乳）和（胚）三部分构成。 7动物细胞常用的培养方法有（贴壁培养）、（悬浮培养）和（固定化培养）三种。8酶的命名方法有（系统命名）和（习惯命名）两种。 酶是生物体活细胞产生的、具有催化反应功能的蛋白质生物体内的各种物质代谢、能量传递、信息转录、神经传导、免疫调节、细胞衰老及生长发育等等，都离不开酶的参与。 作用：1、执行某种具体的生理功能；2、担负保卫清除功能；3、协同激素起生物信号放大作用；4、催化和调控代谢反应 所有的酶都由生物体合成，几乎所有生物都能合成产生酶，酶在生物体内的合成总是受其相应合成调节机制控制，以保证机体最有效、经济地将体内合成原料与能量用于自身生命最需要的酶等物质 分布：它们或定位于某亚细胞结构上处于“溶解”状态；不同生物体细胞内酶的数量和种类不同；同一生物体内的不同部位或不同生长发育阶段的细胞内酶的数量、种类不同； 微生物酶来说，合成后分泌有两种情况：胞外酶（分泌型酶）是指可以穿过质膜的任何酶，大多数是水解酶，大多数工业用酶是胞外酶。胞内酶是指合成后仍然在细胞内发挥作用的酶。 酶系统分类命名的基础是酶的专一性：
科学与技术复习试题 一、选择题（每题2分，共10分） 1．自然界中一切物体的相互作用，都可能归结为四种基本的相 互作用，即引力、弹力、电磁力和(C)相互作用。A．地磁力B．分子力C强力D．结合力 2．基因是含特定遗传信息的核苷酸序列，是(D)的最小功能单位。 A ．细胞 B ．蛋白质 C ．氨基酸 D ．遗传物质 3.1996年，世界上第一只克隆羊——多利面世，这 是世界上首次利用(A)技术而培养出的克隆动物。 A. 细胞核移植 B ．细胞融合C．细胞培养 D ．细胞膜嫁 接 4．由无数恒星和星际物质构成的巨大集合体称为(A) 。 A．星系 B ．星空 C ．星云 D ．星际 5．光纤通信利用光纤来传送(C)，它是20世纪70年代发展起来的一种新的通信方式。 A．电 B ．声 C ．光 D ．机械 二、填空题（每空2分，共10分） 6．科学是技术发展的__理论__基础，技术是科学发展的手段， 他们相互依存、相互渗透、相互转化。 7 ．我国863计划中，被评选列入该纲要的8个技术群是生物技 术、航天技术、信息技术、激光技术、自动化技术、能 源技术、新材料技术和海洋技术。 8 ．新技术革命的兴起是以__信息技术为先导的。 9．板块构造说的理论是在__大陆漂移学说、海底扩张 学说的基础上发展起的。 10.1987年，世界环境与发展委员会发布了一份 题为《我们共同的未来》的报告，首次提出了“可持续 发展”的概念。 三、名词解释（每题5分，共20分） 11．核能是在原子核变化过程中，从变化前后原子核质量亏损的质量 差转化来的能量。 12. 纳米材料就是用特殊的方法将材料颗粒加工到纳米级（lo-g 米），再用这种超细微粒子制造的材料。 13. 地球外部圈层结构指地球外部离地表平均800千米以内的圈 层，包括大气圈、水圈和生物圈。 14 ．物质生产力一（劳动者十劳动资料十劳动对象十管理 +??） 高科技。四、简答题（每题15分．共30分） 15．简述科学认识发展的动因。 (1)科学认识发展的外部动因（8分） 恩格斯曾经指出：“经济上的需要曾经是，而且越来 越是对自然界的认识进展的主要动力”。 一般地说，在19世纪中叶以前，科学是落后于生产和技术的， 它的发展是在生产需要的推动下进行的。而从19世纪下半叶以后，科学理论研究不仅走在技术和生产的前面，还为技术和生产的发展开辟了各种可能的途径。进入二十世纪以后，现代科学产生了空前的先行作用，科学变成了超越一般技术进步的因素。 (2)科学认识发展的内部动因（7分） 科学作为系统化的理论知识体系，有其自身的矛盾运 动和继承积累关系。科学发展的内部矛盾运动是它的内部动力。它表现为：1)新事实和1日理论的矛盾。2)各种不同观点、假说和理论的矛盾。 16．简述新材料发展的方向。 随着社会的进步，人类总是不断地对材料提出新的要求。当今新材料的发展有以下几点： (1)结构与功能相结合。即新材料应是结构和功能 上较为完美的结合。（3分） (2)智能型材料的开发。所谓智能型是要求材料本身具 有一定的 模仿生命体系的作用，既具有敏感又有驱动的双重的功能。（3 分） (3)少污染或不污染环境。新材料在开发和使用过 程中，甚至废弃后，应尽可能少地对环境产生污染。 （3分） 18世纪中叶产 生
现代分子生物学 复习提纲 第一章绪论 第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学：以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究 对象，从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控 等过程，也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术（基因工程） ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） ●基因组、功能基因组与生物信息学研究 第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间：19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一：肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二：噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括： ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑，标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系 思考 ?证明DNA是遗传物质的实验有哪些？ ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。 第二章染色体与DNA
现代生物技术试题归类 一、细胞工程 例1：蛙成熟的未受精的卵处于活跃的DNA合成状态，脑细胞则不能分裂。科学家进行如下图所示的核移植实验，请分析回答： 单独的细胞核则很快死亡。请从分子水平解释产生这一现象的原因：。 ⑵若用人的骨髓瘤细胞与淋巴细胞融合，则其连续分裂产生大量的细胞，这些细胞将合成大量的蛋白。 ⑶该过程中应用了哪些细胞工程技术？请再各举一例说明这些技术的应用。 ⑷本实验能够得出哪些结论？（至少列举两点） 二、基因工程 例2：随着科学技术的发展，化学农药的产量和品种逐年提高和增加，但害虫的抗药性也逐渐增强，对农业生产造成危害。近年来，人们将苏云金芽孢杆菌基因导入植物体内，成功地培育出抗虫水稻等农作物新品种。 ⑴害虫抗药性的增强是的结果。 ⑵“转基因抗虫水稻”的遗传信息传递过程可表示为。 ⑶该项科学技术成果在环境中的重要作用是。 ⑷科学家们预言，此种“转基因抗虫水稻”独立种植若干代后，也将出现不抗虫的植株，产生此现象的原因是。 ⑸转基因技术已在多个领域得到应用。请举例说明该技术的应用可能带来的影响。 正面影响：。 负面影响：。 例3：2002年4月，我国科学家率先在世界上完成了水稻基因组测序工作，我国水稻基因组以袁隆平培育的超级杂交水稻为测序对象，测定了22亿个碱基对的序列，这一研究成果将对世界粮食生产做出巨大贡献。 ⑴下列关于水稻基因组的叙述错误的是（） A．我国水稻基因组的首选对象为超级水稻 B．基因组测序就是测定DNA分子中的碱基排序 C．水稻碱基配对遵循碱基互补配对原则 D．袁隆平培育的杂交水稻的原理是基因突变
⑵设一个基因平均由10的3次方个核苷酸构成，二倍体水稻细胞中有24条染色体，生殖细胞里的DNA合计有6ⅹ10的7次方个核苷酸，那么每条染色体上平均最多有基因个。 ⑶你认为水稻等基因组测序有哪些重要意义？ 三、酶工程 例4：某酒厂所生产的啤酒、果子酒，放置久了会产生沉淀，使酒混浊，造成产品积压滞销。经化验，得知沉淀物是蛋白质。为解决这一问题，提出了两种方案，甲：在酒中加入少量蛋白酶。乙：在酒中加入少量氨基酸氧化酶。请评价这两种方案： ⑴方案合理，原因是。 ⑵方案不合理，原因是。 四、发酵工程 例5：酵母菌是一种与人类生活关系十分密切的微生物，这与其生理特点密切相关。 ⑴酵母菌在环境条件良好的情况下通常进行生殖。 ⑵啤酒的风味主要取决于采用的酵母菌株。某酒厂的菌株使用了30多年，繁殖了3000余代，风味不减当年，其主要原因是。 ⑶配制甜酒时，总是先来“水”，后出“酒”。其原因是。从这点上看，酵母菌异化作用的特点是。 ⑷糯米饭酿制成甜酒后，其重量，原因是。 五、太空育种技术 例6：1999年11月、2001年1月、2002年3月和2002年12月，我国四次成功发射了“神州”号载人航天实验飞船，飞船绕地球飞行一段时间后，飞船的返回舱均安全回收，这标志着我国的航天技术已居世界先进行列。请回答下列问题。 ⑴在飞行过程中，宇航员所在的轨道舱和返回舱都是密封的，若宇航员吸入的空气中CO2浓度过高，就会导致困乏，呼吸频率加快，严重时会引起窒息。为使CO2浓度降低，要调节舱内气体成分的比例，则最好在舱内放入下列物质中的（） A．Na2O2B．Na2CO3C．NaOH D．Na2O ⑵如果在舱内放适量的绿色植物，也可以一定程度上缓解⑴中叙述的问题。若绿色植物释放了Amol的氧气，宇航员吸入这些氧气，最多可以氧化分解mol葡萄糖。 ⑶2002年12月若干种植物种子由“神州四号”航天飞船带上天，“神州四号”搭载种子到太空飞行的目的是。返回的“太空种子”是否肯定是良种？为什么？。 六、同位素示踪技术 例7：用放射性15N标记的（NH4）2SO4给水稻施肥，并将施用该种肥料后水稻的稻谷饲料喂猪，对猪的唾液和尿液定时进行放射性同位素的跟踪检测，结果在猪的唾液和尿液中均能检测到有15N存在。 ⑴经常施用（NH4）2SO4会使土壤酸化的原因是。 ⑵在（NH4）2SO4中掺入15N的用途是。 ⑶（NH4）2SO4中的N进入猪细胞内的简要过程是 。
现代分子生物学复习题 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
现代分子生物学 一.填空题 的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部 分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两 个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法、可以减少蛋白质合成 过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc构型、 L构型。在电泳中最前面 的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别 是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下 几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA显微注射法、胚胎干细胞法。 聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、 B、E 。其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有%的T,则A为%_,G为%_和C为%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA‘TAQ 、引物、缓冲液、dNTP。 18.在琼脂糖电泳中，DNA会向正极移动。 19.染色体包括蛋白质、染色体两大部分。 20.环状DNA双链的复制主要可分为θ形、滚环形、D-环形三种类型。 21.转录的基本过程包括转录的起始、延伸、终止。 22.半乳糖对细菌有双重作用；一方面可以作为碳源供细胞生长；另一方面它又是细胞壁的成 分。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从 S2 开始，无G 时转录从 S1 开始。 重组技术也称为基因克隆或分子克隆。最终目的是把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤：
2017—2018学年 第二学期 2015级 专业《现代生物制药技术》期末考试试卷 一、名词解释：（本大题共5小题，每小题3分，共15分） 1. 生物反应： 2. 发酵： 3. 种子制备： 4. 愈伤组织： 5. 免疫原性： 二、选择题：（本大题共50小题，每小题0.5分，共25 分） （请将正确答案填写在下面表格内） 1.壳聚糖是（ ）。 A.普通多糖 B ．酸性多糖 C ．氨基多糖 D ．络合多糖 2.（ ）是医药工业合成甾体激素的原料。 A.薯蓣皂苷元 B.多糖 C ．黄酮 D ．蛋白质 3.具有强致泻、止血、影响血小板细胞和肝细胞及脑细胞内游离钙浓度等多种活性的番泻苷 A 及其类似物属于（ ）药物。 A.皂苷类 B.多糖 C ．二蒽酮 D ．蛋白质 4. 软紫草根中分离的抗菌、抗炎、抗癌的活性成分紫草素及其衍生物属于（ ）药物。 A.皂苷类 B.多糖类 C ．苯醌类 D ．蛋白质类 5.当归根挥发油中分离当归内酯属于( )，具有抗肿瘤、调节免疫的功能。 A.萘醌类 B ．萜类 C ．香豆素类 D ．植物甾醇类 6. 海洋生物( )含有丰富的伊胡萝卜素。 A.虾蟹 B ．海绵 C ．珊瑚 D.盐藻 7. 许多陆地植物含有皂苷，而目前在动物界中只发现海洋棘皮动物的海参和海星含有皂苷，皂苷是它们的毒性成分，均具有( )功能。 A.抗血栓 B ．抗肿瘤 C ．降血压 D.改善微循环 8. 透明质酸可以从( )中获得。 A ．鲸鱼 B ．扇贝 C ．海星 D ．蓝藻 9.人体必需的氨基酸有（ ）种。 A.8 B.9 C.10 D.12 10.从（ ）中分离出新的甾醇硫酸盐A 和B ，都具有体外抗猫白血病毒作用。 A.海绵 B.海藻 C.鲸鱼 D.螺旋藻 11.苔藓虫素是从海洋苔藓虫中分离的新型（ ）衍生物 A.多肽类 B.青霉类 C.四环类 D. 大环内酯类 12.用于面包制作的酵母发酵属于（ ）。 部 班级 姓名 学号 考场 ----------------------------------------------密----------------------------------封------------------------------------------线----------------------------------------
1.细菌特殊构造包括、、、等。（本题2分） 2.溶源性细胞在正常情况下有大约10 -5 细胞会发生现象，这是由于少数溶源细胞中的变成了的缘故。（本题分） 3.营养物质可以通过、、和四种方式进入细胞。（本题2分） 4.控制有害微生物措施中杀灭的方法有和，常用和方法，抑制的方法有和。（本题3分） 5.证明遗传物质的基础是核酸的三个著名的实验为、、。（本题分） 6.微生物基因重组的方式包括、_____、_____和。（本题2分） 1.纯培养是其中（）的培养物。 A.只有一种微生物 B.只有细菌生长所需的一种营养物 C.除主要微生物外只有一种微生物 D.没有代谢废物 2.实验室常用的培养细菌的培养基是（）。 $ A. 马铃薯培养基 B. 牛肉膏蛋白胨培养基 C.高氏一号培养基 D.麦芽汁培养基 3.己糖单磷酸支路和ED途径是进行（）替换的一个机制。 A.微生物中DNA合成 B.光合生物中的光合作用 C.某些种类微生物中的能量代谢 D.化学渗透作用 4.微生物代谢中，硝酸盐和硫酸盐可作为电子受体是在（）。 A.无酶时 B.无ATP时 C. 有细胞色素时 D. 无氧时 5.由于控制微生物的目的，灭菌一词指的是（）。 A.除去病原微生物 B.降低微生物的数量 ? C.消灭所有的生物 D.只消灭体表的微生物 6.紫外线辐射主要作用于微生物的（）。 A. 核酸 B.酶类 C. 糖类 D.细胞壁 7.青霉素族的抗生素主要用于抗（）。 A.病毒 B.真菌 C.革兰氏阴性菌 D.革兰氏阳性菌 8.所有下述特征皆适合质粒，除了（）之外。 A.它们是自我复制的DNA环 B.它们有10～50个基因 C.它们是细菌存活所必需的成分 D.它们是接合所必需的成分 9.接合时F因子进入受体细胞，受体细胞（）。 A.经历裂解 B.快速繁殖 C.变成供体细胞 D.发育出线粒体 — 10.研究不同微生物群落及其环境之间的关系的是（）。 A.微生物进化 B.微生物生态学 C.微生物生理学 D.微生物生物化学 四、判断题（每小题1分，共10小题10分）
生物技术概论复习题及答案 复习思考题 第一章 1. 现代生物技术是一项高技术，它具有高技术的“六高”特征是指哪“六高”, 答:高效益、高智力、高投入、高竞争、高风险、高势能。 2. 什么是生物技术，它包括哪些基本的内容,它对人类社会将产生怎么样的影响, 答:生物技术，也称生物工程，是指人们以现代生命科学为基础，结合其他基础学科的科学原理，采用先进的工程技术手段，按照预先的设计改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的。生物工程主要包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程和蛋白质工程。 每一次重大的科学发现和科技创新，都使人们对客观世界的认识产生一次飞跃;每一次技术革命浪潮的兴起，都使人们改造自然的能力和推动社会发展的力量提高到一个新的水平。生物技术的发展也不例外，它的发展越来越深刻地影响着世界经济、军事和社会发展的进程。 3. 为什么说生物技术是一门综合性的学科，它与其他学科有什么关系, 答:因为生物技术涉及到很多个方面，有医学、林农业、食品、环境、能源、化学品等等，不仅仅是局限于生物这一方面，例如研究使用到高科技电子设备，两者必须结合才能进行研究。生物分子学也被运用到计算机的研发中去。 4. 简要说明生物技术的发展史以及现代生物技术与传统生物技术的关系。答:传统生物技术诞生较早。在石器时代后期，我国人民就会利用谷物造酒，这是最早的发酵技术。在公元前221年周代后期，我国人民就能制作豆腐、酱和醋，并一直沿用至今。公元10世纪，我国就有了预防灭花的活疫苗。到了明代，就已经广泛地种植痘苗以预防天花。 16世纪，我国的医生已经知道被疯狗咬伤可传播狂犬
病。在西方，苏美尔人和巴比伦人在公元前6000年就已开始啤酒发酵。埃及人则在公元前4000年就开始制作面包。 而现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志的。1944年Avery等阐明DNA是遗传信息的携带者。1953年Watson和Crick提出了DNA的双螺旋结构模型阐明了DNA的半保留复制模式，从而开辟了分子生物学研究的新纪元。 现代生物技术足从传统生物技术发展而来的。 5. 生物技术的应用包括哪些领域, 答:生物技术被世界各国观为一项高新技术。它广泛应用于医药卫生、农林牧渔、轻工、食品、化工和能源等领域，促进传统产业的技术改造和新兴产业的形成。 6. 南开大学生物命科学学院为什么要开设生物技术概论, 1 第二章 1. 基因工程研究的理论依据是什么? 答:不同基因具有相同的遗传物质(DNA/RNA);基因是可以从DNA上切割下来的;基因是可以转移的;多肽与基因之间存在对应关系;遗传密码是通用的(绝少数除外);可以通过DNA复制把遗传信息传递给下一代。 3. 简述限制性内切核酸酶和DNA连接酶的作用机制。 答:限制性内切核酸酶能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并在合适的反应条件下,使每条链的一个磷酸二酯键断开,产生具有3?OH和5?P的DNA片段。 DNA连接酶催化双链DNA片段紧靠在一起的3?OH末端与5? P末端之间形成磷 酸二酯键，使两末端连接。 2. 简述基因工程研究的基本技术路线。
一名词解释 1缺口（gap）：DNA分子中，一条链上失去一段单链，称为gap。 切口（nick）：DNA分子中，一条链上失去一个磷酸二酯键称为nick。 DNA hellicase (DNA解链酶)：也叫DNA解螺旋酶，其通过水解ATP获得能量来解开双链DNA，每解开一对碱基，需水解2分子A TP→ADP+Pi(磷酸盐) 拓扑异构酶：细胞内一类催化DNA拓扑异构体（topoisomerase）相互转化的酶，其为topoisomerase，其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体，在DNA 双链骨架的3’，5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口，使DNA的多聚核苷酸 链得以穿越，通过改变DNA的连接数，而改变的分子拓扑结构。 3 无义突变(nonsense mutation)：DNA序列三联体密码子发生突变，导致AA密码子变为终 止密码子，称为无义突变，其导致翻译提前结束而常使产物失活 错义突变（missense mutation）：DNA序列三联体密码子发生突变导致pr中原来的AA被另一种AA取代。 4 转座子：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5转录单位：RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定起点（启动子），并在一终点处（终止子）终止，此转录区域称为转录单位。一个转录单位可是一个基因，也可是多个基因。转录因子：RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子称为转录因子。其作用或是认别DNA的顺式作用位点，或是识别其他因子，或是识别RNA聚合酶。 6 复制子：DNA的复制单位。 终止子（Terminator）：模板DNA上提供转录停止信号得DNA序列。 7. 单顺反子mRNA：编码1条多肽链的mRNA RNA编辑：是某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，其改变RNA的序列，而导致DNA所编辑的遗传信息改变。 8 起始tRNA：有一类能特异的识别MRNA摸板上起始密码子的tRNA 多顺反子mRNA：编码多条多肽链的mRNA。 9 RNA的再编码（RNA recoding）:mRNA在某些情况下不是以固定的方式被翻译，而可以 改变原来的编码信息，以不同的方式进行翻译，科学上把RNA编码和读码 方式的改变称为…… 同工tRNA：几种搬运相同AA的tRNA成为同工tRNA。 10通读（readthrough）：有些纵止子的作用被特异的因子所阻止，使酶得以越过终止子继续转录，这种现象称为通读 10 翻译跳跃(translation jumping)：翻译中读码框架发生位移，核糖体跳过一个碱基或一大段 mRNA（如50nt）后读继翻译。这一过程称tranlational jumping 1基因家族：真核生物基因中许多来源相同、结构相近、功能相关的基因按功能成套组合，这样的一组基因称为基因家族，其编码另一个蛋白质家族。 2拓扑异构酶：细胞内一类催化DNA拓扑异构体（topoisomerase）相互转化的酶，其为topoisomerase，其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体，在DNA双链 骨架的3’，5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口，使DNA的多聚核苷酸链得以 穿越，通过改变DNA的连接数，而改变的分子拓扑结构。 3基因突变：指DNA的碱基顺序发生突然而永久性地变化，从而影响DNA的复制，并使DNA 的转录和翻译也跟着改变，因而表现出异常地遗传特征。 4 DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5信号肽：在多肽链合成过程中，先合成的一段多肽序列，该序列引导后合成的多肽链进入
生物技术制药试题及答案 一、名词解释 1. 生物技术（biotechnology）：有时也称为生物工程（bioengineering），是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，利用生物得体或其体系或它们的衍生物来制造人类所需要的各种产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。 2．基因工程（gene enginerring）：是指在基因水平上的操作并改变生物遗传特性的技术。即按照人们的需要，用类似工程设计的方法将不同来源的基因（DNA 分子）在体外构建成杂种DNA分子，然后导入受体细胞，并在受体细胞内复制、转录和表达的操作，也称DNA重组技术。 3．细胞工程（cell engineering）：是指在细胞为基本单位，在体外条件下进行培养、繁殖或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而达到改良生物品种和创造新品种的目的，加速繁育动植物个体，或获得某种有用物质的技术。 4．酶工程（enzyme engineering）：是利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能或对酶进行修饰改造，并借助生物反应器和工艺过程来生产人类所需产品的技术。 5．发酵工程（fermentation engineering）：是指利用包括工程微生物在内的某些微生物或动、植物细胞及其特定功能，通过现代工程技术手段（主要是发酵罐或生物反应品的自动化、高效化、功能多样化、大型化）生产各种特定的有用物质；或把微生物直接用于某些工业化生产的一种技术。由于发酵多与微生物密切联系在一起，所以又称之为微生物工程或微生物发酵工程。 6. 生物反应器（bioreactor）：主要包括微生物反应器、植物细胞培养反应器，动物细胞培养反应器以及新发展起来的有活体生物反应器之称的转基因植物生物反应器，转基因动物生物反应器等。 7. 转基因动物：是指在基因组中稳定地整合有导入的外源基因的动物。 8. 转基因植物：是指通过体外重组DNA技术将外源基因转入到植物细胞或组织，从而获得新遗传特性的再生植物。 9. 细胞培养（cell culture）：是指微生物细胞或动物细胞、植物细胞在体外无
南阳师范学院生命科学与技术学院2013—2014学年第二学期现代生物技术概 论试卷 出卷 人：11级生科1班 一、名词解释。（5个，每个3分。） 1、生物技术 2、基因与基因组 3、细胞工程 4、干细胞 5、菌种退化 二、选择题。（10个，每个3分。） 1、蛋白质工程的实质是（ D ）。 A.改变氨基酸结构 B.改变蛋白质结构 C.改变肽链结构 D.改变基因结构 2、干扰素经过改造可长期储存，从蛋白质水平上应改变的是（ D ）。 A.光氨酸 B.谷氨酸 C.精氨酸 D.半光氨酸 3、蛋白质工程的基本操作程序正确的是（ C ） 1
① 蛋白质分子结构合成② DNA 合成③ mRNA 合成④ 蛋白质的预期功能⑤ 根据氨基酸的序列推出脱氧核苷酸的序列 A.①→②→③→④→⑤→① B. ⑤→④→③→②→①→② C. ④→①→⑤→②→③→① D. ②→③→⑤→①→②→④ 4、科学家把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合，培育出的驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的达到驱蚊且对人体无害的效果。下列关于驱蚊草培育的叙述中，错误的是（ C ） A.驱蚊草的培育属于细胞工程育种，其优点是能克服远源杂交不亲和的障碍 B. 驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG 等试剂或离心、振动、电刺激等方法 C. 驱蚊草培育过程是植物体细胞杂交，不同于植物组织培养，无愈伤组织和试管苗形成 D. 驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离 5.、将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（ D ） A. 具有完整细胞核的细胞 B. 一定的营养物质和植物激素 C. 离体状态 D. 2
一：选择题 1、酶的主要来源是（C） A、生物体中分离纯化 B、化学合成 C、微生物生产 D、动/植物细胞与组织培养 2、所谓“第三代生物技术”是指 (A) A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C、单克隆技术 D、干细胞技术 3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：(A) A、大于 B、等于 C、小于 D、无关 4、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：（E） A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用 B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定 C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感 E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化 5、目前基因治疗最常用的载体是：(B) A、腺病毒 B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D、痘苗病毒 E、疱疹病毒 6、cDNA第一链合成所需的引物是：（D） A、Poly A B、Poly C C、Poly G D、Poly T E、发夹结构 7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A) A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达 C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达 D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) A、表达产物的功能 B、表达产物的产量 C.表达产物的稳定性 D.表达产物分离纯化的难易 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。 10、基因工程药物的化学本质属于：(C) A.糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类 11、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：(C) A、PEG的相对分子量大，促进融合率高 B、PEG的浓度高，促进融合率高 C、PEG的相对分子量小，促进融合率高 D、PEG的最佳相对分子量为4000 12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) A、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内 C、容易培养，产物提纯简单 D、表达产物为天然产物 13、人类第一个基因工程药物是：(A) A、人胰岛素 B、重组链激酶 C、促红细胞生成素 D、乙型肝炎疫苗 14、下列不属于加工改造后的抗体是：(C) A、人-鼠嵌合抗体 B、单链抗体 C、鼠源性单克隆抗体 D、单域抗体 15、动物细胞培养的条件中，不正确的是：(D) A.最适pH为7.2-7.4 B.最适温度为37±0.5C