何首乌中二苯乙烯苷提取纯化研究进展
二苯乙烯苷为何首乌的主要活性成分，具有抗衰老、神经保护、降血脂、保护肝脏、抗肿瘤等药理作用，而提取与纯化技术是其获得的关键。本文综述了近年来二苯乙烯苷的提取与纯化技术，主要包括水煎煮法、渗漉法、回流法等提取方法，以及色谱法、重结晶法、萃取法等纯化方法，并探讨其发展前景，为进一步研究及应用提供参考。
Abstract：Stilbene glucoside is one of major active constitutions in Polygoni Multiflori Radix. Stilbene glucoside contributed markedly to resisting caducity，protecting nerve，reducing serum lipids，and protecting liver and antitumor activity. The extraction and purification technology is the key issue to obtain stilbene glucoside. Through research，extraction and purification technology has made a certain progress. The stilbene glycoside could be extracted by water boiling，diacolation，and backflow；then it could be purified by the method of chromatography，recrystallization，and extraction. In this article，the technologies in extracting and purifying stilbene glucoside were reviewed，and the prospect of stilbene glucoside preparation was discussed to lay the foundation for further research and application.
Key words：stilbene glucoside；extraction；purification
何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根，主要以生品或制何首乌入药。生首乌具有润肠、解毒功效，制何首乌则具有补肝肾、益精血、乌须发功效。何首乌的化学成分主要为蒽醌类化合物、二苯乙烯苷类化合物、磷脂类化合物等。其中二苯乙烯苷因具有多种生物活性及药理作用，已成为临床研究热点，其含量也成为何首乌药材的专属性指标。随着二苯乙烯苷临床研究的深入，其提取与纯化技术也成为该领域的研究重点。目前，二苯乙烯苷的提取与纯化方法工艺复杂、效率较低，难以实现产业化。因此，研究开发高效的提取与纯化工艺对二苯乙烯苷稳定性、药理活性及临床应用等研究的开展具有重要意义。本文综述近年来二苯乙烯苷的提取与纯化技术研究进展，以期为其开发及应用提供参考。
1 二苯乙烯苷简介
二苯乙烯苷，化学名称为2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷，分子式为C20H22O9，分子量为406.39，化学结构式见图1。其外观为白色无定形粉末，易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等，可溶于乙酸乙脂，难溶于亲脂性有机溶剂，光照条件下反式二苯乙烯苷转化为顺式二苯乙烯苷[1]，在高温条件（>60 ℃）、酸性溶液中很不稳定，在强酸、强碱条件下，可分别水解为葡萄糖、苷元或醌类化合物。研究表明，二苯乙烯苷具有延缓衰老[2]、保护肝脏[3]、调节血脂[4]、神经保护[5]、抗肿瘤[6]等作用。
葡萄皮中花色苷和油的提取 一.实训目的： 1. 会通过查阅文献资料，搜集有关数据，并正式选用公式的能力。当缺乏必要数据尚需自己通过实验测定或在生产现场进行实际查定。 2. 在兼顾技术上先进性，可行性，经济合理性的前提下，学生能够综合分析设计任务要求，确定仪器分析测定。进行设备选型，并提出保证过程正常，安全运行所需要的监测和计量参数，同时，还要考虑改善劳动条件和环境保护的有效措施。 3. 进一步巩固、提高已有的实验操作技能，掌握常规工艺试验技术，常规检验技术，学会设计工作思路、方法、步骤，受到技术员的基本训练，提高技术实施能力。 4.能够用精炼的语言，简洁的文字，清晰地的图标来表达自己的实际思想和实验结果。 5. 树立严谨的科学作坊的良好的工作习惯，提高独立思考和与他人合作完成任务的能力。 二、实训场所： 北京电子科技职业学院色谱分析实验室及生化实验室。 三、实训要求： 1. 论述相关企业中分析仪器的种类，尤其侧重于气象色谱仪、液相色谱仪、紫外可见以及酸度计等仪器的使用。 2. 测定方法依据和方法原理。 3. 样品及采样过程。 4. 分析工作质量保证措施。 5. 测定数据记录以及数据计算处理过程。 6. 报告测定结果，对样品质量作出评价。
7. 分析工作质量作出自我评价。 四、实训内容及安排： （一）课程设计的主要任务： 1.葡萄皮中花色苷和油的提取 本组做的是葡萄皮中油的提取。 五、实训过程： 12月26日查阅相关资料确定实验方案 1、超声波提取法： 利用超声波破碎细胞（空化）和强化传质作用（机械作用），使溶剂分子渗透到组织细胞中，能更好地与溶质分子接触，使细胞中可溶成分更好地释放出来。它具有操作简单、提取温度低、提取率高、提取物结构不易被破坏等优点。近年来，研究者们已将超声波技术应用到多种油脂的提取中。 相关研究表明，对比无水乙醇、丙酮、石油醚和正己烷四种提取剂在超声波作用下对油的提取效率，石油醚为较适宜的提取剂。以石油醚作为提取剂时，最佳提取工艺为超声时间25min，功率500W,循环泵转速1200r/min，料液比1：5，在此条件下提取率可达94．12%。 2、超临界CO2流体技术： 超临界流体技术是近年来新兴的一门食品工程高新技术。超临界流体以其特有的理化性质、无可比拟的优点受到了各行各业的重视，并被不断地加以应用。超临界CO2的特殊性质决定了其在提油、萃取天然成分等非极性物质方面具有独特的优越性——速度快；产率高；不破坏不饱和脂肪酸；无溶剂残留；油脂色泽浅；脱酸、脱色、脱蜡、脱臭等在萃取器内一次完成。现在，超临界流体技术的基础性和应用性研究正处于一个高潮，将这一技术用于油脂等非极性天然成分萃取的研究和报道已经很多，如在小麦胚芽油提取、植物精油萃取、酒花萃取、磷脂提取等方面已有大量报道。 3、索氏提取法： 在实验室多采用索氏提取法来提取油脂，索氏提取器就是利用溶剂回流及虹吸原理，使固体物质连续不断地被溶剂萃取，既节约溶剂，萃取效率又高。 萃取前先将固体物质研碎，以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套内，置于提取器中，提取器的下端与盛有溶剂的圆底烧瓶相连，上面接回流冷凝管。加热园底烧瓶，使溶剂沸腾，蒸气通过提取器的支管上升，被冷凝后滴入提取器中，溶剂和固体接触进行萃取，当溶剂面超过虹吸管的最高处时，含有萃取物的溶剂虹吸回烧瓶，因而萃取出一部分物质，如此重复，使固体物质不断为纯的溶剂所萃取、将萃取出的物质富集在烧瓶中。
2，3，5，4’一四羟基二苯乙烯一2-O—B—D-葡萄糖苷(简称二苯乙烯苷) 二苯乙烯苷是蓼科蓼属植物何首乌的主要成分之一，是一种多羟基酚类化合物。 1.二苯乙烯苷对脑缺血啮齿动物脑NMDA受体及细胞内钙离子的影响- 我室在前期研究工作中发现，二苯乙烯苷对淀粉样蛋白、叠氮钠和H202致SK-N-SH神经细 胞损伤模型中具有较好的保护作用。 二苯乙烯苷能够抑制啮齿动物脑缺血再灌注所导致的脑组织NMDA受体结合力及神经细胞 内钙离子浓度的升高，减轻钙超载导致的脑组织损伤，可能具有脑保护作用。 2．不同地区制何首乌中二苯乙烯苷含量测定及稳定性考察 二苯乙烯苷是其有效成分之一，具有降低胆固醇和保肝作用。中国药典2000年版何首乌项下规定了何首乌药材中二苯乙烯苷含量不得低于1．0％，而对于制何首乌中二苯乙烯苷含量没有规定含量限定。高效液相色谱法测定二苯乙烯苷。 3．何首乌二苯乙烯苷抑制长波紫外线诱导的HaCaT细胞氧化应激损伤 二苯乙烯苷是何首乌中主要的生物活性成分，分子量为406．39，为白色无定形粉末，水溶性好，具有抗氧化清除自由基的作用，作为抗衰老的一种有效成分极具研究价值。本实验观察了二苯乙烯苷(TSG)对UVA诱导的人皮肤角质形成细胞活力的影响及氧化应激损伤的保护 作用。利用倒置显微镜形态学观察及MTT法研究二苯乙烯苷对皮肤角质形成细胞活力的影响；酶生化法测定细胞内MDA含量和SOD、GSH—PX的活性。 4．不同炮制方法对何首乌中二苯乙烯苷含量的影响 苯乙烯苷为何首乌中主要的水溶性成分，具有抗衰老、神经保护、抗血脂及抗动脉粥样硬化以及抗肿瘤及抗肿瘤转移作用。 采用HPLC测定各炮制品中二苯乙烯苷的含量，色谱柱为Agilent TC-C18(250mm×4.6mm，5um)，流动相为乙腈-水(25：75)，流速为0.8ml／min，检测波长为320nm，常温。 5．广西产何首乌中蒽醌与二苯乙烯苷的含量考察 采用职Lc法测定，色谱柱：symmetryC18(4．6×150mm，5 um)，二苯乙烯苷流动相为乙腈一水(25：75)，流速lml．min-1，检测波长320nm 6.大孔树脂吸附纯化何首乌中二苯乙烯苷的研究 以树脂的比吸附量为指标，比较了4种大孔树脂对二苯乙烯苷的吸附性能，对大孔树脂吸附纯化生首乌中二苯乙烯苷的工艺参数进行筛选，并在此基础上考察了洗脱条件。 7. 二苯乙烯苷的提取分离及在保健饮料中的应用研究 药理分析表明，何首乌中的二苯乙烯苷活性成分具有显著的降低血脂、降低血浆胆固醇和防止脂肪肝、防止肝功能损害等作用115,1 6l。二苯乙烯苷可以通过多种渠道达到降脂保健作用：①．促进肠道胆固·醇的排泄及抑制外源性胆固醇的吸收。②．抑制胆固醇、甘油三酯和B．脂蛋白的合成；③．影响血脂分布、运转及阻止胆固醇在肝脏中的沉积。④．降低血中胆固醇含量，能和胆固醇结合成脂，使之比较容易运送代谢和排泄，而减少血中胆固醇的含量，降低血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶。此外，二苯乙烯苷还具有一定的改善记忆功能、
论文摘要：葡萄皮花色苷是一种天然色素，具有溶解性好、色彩鲜艳、易与食品结合上色等特点，是替代合成色素的一类重要食品添加剂。 本实验利用超声波辅助酸性乙醇溶剂法对葡萄皮花色苷的提取进行了研究，获得葡萄皮花色苷提取的最优工艺，并研究了花色苷对外界环境的稳定性。实验结果表明，葡萄皮中花色苷的最适提取条件为：提取温度60℃，提取液的乙醇浓度80%，提取液pH 0.5。提取液的pH对花色苷提取率有显著性影响。稳定性实验结果表明，低温条件下的花色苷较为稳定，随着温度的升高葡萄皮花色苷降解速度加快，稳定性逐渐下降；避光保存时花色苷稳定性最好，当葡萄皮花色苷溶液处于光照条件下，花色苷降解速率加快；蔗糖、防腐剂、亚硫酸钠对葡萄皮花色苷的稳定性无明显影响；H2O2对葡萄皮花色苷的稳定性有较大影响。 Keywords: grape skin; anthocyanins; extraction; stability test Abstract ：Anthocyanins are natural technicolored pigments and are bright-coloured, which can dissolve in water and combine with food easily. They are important food additives instead of artificial colour. The anthocyanins were extracted from grape skin by ultrasonic wave and the stability of anthocyanins from grape skins were studied. The results showed the optimal temperature for extraction was 60℃, the concentration of ethanol was 80% and the pH was 0.5. The pH of extraction had significantly influence on the ratio of extraction. The stability test showed that anthocyanins from grape skins with low temperature were stable and the rate of degradation was rapid when temperature was high. Light affected the stability of anthocyanins from grape skins and it was stable when anthocyanins were out of light. Glucose, aseptic, Na2SO3 had little influence on the stability of anthocyanins from grape skins;while H2O2 had great influence on the stability of anthocyanins from grape skins. 1 绪论 1.1 花色苷的概述 花色苷是自然界中最庞大的一类水溶性色素，日常生活中人们食用的被子植物和开花植物中，至少有27个科，73个属和很多个种的植物中含有花色苷类物质[1]。花色苷广泛存在这些植物的花、果实、茎、叶和根等器官的细胞液中，使其呈现由红、紫红到蓝等不同的颜色。 1.1.1 花色苷的化学结构以及种类 在花色苷属于黄酮类化合物[8] [9] [10]，由花色苷配基（花色素）和糖基以糖苷键结合形成。花色苷配基（花色素）具有黄酮类物质的C6C3C6 结构[11]，是2-苯基-苯并吡喃阳离子的衍生物。花色素很不稳定，所以在食品中和植物中主要以花色苷的形式存在。 花色素因为3、5位上的取代基的差异而有不同的种类。目前已知的花色素有二十余种，在食品中重要的有六种[11] [12] [13]，即花翠素（飞燕草素）、花青素（矢车菊素）、3′-甲花翠素（矮牵牛色素）、甲基花青素（芍药色素）、二甲花翠素（锦葵色素）[2] [3]。不同种类的花色苷因花色素结构的不同而带有不同的颜色。
何首乌中二苯乙烯苷提取纯化研究进展 二苯乙烯苷为何首乌的主要活性成分，具有抗衰老、神经保护、降血脂、保护肝脏、抗肿瘤等药理作用，而提取与纯化技术是其获得的关键。本文综述了近年来二苯乙烯苷的提取与纯化技术，主要包括水煎煮法、渗漉法、回流法等提取方法，以及色谱法、重结晶法、萃取法等纯化方法，并探讨其发展前景，为进一步研究及应用提供参考。 Abstract：Stilbene glucoside is one of major active constitutions in Polygoni Multiflori Radix. Stilbene glucoside contributed markedly to resisting caducity，protecting nerve，reducing serum lipids，and protecting liver and antitumor activity. The extraction and purification technology is the key issue to obtain stilbene glucoside. Through research，extraction and purification technology has made a certain progress. The stilbene glycoside could be extracted by water boiling，diacolation，and backflow；then it could be purified by the method of chromatography，recrystallization，and extraction. In this article，the technologies in extracting and purifying stilbene glucoside were reviewed，and the prospect of stilbene glucoside preparation was discussed to lay the foundation for further research and application. Key words：stilbene glucoside；extraction；purification 何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根，主要以生品或制何首乌入药。生首乌具有润肠、解毒功效，制何首乌则具有补肝肾、益精血、乌须发功效。何首乌的化学成分主要为蒽醌类化合物、二苯乙烯苷类化合物、磷脂类化合物等。其中二苯乙烯苷因具有多种生物活性及药理作用，已成为临床研究热点，其含量也成为何首乌药材的专属性指标。随着二苯乙烯苷临床研究的深入，其提取与纯化技术也成为该领域的研究重点。目前，二苯乙烯苷的提取与纯化方法工艺复杂、效率较低，难以实现产业化。因此，研究开发高效的提取与纯化工艺对二苯乙烯苷稳定性、药理活性及临床应用等研究的开展具有重要意义。本文综述近年来二苯乙烯苷的提取与纯化技术研究进展，以期为其开发及应用提供参考。 1 二苯乙烯苷简介 二苯乙烯苷，化学名称为2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷，分子式为C20H22O9，分子量为406.39，化学结构式见图1。其外观为白色无定形粉末，易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮等，可溶于乙酸乙脂，难溶于亲脂性有机溶剂，光照条件下反式二苯乙烯苷转化为顺式二苯乙烯苷[1]，在高温条件（>60 ℃）、酸性溶液中很不稳定，在强酸、强碱条件下，可分别水解为葡萄糖、苷元或醌类化合物。研究表明，二苯乙烯苷具有延缓衰老[2]、保护肝脏[3]、调节血脂[4]、神经保护[5]、抗肿瘤[6]等作用。
葡萄皮中花色苷和油的提取 一. 实训目的： 1.会通过查阅文献资料，搜集有关数据，并正式选用公式的能力。当缺乏必要数据尚需自己通过实验测定或在生产现场进行实际查定。 2.在兼顾技术上先进性，可行性，经济合理性的前提下，学生能够综合分析设计任务要求，确定仪器分析测定。进行设备选型，并提出保证过程正常，安全运行所需要的监测和计量参数，同时，还要考虑改善劳动条件和环境保护的有效措施。 3.进一步巩固、提高已有的实验操作技能，掌握常规工艺试验技术，常规检验技术，学会设计工作思路、方法、步骤，受到技术员的基本训练，提高技术实施能力。 4.能够用精炼的语言，简洁的文字，清晰地的图标来表达自己的实际思想和实验结果。 5.树立严谨的科学作坊的良好的工作习惯，提高独立思考和与他人合作完成任务的能力。 二、实训场所： 北京电子科技职业学院色谱分析实验室及生化实验室。 三、实训要求： 1.论述相关企业中分析仪器的种类，尤其侧重于气象色谱仪、液相色谱仪、紫外可见以及酸度计等仪器的使用。 2.测定方法依据和方法原理。 3.样品及采样过程。 4.分析工作质量保证措施。 5.测定数据记录以及数据计算处理过程。 6.报告测定结果，对样品质量作出评价 7.分析工作质量作出自我评价 四、实训内容及安排：
（一）课程设计的主要任务： 1.葡萄皮中花色苷和油的提取本组做的是葡萄皮中油的提取。 五、实训过程： 12月26日查阅相关资料确定实验方案 1、超声波提取法： 利用超声波破碎细胞（空化）和强化传质作用（机械作用），使溶剂分子渗透到组织细胞中，能更好地与溶质分子接触，使细胞中可溶成分更好地释放出来。它具有操作简单、提取温度低、提取率高、提取物结构不易被破坏等优点。近年来，研究者们已将超声波技术应用到多种油脂的提取中。 相关研究表明，对比无水乙醇、丙酮、石油醚和正己烷四种提取剂在超声波作用下对油的提取效率，石油醚为较适宜的提取剂。以石油醚作为提取剂时，最佳提取工艺为超声时间25min,功率500W循环泵转速1200r/min ,料液比1: 5, 在此条件下提取率可达94． 1 2%。 2、超临界CO2流体技术： 超临界流体技术是近年来新兴的一门食品工程高新技术。超临界流体以其特有的理化性质、无可比拟的优点受到了各行各业的重视, 并被不断地加以应用。超临界C02的特殊性质决定了其在提油、萃取天然成分等非极性物质方面具有独特的优越性——速度快；产率高；不破坏不饱和脂肪酸；无溶剂残留；油脂色泽浅；脱酸、脱色、脱蜡、脱臭等在萃取器内一次完成。现在,超临界流体技术的基础性和应用性研究正处于一个高潮, 将这一技术用于油脂等非极性天然成分萃取的研究和报道已经很多,如在小麦胚芽油提取、植物精油萃取、酒花萃取、磷 脂提取等方面已有大量报道。 3、索氏提取法： 在实验室多采用索氏提取法来提取油脂,索氏提取器就是利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被溶剂萃取,既节约溶剂,萃取效率又高。 萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,置于提取器中, 提取器的下端与盛有溶剂的圆底烧瓶相连, 上面接回流冷凝管。加热园底烧瓶,使溶剂沸腾,蒸气通过提取器的支管上升,被冷凝后滴入提取器中, 溶剂和固体接触进行萃取, 当溶剂面超过虹吸管的最高处时, 含有萃取物的溶剂虹吸回烧瓶, 因而萃取出一部分物质, 如此重复, 使固体物质不断为纯的溶剂所萃取、将萃取出的物质富集在烧瓶中。 本组所选用的方法为索氏提取法。 12月27日领取用品进行索氏提取 用品：索氏提取器、石油醚、CH30H圆底烧瓶、正己烷、无水亚硫酸钠等。 准确称取了10.00g已粉碎的葡萄皮样品于滤纸筒中，放于索氏提取器中，加入200mL石油醚，在80C水浴中提取8h。
一、摘要 ⑴、葡萄皮色素来源较为丰富。葡萄果皮花色苷不但含量高, 而且种类多, 葡萄花色苷作为一种天然食用色素, 安全、无毒，且具有降低肝脏及血清中脂肪含量、抗氧化、抗肿瘤、延迟血小板凝集等多种生理和药用活性功能对葡萄皮花色苷的提取技术及稳定性的研究具有重要意义 ⑵、目前为止花色苷的定量分析方法主要有直接比色法、pH示差法、亚硫 酸脱色法、色谱法，本次实训我们采用液相色谱法对花色苷进行提取。 ⑶、用于液相色谱法提取葡萄酒中的花色苷前要进行样品的预处理，再测定 其中的花色苷来判断葡萄酒或者葡萄皮中的花色苷，标定是否合格以及是否符合国家标准。 二、关键词 ⑴花色苷⑵液相色谱⑶分光光度计 三、正文 引言 花色苷的提取方法有溶剂浸提法、微波辅助萃取法、酶解法超高压辅助提取法、本次我们是利用微波萃取，微波是一种频率300～300 000 MHz的电磁波。在微波场中吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分 被选择性加热，从而使得被萃取物质从基体或体系中分离，进入到介电常数较小、微波吸收能力相对较弱的萃取剂中。由于传统提取过程中能量累积和渗透过程以无规则的方式发生，萃取的选择性较差，只能通过改变溶剂性质或延长溶剂萃取时间来获得，同时又受限于溶解能力和扩散系数，效果不够理想；微波因其能对
萃取体系中不同组分进行选择加热，因而能使目标组分直接从基体分离萃取。微 波萃取受溶剂亲和力的限制较小，可供选择的溶剂较多。另外，微波加热则利用 分子极化或离子导电效应直接对物质进行加热，避免了传统加热过程因热传导、 热辐射造成的热量损失，加热效率高、升温快速均匀，缩短了萃取时间。具有设 备简单、适用范围广、重现性好、萃取效率高、萃取时间短、能耗低、污染轻等 特点。用液相色谱法来检测葡萄酒及葡萄皮中的花色苷，用等度及梯 度检测花色苷的存在来判断其营养成分。 ⑴、材料及方法 ①仪器及试剂 材料：葡萄皮 仪器：超声波提取器、紫外-可见分光光度计、安捷伦-高效液相 色谱仪 试剂：甲醇、甲酸、水 ②实验方法 葡萄皮花色苷提取液的制备 干葡萄皮→粉碎→加入提取液→超声波辅助提取→花色苷提取液 称取 1g 粉碎过的干葡萄皮，按 1:40（g/mL）的料液比加入酸性乙醇提取液，用超声波清洗器辅助提取。超声波辅助提取条件定为：频率 40KHZ，功率 500W，工作状态 100%。超声波辅助提取 40min 后过滤得到花色苷提取液，用722可见光分光光度计在530nm下测定吸光值，以吸光值为考察指标，确定提取效果。 在提取液乙醇浓度为 60%，提取液 pH 1.0 的条件下，于 30℃、40℃、50℃、
二苯乙烯苷的含量测定研究 发表时间：2018-06-11T11:38:13.543Z 来源：《中国误诊学杂志》2018年第9期作者：杨金颖1 纪京辉2 [导读] 测定不同批次首乌藤、制何首乌及XX合剂中二苯乙烯苷的含量。 杨金颖1 纪京辉2 1.天津市武清区中医医院制剂室天津 301700； 2.天津市武清区飞鹰集团有限公司天津 301700； 摘要：目的：测定不同批次首乌藤、制何首乌及XX合剂中二苯乙烯苷的含量。方法：采用高效液相色谱法对不同批次的首乌藤、制何首乌、XX合剂进行含量测定。结果：不同批次的首乌藤、制何首乌、XX合剂的含量测定结果有差异。结论：不同产地不同批次的首乌藤和制何首乌质量有差异，不同批次的XX合剂亦有差异。关键词：二苯乙烯苷；含量测定；研究 [Abstract] Objective：To determinate different batches of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture. Method：The contents of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture were determined by HPLC. Result：The determination results of different batches of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture are different. Conclusion：There are differences in the quality of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture. [Key words] stilbene glucoside；content determination；study； 2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（C20H22O9），简称二苯乙烯苷，属多羟基酚类化合物，是蓼科植物何首乌的特有成分。研究表明[1-2]，二苯乙烯苷具有多种生理活性和药用价值，主要表现在降血脂及抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、神经保护、抗衰老、抗氧化清除自由基、保护肝脏等方面。二苯乙烯苷以糖苷的形式存在，固态稳定性较好，其具有良好的水溶性，但光照、温度、金属离子对二苯乙烯苷的稳定性影响较大[3]。何首乌各器官中块根的二苯乙烯苷含量最高，其次为老根和老茎[1]。本实验对不同批次的首乌藤、制何首乌、XX合剂进行含量测定，以期确定饮片的最佳供货单位，并证实饮片的质量会直接影响到制剂的质量，为今后制剂室采购饮片提供参考。 1.资料与方法 1.1.仪器与试药 1.1.1仪器：高效液相色谱仪：岛津LC-2010CHT高效液相色谱仪，分析柱：WondaSil C18（250mm×4.6mm，5μm）；BT25S型电子天平（十万分之一），BSA224S型电子天平（万分之一）。 1.1.2试药：二苯乙烯苷：110844-201411（93.2%）和110844-201512（91.0%），购自中国食品药品检定研究院。首乌藤：（亳州市药材总公司中药公司，批号：140216），（亳州市利尔中药材饮片有限公司，批号：151201、160701、161201），（安徽益生源中药饮片科技有限公司，批号：160501）；制何首乌：（亳州市惠康中药饮片有限公司，批号：20140210），（安徽人民中药饮片有限公司，批号：151001、160301、160601），（亳州市利尔中药材饮片有限公司，批号：170302）；XX合剂（某院内制剂，批号：20150506、20150617、20150805、20151113、20160505、20160616、20160727、20160728、20161028、20161231、20170401、20170603、20170801、 20170929）。甲醇、乙腈为色谱纯；乙醇为分析纯；水为娃哈哈纯净水。 1.2不同批次首乌藤、制何首乌、XX合剂中二苯乙烯苷的含量测定 1. 2.1色谱条件：①首乌藤中测定二苯乙烯苷色谱条件[4]：WondaSil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），检测波长为320nm，柱温40℃，流速：1.0 mL·min-1，流动相为乙腈：水（26：74）。色谱图见图1。②制何首乌中测定二苯乙烯苷色谱条件[4]：WondaSil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），检测波长为320nm，柱温40℃，流速：1.0 ml/min，流动相为乙腈：水（25：75）。色谱图见图2。③XX合剂中测定二苯乙烯苷色谱条件[5]：WondaSil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），检测波长为320 nm，柱温40℃，流速：1.0 mL/min，流动相为乙腈：水（20：80）。色谱图见图3。 2.结果 2.1《中国药典》2015年版规定首乌藤中含二苯乙烯苷不得少于0.20%，制何首乌中含二苯乙烯苷不得少于0.70%，不同批次首乌藤和制何首乌的含量测定结果，如表1所示。
收稿日期 :2013－11－20; 修稿日期 :2013－12－04 基金项目 :国家自然科学基金 (31271836 ; 湖南省研究生创新课题 (CX2012B290 作者简介 :魏一枝 (1990－ , 女 , 硕士 , 研究方向为农产品加工及贮藏工程。通信作者 : 邓洁红 (1967－ , 女 , 教授 , 博士生导师 , 研究方向为园艺产品深加工理论与技术 , 通信地址 :410128湖南长沙市芙蓉区湖南 农业大学食品科技学院 , E-mail :hongjiedeng@163．com 。花色苷纯化分离及鉴定研究进展 魏一枝 1, 邓洁红 1, 2, 王维茜 1, 刘永红 3 (1．湖南农业大学食品科技学院 , 长沙 410128; 2．食品科学与生物技术湖南省重点实验室 , 长沙 410128; 3．湖南生物机电职业技术学院 , 长沙 410127 摘要 :花色苷是高等植物中最重要的水溶性色素。因其种类繁多、来源广泛、安全无毒并有一定的 营养和保健功效而引起国内外的广泛关注 , 具有十分重要的开发价值和广阔的应用前景。文中介绍了国内外花色苷分离纯化 (层析法、高速逆流色谱、膜分离法、固相萃取、以及花色苷鉴定 (高效液相色谱 -串联质谱法 , 核磁共振法的研究方法 , 并对各种方法进行了分析评价。对全面认识和开发利用花色苷具有一定的参考价值。 关键词 :花色苷 ; 纯化 ; 分离 ; 鉴定
中图分类号 :TS264．4文献标志码 :A 文章编号 :1005－1295(2014 01－0050－ 05doi :10．3969/j．issn．1005－1295．2014．01．013 Ｒesearchon Isolation and Identification of Anthocyanins WEI Yi-zhi 1, DENG Jie-hong 1, 2 , WANG Wei-qian 1, LIU Yong-hong 3 (1．College of Food Science and Technology , Hunan Agricultural University , Changsha 410128, China ; 2．Key Laboratory of Food Science and Biological Technology of Hunan Province , Changsha 410128, China ; 3．Hunan Biological and Electromechanical Polytechnic , Changsha 410127, China Abstract :Anthocyanins are the most important water-soluble pigment in plants．It caused widespread concern at home and abroad because of its variety and wide range of sources , safety and rich in nutrition and health effects , it has a very important development value and broad application prospects．The present paper mentioned some methods for anthocyanin separation and purification (chromatography , high-speed countercur-rent chromatography , membrane separation , solid phase extraction , and identification (high performance liq-uid chromatography-tandem mass spectrometry , nuclear magnetic resonance spectroscopy ． Key words :anthocyanin ; purification ; separation ; identification 0引言 随着人们对食品安全意识的提高 , 开发和应
花青苷种类、提取及检测 一.种类 花色素均具有类黄酮的基本结构，由两个苯环和一个含氧杂环组成的(C6-C3-C6)C15化合物(如图)，根据B环羟基化和甲基化位置和数目的不同而将花色素主要分为六类:天竺葵色素((Pelargonidin)、矢车菊色素((cyanidin)、芍药色素(peonidin)(3＇-甲基矢车菊色素)、飞燕草色素(delphinidin)、矮牵牛色素(petunidin)(3＇,5＇-甲基飞燕草色素)和锦葵色素(malvidin)( 3＇,5＇-二甲基飞燕草色素)。不同植物中花色素发生糖苷化的位点(C3、C5和C7位等)和数目的差异，及酞化程度的不同使植物中存在着不同的花色素普，其结构复杂，但都以这六种花色素为基本结构(Grotewold，2006)。 二.提取 国内外学者对花青苷的提取做了大量研究，提取目的及目标花青苷不同，提取方法略有差异。花青苷易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶液，花青苷的稳定性受酶、温度、氧气、光、pH值、金属离子等理化性质的影响，在中性和碱性条件下不稳定。 提取过程常采用酸性溶液，酸能够破坏植物细胞膜并溶解水溶性色素，甲醇溶液提取效率高于乙醇及水溶液。花青苷一般用于食品着色，考虑到甲醇的不安全因素，一般选用体积分数为1%的乙醇溶液。采用盐酸酸化可保持提取液pH值较低，阻止无酰基花青苷的降解。随着盐酸被浓缩，pH 值升高，导致花青苷的降解。为获得更接近于天然状态的花青苷，采用弱有机酸或中性溶剂做初步提取，弱有机酸多用甲酸、乙酸、丙酸、柠檬酸和酒石酸，中性溶剂一般采用丙酮作提取剂。粗提后的花青苷提取液浓度很低，浓缩时一般不超过40℃，时间也不宜太长。 1. 2. 花青苷含量的测定：用0.1%的盐酸甲醇浸提叶片2 h后,测657nm、530nm处的吸光度。 3.
二苯乙烯苷对氧糖剥夺星形胶质细胞凋亡的影响及其机制的 研究＊ 张琰1 ，宋志刚2，张会如1（272067，山东济宁，济宁医学院医学影像系1；250012，山东济南，山东大学药学院在读博士研究生2） 摘要目的探讨2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(TSG) 对大鼠大脑皮层星形胶质细胞（AS）缺氧、缺糖损伤所致凋亡的影响，观察内质网应激相关因子Caspase-12、Caspase-3 的表达变化，探讨TSG产生脑保护作用的可能机制。方法原代培养Sprague-Dawley大鼠大脑皮层AS，建立缺氧、缺糖损伤模型，以流式细胞术检测细胞凋亡率，以透射电镜观察细胞超微结构尤其是凋亡小体的变化，研究氧糖剥夺（OGD）对不同组AS的影响；通过钙离子敏感的荧光探针Fura-2/AM负载细胞，荧光双波长分光光度计检测细胞内钙离子浓度的变化；免疫细胞化学染色和RT-PCR方法观测Caspase-12和Caspase-3在OGD前后的变化。结果与正常对照组相比，缺氧缺糖损伤可使细胞内游离钙离子浓度显著增高，TSG预处理后可明显降低钙离子浓度，调节钙稳态失衡。RT-PCR和免疫细胞化学染色结果显示，缺氧缺糖可使AS内Caspase-12、Caspase-3的表达增加，TSG预处理后可显著抑制两者的表达。结论凋亡因子Caspase-12、Caspase-3在缺氧缺糖处理后表达明显增加，提示内质网应激机制在氧糖剥夺所致AS细胞凋亡的发生发展中具有重要作用。TSG可抑制OGD诱导的AS凋亡，其机制可能通过抑制内质网应激发挥作用。 关键词星形胶质细胞；二苯乙烯苷；氧糖剥夺；细胞凋亡；内质网应激 Effects and mechanisms of 2,3,5,4’-tetrahydroxystibene-2-O-β-D-glucoside(TSG) against oxygen- glucose deprivation indused apoptosis in rat astrocytes＊Zhang Yan1,Song Zhigang2,Zhang Huiru1(1Department of Medical Imaging, Jining Medical University,Jining,272067;2School of Pharmaceutical Sciences Shandong
葡萄皮色素的提取及稳定性研究 赵磊，蒋建忠，康锦平，雷鹏，康瑞，金厂农，李兵 甘肃农业大学理学院，甘肃兰州（730070） E-mail：zhaolei100802@https://www.doczj.com/doc/1114113357.html, 摘要：对从葡萄皮中提取天然葡萄色素的方法和条件进行研究，并且在各种不同条件及环境下，对它的性能和稳定性进行测试，结果表明，该色素易溶于有机溶剂，在70%的乙醇中溶解度较大，在可见光区最大吸收波长为560nm。对光、热的稳定性较好,但该色素的抗氧化能力差，在使用该色素时，应避免与氧化性物质接触。在酸性条件下稳定性较好，且色泽鲜艳，纯正，在中性介质中接近蓝色，而在碱性介质中出现褐色！ 关键词：葡萄，色素，稳定性 1 引言 某些合成的食品色素不仅毫无营养价值，还有损于人体健康。挪威、丹麦等国家已禁止在食品加工中使用合成色素。葡萄色素天然花色苷类色素，安全、无毒且含有一定的营养成分，可以作为食品及化妆品等的着色剂。葡萄色素具有抗氧化和清除自由基的作用，有一定的药用与保健价值。 天然色素提取液中含有复杂的细胞内容物及杂质导致色素不稳定，提高天然色素的稳定性至关重要。我们首先对从葡萄皮中提取色素的各项条件进行详细的试验，而后对影响色素稳定性的因素如pH、温度、光、时间、氧及食物中的其他成进行了相关的研究，为此类色素的开发和应用提供理论依据。 2 实验部分 2.1 药品与仪器 鲜葡萄皮、95%、无水乙醇、酒石酸、盐酸、丙酮、石油醚（均为分析醇）、721型分光光度计（上海精密仪器厂），真空干燥器，电热恒温水浴锅，医用真空泵，家用榨汁机，中量有机制备仪一套，烘箱一台。 2.2 色素提取流程 鲜葡萄皮→榨汁→浸提→滤后残渣→浸提液→粘稠液→性质研究 2.3 提取条件 2.3.1 色素最大吸收波长的测定[1] 将色素用乙醇溶解并稀释，用乙醇作对照，在分光光度计上从波长450-600nm每次10nm 测一次吸光度，以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制曲线。从而确定色素的最大吸收波长在560nm -1-
Journal of Organic Chemistry Research 有机化学研究, 2019, 7(1), 11-17 Published Online March 2019 in Hans. https://www.doczj.com/doc/1114113357.html,/journal/jocr https://https://www.doczj.com/doc/1114113357.html,/10.12677/jocr.2019.71002 Progress on Cis-Trans Isomerization Reactions of Stilbenes Zhibo Shao1, Wenchao Du2 1College of Chemical and Biological Engineering, Lanzhou Jiaotong University, Lanzhou Gansu 2Conba Bio-Pharm, Jinhua Zhejiang Received: Feb. 22nd, 2019; accepted: Mar. 7th, 2019; published: Mar. 14th, 2019 Abstract Two types of stilbenes with cis-trans double bond have great application potential in medicine, food health, chemistry, optics, electronics, and material science and so on. Based on the studies on the synthesis of stilbene compounds at home and abroad, this paper reviews the progress on the cis-trans-isomerization reactions of double bond in the stilbene compounds. Keywords Stilbenes, Cis-Trans Isomerization, Double Bond 二苯乙烯类化合物的顺反异构化反应研究 进展 邵智博1，杜文超2 1兰州交通大学化学与生物工程学院，甘肃兰州 2浙江金华康恩贝生物制药有限公司，浙江金华 收稿日期：2019年2月22日；录用日期：2019年3月7日；发布日期：2019年3月14日 摘要 二苯乙烯类化合物的双键有顺、反两种构型，分别在医药、食品保健、化学、光学、电子、材料科学等领域具有很大的应用潜力。本文基于国内外学者对二苯乙烯类化合物合成方法的研究，总结了二苯乙烯类化合物双键顺、反构型的异构化反应，希望为相关研究工作者提供参考。
二苯乙烯苷的含量测定研究 摘要：目的：测定不同批次首乌藤、制何首乌及XX合剂中二苯乙烯苷的含量。 方法：采用高效液相色谱法对不同批次的首乌藤、制何首乌、XX合剂进行含量测定。结果：不同批次的首乌藤、制何首乌、XX合剂的含量测定结果有差异。结论：不同产地不同批次的首乌藤和制何首乌质量有差异，不同批次的XX合剂亦有差异。 关键词：二苯乙烯苷；含量测定；研究 [Abstract] Objective：To determinate different batches of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture. Method：The contents of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture were determined by HPLC. Result：The determination results of different batches of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture are different. Conclusion：There are differences in the quality of Polygoni multiflori caulis，Polygoni multiflori radix praeparata and XX mixture. [Key words] stilbene glucoside；content determination；study； 2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（C20H22O9），简称二苯乙烯苷，属 多羟基酚类化合物，是蓼科植物何首乌的特有成分。研究表明[1-2]，二苯乙烯苷具有多种生 理活性和药用价值，主要表现在降血脂及抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、神经保护、抗衰老、抗 氧化清除自由基、保护肝脏等方面。二苯乙烯苷以糖苷的形式存在，固态稳定性较好，其具 有良好的水溶性，但光照、温度、金属离子对二苯乙烯苷的稳定性影响较大[3]。何首乌各器 官中块根的二苯乙烯苷含量最高，其次为老根和老茎[1]。本实验对不同批次的首乌藤、制何 首乌、XX合剂进行含量测定，以期确定饮片的最佳供货单位，并证实饮片的质量会直接影响 到制剂的质量，为今后制剂室采购饮片提供参考。 1.资料与方法 1.1.仪器与试药 1.1.1仪器：高效液相色谱仪：岛津LC-2010CHT高效液相色谱仪，分析柱：WondaSil C18（250mm×4.6mm，5μm）；BT25S型电子天平（十万分之一），BSA224S型电子天平（万 分之一）。 1.1.2试药：二苯乙烯苷：110844-201411（93.2%）和110844-201512（91.0%），购自 中国食品药品检定研究院。首乌藤：（亳州市药材总公司中药公司，批号：140216），（亳 州市利尔中药材饮片有限公司，批号：151201、160701、161201），（安徽益生源中药饮片 科技有限公司，批号：160501）；制何首乌：（亳州市惠康中药饮片有限公司，批号：20140210），（安徽人民中药饮片有限公司，批号：151001、160301、160601），（亳州市 利尔中药材饮片有限公司，批号：170302）；XX合剂（某院内制剂，批号：20150506、20150617、20150805、20151113、20160505、20160616、20160727、20160728、20161028、20161231、20170401、20170603、20170801、 20170929）。 甲醇、乙腈为色谱纯；乙醇为分析纯；水为娃哈哈纯净水。 1.2不同批次首乌藤、制何首乌、XX合剂中二苯乙烯苷的含量测定 1.2.1色谱条件：①首乌藤中测定二苯乙烯苷色谱条件[4]：WondaSil C18色谱柱 （250mm×4.6mm，5μm），检测波长为320nm，柱温40℃，流速：1.0 mL·min-1，流动相为 乙腈：水（26：74）。色谱图见图1。②制何首乌中测定二苯乙烯苷色谱条件[4]：WondaSil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），检测波长为320nm，柱温40℃，流速：1.0 ml/min， 流动相为乙腈：水（25：75）。色谱图见图2。③XX合剂中测定二苯乙烯苷色谱条件[5]：WondaSil C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），检测波长为320 nm，柱温40℃，流速：1.0 mL/min，流动相为乙腈：水（20：80）。色谱图见图3。