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胶印常见问题分析与解决

胶印常见问题分析与解决
胶印常见问题分析与解决

第一节 胶印常见问题分析及解决

、胶印故障的形成

胶印故障大致分为机械故障、印刷工艺技术故障、材料引起的故障、操作环境和维护保养造成的故障及 电器故障等内容。

(一)、机械故障因素 印刷机械产生的故障最多。即使是新的胶印机,由于设计装配和安装调试中的某些缺陷,在工作中也

会 出现故障。一台胶印机由上万个零部件组成,各部件的制造加工精度极为重要,国产胶印机由于加工机件的 工作母机及操作技术的条件限制,一些零件达不到先进水平,也是造成机械故障的一个因素。

有的胶印机如主机中的齿轮、滚筒加工质量较好,但配套件技术性能差,也会给正常印刷带来麻烦。例 如有的胶印机水斗加

水配置的真空水箱,达不到真空要求,自动加水经常失灵,导致水斗和版面缺水,操作 者稍不注意,就会发生印品上脏糊版故障。

胶印机的安装和调试工作也很重要。许多工厂安装机器前做地脚基础时,忽略了地面强度和硬度问题。 现在中、高速的胶印

机对机器底座的水平要求极高:纵向允许水平误差不能超过

0.08/1000,横向水平误差不 能超过 0.04/1000 ,用机器底座下校正水平的底脚螺丝调节。如 J2108 型机底座下有 8 只校正螺丝,螺丝的触

地点垫 8cm 方铁,校正水平后,用螺帽扣紧底座,以防底脚螺丝自行走动,问题在于:现在机器的底座不着 地,而靠 8 只底脚螺丝支撑,因为下面要放油盘,不可能再用水泥填封,故要求地基表面强度较高,而说明 书上注明用 200 号水泥,实际改用 400 号水泥较好,并在地基上层轧钢筋,否则地脚螺丝触地点受震动后, 水泥容易损坏或开裂,机器失去水平。特别是滚筒轴颈、轴套磨损快,就会造成重影、杠子等印刷故障。

机器使用到一定年限以后,由于机件逐渐磨损,精度下降,就会出现各种故障。机件磨损的快慢,除了 保养不善的因素外,

还同机件使用的材质及加工制造工艺有关。例如胶木制做的进纸压球,容易磨损成椭圆 形,造成输纸歪斜故障。又如,受力不匀的万向轴转球和叉节, 磨损后会产生输纸停顿故障。压印咬牙轴摆 杆和滚球,会由于受力大而不均,使推拔销松动 、断裂、滚球轴承破碎,造成套印不准或设备事故。

滚筒表面也会磨损,例如进口罗兰四色机的压印滚筒,虽是由耐磨性较好的球墨铸铁制造,但在经常印 刷同一规格的产品

后,压印滚筒表面在纸边处会发生线状的磨损凹陷,以致再印刷尺寸较大的产品时,该处 的印迹便出现一条白杠,影响产品质量。

胶印机应经常进行清洁保养和加油工作, 方能正常工作。 如果保养不好, 加油不勤, 发生的故障就更多。 如有家工厂的

胶印机的滚枕上堆满了油墨、胶水干结污垢,合压过程中变成了“接触滚枕” ,硬把滚筒撑开, 造成滚筒轴颈和轴套严重磨损,印品上重影、杠子、油腻等故障同时发生;有的胶印机咬纸牙不清洗、不加 油,纸毛堆积、锈迹斑斑,单个咬纸牙锈蚀咬死,失去咬力,致使印件套印不准、 “剥皮”故障并发。

断油造成的机件磨损或咬死故障,在胶印厂中普遍存在。有的工厂虽有加油制度,但不落实到人,出了 机件断油咬死故障;

有的厂胶印机的凸轮旁磨下一堆铁粉也无人管;罩壳内的油管断裂或输油不到位等造成 的设备故障, 也是由于缺少检查而造成的。 总的来说, 设备保养不好, 制度不健全, 或虽有制度而执行不力, 是目前许多印刷故障产生的直接原因。

二)、工艺技术因素

胶印过程由于涉及到物理、 化学两方面内容, 对于掌握工艺和技术就有较高的要求, 操作人员的工艺、技术水平等问题,造成的胶印故障也较多。

1、胶印特性

胶印是利用油和水相斥的原理来进行印刷的。 在同一块印版上, 图文部分亲油疏水, 空白部分亲水疏油, 这是胶印不同于其他印刷的最明显之处,也是胶印工艺技术的关键。

在印版版面同时存在油墨和水的情况下,传输油墨的墨辊上接触到水,由于墨辊高速转动, 在机械力的 挤压作用下, 将水混入油墨中, 造成油墨乳化, 正常印刷中达到一个合理的乳化值。 故胶印实际上既利用油、 水相斥的原理,又利用油、水相溶乳化的特性。据国外实验资料介绍,胶印一般能正常印刷时,油墨的合理 乳化值,水约占20?25%,国内无仪器测定,全凭操作者的技术和经验来决定,这就包含着不稳定因素,也 就增加了产生故障的可能性。

胶印所用之水,并非纯水, PVA 版用水中含有磷、铬酸,对版面的腐蚀很大,既腐蚀版面的空白部分的

砂目,不断增生夫机盐层,同时又腐蚀图文部分的基漆,致使印版耐印率降低。 剂含有十多种化学

成分,属于微酸性的润湿剂,带有清洗作用,对印版的腐蚀性极微。 2、印刷压力 印刷压力也是工艺技术的一大基础。胶印因为是间接印刷,图象由印版滚筒转移到橡皮布上,进行第一 次压

印,橡皮滚筒受墨后,将印迹转移到承印物上,这是第二次压印,两次压印所需的压力是不同的,如何 达到“理想压力”的境界,要作出一番努力。一般胶印机,印版滚筒和橡皮滚筒之间的压力,约在 0.10mm 左右;橡皮滚筒和压印滚筒之间的压力,约在 0.20?0.25mm 左右。随着平整度较好的 PS 版和进口气垫橡皮

布的采用,印版滚筒和橡皮滚筒之间的压力可更小些,如进口海德堡四色机在 0.05mm 即可印刷。

胶印使用的压力,是通过计算滚筒半径,测量中心距、测量并增减垫衬数来达到目的。胶印压力一定要 进行规范化、数据化控制,切不能随意增加垫衬,盲目增加压力,以致压力骤变

,滚筒表面线速度不等,接 往往由于管理人员、

PS 版用水中所加的润湿粉

触面摩擦力增加,甚至还会出现油腻、重影、墨杠等其它故障。因此,正确使用和调整好印刷压力,是印好

产品所需工艺技术的重要一环。

3、套印不准套印不准可分为纵向套印不准和横向套印不准两类。有一种说法,讲“纸张在传输过程中始终有机件牢

牢控制,就能保证套印准确。”实际上这句话是不全面的。例如压印咬牙轴或轴套磨损,它在传输纸张时虽然也能牢牢控制,但不能做到正确控制。这好比一个人两手捧着一只球,两臂伸直能捧牢,两臂弯屈也能捧牢,但两个不同姿势捧着的球,离开人体的距离、稳定性等是不一样的。所以应该说是“正确地牢牢控制,才能保证套印准确” 。

造成套印不准的原因很多,常见的有:纸张伸缩、输纸歪科、规矩定位不准、咬牙咬力不够、咬牙轴磨损、交接不符合要求、递纸牙传动部件磨损等。另外一些特殊因素也会造成套印不准,如橡皮布局部变形大,也能使图象局部套印不准;递纸牙轴、压印滚筒轴轴向窜动,会造成横向套印不准等。

4、色序安排以往单色机的印刷色序,总是顺色序黄、红、蓝、墨,这种色序安排,较大的困难是签准黄版、红版的

印刷样,特别是第一色黄版,关系到印刷品的色彩再现和复制效果。若黄版印得太深,印出人物的肤色没有生机感,房屋象古庙一样陈旧,使人难以接受;若黄版印得太淡,复制出的画面干瘪无光亮,色调偏向蓝紫,也不好看。黄版签样偏色,主要原因有两个:一是人眼的视网膜辩色细胞,对黄色的分辨能力最低;二是人们对纸张的吸油性不甚了解,缺少仪器检测,大小一样掌握,往往造成太深、太淡弊病。

例如:双色机的色序安排可将黄版和蓝版放在同一印刷流程,蓝版正好起到蓝玻璃的滤色作用,便于鉴定黄版的墨层厚度是否适宜。但双色机由于是湿叠湿印刷,往往在拖梢两只角上产生不规则的A、B 重影,

这就要求在工艺安排时,适当改变色序来解决。

四色以上的多色胶印机,由于三个色是湿叠湿印刷,所以色序是根据各色油墨粘度,从高到低安排的,否则会发生逆套印故障,从而出现墨色灰暗的混色弊病。有时前几色也会产生 A 、B 重影,色序要作必要的

调整。

(三)、印刷材料因素

胶印材料,主要有纸张、油墨、印版、橡皮布及垫衬物四大类。各种材料要符合胶印特性的印刷适性要求,否则就会出现各种印刷故障。

1、纸张因素

纸张的理化性质和技术指标,包括物理性能指标、光学性能指标、印刷性能指标、化学性能指标等。其中同胶印适性密切相关的有:紧度、抗拉毛强度、伸缩性、白度、吸收性、平滑度、光泽度、pH 值等。

纸张的紧度和抗拉毛强度值,印刷过程中受压分离时,油墨粘性及橡皮布表面水分产生的粘力作用,会产生掉毛、掉粉现象,致使印刷品上出现毛刺状斑点或实地花白故障。

纸张的伸缩性大小同纤维排列的方向有关,长丝(顺丝)方向的伸缩率小于纤维排列两侧方向的伸缩率,因而胶印惯用长丝方向同滚筒轴线平行的纸进行印刷,以尽量减少纸张受湿伸长造成的图像套印不准。

纸张的白度和平滑度,关系到所印图象的色彩鲜艳程度和饱和度,白度高的纸张印上彩色油墨后,投射到纸面上的光被纸张吸收少,反射多,故能较好地呈现油墨色彩的本来面貌。白度差的纸张有伙分,吸收投射光多,反射光少,印刷品图象灰暗。平滑度差的纸张表面粗糙,吸油性强,印迹干燥后无光泽,投射光被

吸收多,而且反射光呈漫反射,印刷品的视觉效果差,色彩灰暗不鲜亮。

吸油性的纸张在印迹尚未干燥结膜之前,大量吸收印迹油墨里的连结料,致使印迹表面结膜粗糙,产品无不泽。严重时,还会产生印迹粉化故障。

一般纸张的pH 值,在5.5 以上,呈微酸性,当pH 值下降到5.5 以下时,纸张酸度增加,这种纸张能破坏油墨的干燥性,产生印迹不干故障。

2、油墨因素

用来表现图象形像和色彩的油墨,是一种塑性流性,通过墨辊传输,涂布在印版上图文上,用经橡皮布,最后转印到纸面上,经过干燥结膜以后变成固体。胶印要求油墨印刷适性的主要指标是:固着性、干燥性、着色率、细度、粘度、流动度、以及耐酸、耐碱、耐水、耐光等可耐性。

随着胶印机速度的提高和多色机的出现,快固着油墨的固着性越来越重要。多色机的印刷速度大都在8000 张/小时以上,每印一张约用0.5秒(s)即要转入第二色印刷。若油墨的固着速度慢,前色印迹就会较多地滞留在后色橡皮布上,并逐步逆转移,使后色产生混色弊病。油墨印迹的干燥一般要在四小时以上,早期干燥油墨在胶辊上就结皮,给正常印刷和清洗工作带来麻烦。如果印在纸上的印迹干燥过头,产生晶化(玻璃化)现象,使后色印不上,相反,如果印迹不干,后色又不能印刷,降低了生产效率。

油墨的着色率越高越好,要求达到100%,但有的油墨着色率只能达到80?90%,胶印操作者为了要达到

色彩饱和程度,不得不采取提高印迹墨层厚度的办法来补救,但墨层印得太厚,容易造成产品背面粘脏和暗调区网点模糊。

一般油墨颗粒的直径约在7.5卩m,若按200线一成网点面积1613卩m2来计算,可容纳68颗颜料颗粒,按印刷适性要求15颗以上,已足足有余了。但在实际印刷中,国产油墨的抗聚性差,由于机器运转时墨辊互相摩擦,油墨的粘性增大,加上纸张上的粉质与纸毛混入,能使颗粒越来越粗,影响印刷品的清晰度和层次表现力。

3、印版因素

胶印印版目前已步入PS 版阶段,但仍有相当数量的工厂在使用蛋白版、PVA 版、多层金属版,近几年又发展了专印翻版书的氧化锌纸基版。这些印版的制版工艺各不相同,作为晒版工艺来说,晒制PS 版最为简单,PVA 版、多层金属版工艺较为复杂。

PVA 版显影、腐蚀、涂基漆操作全靠手工掌握,因而,印版的涂漆很难控制,致使印刷品的色彩还原经常达不到原稿要求。而且锌皮版磨砂目的粗细全凭经验控制。质量没有保证。有时锌皮的磨版次数多了,版材由原来的0.55mm降到0.45mm,而机台操作者也凭经验垫衬印版,往往垫衬太多或太少,等于改变了印版滚筒半径,也就改变了内图尺寸,使内图套印不准。

多层金属版的耐印率可达到几百万张,适于具有统一性且印刷量大的发票、税单、薄本、帐册等印刷。但在印刷过程中如遇纸张掉下的砂粒摩擦,往往将版面铬层轧碎后露铜,产生感脂上脏弊病,要消除镀铬层轧碎上脏非常麻烦,需先用黄胺酸钾除脏,然后再用专用设备通电镀铬,较费时间。

氧化锌纸基版成本低廉,虽制作工艺简单,但对环境温湿度、静电制版机的电流电压、纸版基本身的含水量、感墨性、墨粉的静电传导性等指标要求较高,往往某些环节稍有偏差,制出来的版子文字花白或满版脏污,坏版极多。

(四)、操作环境因素目前我国新增胶印机和新建胶印厂房不少,但由于管理者对胶印工艺认识不足,不能严格控制操作环境

的温、湿度。诸如纸张弓皱、伸缩造成的套印不准,以及纸张带静电影响印刷等问题长期以来难以彻底解决,不能正常生产和发挥其应有的效益,这里的操作环境是指,面积、高度、层次、晾纸占地、门窗与地面、车间座向和采光、工序安排、物流方向,以及风泵与水池和安全、防尘、防震、防火、取暖、通风、照明等内容。操作环境对印刷品质量有着重要的影响,良好的操作环境可减少故障的发生。

(五)、维护保养因素实践证明,许多机械故障除了机器本身设计、制造因素之外,维护保养不够,操作不当也是引起故障的

一个重要原因。同样一台设备如果保养得当,在没有意外事故的情况下,能使用十年左右不大修,反之可能少则三年,多则五年就印不了精细产品。保养时尽管耽误一些时间,影响一些产量,但从长远考虑是值得的。那种任务忙时少保养或不保养,不忙时再保养,实际是不负责任的态度;有的甚至采取开快车,拚设备的作法,则更不对。

保养不外乎按使用说明书上的要求,按部位分为日保养、周保养、月保养、季保养和半年保养等几种。其内容包括定期加油、换油、清洗部件、清理各部位过滤器;对各个电机、电器的保养,炭刷的调整和更换;水(墨)辊、滚筒压力各项数据的定期检测验证和检查各部件有无松动磨损;以及搞好机器的清洁卫生等项工作,

使其设备常期处于良好的运转状态中。以延长机器使用寿命,减少因保养不善引起的各种故障。

二、检查、排除胶印故障的主要方法胶印机操作者的最大苦恼,在于印刷过程中产生了故障而找不到产生故障的原因。往往为了套印不准、杠子、重影、纸绉、倒顺毛等故障,不得不停机校车,每次用掉两、三小时是常有的事,有时解决一个故障甚至要用几天时间,工时损失严重。据估计,胶印操作在日常生产中排除故障所用的时间,约占总工时5?10%,比铅印高出一倍以上。这对提高产品质量、缩短出版周期、增加经济效益都是不利的。为此,每一个胶印机的操作者,若能在解决故障方面努力提高技术水平,将能作出更大的贡献。

胶印机结构复杂,印刷工艺要求高,加上纸张、油墨的可变因素大,所以操作技术要提高。一般新工人

学会操作容易,每当出现弊病或故障以后,要及时找出原因并排除故障,这就比较难了。

胶印故障产生的因素较多,有时一种故障的产生有几十种可能性原因,如保入录寻找根源,而少走或不

走弯路,避免浪费不必要的有效工时,可采用下述几种方法。

(一)、分析法胶印故障产生以后,有多种找出产生故障原因的方法,而在各种方法中,分析法找出故障原因的速度最快。

所谓分析法,就是根据产生故障的时间、部位、条件、形状等四个方面进行分析的方法。将这四个方面的主观因素,逐项列出,然后进行综合分析,许多故障能迎刃而解。而在实际生产中,一些操作者碰到故障后缺乏这四个方面的全面分析,以致延长停机时间,造成不必要的工时损失。

举例说明如下:某胶印机在工作过程中,操作者发现纸张弓绉而变形,产品是杂志封面,反而两色,正

面四色。反面先印刷时纸张正常,反过来印正面,当印刷到第25令纸时,发现纸张拖梢有50mm长的弓绉现

象,停机后,经过有经验的人用分析法对各种可能因素进行分析,初步有了结论:

1、故障是刚刚产生,说明现在有新的因素导致弓绉。

2、部位在纸张的拖梢,有可能是机器因素,也有可能是纸张的因素。

3、从纸绉的形状仅50mm 多长来看,不可能是机械故障所致。

4、再从产生50mm 多长弓绉的纸张条件分析,一般在“荷叶边”的情况下才有可能,但直观纸张非常平整,不可能产生弓绉的。

这样分析后,否定了机器因素和纸张因素,便集中到一个为什么刚刚产生的问题上来,使人马上想到背面印迹堆沾压印滚筒上的可能性。因为背面印过两色的印件,常因印迹尚未干透而逐渐堆积在压印滚筒表面,这种油墨堆积物既不规则又能越堆越厚,等于在不规则地逐渐增加橡皮滚筒和压印滚筒之间的压力,致使纸张在高低不平的平面上受压,于是就产生了拖梢的弓绉故障。经查看压印滚筒,确系墨迹堆积。清洗后再印刷时这个故障就没有了,前后用了十多分钟。

当然有的故障比较复杂,仅用分析法还不能解决问题,须配合使用检测法和试验法。

(二)、检测法所谓检测法是利用放大镜、千分卡、吸铁百分表、同径仪、振动示波仪、密度仪等工具和检测仪器,对故障进行观察,对机件进行检查和测量,从而找出故障的原因来。常使用检测法来查找杠子、重影、网点空虚等故障。

检测法解决故障所需的时间比分析法长得多,一般在采用检测法之前,尽量先用分析法分析,然后集中

一两点进行必要的检测,查找故障产生的原因。

例如:印刷品上的网点产生虚毛弊病,就整个画面而言,传动侧那一端网点空虚不实,而操纵侧那端网点却完整结实。类似这样的毛病,如何进行解决?

经分析可以知道:造成这类故障的主要原因有两个方面:第一可能是输墨故障,版面图文没有上足墨量:第二可能是压力故障,某个滚筒的调压器自行走动,压力消失。

输墨故障的因素包括:版面的一端水分太大;着墨辊的一端在版面的压力轻;着墨辊的一端同串墨辊之间的压力太小;着墨辊表面老化、龟裂等。

压力故障的因素又包括:印版滚筒和橡皮滚筒之间的压力消失;橡皮滚筒和压印滚筒之间压力消失等。检测法应先易后难地进行,因为版面水分太大,机器运转时在灯光下一看便知,先排除了这个因素,然后检查着墨辊同版面和串墨辊之间的压力,使之符合两端压力一致的要求。若着墨辊表面老化、龟裂,则换上新的。墨辊部分正常了,故障仍未解决,再检查滚筒之间的压力,可用电工用熔断丝(20 号保险丝)和千分卡轧测滚枕间隙,不用卸下印版和橡皮布,在滚筒的空档处合压轧测,若滚枕间隙超过说明书规定的数值,则调整调压器,使滚枕两端间隙都符合说明书上的要求,即可排除故障。

(三)、试验法试验法即通常所说的“试试看” 。一些没有经验的新工人和不具备综合分析能力的人往往采用此法。试验法耗时长,容易走弯路,给生产带来一定的损失。但一旦取得成功,操作者不仅积累了经验,而且也提高了技术。

试验法通常对使用新的纸张、油墨、版材等较为有效。但有时印刷过程中出现的常见故障,是新工人缺乏经验所致,也把它看成新问题去作试验,这样,往往把简单的问题搞得复杂化,浪费了许多工时。

例如:一端走不到位的套印不准,而且不准在2mm 左右,这种故障的原因或者是输纸歪斜该端走不到位,或者是印刷

80g/m2以上较硬的纸张从前规中弹出来。而一些操作者去校正前规、咬牙压力、交接关系,花费了许多时间,人也搞得很疲劳,结果故障仍未排除。因此提倡在印刷过程中出现故障后,来用商量的办法去寻找故障原因,新工人尤其要同技术较高的中、老年工人商量,这样才能较快地排除故障,既有利于提高产品质量,又学到了排除故障的技术,提高了操作水平。

总之,对于胶印生产中碰到的各种故障,提倡用分析法和检测法去找出故障的产生原因。碰到复杂的故障,要综合使用分析法和检测法,从而又快又好地去排除各种故障,达到提高产品质量和增加有效工时的目的。

三、机件异常声音的判断作为胶印机操作的熟练技工,要在日常生产中练就耳朵的听觉技能。因为胶印机的零件很多,各种零件在运转中发出的声音,都有固定的音色和节拍,操作者就得去辨别哪个零件发出的声音变了样,从而发现问题。听觉技能对于保证设备的安全运转特别重要,因为近代胶印机的大部分组件都封闭在罩壳内,眼睛看不见,手也摸不着,唯一能被人感觉到的,是它在运转中发出的声音,这就要求在平时的工作中,留心机件正常时发出的声音,熟听清记。一般操作者,起码要求是做到“闻声查病” ,便若停留在这个阶段,显然是不够的,真正有本领的操作者,要力求做到“闻声知病” 。这“闻声知病”是一项了不起的技能,连应知应会的条文中也无法订进去。下述为作者在实践中的一些粗略体会。

(一)、机罩外的部件在工作不正常时发出的异声

1、J2108、J2203、J2201 型胶印机在反点时,有时会发出“吱--啪哒”的声音,“吱”声比较尖厉,“啪哒”声较响却似乎不大整齐。这是摆动牙牙尖碰压印滚筒空档边发出的声音。或者是收纸咬牙牙尖碰压印滚筒空档边的声音。因牙尖尖锐,反点时刮着滚筒空档边滑动,必然发出尖厉的“吱”声来,闭牙时的“啪哒” 声不大整齐,这是因为牙尖有长短,短的先闭牙,长的刮着空档边慢闭牙,所以“啪哒”声不会整齐。

摆动牙尖碰压印滚筒空档边,可调大凸轮的位置或将滚子加大直径解决;收纸牙尖碰压印滚筒空档边,可整体调收纸牙排的

运行时间来解决。

2、滚筒合压后运转时发出“嘭、嘭”的声音,一听便知该机使用的压力太大了。有时发出“咯、咯、咯”的响声,是印版没有拉紧或破碎了。前者需减少滚筒间的压力,后者需拉紧或换上新印版。

3、纸堆装满纸开印时,输纸机发出尖厉的同每张纸一样有间歇的“吱--吱--”声音,这是小挡纸板(闯齐)

碰到了传纸辊。将中间的固脚螺丝松一下,让固脚往下沉一点就能解决。

4、纸堆自升上升吸铁“嗒、嗒、嗒”地连续响个不停而纸堆不上升,这是连续吸铁芯子的销子断掉或将要滑出了,应立即

停机将连接弄好。

5、印刷过程中,每印一张纸便发出一次“突-突-突”的声音,这说明某根水、墨辊在印版上的压力太大了。因为着墨辊和着水辊都是橡胶制成的,故发出的声音比较沉闷。要检查一下是哪一根?调节螺丝有否走动? 然后调节好。

6、来自机器的收纸部位下面的“嚓、嚓、嚓”的声音,这是由于收纸链条太长,转弯时牙排的甩力在导轨上产生的,应适

当收紧两边的收纸链条。

7、收纸堆空台板上升太高,顶撞了收纸吸风杆,吸风轮会发出“吱音-- 吱音”的响声,可将吸风眼固脚

向下移动一些,声音应就会消失。

以上是常听见的异音和故障排除方法。

二)、机罩内部零件发出的声音

1、机罩内部零件,最容易损坏的是滚珠轴承,尤以传动侧较多,如摆动大凸轮上的滚子、下套传动部分的过桥齿轮等,都装有滚珠轴承。齿轮上的滚珠轴承损坏后,齿轮在运转中会发出“轰轰轰”的声音,这主要是齿轮啮合不正常,齿侧过量摩擦发出的,一般还伴有"轰轰轰”的声音。当发现上述这些声音后,应打开罩壳作进一步的检查。有时打开罩壳后也一时难以确定是哪个部件,这时可用“听诊法”来确定之,具体方法是:用一把长柄螺丝刀,刀口接触机件,刀柄放在耳旁听,哪一个机件有问题,经刀柄传入耳朵的声音

就会异样。用这种“听诊法”,确“症”的比例可说是百分之百,能减少许多不必要的重复拆装的麻烦。这种“听诊法”还能应用

到确“症”其它机件如电机的异声故障上。

2、机器突然停车,可确认为硬质螺丝等零部件脱落,而输纸部位的安全保险装置失灵造成的“闷车”故障。如机器逐渐停车,一般为多张纸进入滚筒之间或滚筒轴套等主要部位缺油造成的停机。当以多方查找没有任何障碍物时,可拆开机罩用手逐一摸一摸轴套等部位,发现有烫手或发热部位,即可确认是该部位缺油

焊死而引起的。轴套里进入杂物引起的轴套研磨焊死,在现代胶印机上除人工加油部位外,一般是不存在的,

因为自动润滑机构都有多层过滤器和过滤网。但个别输油管断裂,堵塞现象引起的缺油停车故障,也时有发生。

当出现机器突然停车故障时,操作人员应立即关闭主电机电源,以防出现烧坏电机等不必要损失。如果发现橡皮布滑出一道

长口,而并没有停机,即说明滚筒间轧入零件等物,从滚筒空档处滑落掉到机器坑里,应立即停机检查原因。

建议:一些印刷上的问题是根本性的问题,例如机器、物料、厂房环境,若不认真解决,是没有改进可言的,巧妇难为无米

炊,多么好的工作人员也不能变魔术。另一个非根本性的问题是管理人员和工作的观念,

沟通和态度上的改变。管理人员和工作人员应持续接受教育,成立有效沟通机制,现代管理称为全面管理,鼓励由基层开始找出问

题的成因,将问题及解决办法逐层向上传达,管理人员则以科学方法分析原因及检讨解决办法的有效性,及加强讨论以期达致最佳

效果。最后当然要得到最高管理层的支持,例如提议一些资本性的建议加厂房恒温调温,必须一次资本投资,若不获接纳,所有问

题仍必存在,无法真正解决问题。

四、胶印过程中的常见问题与处理

(一)、套印不准

套印不准示意图如下:

1、轴向(来去)不准(拉纸不准)

(1 )、拉不到和拉过头。

(2 )、推不到和推过头。

2、周向(上下)不准(前规不准)

(1)、走不到。

(2)、走过头。

3、局部不准

4、正反面套印不准

5、间隔性套印不准

套印不准有多种情况,其原因也十分复杂,比较简捷的方法是通过树状图(鱼刺图)来醒目地提示我们, 是比较通常的做法,见下图。

如何解决因设备及其他问题产生的套印问题? 建议:1用较好的纸张;2、用较好的油墨;

添加剂;6、用有质量保证的化工原料(水槽液等) 好,

勤清洗及维修;9、加强教育工作人员,使真正认识问题所

在;鼓励他们研究及提出改善意见。

(二)、糊版

由于目前有水平版印刷几乎都用 PS 版,因此这里所指的印版均指 PS 版(如果没有特别指明的话)。

1、 瞎眼字

字号小、而笔画又多的字,其笔画多的空白处容易糊并且分不清笔画,被称为瞎眼字。它分为:

(1 )、新版一上墨就有的瞎眼字,这种脏版有两种可能性:

① 新版上字号小、而笔画又多的字,笔画之间有残留的亲油的感光胶膜,

造成新版一上墨就有的瞎眼字, 这一般通过修版笔来修正或者重新晒版来解决。

② 新版空白部分没问题,只是新版上墨时,笔划之间没有润湿液来保护,造成新版一上墨就有的瞎眼字(字

糊并了)。这要及时用润湿液、阿拉伯树胶液或

PS 版洁版膏处理之。 (2)、新版印刷一段时间后才有的瞎眼字,一般是该处给水过少或者油墨过于稀薄造成笔画多的地方成 为瞎眼字。这要及

时调整供水量和印刷油墨的流变性,并用 PS 版洁版膏处理该处。 2、 脏版。

又称为油腻、起脏、油脏、挂脏、龌龊等,即印版空白部分着了墨,这可以是局部脏版、也可以是全面 脏版。根据脏版在印刷过程中发生的时段可分为:

(1 )、新版一上墨就有的脏(版)。这种脏版有两种可能:

① 新版空白部分有残留的亲油的感光胶膜,造成新版一上墨就有的脏。这要用专用的 PS 版修版膏或PS 版修版笔来清除之,但是使用时务必注意,千万不能把它涂在图文上,因为它对图文感光膜层有很强的清除

作用。

② 新版空白部分本身并没问题,只是新版上墨时,空白部分没有润湿液来保护,造成新版一上墨就有的 脏。因此新版上墨时,空白部分应有适度的润湿液来保护之。

(2)、新版印刷一段时间后才有的脏版,一般是该处给水过少或者润湿液组分不妥或者该处的砂目已基 本磨损所致。对策是:对于前两种应该及时调整供水量以及润湿液的组分,

起脏的版面要用 PS 版洁版膏清洁 之。对于最后一种必须及时更换印版。

(三)、浮脏

所谓浮脏是由于印刷的油墨内聚力偏小, 印刷时油墨乳化值偏大(造成印刷的油墨内聚力更加偏小 ),致使

飘浮在空白部分水膜上的细小墨点无法被着墨辊收清而造成的。

因此,这种脏版在版面上没有固定的起脏点。 对策是:加入适量 0号调墨油或燥油来提高油墨的内聚力,或者换上内聚力足够的新墨并适当减小版面供水 量。

(四)、花版

所谓花版是指印版图文部分高调处的网点丢失。其原因通常是:润湿液组分不当;版面剩余墨层不足及

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3、用较好印刷版;

4、用较好的橡布布;

5、用较好的油墨 ;7、调节厂房温湿配合纸张之状态; 8、保持机器性能良

(免费共享)SDS-PEGA聚丙烯酰胺凝胶电泳常见问题及分析

常见问题及分析 1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH 环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压梯度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。 所以,pH对整个反应体系的影响是至关重要的,实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况,应首要考虑该因素。 2. 样品如何处理? 根据样品分离目的不同,主要有三种处理方法:还原SDS处理、非还原SDS处理、带有烷基化作用的还原SDS处理。 1) 还原SDS处理:在上样buffer中加入SDS和DTT(或Beta巯基乙醇)后,蛋白质构 象被解离,电荷被中和,形成SDS与蛋白相结合的分子,在电泳中,只根据分子量来分离。一般电泳均按这种方式处理,样品稀释适当浓度,加入上样Buffer,离心,沸水煮5min,再离心加样。 2) 带有烷基化作用的还原SDS处理:碘乙酸胺的烷基化作用可以很好的并经久牢固的保 护SH基团,得到较窄的谱带;另碘乙酸胺可捕集过量的DTT,而防止银染时的纹理现象。100ul样品缓冲液中10ul 20%的碘乙酸胺,并在室温保温30min。 3) 非还原SDS处理:生理体液、血清、尿素等样品,一般只用1%SDS沸水中煮3min, 未加还原剂,因而蛋白折叠未被破坏,不可作为测定分子量来使用。 3. SDS-PAGE电泳凝胶中各主要成分的作用? 聚丙烯酰胺的作用:丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体,其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否,与促凝剂及环境密切相关; 制胶缓冲液:浓缩胶选择pH6.7,分离胶选择pH8.9,选择tris-HCL系统,TEMED 与AP:AP提供自由基,TEMED是催化剂,催化自由基引起的聚合反应进行;十二烷基磺酸钠(SDS):阴离子去污剂,作用有四:去蛋白质电荷、解离蛋白质之间的氢键、取消蛋白分子内的疏水作用、去多肽折叠。 4. 提高SDS-PAGE电泳分辨率的途径? 聚丙烯酰胺的充分聚合,可提高凝胶的分辨率。建议做法:待凝胶在室温凝固后,可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或4度冰箱放置,前者易导致凝固不充分,后者可导致SDS结晶。一般凝胶可在室温下保存4天,SDS可水解聚丙烯酰胺。 一般常用的有氨基黑、考马斯亮蓝、银染色三种染料,不同染料又各自不同的染色方法,具体可参照郭尧君编著的《蛋白质电泳技术手册》P82-103。

DNA合成常见问题解答

DNA合成常见问题解答 1.DNA合成粗产物中含有什么杂质 DNA合成仪合成的粗产物经过浓氨水氨解以后,其中除了含有所需的目的DNA片段(n)以外,还含有合成反应过程中产生的目的片段短的失败片段(n-1,n-2,…)以及脱保护基团产生的铵盐。需要通过纯化去除短片段、通过脱盐去除盐分。 2.如何进行合成产物的纯化 目前公认和大多采用的DNA粗产物后处理方式有4种: A) C18柱脱盐,这是一种活性炭柱子,有人称其为简易反相柱,它对DNA有特异性的吸附,可以被有机溶解洗脱,但不会被水洗脱,所以能有效地去除盐分。但是它不能有效去除比目的片段短的小片段。实际上,它是一种脱盐的作用。这种方法处理的产物中虽然含有比目的片段少5' 端一个或两个或多个碱基的产物,却一般不会对普通PCR反应产生影响。但是对于需要用于测序、用于克隆的引物不能使用这个级别,以免后患无穷。 B) OPC柱纯化,OPC柱中装有对Dmt具有亲和力的树脂,合成DNA片段时保留5' 端最后一个碱基上的Dmt,所有合成产物吸附在OPC柱上以后,用稀的有机溶剂洗柱,带有Dmt 的片段吸附能力强,不易被洗脱,不带有Dmt的片段吸附能力弱, 被洗脱。然后用三氟乙酸TFA或三氯乙酸TCA脱去Dmt基团,再用浓一点的有机溶剂洗脱DNA这种方法的优点是快速,简易。但是其专一性吸附Dmt能力有限, 不免仍然有短片段带入的可能,而且负载量小。特别是对长于25 碱基以上的片段纯化效果不好。 C) HPLC纯化,这是国外厂家常常使用的办法。它是依据不同大小的片段带有的净 电荷多少来分离产物的。合成粗产物中不同长度的DNA片段决定了它带有不同的 净电荷,较长的片段带有高电荷比带电荷低的短片段在离子交换柱中流动得慢。 先将粗产物检测主峰位置,再增加加样量,回收主峰位置的部分。它的优点是自动化程度高、省人

公文写作中常见问题及解决办法

公文写作中常见问题及解决办法 今天主要想和大家从公文的文面结构、容易用错和写错的字、标题写作中一些常见问题的处理、公文结构层次序数的规范、数字运用的规范、字体和字数的规范、标点符号的运用、公文用印、主题词的提炼、版记标识等十个方面就公文写作中的常见问题和解决办法进行学习和探讨,目的在于进一步提高我们公文写作和处理的能力,促进公文写作和处理的进一步规范。 一、公文的文面结构主要有哪些要素? 公文的文面结构即公文格式问题,是公文规范性的重要体现。按照中共中央办公厅、国务院办公厅关于印发《党政机关公文处理工作条例》的通知(中办发[2012]14号)规定,由份号、密级和保密期限、紧急程度、发文机关标志、发文字号、签发人、标题、主送机关、正文、附件说明、成文日期、印章、附注、附件、抄送机关、引发机关和印发日期、页码,共18种要素组成。 主要的要素有八个方面:即版头、发文字号、标题、主送机关、正文、附件、发文机关(落款)、成文日期。 (一)版头 (1)“红头文件”。文件的首页上端,印有“×××文件”字

样的红色大字。政府公文版头下面有一道红线,党的公文在红线中间另加一红五星。 (2)“白头文件”。即不用版头的文件,一般用于印发领导人的讲话等文字材料。 (二)发文字号 由机关代字、年份、发文顺序号组成。 发文机关代字+〔年份〕+发文顺序号 机关代字是发文机关的简化代称,一经确定,不得随意改动。年份用公元纪年标记,使用阿拉伯数字,并用六角方括号括住。位置居中略下(纵向)或左下。顺序号,使用阿拉伯数字,如“58号”。写作“第58号”或“058号”均不规范。 (三)标题 由发文机关名称、事由和文种组成。 机关名称+(关于)事由+(的)文种 如:中共政协西安市委员会党组关于召开政协西安市第十三届委员会第一次会议有关问题的请示 政协西安市委员会办公厅关于报送《关于我市 节能减排工作情况调查报告》的函 (四)主送机关

DNA电泳常见问题分析

DNA电泳常见问题 凝胶电泳操作注意事项 1、琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移及荧光背景的强度,应有选择地使用。 2、凝胶的制备:凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致,溶化的凝胶应及时倒入板中,避免倒入前凝固结块。倒入板中的凝胶应避免出现气泡,以免影响电泳结果。 3、电泳缓冲液:为保持电泳所需的离子强度和pH,应经常更新电泳缓冲液。 4、样品加入量:一般情况下,0.5cm宽的梳子可加0.5μg的DNA量,加样量的多少依据加样孔的大小及DNA 中片段的数量和大小而定.当加样孔大时,样品上样量应相应加大,否则会造成条带浅甚至辨认不清;反之则应适当减少加样量,但是上样量过多会造成加样孔超载,从而导致拖尾或弥散,对于较大的DNA此现象更明显。 5、 DNA样品中盐浓度会影响DNA的迁移率,平行对照样品应使用同样的缓冲条件以消除这种影响。 6、 DNA迁移率取决于琼脂糖凝胶的浓度,迁移分子的形状及大小。采用不同浓度的凝胶有可能分辩范围广泛的DNA分子,制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度。小片段DNA的检测应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,以提高分辨率。 7.选择的实验材料要新鲜,处理时间不易过长。 8.在加入细胞裂解缓冲液前,细胞必须均匀分散,以减少DNA团块形成。 9. 提取的DNA不易溶解:不纯,含杂质较多;加溶解液太少使浓度过大。沉淀物太干燥,也将使溶解变得很困难。 10. 电泳检测时DNA成涂布状:操作不慎;污染核酸酶等。 11.分光光度分析DNA的A280/A260小于1.8;不纯,含有蛋白质等杂质。在这种情况下,应加入SDS至终浓度为0.5%,并重复步骤2~8。 12.酚/氯仿/异戊醇抽提后,其上清液太黏不易吸取:含高浓度的DNA,可加大抽提前缓冲液的量或减少所取组织的量 DNA电泳常见问题分析之一 1 请问配制聚丙烯酰胺凝胶电泳胶时,促凝的是TEMED还是过硫酸铵?胶聚时间很长如何解决? 过硫酸铵提供驱动丙烯酰胺和双丙烯酰胺聚合所需的自由基,而TEMED通过催化过硫酸铵形成自由基而加速它俩的聚合。胶聚合时间长可能是TEMED失效了,过硫酸铵固体时间过久也会失效的。 一个让PAGE胶很快聚合的方法: 不要先配AP(过硫酸铵)溶液,因为AP很容易变质。在保证TEMED和AP质量的情况下,每次配胶时,直接称一定量的AP粉剂溶入液体状态的PAGE中,这样可以保证AP的催化能力,而且可以多加一点。配25ml的PAGE胶,加0.03克AP粉剂,最后加入25ulTEMED,20分钟左右就可以凝固(当然这个时候拔梳子,会有少量未凝固的PAGE在孔里形成丝状干扰,使加的样品看起来不太漂亮,但一般不影响跑胶效果和条带的形状和位置)。 2 DNA电泳的MARKER怎么是扭曲的? 1、配制胶时的缓冲液需要和电泳缓冲液不是同时配制的.最好是同时配制.电泳时缓冲液高过液面1-2mm

PCR常见问题分析报告及对策

PCR常见问题分析及对策(无扩增产物、非特异性扩增、拖尾、假阳性) 问题1:无扩增产物 现象:正对照有条带,而样品则无 原因: 1.模板:含有抑制物,含量低 2.Buffer对样品不合适 3.引物设计不当或者发生降解 4.反应条件:退火温度太高,延伸时间太短 对策: 1.纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量 2.更换Buffer或调整浓度 3.重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新引物 4.降低退火温度、延长延伸时间 问题2:非特异性扩增 现象:条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带 原因: 1.引物特异性差 2.模板或引物浓度过高 3.酶量过多 4.Mg2+浓度偏高 5.退火温度偏低

6.循环次数过多 对策: 1.重新设计引物或者使用巢式PCR 2.适当降低模板或引物浓度 3.适当减少酶量 4.降低镁离子浓度 5.适当提高退火温度或使用二阶段温度法 6.减少循环次数 问题3:拖尾 现象:产物在凝胶上呈Smear状态。 原因: 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg 2+浓度偏高 6.循环次数过多 对策: 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP和镁离子的浓度 6.减少循环次数 问题4:假阳性 现象:空白对照出现目的扩增产物 原因: 靶序列或扩增产物

的交*污染 对策: 1.操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外; 2.除酶及不能耐高温的物质外,所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管 及加样枪头等均应一次性使用。 3.各种试剂最好先进行分装,然后低温贮存 PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及,④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。⑤模板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时,不出现扩增带,极有可能是标本的消化处理,模板核酸提取过程出了毛病,因而要配制有效而稳定的消化处理液,其程序亦应固定不宜随意更改。 酶失活:需更换新酶,或新旧两种酶同时使用,以分析是否因酶的活性丧失或不够而导致假阴性。需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。 引物:引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称,是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题,两条引物一条浓度高,一条浓度低,造成低效率的不对称扩增,对策为:①选定一个好的引物合成单位。②引物的浓度不仅要看OD值,更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳,一定要有引物条带出现,而且两引物带的亮度应大体一致,如一条引物有条带,一条引物无条带,此时做PCR有可能失败,应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高,一条亮度低,在稀释引物时要平衡其浓度。③引物应高浓度小量分装保存,防止多次冻融或长期放冰箱冷藏部分,导致引物变质降解失效。④引物设计不合理,如引物长度不够,引物之间形成二聚体等。 Mg2+浓度:Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特异性,浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。反应体积的改变:通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul,应用多大体积进行PCR扩增,是根据科研和临床检测不同目的而设定,在做小体积如20ul 后,再做大体积时,一定要模索条件,否则容易失败。 物理原因:变性对PCR扩增来说相当重要,如变性温度低,变性时间短,极有可能出现假阴性;退火温度过低,可致非特异性扩增而降低特异性扩增效率退火温度过高影响引物与模板的结合而降低PCR扩增效率。有时还有必要用标准的温度计,检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度,这也是PCR 失败的原因之一。 靶序列变异:如靶序列发生突变或缺失,影响引物与模板特异性结合,或因靶序列某段缺失使引物与模板失去互补序列,其PCR扩增是不会成功的。 假阳性 出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个基因组或大片段的交叉污染,导致假阳性。这种假阳性可用以下方法解决:①操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外。②除酶及不能耐高温的物质外,所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及样进枪头等均应一次性使用。③必要时,在加标本前,反应管和试剂用紫外线照射,以破坏存在的核酸。二是空气中的小片段核酸污染,这些小片段比靶序列短,但有一定的同源性。可互相拼接,与引物互补后,可扩增出PCR产物,而导致假阳性的产生,可用巢式PCR方法来减轻或消除。 出现非特异性扩增带 PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带的出现,其原因:一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关。其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非

印刷工艺流程

印刷工艺流程 【摘要】书籍印刷是用纸张及各种装帧材料、印装工艺将书籍设计物化成为具有物质形态的书籍的工艺过程。书籍印刷主要采用平版印刷方式,平版印刷的印版图文部分与空白部分几乎在同一平面上,印刷时,先由供水装置向印版的空白部分供水,然后由供墨装置向印版供墨,利用水墨不相溶原理,油墨只能供到印版的图文部分,再利用印刷压力,将印版上的油墨通过橡皮布转移到承印物上,完成印刷。书籍的整体设计及最终的形态、效果、质量,必须依赖于纸张材料印前制版、正式印刷、印后加工、装订成型等技术。本文对书籍印刷工艺流程进行了分析。 【关键词】印刷;书籍印刷;印刷流程 1 书籍纸张材料选择 印刷用纸种类较多,有新闻纸、凸版纸、胶版纸、铜版纸、轻涂纸等。 新闻纸也叫白报纸,具有吸墨性能好的特点,它是报刊的主要用纸,也可以用于印刷质量不高的期刊、一般读物等,适合于高速轮转机印刷。 凸版纸具有吸墨均匀、抗水性能强、不起毛等特点,它是印刷书籍、杂志的主要用纸,主要供凸版印刷机使用。 胶版纸具有伸缩性小和对油墨的吸收性均匀、抗水性能强等特点,主要供胶印印刷机或凸版印刷机印制较高级印刷品,如一些高级书籍、书籍封面、宣传画等。 铜版纸属于涂布纸,表面光泽度高、平滑性好,多用于印刷高档印刷品,如画册、商标等。轻涂纸是涂布量较低的涂布纸,主要用于印刷期刊杂志、产品广告等,适合于高速轮转机印刷。 目前,我国绝大多数书籍均采用胶版印刷,书籍印刷多选用胶版纸或轻涂纸为书籍内芯用纸,选用铜版纸为书籍封面用纸。 2 书籍的印前制版 印刷需要一个载体将书籍设计信息通过油墨转移到纸张上,印版就是用于传递油墨或其他黏附色料至承应物上的印刷图文载体。书籍印刷采用平版印刷方式,平版印版包括传统的PS 版、平凹版,以及感光型、感热型等CTP版,其中,传统型的PS型使用最多,其制作过程大致包括出片、拼版、晒版、打样等四个阶段。 1)出片:通过激光照排机,运用分色和网点技术,将书籍设计稿转换为分色胶片。胶片有阳图型胶片和阴图型胶片两种。胶片上图文信息部分不透光、空白部分透光的为阳图型胶片;胶片上图文信息部分透光、空白部分不透光的为阴图型胶片; 2)拼版:又称“装版”、“组版”。因为最终形态的书籍多为16开版面,而生产多用对开纸上对开印刷机进行印刷,如此就需要将多个16开的版面胶片拼在一个对开版面胶片上,然后用对开纸进行印刷,印刷完成后再将对开纸按一定顺序折成16开,得到16开的书籍大小。拼版可以采用人工拼版或电脑拼版,拼版时要根据折页顺序、书籍配页顺序、裁切等来排列胶片的位置; 3)晒版:是将拼好的胶片晒制成PS印版的过程。根据使用的胶片类型不同,PS版有阳图型PS版和阴图型PS版两种。阳图型PS版属于光分解型,是用阳图型胶片与版材感光层密接曝光,感光层见光部分分解,后用稀碱液显影而被溶解,露出铝版基,形成印版的空白部分;而未见光部分的感光层未发生变化,仍留在版面上,构成印版的印刷图文部分。阴图型PS版属于光聚合型,是用阴图型胶片与版材感光层密接曝光,感光层见光部分发生聚合,成为不溶于显影液的物质,形成印版的图文部分;而后用稀碱液显影,未见光部分溶于显影液,露出铝版基,形成印版的空白部分 4)打样:用晒制好的PS印版安装到打样机上印刷出几张印品,用于检查制版各工序的质

公文写作常见问题分析

一、标题常见问题分析 公文标题是公文内容的摄要,在发挥公文效能上起着举足轻重的作用。但受诸多因素的影响,公文标题时常出现一些毛病,现归纳为以下八个方面,并作粗浅分析。 (一)要素不全 完整的、规范的公文标题,一般应具备“三要素”,即发文机关名称、事由、文种,以标明由谁发文、为什么发文和用什文种发文。2012年7月1日起施行的《党政机关公文处理工作条例》作出明确规定:“公文标题应当准确简要地概括公文的主要内容(事由)并标明公文种类(文种),一般应当标明发文机关”。当然,特殊情况下,也可省略标题中的一至二个要素,但不可随意省略,要相对规范,否则,将毛病百出。 常见的病例有三种: 一是随意省略事由。如《××县人民政府决定》,由于省略事由,受文者看不出标题所反映的主要内容、事项和基本观点,不利于学习、贯彻、领会、落实文件精神。除一些非重要的、极其简短的通知、通告和特殊机关发出的特定公文外(如中华人民共和国国务院、司法部门发出的国务院“公告”、“主席令”、“布告”等),一般情况下不得省略事由。 二是随意省略发文机关。如:一份没有版头的文件标题《关于加强农村党支部建设的报告》,待上级看完文件后,才从落款处知道文件是哪个机关发出的,既不庄重,也不严肃,更不利于公文运转和办理。具有重大决策和事项的下行文不得省略发文机关;没有版头的下行文、上行文均不得省略发文机关,但有版头(发文机关标识)的,也可不标明发文机关。 三是随意省略文种。使受文者不得要领,失去公文的严肃性。如《××乡人民政府关于召开春耕生产会议的有关事宜》。 (二)乱用文种 主要表现在三个方面:

一是混用文种。如《全国人大常委会党组关于县乡换届选举问题的请示报告》,这里把“请示”、“报告”两个不同的文种混淆在一起使用,不论是已经废止的《国家行政机关公文处理办法》,还是自2012年7月1日起施行的《党政机关公文处理工作条例》,都没有“请示报告”这一文种,明显不妥。从该“请示报告”的内容看,应使用批转式“报告”这一文种。 二是错用文种。有的该用“请示”的,却用了“报告”,而该用“报告”的反而用的是“请示”;有的该用“函”的却用“通知”;有的把没列为文种的公文种类作为文种使用,如“条例”、“规定”、“办法”、“总结”、“计划”等,以上这些,都不可作为文种使用,不可直接行文。《党政机关公文处理工作条例》所确定的公文文种共有15种,决议、决定、命令(令)、公报、公告、通告、意见、通知、通报、报告、请示、批复、议案、函、纪要。除此之外,均不可直接行文,但可作为“印发”、“颁发”或“通知”的“附件”行文。 三是生造文种。如《关于调整工资的补充说明》、《关于机构改革中有关问题的解释》等,这里的“补充说明”、“解释”均不应作为文种使用,以上两个标题可修定为《××(发文机关)关于印发调整工资补充说明的通知》、《××(发文机关)关于印发机构改革中有关问题解释的通知》。还有的把“安排”、“要点”、“细则”这些既不是公文文种又不是应用文体种类的东西常常作为公文文种直接行文,是错误的。 (三)隶属不清 不该用“批转”的,用了“批转”;该用“批转”的却用了“印发”、“转发”,分不清三者之间的隶属关系和词性。如《××县政府办公室关于批转××市长在××会议上讲话的通知》,这里的“批转”使用不当,应该使用“印发”或“转发”。因为“批转”具有“批准转发”之意,是上级对下级报告的认同并转发下去贯彻落实的。下级对上级机关的文件和上级领导同志的讲话、批示等不可使用“批转”,否则将混淆了上下级的隶属关系。 (四)提炼不精。主要表现在标题冗长上。如《×××(发文机关)关于招收退休退职职工子女就业,进行合理安

琼脂糖凝胶电泳常见问题分析

琼脂糖凝胶电泳常见问题分析

DNA凝胶电泳简介 一、实验原理 DNA电泳是基因工程中最基本的技术,DNA制备及浓度测定、目的DNA片段的分离,重组子的酶切鉴定等均需要电泳完成。根据分离的DNA大小及类型的不同,DNA电泳主要分两类:

1、聚丙烯酰胺凝胶电泳适合分离1kb以下的片段,最高分辨率可达1bp,也用于分离寡核苷酸,在引物的纯化中也常用此中凝胶进行纯化,也称PAGE纯化。 2、琼脂糖凝胶电泳可分离的DNA片段大小因胶浓度的不同而异,胶浓度为0.5~0.6%的凝胶可以分离的DNA片段范围为20bp~50kb。电泳结果用溴化乙锭(EB)染色后可直接在紫外下观察,并且可观察的DNA条带浓度为纳克级,而且整个过程一般1小时即可完成。由于该方法操作的简便和快速,在基因工程中较常用。 二、琼脂糖凝胶 琼脂糖是从琼脂中分离得到,由1,3连接的吡喃型b-D-半乳糖和1,4连接的3,6脱水吡喃型阿a-L-半乳糖组成,形成相对分子量为104~105的长链。琼脂糖加热溶解后分子呈随机线团状分布,当温度降低时链间糖分子上的羟基通过氢键作用相连接,形成孔径结构,而随着琼脂糖浓度不同形成不同大小的孔径。表1给出了不同浓度凝胶对DNA片段的线性分离范围。 表1不同类型琼脂糖分离DNA片段大小的范围 由于琼脂糖凝胶是通过氢键的作用,因此过酸或过碱等破坏氢键形成的方法常用于凝胶的再溶化,象NaClO4能用于凝胶的裂解,一般的凝胶回收试剂盒利用的也是这一原理。 随着实验技术的发展,也针对不同用途开发了各种类型的琼脂糖凝胶:(1)低熔点琼脂糖凝胶,用于DNA片段的回收,且由于该种凝胶中无抑制酶,可在胶中进行酶切、连接等;(2)高熔点凝胶,可分离小于1kb的DNA片段,专用于PCR产物的分析;(3)快速凝胶,电泳速度比普通凝胶中快一倍,可节省实验时间;(4)适用于DNA大片段的分离。(5)其它类型。各生产商还开发很多类型的凝胶,可根据实验要求选择不同类型的,选择原则是考虑合适的机械强度和熔点。

引物的应用常识

引物的应用常识 引物的原理 引物是短的寡核苷酸片段,充当DNA复制的起点。因为几乎所有DNA聚合酶都不能从头合成,所以它们需要一个3’-羟基作为DNA合成的起始点。这个3’-羟基由相配的引物提供。在体内,由于DNA聚合酶的忠实性,不能从头合成DNA,因此只能由RNA聚合酶(称为引物酶)生成,采用RNA引物来延伸,在延伸过程中,RNA引物降解并由DNA取代。在体外PCR反应中所用到的DNA引物,是根据不同的要求及模板序列设计,然后用化学法人工合成的,与模板形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以继续链的延伸;对于大多数PCR反应,决定整个反应成功与否的最重要因素是引物的序列和质量。 1. 不同实验要求的引物选择 在开始设计引物之前,必须弄清以下几点: (1)明确PCR的目的(例如克隆、SNP检测、定量检测等) (2)确定样品材料(基因组DNA、RNA、微小RNA) (3)确定PCR的类型(普通的、定量PCR、RT-PCR、长片段PCR),在查找序列的时候还需要考虑可能存在的问题(如假基因等) 2.引物设计的重要因素 有一些不同的软件工具可用于引物设计和引物分析。引物设计的软件如Oligo 6.22 ,Premier 5.0,Primer Express 3。引物分析常用Primer 5,Oligo 6.22,Primer-Blast。目前生工生物给客户提供的引物设计服务引物用的是在线软件Primer 3 plus, ?引物长度和专一性 常见的引物长度为18-30个碱基。短的引物(≤15碱基)能非常高效地结合, 但是它们的专一性不够。较长的引物能提高专一性,然而退火效率低,从而导致PCR产量低下。 同时应避免编码单一序列和重复序列的引物。 ?平衡GC含量,避免GC-和AT-富集区域 引物的GC含量应介于40%~60%之间。应避免聚-(dC)-或聚(dG)-区域,因为它们会降低退火反应的专一性。聚-(dA)-和聚(dT)-也应避免,因为这样会形成不稳定的引物-模板复合物,从而降低扩增效率。 ?3’-序列 3’端为G-或C-核苷酸较好,因为能增加结合强度。同时它将提高PCR效率,因为引物-模板符合物的开放将达到最小。但是,超过3个G/C碱基将会具有负面效果,因为会 降低反应的专一性。 ?避免互补的引物序列

包装印刷工艺流程及工艺介绍

For personal use only in study and research; not for commercial use For personal use only in study and research; not for commercial use 包装印刷工艺流程及工艺介绍 精美的包装同时也离不开包装印刷,包装印刷是提高商品的附加值、增强商品竞争力、开拓市场的重要手段和途径。设计者应该了解必要的包装印刷工艺知识,使设计出的包装作品更加具有功能性和美观性。 1. 印刷工艺流程 在包装成型之前,需要经过一系列有序的印刷工作:

图01 为了提高印刷质量和生产效率,在印刷前,应注意查看设计稿有无多余内容;文字和线条是否完整;检查套版线、色标及各种印刷和裁切用线是否完整等。只有这样,才能提高生产效率,保证印刷的顺利完成。

图02 不同的包装材料会有不同的印刷工艺,由于纸品包装材料在实际生活中运用最广,所以下面以纸品包装材料印刷工艺为例,为大家阐述印刷工艺的相关知识。 2. 纸品包装印刷工艺 2.1.印刷方法 纸包装印刷的方法有很多种,方法不同,操作也不同,印出的效果也不同。传统使用的印刷方法主要分为以下四类: (1)凸版印刷 凸版印刷是指印版上的图文部分高于非图文部分,墨辊上的油墨只能转移到印版的图文部分,而非图文部分则没有油墨,从而完成印刷品的印刷。 (3)平版印刷 印版的图文部分和非图文部分保持表面相平,图文部分覆一层富有油脂的油膜,而非图文部分则吸收适当水分。上油墨时,图文部分排斥水分而吸收油墨,非图文部分因吸收了水分而形成抗墨作用。

公文写作中常见的问题

公文写作中常见的问题 一、文种使用不当 有的公文作者不了解或不会正确运用确切的文种,以致长期只使用通知、决定等二三个公文,其余文种一概不用;有的公告、通告、通报分不清,望文生义去应用;有的不知公文中报告与请示是两种不同的文种,经常混淆不清,使用时张冠李戴或干脆写成"请示报告";有的不知有命令(令)、批示函、会议纪要等公文,遇到该使用这些公文的场合则都用通知等公文去代替。 二、格式不规范 公文格式上存在的问题,主要有以下表现:(一)公文文头不规范;(二)标题冗长、混乱、残缺不全;(三)主送机关排列混乱;(四)结构层次序数混乱;(五)附件不符;(六)主送、抄送单位不正确。 三、行文规则混乱 (一)越级行文。 (二)多头行文。 (三)请示一文多事。 (四)党政不分。 四、提法不当 有的公文提出一些未经仔细推敲的方针、口号、任务,而这些方针、口号、任务又往往与党和国家在某一时期的工作方针相违背,从而造成一定的混乱。 五、名称表述混乱

公文中的人名、地名、单位等名称表述混乱主要有:一是同一名词在一篇 公文中数次出现时表述不一致。二是排名次序混乱。三是随意用简称。 六、时间表述含糊 (一)用时间代名词而不用具体日期。 (二)年份随意省略。 (三)年份不使用公元纪年。 七、用词不当 (一)词义误用。 (二)生造词语。 (三)词语使用不当。 (四)滥用模糊词语。 八、不符合语法 不少公文存在不合语法的现象,以致于造成理解上的歧义或错误。(一)成分残缺。 (二)成分多余。 (三)搭配不当。 (四)语序不当。 九、数字使用不统一 公文使用数字概念模糊,书写形式杂乱和不准确,主要有以下几种情况: (一)是数字概念不清楚。

PCR常见问题分析及对策

. PCR常见问题分析及对策(无扩增产物、非特异性扩增、拖尾、假阳性) 问题1:无扩增产物 现象:正对照有条带,而样品则无 原因: 1.模板:含有抑制物,含量低 2.Buffer对样品不合适 3.引物设计不当或者发生降解 4.反应条件:退火温度太高,延伸时间太短 对策: 1.纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量 2.更换Buffer或调整浓度 3.重新设计引物(避免链间二聚体和链内二级结构)或者换一管新引物 4.降低退火温度、延长延伸时间 问题2:非特异性扩增 现象:条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带 原因: 1.引物特异性差 2.模板或引物浓度过高 3.酶量过多 4.Mg2+浓度偏高 5.退火温度偏低

. 6.循环次数过多 对策: 1.重新设计引物或者使用巢式PCR 2.适当降低模板或引物浓度 3.适当减少酶量 4.降低镁离子浓度 5.适当提高退火温度或使用二阶段温度法 6.减少循环次数

问题3:拖尾 现象:产物在凝胶上呈Smear状态。 原因: 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg 2+浓度偏高 6.循环次数过多 对策: 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP和镁离子的浓度 6.减少循环次数 问题4:假阳性 现象:空白对照出现目的扩增产物 原因: 靶序列或扩增产物 的交*污染 对策: 1.操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外; 2.除酶及不能耐高温的物质外,所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管 及加样枪头等均应一次性使用。 3.各种试剂最好先进行分装,然后低温贮存 PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。

公文写作中常见错误

公文写作中常见错误和需要注意的事项 一、文字错误 1.法律法规和公文统用“其他”不用“其它”,相应用“他们” 不用“它们” 2.像的使用。根据新公布的《简化字总表》,象不再 是像的简 化字,仍然各司其职。 我们每一个同志都要像爱护自己的生命那 样;像浙江 --- 。 3.账与帐的使用。账用于货币和货物出入的记载 ,个人账户、挂 账、台账;帐专指布、纱、绸子等制成的遮蔽物。 4.法规和公文 解说明。 5.按照与遵照的用法:按照法律法规或文件等的规定或要求; 遵照上级或长辈的指示、教导等。 6.公布与发布的用法: 命令。相继制定和公布 于 的决定》。 7.制定与制订的用法: 规章制度,制订适用于方 案、规划、计划。 8.增长与增加的用法:增长一词后接百分比,增加一词后接具 体数量。地方财政收入由 1997 年的 1702 万元增加到 2002 年 的 5638 万元。增长幅度达 50% ,而不是增长速度达 50% 。 9.截止与截至的用法:截止到 2000 年或截至 2000 年,而不 是截止 2000 年。截止是不及物动词,后不跟宾语。 10 .议案和提案: 人大代表提出的是议案和建议, 政协委员提出 的是提案。 11.用词错误: 表示独一无二用“惟一”而不是“唯一” 用行政区域,不用行政辖区。 久禁不绝不是久禁不止。 富余劳动力不是富裕劳动力 社会各界不是社会各届,届表示次。 公文、出版物统一用“报道”不用“报导”。如:新闻报道;对 有关信息要慎重报道。 应有之义不是应有之意 凸显不是突显 磨炼不是磨练 明察暗访不是明查暗访 中“以上”和“以下”均含本数和本级,无须注 公布适用于行政法规, 发布适用于决定、 统计法》等法律法规。 市政府发布了 《关 制定适用于路线、方针、政策、法令、

电泳常见问题

Marker 参考见解:marker有时会出现这样的问题,应该是时间久了。新买时跑胶在点样孔没有,过一段时间就会在点样孔出现亮点。也可能是蛋白,有时DNA提的不纯含有蛋白时就会出现上样孔有条带的现象 琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的? 参考见解:DNA带模糊??: 1、DNA降解??避免核酸酶污染。 2、DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。 3、所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应<15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。 4、DNA样含盐过高??电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。 5、有蛋白污染??电泳前酚抽提去除蛋白。 6、DNA变性,?电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。 将从组织提取的DNA进琼行脂糖凝胶电泳,用的1.5%的胶加了EB,80V跑1小时,溴酚蓝已经跑到头了,在紫外灯观察什么带也没有,只见孔里面有橘红色的亮光。好象没跑出来,是怎么回事? 参考见解: 1、根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定。 2、紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。

3、最好加一个marker孔,尤其你第一次跑胶时。 4、电泳时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝的离孔距离和目的条带离孔距离。 怎样根据目测条带亮度来判断DNA浓度? 参考见解: 1、跑胶时候marker 可以加成定量marker,如1kb、100bp等marker,按说明书的量上样电泳,如加500ng量的DNA marker,电泳完毕后,就可将目的DNA条带和MARKER 条带的亮度做个大致的比较,找出两者最接近亮度的条带。因为marker的各条带都已知所含的DNA浓度(说明书中详细注明),因此根据条带的亮度、大小大致就可推测目的DNA的浓度。 2、在通过目测DNA浓度的时候,最好要把加样量设一个梯度,比如从0。5、2、4、6,因为,如果质粒的量很浓的话,通过简单的对一条条带的目测产生的结果误差是很大的或者利用marker(推荐DL 2000),再用软件做半定量分析。 DNA电泳的MARKER怎么是扭曲的? 参考见解: 1、配制胶时的缓冲液需要和电泳缓冲液不是同时配制的.最好是同时配制.电泳时缓冲液高过液面1-2mm即可。 2、电泳时电压过高,可以在电泳前15分钟用较低电压(3V/cm),等条带出孔后比较漂亮了.然后再调电压。 3、上样时尽量慢慢加样,等样品自然沉降后再加电压。 跑出的DNA带模糊? 参考见解: 1、DNA降解:避免核酸酶污染。 2、电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液。 3、所用电泳条件不合适:电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃;巨大DNA链电泳,温度应<15℃;核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。 4、DNA上样量过多:减少凝胶中DNA上样量。 5、DNA样含盐过高:电泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。 6、有蛋白污染:电泳前酚抽提去除蛋白。 7、DNA变性:电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。 有不规则DNA带迁移? 参考见解: 1、对于λ/Hind III片段cos位点复性:电泳前于65℃加热DNA 5分钟,然后在冰上冷却5分钟。 2、电泳条件不合适:电泳电压不超过20V/cm;温度<30℃;经常更换电泳缓冲液。 3、DNA变性:以20mM NaCl Buffer稀释DNA,电泳前勿加热。 跑出的DNA条带带弱或无DNA带? 参考见解: 1、DNA的上样量不够:增加DNA的上样量;聚丙烯酰胺凝胶电泳比琼脂糖电泳灵敏度稍高,上样量可适当降低。 2、DNA降解:避免DNA的核酸酶污染。

引物设计常见问题

引物设计常见问题与解答(二) 17. 长链引物为什么出错的几率非常高 答:引物合成时,每一步反应效率都不能达到100%,产生碱基插入,缺失,置换突变的因素客观条件都有一直存在。引物链越长,突变的频率累加起来就越高。研究人员总希望合成的引物万无一失,这种心情可以理解。但是犹如PCR扩增,不可能绝对保证扩增产物中没有突变,引物合成也不可能保证100%正确。要知道,引物合成中发生错误(非人为因素)的频率,比任何高保真高温聚合酶PCR扩增过程所产生的频率都要高。做引物合成,长链引物合成,您要有引物中部分引物可能有突变的思想准备。 18. 如果测序发现突变,该如何处理 答:对您遇到的困惑,我们表示同情。遇到这种情况,首先和我们取得联系,我们的生产人员会检查生产的原始记录,主要是核对合成序列是否和定单一致,我们在电脑中保留所有原始数据。如果确认引物合成序列没有输错,我们建议重新挑取克隆测序,您可能会找到正确克隆的。根据我们经验,40个碱基以下的引物,测1-2个克隆就可以了;40个以上的特别是用于全片段拼接合成的,就需要多测一些了。一般情况下,每个克隆突变的位点都不一样,提示正确的总是有的,就是如何找到它。您也可以要求我们将引物免费重合一次,不过重合的引物和第一次的引物一样,都可能含突变,不会因为重合的引物就减少您的遇到问题的几率。基因拼接过程中,如果发现一段区域突变点不多,就多测几个,否则就重合一下引物。 19. 如果测序发现引物突变,是否有补偿 答:没有。我们可以免费重合一次,没有其他任何补偿或赔偿,不承担其他连带责任。原因我们在前面已提到,化学合成效率不可能达到100%.您选择了化学合成引物,合成过程中一些副产品所带来的后果就可能不可避免的遇到。 20. 引物是经过PAGE纯化的,为什么还有碱基缺失或插入 答:理论上分析型PAGE变性电泳,可以区分引物之间一个碱基的差别。但是制备PAGE电泳,上样量都是非常大,电泳时的条带非常宽,带与带之间有重叠,分辨率已下降,电泳后割带回收目的引物时,很难说不割到差别仅几个碱基的引物。国内有一个不好的现象,PAGE纯化的引物,特别是长引物要的量都比较高,导致割的条带有时可能比较宽。建议:您如果减少OD数,引物遇到的问题可能就会少一些。 21. 为什么OPC或PAGE纯化的引物,再用HPLC鉴定纯度不高

公文常见错误分析及对策

公文常见错误分析及对策 公文写作 公文常见错误分析及对策 公文是公务文书的简称,是处理公务、管理事务的一种书面文字工具。其重要特点就是行文的规范化、制度化和标准化。对于公文格式,国家技术监督局制定了《国家行政机关公文格式》(GB/T9704—1999,以下简称《格式》),国务院办公厅制定了《国家行政机关公文处理办法》(2001年1月1日起施行,以下简称《办法》),中央办公厅制定了《中国共产党各级领导机关文件处理条例(试行)》(以下简称《条例》)。但是不少单位和部门制发文件,并没有严格按照规定、要求去做,而是各行其是,制发文件存在很大的随意性,造成公文格式的不规范,严重影响了公文的严肃性、公正性。更在一定程度上影响了公文的质量和效能,影响了政 府的行政效率,因此必须引起高度重视。 一、存在的问题 (一)文种使用乱。一是生造文种。把没列为文种的公文种类作为文种使用。《办法》所确定的公文文种共有13类14种,即:命名、令,决定,公告,通告,通知,通报,议案,报告,请示,批复,意见,函,会议纪要。除此之外,均不可直接行文,但可作为"印发"、"颁发"式"通知"的"附件"行文。例如,《关于××市区退休人员一次性缴纳医疗费分期缴费的具体操作规定》、《关于使用社会保障卡有关问题的说明》等,这里的"操作规定"、"说明"均不应作为文种使用,可以改成《××关于印发市区退休人员一次性缴纳医疗费分期缴费的具体操作规定的通知》、《××关于印发使用社会保障卡有关问题的说明的通知》,不能作为文种使用的还有"条例"、"规定"、"办法"、"总结"、"计划"等,有的甚至把"安排"、"要点"、"细则"这些既不是公文文种又不是应用文体种类的东西常常作为公文文种直接行文,都是错误的。

DNA电泳常见问题分析

D N A电泳常见问题分析The final revision was on November 23, 2020

DNA电泳常见问题 凝胶电泳操作注意事项 1、琼脂糖:不同厂家、不同批号的琼脂糖,其杂质含量不同,影响DNA的迁移及荧光背景的强度,应有选择地使用。 2、凝胶的制备:凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致,溶化的凝胶应及时倒入板中,避免倒入前凝固结块。倒入板中的凝胶应避免出现气泡,以免影响电泳结果。 3、电泳缓冲液:为保持电泳所需的离子强度和pH,应经常更新电泳缓冲液。 4、 样品加入量:一般情况下,宽的梳子可加μg的DNA量,加样量的多少依据加样孔的大小及DNA中片段的数量和大小而定.当加样孔大时,样品上样量应相应加大,否则会造成条带浅甚至辨认不清;反之则应适当减少加样量,但是上样量过多会造成加样孔超载,从而导致拖尾或弥散,对于较大的DNA此现象更明显。5、DNA样品中盐浓度会影响DNA的迁移率,平行对照样品应使用同样的缓冲条件以消除这种影响。6、DNA迁移率取决于琼脂糖凝胶的浓度,迁移分子的形状及大小。采用不同浓度的凝胶有可能分辩范围广泛的DNA分子,制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度。小片段DNA的检测应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,以提高分辨率。 7.选择的实验材料要新鲜,处理时间不易过长。 8.在加入细胞裂解缓冲液前,细胞必须均匀分散,以减少DNA团块形成。 9. 提取的DNA不易溶解:不纯,含杂质较多;加溶解液太少使浓度过大。沉淀物太干燥,也将使溶解变得很困难。 10. 电泳检测时DNA成涂布状:操作不慎;污染核酸酶等。

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