梅毒实验室诊断 梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。 一、显微镜检查法 （一）暗视野显微镜检查 【基本原理】 梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 【仪器材料】 1．暗视野显微镜。 2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。 【标本采集】 1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。 2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。 【操作步骤】 1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。 2．聚光：将标本玻片臵载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。 3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。 【结果判读】 梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20μm，直径小于0.2μm，有6～12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。 【结果报告】 1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。 2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。 【临床意义】 1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。 2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。 3．如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。 【注意事项】 1.取材时尽量避免出血，以免影响镜下观察。 2.取材后应立即臵暗视野显微镜下观察。 3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。 （二）镀银染色检查 【基本原理】 梅毒螺旋体具有亲银性，可被银溶液染色，从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。 【仪器材料】 1．显微镜。 2．罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。 【标本采集】
梅毒血清学试验四种方法的比较 发表时间：2012-10-25T14:28:14.670Z 来源：《医药前沿》2012年第19期供稿作者：唐玉秀[导读] 比较4种常用的梅毒血清学试验方法，观察各种方法的优缺点，为实验室和临床提供参考。唐玉秀（广西全州县人民医院检验科广西全州541500） 【摘要】目的比较4种常用的梅毒血清学试验方法，观察各种方法的优缺点，为实验室和临床提供参考。方法梅毒酶联免疫吸咐试验（TP-ELISA）,梅毒血浆反应素环状卡片试验（RPR），胶体金快速检测试验（SYP），梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）。结果RPR 和SYP两种方法对梅毒检出率明显低于TP-ELISA和TPPA法。结论 SYP法，ELISA法是实验室初筛梅毒的最佳方法，如果要确诊梅毒要用TPPA法，疗效观察用RPR法。 【关键词】梅毒TP-ELISA RPR SYP TPPA 梅毒是由梅毒螺旋体（苍白螺旋体）感染引起的一种慢性全身性传播疾病。该病病程长，危害大，临床表现复杂，呈多样性，几乎可以累及全身各个器官，早期主要侵犯皮肤，黏膜；晚期可累及心血管及中枢神经系统等器管[1-3]。近年来，梅毒的发病率呈增加趋势，因此对梅毒的早期诊断和及时治疗成为关键问题，防止梅毒的蔓延是重中之重。实验室如何更好的选用哪种检测方法，避免漏诊，误诊，错诊而产生的医疗隐患等。目前用于梅毒血清学检验的方法较多，通过各种方法的比较，从而选择更合适的试验方法，对梅毒的诊断和治疗方面提供更好的科学依据。 1 选择的对象，试剂和仪器，检测的方法 1.1选择的对象选用2011年1月至2011年12月期间住院和门诊检测梅毒项目的患者。大约12400份标本，其中有125例确诊病人，大多数病例无临床症状。 1.2使用的试剂和仪器 （1）试剂：SYP使用艾康生物技术（杭州）有限公司提供的试剂盒。ELISA和RPR由上海科华生物有限公司提供的试剂盒。TPPA是使用日本富士公司试剂盒。 （2）仪器深圳雷杜RT-3100洗板机，上海新波SYM-810酶标仪，XK96-8型梅毒旋转振荡器。 1.3方法严格按照说明书进行操作，先用SYP，TP-ELISA法初筛，检出阳性和弱阳性标本后再用RPR滴渡法和TPPA检测法。 2 结果 SYP和ELISA法初筛结果表1 由SYP和ELISA法筛检阳性标本中，再进行RPR和TPPA检测。先做RPR原倍，阳性者，再做生理盐水稀释滴度1:2,1:4,1:8,1:16 阳性符合率见表2 从表2可得知TPPA为确诊试验，SYP和ELISA法为初筛试验，RPR为疗效观察试验。 3 讨论 由于梅毒感染后，抗心磷酯抗体出现晚于特异性螺旋体抗体，而且梅毒晚期又可能转阴，故RPR，SYP不适宜一期梅毒早期和三期梅毒诊断，对潜伏期和神经梅毒也不敏感。[4]而且SYP，RPR不易于自动化，结果的判断也存在主观性，已不是很适合梅毒的筛检法，但RPR滴度法可作为临床疗效观察的指标。 梅毒酶联免疫吸咐试验（TP-ELISA）是一种基于基因工程的特异性检测技术，灵敏度和特异性均较高，特异性抗体在梅毒的潜伏期即产生，对梅毒的早期辅助诊断较好。TP-ELISA法，操作简单，成本较低，适合医院大批量检测。但存在的缺点是该方法检测的是梅毒IgG 和IgM的混合抗体，IgG抗体治愈后相当长的时间仍然存较高的阳性率，甚至终身阳性，因此TP-ELISA阳性只说明正在感染或者曾经感染过，不能判断梅毒疾病活度与否，所以不能作为疗效监测手段[5]。当然，ELISA法本身也存在不足，这与检测的标本，操作人员的操作有关（如放置时间过长，显色未避光等）导致假阳性。 TPPA的灵敏度和特异性比前三种方法都高，是临床常用的梅毒确诊试验，也可以进行效价测定。但是成本高，操作复杂，耗时较长，不太适合大批量标本的检测。适合用于前三种方法测定阳性后的确诊试验。由于该法检测同样是梅毒IgM的IgG的混合抗体[6]，存在与TP-ELISA相类似的不足。 综上所述四种梅毒学血清方法比较，TP-ELISA法的特异性和灵敏度明显高于SYP，但不能取代SYP法，但两种方法可以互补，结合两种方法更能更好的检测梅毒。对于TP-ELISA和SYP法阳性者，应用TPPA法作确诊试验，RPR作滴度检测，才能更好的为临床提供诊治意见。 参考文献 [1]郭兑山，宁平，方德强,等，梅毒螺旋体抗体IgG ELISA和RPR试验的比较[J].中国输血杂志，2005，14（2）：88. [2]龚向东，叶顺章，张国成等，2000年全国性病流行病学分析[J].中国性病艾滋病防治，2001,7(3):131. [3]刘鹏，梅毒螺旋体的检测技术与应用现状[J].实用医药杂志，2005，22（10）：939-941 [4]黄永梅，ELISA,TPPA和TRUST,RPR梅毒检测方法的比较[J].国际医药卫生导报，2006，12（8）：88-89. [5]王培华，输血技术学[M].北京；北京人民出版社，1998，102-105. [6]何旭东，李龙，ELISA法检测梅毒特异性抗体[J].中国输血杂志，2001，14（增刊）：33.
梅毒实验室测试题 一、单选题 1、梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法： A 革兰染色 B 美兰染色 C 镀银染色 D 伊红染色 2、非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法： A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS 3、TPPA只能检测到： A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA等混合抗体 D IgM 4、梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本： A 皮肤溃疡组织液 B 羊水 C 血液 D 脑脊液 5、RPR检测不能采用下列标本：
A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 6、ELISA检测不能采用下列标本： A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 7、梅毒螺旋体病原学检测方法不包括： A 暗视野显微镜检查 B 镀银染色 C 培养基培养 D 核酸检测 8、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的转速是： A （100±2）转/分B（100±10）转/分 C （120±2）转/分 D （120±10）转/分 9、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的旋转直径是： A 25±2mm B 18±2mm C 20±2mm D 30±2mm 10、RPR/TRUST试验在水平旋转仪上旋转反应时间
A 5分钟 B 8分钟 C 10分钟 D 12分钟 11、TRUST试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 12、前带现象主要出现在下列哪一种方法中： A ELISA B RPR C TPPA D FTA-ABS 13、RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 14、下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体： A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、TPPA试验结果判读孔的血清稀释倍数是：
一、梅毒分类诊断标准 （一）一期梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现：具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。 3、实验室检查：硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性和TPPA（或TPHA 或TP-ELISA）阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查）或结果为阴性的为疑似病例。 （二）二期梅毒的诊断标准 1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史。 2、临床表现：病期2年内，多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损，尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹，也可出现其它损害（关节、眼、内脏等）。 3、实验室检查：皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，
未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）的为疑似病例。
（三）三期梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。 2、临床表现：病期2年以上。有如下特征中的任一项表现，包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿，上腭、鼻中隔等穿孔性损害；骨、眼损害，其它内脏损害；神经梅毒；心血管梅毒。 3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性；或脑脊液检查：WBC≥10×106/L，蛋白>500mg/L，并排除其它引起这些异常的原因。或三期梅毒组织病理变化。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。 （四）隐性梅毒的诊断标准。 1、病史：有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现：无任何梅毒症状与特征。有明确的2年内梅毒接触史或梅毒发病史为早期，病期超过2年或无法判断病期者均为晚期。 3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性（无梅毒史者阳性，滴度
TPPA试剂检测TP抗体假阳性原因分析 TPPA试剂是将梅毒螺旋体（Nichols株）的精制菌体裂解成分包被在人工载体明胶粒子上（致敏粒子），这种致敏粒子含有TP抗原的全片段成分，致敏粒子和样本中的TP抗体进行交联反应发生凝集，产生粒子凝集反应，由此可以检测出血清或血浆中的TP抗体。 在试剂使用过程中，有时由于个别样本中干扰因素和操作偶然因素的影响，可能会出现个别结果不太准确的情况，根据目前收集到的资料分析，产生有异议的结果一般原因如下： 一：试验操作产生的偶然误差 TPPA试剂操作相对简单，但个别情况下也可能产生偶然误差，导致异常结果，如U型板孔划花（重复使用的U型板在清洗时用硬质刷，导致内孔划痕较多，阴性样本的致敏粒子不能正常沉淀而看上去像凝集图像）、静置过程中意外震动（导致沉淀粒子散开）等。 二：其他可能导致异常结果的干扰因素 因为样本个体之间的差异，部分患有其他疾病的患者可能会产生与致敏粒子包被的抗原产生非特异性反应的因子，造成异常结果。根据文献中对于异常结果分析，可能会造成异常结果的疾病是：自身免疫性疾病（系统性红斑狼疮、盘状红斑狼疮、药物诱发的红斑狼疮类、风湿性关节炎、混合结缔组织病、自身免疫性溶血性贫血等）、肿瘤（淋巴肉瘤、脑膜瘤、结肠癌）、皮肤病（皮肤相关的螺旋体引起）、生殖器疱疹、麻风、热性病、
莱姆病、地方性密螺旋体病（雅司病、品他病）等。以及说明书中提及的服用了含有免疫球蛋白血液制品而呈阳性反应的患者。但以上情况中的人群也并不都出现异常结果，可能还和患者自身的个体差异有关。 除疾病外，在孕妇和老年人检测时，也有可能会产生较高概率的异常情况。老年人曾患的基础疾病可能使机体释放诱导产生抗类脂抗体和/或抗T.pallidum抗体（特异性抗体）的交叉抗原，或者个别老年患者体内可能有口腔螺旋体、皮肤相关螺旋体、肠道螺旋体等螺旋体共生，诱导产生抗属、群或特异抗原的交叉反抗体。孕妇在妊娠期间，机体会产生一些特殊物质，可能会导致TPPA检测异常结果（具体何种物质可能会产生影响上不明确）。 总之，TPPA检测结果可以作为样本中是否含有TP抗体的判断依据，但由于人体自身干扰物质影响和个别疾病患者产生的干扰物质影响，可能导致误差的因素较多，在TPPA检测阳性的情况下，还需要结合其他检测结果和临床症状来进行综合评价。 技术服务部
孕产妇检测梅毒假阳性的原因与处理分析 发表时间：2018-07-12T09:23:27.167Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2018年2月第4期作者：罗文蓉 [导读] 探析孕产妇检测梅毒假阳性的原因与处理方法。方法：选取我院行梅毒检测的2584例孕产妇为对象进行研究 罗文蓉 四川省阿坝州茂县人民医院 623200 【摘要】目的：探析孕产妇检测梅毒假阳性的原因与处理方法。方法：选取我院行梅毒检测的2584例孕产妇为对象进行研究，回顾性分析其全部的临床资料，其均接受梅毒检测，总结分析梅毒假阳性的原因与处理方法。结果：经检测，2584份结果中初检阳性为93例。经确诊79例为梅毒患者，14例为假阳性反应，占比15.05%。其中联合恶性肿瘤导致的假阳性1例（1.07%）；妊娠导致的生理学假阳性12例（12.90%）；血清标本处理不当导致的假阳性1例（1.07%）。结论：孕产妇梅毒检测需结合患者临床反应与症状、病史、血清检测等综合判断其假阳性结果。 【关键词】孕产妇；梅毒；假阳性；原因；处理 Reasons and Treatment Analysis of Pregnancy Maternity Syphilis False Positive Abstract：Objective：To explore the causes and treatment of pregnant women with false positive syphilis.Methods：Among the 2584 cases，93 were initially positive and 14 were false positive in 79 cases of syphilis.The ratio was 15.05.One case of false positive caused by combined malignant tumor，12 cases of physiological false positive caused by pregnancy，and 1 case of false positive caused by improper handling of serum samples.Results：After testing，14 out of 2584 results were false positives，accounting for 15.05%.Among them，one case（1.07%）of false positives caused by malignant tumor；12 cases（12.90%）of physiological false positives caused by pregnancy；and one case（1.07%）of false positives caused by improper handling of serum samples.Conclusion：The detection of syphilis in pregnant women should be combined with the clinical response and symptoms，medical history，serum test to determine its false positive results. Keywords：Maternal；Syphilis；False positive；Causes；Treatment 梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病，临床上，梅毒比较常见。相关资料中提及，本病可通过多种途径进行传播，其中最常见的有：经血液途径感染传播；性接触传播；母婴垂直传播等【1】。当人体在感染梅毒之后，其机体中将会产生两种不同的抗体，其中一种为针对梅毒螺旋体的特异性抗体，而另一种则为针对类脂质的非特异性抗体【2】。后者由于不直接针对梅毒螺旋体，所以不具备特异性。当然，除了感染梅毒之外，人体在罹患其它一些疾病亦或者是生理状况有所改变之时，其体內也有可能会形成抗类脂质抗体（低滴度）。现阶段，临床上在对梅毒病患进行诊断之时，常常采取的是梅毒血清学检查法，针对梅毒螺旋体抗体以及针对类脂质抗体进行检测的方式，可取得比较准确的检测结果，但有报道称，此检查方式也存在一定的假阳性问题，也就是生物学假阳性，具体表现为：患者存在生理状况改变亦或者是罹患其它疾病时所致的梅毒血清学检测呈现出假阳性的结果【3】。对此，为能进一步降低患者梅毒血清学检测假阳性问题的发生几率，临床需要对假阳性问题形成的原因进行综合分析，并以此为依据提出相应的解决措施。如此，方可确保孕产妇梅毒检测结果的准确性和可靠性，从而有助于确保孕产妇及胎儿的身体健康。此研究，笔者选取我院行梅毒检测的2584例孕产妇（接诊于2016年1月-2017年12月）为对象进行研究，即对孕产妇检测梅毒假阳性的原因与处理方法进行了探讨和分析，现具体报道如下： 1一般资料与方法 1.1一般资料 选取我院2016年1月-2017年12月行梅毒检测的2584例孕产妇为对象进行研究，其年龄在19-45岁的范围之内，平均 （27.35±4.57）岁；妊娠时间在3-10个月的范围之内，平均（4.3±1.6）个月。所有孕产妇都知情同意此研究，依从性良好，病历资料完整，且符合伦理道德。 1.2标本采集与处理 标本均为早晨空腹血，选用红色头盖无添加剂真空采血管，抽血过程中保证抽血顺利，一针见血，以避免抽血不顺利造成溶血或压脉带使用过久组织液混入等因素影响检测结果。抽血完毕及时分离血清，并于当天及时进行检测。 1.3仪器与试剂 本次研究所用的仪器与试剂 仪器：深圳RT-3900洗板机；北京普朗DNM-9602G酶标仪 试剂：⑴.北京万泰生物药业有限公司生产的梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）；⑵.上海荣盛生物医药有限公司生产的梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） ⑶.北京万泰生物药业有限公司生产的梅毒螺旋体抗体诊断试剂卡（金标法） ⑷.厦门英科新创有限公司生产的梅毒螺旋体抗体诊断试剂卡（金标法） 1.4检测方法 所选择的2584例研究对象均为在我院进行产前检查或入院生产的孕产妇，并全部进行了梅毒检测。检测过程严格按照仪器操作规程以及试剂盒说明书进行检测，与此同时，还需要对所有被检者的基本信息进行准确的记录，主要包括妊娠期、年龄和诊断结果等。 如果出现阳性结果都要用另一种方法复查，如多种方法均为阳性或弱阳性或结果不一致则报告临床医生，然后外送做确证试验。 1.3 评价指标 综合分析2584例孕产妇梅毒检测的结果，统计假阳性反应发生者例数，并对其假阳性形成的原因进行分析讨论，然后再提出相应的解决措施。 2结果 检测结果表明，在2584份检测结果当中有93例初检为阳性。确诊79例为阳性，14例为假阳性反应，所占百分比为15.05%。此14例
梅毒抗体检测中RPR和TPPA是什么区别是什么 RPR滴度如何表达 综述 螺旋体（spirochete)是一类界于细菌与原虫之间、细长、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。螺旋体(Spirochaeta)细长、柔软、弯曲呈螺旋状的运动活泼的单细胞原核生物。全长3～500微米，具有细菌细胞的所有内部结构。在生物学上的位置介于细菌与原虫之间，螺旋体广泛分布在自然界和动物体内。与细菌的区别在生物学上的位置介于细菌与原虫之间。它与细菌的相似之处是：具有与细菌相似的细胞壁，内含脂多糖和胞壁酸，以二分裂方式繁殖，无定型核（属原核型细胞），对抗生素敏感；与原虫的相似之处有：体态柔软，胞壁与胞膜之间绕有弹性轴丝，借助它的屈曲和收缩能活泼运动，易被胆汁或胆盐溶解。在分类学上由于更接近于细菌而归属在细菌的范畴。 当人体感染梅毒螺旋体后4～10 周左右，血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性反应素（主要是IgM、IgG）和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体（主要是IgM、IgG）。这些抗体均可用免疫学方法进行检测。血清学检查是辅助诊断梅毒的重要手段。 根据检测所用抗原不同，梅毒血清学试验分为两大类：一类为非梅毒螺旋体抗原血清试验，包括VDRL 玻片试验、USR 玻片试验、RPR 试验、TRUST 试验，这些试验主要应用于梅毒的筛查和疗效观察。 另一类为梅毒螺旋体抗原血清试验，包括TPHA 试验、TPPA 试验、FTA-ABS 试验、ELISA试验等。这些试验主要用于梅素确诊试验，不用于疗效观察。 非梅毒螺旋体抗体主要是抗心磷脂抗体，其特点是出现相对较晚，一期梅毒早期常阴性。通过检测非梅毒螺旋体抗体的非梅毒螺旋体抗原血清试验特点是敏感性强，但是特异性较差。那理解成RPR敏感性强，但是特异性较差也无不可。 梅毒螺旋体抗体是抗螺旋体本身特异性蛋白的抗体，其特点是比心磷脂抗体出现早。通过检测梅毒螺旋体抗体的梅毒螺旋体抗原血清试验特点是敏感性稍
(11 梅毒实验室测试题 一、单选题 梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法： A 革兰染色 B C 镀银染色 D 非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法: A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS TPPA 只能检测到： A IgA B IgG C IgG+IgM+lgA 等混合抗体 D IgM 梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本： A 皮肤溃疡组织液 B C 血液 D RPR 检测不能采用下列标本： A 血清 B C 全血 D ELISA 检测不能采用下列标本： A 血清 B C 全血 D 梅毒螺旋体病原学检测方法不包括： A 暗视野显微镜检查 B C 培养基培养 D RPR/TRUST 检测用水平旋转仪的转速是： A ( 100± 2)转 / 分 B C ( 120± 2)转 / 分 D RPR/TRUST 佥测用水平旋转仪的旋转直径是: A 25 ± 2mm B 18 C 20 ± 2mm RPR/TRUS 试验在水平旋转仪上旋转反应时间 A 5分钟 B 8 C 10分钟 D 12 TRUST 式验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50 卩 l B 30 C25 卩l D17 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8 9、 10、 11、 12、 美兰染色 伊红染色 羊水 脑脊液 血浆 脑脊液 血浆 脑脊液 镀银染色 核酸检测 (100 ± 10)转 / 分 (120± 10)转 / 分 ± 2mm ± 2mm 分钟 分钟 D 30
前带现象主要出现在下列哪一种方法中: (11
A ELISA B RPR A TRUST B ELISA C TPPA D FTA-ABS 13、 RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是： A 50 卩 l B 30 3 l C 25 卩 l D 17 3 l 14、 下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体： A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、 TPPA 式验结果判读孔的血清稀释倍数是： A 1:20 B 1:40 C 1:80 D 1:160 16、 ELISA 法米用的抗原是: A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 17、 TPPA 法采用的抗原是： A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 18、 RPR 法采用的抗原是： A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 19、 梅毒血清学检测实验室的生物安全级别是： A 一级 B 二级 C 三级 D 四级 20、 室间质控的主要目的是评价： A 检测方法有效性 B 检测结果精确性 C 检测结果准确性 D 检测方法可行性 21、 室内质控的主要目的是评价： A 检测方法有效性 B 检测结果精确性 C 检测结果准确性 D 检测方法可行性 22、 RPF 只能检测到： A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA 等混合抗体 D IgM 23、 特异性梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法：
3种梅毒血清学诊断试验的临床应用价值 目的比较3种梅毒血清学检测方法在临床中的应用价值。方法采用梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA），梅毒甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST），梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验（TPPA）3种方法检测231例血清标本。结果TPPA、ELISA、TRUST敏感性分别为96.30%、98.52%、82.96%，特异性分别为96.88%、92.71%、82.29%。结论ELISA可作为输血和手术前检测的一种理想筛查方法，TRUST法适用于判定病情及疗效观察，有助于判断梅毒复发及再感染，TPPA法有极高的敏感性和特异性，可作为梅毒血清抗体检测的确证方法。 标签：梅毒；血清学诊断；梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验；甲苯胺红不加热血清反应素试验；梅毒螺旋体颗粒凝集试验 梅毒（syphilis）是苍白螺旋体（Treponema pallidum）（又名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性性传播疾病，临床表现呈多样性，可累及多组织和器官，导致组织破坏、功能失常，甚至危及生命，可长期处于潜伏状态，严重影响患者的身心健康，因此，早发现，早诊断和早治疗具有非常重要的临床意义[1]。实验室可以通过检测血液中的非特异性抗体和特异性抗体，判断是否感染梅毒螺旋体，血清学检测是实验室诊断梅毒的重要依据之一，所以选择好的检测方法有利于梅毒早期的诊断和及时治疗。本文采用TP-ELISA、TRUST 和TPPA 3种检测方法进行检测，对结果进行了比较，现报告如下。 1资料与方法 1.1一般资料本组资料选择2012年5月～2014年3月本院门诊及住院确诊的梅毒患者135例，男78例，女57例；梅毒潜伏期或既往感染者48例，现症者87例。另选择96例非梅毒患者，均为本院住院患者，其中自身免疫性疾病患者43例，妊娠孕妇27例，健康对照26例。 1.2试剂与主要仪器ELISA试剂由厦门新创科技公司提供，TRUST试剂由上海荣盛生物技术公司提供，TPPA试剂由日本富士株式会社提供，上述试剂均在有效期内使用。主要仪器为酶标仪、洗板机、离心机、微量振荡器、加样器和恒温水浴箱等。 1.3方法采用TP-ELISA、TRUST和T PPA对258例标本进行检测，3种方法均严格按照试剂盒说明书步骤操作。 1.4统计学方法数据采用SPSS16.0软件包进行统计分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。 2结果
特异性梅毒快速血清学试验（TP）标准操作规程 1、目的 作为血清学确证实验，对梅毒诊断有非常重要的意义，梅毒是国家法定的传染病之一，必须保证该项检测的质量。 2、适用范围 适用于检验科实验室检测梅毒螺旋体IgG、IgM抗体血清学试验（TP）的质量控制。 3、职责 3.1检测人员必须执行本规程。 3.2监督员负责对本规程的执行情况进行检查监督。 3.3科室主任负责对违规情况进行查处，并进行跟踪纠正。 3.4检测人员做好个人防护非常重要，应遵循普遍性防护原则，戴手套谨慎操作。 4、原理 将梅毒的抗原成分固定在结果显示窗上，人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体在移动到该窗口时与固定抗原特异性结合，产生肉眼可见的红色条带，该试验具有较高的敏感性和特异性。方法简便、快捷。 5、仪器 定量架器 6、试剂与材料 6.1试剂盒组成：梅毒TP快速检测试纸条，100人份/包 6.2一次性吸头 7、操作程序 7.1标本的采集： 7.2确保冻融的待检血样充分混匀。 7.3检测程序：撕开试纸条上的盖膜，加质控品和血清或血浆样本50微升分别于试纸条的加样孔内，15分钟后观察结果，最迟不超过2小时。 8、结果的判定 阴性：质控窗口出现条带，样本窗口不出现条带。 阳性：质控窗口出现条带，样本窗口出现条带。 无效：质控窗口不出现条带。 9、注意事项 9.1试剂保存：应保存于2-30℃，在有效期内使用。 9.2判读结果时要保证足够的光线和充足的时间。 9.3确保实验的有效性。试剂在使用前需要进行预评价，检测过程中设置外部对照，观察质控窗条带是否出现，综合判断实验的有效性、确保检测质量。 10、支持性文件 10.1《中华人民共和国传染病防冶法》规定管理的传染病诊断标准
一、梅毒分类诊断标准 (一)一期梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现:具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。 3、实验室检查:硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液:TP 暗视野检查阳性;或RPR(或TRUST)阳性与TPPA(或TPHA 或TP-ELISA)阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未做TPPA(或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查)或结果为阴性的为疑似病例。 (二)二期梅毒的诊断标准 1、病史:有性接触史或性伴感染史或输血史。 2、临床表现:病期2年内,多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损,尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹,也可出现其它损害(关节、眼、内脏等)。 3、实验室检查:皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等:TP 暗视野检查阳性;或RPR(或TRUST)阳性,同时TPPA(或TPHA或TP-ELISA)阳性。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未
做TPPA(或TPHA或TP-ELISA)的为疑似病例。 (三)三期梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。 2、临床表现:病期2年以上。有如下特征中的任一项表现,包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿,上腭、鼻中隔等穿孔性损害;骨、眼损害,其它内脏损害;神经梅毒;心血管梅毒。 3、实验室检查:RPR(或TRUST)阳性,同时TPPA(或TPHA 或TP-ELISA)阳性;或脑脊液检查:WBC≥10×106/L,蛋白>500mg/L,并排除其它引起这些异常的原因。或三期梅毒组织病理变化。 同时符合1、2、3为确诊病例。 同时符合1、2,以及实验室检查RPR(或TRUST)阳性,未做TPPA(或TPHA或TP-ELISA)脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。 (四)隐性梅毒的诊断标准。 1、病史:有性接触史或性伴感染史。 2、临床表现:无任何梅毒症状与特征。有明确的2年内梅毒接触史或梅毒发病史为早期,病期超过2年或无法判断病期者均为晚期。 3、实验室检查:RPR(或TRUST)阳性(无梅毒史者阳性,
引起梅毒血清试验假阳性影响因素 用TRUST及TPPA做梅毒血清学检测。结果 4913例TRUST试验，57例发生生物学假阳性反应，麻风发生率最高，占麻风病例的31.82%，依次为类风湿关节炎17.78%，系统性红斑狼疮（SLE）17.02%，变应性血管炎6.67%，乙型肝炎5.43%，硬皮病3.33%，皮肌炎3.13%，活动性肺结核1.82%，孕妇0.68%，正常人0.08%。结论所有生物学假阳性反应的TRUST定量试验，滴度均≤1:8，其中91.23% 的TRUST定量为1:2，而未经治疗的二期显发梅毒TRUST定量一般≥1:16。 4913例TRUST试验，发生57例生物学假阳性反应，麻风发生率最高，占麻风病例的31.82%，依次为类风湿关节炎17.78%，SLE 17.02%，变应性血管炎6.67%，乙型肝炎5.43%，硬皮病3.33%，皮肌炎3.13%，活动性肺结核1.82%，孕妇0.68%，正常人0.08%。所有生物学假阳性反应的TRUST定量试验均≤1:8，其中91.23%的TRUST定量为1:2。61例二期显发梅毒（未经治疗）患者的TRUST定量试验均≥1:16,其中67.2%的TRUST定量试验≥1:32。 目前国内最常用的梅毒血清学初筛试验是以心拟脂为抗原的非特异性梅毒血 清学试验，简称TRUST，中文名称为苯甲胺红不加热血清反应素试验。其所检测的抗体并非抗梅毒螺旋体抗体，而是梅毒螺旋体感染人体以后分解破坏人体组织，其分解产物释放到血液中，使人体产生抗体。分解释放的产物即是心拟脂，所产生的抗体即是反应素。据文献记载，除梅毒外尚有其他一些感染和免疫性疾病也可使人体组织受损释放心拟脂到血液中，使人体产生反应素，而使TRUST 出现生物学假阳性反应［1，2］。并将生物学假阳性反应分为急性和慢性两种。 急性生物学假阳性反应见于病毒性疾病，如风疹、麻疹、水痘、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎；其他如疟疾、活动性肺结核、丝虫病、鼠咬热、回归热、钩端螺旋体病等，多于6个月内消失。 慢性生物学假阳性反应常见于麻风、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、干燥综合征、桥本甲状腺炎、结节性多动脉炎、风湿性心脏病以及海洛因吸毒成瘾者等，反应持续时间可长达数年或终身［3，4］。 从我们的研究结果可以看出，4913例TRUST试验，发生57例生物学假阳性反应，麻风发生率最高，为31.82%，其后依次为类风湿关节炎17.78%，系统性红斑狼疮17.02%，变应性血管炎6.67%，乙型肝炎5.43%，硬皮病3.33%，皮肌炎3.13%，活动性肺结核1.82%。所有生物学假阳性反应的TRUST定量试验均 ≤1:8，其中91.23%的TRUST定量为1:2。61例二期显性梅毒（未经治疗）患者的TRUST定量试验均≥1:16,其中67.2%的TRUST定量试验≥1:32。均经过TPPA 证实试验确定。提示生物学假阳性反应的TRUST定量滴度一般≤1:8，而未经治疗的二期显发梅毒TRUST定量滴度一般≥1:16。两者有一个明显的定量滴度不同，非常有利于临床的鉴别诊断，为临床医师正确判断化验结果提供了有利的手段。对一些无条件做TPPA、FTA-ABS等梅毒证实试验的医院的医师在梅毒的诊断上无疑也是有很大帮助的。
*欧阳光明*创编 2021.03.07 梅毒实验室诊断 欧阳光明（2021.03.07） 梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。 一、显微镜检查法 （一）暗视野显微镜检查 【基本原理】 梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片，以及淋巴结穿刺液涂片等，在暗视野显微镜下，光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光，从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 【仪器材料】 1．暗视野显微镜。 2．钝刀（刮勺）、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。 【标本采集】 1．皮肤黏膜组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。 2．淋巴液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并反复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检。 【操作步骤】 1．加镜油：在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。 2．聚光：将标本玻片置载物台上，上升聚光器使镜油接触载玻片底面。 3．镜检：在镜下观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。 【结果判读】 梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20m，直径小于0.2m，有6～12个螺旋，具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。 【结果报告】 1．阳性：见到上述特征的梅毒螺旋体。 2．阴性：未见到上述特征的梅毒螺旋体。 【临床意义】 1．暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。 2．螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法，世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。 3．如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性，应复查和血清学检查。 【注意事项】 1.取材时尽量避免出血，以免影响镜下观察。
梅毒血清学试验有两类，一类是非特异性试验，包括RPR、VDRL、USR和TRUST。由于其采用的是非密螺旋体抗原（即正常牛心脂质）测定患者血清中的反应素，反应素也可在某些非梅毒患者及正常人血清中出现，故可呈生物学假阳性。另一类是特异性试验，包括TP ELISA、TPHA、TPPA、FT ABS、金标免疫层析法及免疫印迹试验，其采用Nichols株螺旋体或纯化的、基因重组的梅毒螺旋体抗原测定血清中的特异性抗体。试验的特异性可达到99%左右，但不能绝对排除假阳性。目前国内最常用的梅毒血清学初筛试验是以心拟脂为抗原的非特异性梅毒血清学试验，目前主要有TRUST 和RPR，其所检测的抗体并非抗梅毒螺旋体抗体，而是梅毒螺旋体感染人体以后分解破坏人体组织，其分解产物释放到血液中，使人体产生抗体。分解释放的产物即是心拟脂，所产生的抗体即是反应素。据文献记载，除梅毒外尚有其他一些感染和免疫性疾病也可使人体组织受损释放心拟脂到血液中，使人体产生反应素，而使RPR或TRUST 出现生物学假阳性反应。并将生物学假阳性反应分为急性和慢性两种。急性生物学假阳性反应见于病毒性疾病，如风疹、麻疹、水痘、 丝虫病、鼠咬热、回归热、钩端螺旋体病等，多于6个月内消失。慢 干燥综合征、桥本甲状腺炎、结节性多动脉炎、风湿性心脏病以及海洛因吸毒成瘾者等，反应持续时间可长达数年或终身。生物学假阳性反应的RPR或TRUST定量滴度一般≤1:8，而未经治疗的二期显发
梅毒RPR或TRUST定量滴度一般≥1:16。TPHA等特异性梅毒血清试验假阳性的主要原因有自身免疫病、皮肤病、心血管病、麻风、热性病、老年人、莱姆病、地方性密螺旋体病等因素。为正确判断检测结果是否为假阳性反应，往往需要医生的综合判断分析，如详细询问患者有无不洁性生活史、性病史、流产史、抗梅治疗史；还要认真查体，注意患者是否有梅毒体征；是否为老年人。资料显示老年人梅毒血清学特异性试验假阳性率偏高。 梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种性病。感染梅毒后，人体内会产生两类抗体，一类是直接针对梅毒螺旋体的抗体，另一类则是针对类脂质的抗体。针对类脂质的抗体因不直接针对梅毒螺旋体，因此无特异性，除感染梅毒外，患另外一些疾病以及生理状况的改变，体内也可能产生低滴度的抗类脂质抗体。诊断梅毒时，所做的梅毒血清学检查即检测这两类抗体。RPR试验，即为检测类脂质抗体的实验；而TPHA则为直接检测梅毒螺旋体的实验。因RPR是检测类脂质抗体，而不是直接检测抗梅毒螺旋体抗体的实验，因而无特异性，凡能导致产生类脂质抗体的疾病，均能使RPR阳性。除梅毒外，患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及***成瘾等，都可导致RPR阳性。 梅毒以外其他原因造成的RPR阳性有一个特点，滴度一般较低，小于1：8。根据这一性质在未做确诊试验的实验室进行梅毒滴度的测定来间接对梅毒进行确诊。RPR实验容易出现假阳性，医生常同时做
梅毒血清学实验分两类： 1、非梅毒螺旋体抗原血清试验：用心磷脂做抗原，检查血清中的抗心磷脂脂抗体，即反应素，属于这一类的试验的VDRL试验，USR试验及RPR（快血清反应素）试验，可作定量测定，可用于观察疗效，判断是否复发及再感染， 2、梅毒螺旋体特异性抗原血清试验：用活的或死的梅毒螺旋体或其成份来测抗螺旋体抗体，属于这一类的试验有荧光螺旋体吸收试验FTA-ABS;梅毒螺旋体血凝试验TPHA：这类试验的特异性强，可用作证实试验，但不能用作观察疗效，判断复发及再感染。 当感染梅毒后，人体内会产生两类抗体，类是直接针对梅毒螺旋体的抗体，另一类则是针对类脂质的抗体。针对类脂质的抗体因不直接针对梅毒螺旋体，因此无特异性，除感染梅毒外，患另外一些疾病以及生理状况的改变，体内也可能产生低滴度的抗类脂质抗体。诊断梅毒时，所做的梅毒血清学检查即检测这两类抗体。前面提到的RPR试验，即为检测类脂质抗体的实验；而TPHA则为直接检测梅毒螺旋体的实验。因RPR是检测类脂质抗体，而不是直接检测抗梅毒螺旋体抗体的实验，因而无特异性，凡能导致产生类脂质抗体的疾病，均能使RPR阳性。除梅毒外，患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及海洛因成瘾等，都可导致RPR阳性。 梅毒以外其他原因造成的RPR阳性有一个特点，滴度一般较低，小于1：8。RPR实验容易出现假阳性，医生常同时做特异性较强的TPHA实验来证实梅毒诊断。值得一提的是，TPHA等直接针对梅毒螺旋体的特异性实验，在一般人中也有1%的假阳性。国内曾报道某医院内科住院患者中，TPHA阳性者竟有一半是假阳性。已知可造成TPHA阳性的疾病有：类风湿性关节炎、红斑狼疮、糖尿病、结肠癌、淋巴肉瘤、丙型肝炎、肝硬化、AIDS、麻风、生殖器疱疹、海洛因成瘾等。 除疾病外，某些生理状况的改变，如妊娠，也可导致RPR及TPHA阳性。特别值得一提的是，老年人梅毒血清学检查，假阳性率较一般人高，有报道可达2%。许多老年人患常见的内科疾病，也可导致梅毒化验阳性。不久前，国内某医院报道，他们收治的5例63~80岁老年内科疾病患者，分别患冠心病、脑血管疾病、糖尿病及白血病，住院期间，均出现过RPR和TPHA阳性。 梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据，但不是唯一依据。诊断梅毒，除依据化验结果外，更重要的依据是详细了解患者的生活史和既往病史，以及详细的体查。综合分析后慎重作出判断，才能避免梅毒化验结果假阳性造成的误诊。