微生物学实验复习题
一、选择题
1.革兰氏染色的关键操作步骤是：
A. 结晶紫染色
B. 碘液固定
C. 酒精脱色
D. 复染
2.放线菌印片染色的关键操作是：
A. 印片时不能移动
B. 染色
C. 染色后不能吸干
D. A和C
3.高氏培养基用来培养：
A. 细菌
B. 真菌
C. 放线菌
4.肉汤培养基用来培养:
A. 酵母菌
B. 霉菌
C. 细菌
5.无氮培养基用来培养:
A. 自生固氮菌。
B. 硅酸盐细菌
C. 根瘤菌
D. A、B 均可培养
E. A、B、C 均可培养
6.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加:
A. 二甲苯
B. 水
C. 香柏油
7.常用的消毒酒精浓度为:
A. 75%
B. 50%
C. 90%
8.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是:
A. 20ml/M3
B. 6ml/M3
C. 1ml/M3
9.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是:
A. 121℃/30min
B. 115℃/30min
C. 130℃/30min
10.巴氏消毒的工艺条件是:
A. 62-63℃/30min
B. 71-72℃/15min
C. A.B. 均可
11.半固体培养基的主要用途是:
A. 检查细菌的运动性
B. 检查细菌的好氧性
C. A.B. 两项
12.半固体培养基的琼脂加入量通常是:
A. 1%
B. 0.5%
C. 0.1%
13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是:
A. 排冷气彻底
B. 保温时间适当
C. 灭菌完后排气不能太快
D. A-C
14.目镜头上的“K”字母表示:
A. 广视野目镜
B. 惠更斯目镜
C. 补偿目镜
15.目镜头上的“P”字母表示:
A. 平场目镜
B. 广视野目镜
C. 平场补偿目镜
16.物镜头上的“PL”字母表示:
A.正低相差物镜
B.正高相差物镜
C.负高相差物镜
17.物镜头上的“UVFL”字母表示。
A. 无荧光物镜
B. 照相物镜
C. 相差物镜
18.镜头上标有“TC”字母的镜头是:
A. 相差调整望远镜
B. 摄影目镜
C. 相差目镜
19. “PA”表示:
A. 马铃薯培养基
B. 高氏培养基
C. 肉汤培养基
20.无菌室空气灭菌常用方法是:
A. 甲醛熏蒸
B. 紫外灯照射
C. 喷石炭酸
D. A.B. 并用
21.干热灭菌的关键操作是:
A. 灭菌物不能有水
B. 保温过程中不能开箱门
C. 降温不能太快
22.霉菌水浸制片的关键操作是：
A. 菌丝要分散
B. 菌丝首先要用50% 的乙醇浸润
C. 盖盖玻片不能有气泡
D. A-C
23.加热法染芽胞的染料通常是:
A. 孔雀绿
B. 结晶紫
C. 复红
D. 蕃红
24.复红法染鞭毛的关键操作是:
A. 玻片干净
B. 染料新鲜
C. 菌体活化适当
D. A、B、C
25.镀银法染鞭毛的关键操作是:
A. 玻片干净
B. 染料无沉淀
C. 加热适当
D. 菌体活化适当
E. A-D
26.进行简单染色使用的染色液通常是:
A. 复红
B. 蕃红
C. 结晶紫
D. 孔雀绿
E. A-D 均可
27.物镜头上的“APO”字母代表:
A. 消色差物镜
B. 复消色差物镜
C. 半消色差物镜
28.物镜头上的“Ach”字母表示:
A. 平场物镜
B. 超平场物镜
C. 消色差物镜
29.物镜头上的“NH”字母表示：
A. 正相差物镜
B. 负相差物镜
30.物镜头上的“0.17”表示：
A. 要求的盖玻片厚度
B. 要求的载玻片厚度
C. 镜头浸油的深度
31.镜头上标有“NFK" 字母的镜头是：
A. 照相目镜
B. 荧光目镜
C. 相差目镜
32.目镜头上的“PK”字母表示：
A. 平场目镜
B. 补偿目镜
C. 平场补偿目镜
33.物镜头上的"Splan" 字母表示:
A. 超平场物镜
B. 平场物镜
C. 消色差物镜。
34.物镜头上的"Splan Apo" 表示:
A. 超平场复消色差物镜
B. 超平场半消色差物镜
C. 超平场物镜
35.物镜头上的"Plan Apo" 表示:
A. 超平场物镜
B. 平场物镜
C. 平场复消色差物镜
36.物镜头上的"Plan" 字母表示:
A. 平场物镜
B. 消色差物镜
C. 超平场物镜
37.目镜头上的"WF" 字母表示:
A. 广视野高眼点补偿目镜
B. 高眼点目镜
C. 广视野目镜
38.目镜头上的"SWK" 字母表示:
A. 超广视野目镜
B. 高眼点补偿目镜
C. 平场补偿目镜
39.目镜头上的"WHK" 字母表示:
A. 超广视野目镜
B. 广视野高眼点目镜
C. 平场补偿目镜
40.物镜头上的"F.L" 字母表示:
A. 消色差物镜
B. 半消色差物镜
二、判断题
1.无菌吸管上端塞入棉花是为了过滤口中的有菌空气。
2.无菌吸管上端塞入棉花的目的是为了防止菌液吸入口中
3.稀释平板测数时，放线菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300 个之间的稀释度进行计数。
4.稀释平板测数时，细菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300 个之间的稀释度进行计数。
5.稀释平板测数时，细菌，放线菌，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在 30-300 个的稀释度进行计数。
6.稀释平板测数时，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100 个的稀释度进行计数。
7.稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100 个的稀释度进行计数。
8.用混菌法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是1ml。
9.用涂抹法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是0.1ml。
10.用油镜镜检时应将聚光器升至最高。
11.使用高倍镜时, 可将聚光器升至最高。
12.为了满足微生物对微量元素的需要，配制培养基所用的水最好使用自来水。
13.稀释测数用的无菌水通常是由自来水灭菌而成。
14.观察根霉，青霉只需用低倍镜观察即可。
15.实验室通常使用血球计数板测微生物的总菌数。
16.浸油的油镜头可用软的卫生纸擦净。
17.为了节省时间，可直接在染色涂片上滴加香柏油后, 直接用油镜观察。
18.使用油镜的正确操作步骤是:
（1）低倍镜观察。
（2）高倍镜观察。
（3）转出高倍镜头，滴加香柏油后用油镜观察。
19.在擦拭显微镜镜头时，应向一个方向擦拭。
20.显微镜镜头的放大倍数越大，它的数值孔径值越大，其镜口角也越大。
21.稀释平板测数通常是采用十倍稀释法。
22.稀释平板测数通常采用的是二倍稀释法。
23.做稀释平板测数时，只需一支吸管从头稀释到尾即可。
24.做稀释平板测数时，每做一个稀释度都必须更换一支无菌吸管。
25.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法, 每个平皿中的菌液加入量都是 1ml。
26.稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法，每个平皿中的菌液加入量都是 0.1ml。
27.实验室做固体培养基时，常加 1.8% 的琼脂作凝固剂，做半固体培
养基时, 琼脂加入量通常是 0.5%。
28.实验室做固体培养基，常加 2% 的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是 1%。
29.E. coli经革兰氏染色后，菌体呈红色，它是革兰氏正反应细菌。
30.在光学显微镜下，根霉的孢子囊是透明的。
31.使用手提灭菌锅灭菌后，为了尽快排除锅内蒸汽，可直接打开排气阀排气。
32.所有苏云金杆菌的芽胞在菌体的中央。
33.所有真菌菌落的表面干燥，呈绒毛状。
34.所有放线菌菌落表面干燥，呈粉粒状。
35.所有细菌菌落的表面都是光滑湿润状。
36.镜台测微尺每小格的实际长度是10 微米。
37.目镜测微尺每小格的实际长度是 10μm。
38.镜台测微尺每小格的实际长度是 10nm( 纳米)。
39.血球计数板两边的平台比计数区高 0.1cm。
40.血球计数板两边的平台比计数区高 0.1mm。
41.棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的 2/3。
42.棉花塞入试管的长度应为棉塞全长的 1/2。
43.摆斜面的长度应不超过试管长度的 2/3。
44.摆斜面的长度应不超过试管长度的1/2。
45.血球计数板计数区的面积是 1 mm2。
46.用血球计数板计数时，任数 5 个大方格(80 个小格) 的菌数即可。
47.在使用细菌计数板计数时，为了防止计数偏大，计数区四周压线的菌只能数两边。
48.目镜测微尺每格的实际长度是未知的，需用长度已知的镜台测微尺校正。
49.测微生物的细胞大小时, 需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度。
50.测微生物细胞大小时，需要校正的是目镜测微尺每格的实际长度。
51.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000mm3。
52.血球计数板计数区共有400 个小格，每小格的面积是 1/400 cm2。
53.用分装器将培养基分装试管时，应谨防培养基沾染试管口。
54.琼脂的熔化温度是 80℃以上，凝固温度是 45℃以下。
55.琼脂的熔化温度是 95℃以上，凝固温度是 45℃以下。
56.玻璃器材洗净后在急需时可采用高压蒸汽灭菌，而不能用干热灭菌。
57.细菌计数板每小格的体积是 1/20000 mm3。
58.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000cm3。
59.无菌室用甲醛熏蒸消毒后可喷氨水以减少甲醛的刺激。
三、填空题
1.霉菌水浸片的制片程序是_________, ____________, ___________, _____________,_____________, _________________。
2.放线菌印片染色的操作程序是_______________, _____________,
_____________, _______________, ____________, ________________。
3.固体培养基常用__________ 作凝固剂，普通固体培养基的用量一般为__________ ，半固体培养基的用量一般为_____________。
4.简单染色的操作程序是_____________, ___________, ___________, __________, __________, __________。
5.使用手提式灭菌锅进行灭菌的操作程序是__________, __________, __________, _________,___________, __________, ___________, __________, ___________, ____________。
6.实验室配制固体培养基的操作程序是______ __、____________、
_____________、_______________、___________________、_____ ________________、
___________________。
7.有荚膜的细菌用负染色法染色后, 荚膜为____ 色，菌体为_____ 色。
8.细菌经革兰氏染色后，革兰氏正反应菌呈_______，革兰氏负反应菌呈________。
9.细菌经简单染色后呈_________。
10.显微镜的光学系统由_________,_________,__________和__________ 组成。
11.显微镜的机械部分包括__ _______、____ _____、___________、
____________、____________、___________、______________、____ ______、____________等九部分组成。
12.高氏培养基通常用来培养_________ ，其 pH 值为__________。
13.PA 培养基通常用来培养_________，其 pH 值为___________。
14.牛肉膏、蛋白胨培养基通常用来培养____ 菌，其pH 值为________。
15.干热灭菌的工艺条件是_____________________。
16.使用显微镜低倍镜观察时, 聚光器应该__________，使用显微镜高倍镜观察时，聚光器应该____________________。
17.革兰氏染色的关键操作是_____________________。
18.显微镜的放大倍数越大，焦深________ ，调焦应该_____________。
19.按培养基的形态, 可将培养基分为____________、______ ____、
__________三种类型。
20.配制常规培养基时通常用________________水。
21.干热灭菌通常用来灭菌 _____________，培养基的灭菌通常用________________。
22.细菌稀释测数通常采用___________ 稀释法，稀释用试管无菌水为__________ 毫升。
23.配制培养基时常用__________ 和 ____________ 调节 pH 值。
24.按培养基的特殊用途, 可将培养基分成 __________、_________、
________________ 等。
25.选择培养基可用来分离培养我们所需的特殊微生物类群，例如我们要从土壤中分离纤维分解菌，可以利用 ________作唯一碳源来筛选 _________；要分离产蛋白酶的微生物，可以利用 __________ 作唯一氮源分离__________。
26.革兰氏染色的操作程序是__________, __________, ___________, __________, ________________, _____________, ____________, _____________, ____________, ____________, ___________, ____________。
27.培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或_________ 的
营养基质。按营养物质的不同来源可分为 ___________、_____________、_____________ 三大类。
28.高倍镜头的数值孔径通常为_________，放大倍数为____________。
29.油镜头的数值孔径通常为_____________，放大倍数为____________。
30.低倍镜头的数值孔径通常是__________，放大倍数为____________。
31.穿刺接种使用的接种工具为_________，斜面接种使用的接种工具为_________。
32.进行稀释测数使用的主要器材有_________、______________、___________、_________。
33.用孔雀绿和复红作细菌芽胞染色时，可使菌体呈_____ 色，使芽胞呈_______ 色。
34.用日光灯作光源时, 通常用_________反光镜，用自然光作光源时，通常用_______ 反光镜。
35.无菌室杀菌通常采用____________ 和___________相结合的方法。
36.半固体培养基通常用来检查____________________。
37.摆试管斜面的基本操作方法是________、 ________、 ____________。
38.不能加热灭菌的液体培养基应采用_______________ 除菌，通
常用的器皿有_____________和______________。
39.蓝细菌的培养可用___________________ 培养基。
40.分离酵母菌时为了抑制细菌的生长，通常用________ 培养基。
41.从土壤中分离真菌时, 通常在培养基中加入________和__________ 抑制细菌的生长。
42.测微生物大小使用的主要工具是_____________、_____________和
________ __。
43.进行酵母菌的显微计数使用的主要工具是____________ 和_______________。
44.进行细菌的显微计数时使用的主要工具是___________和_____________。
45.普通光学显微镜测酵母菌的大小的操作程序是________________ _________________、_______________、_______________、_______________、________________、 ________________、、 __________________、 ____________________。
46.显微计数的操作程序是_____________________、 __________________、
_________________________、 _____ _____________、 _____________________、
_____________________、 _____________________、 __________________________。
47.荚膜染色法的操作程序是__________________、 ___________________、
_______________________、 ______________________、 ______________________、
_______________________、 ________________________。
48.芽胞染色的操作程序是___________________、 _____________________、
_____________________、 ______________________、 _________________________、
_____________________、 ______________________、 _________________________。
49.芽胞染色的关键操作是_____________________。
50.放线菌印片染色的关键操作是___________________。
51.用负染色法染荚膜的关键操作是____________________。
52.摇床振荡培养通常用来培养___________ 微生物，享格特的厌氧操作方法通常用来培养______________菌。
53.革兰氏染色反应与细菌细胞壁的_________ 和_________有关。在革兰氏染色过程中，当用 95% 酒精处理后，就放在显微镜下观察，革兰氏阳性菌呈______ 色，而革兰氏阴性菌呈_______ 色。
54.血球计数板与细菌计数板的主要差别是_______________。
55.制霉菌水浸片时加棉兰染色液可使菌体呈_____________色。
56.Anabaena azotica的异型胞通常是________ 生，在光学显微镜下它是_________ 的，细胞两端有 _______ 。它能控制 ________________ 的进入，保持异型胞内 ____________，以利于 ____________。
57.配制培养基时，应注意各种营养物质的配比，特别是______________。一般而言, 当C : N ≥5 : 1 时, 有利于________；当 C : N ∠5 : 1 时有利于___________。
58.由于各种微生物对某种化合物如抗生素、染料的敏感性不同，可以利用这一特征来从土壤中分离出不同类群的微生物。如在培养基中加入_________ ，会杀死或抑制____________ 的生长而分离出___________；在培养基中加入__________ ，有利于分离到革兰氏阴性菌。
59.细菌在革兰氏染色过程中,最后用蕃红复染因是_____________________, _______________________, _________________________。
60.高倍镜下能看到的物象在油镜下看不到往往是由于____________ 和_______________ 引起。
61.微生物在培养基中生长时，由于其____________ 而使培养基___________ 发生改变；所以在配制培养基时，为维持该条件的相对恒定，常在培养基中加入缓冲物质如____________或____________。
62.一般而言, 微生物在含糖基质上生长，会产__________ ，而使_____________；微生物分解蛋白质或氨基酸会产____________ ，而使_____________。
63.在微生物培养过程中使用的培养皿首先是被__________ 采用的，因此又称培养皿为_______dish。 _________ 在其妻子的启发下，将固体培养基使用的凝固剂由明胶改为_____________。
64.显微镜的微动螺旋每转一圈升降距离为___________________。
65.两个典型的革兰氏正反应细菌和革兰氏负反应细菌经革兰氏染色后都呈阴性反应往往是由于___________________ 和____________ 引起。
66.检查乳品和饮料是否含有__________ 等肠道细菌，可采用_______________ 培养基，在这种培养基平板上____________ 会形成具有__________光泽的紫黑色小菌落。
67.细菌鞭毛经镀银法染色后呈_________ 色。
68.细菌鞭毛经李夫森法染色后呈_____________ 色。
69.由于升汞(HgCL2) 有腐蚀作用, 所以不能用于__________ 消毒，特别是___________ 制品。
70.无氮培养基通常用来培养____________ ，其氮源来自_______________。
四、名词解释
1.电子显微镜
2.普通光学显微镜
3.合成培养基
4.培养基
5.天然培养基
6.半合成培养基
7.革兰氏染色法。
8.简单染色。
9.稀释平板计数法
10.显微直接计数法
11.巴氏消毒
12.间歇灭菌
13.消毒
14.灭菌
15.过滤除菌
16.湿热灭菌
17.干热灭菌
18.选择培养基
19.加富培养基
20.鉴别培养基
21.数值孔径
22.分辨力
23.超净工作台
24.纯培养技术
25.焦深
26.暗视野显微术
27.荧光显微术
28.负相差
29.正相差
五、问题
1.试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法。
2.以测苏云金杆菌工业菌粉中的活菌数为例，试述稀释平板计数的基本方法。
3.试述划线分离的操作方法。
4.如何检查细菌的运动性?
5.简述配制培养基的基本原则:
6.试述配制培养基的基本过程及应该注意的问题。
7.试述显微计数的基本方法。
8.标本片上的某一物象，第一次看到后如何再次找到它?
9.试述在光学显微镜下所看到的Anabaena azotica的主要特征。
10.革兰氏染色反应的成败关键是什么? 为什么革兰氏染色有十分重要的理论与实践意义?
11.如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体?
12.察氏培养基的组成为: 蔗糖:30 克, 磷酸氢二钾: 1.0 克, 硝酸钠:2
克, 硫酸镁 0.5 克, 氯化钾: 0.5 克, 硫酸亚铁: 0.01 克,蒸馏水: 1000 ml. 试述:
(1)该培养基的 C 源, N 源各是什么物质。
(2)除 C 源和 N 源外的其它物质起什么作用:
(3)该培养基为什么不加生长因子?
微生物学实验复习题答案
一、选择题
1.C
2.D
3.C
4.C
5.D
6.C
7.A
8.B
9.A
10.C
11.C
12.B
13.A
14.C
15.A
16.A
17.A
18.A
19.A
20.D
21.A
22.D
23.A
24.D
25.E
26.A
27.B
28.C
29.C
30.A
31.A
32.C
33.A
34.A
35.C
36.A
37.C
38.A
39.B
40.B
二、判断题
1.对。
2.错。
3.对。
4.对。
5.错。
6.对。
7.错。
8.对。
9.对。
10.对。
11.错。
12.对。
13.对。
14.错。
15.错。
16.错。
17.错。
18.对。
19.对。
20.对。
21.对。
22.错。
23.错。
24.对。
25.错。
26.错。
27.对。
28.错。
29.错。
30.错。
31.错。
32.错。
33.错。
34.错。
35.错。
36.对。
37.错。
38.错。
39.错。
40.对。
41.对。
42.错。
43.错。
44.对。
45.对。
46.错。
47.对。
48.对。
49.错。
50.对。
51.对。
52.错。
53.对。
54.错。
55.对。
56对。
57.对。
58.错。
59.对。
三、填空题
1.加一滴水于载玻片中央，用解剖针挑取菌丝少许, 将菌丝用50% 的酒精浸润，将菌丝用蒸馏水水洗，将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散，盖上盖玻片
2.印片 , 干燥 , 固定 , 复红染色 2-3 分钟 , 水洗 , 晾干
3.洋菜( 琼脂) ， 1.5-2.0%， 0.5%
4.涂片，干燥，固定，复红染色1-2 分钟，水洗，晾干
5.锅内加水，灭菌物体装锅，对称上紧密封螺帽将锅密封，加热升温，排尽锅内冷空气，升温至灭菌工艺条件{一般为 98kpa}，在工艺条件下保压计时{一般为30 分钟} ，到时间后切断热源，降温，出锅
6.照配方称取药品，将药品溶解在一定量的水中后加热煮沸，将琼脂按量称取后用水浸湿，将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中，待琼脂全部融化后调节 pH 值，补充损失的水分，分装培养基入不同的容器中
7.无色，红色
8.紫色，红色
9.所染染料的颜色
10.反光镜 , 聚光镜 , 物镜 , 目镜
11.镜座，镜臂，载物台，转换器，镜筒，推动器, 粗动螺旋 ,微动螺旋，聚光镜升降螺旋
12.放线菌，7.5-8.0
13.真菌，5-6
14.细菌、6.8-7.2
15.160-170℃ /2h
16.降低，适当升高
17.酒精脱色
18.越小，越小心
19.液体，固体，半固体
20.自来
21.玻璃器材，高压蒸汽灭菌
22.10 倍 , 9
23.1 mol NaOH、 1 mol HCL
24.选择培养基，加富培养基，鉴别培养基
25.纤维素，纤维分解菌，酪蛋白，蛋白分解菌
26.涂片，干燥，固定，结晶紫染色 1 分钟，水洗, 碘液媒染 1 分钟，水洗， 95% 的乙醇脱色 25 秒，水洗，蕃红复染 3-5 分钟，水洗，晾干
27.积累代谢产物，天然培养基，合成培养基,，半合成培养基
28.0.65， 40x
29.1.25， 100x 或90x
30.0.25， 10x 或 8x
31.接种针，接种环
32.酒精灯， 1ml 无菌吸管， 9ml 试管装无菌水， 9cm 的无菌平皿
33.红色，绿色
34.平面，凹面
35.紫外灯照射，喷洒化学药剂( 如酚)
36.细菌的运动性
37.将摆斜面用特制木条放在桌面上，将装有固体培养基的试管趁热放在特制木条上摆成斜面，斜面长度不得超过试管长度的 1/2，将试管棉塞部分用灭菌报纸盖上，以防空气中微生物落到棉塞上引起污染
38.过滤法，蔡氏细菌过滤器，滤膜
39.无氮
40.酸性
41.孟加拉红，链霉素
42.显微镜，镜台测微尺，目镜测微尺
43.显微镜血球计数板。
44.显微镜细菌计数板。
45.将镜台测微尺置载物台上，调焦找到台尺，在低倍镜下校正目镜测微尺每格的长，在高倍镜下校正目镜测微尺每格的长，去掉台尺换上待测样本片，在高倍镜下测出十个酵母菌宽和长的格数，将校正值乘入，算出十个酵母菌的平均宽和平均长，以平均宽Xμm ×平均长 Yμm 表示酵母菌的大小。
46.将待测菌进行适当的稀释，将计数板置于载物台上 , 在低倍镜下找到计数区, 将菌液加到计数区上,调焦看到菌体,按五点取样法计数五个大方格的菌数,计算每小格的含菌数，计算出单位体积( 如每 ml) 中的含菌数。
47.涂片，风干，加复红染色 3-5 分钟，水洗，晾干，加墨素涂抹，风干。
48.涂片，干燥，固定，孔雀绿加热染色 15 分钟，水洗，复红染色2-3 分钟，水洗，晾干。
49.孔雀绿加热染色适当
50.印片时不能移动
51.涂抹墨素要薄
52.好气，专性厌氧
53.结构，组成，紫，无
54.前者计数区的深度是后者的五倍
55.浅兰
56.间生，透明，极节，氧气，低氧分压，固定分子氮
57.C:N 比 ( 碳氮比 )，菌体生长，积累代谢产物
58.青霉素( 链霉素)，细菌和放线菌，真菌，结晶紫
59.G-细菌经结晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色后，菌体紫色脱去，故需用蕃红复染，这样在光镜下才能见到红色的菌体。
60.玻片置反，菌体着色太浅
61.新陈代谢， pH 值，碳酸盐(CaCO3)，磷酸盐
62.酸， pH 下降, 碱， pH 上升
63.Petri， Petri， Hesse ，琼脂。
64.0.1毫米
65.酒精脱色时间过长，菌体培养时间太长
66.大肠杆菌(E.Coli)，伊红-- 美兰，大肠杆菌(E.Coli)，金属
67.褐
68.红
69.金属器皿，铝
70.自生固氮菌，空气中的 N2。
四、名词解释
1.电子显微镜是利用电子波波长短，分辨力高的特点以电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成象的超显微镜检装置。
2.用自然光或者灯光作光源镜检物体的显微镜。
3.由化学成分已知的营养物质配制而成的培养基。
4.人工配制的供微生物生长繁殖并积累代谢产物的一种营养基质。
5.由化学成分不完全清楚的天然物质如马铃薯, 麸皮等配制而成的培养基。
6.由化学成分已知的化学物质和化学成分不完全清楚的天然物质配制而成的培养基。
7.革兰氏染色是细菌的一种鉴别染色法，细菌首先用结晶紫染色，再用碘液固定，然后用 95% 的酒精脱色,最后用蕃红复染。凡是菌体初染的结晶紫被酒精脱去了紫色后，又被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏负反应细菌；凡是菌体初染的紫色不能被酒精脱色，也不能被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏正反应细菌。
8.用单一染料使微生物细胞染上所用染料颜色的染色方法。
9.将一定量的样品经十倍稀释后，用平板培养最后三个稀释度的样品稀释液。待菌落长出后，计数出某一稀释度的菌落数后再乘
以稀释倍数，即为样品中的含菌数。
10.利用血球计数板或细菌计数板在显微镜下测计出每小格的微生物细胞数量后，再换算出单位体积中微生物细胞总数的测数方法。
11.巴氏消毒是法国微生物学家巴斯德发明的一种消毒方法。是在 62-63℃的条件下，保温半小时杀死微生物的营养体 ( 主要是病原菌) 的方法。
12.利用 100℃的温度杀死微生物的营养体. 每次 1 小时连续三天，中间的空隙时间让未杀死的芽胞萌发成营养体，在下一次 100℃的温度下被杀死。如此反复两次可将培养基的微生物( 包括芽胞 ) 全部杀死。该方法适用于没有高压灭菌器的地方进行灭菌处理。
13.只杀死微生物的营养体 ( 主要是病原菌 )，而不能杀死微生物的芽胞的除菌方法。
14.利用物理或化学方法杀死所有微生物包括细菌的芽胞的除菌方法称为灭菌。
15.利用一定孔径的滤膜阻止微生物的通过而除去溶液中或者空气中微生物的除菌方法。
16.利用热的蒸汽杀死微生物的灭菌方法。湿热灭菌又分常压蒸汽灭菌和加压蒸汽灭菌。
17.利用干热空气杀死微生物的方法。其灭菌工艺条件通常为160-170℃/2h 。
18.根据使用的目的，控制培养基的组成成分，使之有利于某种微生物的生长而限制其它微生物的生长，从而能从自然界混杂的群体中分离出某一种单一的微生物。如无氮培养基用来分离土壤中的自生固氮菌。
19.在基本培养基中加入血清，动植物组织液或者其它生长因子而配制出来的营养特别丰富的培养基。
20.根据微生物的代谢特点，通过指示剂的显色反应，用以鉴别不同微生物的培养基。
21.数值孔径是判断物镜和聚光镜性能的重要指标，通常用 N.A 表示。N.A = n.sinα/2( n 为介质折光率，α为镜口角)。
22.分辨力是指显微镜能够分辨出的物体两点间最小距离的能力。它与波长及物镜的数值孔径有关。
23.利用过滤除菌的原理而设计出来的一种无菌操作工作台，鼓风机鼓出的空气通过孔径很小的薄膜将空气中的微生物过滤后变成无菌空气吹向操作台，可防止周围有菌空气流入，能保证操作台始终保持无菌状态，便于无菌操作。
24.纯培养技术是培养某个单一微生物的方法。包括培养基的制作与灭菌。单一微生物的分离与纯化, 和无菌操作接种技术。
25.焦深是指清晰的目的象的上面和下面所看见的物象之间的距离。它与放大倍数成反比，即放大倍数越大, 焦深越小。
26.利用暗视野聚光器能阻止光线直接照射标本，而使光线斜射在标本上。在显微镜中见到黑暗视野中明亮物象的镜检技术。27.以紫外光作光源的显微镜检技术。
28.在黑暗视野中看到明亮物体的相差镜检技术。
29.在明亮视野中看到黑暗物体的相差镜检技术。
五、问题
1.测定微生物细胞的大小主要使用目镜测微尺。其方法如下:
（1）先用长度已知的镜台测微尺校正目镜测微尺。校正的方法是让台尺与目尺重叠, 看台尺的 X 格正好与目尺的 Y 格重叠，然后用计算目尺每格的长. 分别校正目镜测微尺在低倍镜, 高倍镜及油镜下每格所代表的实际长度。
（2）将待测微生物制成水浸片或染色涂片置载物台上，调焦找到微生物后用目镜测微尺测量其宽几格，长几格, 然后乘上相应放大倍数下的校正值。（3）一般测 10 个微生物，然后以平均值表示。
（4）若是酵母、细菌等单细胞微生物, 通常测其宽和长，然后以平均宽 平均长表示, 单位为μm。
2.答：（1）测数前先准备好测数用的 1ml 无菌吸管,9cm 无菌平皿，9ml 试管无菌水和牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。
（2）称取10克工业菌粉加入 90ml 无菌水中置摇床上或用手振荡 20-30分钟，让菌体分散。
（3）将上述振荡过的菌液按无菌操作法进行十倍稀释直到 10-8。
（4）取 9cm 无菌平板皿9 套用记号笔在平皿底编号，10-8编3 套，10-7编3 套，10-6编3 套。
（5）用 1 支 1ml 的无菌吸管，取 1ml 10-8的稀释菌液放入编号10-8的平皿中，如此将三个重复做完。同法取 10-7稀释菌液放入三个编号为10-7平皿中。同法取10-6稀释菌液放入三个编号为10-6 平皿中.( 均要按无菌操作法做)。
（6）将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基熔化冷至 45-50℃后，在酒精灯火焰边按无菌操作法倒入上述 9 套平皿中，每个加入量大约 15-20ml，边加边摇动平皿,，使培养基与菌液充分混匀。
（7）待培养基凝固后,将平板倒过来，置 28-30℃下培养 48 小时后计数。
3. 答：（1）取 9ml 无菌平皿一套在火焰旁按无菌操作法倒人 15-20 ml 营养琼脂，让其冷凝成平板。
（2）左手拿上述平板,右手拿接种环在火焰上灭菌后沾取原始分离物在平板上平行划线三条。
（3）将接种环在火焰上灭菌,左手平板转动大约 70 度，用灭菌接种环通过第一次划线的地方作二次划线，亦划三条。
（4）同上法再作第三次,，第四次划线。
（5）盖上平板盖，将平板倒过来置 28-30℃下培养 2-4 天后观察结果。划的好应在第四次划线处出现单个菌落。
注: 本答案也可画图说明。
4.检查细菌的运动性有两种方法:
（1）镜检法
将待检样品制成菌悬液,滴一点菌液于一盖玻片上，取一凹窝载玻片，将凹窝对准菌悬液盖在盖玻片上，然后将盖玻片和载玻片一起翻转，让菌悬液在凹窝上的盖玻片下。然后在显微镜下观察，观察应找悬液的边缘，因细菌为了更多地接触空气，总向水滴的边缘运动。观察时要注意将细菌的运动与分子的布朗运动区别开。
（2）半固体穿刺法
将待检细菌穿刺接种在半固体试管培养基中, 若细菌仅沿穿刺线生长, 说明细菌不运动。若细菌沿穿刺线向周围扩散生长, 说明细菌有运动性。
5.培养基是人工配制的供不同微生物生长繁殖，或用于积累代谢产物的营养基质。所以配制培养基时应注意以下原则：（1）根据微生物的不同选用不同的培养基，以满足微生物对营养物的需要。如自养型微生物所要求营养较简单，而异养型微生物营养要求较复杂。培养细菌，放线菌，真菌等各有不同的培养基。
（2）注意各种营养物质的浓度与配比。微生物生长所需要的营养物质往往在适当时才生长良好。浓度大往往会抑制微生物的生长。如糖类，各种重金属盐类如果浓度太高，也会影响微生物的生长。同时各种营养物质的浓度比也应注意，特别是 C/N 比。
（3）注意将培养基的 pH 值控制在一定范围内。为了防止因微生物生长繁殖或积累代谢产物后影响培养基 pH 值，常在其中加入磷酸盐，碳酸盐，以维持培养基 pH 值的相对恒定。
（4）同时还应考虑培养基的氧化还原电位及原材料的经济、易购和来源广泛的原则。
6. 制培养基的基本过程是:
（1）按培养基的配方称取各种药品，用量太少的药品应配制成溶液后再取一定量加入。
（2）将各种药品加水溶解，通常是加所需水量的一半。
（3）若配固体培养基，按 2% 的用量称取琼脂，用水将琼脂浸湿一下，用手挤去琼脂中过多的水分，加入 2 的溶液中。
（4）加热至琼脂全部溶解，并补足所需的全部水量。
（5）用 1mol NaOH 和 1mol HCL 调节 pH 至要求值。
（6）用分装器将培养基分装入试管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎，灭菌后备用。注意事项:
（1）过程中，在加热熔化琼脂时，要不断搅拌，以防糊底。
（2）分装时不要让培养基沾染试管口或瓶口，以防培养过程中容易污染杂菌。
7.显微计数通常用来测微生物单细胞的数量，大一点的细胞如酵母菌用血球计数板，小一点的细胞如细菌用细菌计数板。该测数方法不能区别死活细胞，测出的是微生物总的细胞数量。
（1）血球计数板和细菌计数板构造相似，计数区的面积都是1mm2，两者的差别在于血球计数板的深度为 0.1mm。细菌计数板的深度为0.02mm。无论是血球计数板还是细菌计数板计数区都划为 25 个大方格，每个大方格又划为 16 个小格。所以每小格的体积为 1/4000 mm3或 1/20000mm3。
（2）计数时, 先在显微镜下找到计数区，然后将菌液稀释到适当浓度，取少量菌液滴在计数区上盖上特制盖玻片，亦可先盖盖玻片。然后用吸管将菌液从计数板上的沟里加入。靠菌液的表面张力充满计数区。
（3）计数时采取五点取样法数数，即四角各取一个大方格，再在中央取一个大方格。计数时大方格四周压线的细胞只数两边，以防增加数量。（4）将 5 个大方格的菌数加起来除以 80 得出每个小格的菌数，再乘以 4000 即为 1mm3的菌数，再乘上 1000 即为 1ml 的菌数，乘上稀释倍数即为样品含菌数。
8.做到这一点，首先取决于显微镜的好坏，若显微镜上的推动器带有纵横标尺，很容易做到这一点。首先记住标本片放到推动器上的方向，然后记下观察某一物体时推动器上的纵横标尺的数字。如纵 3，横 4。
当标本片拿下来后，若要重复观察原来的物象，只要按原方向将标本片荚在推动器上，将推动器推动到第一次观察该物体的纵，横标尺数字纵 3，横 4，即可看到第一次观察过的物体。
9.Anabaena azotica的主要特征是:
（1）菌体为丝状体，营养细胞为绿色，藻丝不扭曲。
（2）该菌有异型胞, 异型胞间生，无色透明，两端有极点。
（3）厚壁孢子无色、大、两端无极点。
10.答：通过革兰氏染色，可把几乎所有的细菌都分成 G＋和 G－菌两大类细菌，在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异。因此，任何细菌只要通过革兰氏染色，即可提供不少重要的生物学特性方面的信息。
革兰氏染色反应的成败关键是:
（1）菌龄:12-24 小时的纯培养物。
（2）革兰氏染色操作时，要严格控制酒精脱色时间，菌液涂布均匀而薄。
（3）养基的组成。
11.首先要根据分离对象选择适宜的培养基。若要分离真菌应选用马丁- 孟加拉红选择培养基；若要分离细菌应选用牛肉膏蛋白胨培养基；若要分离放线菌应选用高氏培养基。
土样采回来后，用常规的十倍稀释分离法进行稀释分离，若分离细菌，一般稀至 10-8, 若分离放线菌,一般稀至 10-6；若分离真菌，一般稀至 10-4。取最后三个稀释度倒平板获得单个菌落。将平板上出现的单菌落转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度，若不纯，应将培养的单菌落斜面再次进行稀释分离。倒平板获得单菌落，转接斜面培养，同时镜检菌体的纯度。反复几次直到得到菌体单一的单菌落方可认为是某一微生物的纯培养体。
12. （1）该培养基的 C 源物质是蔗糖，N 源物质是硝酸钠。
（2）磷酸氢二钾、硫酸镁、氯化钾、硫酸亚铁为该培养基提供矿质营养。蒸馏水提供水分。
（3）该培养基培养的微生物在培养基上能合成自身所需的全部生长因子，故无需添加生长因素,该培养基所培养的微生物为野生型。
第十一章微生物学实验试题 一、选择题 111818.革兰氏染色的关键操作步骤是： A. 结晶紫染色 B. 碘液固定 C. 酒精脱色 D. 复染 答:( ) 111819.放线菌印片染色的关键操作是： A. 印片时不能移动 B. 染色 C. 染色后不能吸干 D. A和C 答:( ) 111820.高氏培养基用来培养： A. 细菌 B. 真菌 C. 放线菌 答:( ) 111821.肉汤培养基用来培养: A. 酵母菌 B. 霉菌 C. 细菌 答:( ) 111822.无氮培养基用来培养: A. 自生固氮菌。 B. 硅酸盐细菌 C. 根瘤菌 D. A、B 均可培养 E. A、B、C 均可培养 答:( ) 111823.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: A. 二甲苯 B. 水 C. 香柏油 答:( ) 111824.常用的消毒酒精浓度为: A. 75% B. 50% C. 90% 答:( ) 111825.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: A. 20ml/M3 B. 6ml/M3 C. 1ml/M3 答:( ) 111826.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A. 121℃/30min B. 115℃/30min C. 130℃/30min 答:( ) 111827.巴氏消毒的工艺条件是:
A. 62-63℃/30min B. 71-72℃/15min C. A.B. 均可 答:( ) 111828.半固体培养基的主要用途是: A. 检查细菌的运动性 B. 检查细菌的好氧性 C. A.B. 两项 答：( ) 111829.半固体培养基的琼脂加入量通常是: A. 1% B. 0.5% C. 0.1% 答:( )。 111830.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A. 排冷气彻底 B. 保温时间适当 C. 灭菌完后排气不能太快 D. A-C 答:( )。 111831.目镜头上的“K”字母表示: A. 广视野目镜 B. 惠更斯目镜 C. 补偿目镜 答:( ) 111832.目镜头上的“P”字母表示: A. 平场目镜 B. 广视野目镜 C. 平场补偿目镜 答:( ) 111833.物镜头上的“PL”字母表示: A.正低相差物镜 B.正高相差物镜 C.负高相差物镜 答: ( ) 111834.物镜头上的“UVFL”字母表示。 A. 无荧光物镜 B. 照相物镜 C. 相差物镜 答:( ) 111835.镜头上标有“TC”字母的镜头是: A. 相差调整望远镜 B. 摄影目镜 C. 相差目镜 答:( ) 111836.“PA”表示: A. 马铃薯培养基 B. 高氏培养基 C. 肉汤培养基 答: ( ) 111837.无菌室空气灭菌常用方法是: A. 甲醛熏蒸 B. 紫外灯照射 C. 喷石炭酸
微生物实验知识总结与实践应用经过这学期学习和实验操作，我对《微生物实验》有了一些初步的认识，也从中学习到了有用的知识。《微生物学实验》是要求我们掌握实验知识的基本操作和技能训练，初步了解和掌握先进的技术和方法，与迅速发展的科学前沿接轨。微生物：包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，却与人类生活关系密切。涵盖了有益有害的众多种类，广泛涉及健康、食品、医药、工农业、环保等诸多领域。我将我这学期学到的微生物学知识，结合生活和工业当中的一些应用，归纳如下：在吾尔恩老师的带领下，我们先从最基本的知识学起。 （1）无菌操作技术：高温对微生物具有致死效应，因此微生物在转接过程中，一般再火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，已达到灭菌的目的。在做实验时要保持严谨的态度，以后的实验中多数操作都必须再火焰旁进行。 （2）培养基的制备：培养基是人工配置的生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴别微生物或积累代谢产物。自然界中培养基的种类很多，但是不同的培养基中，一般含有水分、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，不同类别的微生物对PH值的要求一般不同。 （3）消毒与灭菌：灭菌是用理化方法杀死一定物质中的微生物的微生物学基本技术。灭菌的彻底程度受灭菌时间与灭菌剂强度的制约。微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或
环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。是指用物理或化学的方法杀灭全部微生 物，使之达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。 （4）平板分离与活菌计数：平板分离计数法是将待测菌液经适当稀释，涂布在平板上。经培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。根据稀释倍数和取样量计算出样品中细胞密度。平板分离法主要有：1.平板划线分离法。2.稀释涂布平板法。 （5）革兰氏染色法：革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性细菌（G+）和革兰氏阴性细菌（G-）两种类型。这是两种细菌细胞壁结构和组成的差异决定的。大肠杆菌是革兰氏阴性杆状细菌，金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性细菌，经过革兰氏染色后两者呈现不同的颜色，在显微镜下便于进行观察…… 我们学习微生物实验技术，就是要把微生物的实验技能应用于实践生产，培养繁育细菌收集细菌代谢产物，应用于药业、工业，产生经济利益。制备培养基是微生物实验技术操作的重要环节，按照培养基的功能分类培养基的类型有：1.选择培养基。2.鉴别培养基。在工业生产中常常应用于培养微生物的主要是-发酵罐。我将微生物在生产生活中的应用总结如下： 微生物技术的应用在当今社会中已取得了很大的作用，在工业、农业、医药业、畜牧业等各个行业中都取得了长足的进展，但相对于
2011环境微生物学考研试题及答案一、名词解释 包含体： 细胞膜： 衣原体： 同宗配合： 酵母菌： 生态系统： 碳源： 拮抗： 菌种复壮： DNA的变性： DNA复制： 根际微生物： 物质流： 类菌体： 硝化细菌： 细菌活性污泥法： 生物反应器：
微生物细胞固定化： 堆肥化： 自生固氮作用： 二、是非题 原噬菌体是整合在宿主DNA上的DNA片段,它不能独立进行繁殖。() 细菌的异常形态是细菌的固有特征。（） 真核微生物比原核微生物更能在高温下生长。（） 芽孢是芽孢细菌的繁殖器官。（） 光合细菌和蓝细菌都是产氧的光能营养型微生物。() 用来固化细菌培养基的多糖是琼脂。() 微生物生长的衰亡期，细胞死亡速率超过细胞分裂速率。() 碱基腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶存在于RNA或DNA，但只RNA中有胸腺嘧啶。() 真菌最适的生长条件是有点碱性的。() 凡是影响微生物生长速率的营养成分均称为生长限制因子。() 三、选择题 1．大部分微生物___。
(a）是原生动物(b）帮助改善生活质量 (c)生活在海洋的底层(d)发现于外层空间 2.噬菌体是一种感染____的病毒。 （a）酵母菌（b）霉菌 （c）放线菌和细菌（d）原生动物 3.G＋菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是___ （a）支原体(b)L型细菌(c)原生质体(d)原生质球 4.下列微生物中，______属于革兰氏阴性菌 （a）大肠杆菌(b)金黄葡萄球菌(c)巨大芽孢杆菌(d).肺炎双球菌5.下列能产游动孢子的霉菌是____。 （a）腐霉(b)毛霉 (c)赤霉(d)青霉 6.硝酸细菌依靠____方式产能。 （a）发酵作用(b)有氧呼吸(c)无氧呼吸(d)光合磷酸化 7.酵母菌适宜的生长pH值为____ (a)5.0-6.0(b)3.0-4.0(c)8.0-9.0(d)7.0-7.5 8.进人三羧酸循环进一步代谢的化学底物是____。 (a)乙醇(b)丙酮酸（c）乙酰CoA(d)三磷酸腺苷 9.称为微好氧菌的那些细菌能___生长。
微生物学实验复习题 一、选择题 1、革兰氏染色得关键操作步骤就是: Ａ、结晶紫染色 B、碘液固定 C、酒精脱色 Ｄ、复染 2、放线菌印片染色得关键操作就是： A、印片时不能移动 B、染色 C、染色后不能吸干 D、A与C 3、高氏培养基用来培养： Ａ、细菌 B、真菌 C、放线菌 ４、肉汤培养基用来培养: A、酵母菌 B、霉菌 Ｃ、细菌 ５、无氮培养基用来培养: Ａ、自生固氮菌。 B、硅酸盐细菌 Ｃ、根瘤菌 D、A、Ｂ均可培养 E、Ａ、B、C 均可培养 ６、在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力，通常在镜头与盖玻片之间滴加： A、二甲苯 B、水 C、香柏油 7、常用得消毒酒精浓度为： A、 7５％ Ｂ、 5０% C、 90％ 8、用甲醛进行空气熏蒸消毒得用量就是： A、 20ml/M3 B、 6ｍl/M3 C、１ml/M3 9、实验室培养基高压蒸汽灭菌得工艺条件就是： A、 1２１℃／30miｎ B、 115℃／３0mｉn C、130℃／3０min
1０、巴氏消毒得工艺条件就是： Ａ、６2-6３℃／30ｍiｎ Ｂ、71-72℃／15min C、Ａ、Ｂ、均可 1１、半固体培养基得主要用途就是: A、检查细菌得运动性 B、检查细菌得好氧性 C、 A、Ｂ、两项 １2、半固体培养基得琼脂加入量通常就是: A、 1% B、0、5％ C、0、1% 13、使用手提式灭菌锅灭菌得关键操作就是: A、排冷气彻底 Ｂ、保温时间适当 Ｃ、灭菌完后排气不能太快 D、A-C 1４、目镜头上得“K”字母表示: A、广视野目镜 B、惠更斯目镜 Ｃ、补偿目镜 1５、目镜头上得“P”字母表示: A、平场目镜 B、广视野目镜 C、平场补偿目镜 16、物镜头上得“PL”字母表示: A、正低相差物镜 B、正高相差物镜 C、负高相差物镜 17、物镜头上得“UVＦL”字母表示。 Ａ、无荧光物镜 B、照相物镜 Ｃ、相差物镜 18、镜头上标有“TC”字母得镜头就是: Ａ、相差调整望远镜 B、摄影目镜 C、相差目镜 １９、“ＰA”表示: A、马铃薯培养基 B、高氏培养基 C、肉汤培养基 20、无菌室空气灭菌常用方法就是： A、甲醛熏蒸 B、紫外灯照射
微生物复习题 一、单选题 1．关于共生相关概念下列哪一个是错误的C A、互利共生是指两种生物在一起生活，相互依赖，双方互利 B、共生是指两种生物在一起生活的现象 C、共栖是指两种生物在一起生活，双方互不侵害互不受益 D、共栖、互利共生和寄生是根据两种共生生物之间的利害关系来分的 E、寄生指一种生物生活在另一种生物的体内或体表，获取营养并使对方受害2．用来测量细菌大小的单位是C A.厘米(cm) B.毫米(mm) C.微米(μm) D.纳米(nm) E.微微米(pm) 3．有完整细胞核的微生物是B A、细菌 B、真菌 C、放线菌 D、衣原体 E、支原体 4．正常微生物（菌）群是E A、无侵袭力的细菌 B、不产生毒素的细菌 C、健康人的致病菌 D、健康带菌者所携带的细菌 E、在人体内长期存在的有益或无害的细菌5．机体受病原菌侵入后不出现或仅出现不明显临床症状的感染过程称为C A、带菌者 B、局部感染 C、隐性感染 D、显性感染 E、潜在性感染6．下列哪种消毒灭菌方式不合适E A、空气—紫外线 B、牛奶—巴氏消毒法 C、接种环—烧灼法 D、皮肤—碘酒 E、血清—高压蒸气灭菌法 7．肉眼直接观察细菌有无动力常选用C A、液体培养基 B、固体斜面培养基 C、半固体培养基 D、固体平板培养基 E、选择培养基 8．革兰氏染色的步骤是C A、结晶紫-酒精-碘液-复红 B、复红-碘液-酒精-结晶紫 C、结晶紫-碘液-酒精-复红 D、复红-酒精-碘液-结晶紫 E、结晶紫-复红-酒精-碘液 9．哪一项不是细菌质粒的特点E A、化学性质是环状双链DNA B、可在细菌间转移 C、非细菌所必需的遗传物质 D、能自主复制 E、是细菌的特殊构造 10．在细菌生长曲线中菌数增加最快的是：B A、迟缓期 B、对数期 C、稳定期 D、衰亡期 E、全部生长过程 11．溶原性细菌是指A A、带有前噬菌体的细菌 B、带有R质粒的细菌 C、带有毒性噬菌体的细菌 D、带有F质粒的细菌 E、带有Col质粒的细菌 12. 关于原核细胞型病原生物的基因转移，下列陈述哪项正确D A、转化与转导具有相同的转移途径 B、接合是质粒转移的非自然方式 C、转化与接合的不同在于后者依靠F+菌，前者依靠温和噬菌体 D、转化是真核生物与原核生物共同拥有的基因转移方式 E、溶原性转换是由溶原性噬菌体引起的转化现象 13．细菌的遗传物质不包括C
一．名词解释 1．微生物的纯培养物：由一种微生物组成的细胞群体，通常是由一个单细胞生长、繁殖所形成。 2．菌落：单个微生物细胞在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度形成的肉眼可见的、有一定形态的子细胞生长群体。 3. 灭菌：是指物体中包括芽孢在内的所有微生物都被杀死或消除。 4. 消毒：杀死或灭活物质或物体中所有病原微生物的措施，消毒可起到防止感 染或传播的作用。 5.无菌技术：在分离、转接及培养纯种微生物时，防止其被环境中微生物污染或 其自身污染环境的技术。 6. 鉴别培养基：在培养基中加入能与特定微生物的代谢产物发生特征性化学反 应的化学物质，用于鉴别不同类型微生物。 7. 选择培养基：根据不同微生物的营养需求或对某种化学物质敏感性不同，在 培养基中加入相应营养物质或化学物质，抑制不需要微生物的生长， 将所需微生物从复杂的微生物群体中选择分离出来。 8. 基础培养基：含有一般微生物生长所需基本营养物质的培养基。 9. 合成培养基：由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基，也称为化学限 定培养基。 10. 平板划线法：用接种环在培养平板表面划线接种微生物，使微生物细胞数量 随着划线次数的增加而减少，并逐步分开。保温培养后，在固体培养 基表面得到生长分离的微生物菌落。 11. 稀释倒平板法：将待分离的材料稀释后与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培 养基混合，摇匀后制成可能含菌的培养平板，保温培养后分离得到的 微生物菌落生长在固体培养基表面和里面。 12．平板菌落计数法：将适当稀释的样品涂布于琼脂培养基表面，培养后活细胞能形成菌落，通过计算菌落数能知道样品中的活菌数，该方法称为平 板计数或菌落计数。 二．填空题（每空1分，共20分） 1. 用培养平板进行微生物纯培养分离的方法包括：、、。
《微生物学教程》考试试卷 （B 卷） （本试卷共 3 页） 要求：开卷考试；答案写在答题纸上，标清楚题号；答案和试题全交。 一、解释名词（每个2分，本题满分20分） 1、菌落 2、病毒 3、生长因子 4、微生物典型生长曲线 5、灭菌 6、质粒 7、营养缺陷型 8、水体自净作用 9、微生物的种 10、培养基 二、填空（每个空0.5分，40个满分20分） 1、微生物与生物环境间的相互关系分为五种： （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 、 （5） 。 2、单细胞微生物典型生长曲线由 （1） 、 （2） 、（3） 、（4）四个时期组成。 3、防止霉腐微生物引发食品腐败的常用措施有： （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 、 （5） 。 4、微生物的五大共性包括： （1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 、 （5） 。 5、微生物根据对氧的需求可分为5种类型： （1） 、（2） 、（3） 、 （4） 、 （5） 。 6、葡萄糖经EMP 代途径10步反应产生的3种产物是： （1） 、 （2） 、 （3） 。 7、真菌（霉菌类）无性孢子有多种类型。比如（1） 、 （2） 、 （3） 、 （4） 。 8、列举对微生物学发展做出过巨大贡献的科学家名字： （1） 、 （2） 、 （3） 。 第1页 9、三域学说将整个生物划分为3个域，即 （1） 、 （2） 、 （3） 。
10、常用的消毒剂有： （1） 、 （2） 、 （3） 。 三、判断题（每小题1分，满分10分） 1、冷冻干燥保藏和液氮保藏是长期有效保藏各种微生物的 基本方法。 2、青霉素可以杀死正在旺盛生长繁殖的细菌细胞，但无法杀死正处于休止状态的营养缺陷型细胞。 3、黑曲霉、红曲霉、黄曲霉、根霉、毛霉，其中有些是单细胞微生物。 4、食品的水活度值越低，越不利于腐败（病原）微生物的生长，因此降低含水量有利于食品的保藏。 5、因为细菌是低等原核生物，所以，它没有有性繁殖，只有无性繁殖形式。 6、大肠杆菌F +细胞通过接合作用向受体细胞转移F 质粒，结果导致原供体细胞失去了F 质粒。 7、国家规定：引用水中的微生物数应低于100个细胞/mL, 大肠菌群数不能超过3个细胞/L 。 8、黄曲霉毒素是由黄曲霉菌产生的剧毒、致癌物质，它要在人或动物体经过代活化后才引起致癌作用。 9、地衣实际上是蓝细菌与真菌或藻类与真菌形成的共生体。 10、青霉菌发酵时，产青霉素的最佳温度与菌体生长最适温度完全一致。 四、简答题（4道题，每小题10分，满分40分 ） 1、简述常用化学消毒剂的种类及其杀菌机制。 2、简述艾姆氏试验的原理和实践意义。 3、比较同型乳酸发酵与异型乳酸发酵在产物、产能和菌种上的差异。 4、常用的高温灭菌方法及其适用对象。 第2页
一、名词解释 1、菌株(strain)： 2、饰变(modification)： 3、原生型(prototroph)： 4、深层液体培养： 5、类毒素(toxoid)： 6、特异性免疫(specific immuneity)： 7、芽孢(spore)： 8、鞭毛(flagella)： 9、抗生素(antibiotics)： 10、支原体(mycoplasma)： 11、菌核(scleraotium)： 12、噬菌斑(plaque)： 13、温和噬菌体(temperate phage)： 14、局限转导(specialized transduction)： 15、选择性培养基(seclected media)： 16、反硝化作用(denitrification)： 17、石炭酸系数(phenol coefficient)： 18、富营养化(eutrophication)： 19、条件致死突变型(conditional lethal mutant)： 20、细菌素(bacteriocin)： 21、初次应答： 22、再次应答： 二、单项选择题 1、下列细菌中，属于 Archaea一类的为( ) A Klebsiella pneumoniae B Neurospora crassa C Staphylococus aureus D Methanobacterium 2、具有周生鞭毛的细菌如E.coli，在下列哪种情况下呈直线运动一段时间( ) A 朝着营养物质浓度高的地方，顺时针转动。 B 朝着营养物质浓度高的地方，逆时针转动。 C 朝着有毒物质方向，顺时针转动。 D 朝着有毒物质方向，逆时针转动。 3、某细菌悬液经100倍稀释后，在血球计数板上，计得平均每小格含菌数为7.5个，则每毫升原菌悬液的含菌数为( ) A 3.75×107个 B 2.35×107个 C 3.0×109个 D 3.2×109个 4、可满足一切营养缺陷型菌株营养需要的天然或半组合培养基为( ) A 完全培养基 B 基本培养基 C 补充培养基 D鉴别培养基 5、Saccharomyces cerevisiae最适生长pH值为( ) A 4.0-5.0 B 5.0-6.0 C 6.0-7.0 D 7.0-7.4 6、专性厌氧微生物是由于其细胞内缺少（），从而不能解除分子氧对细胞的毒害。 A BOD B COD C NO D D SOD 7、下列微生物中，哪一种能产生伴孢晶体( ) A Bacillus subitis B Bacillus magaterium C Bacillus thuringiensis D Clostridium botulinum 8、下列微生物中，具有周生鞭毛的是( ) A Vibrio cholerae B Bacillus subitis C Staphylococcus aureus D Spirillum rubrum 9、革兰氏染色的关键操作步骤是( ) A 初染 B 媒染 C 脱色 D 复染 10、Zymomonas mobiles 的同型酒精发酵通过下列哪个途径进行( ) A EMP途径 B ED途径 C HMP途径 D Sticland反应
第一章绪论 一、填空题 1．世界上第一个看见并描述微生物的人是荷兰商人安东?列文虎克，他的最大贡献不在商界，而是利用自制的____显微镜___发现了微生物世界。 2．微生物学发展的奠基者是法国的巴斯德，他对微生物学的建立和发展作出卓越的贡献，主要集中体现__彻底否定了“自生说”学说___、__免疫学--预防接种__和__证实发酵是由微生物引起的___；而被称为细菌学奠基者是_德__国的_____柯赫____,他也对微生物学建立和发展作出卓越贡献，主要集中体现____建立了细菌纯培养技术___和__提出了柯赫法则____. 3．微生物学发展史可分为5期，其分别为史前期、初创期、___奠基期____、______发展期和成熟期；我国人民在史前期期曾有过重大贡献，其为制曲酿酒技术。 4．微生物学与___数___、___理____、___化___、信息科学和技术科学进一步交叉、渗透和融合，至今已分化出一系列基础性学科和应用性学科,如化学微生物学、分析微生物学、生物生物工程学、微生物化学分类学和微生物信息学等。 5．微生物的五大共性是指体积小，面积大、吸收多，转化快、生长旺，繁殖快、适应性强，易变异、分布广、种类多 . 二、问答题: 1．“微生物对人类的重要性，你怎么强调都不过分。”试用具体事例来说明这句话的深刻意义. （从四个方面具体的事例来说明人类与微生物的关系。) (1) 物质和能量循环（2）人体生理屏障（3）提供必需物质 (4)现代生物技术等方面。2．简述科赫原则.(如何判定某种微生物是病原菌?） 3．微生物有哪五大共性?其中最基本的是哪一个？为什么？ 4．什么是微生物，微生物学?学习微生物学的任务是什么? 5．简述微生物对生命科学基础理论研究有何重大贡献？ 答案要点：1）微生物是生命科学研究的理想材料; 2）利用酵母菌细胞制剂进行酒精发酵研究，不但阐明了生物体内糖的复杂转化过程，且为近代生物化学领域的酶学奠定了基础； 3)比德尔（Beadle）用脉胞菌进行突变试验，阐明了基因和酶的关系，提出了“一个基因 一个酶”的假说,开创了生化遗传学新学科； 4）遗传的物质基础是用微生物证实的； 5）遗传密码的被揭露、中心法则的确定、基因对酶的调节控制在分子生物学的基本原理都与微生物学有密切关系； 6）遗传工程的主角：①作为遗传工程中表达DNA所携带的遗传性状的载体,今天依然以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌等微生物为主,基因工程药物的生产几乎都是微生物；②在基因工程的操作中用于切割DNA取得所需基因的“手术刀”的限制性内切酶都来自微生物；③基因的载体是病毒、噬菌体、质粒；④动植物细胞培养和发酵技术； 7）微生物技术向微生物科学的整个领域扩散。 第二章微生物细胞的结构与功能 一、填空 1．微生物包括的主要类群有原核微生物、真核微生物和非细胞生物。 2．细菌的基本形态有球状、杆状和螺旋状。 3．根据分裂方式及排列情况,球菌分有单球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、和葡萄球菌等，螺旋菌又有螺旋体菌、螺旋状__和__弧状__，及其它形态的菌有星形、方形、柄杆状和异常形态. 4．细菌的一般构造有____细胞壁____、___细胞膜____、___细胞质____和___核区___等,特殊构造又有鞭毛、菌毛(或性菌毛）、荚膜和____芽孢___等。 5．引起细菌形成异常形态的主要原因是受环境条件的影响,比如培养时间、____培养温度和培养基的组成和浓度等。 6．细菌的染色方法有①__简单染色法____、②___鉴别染色法____、③___负染色法___，其中②又可分为革兰氏染色法、抗酸性染色法、芽孢染色法和姬姆萨染色法。
微生物学实验复习提纲 1.研究微生物学的基本技术有哪些（显微镜技术、无菌技术、纯种分离技术和纯种培养技术） 2.细菌培养基的配制过程？ 答：配制培养液→调节PH→分装→包扎→灭菌→搁置斜面 3.制造接种环、接种针的金属常用铂或镍,原因是软硬适度，能经受火焰反复灼烧，又易冷却. 4.灭菌吸管的包装的注意事项：（1）吸管必须干燥;(2)在距其粗头顶端约0.5cm处，塞一小段约1.5cm 长的棉花（不能用脱脂棉）。作用是避免外界及口中杂菌吸入管内，并防止菌液等吸入口中。 5.空的玻璃器皿一般用干热灭菌，若用湿热灭菌。则要多用几层报纸包扎，外面最好加一层牛皮纸或铝箔。 6.接种环在用前必须烧灼灭菌，用后也应立即烧灼。 7.酵母的死细胞和活细胞可通过哪些方式鉴别？ 答：1.、用美蓝液对酵母菌染色后，活细胞为无色，死细胞为蓝色2、平板菌落计数法 8.细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类微生物的菌落各有何特点？ 答：细菌：湿润、光滑、透明、粘稠、易挑起、质地均匀、菌落各部位的颜色一致等。 放线菌：质地致密、丝绒状或有皱折、干燥，不透明，上覆盖有不同颜色的干粉（孢子），菌落正反面的颜色常不一致，基内菌丝与培养基结合较紧，难以挑起。 酵母菌：菌落与细菌的相仿，比细菌菌落大而且厚，菌落表面湿润、粘稠、易被挑起，其颜色多为乳白色，少数为红色。同时会散发出悦人的酒香味。 霉菌：菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取，菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致等。 9.培养基按化学成分、物理状态、用途划分可分为哪几种类型？ 答：化学成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基物理状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基用途：基础培养基、鉴别培养基、选择培养基 10.实验常用的凝固剂是哪一种？固体培养基、半固体培养基及液体培养基加凝固剂琼脂的量为多少？琼脂在什么温度下溶化？什么温度下凝固？ 答：常用凝固剂是琼脂，分别为1—2%，0.5% 96°C下融化，40°C凝固 11.配制培养基时应遵循哪些原则？配制培养基的一般方法和步骤是什么？配制培养基时不可用铜锅或铁锅，原因是什么？调pH一般用什么试剂调？配制pH低的琼脂培养基时，应怎样配制？ 答：原则：目的明确、营养协调、理化适宜、经济节约方法：生态模拟、参阅文献、精心设计、试验比较 用磷酸缓冲液和碳酸钙做调节剂 12.培养基分装时，液体分装高度以试管的多少为宜，三角瓶的多少为宜？固体分装高度以试管的多少为宜，三角瓶的多少为宜？半固体分装高度以试管的多少为宜？ 答：液体：试管高度的1\4,三角瓶的试管高度的1\2,固体：试管高度的1\5，三角瓶的1\2，半固体：试管高度的1\3 13.培养基灭菌时外用牛皮纸包扎的目的是什么？ 答：防止灭菌时冷凝水润湿棉塞 14.摆斜面的正确方法是什么？ 答：试管口搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。 15.棉塞的作用是什么？正确的棉塞要求是什么？棉塞的长度多少在管口外，多少在管内为
环境微生物学试题答题要点(精华版) 一、名词解释（每题1.5分，计30分） 噬菌体：是侵染细菌、放线菌、霉菌等微生物的病毒。 菌落：菌落是指在固体平板培养基上，微生物的单细胞经过生长繁殖，形成肉眼能看到的，具有一定形态特征的微生物群体。PHB：是细菌细胞中含有的叫聚羟基丁酸盐的贮藏物质。 初生菌丝体：担子菌的孢子直接萌发而成的菌丝体，一般不会繁殖成为子实体。 分生孢子：分生孢子是由菌丝分枝顶端细胞或者由菌丝分化成的分生孢子梗的顶端细胞分割缢缩而成的单个或者成簇的孢子。间歇灭菌法：是利用常压蒸气反复灭菌的方法。 生物氧化：物质在生物体内经过一系列连续的氧化还原反应逐步分解并释放能量的过程。 化学杀菌剂：能够抑制和杀死微生物的化学物质。 共生：两个微生物在一起时形成特殊的结构和功能，两者高度的协调和彼此得利。 启动子：是一个“开始”的信号，它含有与RNA聚合酶结合并启动转录的保守序列。 操纵子：负责合成特殊蛋白质的基因簇。 生态系统：是生物群落与其生存环境组成的整体系统。 活性污泥：污水处理过程中的具有活性的微生物絮凝体。 联合固氮：是指某些生活在植物根的表面至根皮层细胞间而不进入植物根细胞的微生物进行固氮作用的现象。 反硝化细菌：反硝化作用是指微生物还原硝酸产生气态氮的过程。 活性污泥法：以活性污泥为主体的污水生物处理技术。 生物反应器：是通过酶、微生物、动植物细胞等的固定化，进行物质转化的反应器。 根际微生物：生长在植物根系直接作用土壤范围内的微生物。 纯培养：是指在实验室条件下，从一个微生物细胞繁殖得到的后代。 细胞壁：细胞壁是包在细菌细胞表面、内侧紧贴细胞质膜的较为坚韧并略具弹性的结构。 二、是非题（每题1分，计10分） ?溶源性细菌在一定条件诱发下,可变为烈性噬菌体裂解寄主细胞。( + ) ?细菌形态通常有球状、杆状、螺丝状三类。自然界中杆状最常见，球状次之，螺旋菌最少。( - ) ?某些藻类如团藻属存在群体形态。( + ) ?光合磷酸化和氧化磷酸化一样都是通过电子传递系统产生ATP。( - ) ?在固体培养基中，琼脂的浓度一般为0.5—1.0%。( - ) ?称为嗜碱菌的那些细菌是能在pH 7.0以上的环境中生长的细菌。( + ) ?在真核微生物细胞的染色体中，DNA是与组蛋白结合形成染色体的。( + ) ?EMP、ED等糖酵解途径的共同特点是将葡萄糖降解到丙酮酸。( + ) ?精确定量某些成分而配制的培养基是所有成分的性质和数量已知的培养基，称为天然培养基。( - ) ?在实验室中细菌不能形成菌落。( - ) 三、选择题（每题1分，计20分） 1. 适合所有微生物的特殊特征是__c__。 (a)它们是多细胞的（b)细胞有明显的核 (c)只有用显微镜才能观察到（d）可进行光合作用 2. 病毒缺乏__b___。 (a)增值能力(b)独立代谢的酶体系 (c)核酸 (d)蛋白质 3. G－菌由溶菌酶处理后所得到的缺壁细胞是___d__。 (a) 支原体(b) L型细菌(c) 原生质体(d) 原生质球 4. 酵母菌的细胞壁主要含___d__。 (a) 肽聚糖和甘露聚糖 (b) 葡聚糖和脂多糖 (c) 几丁质和纤维素 (d)葡聚糖和甘露聚糖 5. 下列能产子囊孢子的霉菌是__c__。 (a) 毛霉和根霉 (b) 青霉和曲霉
微生物学实验试题 一、选择题 1.革兰氏染色的关键操作步骤是： A.结晶紫染色 B.碘液固定 C.酒精脱色 D.复染 答:(C) 2.放线菌印片染色的关键操作是： A.印片时不能移动 B.染色 C.染色后不能吸干 D.A和C 答:(D) 3.高氏培养基用来培养： A.细菌 B.真菌 C.放线菌 答:(C) 111821.肉汤培养基用来培养: A.酵母菌 B.霉菌 C.细菌 答:(C) 111822.无氮培养基用来培养: A.自生固氮菌。 B.硅酸盐细菌 C.根瘤菌 D.A、B均可培养 E.A、B、C均可培养 答:(D) 111823.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加: A.二甲苯 B.水 C.香柏油 答:(C) 111824.常用的消毒酒精浓度为: A.75% B.50% C.90% 答:(A) 111825.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是: A.20ml/M3 B.6ml/M3
111826.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是: A.121℃/30min B.115℃/30min C.130℃/30min 答:(A) 111827.巴氏消毒的工艺条件是: A.62-63℃/30min B.71-72℃/15min C.A.B.均可 答:(C) 111828.半固体培养基的主要用途是: A.检查细菌的运动性 B.检查细菌的好氧性 C.A.B.两项 答：(C) 111829.半固体培养基的琼脂加入量通常是: A.1% B.0.5% C.0.1% 答:(B)。 111830.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是: A.排冷气彻底 B.保温时间适当 C.灭菌完后排气不能太快 D.A-C 答:(A)。 111831.目镜头上的“K”字母表示: A.广视野目镜 B.惠更斯目镜 C.补偿目镜 答:() 111832.目镜头上的“P”字母表示: A.平场目镜 B.广视野目镜 C.平场补偿目镜 答:() 111833.物镜头上的“PL”字母表示: A.正低相差物镜 B.正高相差物镜 C.负高相差物镜 答:() 111834.物镜头上的“UVFL”字母表示。 A.无荧光物镜 B.照相物镜
医学微生物学考试试卷（A） (临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科) 班级学号姓名 注意事项： 1．在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写上班级、姓名和试卷类型（A卷/B卷）。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交，否则以零分计算！ 2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成，共150个选择题，请按题目要求，在备选答案中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应的字母涂黑，做在试卷上无效。 3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。 第一部分、Ａ型选择题 （由一题干和５个备选答案组成，请选出一个最佳答案。共90个选择题） 1.哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物： A.疯牛病 B.梅毒 C.结核病 D.沙眼 E.体癣 2.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是: A.单细胞 B.二分裂方式繁殖 C.对抗生素敏感 D.有由肽聚糖组成的细胞壁 E.仅有原始核结构，无核膜 3.革兰阳性菌细胞壁： A.肽聚糖含量少 B.缺乏五肽交联桥 C.对溶菌酶敏感 D.所含脂多糖与致病性有关 E.有蛋白糖脂外膜 4.青霉素杀菌机制是: A.干扰细胞壁的合成 B.与核糖体50S亚基结合，干扰蛋白质合成 C.影响核酸复制 D.与核糖体30S亚基结合，干扰蛋白质合成 E.损伤细胞膜 5.有关“细菌鞭毛”的叙述，哪一项是错误的: A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C.在普通光学显微镜下不能直接观察到 D.可用于细菌的鉴定 E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛(半固体) 6.有关“芽胞”的叙述，错误的是: A.革兰阳性菌和阴性菌均可产生（都是阳性） B.不直接引起疾病 C.对热有强大的抵抗力 D.代谢不活跃 E.通常在细菌处于不利环境下形成 7.用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为: A.10倍 B.100倍 C.400倍 D.900～1000倍 E.10000倍 8.脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌经结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色后，菌体分别呈: A.红色和紫色 B.紫色和紫色
江南大学微生物实验部分试题库及标准答案 一、名词解释题 1.电子显微镜：电子显微镜是利用电子波波长短,分辨力高的特点以电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成象的超显微镜检装置。 2.普通光学显微镜：用自然光或者灯光作光源镜检物体的显微镜。 3.合成培养基：由化学成分已知的营养物质配制而成的培养基。 4.人工培养基：人工配制的供微生物生长繁殖并积累代谢产物的一种营养基质。 5.天然培养基：由化学成分不完全清楚的天然物质如马铃薯,麸皮等配制而成的培养基。 6.半合成培养基：由化学成分已知的化学物质和化学成分不完全清楚的天然物质配制而成的培养基。 7.革兰氏染色法：革兰氏染色是细菌的一种鉴别染色法,细菌首先用结晶紫染色,再用碘液固定,然后用95%的酒精脱色,最后用蕃红复染。凡是菌体初染的结晶紫被酒精脱去了紫色后,又被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏负反应细菌；凡是菌体初染的紫色不能被酒精脱色,也不能被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏正反应细菌。 8.简单染色：用单一染料使微生物细胞染上所用染料颜色的染色方法。 9.稀释平板计数法：将一定量的样品经十倍稀释后,用平板培养最后三个稀释度的样品稀释液。待菌落长出后,计数出某一稀释度的菌落数后再乘以稀释倍数,即为样品中的含菌数。10.显微直接计：利用血球计数板或细菌计数板在显微镜下测计出每小格的微生物细胞数量后,再换算出单位体积中微生物细胞总数的测数方法。 二、选择题 01.革兰氏染色的关键操作步骤是: A.结晶紫染色。 B.碘液固定。 C.酒精脱色。 D.复染。答:(C) 02.放线菌印片染色的关键操作是: A.印片时不能移动。 B.染色。 C.染色后不能吸干。 D.A-C。答:(A)。 03.高氏培养基用来培养: A.细菌。 B.霉菌。 C.放线菌。D酵母菌答:(C)。 04.肉汤培养基用来培养: A.酵母菌。 B.霉菌。 C.细菌。D放线菌答:(C)。 05.无氮培养基用来培养: A.自生固氮菌。 B.硅酸盐细菌。 C.根瘤菌。 D.A,B均可培养。答:(D)。 06.在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力,通常在镜头和盖玻片之间滴加: A.二甲苯。 B.水。 C.香柏油。D甲苯答:(C)。 07.常用的消毒酒精浓度为: A.75%。 B.50%。 C.90%。D70% 答:(A)。
一、解释下列名词 1．伴胞晶体：少数芽孢杆菌在其形成芽孢的同时，会在芽孢旁边形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体——δ内毒素,称为伴胞晶体（59） 2．菌落：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体，成为菌落。 3．选择培养基：用来将某种或某种微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不同，在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，一直不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。（91） 4．革兰氏阳性菌：在革兰氏染色法里，通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞膜内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。革兰氏阳性菌由于其细胞壁厚度大和肽聚糖网层次多和交联致密，故遇乙醇或丙酮酸脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，在加上它不含类脂，故乙醇处理不会溶出缝隙，因此能吧结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色。（49）革兰氏阳性菌细胞壁特点是厚度大、化学组分简单，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸，从而与层次多、厚度地、成分复杂的革兰氏阴性菌的细胞壁有明显的差别。革兰氏阴性菌因含有LPS外膜，故比革兰氏阳性菌更能抵抗毒物和抗生素对其毒害。（40） 5．LPS:脂多糖，位于革兰氏阴性菌细胞壁最外层的一层较厚的类脂多糖类物质，由类脂、可信多糖和O-特异侧脸三部分组成。（43） 6．营养缺陷型：某些菌株发生突变（自然突变或人工诱变）后，失去合成某种（或某些）对该菌株生长必不可少的物质（通常是生长因子如氨基酸、维生素）的能力，必须从外界环境获得该物质才能生长繁殖，这种突变型菌株成为营养缺陷性（85）(218) 7．氨基酸异养型生物：不能合成某些必须的氨基酸，必须从外源提供这些氨基酸才能成长，动物和部分异养微生物为氨基酸异养型生物。如乳酸细菌需要谷氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸、组氨酸、亮氨酸和脯氨酸等外源氨基酸才能生长。（baidu) （氨基酸自养型：能以无机氮为唯一氮源，合成氨基酸，进而转化为蛋白质及其他含氮有机物。 8．芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或团圆性、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体（55） 9．鉴别培养基：用于鉴别微生物。在培养基中加入某种特殊化学物质，某种微生物在培养基中生长后能产生某种带些产物，而这种带些产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征性变化，根据这种特征性变化，可讲该种微生物与其他微生物区分开来（91） 10．PHB：聚-B-羟丁酸，直径为0.2~0.7um的小颗粒，是存在于许多细菌细胞质内属于类脂兴致的碳源类贮藏无。不溶于水，可溶于氯仿，可用尼罗蓝或苏丹黑染色。具有贮藏能量、碳源和降低细胞内渗透压的作用。（53） 11．糖被：包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的胶状物质。（60）
临床微生物学检验技术试题及答案A1题型 1、人类ABO血型抗原包括 A、A抗原 B、B抗原 C、O抗原 D、AB抗原 E、A抗原和B抗原 答案：E 2、ABO血型物质在人体中可引起哪几种Ab产生 A、抗B抗体 B、抗AB抗体 C、抗A抗体 D、抗O抗体 E、抗A和抗B抗体 答案：E 3、免疫耐受就是 A、非特异性无反应性 B、特异性无反应性 C、机体无反应性 D、免疫抑制性 E、对任何抗原都不反应 答案：B 4、迟发型皮肤过敏反应与下列哪种物质有关 A、IgE B、IgA C、活化B细胞 D、活化T细胞 E、活化NK细胞
答案：D 5、佐剂作用是 A、将Ag送入机体各部位 B、将Ag固定在局部 C、增强Ag免疫原性 D、赋予Ag免疫原性 E、增强机体对Ag的免疫应答 答案：E 6、下列哪种物质既有非特异性免疫也参与特异性免疫反应 A、IgG B、干扰素 C、IgA D、前列腺素 E、补体 答案：E 7、TDH 细胞是 A、产生Ab细胞 B、天然杀伤细胞 C、细胞毒细胞 D、迟发变态反应T细胞 E、依Ab杀伤T细胞 答案：D 8、关于霍乱弧菌是否侵入上皮细胞，下列说法正确的是 A、不侵入 B、侵入 C、在特定条件下侵入 D、具有侵袭基因的霍乱弧菌侵入 E、侵入后局限于上皮细胞内 答案：A 9、葡萄球菌能产生多种溶血素，其中最主要的是
A、α、β溶血素 B、α、γ溶血素 C、β、γ溶血素 D、δ、ε溶血素 E、α、γ溶血素 答案：A 10、与其他肺部感染病原菌相比较，铜绿假单胞菌的毒力特点是 A、产生外毒素 B、具有内毒素 C、产生溶血素 D、产生绿脓素 E、具有菌毛 答案：D 11、有荚膜的流感嗜血杆菌含有荚膜多糖抗原称作： A、V抗原 B、M抗原 C、A抗原 D、X抗原 E、S抗原 答案：B 12、下列关于铜绿假单胞菌叙述中，正确的是 A、革兰氏阳性球菌 B、革兰氏阳性杆菌 C、无芽孢 D、具有荚膜 E、无鞭毛 答案：C 13、下列何种微生物具有荚膜结构 A、军团菌 B、支原体
填空题 1.动植物的研究能以体为单位进行，而对微生物的研究一般用体 2.在微生物学中，在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体称为培养物、其中只有培养物能较好地被研究、利用和重复结果。 3.一般情况下，培养微生物的器具，在使用前必须先行，使容器中不含。 4.用培养平板进行微生物纯培养分离的方法包括、和。 5、微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行、的重要依据。 6、微生物保藏的目标就是要使所保藏菌株在一段时间不、不和不 7、一般说来，采用冷冻法时，保藏温度越，保藏效果越。 8、、和是影响显微镜观察效果的3个重要因索。 9.光学显微镜能达到的最大有效放大倍数是，这时一般使用 x的目镜，和 x的物镜，并应在物镜镜头和玻片之间加。 10、采用明视野显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时，光的和都没 有明显的变化，因此，其形态和内部结构往往难以分辨。 11.在的照射下，发荧光的物体会在黑暗的背景下表现为光亮的有色物体，这就是荧光显微技术的原理。 12.透射电子显微镜用电子作为，因此其分辨率较光学显微镜有很大提高，但镜筒必须是环境，形成的影像也只能通过或进行观察、记录。 13.在显微镜下不同细菌的形态可以说是千差万别，丰富多彩，但就单个有机体而言，其基本形态可分为、与 3种。 14.霉菌菌体均由分支或不分支的菌丝构成。许多菌丝交织在一起，称为。在固体培养基上，部分菌丝伸入培养基内吸收养料，称为；另一部分则向空中生长，称为。有的气生菌丝发育到一定阶段，分化成。 15. 是一类缺少真正细胞壁，细胞通常无色，具有运动能力，并进行吞噬营养的单细胞真核生物。它们个体微小，大多数都需要显微镜才能看见。 选择题（4个答案选1) 1.培养微生物的常用器具中，（）是专为培养微生物设计的。 (1)平皿(2)试管(3)烧瓶(4)烧杯 2.( )可用来分离培养出由科学家设计的特定环境中能生长的微生物，尽管我们并不知道什么微生物能在这种特定的环境中生长。 (1)选择平板(2)富集培养(3)稀释涂布(4)单细胞显微分离 3.下面哪一项不属于稀释倒平板法的缺点?( ) (1)菌落有时分布不够均匀 (2)热敏感菌易被烫死 (3)严格好氧菌因被固定在培养基中生长受到影响 (4)环境温度低时不易操作 4.下面哪一种方法一般不被用作传代保藏?( ） (1)琼脂斜面(2)半固体琼脂柱(3)培养平板(4)摇瓶发酵 5.冷冻真空干燥法可以长期保藏微生物的原因是微生物处于( )的环境，代谢水平大大降低。 (1)干燥、缺氧、寡营养(2)低温、干燥、缺氧 (3)低温、缺氧、寡营养(4)低温、干燥、寡营养 6.对光学显微镜观察效果影响最大的是( )。