一、原子荧光分光光度计
技术参数
1、工作条件要求
1.1电源: 220V，50Hz
1.2温度: 15～35℃
1.3相对湿度: 10-75%
2、技术能力要求
2.1用途：用于食品卫生检验、环境样品检验、城市给排水检测、农产品检验、地质冶金检验、化妆品检验、土壤肥料饲料检验等样品中As、Sb、Bi、Hg、Se、Te、Sn、Ge、Pb、Zn、Cd元素的痕量分析。
2.2分析方法：非色散光学系统,进行两道元素同时测量
*2.2.1氢化物发生进样方式：双注射泵联合进样，蠕动泵主动排废
2.2.2检测能力：适用于As、Hg、Se、Pb、Ge、Sn、Te、Bi、Sb、Cd、Zn等十一种元素的痕量测定
2.2.3检测限(D.L.)：As、Pb、Se、Bi、Sn、Sb、Te、Hg≤0.01μg/L；Hg（冷原子测汞）、Cd≤0.001μg/L；Ge≤0.05μg/L;Zn≤1.0μg/L
*2.2.4相对标准偏差（RSD)：≤0.8%
2.2.5线性范围：≥三个数量级
*2.3光学光源系统：双光束、实时监控，脉冲恒流或集束脉冲供电，无色散光学系统，自识空心阴极灯
2.4气路设计（气路控制模块）：
2.4.1控制方式：质量流量控制器（MFC）
2.4.2连续可调：气体流量控制，气路自动保护装置，自动控制气路并可自动诊断，关机可自动切断气源
2.4.3气路控制：载气、屏蔽气流量分别自动控制（控制精度可达1ml/min）
*2.5双检测系统：高信噪比光电倍增管双检测系统
2.6内置式两个独立注射泵进样：一路进样品载流，一路进还原剂（自动配制标准曲线，高浓度自动稀释，自动清洗，单标自配标准曲线，在线智能提示，自动在线加载还原剂、掩蔽剂）
2.7 在线分析功能：自动炉高调节、自动负高压设置、自动气路设置、在线动态
调整空芯阴极灯、动态监视、开机自检、自动诊断、故障自动报警等功能
2.8 清洗监测功能：对样品测量进行全程监测，对测样前与清洗后的反应情况进行比较，自动判断流路是否清洗干净
*2.9灯位或通道要求：≥六灯位或四道同测（计算机控制自动变更元素灯，可同时预热多支元素灯，元素灯免调，即插即用）
2.10环保功能：采用有害元素捕集阱装置。
2.11稳定装置：汞灯稳定装置
2.12全自动进样器：≥150位极坐标（圆盘式）自动进样器
2.13件系统：Windows中文软件操作系统（系统自动诊断、自动样品测量、标准曲线测量、2.19多种报告格式、帮助系统，最佳仪器条件及样品预处理、标液配制等指南）
2.14 形态分析：升级配置形态分析前处理模块，可以测定As、Se、Hg、Sb的形态含量
2.15 固态汞检测能力：升级配置电热蒸发固体测汞装置，可以直接进样测试固、液、气三态样品。
*2.16 固体镉检测能力：升级配置电热蒸发固体测镉模块，样品无需消解，直接测试样品中的镉。
3、配置要求
3.1多灯位双道或四道顺序注射原子荧光光谱仪
3.2全自动进样器：160位及以上极坐标（圆盘式）自动进样器
3.3元素灯：As、Hg、Sb、Se
3.4进样针
3.5泵管
3.6中文工作站软件（含电子狗）
3.7标准附件工具
3.8电脑：主流商务电脑
3.9打印机：主流激光打印机
3.10氩气钢瓶（含气）及减压阀
二、全自动无机样品前处理平台（包含全自动消解仪+全自动萃取仪+ (无机)
全自动液体处理工作站+往复式水平震荡装置+翻转式振荡装置+视频监控设备）
（一）全自动消解仪
技术参数
1.1 加热模块
1)控温范围：室温～230℃
2)控温方式：智能PID控制；控温精度：±0.1℃
3)★样品位数：60位×50mL；环绕式石墨加热主体，表面喷涂特氟龙处理；
同时具有两个独立的30位石墨加热块，可设置不同温度消解不同样品
4)消解过程可实现20级以上程序升温；升温速率可设，利于消解控制
5)可使用手机或办公室电脑通过实验室局域网查看消解温度、消解时间等系统
状态和消解进程
1.2.全自动试剂添加系统
1)★试剂通道：9，可支持自动切换9种消解试剂
2)试剂添加速度：2mL/s，加液速度可调；加液精度：优于1%
3)试剂添加使用高精度蠕动泵，试剂输送管路均为PFA材质，所有通道均可安
全操作各种腐蚀性试剂（包括氢氟酸）
4)★XY轴全方位移动机械臂，机械臂传动丝杆，定位精准，无皮带耗材设计
具有超长的使用寿命
5)加液管倾斜设计，试剂沿消解管壁流下有效减少粉末样品在管壁的粘附，同
时避免试剂和样品喷溅
1.3 全自动升降振荡系统
1)★全自动振荡摇匀功能，通过机械马达振荡系统和消解管架实现消解试剂和
样品的混匀，整个混匀过程中样品与外部无接触，避免引入污染和样品间交叉污染；可同时对60个消解管进行混匀，工作效率更高。
2)振荡摇匀功率连续可调，振荡时间可设；多种摇匀模式可选
3)★双模块设计：两个模块可运行完全独立的消解程序，可实现独立升降、摇
匀、加酸、不同温度消解、赶酸、定容等
4)自动升降功能，在加酸前和赶酸完毕后消解管架自动升起使消解管脱离加热
模块；可设定消解管提升加酸冷却时间，保证加酸过程安全性
1.4自动样品定容系统
样品消解赶酸后，在室温下定容，通过微距低功率超声传感器测量消解管中样品体积，由高精度蠕动泵定容样品至指定体积（10～50mL）；定容精度：优于1％
1.5 自动酸气排放系统
1)仪器自带全自动酸气排放系统，无需置于通风橱内使用。将酸气封闭在酸气
排放系统内，避免将整机放入通风橱时对电子元件的损害
2)★标配通风系统自带HEPA级过滤功能，在消解过程中持续净化进入系统的
空气；通风系统风量可根据实验步骤和样品量的不同设定自动调节风量大小1.6智能控制软件
1)电脑PC机控制，功能强大；控制软件可进行中英文轻松切换；软件主界面
可实现9个试剂通道通道试剂剩余量报警功能，废液瓶满预警功能，报警限量均可由用户自定义。
2)★带远程监控系统：用户可以在实验室外（办公室或其它场所）通过手机或
其它远程控制终端实现对实验过程实时状态和实验步骤监控，随时掌握实验进程；可实现远程紧急停机操作
3)可随意设定和存储消解及其它前处理步骤，满足不同项目的消解要求。
4)可自动生成消解过程实验报告
2配置清单：
1)全自动石墨消解仪主机1台，包括两套独立的石墨加热模块，9试剂通
道加液定容系统，双模块升降摇匀模块；
2)自动酸气排放系统，具有HEPA净化功能；
3)聚丙烯材质排风管5m；
4)HEPA级别过滤净化网；
5)消解管支架（30位）；
6)聚四氟乙烯消解管；
7)聚四氟乙烯试剂瓶盖；
8)聚丙烯消解管；
9)智能控制软件；
10)远程监控系统软件
11)电脑
（二）全自动萃取仪
技术参数
1、产品应用：适用于环境中土壤、地表水、污水中的前处理，同时连接阴离子表面活性剂分析模块，可以对土壤、水样中的阴离子表面活性剂分析检测。
2、自动萃取仪集成注射泵模块、十通阀模块和测量模块
3、萃取试剂： 5-30mL氯仿，或者其他试剂；
4、萃取过程：可以实现多步萃取，对同一样品3次以上萃取，对于萃取液可以再次进行反萃取；
5、自动萃取比例：可根据用户需求设置（0.1-10）
6、分离方式：膜分离
7、★自动进样器：可连续萃取25个样品，加试剂、萃取、分离、自动完成。
8、试剂回收：自动收集液体试剂，废气自动吸附
9、标配阴离子表面活性剂测定模块：按照国标方法亚甲蓝分光光度法测定阴离子表面活性剂，测量范围： 0.02-2mg/L，分辨率： 0.001mg/L，检出限： 0.01mg/L，重现性： RSD<2%，准确度：±5%，测量波长：650、652nm可选，波数准确度：±1nm，测量时间：＜8分钟
10、操作方式：触摸屏电脑控制，有中文菜单操作。
11、操作软件：操作软件具有国家版权局授予的软件著作权登记证书
12、外部电源： 220V±10%，50Hz
三、配置
1、包括25位自动萃取仪主机，阴离子表面活性剂分析模块。
三年耗材：隔水膜
过滤膜
O型圈
泵管
（三）(无机)全自动液体处理工作站
技术参数
一、基本要求
1.过程开放式设计：可以根据每个分析项目的需求，建立样品处理方法；
2.★具有液位探测：自动探测液位液面，自动停止在液面上，沉入液面深度可
设置；
3.★采用一次性枪头的工作模式，自动取/退一次性枪头，并且1ml，5ml枪头
可以自由切换；
4.具有加标回收，混标配置，标准曲线，样品定点定量转移等功能
二、配置要求
1.全自动液体处理工作站1台，电脑（电脑I3/4G/500G/Win7 64位系统/20寸显
示屏）。
2.1000ul一次性TIP头，5000ul一次性TIP头。
三、技术指标
1.★高精度的XYZ三位机械臂(x<0.15mm，y<0.1mm，z<0.1mm)
2.大体积样品分配、标准溶液配制、液体转移
3.128位10/15ml 离心管位，40位50ml离心管管位，3位500ml试剂位，定容
位与样品位共享，客户可以自行定义桌面平台。
4.流体管路：聚四氟乙烯
5.★采用一次性枪头：100%无交叉污染
6.标液配制方式：单标稀释、混标稀释
7.稀释方式：定点稀释
8.混匀方式：吹打自动混匀或吸吐混匀
9.加样RSD: 500ul<0.2% 100ul<0.8%
10.加样准确度：<0.8%（50ml标准液定容)
11.根据实际加样需求，自动选取1000ul和5000ul一次性枪头
12.完成单标6点定容10ml标准曲线定制<5分钟
13.稀释液不足/样品位液体不足自动报警
14.具有液面探测功能，提高加样精度
15.通信方式：232/USB
16.仪器尺寸：815mm(L)×600mm(D)×515mm(H)
17.仪器电源：220V±10%
18.重量：50KG
（四）往复式水平震荡装置
1、工作方式：往复
2、振荡幅度(mm)：20
3、振荡频率(rpm)：260
4、定时范围：0～120
5、整机功率(W)：不小于120
6、工作尺寸(cm2)：不小于8000
7、可用于上下振荡、左右振荡、回旋振荡，混和均匀。震荡速度速无极可调。（五）翻转式振荡装置
1、工作方式：翻转式
2、转速：0-60r/min。
3、翻转振荡器可放置2L玻璃瓶、PE瓶、PTFE瓶、TEFLON瓶和ZHE零空间式萃取容器。
4、种类：≧10瓶；
5、材质：全不锈钢结构；
6、转速：每分钟0-45转可调；
7、翻转方式：可实现正转及反转方式；
8、时间设定：分钟、小时任选；
9、温度设定：根据需要任意设定；
10、安全装置：具有翻盖断电装置，漏电保护装置，过负载保护装置。
11、符合标准HJ/T 299-2007和HJ/T 300-2007的要求。
（六）视频监控设备
1、摄像头：网络200万像素1080P，大功率四灯点阵，配备支架；
2、录像机：分辨率：16路3M;32路1080P,8路回放，最大支持8块6T硬盘，配件：鼠标，使用手册，光盘，电源；
3、防水电源：2.5A防水电源；
4、交换机：工程专用千兆16口/10/1000M自适应以太网交换机，外置5V3A 电源；
5、监控专用网线：国标网线；
6、监视器：24寸监视器
三、土壤采样套装
技术参数
1、不锈钢采样管内置PVC衬片，样品容易取出；
2、外配工程塑料切割头，保证所采样品不与金属接触；
3、闭合圆环切割头独特双凸设计，既减小采样阻力，又减小土样压缩率；
4、采样管与切割头之间螺纹连接，避免切割头脱落；
5、另外，还配有不锈钢切割头，用于采集原状土样。
标准配置：
T型手柄、击打手柄、吸能锤、采样管固定器、不锈钢采样管、PVC衬片、心型壤土钻头、工程塑料切割头、不锈钢切割头、100cm延长杆、50cm延长杆、竹刀、竹铲、扳手、3米钢卷尺、刮刀、手套、铝箱包装。
AFS系列双道原子荧光光度计 维护手册 （内部资料） 北京科创海光仪器有限公司 本文件归北京科创海光仪器有限公司所有 未经允许不得翻制
前言 北京科创海光仪器有限公司是国内著名的分析仪器制造商，拥有原子吸收和原子荧光两大系列的光谱仪器，公司开发研制的原子荧光光谱仪是国内惟一拥有自主知识产权的分析仪器，深受广大用户信赖，广泛应用在环保、地质、冶金、食品卫生、水质监测、农产品检测以及制药等行业。 本公司自上世纪80年代开发并生产出第一台商品化原子荧光光谱仪以来，一直致力于产品的更新，迄今已生产有十多种型号的原子荧光仪器，国内外有近万家用户在使用本公司生产的仪器，为了更好的为用户提供服务，特意编写了本维修手册，希望能给用户带来方便。 本手册中不包含原理描述，有关这方面的内容请参见产品说明书或直接和科创海光公司联系，另外本手册中的部分内容（常用部件更换或保养部分）也需要用户参考说明中的图例或描述。 本手册适用于AFS-2202E、AFS-230E、AFS-3000 AFS-3100、AFS-9800以及AFS-8800，部分适用于AFS-2202和AFS-230、AFS-2201以及AFS-9800，由于经验和能力有限，本手册中不可能含盖所有的故障现象，也难免存在有一些错误，因此也希望用户能够谅解，另外科创海光公司也希望广大用户对本手册中提出宝贵意见，以便于我们更好地为用户服务。
特别说明 更换元素灯时一定要关闭主机电源，要确保灯头上的各管脚正确顺利的插在灯座上。一旦错位，有可能造成烧坏主机内的主板，导致通讯失败。 调光时最好先关闭氩气，否则调光器会堵塞载气通路导致水封中的水排出或进入上端的胶管而影响测量，在调试完毕后再打开钢瓶开关。 更换灯时一定要在关机后稍微停留一段时间，防止灯丝过热时灯受到振动而造成阴极材料溅射，影响灯的发光强度和寿命。 每次做完样品时一定要清洗几次，先把泵压块松开，一定要在最后再关闭氩气，防止液体回流到载气管路中而导致气路控制箱腐蚀，严重时载气通道会完全堵塞。 严禁非专业人员擅自对仪器进行维修操作。 出现故障时，应及时与科创海光公司指定的维修服务站联系，或在科创海光公司售后服务部人员的指导下进行各类操作。
实验一原子荧光光谱法测量条件的选择 一、实验目的 1．了解原子荧光光谱仪的基本结构及使用方法； 2．掌握原子吸收光谱分析测量条件的选择方法及测量条件的相互关系及影响，确定各项条件的最佳值。 二、方法原理 原子荧光光谱仪工作原理： 在一定工作条件下，荧光强度I F与被测元素的浓度c成正比，其关系如下： I F = K c 氢化物发生原理： BH4- + H++ 2As3+ +3H2O →2AsH3↑+H2↑+ BO33-生成的AsH3蒸汽在载气的带动下，经过火焰原子化，As原子接受由低压砷灯发出激发光照射，基态砷原子被激发到高能态，当返回到基态时辐射出共振荧光，此荧光经聚光镜聚焦于光电倍增管，实现光电转换，最后得到信号。 在原子荧光光谱分析中测量条件选择得是否正确，直接影响到分析方法的检出限、精密度和准确度。本实验通过砷的原子荧光光谱分析测量条件的选择，如灯电流、载气流量等，确定这些测量条件的最佳值。 三、仪器设备与试剂材料 1．PF6型原子荧光光谱仪（北京普析通用），砷高强度空心阴极灯。 2．试剂： （1）砷标准贮备液（1000u g?mL-1）：国家标准。 （2）砷实验工作溶液（1u g?mL-1）：由砷标准贮备液1000u g?mL-1逐级稀释得到。 （3）硫脲溶液（100g?L-1）：称取硫脲10g，加入80mL蒸馏水，水浴加热溶解，蒸馏水稀至100mL，摇匀。 （4）硼氢化钠-氢氧化钠溶液（15g?L-1）：称取5g氢氧化钠溶于200mL蒸馏水，加入15g硼氢化钠并使其溶解，用蒸馏水稀至1000mL，摇匀。 （5）2% 盐酸溶液（v/v）：移取20ml HCl（GR）,用蒸馏水稀释至1000mL，摇匀。 （6）（1+1）盐酸溶液（v/v）。 四、测量条件的选择 1．10ng?mL-1标准溶液的配制
ＬＳ－４５／５５荧光／磷光／发光 分光光度计 使用说明书 美国Perkin Elmer公司 ２００３ 年４月
一、理论基础 荧光、磷光、化学发光及生物发光均属于分子发光。现将其原理简介如下： 室温下，大多数分子处于基态的最低振动能层。处于基态的分子吸收能量后被激发为激发态。激发态不稳定，将很快衰变到基态。若返回到基态时伴随着光子的辐射，这种现象被称为“发光”。 每个分子具有一系列严格分立的能级，称为电子能级，而每个电子能级中又包含了一系列的振动能层和转动能层。图中基态用Ｓ０表示，第一电子激发单重态和第二电子激发单重态分别用Ｓ１、Ｓ２表示，０、１、２、３…表示基态和激发态的振动能层（见图１），第一、二电子的激发三重态分别用Ｔ１和Ｔ２表示（见图２）。 图１荧光的能级图 １、荧光的产生 当分子处于单重激发态的最低振动能级时，去活化过程的一种形式是以１０－９～１０－６秒左右的短时间内发射一个光子返回基态，这一过程称为荧光发射（见图１）。２、磷光的产生 从单重态回到三重态的分子系间跨越越迁发生后，接着发生快速的振动驰豫而到达三重态的最低振动能层上，当没有其他过程同它竞争时，在１０－４～１０２秒左右的时间内跃迁回基态而发生磷光（见图２）。 由此可见，荧光与磷光的的根本区别是：荧光是由激发单重态最低振动能层至基态各振动能层的跃迁产生的，而磷光是由激发三重态的最低振动能层至基态各振动能层间跃迁产生的。
图２磷光的能级图 ３、化学发光及生物发光的产生 某些物质在进行化学反应时，由于吸收了反应时产生的化学能，而使反应产物分子激发至激发态，受激分子由激发态回到基态时，便发出了一定波长的光，这种吸收化学能使分子发光的过程称为化学发光。化学发光也发生于生命体系，这种发光被称为生物发光。 二、仪器简介 １、仪器原理 图３ＬＳ４５／５５荧光／磷光／发光分光光度计的原理图
荧光分光光度计 荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定, 不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm，发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品（如凝胶条）的光谱扫描。 荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点，可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。 基本结构与原理 由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。 基本结构和原理如图所示，光源与检测器成直角方式安排。 荧光分光光度计的工作原理： 物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光 的形式放出，从而产生荧光． 不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱；，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。 在溶液中，当荧光物质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法类似，荧光分析通常也采用标准曲线法进行。 荧光分光光度计基本结构和原理图 1. 光源： 为高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～400nm 范围内强度几乎相等，故较常用。 2．激发单色器： 置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器，筛选出特定的激发光谱。
浅谈氢化物原子荧光分光光度法测砷的注意事项 河南省水产技术推广站渔业检测中心魏文东 前言国务院于2011年2月19日正式批复《重金属污染综合防治“十 二五”规划》，这是中国第一个“十二五”专项规划⑴。环保部等部门将 掀起重金属污染防治风暴，涉及5大重点防控行业的砷、铅、汞、铬、 镉等重金属污染。未来五年据称国家计划投入750亿元，各地还要 将防治成效纳入政府领导考核内容。 作为重金属监控检测之一，砷的化合物种类很多固态的有三氧化二砷（即砒霜），二硫化三砷，三硫化二砷和五氧化二砷等。而砷的化合物均有剧毒，砷通过呼吸道、消化道和皮肤接触进入人体。如摄入量超过排泄量，砷就会在人体的肝、肾、肺、脾、子宫、胎盘、骨骼、肌肉等部分，特别是在毛发、指甲中蓄积，从而引起慢性砷中毒，潜伏期可长达几年甚至几十年，慢性砷中毒有消化系统症状、神经系统症状和皮肤病变等。砷还有致癌作用，能引起皮肤癌。 无论是以“‘农夫山泉’检测事件”为警示，还是为了《重金属污染综合防治“十二五”规划》的全面实施，笔者都认为有必要对重金属砷的检测方法做一个系统的回顾。 一、目前采用的检测方法 目前经常使用的检测方法有，（一）化学分析法：银盐法，砷斑法；（二）仪器分析法：氢化物原子荧光分光光度法，硼氢化物还原比色发，示波极谱法，无火焰氢化物原子吸收法分光光度法( 氢化物发生器法) ，石墨炉原子吸收法，电感耦合等离子体原子发射光谱法等。无论是传统
的化学分析方法，还是比色法、分光光度法、原子吸收法等，这些方法都操作繁琐，分析时间长，灵敏度也不高。加之考虑到检测成本和仪器价格，我们很容易选择氢化物原子荧光分光光度法，加快了检测速度，提高了灵敏度及回收率，拓宽了线性范围。 二、氢化物原子荧光法的原理及试验步骤 其原理是，在酸性介质中，样品中的砷与还原剂( 一般为硼氢化钾或钠) 反应在氢化物发生系统中生成挥发性的氢化物：过量氢气和气态氢化物与载气( 氩气) 混合，进入原子化器，氢气和氩气在特制点火装置的作用下形成氩氢火焰，使待测元素原子化。待测元素的激发光源——特制高性能空心阴极灯发射出砷的特征谱线通过聚焦，激发氩氢焰中待测物原子，产生原子荧光。根据荧光强度的大小来测定氢化物元素在试样中的浓度。 我实验室使用的仪器为：北京科创海光双道原子荧光分光光度计AFS-3100，德国进口微波消解仪speedwave?MWS-3,电热板其实验步骤如下⑵-⑺： 1.标准系列配制准确移取1.0mg/L砷标准溶液0.5 、1.0、 2.0、4.0、6.0、10 mL于100 mL量瓶中，分别加入5.00 m L浓盐酸，20.0mL 15％硫脲,混合溶液,用去离子水定容至刻度,摇匀,制成含5.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0、100.0ug/L的标准系列溶液备用。 2.样品的处理准确称量0.50g水产品肉糜，于消解罐中，加入1.0mL 浓硝酸，0.5mL30%双氧水，8.0mL水⑻，放置15分钟后放进微波消解仪中，按照编制好的程序：消解。消解液转移到25mL比色管中，用3ml的去离子
高等仪器分析实验(荧光分光光度计的使用) 实验目的 1． 2．掌握荧光分光光度计的基本使用方法：扫描激发光谱，发射光谱，荧光强度，同步荧光光谱 3． 4．掌握荧光定量分析方法 实验原理 荧光分光光度计是常用的光学仪器，在定量分析，样品的光谱性质表征时经常用到。 荧光分光光度计的基本功能是完成激发光谱，发射光谱的扫描，进行相对荧光强度的测量。从激发光谱可以获得样品激发态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳激发波长。从发射光谱可以知道样品基态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳发射波长。荧光定量分析法的方法与紫外可见吸收光谱法类似，但需要注意荧光强度值是相对值，同一样品，同一仪器在不同仪器参数时获得的荧光强度是不同的。只有当测量时仪器参数完全相同时，不同样品荧光强度的相互比较才有意义。 与紫外可见吸收光谱类似，分子荧光光谱也是分子光谱，其谱峰较宽，特征性不是很强，谱峰重叠现象比较普遍。为了减小谱峰宽度，避免谱峰重叠，提高分析的选择性，在定量分析时常采用同步荧光的方法进行。同步荧光是同时扫描荧光分光光度计的激发和发射单色仪得到的谱图，通过选择合适的扫描参数，可以使样品谱峰变窄，并避免不同组份的谱峰重叠，得到比较好的分析效果。 同步荧光扫描有固定波长同步荧光法，固定能量同步荧光法，可变角同步荧光法，导数同步荧光法等，其中以固定波长同步荧光法最为常用。 扫描已知样品荧光激发和发射光谱时，可先根据参考波长来进行。扫描未知样品的荧光光谱，可以将发射波长先每隔一定波长（例如50nm）扫描一个激发光谱。对比不同位置的激发光谱，从最强的激发光谱中选择最大激发波长，设定该波长为激发波长，扫描发射光谱。再从新得到的发射光谱中找到最大发射波长，在最大发射波长处重新扫描激发光谱。 扫描样品激发光谱和发射光谱时，需要注意：扫描激发光谱时，激发单色器扫描范围的长波端一般应小于发射波长；扫描发射光谱时，发射单色器扫描范围的短波端应大于激发波长。否则在发射光谱（激发光谱）中与激发波长（发射波长）波长相同的位置会出现很强的散射谱峰，这不是样品的荧光引起的，应注意区分。 如果样品不是真正的溶液，或包含有不溶颗粒物，或是固体样品，如果扫描范围较宽时，通常在发射光谱（激发光谱）中激发波长（发射波长）整数倍波长的位置也会出现弱的散射谱峰，称为倍频峰，在分析光谱情况时也应注意区分。对散射倍频峰或样品荧光峰，可通过适当改变激发波长来进行区分，散射倍频峰的位置会随着激发峰位置的变化而变化，而荧光峰位置通常是不变的。如果倍频峰对样品的测量有干扰，可使用合适的滤光片消除倍频峰。合适的消倍频峰滤光片应可以使发射光透过，而阻挡激发光不能透过。 如果样品荧光较弱，使用高灵敏度档测定时，通常会观察到溶剂的拉曼峰，也应注意与样品荧光进行区分。拉曼峰的位置也与激发波长有关，同时会随着激发波长的变化而变化。其位置估算方
F-2700荧光分光光度计操作规程 1、开机： （1）开启计算机 （2）开启仪器主机电源按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色为正常。 （3）双击桌面图标（FL Solutions 4.1 for F-7000），主机自行初始化，扫描界面自动进入 （4）初始化结束后，须预热15-20分钟，出现操作主界面（界面右下角出现Ready） 2、点击扫描界面右侧“Method” 在“General”选项中的“Measurement”选择“wavelength scan”测量模式 在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数 选择扫描模式“Scan Mode”：Emission/Excitation（发射光谱/激发光谱） 选择数据模式“Data Mode”：Fluorescence (荧光测量) 设定波长扫描范围 扫描荧光激发光谱(Excitation)：需设定激发光的起始/终止波长（EX Start/End WL）和荧光发射波长（EM WL） 扫描荧光发射光谱(Emission)：需设定发射光的起始/终止波长（EM Start/End WL）和荧光激发波长（EX WL） 其他选项可选择默认值（也可根据具体实验要求自行设定） 参数设置好后，点击“确定” 3、设置文件存储路径（此步也可不进行参数设置，可以在按5中方法进行保存） （1）点击扫描界面右侧“Sample” （2）样品名可自行命名 （3）选中“Auto File”，可以自动保存原始文件和TXT格式文本文档数据（4）参数设置好后，点击“OK” 4、扫描测试 （1）打开盖子，放入待测样品后，盖上盖子（请勿用力） （2）点击扫描界面右侧“Measure”，窗口在线出现扫描谱图 5、数据处理与保存 （1）选中自动弹出的数据窗口 （2）右键--“Trace”，进行读数并寻峰等操作 （3）“File”--“Save as”对数据进行保存 6、关机顺序： （1）关闭运行软件FL Solution 2.1 for F-7000 （2）选中“Close the lamp，then close the monitor windows？”点击“Yes”窗口自动关闭同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP指示灯暗下来，而RUN指示灯仍显示绿色 （4）约十分钟后，关闭仪器主机电源，即按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）（目的是仅让风扇工作，使Xe灯室散热） （5）从样品池中取出所有比色皿，清洗干净以便下一次使用 （6）关闭计算机
形态分析软件操作步骤北京海光仪器有限公司
目录 1形态分析流程示意图 (1) 2软件与仪器操作 (2) 2.1开机与联机 (2) 2.2参数设置 (2) 2.2.1仪器参数设置 (2) 2.2.2谱图采集参数设置 (3) 2.3仪器操作 (6) 2.3.1液相泵排气 (6) 2.3.2蠕动泵和液相泵运行 (7) 2.3.3点火与柱温 (7) 2.3.4进样操作 (7) 3数据处理 (7) 3.1谱图处理 (7) 3.2组分设定 (8) 3.3计算校正因子 (10) 3.4计算工作曲线 (10) 3.5样品分析 (12) 3.6打印报告 (13) 4关机 (15) 5附录 (15) 5.1附录I——谱图左右键功能 (15) 5.1.1谱图区鼠标左键操作 (15) 5.1.2谱图区鼠标右键操作 (15) 5.2附录II——菜单功能（简写） (17) 5.2.1文件菜单 (18) 5.2.2视图菜单 (18) 5.2.3操作菜单 (19) 5.2.4工具菜单 (20)
5.2.5窗口菜单 (22) 5.2.6帮助菜单 (22)
1形态分析流程示意图
2软件与仪器操作 2.1开机与联机 1.打开电脑和LC-AFS各模块电源； 2. 打开桌面上的原子荧光形态分析仪软件文件夹 ，并运行 和程序； 3.进入控制面板界面进行设备连接，打开的对话框如图2-1所示，选择相应的原子荧 光串口、液相色谱泵串口和自动进样器串口，点击进行联机，显示联机状态为：原子荧光仪-Yes； 4.打开氩气总阀，减压阀调至0.2~0.3MPa。 2.2参数设置 2.2.1仪器参数设置 1.在控制面板界面进行仪器参数设置，首先进入设置条件选项； 2.设置原子荧光光谱仪的参数，包括通道选择、元素灯及灯电流选择、载气及屏蔽气 选择，并点击“应用”；设定液相高压输液泵的工作方式、泵的压力参数以及等度或梯度程序，并点击“应用”。仪器参数设置界面如图2-2所示； 图2-1
AFS-2100/230E/3100 全自动双道原子荧光光度计 操 作 规 程 （以AFS-2100仪器为例AFS-230E 、AFS-3100 同理） 北京科创海光仪器有限公司云南维修站 AFS —2100/230E/3100原子荧光光度计操作规程 1、开机及进入操作系统 开启计算机、打印机。 打开Ar 瓶使次级压力～，一般在 MPa 。 安装所需元素灯，注意灯的插口，更换元素灯时一定确保仪器不通电的情况下进行。 打开主机、自动进样器，开启自动进样器之前确认自动进样臂位于下端。 调节原子化器高度Hg 灯调节至10mm ，其他元素灯调节至8mm 。用调光器调节灯位置，使光斑位于调光器的中心位置(Hg 灯调节至10mm ，其他元素灯调节至8mm)。（检查水封中是否有水，针对有水封仪器）。 进入操作系统，用鼠标的左键单击“AFS-2100/230E/3100 原子荧光光度计”，进入AFS-2100/230E/3100 软件操作系统。此时，屏幕显示软件的主题画面，该画面中有软件名称、版本号、公司名称、版权保护提示等内容。如下图1-1 图1-1 进入图1-1 图1-2 如下图1-3 图1-3 2、仪器自检
在“文件（F ）”菜单中依次进行“气路自检”如图2-1、“断续流动和自动进样器自检” 如图2-2、“空芯阴极灯和检测电路自检” 如图2-3。 图2-1 图2-2 图2- 3、建立数据库及条件设置 建立数据库 在“文件（F ）”中选择“ 生成新数据库” 在“文件名 ”栏中输入新数据库的名字如图 生成一新数据库，或“ 连接数据库”打开所需文件名称在“文件（F 会弹出一个提示对话框，用于连接一个已有的数据库如图3-2。 图3-1
原子荧光分光光度计 一、发展历程 1859年克希霍夫研究太阳光谱时开始原子荧光理论的研究。 1964年,Winefordner和Κuga首先提出用原子荧光光谱（AFS)作为分析方法的概念。1969年,Holak研究出氢化物气体分离技术并用于原子吸收光谱法测定砷。 1974年,Tsujiu将原子荧光光谱和氢化物气体分离技术相结合，提出了气体分离-非色散原子荧光光谱测定砷的方法，这种联合技术就是现代常用氢化物发生-原子荧光光谱（HG-AFS)。 1982年郭小伟（西北有色地质研究所）和张锦茂（地矿部物化探研究所）两个研究小组合作，研制成功了世界上首台以溴化物无极放电灯作激发光源的“WYD^2型蒸气发生-双道原子荧光光谱仪”。该仪器采用微波激发无极放电灯作为激发光源、自行研制的高温石英管原子化器、间断法氢化反应发生器，可同时测定两个可形成氢化元素及汞原子的原子荧光光谱仪。与此同时，张锦茂、范凡等开展了地球化学样品中As，Sb，Bi，Hg等两种元素同时测定分析方法的研究，取得了令人满意的分析结果。使其成为地矿部开展《20万区域化探全国扫面计划》找矿的重要配套仪器及分析方法，随即将科研成果迅速地转化为商品化仪器，按地矿部统一部署转让给北京地质仪器厂。 1985年开始由北京地质仪器厂（随后脱离出海光仪器公司）和江苏宝应仪器（种种原因到现在就没有发现该公司）进样系统以小蠕动泵为主并投入批量生产。 1995年以郭小伟为首西北有色金属研究院成立金索坤技术有限公司（不知道什么原因到目前为止市场占有率极低，目前也只有蠕动泵的产品）。 1996年北分瑞利公司与著名原子荧光光谱专家张锦茂先生合作，成功研制以蠕动泵为主的原子荧光（不知道什么原因现在市场占有率也不是很理想）；随后北京东西电子研究所也推出以蠕动泵为主的原子荧光（不知打什么原因现在市场占有情况不是很理想）。 1998年，加拿大Aurora公司也推出了一款蒸气发生-原子荧光光谱仪，该仪器的性能基本上接近于我国早期同类型仪器的水平。所以国外原子荧光水平和国内至少相差15年左右。 1999年，北京有色金属研究院为了进一步提高空心阴极灯的辐射强度，满足原子荧光分析高灵敏度的需求，在我国早期吴廷照、高英奇研制成功的原子吸收高性能空心阴极灯[13]基础上结合原子荧光的特点，研制成功了用于原子荧光的“高性能空心阴极灯”。一直沿用至今（随后各厂家为灯添加特殊代码，实验灯的自动识别）。其中光源直接决定检测结果，未来发展发向是一种新型的激发光源，其性能具有单色性好、相干性强、方向集中和功率密度高等优点，但是价格也就不说咯。 2000年以刘明钟（海光第一任老总）为首成立北京吉天仪器有限公司。随后为原子荧光推出入双注射泵进样系统（目前市场占有率较高）；随后普析也开始开展原子荧光的业务（目前市场占有率不是很理想）。 2005年北分瑞利成功研制推出第一台联用技术原子荧光光谱仪。随后几年内海光吉天普析等厂家也顺利推出该仪器。（为原子荧光测试重金属不同价态含量做出重要贡献）。 2006年北京路捷仪器有限公司（目前北京锐光仪器有限公司）成立致力于原子荧光各基础核心部件改进研发，并多次拿得国家重大专项目，协助制定多项有关原子荧光应用标准。并将成熟技术以授权于其他厂家使用带来良好效果。
分子荧光分析法 发光光谱：物质分子或原子吸收辐射被激发后，电子以无辐射跃迁至第一电子激发态的最低振动能级，再以辐射的方式释放这一部分能量而产生的光谱称为荧光、磷光。 根据物质接受的辐射能量的大小及与辐射作用的质点不同，荧光分析法可分为以下几种： 1. X射线荧光分析法 用X射线作光源，待测物质的原子受激发后在很短时间内（10-8 s）发射波长在X 射线范围内的荧光。 2. 原子荧光分析法： 待测元素的原子蒸气吸收辐射激发后，在很短的时间内（10-8 s），部分将发生辐射跃迁至基态，这种二次辐射即为荧光，根据其波长可进行定性，根据谱线强度进行定量。 荧光的波长如与激发光相同，称为共振荧光。 荧光的波长比激发光波长长，称为stokes荧光；若短，称为反stokes荧光。 3. 分子荧光分析法： 有些物质的多原子分子，在用紫外、可见光（或红外光）照射时，也能发射波长在紫外、可见（红外）区荧光，根据其波长及强度可进行定性和定量分析，这就是通常的（分子）荧光分析法。
基本原理 一. 分子荧光的发生过程 （一）分子的激发态——单线激发态和三线激发态 大多数分子含有偶数电子，在基态时，这些电子成对地存在于各个原子或分子轨道中，成对自旋，方向相反，电子净自旋等于零：S=?+(-?)=0，其多重性M=2S+1=1 (M 为磁量子数)，因此，分子是抗（反）磁性的，其能级不受外界磁场影响而分裂， 称“单线态”； 图1 单线基态（A）、单线激发态（B）和三线激发态（C） 当基态分子的一个成对电子吸收光辐射后，被激发跃迁到能量较高的轨道上，通常它的自旋方向不改变，即?S=0，则激发态仍是单线态，即“单线(重)激发态”； 如果电子在跃迁过程中，还伴随着自旋方向的改变，这时便具有两个自旋不配对的电子，电子净自旋不等于零，而等于1：S=1/2+1/2=1 其多重性：M=2S+1=3 即分子在磁场中受到影响而产生能级分裂，这种受激态称为“三线(重)激发态”； “三线激发态” 比“单线激发态” 能量稍低。但由于电子自旋方向的改变在光谱学上一般是禁阻的，即跃迁几率非常小，只相当于单线态→单线态过程的10-6~10-7。（二）分子去活化过程及荧光的发生： （一个分子的外层电子能级包括S0（基态）和各激发态S1，S2，…..，T1…..，每个电子能级又包括一系列能量非常接近的振动能级） 处于激发态的分子不稳定，在较短的时间内可通过不同途径释放多余的能量（辐射或非辐射跃迁）回到激态，这个过程称为“去活化过程”，这些途径为： 1. 振动弛豫：在溶液中，处于激发态的溶质分子与溶剂分子间发生碰撞，把一部分能
AFS-2202E原子荧光光度计操作规程与注意事项 Spetrof luorophotometer 型号AFS-2202E 厂商北京科创海光仪器有限公司 性能指标线性范围：大于三个数量级；精密度<1.0%；检出限：As、Pb、Se、Bi、Sn、Sb＜0.02μg/L；Hg、Cd＜0.001μg/ L；Ge＜0.05μg/L；Zn＜1.0μg/L。 主要功能单泵断续流动进样，膜分离式气液分离器；密闭式石英炉原子化器；双通道同时测定，数据RSC转换，用于As、 Hg、Cd、Ge、Se、Pb、Bi、Te、Sn、Sb、Zn十一种元素 的测定。 应用范围食品卫生、环境、冶金、药品、实验室、地质、化妆品中金属含量的测定。 操作规程： 1.打开实验室电源，稳压电源以及通风设备。 2.安装待测元素的空心阴极灯，确认水封中应有水。 3.打开仪器电源，进入操作软件并设置工作条件。 4.进行灯位置和原子化器高度调整。 5.确认氩气出口压力为0.52Mpa，压上泵管压块，确认管路系统 正常（必要时需进行气路的检漏）。 6.点火进行测试，调整压块顶丝使进样通畅，预热测试30分钟。 7.按操作要求进行标准曲线和位置样品的测试。 8.测试完成后要洗蒸馏水进行几次测量，对仪器管路进行清洗。 9.熄火并退出工作软件，关闭氩气、计算机和主机。 10.打开泵管压块，松开泵管，擦拭滴漏的酸液。 11.做完实验经由负责人验收，并在使用记录本上登记签字后方可 离开。
注意问题： 1.更换元素灯时一定要关机，确保灯头插针和灯座上的插孔完全 吻合。 2.要定期在泵管以及采样臂滑轨，臂升降结构等处添加硅油。 3.仪器要保持干燥、清洁，每次使用完毕应盖上防尘罩。
原子荧光光度计期间核查作业指导书 1.目的 为使原子荧光光度计能在检定期间内处于正常的工作状态，确保检验结果的准确性和有效性。在仪器设备两次检定期间，对该设备进行期间核查，以验证设备是否保持校准时的状态，确保检验结果的准确性和有效性。 2.核查范围 适用于本中心所使用的原子荧光光度计的期间核查。 3.核查内容 外观检查、重复性、检出限及标准曲线相关系数 4.使用的标准物质 砷、硒10ug/L标准溶液，汞1ug/L标准溶液 5.检查依据 原子荧光光度计PF7使用说明书。 6.检查方法 6.1仪器的外观 6.1．1仪器应具备下列标志：名称、型号、制造厂名、出厂日期、系列号（或编号）等。 6.1.2仪器的各功能部件（量程、输出旋钮、按键、开关和指示灯等）均能正常工作，各紧固件应无松动。 6.1.3仪器应标明所使用的电源、电压和频率。电源线、信号电缆等插头、接头应与插座紧密配合。 6.2重复性 6.2.1试剂及仪器 砷、硒、汞高性能空心阴极灯；含砷、硒10ug/L标准溶液，含汞1ug/L 标准溶液；2%盐酸溶液，7%盐酸溶液，0.005%KOH+0.0005%KBH4溶液，0.005%KOH+0.015%KBH4溶液；高纯氩气。 6.2.2方法
开启仪器，设置好仪器检测条件，分别测定7次10ug/L(砷、硒标准溶液)和1ug/L(汞标准溶液) 分别记录7次的SD值和平均值。 6.2.3结果应符合仪器出厂技术标准：RSD≤1.0% 6.3检出限及标准曲线相关系数 6.3.1试剂及仪器 砷、硒、汞高性能空心阴极灯；含砷、硒10ug/L标准溶液，含汞1ug/L 标准溶液；2%盐酸溶液，7%盐酸溶液，0.005%KOH+0.0005%KBH4溶液，0.005%KOH+0.015%KBH4溶液；高纯氩气。 6.3.2方法 调整仪器运行参数，对载液进行11次重复测量，并分别测定标准溶液，读取软件页面检出限及标准曲线的相关系数。 6.3.3结果应符介仪器出厂技术标准： D.L.≤0.01ug/L（汞D.L.≤0.001ug/L）；R2≥0.999
原子荧光问题总结 1、做Se时的空白在90左右，而做汞和砷空白就到了600左右，差好大啊，这个值是否合理啊，多少是可以接受的范围啊，谢谢；那么空白高得原因怎么样来排查啊 答：除了汞的空白在300左右，其余的元素灯大约在100左右；调节负高压和灯电流能降低荧光值。一般负高压降低20V荧光值降低一倍；另：空白确实有点高。不知道大家遇到过没有，环境温度高的时候空白就高，大概在8月份，由于有通风橱，空调也不凉了，结果空白特别高，后来到了10月份，空白就下来了。 注：关于空白值，是根据仪器不同而不同的。用一个厂家的仪器空白值比较接近，不同厂家的仪器就没有可比性了。再者，像问题中的空白值不同，如果灯电流，负高压给的相同的话，有可能是灯的问题。不同的灯强度不同，所以空白值就有所不同。再者，空白值是个相对的概念，不能确切的说多大的空白值是好的，只要你的净强度值够就行。 2、海光AFS2202用了4年多，是教学仪器，为什么点火炉丝今年容易烧断，是什么原因导致炉丝烧断呢。一般灯电流最大采用80mA 答：一个可能是炉丝抻的太开了，还有一个可能就是酸度太大了（环境的酸度），被腐蚀了。和灯电流没有关系。检查一下玻璃丝棉。 注：这种属于小问题了，一般炉丝是不那么容易烧断的，可能接触不好，接触点老化所致。 3、主要问题：同一个样品多次检测，重复性很差，通常都是逐渐降低，不知道是什么原因，请老师们帮忙看看！（注：仪器用的是北京瑞利AF－610A） 答：重复性太差是因为载气的流量不够。仪器的背后有个次级减压阀，固定的0.05MPa，我的仪器由于种种原因没有调上去，导致仪器前面流量调节失去作用，只能在300ml/min左右，通过调节后，流量可以上到需要的水平，重复性就好了很多了。 注：瑞利的仪器我没用过，不过重现性反应的是仪器的整体水平，仪器的稳定性是个综合的指标，进样系统，载气大小，屏蔽气大小，气液分离器的好坏，实验室的温度等等都能影响到仪器的稳定性。 4、我今天做hg，发现预热的时间短了的话荧光一直是负的.还有一直曲线配不好，我是自动配置，配了1ppb，然后设置了0.1，0.2，0.5，1.0四个点。后来配置1ppm还是不行，不知道怎么回事，还有荧光老是负值怎么回事（仪器北京吉天AFS9230的荧光） 答：检查下看元素灯是否打开，光电系统是否正常。排除这两个原因在找其他原因，或者硼氢化钾（钠）配置是否有问题。看看点火炉丝是否断了，我也出现过这样的情况 注：可以先换其他灯做试试仪器有没有问题，在用同样的还原剂、灯电流、负高压的情况下去试其他灯。有可能是没点着火，因为一个ppm的荧光值应该很高的。 5、在原子荧光测定时，有没有荧光强度值最低和最高的限制.就是说我的空白荧光值在什么范围最好，测定中荧光强度值超过多少，测定将不准确，如何判定呢? 答：建议用仪器公司提供的条件，标准系列浓度，一般不会出现很奇怪的值的 注：荧光测的都是净荧光值，空白高低并没有多大的关系。再者，荧光都是使用标准曲线法进
1．目的 通过实施本规程，规范化验员的操作，保证原子荧光光谱仪测定结果的准确性，使原料采购、生产控制、产品销售正常运行，延长仪器的使用寿命。 2 适用范围 2.1 本规程规定了质检中心原子荧光光谱仪测定操作的具体要求及注意事项。 2.2 本规程适用于质检中心原子荧光光谱仪测定的操作与维护。 3 职责 3.1 质检中心班长负责全面管理及监督。 3.2 质检中心化验员负责日常化验操作。 4 工作原理 原子荧光光度计利用惰性气体氩气作载气，将气态氢化物和过量氢气与载气混合后，倒入加热的原子化装置，氢气和氩气在特制火焰装置中燃烧加热，氢化物受热以后迅速分解，被测元素离解为基态原子蒸汽，其基态原子的量比单纯加热元素生成的基态原子高几个数量级。 5 实验步骤
1．打开电脑，进入WINDOWS 桌面。 2．打开氩气瓶减压阀，分压表调至0.25MPa 左右。 3．换上需要做元素的元素灯，打开仪器主机电源，双击桌面上图标 4．检查元素灯光斑是否对正，光斑对准调光器中间横线和竖线的交叉点，如果仪器没有搬动，没有更换元素灯，此步骤可以省略。 5．做冷汞温度设成0度；其他元素设成200度， 点击 和。 6． 选择手动进样,让仪器自动运行测量，在 ，输入曲线各标准点的浓度，若用仪器自动稀释曲线，在前打上对勾。本液浓度输入配置的单点标液浓度。 7．压好泵管，放好还原剂和盐酸瓶.把各自的管路放到对应的瓶中，清洗三次。 8．，仪器预热30分钟，点击仪器依次测量载流，标准空 白，标准曲线，样品空白，样品。 9．，需要打印曲线，，数据打印。如果
想导出测量数据，点击 10．仪器清洗，将进样针和还原剂毛细管放入去离子水中，输入清洗次数点“开始”清洗三次以上。 11．关氩气，退出仪器工作站，松开泵的压块，关仪器主机电源。 12．把仪器内部的溶液全部取出，仪器内放些干燥剂。 6 操作注意事项 此仪器测量单位是ug/l，对试剂要求很严格，尽量全用优级纯试剂。容量瓶要严格泡洗。
原子荧光分光光度计原理及应用 原子荧光原理及应用 原子荧光光谱法，英文是atomic fluorescence spectrometry简写为AFS。需要了解的是AES、AAS。 一、原子荧光光谱的产生 气态自由原子，吸收光源（常用空心阴极灯）的特征辐射后，原子的外层电子跃迁到较高能级，然后又跃迁返回基态或较低能级，同时发射出与原激发波长相同或不同的发射光谱即为原子荧光。原子荧光是光致发光，也是二次发光。当激发光源停止照射之后，再发射过程立即停止。 对该概念的理解有以下几点： （1）产生气态自由原子的方式有：火焰、石墨炉、电激发、热激发、电感耦合等离子焰。在AFS中主要是火焰。 （2）原子荧光可分为三类：即共振荧光、非共振荧光和敏化荧光，实际的到的原子荧光谱线，这三种荧光都存在。其中以共振原子荧光最强，在分析中应用最广。共振荧光是所发射的荧光和吸收的辐射波长相同，当发射的荧光与激发光的波长不相同时，产生非共振荧光，非共振荧光又分为直跃线荧光、阶跃线荧光、anti-Stokes（反斯托克斯）荧光。敏化荧光: 受光激发的原子与另一种原子碰撞时，把激发能传递给另一个原子使其激发，后者再以发射形式去激发而发射荧光即为敏化荧光。火焰原子化器中观察不到敏化荧光，在非火焰原子化器中才能观察到。 共振荧光是所发射的荧光和吸收的辐射波长相同。只有当基态是单一态，不存在中间能级，才能产生共振荧光。非共振荧光是激发态原子发射的荧光波长和吸收的辐射波长不相同。非共振荧光又可分为直跃线荧光、阶跃线荧光和反斯托克斯荧光。直跃线荧光是激发态原子由高能级跃迁到高于基态的亚稳能级所产生的荧光。阶跃线荧光是激发态原子先以非辐射方式去活化损失部分能量，回到较低的激发态，再以辐射方式去活化跃迁到基态所发射的荧光。直跃线和阶跃线荧光的波长都是比吸收辐射的波长要长。反斯托克斯荧光的特点是荧光波长
高等仪器分析实验（荧光分光光度计的使用） 实验目的 1．掌握荧光分光光度计的基本使用方法：扫描激发光谱，发射光谱，荧光强度，同步 荧光光谱 2．掌握荧光定量分析方法 实验原理 荧光分光光度计是常用的光学仪器，在定量分析，样品的光谱性质表征时经常用到。 荧光分光光度计的基本功能是完成激发光谱，发射光谱的扫描，进行相对荧光强度的 测量。从激发光谱可以获得样品激发态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳激发波长。从发射光谱可以知道样品基态能级的分布情况，用来选择定量分析的最佳发射波长。 荧光定量分析法的方法与紫外可见吸收光谱法类似，但需要注意荧光强度值是相对值，同一样品，同一仪器在不同仪器参数时获得的荧光强度是不同的。只有当测量时仪器参数完全相同时，不同样品荧光强度的相互比较才有意义。 与紫外可见吸收光谱类似，分子荧光光谱也是分子光谱，其谱峰较宽，特征性不是很 强，谱峰重叠现象比较普遍。为了减小谱峰宽度，避免谱峰重叠，提高分析的选择性，在定量分析时常采用同步荧光的方法进行。同步荧光是同时扫描荧光分光光度计的激发和发射单色仪得到的谱图，通过选择合适的扫描参数，可以使样品谱峰变窄，并避免不同组份的谱峰重叠，得到比较好的分析效果。 同步荧光扫描有固定波长同步荧光法，固定能量同步荧光法，可变角同步荧光法，导 数同步荧光法等，其中以固定波长同步荧光法最为常用。 扫描已知样品荧光激发和发射光谱时，可先根据参考波长来进行。扫描未知样品的荧 光光谱，可以将发射波长先每隔一定波长（例如50nm）扫描一个激发光谱。对比不同位
置的激发光谱，从最强的激发光谱中选择最大激发波长，设定该波长为激发波长，扫描发射光谱。再从新得到的发射光谱中找到最大发射波长，在最大发射波长处重新扫描激发光谱。 扫描样品激发光谱和发射光谱时，需要注意：扫描激发光谱时，激发单色器扫描范围的长波端一般应小于发射波长；扫描发射光谱时，发射单色器扫描范围的短波端应大于激发波长。否则在发射光谱（激发光谱）中与激发波长（发射波长）波长相同的位置会出现很强的散射谱峰，这不是样品的荧光引起的，应注意区分。 如果样品不是真正的溶液，或包含有不溶颗粒物，或是固体样品，如果扫描范围较宽时，通常在发射光谱（激发光谱）中激发波长（发射波长）整数倍波长的位置也会出现弱的散射谱峰，称为倍频峰，在分析光谱情况时也应注意区分。对散射倍频峰或样品荧光峰，可通过适当改变激发波长来进行区分，散射倍频峰的位置会随着激发峰位置的变化而变化，而荧光峰位置通常是不变的。如果倍频峰对样品的测量有干扰，可使用合适的滤光片消除倍频峰。合适的消倍频峰滤光片应可以使发射光透过，而阻挡激发光不能透过。 如果样品荧光较弱，使用高灵敏度档测定时，通常会观察到溶剂的拉曼峰，也应注意与样品荧光进行区分。拉曼峰的位置也与激发波长有关，同时会随着激发波长的变化而变化。其位置估算方 法：?laman=1/（1/? ex-?H2O /10 7）,其中波长单位为nm，?H2O 为溶剂的红外吸收波长，单位为波数，溶剂为水时，主要的红外吸收是O-H 伸缩振动，波长在3300波数。 狭缝的选择：激发和发射狭缝通常并不要求严格一致，为获得较好的灵敏度和准确反 应谱峰形状，测定激发光谱时，选用较大的发射狭缝和较小的激发狭缝是比较好的。而测 定发射光谱时则恰好相反。 灵敏度档的选择：灵敏度档与仪器中光电倍增管的放大倍数有关，对荧光比较弱的样 品，应选择灵敏度较高的档位，反之亦反。但注意不同档位之间的荧光强度值没有确定的 换算关系，不能相互比较。进行定量分析时，所有样品必须在同样的狭缝和灵敏度档位测 量。 仪器及试剂 970MC荧光分光光度计 缓冲溶液：10-2mol/L Na 2HPO4-NaOH 缓冲溶液，pH=11-12
原子荧光法复习题 一、填空： 1.原子荧光分析中，荧光类型有、、、热助线荧光和敏化原子荧光等。 答案：共振荧光、直跃线荧光、阶跃线荧光 2.原子荧光光谱仪中，目前有和两类仪器。 答案：色散系统、非色散系统 3.七十年代末，由于、及各种高效原子化器的使用，AFS技术得到了较大发展。 答案：高强度空心阴极灯、激光器 4.荧光猝灭的程度与及有关。 答案：被测元素、猝灭剂的种类 5.在原子荧光分析中，原子浓度较高时容易发生，它可使荧光信号变化和荧光谱 线，从而峰值强度。 答案：自吸、变宽、减少 6. 在原子荧光分析中，无论是连续光源或者线光源，光源强度越高，其测量线性工作范 围。 答案：越宽 7.原子荧光光谱仪的检测部分主要包括、以及放大系统和输出装置。答案：分光系统、光电转换装置 8. 在原子荧光分析中，石英原子化器炉温过高会使降低、增高，但较高的炉温又有利于消除干扰，所以应根据实际情况确定原子化温度。 答案：灵敏度、噪声、气相 9. 在原子荧光分析中，测定灵敏度随观测高度增加而，观测高度太低时，会增加，观测高度太高时，会使和下降。 答案：降低、噪声、灵敏度、精度 10.原子荧光光谱仪中，以供电的空心阴极灯，可以使增强几十至几百倍。答案：脉冲、谱线 11. 在原子荧光分析的实际工作中，会出现空白大于样品强度的情况，这是因为空白溶液中不存在的原因。 答案：荧光、干扰 12. 在原子荧光分析中，样品分析时，标准溶液的应和样品完全一致，同时必须做。答案：介质、空白 13. 在原子荧光分析中，当光电倍增管的负高压增加时，和水平同时增加，当灵敏度可以满足要求时，应尽量采用的负高压。 答案：信号、噪声、较低 14. 原子荧光光谱仪一般由四部分组成：、、和。 答案：光源（激发光源）、原子化器、光学系统（单色仪）、检测器