浙科版生物选修3第一节《工具酶的发现和基因工程
的诞生》word学案
【学习目标】
1．简述基础理论研究和技术进步催生了基因工程。
2．简述基因工程的原理和技术。
3．运用所学的DNA重组技术的知识，模拟制作重组DNA模型。
4．运用基因工程的原理，提出解决某一实际问题的方案。
【学习过程】
1．总结基因工程的理论基础和技术保证。
2．阅读课文，了解限制性核酸内切酶。
3．阅读课文，总结DNA连接酶并比较DNA连接酶和DNA聚合酶的区别。
4．阅读课文，总结运载体需要具备的条件以及质粒作为运载体的特点。
【知识梳理】
一．“分子手术刀”──限制酶。
1．特点
2．作用
二．“分子缝合针”──DNA连接酶。
1．作用
2．种类
三．“分子运输车”──基因进入受体细胞的载体。
1．条件
2．种类
【典题解悟】下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是（）A．DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接
B．RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录
C．一种限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因
D．利用纤维素酶和果胶酶能够得到植物的原生质体
解析：DNA连接酶能够将两个DNA片段末端的不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接形成磷酸二酯键，故A正确。RNA聚合酶催化的是转录过程，B正确。C错在一种限制酶只能识别一种特定的碱基序列，而不是多种序列。D是植物细胞工程常用的手段，是正确的，故选C。
【当堂检测】
１．把兔操纵血红蛋白合成的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中，结果能合成出兔的血红蛋白，这说明( )
A．兔和大肠杆菌共用一套遗传密码子
B．大肠杆菌的遗传物质是RNA
C．兔的RNA和大肠杆菌的RNA携带相同的遗传信息
D．兔操纵血红蛋白合成的基因能进人大肠杆菌
2．能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是（）
A．单倍体育种B．杂交育种
C．基因工程育种D．多倍体育种
3．科学家用纳米技术制造出一种“生物导弹”，能够携带DNA分子。把它注射入组织中，
能够通过细胞的内吞作用的方式进入细胞内，DNA 被开释出来，进入到细胞核内，最终整
合到细胞染色体中，成为细胞基因组的一部分，DNA 整合到细胞染色体中的过程，属于( )
A ．基因突变
B ．基因重组
C ．基因互换
D ．染色体变异
4．下列何种技术能有效地打破物种的界限,定向地改造生物的遗传性状,培养新的农作物优良
品种 ( )
A ．基因工程技术
B ．诱变育种技术
C ．杂交育种技术
D ．组织培养技术
5．实施基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限性
内切酶。一种限制性内切酶能识别DNA 子中的GAATTC 顺序，切点在G 和A 之间，
这是应用了酶的（ ）
A ．高效性
B ．专一性
C ．多样性
D ．催化活性受外界条件阻碍
6．多数限制性核酸内切酶切割后的DNA 末端为
A ．平头末端
B ．3突出末端
C ．5突出末端
D ．粘性末端
7．研究人员想将生长激素基因通过质粒介导入大肠杆菌细胞内，以表达产生生长激素。已
知质粒中存在两个抗性基因：A 是抗链霉素基因，B 是抗氨苄青霉素基因，且目的基因不插
入到基因A 、B 中，而大肠杆菌不带任何抗性基因，则选择获得“工程菌”的培养基中的抗
抗生素第一应该
A ．仅有链霉素
B ．仅有氨苄青霉素
C ．同时有链霉素和氨苄青霉素
D ．无链霉素和氨苄青霉素
8．限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G ↓GA TCC —，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切
点是—↓GATC —。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有一个酶Ⅱ的切点。
（1）请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
（2）请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。
（3）在DNA 连接酶作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接？什么
缘故？
8．（1）
（2）
（3）能够连接。因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是能够互补的）
—↓GA TC —……—↓GATC —
— CTAG ↑—……— CTAG ↑— 用酶Ⅱ切割 目的基因 — GATC —……— GATC — —CTAG —……—CTAG — 目的基因
—G ↓GATC C — —C CTAG ↑G — 用酶Ⅰ切割 —G GA TCC — —CCTAG G —
浙科版选修1第三部分《实验九腐乳的制作》学案2 课堂导学案 【重难点突破】 一、腐乳制作的主要菌种是哪种菌？ 腐乳制作的主要菌种有毛霉菌和根霉菌，两者都是真菌。 1、毛霉 ①毛霉外呈毛状，白色菌丝细胞无横隔，由单细胞组成，细胞质中有多个核，白色菌丝呈分枝。常栖生在果实、果酱、蔬菜、糕点、乳制品等食品上，引起食品腐败变质。 ②菌落特征：菌落一般灰色或浅褐色，质地疏松，高度1 cm以内，在豆腐坯或熟的大豆粒上生长得旺盛，菌丝厚密，高度在1 cm以上，白色或灰白色。 ③毛霉生长的温度控制在15—18O C。 2．根霉菌 ①根霉菌丝较粗，无隔膜，一般认为是单细胞的。菌丝会在培养基表面迅速蔓延，称为匐匍菌丝。在匐匍菌丝上有节，向下伸入培养基中，成为分枝如根状的菌丝，称为假根。从假根部向空气中丛生出直立的孢子囊梗，顶端膨大，形成孢子囊，内生长大量的孢囊孢子。 ②在自然界分布很广，常生长在淀粉质的物品上，如馒头、面包、山芋。市售甜酒曲中主要是根霉。根霉也可制造豆腐乳及生产糖化酶，另外，它又是甾体物质、延胡索酸等物质生产的菌种 ③腐乳旧法生产只能在冷天进行，现在炎热的夏天也能每天连续制造，使生产不受季节性的限制，主要就是在豆腐坯上培养能耐高温的根霉群系。米根霉生长的最适温度是37℃～40℃。华根霉在45℃时还能生长。 3．毛霉等微生物产生的蛋白酶能够将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，使腐乳具有鲜味和芳香；脂肪酶可以将脂肪水解为甘油和脂肪酸。 4.腐乳酿造选择优良菌种的条件：①不产生毒素，菌丝壁细软，棉絮状，色白或淡黄；②生长繁殖快速，且抗杂菌能力强；③生产的温度范围大，不受季节限制，④有蛋白酶、脂肪酶、肽酶及有益于腐乳质量的酶系；⑤使产品质地细腻柔糯，气味正常良好。 【典题演示1】 1．（原创）细胞结构和毛霉不相同，含有有氧呼吸酶的生物是 A.酵母菌 B.醋酸菌 C.根霉 D.青霉 【答案】B
选修1《生物技术实践》知识点归纳 实验1 大肠杆菌的培养和分离? 1.微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生 物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。细菌是单细胞的原核生物， 有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核,只有一环状DMA 分子 (拟核)。以分裂(二分裂)的方式繁殖,分裂速度很快。用革兰氏染色法将细菌分 为革兰氏阳性菌(革兰氏染液染色后,再脱色处理,细菌仍保留染色液的颜色)和 革兰氏阴性菌两大类,区别在细胞壁的成分不同。大肠杆菌是革兰氏阴性(细胞 壁薄,有荚膜)、兼性厌氧的肠道杆菌。 2.细菌的分离方法有两种:划线分离法和涂布分离法。是消除污染杂菌的通 用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。划线分离就是用接种环 蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线的过程中菌液逐渐减少,细 菌也逐渐减少,。划线最后,可使细菌间的距离加大。将接种后的固体培养基培 养10~20小时后,一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞,形成菌落,不会重叠。 在斜面上划线,则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。用于基因工程的 大肠杆菌的工程菌,可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。由于工程菌 的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因),如在培养基中加入一定量的氨 苄青霉素,由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因,所以在划线后只有存在抗 性基因的工程菌能生存下来。 涂布分离时,需要先将培养的菌液稀释,通常稀释10-5~10-7倍之间,然后取 0.1mL 不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在 培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落，每个培养 基里有20个以内的单菌落为最合适。 优点：划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂 。 在培养微生物时,必须进行无菌操作。其首要条件是各种器皿必须是无菌的,各 种培养基也必须是无菌的,转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂 布等操作中的每一步都要做到无菌(防止杂菌污染)。进行恒温培养时,要将培养 皿倒置,是因为培养基中的水分会以水蒸气的形式蒸发,倒放培养皿会使水蒸气 凝结成水滴后,落入培养基的表面并且扩散,菌落中的细菌也会随水扩散,菌落相 互影响,很难再分成单菌落,达不到分离的目的。 4.细菌扩大培养要用LB 液体培养基(通用培养基、常用于做生理学研究和 发酵工业),划线分离要用LB 固体培养基(常用于微生物分离、鉴定、计数和菌 种保存)。我们在利用微生物时,常常要求所利用的微生物不被其他微生物污染。 因此,在培养微生物时必须进行无菌操作 无菌操作的首要条件是各种器皿必须是无菌的,如各种大小的培养皿、试管、 三角瓶、取样器的头(或称“枪头”、“tip”)、移液管、三角刮刀、接种环、 镊子等等。这些用具通常用高压蒸汽灭菌法前各种用品均需用牛皮纸或报纸包 好。培养皿可几个包在一起;试管加棉花塞或塑料盖后也是几个包在一起;三角 瓶可用封口膜(市售产品,既通气又不使菌进入)或6层纱布封口,再用牛皮纸或 报纸封口;移液管上端用镊子放入少量棉花,再用牛皮纸包上(现在多不用移液管 而用取样器);取样器的“枪头”放在可灭菌的专用塑料盒中,也可放在上口用牛 皮纸包好的烧杯中……在121℃(1kg/cm 2压力)下灭菌15min 。值得注意的是,实 验中所需的棉花不能用脱脂棉,因脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染。灭菌后,建议收藏下载本文，以便随时学习！我去人也就有人！为UR扼腕入站内信不存在向你偶同意调剖沙
第一章基因工程 一、工具酶的发现和基因工程的诞生 1、基因工程的概念： （1）广义的遗传工程：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。（2）基因工程： 就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们需要的基因产物，或者让它获得新的遗传性状。基因工程的核心是构建重组DNA分子。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。 （3）基因工程诞生的理论基础： DNA是遗传物质的发现过程、DNA双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。 2、基因工程的基本工具 （1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） ①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 ②功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能切割（使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开），因此具有专一性。 例如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是GAATTC,能在G和A之间切割DNA，如下图所示。 黏性末端 黏性末端 ③结果：能将DNA分子切割成许多不同的片段。 备注：不同DNA分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个DNA分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。 （2）“分子缝合针”——DNA连接酶 ①作用：将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起（缝合磷酸二酯键）形成的D NA分子称为重组DNA分子。 因此，DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用，可以将外源基因和载体DNA连接在一起。 （3）“分子运输车”——载体——质粒
高中生物 3.9《实验九腐乳的制作》学案2 浙 科版选修1 【重难点突破】 一、腐乳制作的主要菌种是哪种菌？腐乳制作的主要菌种有 毛霉菌和根霉菌，两者都是真菌。 1、毛霉①毛霉外呈毛状，白色菌丝细胞无横隔，由单细胞 组成，细胞质中有多个核，白色菌丝呈分枝。常栖生在果实、果酱、蔬菜、糕点、乳制品等食品上，引起食品腐败变质。 ②菌落特征：菌落一般灰色或浅褐色，质地疏松，高度1 cm 以内，在豆腐坯或熟的大豆粒上生长得旺盛，菌丝厚密，高度在1 cm以上，白色或灰白色。③毛霉生长的温度控制在1518OC，而夏天发酵的是根霉菌，它能够在高温下进行。 二、乳腐制作的原理是什么腐乳酿造是利用豆腐坯上培养的 毛霉或根霉，培养及腌制期间由外界侵入微生物的繁殖，以及配 料中加入的红曲中的红曲霉、面包曲中的米曲霉、酒类中的酵母 等所分泌的酶类，在发酵期间，特别是后期发酵中引起极其复杂 的化学变化，促使蛋白质水解成可溶性的低分子含氮化合物氨基酸，淀粉糖化，糖分发酵成乙醇和其他醇类及形成有机酸，同时 辅料中的酒类及添加的各种香辛料等也共同参与作用，合成复杂
的酯类，最后形成腐乳所特有的色、香、味、体等，使成品细腻、柔糯而可口。 【典题演示2】 1、（改编xx徐州三模）下列关于造成相关实验失败的原因分析中，不正确的是 A、制作腐乳的卤汤时，料酒加的量较多，易造成豆腐腐败变质 B、制作果酒时，先除去葡萄的枝梗再进行冲洗，可能造成葡萄霉烂 C、制作果醋时，通氧不足或温度过低，造成发酵失败 D、根霉、毛霉分别在不同的温度条件下进行腐乳的发酵 【答案】 A 【解析】 正确理解微生物在食品加工方面的应用是关键。腐乳制作过程中添加料酒过多会延长发酵的时间。 【变式训练4】 1、（xx南通三模）（多选）腐乳制作过程中，豆腐含水量、盐的用量、发酵温度和酒的用量等均会影响腐乳风味和质量。下列相关叙述正确的是 A、豆腐含水量过高，腐乳不易成形 B、加盐量过多，腐乳硬度会增大
课后知能检测10 一、选择题 1．生态农业比一般农业( ) A．投入多，产出多，污染少，可持续发展能力强 B．投入少，产出多，污染少，可持续发展能力强 C．投入一样，产出相当，污染少，可持续发展能力强 D．投入和产出都较少，污染相同，可持续发展能力强 【解析】在生态农业中，实现了废弃物资源化，利用物质循环再生原理，因此投入少，污染少，同时产出多，可持续发展能力强。 【答案】B 2．某地通过新建沼气池和植树造林，构建了新型农业生态系统(如图所示) 。关于该农 业生态系统的叙述，错误的是( ) A．该生态系统的维持，人的作用非常关键B．该生态系统利用了物质循环再生原理，实现了农业生产的可持续发展C．该生态系统采用分布式结构，提高了能量传递效率 D．该生态系统充分利用了废弃物中的能量，实现了能量的多级利用 【解析】该生态系统采用分布式结构，提高了能量的利用率，但不能提高能量的传递效率。 【答案】C 3．世博会伦敦馆又名“零碳馆”。它除了利用太阳能、风能之外，还将剩饭菜中的生物质能用于发电。另外，水源也是位于房顶的花盆接收并过滤的雨水，供生活用水。“零碳馆”的设计与哪种生态工程更相似( ) A．物质循环利用的生态工程B．节水和废水处理与应用的生态工程 C．小流域综合治理的生态工程D．清洁和可再生能源系统组合利用的生态工程 解析】“零碳馆”强调零排放，因此应属于能源方面的生态工程。 答案】D 4．设计生态工程的常用方法之一是给食物链( 网) “加环”，下图就是一种“加环”示 意图。据图判断下列说法不正确的是( )
A．用玉米的副产品玉米芯生产木糖醇，可增加经济效益 B．用残渣来培育食用菌和蛆蛹，实现了物质的多级利用 C．用蛆蛹粪便作为有机肥还田，运用了能量循环再生的原理 D．该生态工程的运转离不开人的管理 【解析】A 项提高了副产品的经济价值，减少了环境污染；B项使残渣中的能量流向 生物，提高了能量利用率，减少了环境污染；C 项用蛆蛹粪便作为有机肥还田，其中的能量不能直接被植物利用，且能量也不能循环再生，有机肥中的有机物在田里会被微生物分解为无机物而被植物利用，这体现了物质循环再生；D项这种农田生态系统，离不开人的管理， 人的作用占主导。 【答案】C 5．某生物小组考查一农田生态系统中水稻从播种到稻秆还田的全过程。在稻田分蘖期间，农民拔草、治虫；然后排水进行搁田(亦称“烤田” ) ；稻谷收获之后，有不少农民在田 里焚烧稻秆。下列叙述中不正确的是( ) A．农民拔草、治虫目的是使能量较多地流向水稻 B．搁田时排出的水可能对水体造成污染 C．搁田有利于水稻根系生长，提高水稻抗倒伏能力 D．焚烧稻秆可促进物质循环，实现能量高效利用 【解析】焚烧稻秆虽然可以促进物质循环，但是浪费了大量能量，从而使能量的利用效率大大降低。拔草、治虫使能量较多地流向水稻；搁田时排出的水中含有大量氮、磷等无机盐，可能对水体造成污染，但土壤暴露在空气中，有利于水稻根系的呼吸，促进水稻的生长发育。 【答案】D 6．下列叙述违背生态工程中生态学原理的是( ) A．充分考虑环境因子对生物的影响 B．尽可能减少种间竞争所产生的损耗 C．实现生态系统的良性循环 D．以单一种群获得经济效益的最大化 【解析】设计生态工程的目的是在促进自然界良性循环的前提下，充分发挥资源的生产能力，防治
学业达标测评( 六 )泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 1. 制作泡菜所利用的乳酸菌最初来自于() A．人工加入到泡菜水中的 B．所选蔬菜自身原有的 C．腌制过程中自生的 D．水中的乳酸菌 【解析】制作泡菜时所利用的乳酸菌最初来自于所选蔬菜自身原有的。 【答案】 B 2．制泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化是() A．先减少后增加B．先增加后减少 C．逐渐增加D．逐渐减少 【解析】泡菜腌制过程中，由于坛内环境中硝酸还原菌的繁殖，促进硝酸盐还原为亚硝酸盐，但随 腌制时间延长，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸，抑制硝酸盐还原菌繁殖，产生的亚硝酸盐被分解，使亚硝酸 盐含量逐渐下降。b5E2RGbCAP 【答案】 B 3．亚硝酸盐溶液与对氨基苯磺酸反应后与N-1- 萘基乙二胺偶联出现的颜色是() A．橙黄色B．紫红色 C．黄绿色D．橘红色 【解析】亚硝酸盐溶液与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1- 萘基乙二胺偶联会形成紫红色产物。 【答案】 B 4．在泡菜的腌制过程中容易造成亚硝酸盐含量增加的因素主要是() A．食盐用量过多B．细菌大量繁殖 C．腌制时间过长D．加水过少 【解析】泡菜坛中硝酸盐还原菌大量繁殖可导致坛内亚硝酸盐含量增多。 【答案】 B 5．下列与泡菜制作及亚硝酸盐含量测定相关叙述不正确的是() A．泡菜和酸菜都是利用天然微生物进行发酵制成的 B．泡菜腌制过程中发挥作用的主要是假丝酵母和乳酸菌 C．泡菜发酵过程中的无氧环境主要依赖于容器凹槽加水再加盖密封 D．亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸偶联，形成紫红色产物，之后可用光电比色法定量
色产物，然后可用光电比色法定量。p1EanqFDPw 【答案】 D 6．有关膳食中的亚硝酸盐对人体健康的影响，下列说法不正确的是() A．膳食中的亚硝酸盐在人体内会随尿液全部排出 B．亚硝酸盐可作为食品添加剂 C．亚硝酸盐在特定条件下可转变成致癌物质 D．蔬菜放置过久，亚硝酸盐含量将上升 【解析】研究表明膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，可作为食品添加剂，但当人体一次摄 入的亚硝酸盐总量达到某一数值时将会致病。亚硝酸盐本身无致癌作用，在特定条件下转变成的亚硝胺有 致癌作用。蔬菜放置过久，其亚硝酸盐含量会上升。少量的亚硝酸盐可随尿排出，过量时将危害健康。 DXDiTa9E3d 【答案】 A 7．关于亚硝酸盐定量计算公式的叙述正确的是() A．式中X1为样品中亚硝酸盐含量，单位为g/kg B．式中m1为样品质量，m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，m1、 m2单位应相同 C．式中V1为测定用样品液体积，V2为样品处理液总体积 D．式中m1为样品质量，单位为g，m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，单位为μg 【解析】亚硝酸盐定量计算公式中，X1为样品中亚硝酸盐含量，单位mg/kg；m1为样品质量，单位g；m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，单位μg；V1为样品处理液总体积；V2为测定用样品液体积。RTCrpUDGiT 【答案】 D 8．如图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答： (1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是 ____________________________________________________________ 。5PCzVD7HxA (2) 盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是_________________________ ______________________________________________________________ ；jLBHrnAILg 试说明盐在泡菜制作中的作用：__________________________________ ____________________________________________________________ 。xHAQX74J0X (3)泡菜风味形成的关键在于 ________的加入。 (4)泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，试分析可能的原因： _________________________________________________________ LDAYtRyKfE
分离以尿素为氮源的微生物 1．尿素在自然界中氮循环有怎样的关系？ 自然界中的氮循环在保持生态稳态上有重要的作用，具体过程可参看下图。 自然界中的氮循环 如果土壤中有许多尿素，在自然界较高温度下就会被水解，水解后的NH3会使土壤变成碱性，NH3与其他阴离子物质如SO2－4、CO2－3、NO－3等形成化合物，则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解，并利用了所形成的氨，有利于自然界中氮的循环。 2．为什么本实验中要用琼脂糖来代替琼脂配制固体培养基呢？琼脂糖与琼脂有何区别？ 琼脂在制作固体培养基时起凝固剂的作用。但它却是一种未被纯化的混合物，里面有一定量的含氮化合物。在本实验中所使用的尿素培养基却要求提供氮元素的物质只有尿素，用这种培养基才能分离得到含脲酶的细菌。若用琼脂来制备本实验的尿素固体培养基，则提供氮元素的物质除了尿素还有琼脂，用这种培养基就不难只得到含脲酶的细菌，还会得到大量以非尿素为氮源的细菌，这样就达不到分离出以尿素为氮源的细菌这一实验目的了。所以要将琼脂纯化，去除那些含氮化合物，这样经纯化得到的琼脂糖就可以代替琼脂做固体剂且不会带来含氮化合物对本实验的干扰了。 3．本实验的微生物分离与上一实验中大肠杆菌的分离实质上一样吗？ 两者的细菌分离有很大的不同。
若在尿素培养基上出现了菌落，则表明已经分离得到有脲酶的细菌菌落了。得出这一结论的依据是：尿素培养基中提供氮源的只有尿素，在这样的培养基中能存活的细菌则能利用尿素做氮源，它们就是有脲酶的细菌。 5．全营养培养基与尿素培养基上的菌落在数量和类型上有什么不同呢？为什么出现这种差异呢？
LB培养基稀释度10－4尿素培养基稀释度10－4比较上图，可明显发现：全营养培养基数量和种类都明显多于尿素培养基上的。因为全营养培养基中的氮源是蛋白胨，很多细菌都能利用它，而尿素培养基中的氮源只有尿素，只有含脲酶的细菌才能利用尿素，能存活。 6．全营养培养基与尿素培养基属于什么类型的培养基呢？微生物的培养基是怎么分类的？ 全营养培养基属于基础培养基，而尿素培养基属于选择培养基。 培养基名目繁多，种类各异，为了便于系统化，可对其进行分类。 (1)按对培养基成分的了解程度分： ①天然培养基：利用一些天然材料制成的培养基，对其成分无法确定。 具体材料：如用肉汤、芽汁等制成的。 用途：适合作实验室用的基本培养基及大生产中的种子培养基。 ②组合培养基(合成培养基、化学限定培养基或综合培养基)： 是用化学成分及其数量都很清楚的物质配制的培养基。 用途：一般用作营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定和生物测定等较高的研究工作。 (2)按物理状态分： ①固体培养基：外观呈固态的培养基。 用途：广泛，可用于菌种的分离、鉴定、菌落计数等。可用于菌种保藏、生物活性物质测定等。 ②半固体培养基：在液体培养基内加入少量琼脂(0.5%左右)，当培养基倒放时会流动。 用途：细菌运动观察(穿刺接种)噬菌种的效价；厌氧菌的培养及菌种保藏。 ③液体培养基：不加入凝固剂呈液体状态的培养基。 用途：广泛，在实验室中作各种生理、代谢研究和获得大量菌体，生产上绝大多数用液体培养基。 (3)按培养基的用途分： ①基础培养基：含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基。如：牛肉膏蛋白胨培养基是培养细菌的基础培养基。 ②选择性培养基： 根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学、物理因素的抗性而设计的培养基。它的目的是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。 ③加富培养基：在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。如加入血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。一般是用来培养营养要求苛刻的微生物。一定意义上有选择的作用。它可以增加所要分离微生物的数量，达到富集，从而形成优势，
浙科版生物选修3第一节《工具酶的发现和基因工程 的诞生》word学案 【学习目标】 1．简述基础理论研究和技术进步催生了基因工程。 2．简述基因工程的原理和技术。 3．运用所学的DNA重组技术的知识，模拟制作重组DNA模型。 4．运用基因工程的原理，提出解决某一实际问题的方案。 【学习过程】 1．总结基因工程的理论基础和技术保证。 2．阅读课文，了解限制性核酸内切酶。 3．阅读课文，总结DNA连接酶并比较DNA连接酶和DNA聚合酶的区别。 4．阅读课文，总结运载体需要具备的条件以及质粒作为运载体的特点。 【知识梳理】 一．“分子手术刀”──限制酶。 1．特点 2．作用 二．“分子缝合针”──DNA连接酶。 1．作用 2．种类 三．“分子运输车”──基因进入受体细胞的载体。 1．条件 2．种类 【典题解悟】下列关于各种酶作用的叙述，不正确的是（）A．DNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接 B．RNA聚合酶能与基因的特定位点结合，催化遗传信息的转录 C．一种限制酶能识别多种核苷酸序列，切割出多种目的基因 D．利用纤维素酶和果胶酶能够得到植物的原生质体 解析：DNA连接酶能够将两个DNA片段末端的不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接形成磷酸二酯键，故A正确。RNA聚合酶催化的是转录过程，B正确。C错在一种限制酶只能识别一种特定的碱基序列，而不是多种序列。D是植物细胞工程常用的手段，是正确的，故选C。 【当堂检测】 １．把兔操纵血红蛋白合成的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中，结果能合成出兔的血红蛋白，这说明( ) A．兔和大肠杆菌共用一套遗传密码子 B．大肠杆菌的遗传物质是RNA C．兔的RNA和大肠杆菌的RNA携带相同的遗传信息 D．兔操纵血红蛋白合成的基因能进人大肠杆菌 2．能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是（） A．单倍体育种B．杂交育种 C．基因工程育种D．多倍体育种 3．科学家用纳米技术制造出一种“生物导弹”，能够携带DNA分子。把它注射入组织中，
精选2019-2020年浙科版高中生物选修3 现代生物科技专题课后辅导练习三 十六 第1题【单选题】 下列关于生物技术的安全性和伦理问题的叙述正确的是 A、由于至今未发现一例因食用转基因食物而影响人体健康的实例，因而，不需要考虑转基因食物的 安全性问题 B、由于转基因生物可能成为“入侵的外来物种”，因而转基因生物势必会威胁生物的多样性 C、基因检测疾病带来的负面影响主要是基因歧视，但可以通过正确的科学知识传播、伦理道德教育 和立法得以解决 D、由于设计试管婴儿、克隆技术目前已经成熟，在不违背伦理道德的前提下，可用来解决不孕夫妇 的生育问题 【答案】： 【解析】： 第2题【单选题】 下列有关克隆人的说法错误的是( ) A、克隆人是一种无性生殖方式 B、克隆人证明了人体细胞细胞核具有全能性 C、在现有克隆技术条件下，成功率为100% D、中国政府禁止生殖性克隆人 【答案】： 【解析】：
第3题【单选题】 引发伦理问题的生物技术主要是( ) ①克隆人；②设计试管婴儿；③制作基因身份证；④转基因生物 A、①②④ B、①②③ C、①②③④ D、①④ 【答案】： 【解析】： 第4题【单选题】 不同物种之间很难通过杂交培育新品种，可打破物种界限进行育种的方式是 A、诱变育种 B、杂交育种 C、单倍体育种
D、转基因育种 【答案】： 【解析】： 第5题【单选题】 生物界普遍存在着变异，人们研究并利用变异可以培育出高产、优质的作物新品种。下列能产生新基因的育种方式是( ) A、“杂交水稻之父”袁隆平通过杂交技术培育出高产的超级稻 B、用X射线进行大豆人工诱变育种，从诱变后代中选出抗病性强的优良品种 C、通过杂交和人工染色体加倍技术，成功培育出抗逆能力强的八倍体小黑麦 D、把合成β胡萝卜素的有关基因转进水稻，培育出可防止人类VA缺乏症的转基因水稻 【答案】： 【解析】： 第6题【单选题】 引发伦理问题的生物技术要包括( ) ①克隆人②设计试管婴儿③基因身份证④转基因生物． A、①② B、①②③ C、①②③④ D、④ 【答案】： 【解析】：
（浙江专版）高中生物第四章实验七植物的组织培养教学案浙科版 选修 1 一、植物组织培养 1．概念：取一部分植物组织，在无菌的条件下接种在培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽，培养为成熟植株的技术。 2．理论基础：植物细胞的全能性。 3．培养基 (1)发芽培养基：细胞分裂素浓度大于生长素浓度的培养基。 (2)生根培养基：生长素浓度大于细胞分裂素浓度的培养基。 4．培养过程 外植体――→脱分化愈伤组织――生芽丛状苗―→生根幼苗――→ 植株 二、菊花的组织培养 1．材料 MS 培养基、发芽培养基、生根培养基、萘乙酸(NAA)、苄基腺嘌呤(BA)、菊花幼苗。 2．操作流程 1.植物组织培养的理论基础是植物细胞的全能性。 2.影响植物组织培养的因素有：植物材料、营养物质、植物激素 及pH 、温度、光照等。 3.植物组织培养的一般过程为： 离体的植物器官、组织、细胞――→脱分化愈伤组织――→发芽培养基丛状苗――→生根培养基 生根――→ 植株 4.发芽培养基中细胞分裂素相对较多而生长素相对较少；生根培 养基中生长素较多而细胞分裂素较少。
1．不同植物、不同组织的生根和生芽是否都要使用相同的生长素和细胞分裂素浓度？ 提示：不相同。 2．本实验用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，为什么？ 提示：天然激素都有相应的使之分解的酶，所以使用时间短，而人工合成的，没有分解酶，作用时间长，效果显著。 3．植物组织培养过程中，产生污染的途径有哪些？ 提示：①外植体带菌；②培养基及接种器具灭菌不彻底；③接种操作时带入；④环境不清洁。 核心要点一| 有关植物组织培养的几个问题及分析1．细胞的全能性 (1)概念：指已经分化的细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。 (2)原因：生物体的每一个体细胞都是由受精卵经有丝分裂而来的，含有本物种的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全套基因。 (3)植物细胞表达全能性的条件：①离体状态；②一定的营养物质；③植物激素；④其他适宜的外界条件(温度、pH、氧气、光照、无菌等)。 2．激素用量比例产生的影响 生长素与细胞分裂素比值结果
选修一知识点填空 实验 1 大肠杆菌的培养和分离 1、微生物指的是 ______________________ 的单细胞、多细胞或______________ 的低等生物。如： 等。绝大多数微生物与传染病（有关/ 无关），90%以上的微生物是对人类（有利/ 有害）。 2、大肠杆菌是革兰氏 ______ 性菌，新陈代谢类型是_________________ 。从细胞结构上看，它属于 _________ 生物。在肠道 中一般对人体无害，也有少数菌株对人体_________ ，可以侵袭_______ 并产生_____ 。但是，任何大肠杆菌如果进入人的，都会对人体产生危害。大肠杆菌是工程中被广泛采用的工具。如重组的人粒细胞- 巨噬细胞（rhGM-CSF就是用大肠杆菌工程菌生产的。这种刺激因子是一种，只要用级的量即可提高人的白细胞的数量，目前是放疗和化疗过程中的必用辅助药物。大肠杆菌细胞壁的主要成分是，细 胞质中含有的细胞器是 __________ ，控制细菌遗传性状的DNA主要分布在__________ ，此外，细胞质中也有小型的 环状DNA称为_____________ 。 3、革兰氏染色法是一种用于 ____________的染色法。此法将细菌分为两大类，即革兰氏阳性菌和____________________ 。 4、各类生物细胞壁的成分：植物 ___________________ 细菌 ___________________ 真菌___________________ 5、细菌通常以 ________ 方式繁殖， _________________ 在固体培养基上大量繁殖形成的____________________ 的细胞群统 称为单菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。单菌落的分离是________________________________ 的通用方法，也是用于 6、细菌培养的通用培养基是 _________ ,其液体培养基的配方（以1升为例）：_______________________________________ ， 若要配制固体培养基则需加入 ________________ ；培养基的分类：按物理性状_________________________________________ ， 按化学成分 _______________________________________ ；按用途 _________________________________________ 7、细菌喜 _________ ，霉菌喜_________；细菌通常要求在__________________________ 的环境中生长，霉菌要求在 _____________________ 的环境中生长。 8、常用的细菌分离方法：划线分离法和 _____________________ ，前者的具体操作是：用已经在 _________________ 烧红后冷 却的 ____________ 蘸取带菌的培养物，在_______________ （固体/ 液体）培养基的平板上划线。其中烧红的目的 _______________________ ，冷却的目的_______________________ 。接种环部分深入到菌液中，然后，在固体培养基的平板上 _______________________ 划线。注意：接种环只在菌液中蘸菌液次。每次划完线，接种环都要 ______________________ （原因是_________________________ 并冷却（原因是__________________________ 后从___________________________ 开 始再重新划线（原因是 ________________________________ ，最后，在划线的末端出现______________________________ ， 表明菌已被分离。如果再将单个菌落接种至固体培养基的试管斜面上，即在斜面上划线，则斜面上的菌群就是单个细胞产生的后代。制成斜面培养基是为了 ___________________________________________ ，且斜面密闭效果比平面的好很多, 不容易进入杂 菌, 同时能用来做纯细菌的 _____________________ 。但斜面过长就会使棉塞沾上培养基而造成污染，所以使培养基形成 的斜面的长度不超过试管总长的___________________ 。后者的具体操作是：将培养的菌液稀释成10-5 —10-7 倍。（举例 说明如何稀释10 倍？___________________________________________________ 取 _________ 稀释倍数不同的菌液，加在 培养皿的固体培养基上，用 ____________ （该器具的灭菌方法_____________________________________________________ 涂布在培养基的平面上，然后进行培养。在某个稀释度下，可培养得到不连续的菌落，通常以每个培养皿中有 ___________ 个以内的单菌落最为合适。这两种细菌的分离方法的优缺点是？____________________________________________ 9、写出消毒和灭菌的区别__________________________________________________________________________ 10、灭菌或消毒的常用方法有: ___________________________________________________________________________ ， 不同的器具应选择合适的方法灭菌。接种环等金属应选用的灭菌方法是： _________________________ ，操作者的手应选用的消毒方法是：__________________ ，培养基应选用的灭菌方法是： ________________________ ，若培养基中有葡萄糖，则
章末综合测评(一) (时间：45分钟满分：100分) 一、选择题(每小题5分，共60分) 1．将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是( ) A．在大肠杆菌的质粒连接人生长激素的基因时，需用同一种限制性核酸内切酶 B．大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异不可以遗传 C．大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等 D．生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶 【解析】在大肠杆菌的质粒连接人生长激素的基因时，应用同一种限制性核酸内切酶切割，这样才能产生相同的粘性末端，A项正确；通过转基因技术让大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异，其原理是基因重组，是可遗传的变异，B项错误；质粒是小型的环状DNA 分子，其结构中没有尿嘧啶，C项错误；基因在转录时需要的酶是解旋酶和RNA聚合酶，D 项错误。 【答案】 A 2．下列实践活动包含基因工程技术的是( ) A．水稻F1花药经培养和染色体加倍，获得基因型纯合新品种 B．抗虫小麦与矮秆小麦杂交，通过基因重组获得抗虫矮秆小麦 C．将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞，经组织培养获得抗病植株 D．用射线照射大豆使其基因结构发生改变，获得种子性状发生变异的大豆 【解析】A项属于单倍体育种，原理是染色体变异；B项属于杂交育种，原理是基因重组；C项属于基因工程，原理是基因重组；D项属于诱变育种，原理是基因突变。选C。 【答案】 C 3．下列有关基因工程操作工具——载体的叙述错误的是( ) A．质粒为常见的载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有 B．作为基因工程的载体，标记基因不可或缺 C．目的基因插入载体时，有特定的插入位点 D．构建重组DNA分子时需DNA连接酶和限制性核酸内切酶等 【解析】病毒无细胞结构，没有质粒。 【答案】 A 4．利用苏云金芽孢杆菌的抗虫基因培育的抗虫棉是否成功，最好检测( ) A．是否有抗生素产生 B．是否有目的基因表达 C．是否有抗虫的性状出现
第9课时动物的克隆(二) 目标导航 1.简述单克隆抗体的制备过程。2.概述动物细胞的全能性。3.理解动物的克隆繁殖。 一、杂交瘤技术和单克隆抗体的制备 1．杂交瘤技术制备单克隆抗体的方法 (1)用外界抗原刺激动物(如小鼠)，使其发生免疫反应，使____________产生抗体。 (2)利用____________或____________等作介导，使经免疫的动物的脾细胞与可以无限传代的____________融合。 (3)经过筛选、克隆培养，获得来自单一细胞的既能________________、又能____________的杂交瘤细胞克隆。 2．杂交瘤技术制备单克隆抗体的最大优点：可以从________________________的抗原混合物中获得单抗。 二、动物细胞全能性的表现程度 1．高等动物细胞 (1)受精卵：由两性配子结合而成的受精卵具有____________________________的潜在能力，完整的个体就是以其为基础发育而成的。因此受精卵具有全能性，且最高。 (2)多能细胞：______________________________________________________________，这样的细胞称为多能细胞。 (3)单能细胞：有的细胞____________________，这样的细胞称为单能细胞。 2．低等动物细胞 低等动物细胞的全能性一般________________。 三、动物难以克隆的根本原因 动物细胞____________，基因组中的基因活动________，差异性表达程度太高。 四、细胞核移植实验和动物的克隆繁殖 1．概念：核移植就是 __________________________________________________________________________。 2．种类：(1)____________________(易)；(2)____________________(难)。 3．过程(以克隆羊“多莉”为例) (1)将苏格兰黑面母羊(A)的卵细胞的核吸出，取出芬兰白面母羊(B)的乳腺上皮细胞的核与A羊的去核卵细胞融合，形成重组细胞；(2)促使重组细胞分裂，发育成早期胚胎；(3)当胚胎发育到一定程度时，将其植入另一只苏格兰黑面母羊(C)的子宫中，由C羊孕育并产下克隆羊“多莉”。
实验2 分离以尿素为氮源的微生物 【学习目标】 1.使用专一的培养基（含有尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）。 2.利用指示剂颜色的变化检知酶（脲酶）所催化的反应。 【教学重点】 对土样的选取和选择培养基的配置 【教学难点】 选择培养基的配置 【知识链接】 1.培养基一般都含有、、、四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对、以及的要求。 2.培养基的分类：按照物理性质可以分为、、；按照化学性质分为和；按照用途分为和。 3.尿素可以为农作物提供肥，但是只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。 4.以土壤中能分解尿素的细菌为研究对象，要达到的两个主要目的是： （1）；（2）。 【导学过程】 （一）筛选菌株 1.原理：人为提供有利于生长的条件（包括等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 2.方法：选择培养基 定义：在微生物学中，将允许的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 配制的依据： ①在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，加入可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。 ②培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏源时，可以分离固氮微生物。 ③当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。 ④改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在环境
中培养只能得到耐高温的微生物。 讨论1：怎样寻找耐高温的酶呢？ 讨论2.如何找到能够分解石油的细菌？ （二）设置对照 设置对照的主要目的 对照试验的定义： （三）实验设计 实验设计包括，所需、、用具和药品，具体的以及时间安排等的综合考虑和安排。 （1）土壤取样 从富含有机物、潮湿、pH≈ 的土壤中取样。铲去，在距地表约cm的土壤层取样。（2）制备培养基 准备牛肉膏蛋白胨培养基和用作为氮源的选择培养基。牛肉膏蛋白胨培养基作为，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。 （3）微生物的培养与观察 将土样以1、10-1、10-2……依次等比稀释至10-7稀释度，按照浓度从低到高的顺序涂布平板，（是否）更换移液管。对于不同的微生物要选择不同的稀释浓度，测定细菌一般选择，测定真菌一般选择，测定放线菌一般选择。注明培养基种类、培养日期以及平板培养样品的稀释度。将涂布好的培养皿放在℃温度下培养。随着培养时间的延长，会有不同的菌产生。比较牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。 讨论3.为什么分离不同的微生物需要不同的稀释浓度？ （四）操作提示 1.本实验中要注意那些无菌操作？ 2.在进行多组实验过程中，应注意做好标记，其目的是什么？应标记哪些内容？怎样操作更有利于实验的进行？ 3.如何对分离的菌种作进一步的鉴定？
（生物科技行业）浙科版生物选修三生物科技专题学分考试(含答案)
选修3《现代生物科技专题》学分考 班级姓名学号 壹．个．正确选项 壹、选择题：每小题只有 ．． 1．以下说法正确的是（） A．所有的限制酶只能识别同壹种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中唯壹的载体 C．载体必须具备的条件之壹是：具有多个限制酶切点，以便和外源基因连接D．基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复 2．不．属于质粒被选为基因载体的理由是（） A．能复制B．有多个限制酶切点 C．具有标记基因D．它是环状DNA 3．依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述，不．正确的是（） A．切断a处的酶为限制性核酸内切酶 B．连接a处的酶为DNA连接酶 C．切断b处的酶为解旋酶 D．切断b处的酶为限制性核酸内切酶 4．1976年，美国的H.Boyer教授首次将人的生长抑制素释放因子的基因转入大肠杆菌，且获得表达，这是人类第壹次获得的转基因生物，此文中的表达是指该基因在大肠杆菌（） A．能进行DNA复制B．能进行转录和翻译
C．能控制合成抑制生长素释放因子D．能合成人的生长激素 5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不．进行碱基互补配对的步骤是（） A．人工合成基因B．制备重组DNA分子 C．转化受体细胞D．目的基因的检测和表达 6．在烟草的叶片中含有大量的烟碱，当把烟草嫁接到番茄上时，烟草的叶就不含烟碱了。反之，嫁接到烟草上的番茄叶中却含有烟碱。这说明（） A．烟草根部能合成烟碱 B．烟草叶受番茄的影响，遗传性状发生改变 C．番茄叶受烟草的影响，遗传性状发生改变 D．只有依赖烟草根部吸收某种物质，烟草叶片才能合成烟碱 7．科学家常选用的细菌质粒往往带有壹个抗菌素抗性基因，该抗性基因的主要作用是（） A．提高受体细胞在自然环境中的耐热性B．有利于检测目的基因否导入受体细胞 C．增加质粒分子的相对分子质量D．便于和外源基因连接 8．人的糖蛋白必须经内质网和高尔基体加工合成。通过转基因技术，能够使人的糖蛋白基因得以表达的受体生物结构是（） A．大肠杆菌B．酵母菌C．T4噬菌体D．质粒DNA 9．随着转基因技术的发展，“基因污染”应运而生，关于基因污染的下列说法不正 ．．