２００６年第１５卷第８期药物研究益生菌株对ＨＴ一２９细胞的粘附及对致病菌的粘附抑制性能研究
魏银萍ｈ２，王斌２，魏泓ｈ２
（１．西南大学生命科学学院，重庆４００７１５；２．第三军医大学基础部动物学教研室，重庆４０００３８）
摘要：目的研究培菲康微生态制荆中菌株的粘附性能及对致病菌的粘附抑制性能。方法以革兰氏染色法和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法评价３株益生茵分别对ＨＴ一２９细胞和粘蛋白的粘附性能，与益生茵共孵育后裂解细胞活茵计数法检测益生茵抑制致病茵对ＨＴ一２９细胞的粘附性能。结果嗜酸乳杆菌、长双歧杆菌和粪肠球菌的粘附指数分别为５０１．３３±３８．１８，４４０．６７±６０．９３，１６３．３３±４．１６，并可以分别使致病性大肠杆菌粘附率由６．７％下降到２．８５％，０．２１４％，１．９％；使伤寒沙门氏菌粘附率由３２．４９％下降到１６．９５％，１２．９３％，２０．３３％。结论培菲康微生态制剂中３株益生茵均有不同程度的粘附性能以及抑制致病茵对肠上皮细胞粘附的作用，其中嗜酸乳杆菌的粘附性能最好，而长双歧杆茵对致病菌的粘附抑制作用最好。
关键词：培菲康；益生菌；粘附；致病菌；粘附抑制
中图分类号：Ｒ９６５：Ｒ４５７．２文献标识码：Ａ文章编号：１００６—４９３１（２００６）０８一∞０７一０２
ＳｔｕｄｙｏｆＡｄｈｅｓｉｏｎＣａｐａｂｉｌｉｔｙｏｆＴｈｒｅｅＰｒｏｂｉｏｔｉｃｓｔｏＨＴ一２９ＣｅｌＩｓａｎｄ
ＡｄｈｅｓｉｏｎＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＢａｃｔｅｒｉａｌＰａｔｈｏｇｅｎｓ
ＷｅｉＹｉｎｐｉｎｇ＇ｔ２ＷａｎｇＢｉｎ２，ＷｅｉＨｏｎ９７，２
ｆ』．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ４００７１５；
２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅｏｆＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅＢｉ＠，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ４０００３８）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅａｄｈｅｓｉｏｎｃａｐａｃｉｔｙｏｆｔｈｒｅｅｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓｉｎＢｉｆｉｃｏａｎｄｔｌｌｅａｄｈｅｓｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｔｗｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐａｔｈｏｇｅｎｓｔｏＨＴ一２９ｃｅｌｌｓ
ｐｒｏｖｉｄｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＧｒａｍｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄＥＬＩＳＡｍｅｔｈｏｄｓｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｃａｐａｃｉｔｙｏｆｔｈｅａｄｈｅｓｉｏｎｏｆｔｈｒｅｅｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓｔｏＨＴ一２９ｃｅｌｌｓａｎｄｍｕｃｉｎｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＰｌａｔｉｎｇｃｏｕｎｔａｆｔｅｒｉｎｃｕｂａｔｉｎｇｗｉｔｈｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓａｎｄｃｅｌｌｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅａｄｈｅｓｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｔｗｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐａｔｈｏｇｅｎｓｔｏＨＴ一２９ｃｅＨｓｂｙｔｈｒｅｅｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅａｄｈｅｓｉｏｎｉｎｄｅｘｅｓｏｆＬＡ．ＢＬａｎｄＥＦｗｅｒｅ５０１．３３土３８．１８，４４０．６７±６０．９３，１６３．３３±４．１６ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＡｆｔｅｒｉｎｃｕｂａｔｉｎｇｗｉｔｈＬＡ，ＢＬａｎｄＥＦｔｈｅａｄｈｅｓｉｏｎｒａｔｉｏｏｆＥＰＥＣｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｆｒｏｍ６．７％ｔｏ２．８５％，０．２１４％ａｎｄ１．９％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙａｎｄＳＬｆｒｏｍ３２．４９％ｔｏ１６．９５％，１２．９３％ａｎｄ２０．３３％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
ＴｈｒｅｅｐｒｕｂｉｏｔｉｅｓｏｆＢｉｆｉｃｏｃａｌｌｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅａｄｈｅｓｉｏｎｏｆｂａｃｔｅｒｉａｌ
ｐａｔｈｏｇｅｎｓｔｏＨＴ一２９ｃｅｌｌｓ．ＬＡｅｘｐｒｅｓｓｅｓｔｈｅｓｔｒｏｎｇｅｓｔａｄｈｅｓｉｏｎｔｏＨＴ一２９ｃｅｉｌｓａｎｄＢＬｅｘｐｒｅｓｓｅｓｔｈｅｂｅｓｔａｄｈｅｓｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｔｏＨＴ一２９ｃｅｌｌｓｂｙｂａｃｔｅｒｉａｌｐａｔｈｏｇｅｎｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｂｉｆｉｃｏ；ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ；ａｄｈｅｓｉｏｎ；ｂａｃｔｅｒｉａｌｐａｔｈｏｇｅｎｓ；ａｄｈｅｓｉｏｎｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ
益生菌是可改善宿主肠道微生态平衡且含生理性活菌的微生物制剂【ｌＩ。粘附是微生物与宿主肠道相互作用的第一步，也是进入肠道的微生物发挥作用的前提汜ｊ。益生菌必须粘附于宿主肠道，才能与正常菌群一起构成生物屏障，通过定植保护作用影响过路菌或者外袭菌的定植、占位和繁殖，并且益生菌还可以在宿主体内产生生物酶、活性肽及一些代谢产物（如有机酸、过氧化氢、细菌素等物质），从而阻止或杀死致病菌在体内的定植，发挥化学屏障作用１３１。因此益生菌的粘附性能及其对致病菌的粘附抑制作用就成为菌株质量评定的重要指标，笔者就培菲康制剂中三株益生菌的这两项指标作一研究。
１仪器与试药
倒置照相显微镜（Ｏｌｙｍｐｕｓ，日本）；酶标仪（ＢＩＯ—ＲＡＤ，美国）。新生牛血清（天津ＴＢＤ公司）；粘蛋白（Ｓｉｇｍａ公司）；辣根过氧化物酶（ＨＲＰ，Ｓｉｇｍａ公司）；ＤＭＥＭ培养基（Ｇｉｂｃｏ公司）；ＤＡＢ显色试剂盒（博士德生物公司）。培菲康产品中３株益生菌为嗜酸乳杆菌（ＬＡ）、长双歧杆菌（ＢＬ）、粪肠球菌（ＥＦ），其原始菌株由上海信谊药厂提供；致病性大肠杆菌（ＥＰＥＣ）、伤寒沙门氏菌（ｓＬ），分离自腹泻患者粪便。
２方法与结果
２．１粘附试验
细胞培养革兰氏染色法１４ｊ：ＨＴ一２９细胞常规培养，试验之前将细胞接至６孑Ｌ板培养，已长至单层（加盖玻片）的细胞用灭菌磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ，ｐＨ＝７．４）漂洗２次，每孔中加入１ｍＬ益生菌的菌悬液（细菌浓度为１×１０８～２×１０８／ｍＬ）和ｌｍＬ新鲜的ＤＭＥＭ基础液，于３７℃，５％ＣＯｚ，９５％空气的二氧化碳培养箱中共孵育１ｈ，漂
中国药业ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ洗细胞５次，以除去未粘附的细菌，甲醇固定，革兰氏染色，油镜下计算２０个随机视野下粘附至细胞上的细菌数，粘附指数以１００个细胞上粘附的细菌数表示。结果显示：ＬＡ，ＢＬ，ＥＦ对ＨＴ一２９细胞的粘附指数分别为５０１．３３±３８．１８，４４０．６７±６０．９３，１６３．３３±４．１６。细菌粘附图示见图１。
ＡＢＣ
Ａ．ＬＡＢ．ＢＬＣ．ＥＦ
图１３株益生菌对ＨＴ一２９细胞的粘附（革兰氏染色，×１０００）
注：箭头所示为粘附在细胞上的细茵。
酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）【５】：将益生菌的菌悬液（细菌浓度为１×１０８—２×１０８／ｍＬ）用ＰＢＳ漂洗后，于４℃包被过夜，以０．２％戊二醛、２２℃固定１０ｒａｉｎ，加５％牛血清白蛋白一磷酸盐（ＢＳＡ—ＰＢＳ）封闭液于３７℃温
箱中孵育２ｈ，漂洗过后
加ＨＲＰ标记的粘蛋白
（５０斗ｇ／ｍＬ），于３７℃温
箱中孵育１ｈ，ＤＡＢ显色
液进行显色。以酶标仪
检测在４５０Ｂｉｌｌ波长的
光密度（ＯＤ４ｓｏ），以未加
图２３株益生茵的粘蛋白粘附试验结果
注：与对照相比，‘Ｐ＜０．０５，一Ｐ＜０．０１。
?一７?
万方数据
药物研究
细菌的孔作为阴性对照，结果见图２。
２．２粘附抑制试验旧１
将生长至６孔板上的单层细胞漂洗过后加入１ｍＬ益生菌和１ｍＬ致病菌，共孵育１ｈ。用灭菌的ＰＢＳ漂洗５次，洗去未粘附的细菌，加无菌水裂解细胞。进行系列稀释，选择性培养基活菌计数，并以未加益生菌的孔作对照，结果见图３。
图３３株益生茵对ＥＰＥＣ和ｓＬ的粘附抑制试验结果
注：与不加益生茵组相比，‘Ｐ（０．０５，一Ｐ＜０．０１。
３讨论
作为益生菌筛选重要指标之一的粘附性能检测，目前国内外学者普遍采用体外培养肠上皮细胞的方法来评价菌株的粘附能力，因革兰氏染色法比较简单可行，故在此就用该细胞系评价了３株益生菌的粘附性能。结果发现，培菲康产品中３株益生菌对肠上皮细胞粘附均具有一定程度的作用，其中ＬＡ的粘附性能最好，可达５０１．３３±３８．１８，ＧｏｐａｌＰＫ等…也用同样方法检测了１株ＬＡ一１的粘附性能［粘附指数为（１２１±１６）】，与本次试验结果相差较远，可能是菌株之间的差异所致。虽然采用体外培养的肠上皮细胞作为模型来研究益生菌的粘附性能简便可行，但在宿主的肠道内，肠上皮细胞表面还覆盖有一层由一些糖蛋白类物质组成的黏液层，粘蛋白是其中主要的一种糖蛋白（广泛分布于肠黏膜上皮细胞表面），其上分布有肠菌群的一些特异性结合位点。粘蛋白可作为受体模型来研究益生菌的粘附，因此本试验中将粘蛋白用ＨＲＰ标记后，采用ＥＬＩＳＡ法检测益生菌与粘蛋白的粘附，以此作为细胞培养革兰氏染色法的一种补充，从而更全面地评价益生菌的粘附性能。试验发现，３株益生菌中ＬＡ与ＨＴ一２９细胞的粘附能力最强，与粘蛋白的粘附能力也最强；不同的是，ＥＦ与ＨＴ一２９细胞的粘附能力一般，并且与ＬＡ，ＢＬ相差较远，而ＥＦ与粘蛋白的粘附能力与ＬＡ，ＢＬ无显著性差异。三者均表现出与粘蛋白的强粘附性，原因可能是粘蛋白和ＨＴ一２９细胞上表达的粘附素受体有一定差异，针对ＥＦ的特异性受体在细胞上较少，而在粘蛋白上却比较丰富。
在筛选益生菌时，它必须具有粘附于肠黏膜且可重建肠道微生态，以及通过营养竞争或释放抗菌物质而抑制致病菌的能力鹕，。乳杆菌和双歧杆菌可抑制致病菌与细胞的粘附和侵袭【９】，本试验发现，粘附性能较好的ＬＡ和ＢＬ对致病菌的粘附抑制作用也比较好，只是ＬＡ粘附性能较ＢＬ好，而粘附抑制作用却稍次于ＢＬ，这可能是在抑制致病菌粘附于肠上皮细胞的作用机制中，除了空问占位性保护作用外，还有益生菌产生的有机酸或者细菌素等物质的共同作用，ＧａｇｎｏｎＭ等陋１发现１株粘附率为４．１５％的双歧杆菌ＲＢＬ７１与大肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉ０１５７：Ｈ７共孵育后，后者的粘附率由１０．４％下降到４．２％，提示乳杆菌或双歧杆菌体外抑制致病菌粘附
２００６年第１５卷第８期于人细胞系的机制虽还不很清楚，但空间位阻效应要比特异性
受体阻断作用要大。而ＬｅｈｔｏＥＭ等¨引发现Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓＧＧ抑制沙门氏菌对Ｃａｃｏ一２细胞的粘附主要是依靠ｐＨ值的影响，当Ｌ．ｒｈａｍｎｏｓｕｓＧＧ培养上清的ｐＨ值调至中性时则无抑制作用，有可能是较低的ｐＨ值导致致病菌死亡。
益生菌可粘附于肠道内通过定植调节胃肠道微生态失调，并通过占位保护肠黏膜免受致病菌侵袭，从而达到预防和治疗胃肠道感染性疾病的目的。目前，有关培菲康的临床疗效已有不少报道。王曦钟等“１１发现培菲康可明显改善因肠道菌群失调所致的急、慢性腹泻症状，纠正肠道茵群紊乱，维持肠道微生态平衡，从而保护、强固胃肠黏膜屏障。王桂兰”２１也发现培菲康微生态制剂服用后可有效治疗小儿急性腹泻症状。
本试验采用两种独立的方法评价了培菲康微生态制剂中３株益生菌的粘附性能，并且检测了其对致病菌的粘附抑制性能，从而为培菲康作用的基础研究提供了一定的材料。
作者简介：魏银萍（１９８０一），女，硕士，研究方向为应用微生物；魏泓，本文通讯作者，（电话）０２３—６８７５２０５１（电子信箱）ｗｅｉｈｏｎ９６３５２８＠１６３．ｃｏｍ。
参考文献：
［１】熊德鑫．现代肠道微生态学【Ｍ】．北京：中国科学技术出版社，２００３：８２．［２］ＣｏｔｔｅｒＰＡ，ＭｉｌｌｅｒＪＦ．Ｔｒｉｇｇｅｒｉｎｇｂａｃｔｅｒｉａｌｖｉｒｕｌｅｎｃｅ【Ｊ】．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９６，２７３（５２７９）：１１８３．
【３】康白．微生态学原理【ＭＪ．第２版．大连：大连出版社，２００２：１８７，【４】ＣｏｃｏｎｎｉｅｒＭＨ，ＫｌａｅｎｈａｍｍｅｒＴＲ，ＫｅｒｕｅｉｓｋＳ，ｅｔａ１．Ｐｒｏｔｅｉｎ—ＭｅｄｉａｔｅｄＡｄｈｅｓｉｏｎｏｆＬｃｔｏｂｉｃｉｌｌｕｓ
ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ
ＢＧ２Ｆ０４ｏｎＨｕｍａｎ
Ｅｎｔｅｒｏｃｙｔｅ
ａｎｄＭｕｃｕｓ—ＳｅｃｒｅｔｉｎｇＣｅｌｌＬｉｎｅｓｉｎＣｕｈｕｒｅ［Ｊ］．ＡｐｐｌＥｎｖｉｒｏｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９９２，５８：２０３４—２０３９．．
［５］ＲｅｐｅｎｔｉｇｎｙＬ，ＡｕｍｏｎｔＦ，ＢｅｒｎａｒｄＫ，ｅｔａ１．ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＢｉｎｄｉｎｇｏｆＣａｎｄｉｄａａｌｂｉｃｏ，”ｔｏＳｍａｌｌＩｎｔｅｓｔｉｎａｌＭｕｃｉｎａｎｄＩｔｓＲｏｌｅｉｎＡｄｈｅｒｅｎｃｅｔｏＭｕｃｏｓａｌＥｐｉｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌｓ．Ｉｎｆｅｃｔ［Ｊ］．１ｍｍｕｎ，２０００，６８：３１７２—３１７９．
［６］ＧａｇｎｏｎＭ，ＫｈｅａｄｒＥ，ＬｅＢｌａｙＧ，ｅｔａ１．／ｎｖｉｔｒｏｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＥｓｅｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｉｌ
０１５７：Ｈ７ｂｙｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａｌｓｔｒａｉｎｓｏｆｈｕｍａｎ
ｏｒｉｇｉｎ
ＩｎｔｆＪ］．ＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００４，９２：６９—７８．
【７】ＧｏｐａｌＰＫ，ＰｒａｓａｄＪ，ＳｍａｒｔＪ，ｅｔａ１．ＩｎｖｉｔｒｏａｄｈｅｒｅｎｃｅｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆＬａｃｔｏ－ｂａｃｉｌｌｕｓｒｈａｍｎｏｓｏｓＤＲ２０ａｎｄＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｌｎｌａｃｔｉｓＤＲｌＯｓｔｒａｉｎｓａｎｄｔｈｅｉｒａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｙａｇａｉｎｓｔａｎｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃ
ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＩｎｔ［Ｊ］．ＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌ，２００１，６７：２０７—２１６．
【８】ＭｃＮａｕｇｈｔＣＥ，ＭａｃＦｉｅＪ．Ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｐｒａｃｔｉｃｅ：ａｃｒｉｔｉｃａｌｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅｅｖｉｄｅｎｃｅ［Ｊ］．ＮｕｔｒＲｅｓ，２００１，２１：３４３—３５３，
［９】ＳａｌｍｉｎｅｎＳ，ＬａｉｎｅＭ，ＶｏｎＷｒｉｇｈｔＡ，ｅｔａ１．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｓｅｌｅｃｔｉｏｎｃｒｉｔｅｒｉａｆｏｒｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓｔｒａｉｎｓｔｏａｓｓｅｓｔｈｅｉｒｐｏｔｅｎｔｉａｌｉｎｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｆｏｏｄｓ：ａＮｏｒｄｉｃａｎｄＥｕｒｏｐｅａｎａｐｐｒｏａｃｈ［Ｊ］．ＢｉｏｓｃｉＭｉｃｒｏｆｌｏｒａ，１９９６，１５：６１—６７．
【１０］ＬｅｈｔｏＥＭ，ＳａｌｍｉｎｅｎＳＪ．ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＳａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍａｄｈｅｓｉｏｎｔｏＣａｃｏ一２ｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅｓｂｙＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｓｔｒａｉｎＧＧｓｐｅｎｔｃｕｌｔｕｒｅｓｕｐｅｒｕａｔｅ：ｏｎｌｙａｐＨｅｆｆｅｃｔ？【Ｊ】．ＦＥＭＳＩｍｍｕｎｏｌＭｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌ，１９９７，１８（２）：１２５—１３２．【１１】王曦钟，吕益中，梁水权，等．微生态制荆与胃肠黏膜面屏障［Ｊ】．中国基层医药，２００５，１２（２）：２１７—２１８．
［１２］王桂兰．培菲康治疗小儿急性腹泻病【Ｊ］．药物与临床，２００４，２５（２２）：６３—６５．
（收稿日期：２００５—１１—１３；修回日期：２００５—１２—１５）
?８?中国药业ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ 万方数据
益生菌株对HT-29细胞的粘附及对致病菌的粘附抑制性能研究
作者：魏银萍， 王斌， 魏泓， Wei Yinpin， Wang Bin， Wei Hong
作者单位：魏银萍,魏泓,Wei Yinpin,Wei Hong(西南大学生命科学学院，重庆 400715;第三军医大学基础部动物学教研室，重庆 400038)， 王斌,Wang Bin(第三军医大学基础部动物学教研室
，重庆 400038)
刊名：
中国药业
英文刊名：CHINA PHARMACEUTICALS
年，卷(期)：2006，15(8)
被引用次数：1次
参考文献(12条)
1.熊德鑫现代肠道微生态学 2003
2.Cotter https://www.doczj.com/doc/1c8586989.html,ler JF Triggering bacterial virulence 1996(5279)
3.康白微生态学原理 2002
4.Coconnier MH.Klaenhammer TR.Kerneisk S Protein-Mediated Adhesion of Lctobicillus acidophilus
BG2FO4 on Human Enterocyte and Mucus-Secreting Cell Lines in Culture 1992
5.Repentigny L.Aumont F.Bernard K Characterization of Binding of Candida albicans to Small
Intestinal Mucin and Its Role in Adherence to Mucosal Epithelial Cells.Infect 2000
6.Gagnon M.Kheadr E.Le Blay G In vitro inhibition of Escherichia coli O157:H7 by bifidobacterial strains of human origin Int 2004
7.Gopal PK.Prasad J.Smart J In vitro adherence properties of Lactobacillus rhamnosus DR20 and Bifidobacterium lactis DR10 strains and their antagonistic activity against an enterotoxigenic Escherichia coli Int 2001
8.McNaught GE.MacFie J Probiotics in clinical practice:a critical review of the evidence 2001
9.Salminen https://www.doczj.com/doc/1c8586989.html,ine M.Von Wright A Development of selection criteria for probiotic strains to asses their potential in functional foods:a Nordic and European approach 1996
10.Lehto EM.Salminen SJ Inhibition of Salmonella typhimurium adhesion to Caco-2 cell cultures by Lactobacillus strain GG spent culture supernate:only a pH effect? 1997(02)
11.王曦钟.吕益中.梁水权微生态制剂与胃肠黏膜面屏障[期刊论文]-中国基层医药 2005(02)
12.王桂兰培菲康治疗小儿急性腹泻病[期刊论文]-药物与临床 2004(22)
相似文献(10条)
1.期刊论文赵和平.霍丽娟.ZHAO He-ping.HUO Li-juan益生菌对溃疡性结肠炎大鼠作用的实验研究-山西医科大学学报2006,37(8)
目的 采用乙酸法制备大鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,观察培菲康(bifico)对UC的治疗效果并探讨其作用机制.方法 用8%乙酸灌肠法制备大鼠UC模型,给大鼠应用bifico溶液,观察UC大鼠的症状和组织学变化,并采用原位杂交技术,检测UC大鼠肠黏膜内IL-1β、TNF-α、IL-10、NF-κB的表达水平.结果 应用bifico后,UC大鼠的症状、组织损害均较模型组明显减轻,同时IL-1β、TNF-α、NF-κB的表达明显降低,IL-10的表达明显提高.结论 bifico可有效治疗UC,机制可能是通过抑制NF-κB的活性,进而降低致炎细胞因子的表达,提高抗炎细胞因子的水平而完成的.
2.学位论文魏银萍国内5种市售微生态制剂益生菌株的粘附性能研究2006
益生菌是指可以改善宿主肠道微生态平衡，并且含有生理性的活菌的微生物，益生菌作用的好坏取决于菌种的选择。
粘附是微生物与宿主肠道相互作用的第一步，也是进入肠道的微生物发挥作用的前提。益生菌必须粘附于宿主肠道，才能与正常菌群一起构成生物屏障，通过定植保护作用影响过路菌或者外袭菌的定植、占位和繁殖，并且，益生菌还可以在宿主体内产生生物酶、活性肽以及一些代谢产物如有机酸、过氧化氢、细菌素等物质可以阻止或杀死致病菌在体内的定植，发挥化学屏障作用，因此，益生菌的粘附性能就成为益生菌菌株质量评定的重要指标之一。目前国内外的微生态制剂品种比较多，但是对这些制剂中益生菌的粘附性能方面的系统检测资料尚比较缺乏。
本课题拟对目前我国国内市售的5种微生态制剂中10株益生菌的粘附性能进行系统检测，从而为其作用基础提供实验资料。
方法：(1)采用革兰氏染色法，检测益生菌对体外培养的HT-29细胞的粘附能力。(2)益生菌与辣根过氧化物酶标记的粘蛋白共孵育后，DAB显色，即采用ELISA法测定492nm的OD值反映益生菌对粘蛋白的粘附能力。(3)益生菌和致病菌一起与细胞共孵育后，蒸馏水裂解细胞释放粘附其上的细菌，利用致病菌的选择性培养基计数，反映致病菌的粘附率的方法检测了10株益生菌对致病性大肠杆菌(EPEC)的粘附抑制性能，体外检测了益生菌对致病菌的拮抗
作用。
结果：(1)3种方法的综合评价结果显示，在所检测的10株益生菌中，其粘附性能的综合排序为金双歧的长双歧杆菌(J.BL)、丽株肠乐的青春双歧杆菌(L.BL)、金双歧的保加利亚乳杆菌(J.LB)、培菲康的嗜酸乳杆菌(https://www.doczj.com/doc/1c8586989.html,)、培菲康的长双歧杆菌(P.BL)、培菲康的粪肠球菌(P.EC)、妈咪爱的屎肠球菌(M.EC)、妈咪爱的枯草芽孢杆菌(M.yb)、整肠生的地衣芽孢杆菌(Z.yb)、金双歧的嗜热链球菌(J.EC)。
(2)从不同菌属的益生菌的粘附性能来看，双歧杆菌的粘附性能最好、乳杆菌其次、肠球菌一般、芽孢杆菌最弱。
(3)不同的实验方法检测到的10株益生菌的粘附性能排序之间有差异。a.就革兰氏染色法而言，10株菌的粘附性能的排序为金双歧的长双歧杆菌(J.BL)、丽株肠乐的青春双歧杆菌(L.BL)、培菲康的嗜酸乳杆菌(https://www.doczj.com/doc/1c8586989.html,)、金双歧的保加利亚乳杆菌(J.LB)、培菲康的长双歧杆菌(P.BL)、培菲康的粪肠球菌(P.EC)、妈咪爱的屎肠球菌(M.EC)、金双歧的嗜热链球菌(J.EC)、妈咪爱的枯草芽孢杆菌(M.yb)、整肠生的地衣芽孢杆菌(Z.yb)，与综合评价结果基本一致，仅仅是两株乳杆菌https://www.doczj.com/doc/1c8586989.html,、J.LB和J.EC排序出现差异.
b.ELISA法排序结果为：丽株肠乐的青春双歧杆菌(L.BL)、金双歧的长双歧杆菌(J.BL)、培菲康的长双歧杆菌(P.BL)、培菲康的嗜酸乳杆菌(https://www.doczj.com/doc/1c8586989.html,)、培菲康的粪肠球菌(P.EC)、金双歧的保加利亚乳杆菌(J.LB)、金双歧的嗜热链球菌(J.EC)、妈咪爱的屎肠球菌(M.EC)、妈咪爱的枯草芽孢杆菌(M.yb)、整肠生的地衣芽孢杆菌(Z.yb)，P.BL对粘蛋白的粘附性能高于了两株乳杆菌，J.EC也表现出与粘蛋白的强粘附性，而J.LB对粘蛋白的粘附性能较之综合评定排序置后；
c.对EPEC的粘附抑制结果排序为：金双歧的保加利亚乳杆菌(J.LB)、培菲康的长双歧杆菌(P.BL)、金双歧的长双歧杆菌(J.BL)、妈咪爱的屎肠球菌(M.EC)、丽株肠乐的青春双歧杆菌(L.BL)、培菲康的粪肠球菌(P.EC)、培菲康的嗜酸乳杆菌(https://www.doczj.com/doc/1c8586989.html,)、妈咪爱的枯草芽孢杆菌(M.yb)、整肠生的地衣芽孢杆菌(Z.yb)、金双歧的嗜热链球菌(J.EC)，与综合评定结果差异较大，J.LB和P.BL以及M.EC都出现了较好的粘附抑制效果，相反，L.BL和https://www.doczj.com/doc/1c8586989.html,排序与综合评定结果相比明显置后。
3.期刊论文崔舒晟.胡颖培菲康治疗肠易激综合征疗效观察-实用医学杂志2010,26(4)
目的:评价培菲康治疗肠易激综合征(IBS)的疗效.方法:以ROMA Ⅲ为标准选取IBS患者60例,其中37例予以培菲康治疗4周,23例予以安慰剂治疗4周;治疗完成后通过对患者症状评定评价疗效.结果:治疗组在治疗4周后症状好转明显高于对照组,其中腹痛或腹部不适、腹胀症状及排便形态明显好转.结论:培菲康对于IBS患者具有一定的疗效.
4.学位论文肖丽君培菲康对幽门螺杆菌治疗中胃内菌群失调的作用研究2008
目的：观察益生菌培菲康对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，H.pylori)治疗中胃内菌群失调的作用。
方法：H.pylori感染的消化性溃疡患者120例，随机分为两组。对照组采用埃索美啦唑镁+阿莫西林+呋喃唑酮三联疗法；治疗组采用上述三联疗法+培菲康。治疗前及治疗14天后分别行胃镜检查，取胃液测pH值和普通细菌培养，观察治疗前后胃液pH值、胃内菌群变化、不良反应、溃疡及糜烂愈合率。治疗结束后4周复查14C-呼吸试验，观察H.pylori根除率。
结果：(1)胃液pH值变化：对照组治疗前后分别为1.45±0.42、4.00±1.02，治疗组分别为1.48±0.35、3.93±O.98，治疗后两组胃液pH均显著升高(P<0.05)，两组之间治疗前后比较差异无统计学意义。(2)胃内菌群变化：治疗前两组胃液细菌培养均为阴性，治疗后治疗组与对照组胃液细菌培养阳性率分别为46.7％、63.3％，两组比较差异无统计学意义(P>0.05)；在胃液pH值大于4时，治疗组与对照组阳性率分别为80％、97.4％，治疗组阳性率低于对照组(P<0.05)；治疗组胃液细菌浓度低于对照组(P<0.01)。两组胃液分离菌中革兰氏阳性菌无明显耐药；革兰氏阴性菌对β-内酰胺类及磺胺类等抗生素耐药。(3)H.pylori根除率：ITT分析，治疗组与对照组分别为68.3％、55.0％，两组比较差异无统计学意义(P>0.05)；PP分析分别为80.4％、
62.3％，治疗组根除率高于对照组(P<0.05)。
(4)不良反应：治疗组与对照组不良反应发生率分别为11.7％、30％，治疗组低于对照组(P<0.05)。(5)溃疡、糜烂愈合率：治疗两周时，治疗组与对照组溃疡愈合率分别为80％、73.3％，两组比较差异无统计学意义(P>0.05)；糜烂愈合率分别为68.7％，40.7％，治疗组高于对照组(P<0.05)。
结论：抗H.pylori治疗后胃内pH值显著升高，出现胃内细菌过度生长；培菲康联合三联抗H.pylori治疗，能减少胃内细菌生长，胃液pH值大于4时作用明显；且能减少不良反应，提高H.pylori根除率，促进溃疡、糜烂愈合。
5.期刊论文卜淑蕊.戴鹏.赵严.刘近春.闫柱.BU Shu-rui.DAI Peng.ZHAO Yan.LIU Jing-chun.YAN Zhu益生菌对
肝硬化血氨影响的实验及临床研究-中国微生态学杂志2007,19(1)
目的 采用动物实验及临床观察,探讨益生菌制剂培菲康治疗肝硬化高氨血症的作用机制.方法 采用大鼠肝硬化模型,其中治疗组予以培菲康悬液每天灌胃治疗共8周,检测治疗组及对照组血浆内毒素指标;并选用70例肝硬化Child-Pugh分级为B级的患者,其中治疗组口服培菲康胶囊(每次2粒,每日3次)3周,观察治疗前后血浆内毒素变化.结果 培菲康治疗组的肝硬化大鼠及患者血浆内毒素均明显低于对照组(P＜0.05).结论 培菲康能明显降低肝硬化患者的血氨水平,可作为肝硬化患者的辅助用药.
6.会议论文王文建.郑跃杰国内儿科应用益生菌制剂的文献分析2008
目的:探讨国内益生菌制剂在儿科临床应用的情况。
方法:以国内儿科临床上使用的益生菌制剂的商品名为关键词,从CHKD 期刊全文数据库检索1994-2007年临床应用类文献,选择有关指标进行统计分析。
结果:共检索到文献463篇,益生菌制剂前6位为妈咪爱112篇（24.2％）、金双歧 90篇（19.4％）、培菲康68篇（14.9％）、丽珠肠乐65篇（14％）、整肠生30篇（6.5％）、贝飞达 20篇（4.3％）。益生菌治疗疾病前7位依次为急性腹泻204篇（44.1％）,新生儿黄疸70篇（15.1％）,功能性肠病60篇（13％）,母乳性黄疸39篇（8.4％）,慢性及迁延性腹泻34篇（7.4％）,肝脏疾病17篇（3.8％）,抗生素相关性腹泻14篇（3％）。实验设计中一般临床观察36篇（7.8％）,对照临床实验426篇（92％）,随机对照临床试验4篇（包括多中心协作研究2篇）。所有文献均报道益生菌治疗有效,有4篇提及安全性（1.7％）。
结论:益生菌制剂已在国内儿科临床广泛使用，并对多种疾病有效。与国外相关研究相比,仍然需要设计严谨的、随机对照临床研究进一步验证。
7.期刊论文马芬芳.MA Fenfang应用培菲康预防小儿肺炎继发腹泻-现代医院2009,9(6)
目的 探讨应用益生菌制剂(培菲康)预防小儿肺炎继发腹泻的效果.方法 将符合研究条件的60例肺炎病儿随机分两组,均按小儿肺炎防治方案应用抗生素以及对症治疗,抗生素以静脉途径,试验组同时加用培菲康散剂口服,1.0 g,3次/天.观察每天大便次数、性状、量,有无呕吐,对发生腹泻者评定脱水程度并测定血气和电解质.比较两组病人分别在第1、3、5、7天时腹泻的发生率及严重程度(轻型、重型).结果 两组患儿的腹泻发生率比较第1天两组无显著性差异(2=0.001,p>0.05),第3、5、7天时试验腹泻发生率均低于对照组,差异均具有统计学意义(p<0.01);两组轻度腹泻、重度腹泻、无腹泻的构成差别有显著意义(p<0.01);试验组病例未见不良事件,试验组病例依从性较好,全部完成本次研究.结论 通过对肺炎患儿补充益生菌,可以迅速提高肠道内益生菌的数量,具有生物拮抗、维持和调整肠道微生态平衡,促进肠绒毛上皮细胞增生,促进肠黏膜相关的免疫功能的发育、成熟、调节等作用,预防及减少继发腹泻的发生,所以益生菌可作为维持肠道菌群平衡、预防和治疗小儿肺炎继发腹泻的有效手段之一.
8.学位论文向建文口服益生菌对早产儿胃食管反流发生的影响2008
目的：通过对服用益生菌早产儿及对照组早产儿胃食管反流症状观察,动态体重测量,24小时食管PH监测,探讨益生菌对早产儿胃食管反流的影响。 方法：将90例早产儿分成两组,45例于常规人工喂养后予口服益生菌(培菲康散),作研究组,另45例根据诊疗常规人工喂养,不加用益生菌,作对照组,；观察两组早产儿体重增长及发生呕吐、胃潴留、腹胀等消化道症状及呼吸暂停发生的的情况,于喂养3周后两组早产儿分别行24小时食管PH监测。
结果：
1.消化道症状情况：研究组早产儿发生呕吐、胃潴留、腹胀和呼吸暂停例数(百分比)分别为5(11.6)、4(9.3)、6(13.9)、6(13.9),发生率明显低于对对照组的12(30.0)、11(25.6)、13(3
2.5)、15(37.5),(P<0.05)。
2.研究组早产儿出生及1到3周体重分别是2.11±0.10kg、2.03±0.15kg、2.28±0.14kg、2.53±0.21kg,对照组分别是2.16±0.12 kg、2.09±0.13 kg、2.19±0.17kg、2.36±0.19 kg。两组相比,出生体重及前2周体重无明显差别(P>0.05),第3周时研究组早产儿体重高于比对照组(P<0.05)。
3.研究组早产儿胃食管反流指标中的反流发生的次数、反流超过5分钟的次数、最长反流持续时间、食管PH<4总时间、反流指数分别是28.7±5.2、
4.7±0.7、11.6±1.1、32.6±8.4、
5.5±0.6,均低于对照组的33.5±7.8、5.2±0.6、12.7±2.3、39.3±7.5、
6.2±0.9,差异均有非常显著意义
(P<0.05)。研究组38例中有11例Johnson-DeMeester计分≧22分,病理性GER发生率为28.9％；对照组36例中有19,占52.7％。研究组GER发生率低于对照组,差异有显著性(X~2=4.355 P<0.05)。
结论：口服益生菌能改善早产儿胃肠功能,减少呕吐、胃潴留、腹胀和呼吸暂停的发生,促进体重增长及减少或减轻早产儿胃食管反流的发生及程度。
9.期刊论文范妮.田字彬.孔心涓.赵清喜.魏良洲.Ni Fan.Zi-Bin Tian.Xin-Juan Kong.Qing-Xi Zhao.Liang-Zhou
Wei益生菌对肝硬化患者肠黏膜通透性的影响-世界华人消化杂志2009,17(36)
目的:探讨肝硬化门脉高压患者肠黏膜屏障功能及双歧杆菌等三联活菌胶囊(培菲康)对肝硬化患者肠黏膜通透性的影响.方法:选择我院肝硬化门脉高压、肝功能Child-pugh分级为B级的患者34例,随机分为对照组和双歧杆菌等三联活菌胶囊(培菲康)治疗组,两组均给予常规对症治疗,治疗组加用培菲康,每次420 mg,每日3次,口服2 wk.所有患者均于治疗前后测定血清二胺氧化酶(DAO)及内毒素(ETX)含量.另选12例健康体检者作为正常对照组.结果:肝硬化患者治疗组及对照组血清DAO及ETX含量均高于正常对照组,差异有统计学意义(0.2502±0.0969 kU/L,0.2263±0.1145kU/L vs 0.1145±0.0680
kU/L,P<0.01;0.3801±0.1929 EU/mL,0.3283±0.1251 EU/mL vs0.2338±0.0843 EU/mL,均P<0.05);血清DAO及ETX两指标呈线性相关
(r=0.800,P<0.01);培菲康组治疗后血清DAO及ETX水平较治疗前下降,差异均有统计学意义(0.1635±0.0592kU/L vs 0.2502±0.0969
kU/L,0.2445±0.1219EU/mL vs 0.3801±0.1929 EU/mL,P<0.05);对照组治疗后血清DAO及ETX水平较治疗前下降,但差异无统计学意义.结论:血清DAO及ETX水平可作为肝硬化Child-pugh分级B级患者肠黏膜屏障功能的监测指标;补充肠道益生菌可帮助改善肠黏膜屏障功能.
10.会议论文黄方.黄志华姜黄素对急性肝内胆汁淤积大鼠肝组织NF-κB和MCP-1的影响2008
益生菌是指能够促进肠道内菌群生态平衡，对宿主起有益作用的活的微生物制剂。临床上益生菌制剂干预母乳性黄疸，可降低血清总胆红素及肠道、胆汁中的β-葡萄糖醛酸苷酶(β－GD)的活性。本文采用益生菌制剂－培菲康，其主要成分为双歧杆菌、嗜酸乳杆菌和粪链球菌，来干预ANIT诱导的急性肝内胆汁淤积鼠模型，分时测定肝组织NF-κB和MCP-1的表达量，进一步探讨益生菌防治急性胆汁淤积肝损伤的作用机制。
引证文献(1条)
1.于晓燕.尹华华.朱京慈益生菌对重型颅脑伤大鼠肠道菌群、消化酶及肠动力的影响[期刊论文]-中国实用护理杂志 2009(10)
本文链接：https://www.doczj.com/doc/1c8586989.html,/Periodical_zgyy200608004.aspx
授权使用：南昌大学图书馆(wfncdxtsg)，授权号：19c3a0a5-1aad-4478-87df-9e08012902b9
下载时间：2010年10月7日