毕业论文
题目：三种肺炎支原体检测法的临床应用分析
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准考证号:
考生姓名: 王莹
指导老师:
二〇一八年八月十四日
三种肺炎支原体检测法的临床应用分析
摘要
目的探讨肺炎支原体（MP）咽拭子快速液体培养法、咽拭子聚合酶链反应（PCR）法和血清MP被动凝集法（MP-Ab）等方法在儿童MP感染诊断治疗过程中的敏感性方法采用3MP检测法对362例临床拟诊呼吸道（非细菌性）感染的患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究，每患儿取咽拭子做快速培养和PCR，同时取血清做MP-Ab检测，对3种方法的检测结果与临床诊断治疗病例进行回顾性分析。结果回顾临床病例诊断MP感染患儿152例。MP快速培养法检出阳性78例，阳性率为51.3%，病程为（4.5±2.6）天；PCR法检测出阳性103例，阳性率为67.8%，病程为（6.2±3.5）天；MP-Ab法检测出阳性127例，阳性率83.5%，病程（8.1±4.5）天。结论 3种MP检测法的敏感性与病程有相关性，临床医生应根据患儿病程选取检测方法，以提高阳性检出率和敏感性。
关键词肺炎支原体，快速培养法，咽拭子聚合酶链反应，血清抗体，配对研究
目录
前言 (4)
第一章文献综述 (5)
§1.1 肺炎支原体的定义 (5)
§1.2 肺炎支原体的发病机制 (5)
§1.3 肺炎支原体的分类 (5)
§1.4 肺炎支原体的临床表现 (5)
§1.5 肺炎支原体的临床诊断 (5)
§1.6 肺炎支原体的实验室检查 (6)
第二章材料和方法 (7)
§2.1 样本 (7)
§2.2方法概述 (7)
§2.3临床诊断MP感染的诊断标准 (7)
§2.4实验方法 (7)
§2.5统计学方法 .................................................................... .. (8)
第三章结果 (9)
第四章讨论 (10)
结论 (11)
参考文献 (11)
附录 (12)
错误！未定义书签。
前言
肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae,MP）是婴幼儿、青少年急道感染的主要病原体之，临床上表现为呼吸道感染综合征，其中约3%～10%可发展为支原体肺炎。但只根据临床症状很难鉴别由MP或病毒、细菌等病原体引起的儿童呼吸道感染，给临床治疗带来一定的困难。笔者采用3种MP检测法对362例临床拟诊为呼吸道（非细菌性）感染患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究，通过病例回顾来探索对支原体肺炎敏感的实验室诊断方法，以协助临床准确做出诊治。
第一章文献综述
§1.1肺炎支原体的定义
小儿肺炎支原体肺炎多见于5~15岁儿童，婴幼儿患病常表现为毛细支气管炎。多数为亚急性起病，发热无定型，或体温正常，咳嗽较重，初期为刺激性干咳，常有咽痛，头痛等症状。X线改变明显，多为单侧病变，也可见双侧病变，以下叶为多见，有时病灶呈游走性，少数呈大叶性阴影；病程2~3周不等，X线阴影完全消失比症状消退更延长2~3周之久，偶有延长至6周者。
§1.2 肺炎支原体的发病机制
肺炎支原体肺炎（Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia，MPP）的发病机制仍不十分清楚，目前主要有呼吸道上皮吸附作用、MP直接侵入和免疫学发病机制等学说，其中免疫调节异常在MPP的发生发展中可能起重要作用
§1.3肺炎支原体的临床表现
1. 多数为亚急性起病，发热无定型，或体温正常，咳嗽较重，初期为刺激性干咳，常有咽痛，头痛等症状。
2. 可出现多系统多器官的损害，皮肤粘膜表现为麻疹样或猩红热样皮疹；偶见非特异性肌痛和游走性关节痛；也有表现心血管系统、神经系统损害、血尿及溶血性贫血等。
3. 全身症状比胸部体征明显。体检肺部体征不明显，偶有呼吸音稍低及少许干湿罗音者
§1.4 肺炎支原体的临床诊断
病原学诊断
肺炎支原体快速鉴定培养法优于被动凝集法，在肺炎支原体肺炎感染的早期可提供重要的依据，可做为临床诊断MP感染的优先试验[8]；气管肺泡灌洗液MP-DNA测定不仅能诊断MP感染,且支气管肺泡灌洗术可促进呼吸道症状的改善
及体征恢复，且通过纤维支气管镜收集支气管肺泡灌洗液MP-DNA，痰液MP-DNA 及血清MP抗体检测阳性率没有差异。CRP的检测是肺炎病原体的辅助诊断方法，一定程度可区分细菌性肺炎和支原体肺炎。聚合酶链反应(PCR)技术检测MP具有可靠、特异性高的特点，逐渐成为早期特异诊断的有力武器。
§1.5 肺炎支原体的实验室检查
急性期MPP患儿血清hs-CRP、C3、CA、IgM、IgG明显升高，IgA明显降低；而恢复期hs-CR、IgG仍然较高，而IgM和IgA均没有明显变化，补体C3、C4在恢复期内也没有明显变化，因此血清C-反应蛋白、免疫球蛋白和血清补体的监测对诊断急性期或恢复期MPP有重要意义。MP-IgM和冷凝集试验同时检测可提高小儿支原体肺炎实验诊断的准确率；支原体肺炎患儿外周血白细胞大多正常占80%，中性粒细胞增高占61%；65.6%患儿C-反应蛋白增高；53.6%患儿血沉增快；
58.4%患儿心肌酶谱增高；24.0%患儿肝酶增高；16.8%患儿尿酸增高。5流行病学特点及进展
MP肺炎发生率约为22.3%，9～12岁感染率最低,3～6岁最高,10～12月是发病高峰月,小儿支原休肺炎发病率有所上升,发病年龄有趋小倾向,秋冬季发病率高,肺炎支原体只要通过呼吸道进行传播，尤其发病率较高的地区，局部区域每隔3-5年可发生一次肺炎支原体感染，每2-6年可发生一次大范围的肺炎支原体感染，每次感染的时间都持续较长，有的感染可持续一年左右，因此，有关部门一定要采取相应的预防措施，切断呼吸道飞沫传播途径对控制疾病发生和流行具有重大意义。控制支原体感染的发生和流行。
第二章材料和方法
§ 2.1 样本
收集医院检验科2018年1月1日～8月6日在儿科就诊住院患儿病例，有呼吸道感染症状，已经初诊为非细菌性感染的患儿362例作为研究对象，其中男175例，女187例；年龄为2个月～12岁，病程为1～90天。
§2.2 方法
具体方法有：（1）用MP快速培养法、PCR法和MP-Ab法等3种MP检测法对362例研究对象同时进行检测，记录结果。（2）通过研究对象病历回顾统计MP 感染的例数，并按年龄、病程和3种MP检测法结果进行统计学分析。
§2.3 临床诊断MP感染的诊断标准
按文献［1］、临床症状、体征标准，包括回顾性诊断——即患儿经红霉素治疗有效，经青霉素、头孢菌素治疗无效者等；以及实验室检查3种检测法至少有一种阳性。病程计算方法：以病历本记录为准，即在患儿开始有症状或体征时开始计算，到患儿来就诊检测时为止进行计算。
§ 2.4 MP快速培养法
支原体分离鉴别培养液由珠海市浪峰生物技术有限公司提供。清晨患儿未洗漱用咽拭子取咽部分泌物，严格按说明书进行，将咽拭子用无菌生理盐水处理，接种到预温的培养基中，37 ℃培养；培养基
液体颜色由紫红色变为草绿色或嫩绿色且清亮，并且在静置时，瓶底有蓝色颗粒或物质沉淀为阳性，5天后培养基颜色不变或无蓝色颗粒或物质沉淀为阴性。PCR法：试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供。应用PCR法检测MP-DNA，严格按试剂盒说明书进行，以在紫外灯下出现180 bp扩增带结果判为阳性。每次试验均设阳性、阴性对照（阳性对照为MP质粒，阴性对照为无菌生理盐水），由专人进行操作，质量控制。MP-Ab法：试剂为日本瑞必欧株式会社MP-Ab检测试剂SERODIA-MYCOⅡ凝集试验试剂盒，严格按试剂盒说明书操作，抽取患儿静脉血 3 ml，采用明胶颗粒被动凝集法，用血清检测，结果以≥1∶40判断为阳性。每次试验均设未致敏明胶颗粒、致敏明胶颗粒和阳性、阴性血清进行测定。
§ 2.5 统计学方法
计量资料用均数±标准差（x±s）表示，各年龄组与3种检测方法结果比较用Spearman检验；各年龄组间确诊病例的阳性率比较用χ2检验；3种检测方法阳性结果与病程之间的比较用q检验。
第三章结果
§ 3.1 阳性样本
经过回顾性诊断，在配对研究组362例研究对象中有152例符合MP感染的诊断标准，即有152例确诊病例，其中肺炎45例，支气管炎56例，上呼吸感染49例，支气管哮喘2例。MP快速培养法检测出78例阳性，PCR法检测出103例阳性，MP-Ab法检测出127例阳性。
§ 3.2 结果分析
各确诊病例的年龄分布，见表1。表1显示儿童MP感染的年龄以3～4岁年龄段的病例最多，为46例，阳性率最高，为70.77%，与其余年龄组段比较P<0.05。3种检测法的阳性检测结果与年龄分布见表1，表1显示3种检测法与年龄之间差异无统计学意义，以3～4岁的年龄段与其余年龄组段比较差异无统计学意义，P>0.05。不同病程患儿3种检测法的检测结果，见表2，表2显示MP快速培养法为阳性的患儿病程均值较短为（4.5±2.6）天，PCR法为阳性的患儿病程均值为（6.2±3.5）天，MP-Ab法为阳性的患儿病程均值较长为（8.1±4.5）天。3组之间两两比较，差异有统计学意义（P<0.05）。表1 不同年龄组MP感染确诊病例和3种检测方法结果对比分析注：△□代表与年龄组3～4岁组段比较结果表2 不同病程患儿3种检测方法阳性结果对比分析注：△代表三组之间的两两比较
第四章讨论
1 MP感染的临床表现常无特异性，临床的实际工作中，容易与一般病毒性感冒
相混淆。在临床上患儿有下列症状：（1）发热呈弛张热或不规则热。刺激性咳嗽非脓性痰，偶带血丝。（2）可有咽痛、头痛、胸痛，全身症状比体征明显。（3）肺部体征不典型而胸片炎症显著，可见云雾状大片阴影。（4）WBC正常或升高。（5）青霉素类、磺胺类抗生素治疗无效，改用或一开始用大环内酯类抗生素有效。（6）实验室MP检验有1项或1项以上阳性具备以上2个条件或以上者可初步诊断为MP感染。多时候，临床医生为了尽快缓解患儿的症状，需根据患儿的症状、体征和病史做MP感染的诊断性治疗，但应与肺结核相互鉴别。
2 近年来由于诊断技术的提高，MP感染报道日渐增多，一般认为MP感染以年长
儿发病较多，本文表1资料显示，2～8岁年龄段是发病的高峰期［2］。占同期呼吸免疫科住院患儿的9.3%，比有关文献报道各年龄组支原体肺炎占肺炎发病的10%～20%低。说明MP感染的发病年龄有提前，且年龄越小，临床表现愈不典型。
3临床实验室检测MP的方法很多，过去所用的冷凝集试验法诊断MP感染缺乏特
异性，敏感性也差，易受病程的影响［3］。本文采用配对资料研究，对疑为MP 感染的患儿进行3种MP检测法，以探讨MP快速培养法、PCR法和MP-Ab法等方法在儿童支原体肺炎诊断治疗过程中的敏感性。提示临床医生根据患儿不同的病程选取不同的检测方法，以提高实验室的阳性检出率。
4MP快速培养法是利用MP生长代谢产物使培养基液体中指示剂颜色发生改变来
判断MP生长；标本中的其他支原体和细菌则因培养基中加入了青霉素和醋酸陀均被抑制。该法阳性结果可48 h检出。结果显示，培养法阳性率为51.3%（78/152），低于另外两种方法的阳性率。可能与在检测前患儿已经用了MP敏感药物有关。表2结果显示，该法阳性病例病程最短。提示病程时间较短的患儿选择此方法对检测的阳性率较高。MP培养是诊断MP的金标准［4］。
5 咽拭子PCR法检测质粒核酸，该法快速、敏感和特异，通过一技术可从患儿
痰中检测MP-DNA。由于此方法相当敏感，易受污染，故实验室操作时应特别小心。统计结果显示，该法的阳性率为67.76%（103/152），高于快培法。此法弥补了极微量的和被药物杀死的MP不能通过快速培养法检出的病例。表2结果显示，该法阳性病例，病程为（6.2±3.5）天。详细资料显示，有病程在30天以上的患儿经抗MP治疗，该法仍可为阳性，说明MP的生存力相当强，要系统化治疗。
血清MP-Ab法阳性率是3种检测方法中最高的，为83.55%（127/152），该法是检测患儿血清中的MP抗体，而非直截了当检测MP本身，因而阳性结果并不能确诊是MP感染。对患儿状态的综合评估应包括对患者临床症状和试验结果的严谨分析。极低量的抗体可能不被此试验检测出来。另外还有些MP感染的患者不
产生抗体或只产生少量的抗体，高抗体滴度的样品要出现前带现象。表2结果显示，该法阳性病例，病程最长，这是由于发病初期，机体中尚未产生抗体而不能被检测出，提示发病时间较长或经过多种药物治疗过的患儿选择此方法有较高的阳性率。此检测法结果往往受抗体出现的时相及患儿年龄、机体免疫系统状况等多方面的影响。
结论
临床应根据患儿的不同病程、不同年龄以及用药情况来选取实验室的检测方法，以提高MP的阳性检测率，以更好地结合临床症状进行综合分析，从而提高小儿MP感染诊断的准确率。
参考文献
1 檀卫平.聚合酶链反应及血清学检测在肺炎支原体感染诊断中的意义.广东医学，1996，17（4）：218.
2陆定，陆诗强，庄丽宝，等.肺炎支原体引起小儿上呼吸道感染的临床研究.中国当代儿科杂志，2006，8（3）：205-206.
3杨莉.小儿肺炎支原体感染的早期诊断.南京铁道医学院学报，1997，16（2）：116.
4周金凤，黄秀琼.1362例呼吸道感染患者痰、咽拭子肺炎支原体培养结果分析.现代医院，2006，6（6）：86-87.
附录
猪支原体肺炎治疗方法 概述：猪支原体肺炎也可称为猪霉形体肺炎、猪地方流行性肺炎，属于慢性呼吸道病的一种，主要是由支原体科支原体属的猪肺炎支原体引起。本病致死率并不是很高，但会使猪群的生长受到严重影响，降低饲料利用率，增大料肉比;如果继发感染其他疾病也具有较高的死亡率。猪支原体肺炎的症状 急性型：病猪采食较少，甚至完全停止，精神萎靡，咳嗽，尤其是在剧烈运动、清晨、夜间和喂食后咳嗽更加明显。随着病情的发展，导致气喘和呼吸困难，一般呈腹式呼吸，即呈犬坐姿势，并张口喘气，有泡沫从口鼻流出。病猪通常会有窒息而发生死亡，能够耐过的病猪则变成慢性型。此外，病猪体温基本正常，约37.5℃，精神萎靡，呼吸次数每分钟大约130次，由于出现气喘而无法咽下食物，体质消瘦，发育较慢，被毛粗乱失去光泽。 慢性型：病猪长时间咳嗽，开始时是干咳，严重时会出现连续痉挛性咳嗽，且随着病情恶化，会出现难以呼吸和喘气的现象，腹式呼吸非常明显，夜间能够清晰的听到哮喘声。病猪可视黏膜发绀，往往会流鼻液，但体温及食欲基本没有明显变化，严重时才会减少采食或者停止采食，最终由于体质衰弱而发生死亡。 猪支原体肺炎紧急治疗方案
猪支原体肺炎的西药紧急治疗方案: 方法1，林可霉素进行肌肉注射，持续5天以上，或在饲料中添加林可霉素，进行喂食。 方法2，盐酸霉素，硼酸溶液进行肌肉注射，一天一次，持续用药5天以上。 猪支原体肺炎的中药紧急治疗方案: 方法1，杏、白果、麻黄、甘草、苏叶、黄芪、石膏，熬汤冠服。 方法2，炒白芍、桔梗、党参、桂枝花粉、甘草、金银花、柴胡、五味子、葶苈子、杏、山药、连翘，熬汤灌服。 方案3，皂角、醉鱼草跟、石菖蒲、臭牡丹、苦参、甘草，熬药灌服。 猪支原体肺炎治疗方法 发现病猪后要立即将其与群猪进行隔离，并对其污染的环境进行消毒，可喷洒2%～3%氢氧化钠溶液进行消毒。对于病猪所在猪群的同群猪只也要采取隔离观察，并在饲料中添加土霉素拌料，一般每千克饲料中添加60～80mg，采取预防性治疗，每天饲喂1次，1个疗程是5～7天，需要连续用药3个疗程，如果经过2月后没有可疑病
猪喘气病又名猪支原体肺炎、猪霉形体肺炎、猪地方流行性肺炎，是由猪肺炎支原体感染而发生的一种接触性慢性呼吸道传染病，临床上呈慢性经过，主要症状为咳嗽和气喘。现将治疗该病有较好疗效的药物及方法荟萃于 猪喘气病又名猪支原体肺炎、猪霉形体肺炎、猪地方流行性肺炎，是由猪肺炎支原体感染而发生的一种接触性慢性呼吸道传染病，临床上呈慢性经过，主要症状为咳嗽和气喘。病变的特征是肺的尖叶、心叶、中间叶和膈叶前缘呈“肉样”或“虾肉”样实变。现将治疗该病有较好疗效的药物及方法荟萃于后，供读者参考。 １盐酸土霉素 日用量300mg/kg体重（第一次用量加倍），用0.25％普鲁卡因或5％的葡萄糖生理盐水稀释后肌肉注射，每日1次，连续注射5天为一个疗程。重症者可适当延长一个疗程。按6mg/kg体重作气管内注射效果较好。 2 恩诺沙星 用量2.5mg/kg体重，每日2次，肌注。 3 泰妙菌素 泰妙菌素的商品名为“支原净”，是一种白色结晶粉末，以拌入饲料内给药为主。对猪喘气病预防剂量为每天50mg/kg体重拌料，口服连续2周。治疗期间有明显的疗效，但部分治疗猪仍会复发。被治疗猪在治疗后6天，剖杀做病原分离，部分猪仍会带菌。从实践来看，泰妙菌素仅能使有食欲的健康猪拌料作预防猪喘气病使用，对较轻有食欲的喘气病猪治疗有效，对明显减食或废食病重的病猪疗效不理想。如果用泰妙菌素和磺胺嘧啶钠按每千克体重分别添加20mg拌入饲料，连喂10天，对该病预防效果好。
4 卡那霉素 硫酸卡那霉素药效较高，一般病猪2.5万IU/kg肌肉注射，可作为延缓疾病急性症状发作的有效药物。此药治疗喘气病疗效快，但是复发率较高，一般治愈率仅占50％左右。如用卡那霉素与土霉素交替使用，其疗效会提高。 5 泰乐菌素 泰乐菌素注射液，按4-9ml/kg体重肌肉注射，1次/天，连用3天。 6 氟苯尼考 猪早期喘气病用此药疗效很好，按0。2ml/kg体重肌肉注射或肺内注射，每天1次，连用3天。如在饲料中添加氟苯尼考治疗效果也不错。 7 林可霉素 又称洁霉素，对猪喘气病有特效。按50mg/kg体重给药，5天一个疗程，杂交猪2周治愈率可达88.67％，但对二花脸猪疗效差。如在饲料中添加，按每吨饲料加入200ｇ，连续喂3周，疗效较好，休药期为宰前1天。 8 丁胺卡那霉素 50IU～100IU，在右侧苏气穴注射，每天1次，连用3天，疗效很好。
毕业论文 题目：三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 地市: 学校: 准考证号: 考生姓名: 王莹 指导老师: 二〇一八年八月十四日
三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 摘要 目的探讨肺炎支原体（MP）咽拭子快速液体培养法、咽拭子聚合酶链反应（PCR）法和血清MP被动凝集法（MP-Ab）等方法在儿童MP感染诊断治疗过程中的敏感性方法采用3MP检测法对362例临床拟诊呼吸道（非细菌性）感染的患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究，每患儿取咽拭子做快速培养和PCR，同时取血清做MP-Ab检测，对3种方法的检测结果与临床诊断治疗病例进行回顾性分析。结果回顾临床病例诊断MP感染患儿152例。MP快速培养法检出阳性78例，阳性率为51.3%，病程为（4.5±2.6）天；PCR法检测出阳性103例，阳性率为67.8%，病程为（6.2±3.5）天；MP-Ab法检测出阳性127例，阳性率83.5%，病程（8.1±4.5）天。结论 3种MP检测法的敏感性与病程有相关性，临床医生应根据患儿病程选取检测方法，以提高阳性检出率和敏感性。 关键词肺炎支原体，快速培养法，咽拭子聚合酶链反应，血清抗体，配对研究
目录 前言 (4) 第一章文献综述 (5) §1.1 肺炎支原体的定义 (5) §1.2 肺炎支原体的发病机制 (5) §1.3 肺炎支原体的分类 (5) §1.4 肺炎支原体的临床表现 (5) §1.5 肺炎支原体的临床诊断 (5) §1.6 肺炎支原体的实验室检查 (6) 第二章材料和方法 (7) §2.1 样本 (7) §2.2方法概述 (7) §2.3临床诊断MP感染的诊断标准 (7) §2.4实验方法 (7) §2.5统计学方法 .................................................................... .. (8) 第三章结果 (9) 第四章讨论 (10) 结论 (11) 参考文献 (11) 附录 (12) 错误！未定义书签。
猪支原体肺炎的鉴别诊断和预防 猪支原体肺炎（猪气喘病）是由猪肺炎支原体引起的一种慢性、接触性呼吸道疾病，表现咳嗽、气喘和生长迟缓，感染率高、死亡率低。感染猪的呼吸道纤毛屏障被破坏，使其它疾病（如猪蓝耳病、圆环病毒、胸膜肺炎、副猪嗜血杆菌病等）混合感染的几率大大增加，肺脏病变加重，呼吸功能和饲料转化率下降，经济损失巨大。该病是一种原发性呼吸道疾病，也是呼吸道病复合体（PRDC）最重要的病原之一，多与其它病原混合感染，使临床表现和剖检症状变得复杂。本文通过对猪支原体肺炎的流行病学、临床评价和检测方法的分析，为其鉴别诊断和防治提供依据。 1 猪支原体肺炎的流行病学和发病机制 目前，商品猪场几乎100%感染猪肺炎支原体，带菌散毒猪群普遍存在。仔猪出生后两周内，一般不会自然感染猪支原体肺炎。随着日龄增加，应激增大、抵抗力降低，感染几率随之提升。感染猪肺炎支原体后的潜伏期为3周左右，所以咳嗽症状多出现在7周龄之后，10周龄为发病和抗体转阳高峰，被称之谓“十周龄墙”。 猪肺炎支原体通过空气中的气溶胶，经呼吸道感染，首先黏附在猪呼吸道纤毛顶端，进而繁殖并释放代谢中间产物，使纤毛脱落、黏膜受损，呼吸道屏障系统被破坏。吸入空气中的异物、黏膜分泌物和脱落的纤毛，沉降到肺泡中，导致连续干咳和气喘的发生，并逐渐形成肺脏肉变或胰样变。肺脏功能遭到破坏，生长受阻、饲料转化率下降；同时呼吸道纤毛脱落，失去过滤异物、清除病原的能力，增加了其它病原混合感染可能。 猪肺炎支原体能长期定居于猪呼吸系统，且具有免疫逃避的特性，难以通过药物或免疫清除，经常反复发病。而纤毛脱落和肺部实变，均是不可逆的，一旦发生终生受其影响，严重的可变成僵猪。 2 猪支原体肺炎的临床症状与咳嗽指数 感染猪肺炎支原体后的猪群，体温和食欲无明显变化。发病初期多表现连续性的干咳，后期出现气喘、呼吸困难（猪呈腹式呼吸），部分严重的极度消瘦。若继发感染其它细菌和病毒，则体温升高，死亡率增加。临床上为了与其他因素引起的咳嗽症状进行区分，现将不同因素引发的疾病与咳嗽类型和所对应的临床表现总结如下：猪传染性胸膜肺炎表现为咳嗽、体温高且口鼻流有泡沫或带血黏液、可视粘膜发绀等；猪肺疫表现为连续咳嗽、时有喘鸣声、咽喉部肿胀导致呼
小儿肺炎支原体肺炎的临床诊治分析 摘要目的分析小儿肺炎支原体肺炎的临床诊治方法和效果。方法100例肺炎支原体肺炎患儿，随机分成观察组和对照组，各50例。对照组给予红霉素治疗，观察组给予阿奇霉素治疗，比较两组治疗效果。结果观察组总有效率为96%，对照组总有效率为72%，比较差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组不良反应发生率为6%（3/50），对照组为36%（18/50），比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论小儿肺炎支原体肺炎的临床诊治中，需要对患儿的临床症状和血清肺炎支原体抗体（MP-IgM）的检测充分结合，并采取阿奇霉素进行治疗，才能取得准确而安全的诊治效果。 关键词小儿肺炎；支原体肺炎；临床诊治 肺炎支原体肺炎多是由飞沫传染所引起的，并在婴幼儿、学龄儿童和青少年中比较常见，常伴有发热、头痛、咳嗽、畏寒等症状，病程虽短，但具有易复发的特征。受社会环境的影响，小儿肺炎支气管肺炎的发生率呈现着逐年升高的迹象，并发症的发生率也逐渐升高，这对患儿病症的诊断和治疗都是非常不利的[1，2]。基于此，医院选取2013年8月～ 2014年8月收治的100例肺炎支原体肺炎患儿，对临床诊治方法和效果进行分析，现报告如下。 1 资料与方法 1. 1 一般资料随机选取医院于2013年8月～2014年8月收治的100例肺炎支原体肺炎患儿为研究对象，所有患儿经诊断结果显示均符合支原体肺炎的诊断标准。其中男48例，女52例，年龄1～10岁，病程2～30周。临床病症主要表现为：100例患儿均伴有发热症状（稽留热40例、不规则热32例、弛张热28例），持续时间在7 d天左右；90例患儿出现咳嗽，其中32例伴有气喘；48例有血液系统症状（20例出血斑点、10例贫血、18例黄疸）；40例有神经系统障碍，23例伴有呕吐症状；45例患儿泌尿系统出现症状（血尿15例，尿蛋白30例）。将患儿随机分成观察组和对照组，各50例。 1. 2 方法两组患儿均于治疗前行血常规检查、胸部X线检查、心肌酶谱检查、血清肺炎支原体抗体检查，检查完毕后对确诊的病例采取抗感染、抗病毒，并根据患儿的临床实际情况进行对症治疗，一旦患儿出现发热，必须进行退热处理，如果出现咳嗽进行止咳以及平喘治疗[1]。在此基础上，对照组患儿给予红霉素治疗，将20～25 mg/（kg·d）红霉素溶于500 ml的5%葡萄糖溶液中，静脉滴注，1次/d，7～14 d为1个疗程。观察组患儿采取阿奇霉素治疗，将10 mg/（kg·d）溶于250 ml生理盐水，或5%葡萄糖溶液中，静脉滴注，1次/d，3～5 d为1个疗程。并观察两组不良反应发生情况。 1. 3 疗效判定标准[3] 显效：治疗3 d后，患儿体温逐步恢复，咳嗽症状
肺炎支原体检测方法选择的几个注意点 肺炎支原体（MP ），主要引起咽炎及支气管炎，少数累及肺。以其顶端结构与宿主细胞上受体结合粘附于上皮细胞上，一般为表面感染，除穿透支原体外（艾滋病人感染）大多不侵入血液。产生有毒代谢产物如外毒素或过氧化氢等引起发热及局部细胞损伤。 选择检测方法的注意事项： 1.临床常用全血（指尖血）或血清（橘黄管）检测IgM 来判定肺炎支原体的感染，但是，抗体检测只是各种实验室方法的一种，尚有其他方法可用，如培养及DNA 检测，每种方法各有利弊，对不同病程各有针对性。 2.每一种实验结果都需要另外一种实验结果来验证，正常人咽部或支气管可携带MP ，所以不能用一种实验数据来下诊断。 3.初次感染时， IgM 、IgG 都会产生，再次感染时，有时IgM 不产生。 4.儿童由于初次感染几率大，常能产生IgM ，成人由于机体可能感染过多次，常不产生IgM 。 5. 检测方法的选择需要根据病程确定： <6个月 6-12个月 1-9岁 IgM + IgM — 年龄对IgM 抗体产生的影响
抗体 抗原 MP感染不同时段产物的比较 由此图可以看出： a.感染早期，7天之内以检测抗原为主，宜培养或DNA检测： 培养为“金标准”，据国内文献显示，快速培养法阳性率为24%；PCR--DNA检测为96%。美国一篇文献显示，培养阳性率为5%，DNA为57%。 b.早期未产生抗体，导致延误治疗，后期抗体阳性，病原体消失，导致过用抗生素。 c.7天之后可检测IgM抗体； d.IgM可持续较长时间，感染后三个月抗体浓度依然较高，有的可以终生阳性，如果短时间内检测抗体，常不能分辨是否为MP现症感染或其他感染。 e.感染早期宜病原体筛查，此时抗体尚未产生，可导致延误治疗；中后期适宜抗体检测，主要用于回顾性验证试验，此时病原体消失，可导致过用抗生素。
第三章病例分析——肺 炎 一、概念 肺炎是指终末气道、肺泡腔及肺间质的炎症，病因以感染为最常见，其他尚有理化因子、免疫损伤，药物因素等。病原体主要有细菌、病毒、真菌、寄生虫等。当人体免疫力降低，呼吸道防御功能下降时，病原体可侵入下呼吸道，引起肺泡毛细血管充血、水肿，肺泡内纤维蛋白渗出和细胞浸润。临床上出现发热、咳嗽、咳痰、气促、胸痛等症状，肺部可闻及固定的湿啰音，出现肺实变体征，胸片出现相应改变。 二、分类 （一）按解剖学或影像学分类 1.大叶性肺炎：病变起始于肺泡，经肺泡间孔（Cohn孔）蔓延至邻近肺泡，直至整个肺叶或肺段。影像学表现为肺渗出性阴影，通常不累及细支气管。典型的大叶性肺炎呈整叶肺实变。由于抗菌药物广泛应用，典型大叶性肺炎已少见，而多数仅表现肺段或亚肺段的渗出和实变。 2.小叶性肺炎 也称支气管肺炎。基本病变亦为炎症渗出，但病变常起于支气管或细支气管，继而累及肺腺泡或肺泡。影像学特征是沿肺纹理分布的小片状或斑片阴影，密度不均匀，边缘淡薄而模糊，以两下肺、内中带多见。病灶亦可融合成片状或大片状，密度深浅不一，且不受肺叶或肺段限制，区别于大叶性肺炎。
3.间质性肺炎 病变位于肺泡壁及其支持组织，影像学上表现为弥漫性不规则条索状及网织状阴影，其间可散布有密度增高的小点状阴影。 （二）按病原体分类 1.细菌性肺炎 常见细菌有肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷白杆菌、铜绿假单胞菌、卡他莫拉菌等。此外，分类学上不属于细菌、但某些特征类似于细菌的肺炎支原体、肺炎衣原体，以及分类学上属于细菌的细胞内病原体军团菌常被统称作“非典型病原体”，也是肺炎的常见病原体。 2.病毒性肺炎 以儿童最常见，主要有腺病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒等。 3.真菌性肺炎 大多为条件致病性真菌。引起肺炎的真菌主要有念珠菌、曲霉菌、隐球菌和毛霉菌。真菌性肺炎大多为继发性的，如免疫抑制、长期应用广谱抗生素以及其他重危患者。 4.寄生虫性肺炎（肺寄生虫病） 阿米巴原虫、弓形体、肺吸虫和棘球绦虫、血吸虫等均可以引起或主要引起肺部感染。 （三）按发病场所分类 1.社区获得性肺炎 社区获得性肺炎（community acquired pneumonia，CAP）最为常见。是指在社区环境中机体受微生物感染而发生的肺炎，包括在社区感染，尚在潜伏期，因其他原因住院后而发病的肺炎，并排除在医院内感染而于出院后发病的肺炎。肺炎链球菌为最主要的病原体。 2.医院获得性肺炎 医院获得性肺炎（hospital acquired pneumonia，HAP），是指患者入院时不存在、也不处在感染潜伏期，而于入院≥48h在医院内发生的肺炎，包括在医院内获得感染而于出院后48h内发病的肺炎。革兰阴性杆菌为最常见的病原体。 三、诊断要点 1.症状 2.体征 3.辅助检查 以肺炎球菌肺炎为例： 1.症状 患者多为青壮年，起病多急骤，受寒、疲劳、酗酒常为其诱因，先有寒战，继而高热，体温可达39～40℃，常呈稽留热，咳嗽，咳铁锈色痰，患侧胸痛，常伴肺外症状，如头痛，乏力，腹胀，恶心，呕吐，纳差等。数日后体温可急骤下降，大量出汗，随之症状明显好
猪支原体肺炎的诊断与防治 （代刚1 1.奇峰畜牧兽医站） 摘要：猪支原体肺炎是养猪业中常遇到的疾病，该病广泛流行于世界各养猪国家和地区，已成为世界性问题。单独地发生本病对猪致死率不高，但它使感染、发病猪的生产性能、抵抗力下降，易导致猪爆发其他传染性疾病，并且猪场一旦发生此病常常难以根治，是危害养猪业健康发展的一个大病老病，在养猪业中需要引起重视。本文就该病的病原、发病机理、临床症状及诊断、预防措施等进行讨论，以期为养猪业避免或减少本病发生，健康发展提供参考。 关键词：猪支原体肺炎诊断防治 猪衣原体肺炎（mycoplasmal pneumonia of swine，MPS），又称猪地方流行性肺炎（swine enzootic pneumonia）,俗称猪气喘病，是由猪肺炎支原体引起的猪的一种慢性呼吸道传染病[1]。主要临床症状为咳嗽和气喘，病理变化特征是肺的尖叶、心叶、中间叶和膈叶前缘成肉样或虾肉样实变。本病不同年龄、品种的猪，一年四季均可发病，尤其在寒冷多雨潮湿或气候骤变时多发[2]。单独地发生本病对猪致死率虽然不高，但它使感染、发病猪的生产性能、抵抗力下降，易导致猪爆发其他传染性疾病，是危害养猪业健康发展的一个大病老病，一直以来在养猪业中都极为重视。 1.病原 本病病原为猪肺炎支原体（Mycoplasmal hyopneumonia），又称为霉形体，是一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小原核细胞型微生物,缺乏细胞壁,不能维持固定的形态,呈球形、短杆形、分支丝状等多形态性,最常呈分支丝状[3]。其革兰氏染色阴性，但着色不佳，吉
姆萨或瑞士染色良好。本菌在无细胞人工培养基上培养条件苛刻。液体培养基由水解乳蛋白的组织缓冲液、酵母浸液和猪血清组成。细胞培养可选用猪肺埋块、猪肾和猪睾丸细胞继代培养。病料接种乳兔，经连续传代600多代，对猪的致病力减弱，并仍保持较好的免疫原性，也可在鸡胚中生长。猪肺炎支原体对自然环境抵抗力不强，圈舍、用具上的支原体，一般在2-3d失活，病料悬液中支原体在15-20℃放置36℃即丧失致病力。对青霉素、链霉素、红霉素和磺胺类药物不敏感，对放线菌素D、丝裂菌素C最敏感，对壮观霉素、土霉素、卡那霉素、泰乐菌素、林可霉素、螺旋霉素敏感。常用的化学消毒剂均能达到消毒目的。 2.流行病学 自然条件下，仅感染猪，不同年龄段、品种猪均能感染，但乳猪和断乳仔猪易感性最高，发病率和死亡率较高，其次是怀孕后期和哺乳期的母猪，育肥猪发病较少，病情也较轻。母猪和成年猪多呈慢性和隐性。本病一年四季均可发生，但在寒冷、多雨、潮湿或气候骤变时较为多见。饲养管理和卫生条件是影响本病发病率和死亡率的重要因素，尤其在饲料质量、猪舍潮湿和拥挤、通风不良等影响较大。如继发或并发其他疾病，常引起临诊症状加剧和死亡率升高。本病传染源是病猪和带病猪，主要通过接触或飞沫经呼吸道传染，皮下、静脉、肌注或胃管接种病原体都不致病。 3.发病机理 支原体聚集并粘连在支气管、细致器官及器官上皮细胞上，首先
肺炎支原体及其快速培养法 支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，它既不同于细菌，也不同于病毒，是介于细菌和病毒之间，能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界，与人类、nbsp;动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多，造成的危害非常广泛。 作者：罗三艳作者单位：412001 湖南株洲，株洲田心医院检验科支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，它既不同于细菌，也不同于病毒，是介于细菌和病毒之间，能在无活细胞的人工培养基上生长繁殖的最小微生物。它广泛分布于自然界，与人类、动植物的疾病有密切的关系。支原体的种类繁多，造成的危害非常广泛。目前证明对人体有致病作用的支原体有肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、生殖支原体等几种，但临床以肺炎支原体最为常见［1］。肺炎支原体主要以飞沫传播，引起儿童、青少年呼吸道感染、咽炎、气管炎、肺炎等。近年肺炎支原体感染病例明显增多并有局部流行的趋势，早期诊断极为重要。 1 肺炎支原体的实验室检测方法目前，肺炎支原体的实验室检测方法有支原体分离培养、 PCR法检测质粒核酸、抗体检测、支原体快速培养法、分子生物学方法等。支原体细胞分离培养可获得肺炎支原体，可以确诊。由于支原体分离培养要求苛刻，一般医院实验室难以推广。此法阳性率低，需时3 周甚至更长时间，对临床快速诊断意义不大。PCR法检测质粒核酸快速、特异、敏感，但需昂贵设备，不易普及，且方法过于敏感，容易受污染。传统的冷凝集法检测肺炎支原体的IgM 抗体，方法简单、易行，但其敏感性和特异性均较差，易受病程影响。ELISA 检测支原体抗体法较为简便、可靠。由于发病初期，机体中尚未产生抗体不能被检出，发病时间较长此法才有意义。而快速培养法正以其简单、快速、经济、无创伤等优点，被越来越多的临床实验室所推广，也被越来越多的患者所接受。 2 肺炎支原体快速培养法肺炎支原体快速培养法是利用肺炎支原体的代谢产物使培养基液体中的指示剂颜色发生改变来判断其生长，标本中的其他支原体和细菌则被培养基中的青霉素和醋酸陀抑制［2］。此法操作简便、快速、无痛苦。先从冰箱中取出快速培养基，复温，按常规方法采集患者咽拭标本，将标本棉签浸入培养液，沿瓶壁挤压棉签，取出棉签、丢弃。旋紧瓶盖，登记标本号，35℃～37℃孵育24～ 48h，观察结果。培养基由红色变为绿色、黄色，且仍保持清晰透明，说明有肺炎支原体生长，明显混浊变色者不能视为阳性。培养液颜色不变，应判为无肺炎支原体生长。我院检验科是从2007年4月份开始展开此项检测，共检测293 例疑似肺炎支原体感染病例，阳性病例161 例，阳性率54.9%，及早为临床诊断、治疗肺炎支原体感染提供了依据。 3 讨论近年来，肺炎支原体感染明显上升，危害较大，其临床表现常无特异性，易与一般病毒性感冒相混淆。临床医生为了尽快缓解患者的症状，需根据患者症状、体征及肺炎支原体的相关检测，及早诊断、治疗。快速培养法不受病程影响，感染初期就可检测出肺炎支原体。有资料报道，在肺炎支原体检测的各种方法中，该法阳性病例病程最短，提示病程时间较短的患者选择此法检测的阳性率较高。快速培养法是诊断肺炎支原体的金标准 ［2］。肺炎支原体快速培养法采咽拭标本，采集标本前，用生理盐水漱口。所采集的标本应迅速接种，若不能及时接种，室温保存不超过2h。使用
肺炎支原体感染的血清学试验 参考范围： 补体结合试验(CF) <1:8 代谢抑制试验(M1) 阴性 问接血凝试验(PHA) 阴性 酶联免疫吸附试验(ELISA) 阴性 MG链球菌凝集试验<1:40 临床评价： 1．肺炎支原体（MP）是主要的病原性支原体之一，在临床上主要引起上呼吸道感染、气管艾气管炎及支原潍肺炎。过去称为“原发性非典型性肺炎”的病原体中，MP最为常见。约有80％的慢性支气管炎患者合并MP感染。肺炎病例中约有10％～20％由MP引起。MP感染后，可用各种血清学试验检测体内产生的特异性抗体，有助于疾病的诊断。 2．测定病人血清中特异性抗体，常用的方法有CF、MI、PHA和ELISA等，其中CF 试验是诊断支原体肺炎最常应用的方法。支原体有较强的补体结合反应，单份血清抗体效价>1：6 4或恢复期较急性期抗体滴度增加4倍以上即有诊断价值。一般补体结合抗体在感染后7～9天开始上升，3～4周达到高峰，维持4～6个月。问接血凝试验在MP感染的急性期即可出现阳性，血凝抗体可存在数年。代谢抑制试验可测定MP脂多糖胞膜抗原的相应抗体，方法敏感且特异性强。这种抗体的出现较上二者为迟。ELISA所用抗原为MP表面P蛋白，采用间接法检测特异IgM抗体，具有早期诊断意义。 MG链球菌凝集试验是检测患者血清中MG链球菌凝集素效价的一种方法。MG链球菌是从某些原发性非典型性肺炎病人的呼吸道或肺部分离出的一种非溶血性菌株，约有40％～50％的支原体肺炎患者恢复期血清中常产生MG链球菌凝集素，本试验呈阳性，故检测患者血清内凝集素效价对支原体肺炎有辅助诊断意义。本试验还有助于与病毒性肺炎的鉴别，病毒性肺炎不出现MG链球菌凝集反应。 3．采用分离培养的方法检测患者痰、咽拭等标本中的MP，对支原体肺炎具有病原确诊意义，但需要2周以上时间，且阳性率不等，在临床上不能早期、快速诊断。寒冷凝集试验是一种非特异性反应，在临床上常用作支原体肺炎的辅助诊断，约有50％以上病例可出现冷凝集抗体。应用PCR技术检测患者呼吸道分泌物和支气管肺泡冲洗物中MP的DNA，是敏感、特异且快速的实验室诊断方法。 4．影响本试验结果的因素 (1)CF试验的敏感性和特异性不高，所用的MP糖脂抗原可与许多微生物、植物及人体组织有交叉反应。 (2)MG链球菌凝集试验在某些严重感染性疾病也可呈阳性。 寒冷凝集试验 参考范围： 寒冷凝集试验 临床评价： 1．寒冷凝集素是由I抗原刺激机体产生的一种非特异性抗体，属IgM类，在0～10℃的寒冷情况下，能与O型人红细胞或自身红细胞的膜抗原结合，产生凝集现象。此种凝集反应具有可逆性，若将已凝集的红细胞再放置于37℃时，凝集现象即可消失。支原体肺炎患者血清中常可出现高效价的寒冷凝集素，寒冷凝集试验可用于测定该抗体的效价，有助于支原体肺炎的诊断。 2．寒冷凝集素大多在发病后1～2周开始出现，以后继续增高，于病程3～4周达到
肺炎支原体肺炎的诊断 空军总医院刘春灵 支原体是介于细菌和病毒之间的一类缺乏细胞壁、呈高度多型性、能通过滤菌器、可在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。迄今分离到的支原体已达150余种，已确定与人类疾病关系最大的有3种，肺炎支原体（mycoplasma pneumonia, MP）是其中的一种。MP在国内外都是儿童和成人呼吸道感染的重要病原体之一，主要导致肺炎，所有肺炎的15-20%，约50%的儿童和青少年肺炎是由MP引起的.因此MP肺炎（MP pneumonia,MPP）是常见病和多发病。但迄今为止，MPP仍缺乏快速、可靠的诊断试验，因而临床确诊困难。 MPP的诊断包含两个层面：临床诊断（经验性）和结合了实验室病原学检测的确定诊断。 一、MPP临床诊断：根据流行病学、临床症状、体征、实验室辅助检查等特点经验性综合判断而出。MPP有着不同于一般感染性疾病的的特点：一般肺炎多发于冬季，MPP一年四季均可发病，但多发生于夏秋季节；临床症状大多只有发热和咳嗽；外周血白细胞总数大多不高；疾病早期X线检查即可出现肺炎，约10%-20%的病例会出现肺不张；因MP无细胞壁，临床常用的、作用于细胞壁的、安全性高的治疗肺炎的药物如β-内酰胺类的青霉素类、头孢类抗生素对其无作用；因此易被误诊为病毒性肺炎。综合上述特点，可作出初步的经验性临床诊断。 二、实验室病原学诊断：包括直接病原体检测和血清学检测。下面介绍几种常用或经典的MP实验室诊断方法。 （一）直接病原体检测：主要有MP分离培养和聚合酶链反应（PCR）法检测MP-DNA。检测用标本可取自可疑患者呼吸道的痰、咽拭子、鼻咽吸出物、支气管肺泡灌洗液、胸水等。 1、MP分离培养与鉴定： MP很挑剔，培养基的营养要求比一般细菌高，生长速度慢，较一般细菌难培养；分离培养需要10-14天，而通常需要2-5周才能生长成肉眼可见的菌落。通过生化反应和免疫学方法进行鉴定。还有其它影响因素，如MPP无细胞壁，对环境的影响更为敏感，易被灭活；标本采集后接种到培养基的过程也是培养可能失败的一个环节。由于其费时、费力、阳性率低，实际临床已经弃用此方法，目前主要用于研究性项目。
HQBJS/MYXM-9-2015 SOP文件B9.1【检验目的】 肺炎支原体是人类原发性支原体肺炎的病原体，经呼吸道感染。多发生于儿童、青年，发病初期临床症状不明显，隐性感染和轻型感染较多，也可致严重肺炎，出现头痛、发热、咳嗽等，本试验用胶体金法定性检测人血清中的肺炎支原体IgM 抗体。 B9.2【检验原理】 用肺炎支原体抗原固相硝酸纤维素膜，应用渗滤式间接法原理，检测血清中肺炎支原体抗体。 B9.3【样本要求】 血清样品不能溶血，应为新鲜血清或2℃～8℃条件保存不超过3天。高脂血症血清不能使用。 B9.4【样本采集】 不抗凝血2ml，避免溶血、混浊、或脂血标本 B9.5【试剂盒主要组成成份】 斑点反应板：40块（或20块） 试剂A： 1瓶, 约10ml 试剂B: 1瓶,约8ml, 胶体金标记物 B9.6【储存条件及有效期】 产品应储存在2℃～8℃条件中，不能冷冻；有效期8个月。
HQBJS/MYXM-9-2015 SOP文件 B9.7【检验方法】 滴入二滴试剂A于反应板中央孔中，待完全渗入； 滴入100μl血清于反应板孔中，待完全渗入； 滴加三滴试剂B于反应板孔中，待完全渗入； 渗入三滴试剂A于反应板孔中，待完全渗入。 B9.8【结果解释】 阳性：反应板孔中出现红色圆斑和清晰的红色质控线，为肺炎支原体抗体阳性； 阴性：反应板孔中只显现清晰的红色质控线，为肺炎支原体抗体阴性；失效: 反应板孔中未显现红色质控线，为操作失误或试剂失效。 B9.9【检验方法的局限性】 本试剂试验仅用于检测肺炎支原体抗体而非直接检测肺炎支原体，因而阳性结果并不能确诊是肺炎支原体感染。对患者状况的诊断应结合患者临床体征与症状和试验结果的综合分析。 抗体含量低的血清样品，不能被检测出来是可能的。部份肺炎支原体感染的患者，不产生抗体或产生少量的抗体。此时，可能显示阴性结果。 试验结果可疑时，应用培养基进行培养确诊。
肺炎支原体检测样本采集标准操作规程 1目的 本程序规范样品的采集，以确保检验结果的准确。 2范围 适用于郑州安图绿科生物工程有限公司生产的肺炎支原体培养药敏试剂盒所检测的临床样本。 3 工作程序 采样人员必须经过培训合格，方可进行采样。对于患者自行收取标本，须接受专业人员的指导。 采样前，采样人员根据申请者申请的检验项目的要求，确认采样计划和进行适当的准备工作。这些准备包括核对医嘱，打印条形码，选择恰当的容器粘贴条形码，指导患者做好采样前的。 采样容器应贴（或记号笔注明）含有验单上的ID号或住院号、病人姓名和临床科室等资料的条码，条码不能全包试管妨碍观察标本情况。用申请单包裹标本时，应将有病人姓名和检验项目的一面包在最外层。 采样人员必须根据检验项目的要求和计划以及医嘱要求执行的时间,选择恰当的部分,采集适当的样品量。实验室应定期评审检验所需的样品量，保证样品量适合所进行的检验。采集标本前必顺认真核对患者、标本容器和检验申请是否一致，严防差错。 3.1 采集器皿： 3.1.1 无菌痰杯：用于痰液采样使用。 3.1.2 无菌拭子：用于咽拭子采样使用。无菌拭子包括有采样棒，采样棉棒，采样棉签，一次性拭子等。 3.2 痰液的采集 3.2.1 以采集清晨第1-2口痰为佳。 3.2.2 自然咯痰法：先让病人用清水漱口数次，以除去口腔内大量杂菌，用力自气管深部咳出痰液吐至无菌试管内，对于痰量少或无痰的病人可采用雾化吸入加温至45℃的10%氯化钠水溶液而使痰易排出。 3.3 咽拭子标本的采集 3.3.1 采取前数小时不得用消毒药物漱口，对刚治疗过或用药物的患者，最好在停药24小时后采集标本。 3.3.2用棉拭子采集咽部标本时应小心、准确，避免触及舌、口腔粘膜和唾液，以免污染。 3.3.3让患者头部微仰，嘴张大，并发“啊”音，露出两侧咽扁桃体，手持拭子在病人两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次；无菌拭子取出后放入无菌试管后送检。 3.4 样本的运输：因肺炎支原体在体外极易死亡，采样后的痰液或咽拭子应尽快送检进行培养，室温保存不超过四个小时。 3.5 样本的接种：
B19病毒抗体检测试剂盒（胶体金法） 说明书 【产品名称】B19病毒抗体检测试剂盒（胶体金法） 【包装规格】24人份/盒 48人份/盒 【预期用途】用于检测试验血清中的B19病毒抗体(IgM/IgG) 【检验原理】用B19病毒抗原固相硝酸纤维素膜，应用渗滤式间接法原理，检测血清中B19病毒抗体。 【主要组成成份】 1、反应板 24份或48份 2、试剂Ⅰ 1瓶 0.02mol/L PH 7.4 PBS 3、试剂Ⅱ 1瓶胶体金标记物 【储存条件及有效期】产品应储存在2℃～8℃条件中，不能冷冻；有效期24个月。 【样本要求】 1、血清样品不能溶血，应为新鲜血清或2℃～8℃条件保存不超过一周。 2、高脂血症血清不能使用。 【检验方法】 1、滴入二滴试剂Ⅰ于反应板中央孔中，待完全渗入； 2、滴入100μl血清于反应板孔中，待完全渗入； 3、滴加三滴试剂Ⅱ于反应板孔中，待完全渗入； 4、渗入三滴试剂Ⅰ于反应板孔中，待完全渗入。 【结果解释】 阳性：反应板孔中C端出现红色圆斑，T端出现红色圆斑，为B19病毒抗体阳性； 阴性：反应板孔中C端出现红色圆斑，T端不出现红色圆斑，为B19病毒抗体阴性。 失效：反应板孔中C端不出现红色圆斑，或C端、T端均不出现红色圆斑，为试剂盒失效。 【检验方法的局限性】 1、本试剂试验仅用于检测B19病毒抗体而非直接检测B19病毒抗原,因而阳性结果并不能确诊是B19病毒感 染。对患者状况的诊断应结合患者临床体征与症状和试验结果的综合分析。 2、抗体含量低的血清样品，不能被检测出来是可能的。部份B19病毒感染的患者，不产生抗体或产生少量 的抗体。此时，可能显示阴性结果。 3、试验结果可疑时，应用PCR法确诊。 【产品性能指标】 1、批内精密度：阳性符合率和阴性符合率均应≥95%，反应斑点颜色深浅程度应接近。 2、批间精密度：阳性符合率和阴性符合率均应≥95%。 【注意事项】 1、本产品尚未获得产品注册证号，仅供研究，不用临床诊断。 2、试验一旦开始操作，应按操作步骤连续进行，直至结束。 3、试剂盒从冰箱取出时，应使试剂恢复至室温。
218例肺炎支原体肺炎临床分析 发表时间：2010-05-27T16:09:41.233Z 来源：《中外健康文摘》2010年第2期供稿作者：吴文华[导读] 随着医学的发展，检测水平的提高，人们生活及卫生条件的改善，细菌性疾病逐渐被控制 吴文华 (黑龙江省勃利县人民医院黑龙江勃利 154500) 【中图分类号】R563.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085 (2010)02-0117-02 【关键词】肺炎支原体肺炎临床分析 肺炎支原体肺炎是由肺炎支原体引起的急性呼吸道感染和肺部炎症，病原为肺炎支原体是介于细菌和病毒之间的原核细胞型微生物。无细胞壁。由口鼻分泌物经空气飞沫传播，侵入上呼吸道，并向气管-支气管和肺蔓延，其致病性在于产生过氧化物损害气道黏膜细胞。肺炎支原体肺炎是儿童和青年呼吸道感染最常见病，秋冬季节发病较多。肺炎支原体传染主要发生在急性期咳嗽时的飞沫经呼吸道吸入感染。常伴发咽炎、耳鼓膜炎、气管炎和支气管炎。 随着医学的发展，检测水平的提高，人们生活及卫生条件的改善，细菌性疾病逐渐被控制，但肺炎支原体等非细菌感染性疾病出现增多的趋势。现就肺炎支原体肺炎诊断和治疗讨论如下： 1 临床资料 1.1病例 2003年9月至2008年9月我院内科共收治肺炎支原体肺炎218例，占同期住院病人的21.5％。218例中，男132例，占61％；女86例，占39.2％。6至16岁71例，占3 2.6％，16岁以上147例，占67.4％。217例(99.5%}6)以发热、刺激性咳嗽为突出表现，l例(0.5％)以溶血性贫血起病，13例(12．0％)伴呕吐、腹泻及肝功损害，11例(5.1％)伴心肌炎，9例(4.1％)伴猩红热样皮疹，8例( 3.7％)伴游走性关节痛，7例(3.2％)伴咽痛、胸闷及胸痛。体检：双肺呼吸音粗82例(37.6％)，下肺呼吸音减弱78例(35.8％)，双肺可闻及少许干罗音35例(16.1％)，双肺可闻及哮鸣音及湿性罗音23例(10.6％)。 1.2实验室检查白细胞升高82例(40.8％)，白细胞降低23例(44.0％)，白细胞正常113例(6.0％)，均有血沉增快20～-40mtll/h。 用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺炎支原体(MP)抗体，在MP感染症状发作7天左右，血清中特异性IgM抗体可被检出，10～30天达高峰，12～26周消失[1]。而测血清冷凝素(属IgM型)阳性率56％，冷凝素大多于起病后第1周末或第2周初开始出现，至第3～4周达高峰，以后降低，2～4月消失。此为非特异性反应[1]。本组IgM升高109例(50.0％)，IgM及IgG升高96例(44.0％)，IgG≥4倍升高13例(6.0％)。 1.3 X线检查以支气管肺炎改变78例(35.8％)，肺门阴影增浓为主者58例(26.6％)，问质性肺炎改变52例(23．9％)，右下肺炎改变30例(13.8％)。 1.4诊断通过ELISA法测Mt，抗体、结合症状、体征及x线等检查，103例(47.2％)在起病l周确诊为肺炎支原体肺炎，102例(46.8％)在起病l～2周得到确诊，13例(6.0％)在起病2～3周确诊。 1.5治疗有190例(87.2％)曾以上呼吸道感染、急性支气管炎、支气管肺炎(病毒性和／或细菌性)，用“青霉素”、“头抱类抗生素”等治疗，11例(5.0％)以“心肌炎”治疗，8例(3.7％)以“风湿热”治疗，8例(3.7％)以“肝炎”治疗，1例(0.5％)以“溶血贫血”治疗等，未见好转，才查MP抗体，确诊为肺炎支原体肺炎，改用大环内酯抗生素，疗程轻症3～4周，重症4～6周，重症患儿加用肾上腺皮质激素治愈。 对于大环内酯类抗生素的选用，因考虑红毒素剐作用较大，半衰期短，组织内及细胞内浓度较低，多选用罗红霉素，用量为5～10mg/kg·d，分两次口服，疗程3～4周或克拉霉素，用量为10～15mg/kg·d，分两次口服，疗程2～3周，静脉滴注20mg/kg·d，症状缓解，改为口服，总疗程3～4周，或阿奇霉素10mg/kg·d，每天1次口服，或静脉滴注，3天后，停用7天，为l疗程，连用3～4疗程。 2 讨论 肺炎支原体肺炎是儿童及青年常见的一种肺炎，婴幼儿也不少见，主要通过呼吸道飞沫传染，近几年有增多趋势，除肺炎外，还可表现为支气管炎、气管炎及咽炎，不少门诊病人症状较轻，如不测肺炎支原体抗体，极易漏诊。而且部分患儿有多个系统病变表现，如心肌炎、溶血性贫血、肝炎、各型皮疹、游走性关节痛等。肺外疾病可伴有呼吸道感染症状，也可直接以肺外表现起病。故儿童如有发热、咳漱、同时伴有其他脏器受累、血沉增高而中毒症状不重者，应考虑MP感染，必须进一步用ELISA测血清中1VI}，抗体，此法灵敏，特异性高，且快速、经济，为目前诊断MP感染的一种实用而可靠的血清学方法[川，以便早发现、早诊断、早治疗，防止误诊及抗生素的滥用。参考文献 [1]官道华，吴升华，主编．感染病学．北京：人民卫生出版社，2002.3：726～72.
猪支原体肺炎的诊治 2010-12-23 作者：方荣奎 摘要：介绍了猪支原体肺炎的流行病学、临床症状、病理变化,总结了其预防和治疗措施,以期为该病的防治提供参考。 关键词：猪支原体肺炎;流行病学;病理变化;治疗措施 随着畜牧业的发展,养殖集约化、规模化生产迅速形成,畜牧业在景东县已成为支柱产业,因此对猪的许多疫病、疫情特别是传染病的防治工作显得越来越重要。猪支原体肺炎是影响景东县养猪业的传染病之一,该病又称猪地方流行性肺炎,俗称猪气喘病,是由猪肺炎支原体引起的猪的一种慢性呼吸道传染病。不同年龄、性别和品种的猪均能感染,但乳猪和断乳仔猪易感性最高,发病率和死亡率较高,其次是怀孕后期和哺乳期的母猪,育肥猪发病较少,病情也轻。母猪和成年猪多呈慢性和隐性。为了减少猪支原体肺炎的发病率和死亡率,保证养殖业的健康发展。现将其防治措施总结如下。 1流行病学 该病一年四季均可发生,自然病例仅见于猪。在饲养管理和卫生条件较差、气候骤变和寒冷、多雨、猪舍潮湿和拥挤、通风不良、饲料质量差时更易发病和死亡。猪只年龄较小、体质较差更易感。病猪和带菌猪是本病的传染源,很多地区和猪场由于从外地引进猪只时,未经严格检疫购入带菌猪,引起本病的暴发。仔猪从患病的母猪感染,病猪在临床症状消失后,在相当长时间内不断排菌,感染健康猪。本病一旦传入后,如不采取严密措施,很难彻底扑灭。病猪与健康猪直接接触,或通过飞沫经呼吸道感染[1]。 2临床症状 一是急性型。主要见于新疫区和新感染的猪群,病初精神不振,头下垂,站立一隅或趴伏在地,呼吸次数剧增,达60~120次/min。病猪呼吸困难,严重者张口喘气,发生哮鸣声,似拉风箱,有明显腹式呼吸,咳嗽次数少而低沉,有时会发生痉挛性阵咳。体温一般正常,如有继发感染则可升到40 ℃以上,病程一般为1~2周,病死率较高[2]。二是慢性型。多由急性转来,也有部分病猪开始时就取慢性经过,常见于老疫区的架子猪、育肥猪和后备母猪。主要临床症状为咳嗽,清晨和傍晚气温低时或赶猪喂食和剧烈运动时咳嗽最明显。咳嗽时四肢叉开,站立不动,背拱,颈伸直,头下垂,用力咳嗽多次,声音粗厉、深沉、洪亮,严重时呈连续痉挛性咳嗽,常出现不同程度的呼吸困难,呼吸次数增加和腹式呼吸(喘气)[3]。上述临床症状时而明显、时而缓和,食欲变化不大,但病势严重时食欲减少或完全不食。病期较长的小猪,身体消瘦而衰弱,生长发育停滞,病程可拖延2~3个月,甚至长达6个月以上。三是隐性型。可由急性或慢性转变而成。在饲养管理条件好的情况下感染后不表现临床症状。饲养管理恶劣,病情恶化而出现急性或慢性临床症状,甚至引起死亡。 3病理变化 主要见于肺、肺门淋巴结和纵隔淋巴结。急性死亡可见肺有不同程度的水肿和气肿。在心叶、尖叶、中间叶及部分病例的隔叶前缘出现融合性支气管肺炎,以心叶最为显著,尖叶和中间叶次之,然后波及到隔叶。早期病理变化发生在心叶,如粟粒大至绿豆大,逐渐扩展而融合成多叶病理变化,成为融合性支气管肺炎,两侧病理变化大致对称,病理变化部位的颜色多为淡红色或灰红色,半透明状,界限明显,如鲜嫩肌肉,俗称“肉变”。随着病情延长和加重,病理变化部位转为浅红色、灰白色或灰红,半透明状态的程度减轻,俗称“胰变”或“虾肉样变”。肺门和隔淋巴结显著肿大,有时边缘轻度充血,继发感染细菌时,引起肺和胸膜纤维毒性、化脓性和坏死性病理变化,还可见其他脏器的病理变化。组织学变化,早期以间质性肺炎为主,以后则演变为支气管性肺炎,支气管和细支气管上皮细胞纤毛数量减少,小支气管周围的肺泡扩大,泡腔充满多量炎性渗出物,肺泡间组织有淋巴样细胞增生。急性病例中,扩张的泡腔内充满浆液性渗出物杂有单核细胞、中性粒白细胞、少量淋巴细胞和脱落的肺泡上皮细胞[4]。慢性渗出物中液体成分减少,主要是淋巴细胞浸润。4预防措施