用小鼠做实验的基本知识
1．实验动物环境可分为：
外环境。是指实验动物设施或动物实验设施以外的周边环境。如气候或其他自然因素、邻近的民居或厂矿单位、交通和水电资源等。
内环境。指实验动物设施或动物实验设施内部的环境。内环境又细分为大环境和小环境。前者是指实验动物的饲养间或实验间的整体环境状况;后者是指在动物笼具内，包围着每个动物个体的环境状况，如，温、湿度，气流速度，氨及其他气体的浓度，光照，噪音等等。实验动物环境条件,对动物的健康和质量,以及对动物实验结果有直接的影响，尤其是高等级的实验动物，环境条件要求严格和恒定。因而，对环境条件人工控制程度越高，并符合标准化的要求，生活这样环境中的动物，就越具有质量上的保证，一致性的程度就越高，动物实验结果就有更好的可靠性和可重复性，也使同类型的实验数据具有可比较的意义。
影响实验动物环境的因素及其控制：
气候因素。包括有温度、湿度、气流和风速等。在普通级动物的开放式环境中，主要是自然因素在起作用，仅可通过动物房舍的建筑座向和结构、动物放置的位置和空间密度等方面来作有限的调控。在隔离系统或屏障、亚屏障系统中的动物，主要是通过各种设备，对上述的因素予以人工控制。在国家制定的实验动物标准中，对各质量等级动物的环境气候因素控制，都有明确的要求。
理化因素。包括有光照、噪音、粉尘、有害气体、杀虫剂和消毒剂等。这些因素可影响动物各生理系统的功能及生殖机能，需要严格控制，并实施经常性的监测。普通级动物要在适当的范围内，采取有效的措施，对此予以监控;尤其是清洁级以上等级的动物，应通过实验动物设施内的各种设备，按国家颁布的各个等级标准，严格予以控制。
生物因素。是指实验动物饲育环境中，特别是动物个体周边的生物状况。包括有动物的社群状况、饲养密度、空气中微生物的状况等。例如，在实验动物中许多种类，都有能自然形成具有一定社会关系群体的特性。对动物进行小群组合时，就必须考虑到这些因素。不同种之间或同种的个体之间，都应有间隔或适合的距离。对实验动物设施内空气中的微生物有明确的要求，动物等级越高要求越为严格。国家标准规定，亚屏障系统设施内空气落下的菌数少于或等于12.2个/皿时，屏障系统2.45个/皿时，隔离系统0.49个/皿时。
2．对实验动物设施的环境条件，国家有标准化的规定，检测项目包括温度、相对湿度、气六速度、梯度压差、空气洁净度、空气落菌数、氨浓度、噪声、照度和换气量等。
环境检测的项目
空气洁净度的指标包括有：空气落菌数，是检测空气生物洁净度的指标，用血琼脂培养基，置于被检房舍的空间，暴露30分钟后，计算培养基上的落菌数;尘埃粒子测定，是空气洁净级别的指标，10-20平米的房间布点3-5个，用专用仪器测定，数据作统计分析。
此外还有下列七项指标的测定：温度、湿度测定，包括日温差、温湿度的均匀性等;气流速度测定，使动物处在合理的风速区域;换气次数，测定送风口或出风口的风速，然后参照风口面积和房间容积计算;静压差测定，用压差计测定设施内各区域的压差，分析设施内气流走向的合理性;噪声测定，用噪声计，选离墙壁1米，距地面1.2-1.5米的测点测定;照度测定，常用仪器是照度计，采用多测点测定，检测光照的均匀性;氨浓度测定，该检测项目通
常是在设施运转后进行的监测项目，反映室内的换气情况、动物的合理密度和设施的管理水平。
实验动物设施的维护
实验动物设施的各项环境指标是通过是相关设备的运转来实现及维持的，环境指标值无时不在动态的变化之中。对设施的环境监测和维护，是实验动物设施经常进行的工作。日常维护的重点有以下三个方面：
空气过滤系统的维护，系统中有初效、中效和高效三级过滤，过滤材料在工作时会沾染粉尘，逐渐造成堵塞，而影响设施内的空气质量。初效过滤材料应2周至3个月更换一次，过滤材料经清洗、干燥，可重复使用;中效材料3至18个月更换一次，经清洗、干燥也可重复使用;高效材料一般1--3年更换一次，一般不重复使用。材料更换的次数取决于空气使用量和周围空气的质量。勤换初效和中效材料，可减少对高效材料的更换，因为更换高效过滤材料会在一定时间内造成设施内环境因素的不稳定。
空调系统的维护，空调系统主要控制温、湿度两个重要的环境指标，空调的热交换部件要经常清洗，并要经常检查制冷剂有否泄漏，自动控温装置是否有效。
灭菌系统的维护，注意高压灭菌装置和饮水灭菌系统是否有效，要经常监测，不可疏忽大意。此外，还有传递窗的紫外线灭菌是否有效，传递渡槽的消毒液要及时更换等一些日常的维护工作也不能忽视。总之做好设施的维护工作，反映了设施的管理工作水平，要健全制度，建立岗位责任，在管理上下功夫。
3.实验动物的房舍设施
这里指的实验动物设施是实验动物和动物实验设施的总称，是为实现对动物所需的环境条件实行控制目标而专门设计和建造的。实验动物设施依其使用功能的不同，划分为各个功能区域，各自有不同的要求。
实验动物设施的等级及其规划结构要点
按照“实验动物环境与设施”国家标准（1994）规定，实验动物环境设施分为四等，控制程度从低到高，依次为开放系统、亚屏障系统、屏障系统和隔离系统。
开放系统
通常为单走廊专用房舍，采用自然通风或设有排风装置，有防虫、防鼠设施，要求笼具和垫料消毒、使用无污染的饲料，人员进出有一定的防疫措施。这类设施仅适用于普通级动物。该系统通常分为三个区域：前区，包括检疫室、办公室、休息室等;控制区，包括动物饲育室、或动物实验室、清洁走廊、清洁物品储存室等;后勤处理室，包括污染走廊、洗刷消毒室、污物处理设施等。人员、动物和物品原则上按：前区--控制区--后勤处理区的走向运行。
亚屏障系统
又称为清洁级屏障系统，用于清洁级动物的饲育。一般设双走廊，也有用层流架作清洁级屏障系统。其设施的结构及设备配置要求都与屏障系统大体相同，只是空气洁净度只要求达
到10万级，管理上要求稍低于屏障系统，故称之为亚屏障系统。也分三个区域，即清洁区、污染区和外部区。清洁区包括动物饲育室或实验室、清洁走廊、清洁准备室、清洁物品储存室、检疫室等;污染区包括污染走廊、洗刷消毒室等;外部区包括接受动物室、饲料加工室、库房、更衣淋浴间、办公室、值班室、机房、焚烧炉等。结构通常是双走廊，凡进入清洁区的人员、动物、和物品，甚至空气和水都要经过相应的处理，保证该区域不受微生物的侵染。
进入清洁区的人员、动物和物品要分别遵循一定的运行路线：
1.人员：更衣--淋浴--更衣--清洁走廊--饲养室或动物实验室--污染走廊--洗刷消毒室--更衣--外部区域。
2.物品：包装--高压消毒（已包装消毒的可经传递窗，清结笼具经有消毒液的渡槽）--清结准备室--清洁物品储存室--饲养室或动物实验室--（污物经包装处理）污染走廊--外部区域。
3.动物：动物（带专用包装）--传递窗--检疫室--清洁走廊--饲育室或实验室--（实验后或生产供应）--（经包装）污染走廊--外部区域。
屏障系统
主要是用于SPF级动物的饲育。有正压屏障构造、负压屏障构造（生物安全屏障系统）也有用层流架（正压/负压）或隔离器作SPF级屏障系统。屏障系统设施，要求与外界隔离，空气经三级过滤净化后才进入屏障设施之内，空气洁净度为10,000级。除生物安全屏障系统为负压以外，通常应保持为正压，且不低于20--50Pa;出风口设有防空气倒流装置。屏障系统设有清洁和污染走廊，进入系统的笼具、饲料、饮水、垫料、器械等一切物品都要经过严格的消毒灭菌，人员进入要经淋浴、更衣，使用专用的服装，进入的动物要有专用包装，也经严格的消毒处理。系统内的人员、物品和空气等采用单向固定的流通路线，有呼吸系统疾病和皮肤病的人员不能进入系统内。结构要求和进入系统内的人、动物和物品的运行等与亚屏障系统基本相同，但要求更为严格。
隔离系统
主要设备是隔离器，分有正压和负压隔离器。隔离器及其辅助装置共同组成的隔离系统，用于饲养SPF动物、无菌动物和悉生动物。隔离器可置于亚屏障系统或开放系统内运转，如在开放系统内，则要严格控制系统内环境的温、湿度。
操作时，工作人员只能通过隔离器上的橡胶手套来进行饲养或实验。物品是通过包装消毒后，由灭菌渡舱或传递窗传入;动物是经由无菌剖腹产的方法进入;进入隔离器的空气，应经高效过滤，保证隔离器内空气洁净度达100级，无菌并维持正压状态。根据实验需要也可维持负压状态，但需要配置空气排放装置，保证空气排放符合标准。
另外，对实验动物设施的房舍设施的建设，如：地面、门窗、墙壁、天花板、走廊及空气净化调节设备与送排风系统等都有详细的要求，例如：地面要求平而不滑，一般不设排水口;墙壁要求保温和隔音，墙涂料耐酸碱，易于消毒清洗;有压力梯度的系统，门应开向压力高的一侧等。总之，设施建设是从质量控制要求的角度，考虑到操作和成本等因素来提出相应的要求。
小白鼠俗称“小鼠”、尖嘴鼠，由于颜色纯白而得名。我国饲养小白鼠历史最早，据记载，公元307～1641年就有人捕获野生小鼠进行饲养，并作为古代僧侣们的祭物。据资料介绍，从18世纪开始，小鼠开始成为实验动物，有的也进行观赏饲养。
小白鼠
一、生物学特性
（一）分类学地位
小白鼠是野生鼷鼠的变种，隶属于动物界，脊椎动物门，哺乳纲，啮齿目，鼠种。我国目前饲养最广泛的是1946年从印度某研究所引入到云南昆明饲养的品种，又名昆明种。50年代由昆明引到北京生物制品研究所，以后输送到全国各地饲养。
（二）形态特生
小白鼠经过人们长期选择，定向培育，已形成许多品种类型。一般人们把它分为普通常用小白鼠和满足特殊需要的特种小白鼠两种。特种小白鼠有高癌鼠、低癌鼠、糖尿病鼠及先天性肌肉萎缩病鼠等。有的将小白鼠根据不同杂交方法和获得遗传特性而划分为近交品系、突变品系、远交和杂交群等。1972年以前，国际上公认的小白鼠近交系已有250多个。各品种小白鼠形态特征略有差异，但基本上相差不多。普通小白鼠体长约8厘米，尾略短或略长于体长，面部尖实，嘴前部有长长的触毛，耳耸立呈半圆形，眼睛大，嘴尖，被毛有纯白色和白斑色。90日龄昆明种小白鼠，体长9～11.0厘米，一般雄鼠大于雌鼠，尾有四小白鼠经过人们无数代的定向选择，生活习性有了一定的改变，环境适应性较差。如果把它们放回到室外环境，往往会因缺乏竞争力而难以生存。在人工饲养条件下的小白鼠，胆小怕惊，温顺，较易捕捉。当它受惊时，尾巴挺直并猛力甩动。夜间比白天活跃，喜群居。白日常集群而卧，下午4～5点钟以后活动加强，尤其在晚上更加活跃。当人在晚上进入鼠舍，即可听到小鼠不停地活动与啃咬所发出的沙沙响声。小白鼠喜阴暗、安静的环境，对环境温度、湿度很敏感，经不起温度的骤变和过高的温度。夏季温度过高常影响种母鼠的受胎率和仔鼠生长发育。冬季室温过低，不仅会影响种鼠的生长繁殖，且易发生多种疾病。小白鼠最适宜的室温是 18～22℃，相对湿度为50～60％时较理想。此外，小白鼠尚有在干燥角落营巢的习性。
白化小白鼠怕强光，在比较强烈光照下，哺乳母鼠易发生神经紊乱，可能发生吃仔鼠的现象。受到噪音的刺激，也会吃仔鼠。雄鼠好斗，性成熟的雄鼠放在一起，常发生互斗咬伤。雄鼠具有分泌醋酸氨臭气的特征，是引起饲养室内特殊臭气的原因。小白鼠为杂食性动物，可供利用的饲料很多，但作为实验动物饲养，应针对不同类型的小白鼠和各个生长发育阶段来制定合理的日粮标准。健康小白鼠一般能活存18个月至20个月，最长的可活至二年半。但年老的小鼠常体弱毛稀，多死于各种疾病，尤以肿瘤为多。
（一）饲养设施
经过长期入工饲养的小白鼠，对环境的适应性差，不耐冷热，要求生活在清洁无尘，空气新鲜，温度在18～22℃，相对湿度50～60％，噪音85分贝以下，氨浓度20PPm．通风换气8～
12次/小时的环境中。因此，它对饲养房舍的建筑、环境条件要求比较严格。目前，国外饲养实验小白鼠多采用全封闭式的饲养设施，室内温度。湿度、光照、通风全部自动控制。国内饲养条件，尽管因陋就简，也要满足小白鼠对生活环境的基本要求。此外，笼具是小白鼠的生活场所，也是从事饲养人员每天都得操作的用具，因而笼具的结构、质量、式样以及重量等，是否合乎科学饲养要求，这对动物的生长繁殖，改善工作人员的劳动条件和提高工作效率等，都是十分重要的。
1．鼠舍
饲养小白鼠的房舍不宜过大，以20～25平方米为宜。这样有利于鼠群的调整及房舍的消毒。如果是平房，每幢房舍之间应有一定的距离，至少不少于15米，这样既可保证周围环境的宽敞，又可较有效地控制疾病的传播。除饲养房舍之外，还应合理设计辅助设施。例清洁消毒室，饲料、笼具、垫料贮藏室以及工作人员的更衣室、消毒室等。
2．鼠罐
当前在国内使用的有白瓷罐。泥瓦罐和塑料罐3种，还包括配备相应的罐盖。白瓷罐外形呈桶状，上口直径22厘米，下底直径18厘米，罐高吸厘米。其优点是上口较大，空气流通，夏季小白鼠居住凉爽，因其不渗水，不易引起铁鼠架的腐蚀。缺点是冬季保温性能差，笨重不易操作。泥瓦罐外形呈鼓状，有二个耳把。上口直径16厘米，下底直径15厘米，中间直径18厘米，罐高17厘米。优点是冬季保温性能好，使用轻便，价格便宜。具有防潮、暗光、价廉以及减少疾病传播等优点，是我国饲养小白鼠的传统用具。缺点是易渗水，腐蚀铁架，长期使用时，鼠粪和鼠尿熏染的臭气大。经过洗刷煮沸消毒，其臭味仍不易除去，有的破损率较大,过于笨重。塑料罐外形呈桶状，上口直径23厘米，下底直径19厘米，罐高14厘米，罐口上缘有卷边，罐重约150克。原料为聚乙烯塑料。其优点是使用轻便，不吸水，耐磨损，便于洗刷消毒，易干燥，贮存方便，耐腐蚀，耐用，破损少，老化后仍可回收，劳动强度轻。各种罐盖的外形结构及其大小都是按照鼠罐上口边缘的外形大小用铁丝编制而成。盖面上有填装饲料及饮水瓶的同斗，其孔大小，以逃不出仔鼠为原则。
3．鼠盒
小型盒长37厘米，宽26厘米，高17厘米。鼠盒可用于一公多母配种生产使用，也可用作待发小白鼠或饲养试验用鼠。利用鼠盒饲养小白鼠，其活动面积较大，但铁皮制作的盒底，容易被鼠的粪尿腐蚀。鼠盒盖的制法与要求同鼠罐。
4．鼠架
鼠架有木制及铁制两种。现在多为铁制的，材料多选用三角铁和薄铁皮（或塑料板）焊接而成。鼠架的大小根据条件、饲养数量等情况而定。一般的尺寸为高171厘米，长160厘米，宽50厘米，连同架盖分为五层。除顶盖外，每层鼠架可容纳鼠罐12个，每个鼠架分4层，共容纳鼠罐48个。目前国外已推广使用能够拆开的活动鼠架，用不锈钢制成，有很好的防腐性能。
5．饮水器
饮水器是饲养小白鼠的必备用具。常用的有玻璃瓶、塑料瓶和乳头式自动饮水器3种。其中以玻璃瓶使用最为广泛，一般采用容量250毫升和5吗毫升两种型号的玻璃瓶，瓶口使用生理盐水瓶上的瓶塞，从中间打孔插入铝管或玻璃管，其内径为0．5厘米，外径0．7厘米。
6．铺垫物
垫料，能吸附水分、动物的排泄物，维持笼内和动物本身的清洁卫生，垫料应不含挥发性、刺激性物质，无毒性，不会干扰动物实验。垫料的原料常用锯末、木刨花、木屑、碎玉米芯等。垫料的原材料常会携带各种微生物和寄生虫，使用前要经加工处理、消毒灭菌、除虫等（不要自己瞎整）。欧洲国家多用白杨木屑做垫料，而美国多用碎玉米芯，考虑到了材料的毒性因素和取材的难易。目前我国实验动物垫料尚未标准化，多采用混合木屑，其成分和毒性都不确定，可喜的是，现已开展了相关的研究，莎适合国情的标准化垫料，指日可待。
（二）饲料
小白鼠属杂食动物，胃容量较小，一般为l～1．5毫升。小白鼠有随时采食的习性，夜间更为活跃。小白鼠的饲料消耗量，随着生长发育和生产繁殖的不同阶段而有所不同，在饲养管理上，须加注意。妊娠雌鼠，饲料消耗量逐渐增加。在产后第一天，饲料消耗量几乎没有增加，第二天开始上升，产后l～12天，仔鼠体重小，需乳量不大，但体重增加的速度较快。产后12～21日龄，仔鼠开始睁眼，体重增大，需乳量和饲料量也随之增多。由于乳量不能满足需要，每日平均增重减少。21日龄离乳到35日龄内，每天饲料消耗量由4克增到5．5～6克，体重增加最快。日龄达35天以后，逐渐稳定。对小白鼠的给饲，一定要根据不同阶段的生长发育特点进行。对睁眼和刚离乳的仔鼠，应加喂营养较高的颗粒料或软料，以满足其生长发育的需要。为增加雌鼠的泌乳量，整个哺乳过程，都应加喂葵花籽，以满足哺乳仔鼠的正常发育。
小白鼠的食量虽小，但对饲料质量的要求相对较高，必须保持营养物质的平衡稳定，富有蛋白质等，否则对其发育、繁殖和抗病能力会造成严重影响。小白鼠对鱼肝油等维生素都很需要，口粮中长期缺乏这些营养物质时，仔鼠生长缓慢，出现死亡。此外，小白鼠的饲料不立经常更换，在饲料品种不稳定的情况下，易引起小白鼠生长停滞，繁殖率下降等现象。纯系小白鼠对营养成分要求高，对营养变化也极为敏感，如 DBA／2纯系小白鼠需要高蛋白质低脂肪的饲料。因此应根据不同品系的不同要求制定不同的饲料配方。如生产用种鼠（杂种鼠）和纯系小白鼠的饲料，所含蛋白质成份高于待发小白鼠及一般非生产小白鼠的饲料。一些对营养物质有特殊要求的小白鼠，需要高蛋白饲料，应在饲料中注意调整和补充。军事医学科学院实验动物场的两种饲料配方如下，以供参考。
配方1
配方2
白面 25%，麸皮 18％，酵母粉 1％，
白面 25％，麸皮18％，酵母粉1％，
玉米面 20％，骨粉 3％，高梁面 15％，
玉米面20％，骨粉3%，高梁面15％．
鱼粉 4%，食盐 1%, 豆饼面 22%
鱼粉 4%，食盐 1％，豆饼面22 ％，
鸡蛋 1%，鱼肝油 1%
骨肉粉2%．鱼肝油1％。
由于各地实际情况的差别，饲料配方也不尽相一致。但在制定小料形式应采取烘烤的块料。块料严格按照配方比例制作。制出的块料及时送烤料室烘烤。温度不宜超过80℃ ，时间要适宜，否则维生素等易遭破坏。烤料室的热源采用高温蒸气为好。配料时是先将鱼肝油与各种饲料混合，然后再加鱼粉（或骨肉粉）、矿物质饲料及酵母粉等。烘制好的饲料，应妥善存放，以免受潮发霉或被其他动物啃咬污染。一旦块料生霉变质，应停止喂给。
（三）管理
1．不同鼠群的管理
不同的鼠群，管理方式、方法或要求是不同的。核心种鼠群担负着为生产鼠群提供种鼠的任务。管理上要求比较细致。当采用一种公鼠与五只种母鼠循环配种时，种公鼠与种母鼠在同一鼠罐中同居10天，然后将怀孕种母鼠单罐饲养，再使种公鼠与另一鼠罐的种母鼠同居10天。依此类推，循环往复进行。根据需要和培育方向，有计划地配种、留种。留种时按1:1的比例进行选留，多余仔鼠予以淘汰。选留的仔鼠，要延长哺乳期至23天，离乳时体重要求达13克以上。保证向生产种鼠群提供优质后代。生产种鼠群交配繁殖频繁，尤其种母鼠的负担重，体质消耗大，要保证供给充足的营养，定时补充少量的葵花籽、麦芽和拌有鸡蛋的软料，保证供给清洁饮水。按照选种、选配的要求，将一只种公鼠与一只种母鼠放在同一鼠罐中进行配种繁殖。配种后20天仍未受孕者，可采取鼠罐之间倒换各公鼠的方法，提高种母鼠的受孕率，并及时作好配种、产仔、离乳等项登记及统计工作。生产繁殖群中离乳后的幼鼠转入待发鼠群饲养。待发鼠群在管理上一定要将雌雄分开，并根据不同日龄、体重、品系等将它们分别放入铁盘中饲养。大型铁盒装15克以下幼鼠60只，25克以上幼鼠30只。不同铁盒中的待发鼠不可混养，以防相互打架咬伤。此外，要严防小鼠逃出盒外，严格淘汰患病的畸形小鼠，待发母鼠盒内严禁混入公鼠。饲养人员每天都应将幼鼠的转入、待发鼠的发出、死亡、淘汰等情况做好登记。
2．不同季节的管理
由于各地气候条件不同，饲养情况也不同。春秋季节昼夜温差大，有时相差15℃左右，小白鼠易于引起肺炎、仔鼠腹泻以及鼠痘等疾病，要做好鼠舍的保温工作。秋季应给鼠罐内添加稻草，注意调节鼠舍内的温度和通风换气，保持鼠舍内空气新鲜。为了防止小鼠肠道寄生虫病的蔓延，一定要做好驱虫消毒工作。夏季温度高，湿度大，白天最高温度可达38℃以上，小白鼠往往食欲下降，种母鼠的受孕率低，仔鼠生长发育缓慢，死亡淘汰增高。降温防潮是夏季饲养管理中的主要问题。适当减少鼠群的密度，减少种母鼠的带仔数，加强鼠舍的通风，保持室内空气流通新鲜和温湿度适宜。夏季饲料易发霉变质，要把喂饲小白鼠的各种饲料保管贮存好，保持饲料新鲜。饲喂量要适当，少给勤添，不能剩料，保证供给清洁新鲜
的饮水。冬季气温低，日照时间短，寒风刺骨，要抓好小白鼠的冬季管理。首先要做好入冬前的准备工作。从物质上准备好垫料、检修门窗及通风保温设备，淘汰老年体弱的种鼠，做好检虫驱虫和消毒工作。其次，做好保温防寒工作，最好有取暖设施，增加鼠舍温度，并保持温度相对恒定。关好门窗，防止贼风侵袭。冬季门窗关闭，要搞好通风换气和粪尿污物清除，注意食物卫生。
3．一般管理原则
饲料饲养。饲料配方要满足小白鼠的营养需要，保持相对稳定，补充0．5～l％的鱼肝油，以满足小白鼠对维生素A．D的需要，否则出现母鼠受孕率低，产仔率下降以及吃食仔鼠等现象。小白鼠是昼伏夜动的动物，采食以夜间为主。因此，鼠罐、盒盖的同斗内要经常保持足够的新鲜干燥饲料。在小白鼠大群饲养中，每周应有2天以上给小白鼠添加饲料，保证不间断地供给小白鼠饲料。小白鼠一昼夜的饲料量见表。小白鼠的备用饲料应严防野鼠、蟑螂等污染。霉雨季节，小白鼠的干块饲料要少做勤做，以防发霉变质。供给青饲料时，如发麦芽，麦芽生好后，用清水冲洗干净，风干之后饲喂。
小白鼠一昼夜的饲料量（单位:克）
小白鼠 饲料
干块料 麦芽每克约19粒 葵花籽每克约12粒
成年 5～6 3～5 0.5～1
幼年 1～3 0.5～0.25 0.1～0.5
清洁卫生。小白鼠的饲养房要保持室外整洁，门窗、墙壁、地面等无尘土，无蜘蛛网，最好是室内每月用0．1％的新洁尔灭喷雾消毒1次，室外用3％来苏尔消毒一次。鼠架每周要用消毒药液的湿布擦洗一次。垫料要保持清洁干燥，放在专用的房间内贮存，严格防止野鼠、猫、狗等窜入。条件允许的情况下，对垫料可采用高压蒸气等方法消毒灭菌。鼠罐、鼠金中的垫料更换次数每周不得少于2次。饮水瓶要每月定期煮沸消毒1次，或用0．2％过氧乙酸浸泡3分钟消毒。饲料最好也使用高压蒸气等方法消毒。
控制温湿度。小白鼠对环境变化很敏感，湿温度过高或过低会直接影响小白鼠的生长发育、生产繁殖，甚至导致小白鼠发生疾病。因此，要保持温湿度相对稳定。饲养小白鼠的适宜温度是18～22℃。若高于35℃时，明显影响母鼠的受胎和仔鼠的生长，若低于18℃时，引起幼鼠的发病或死亡。此外，小白鼠最忌温度忽高忽低，要保持温度相对稳定。这是饲养好小白鼠的一个关键。饲养小白鼠适宜的湿度为50～ 60％。当温度较低，室内易干燥，可采取在地面上洒水或用温布拖地方法，增加室内的湿度。饲养小白鼠，通风也很重要。通风可以调节室内温湿度，保持空气新鲜。如果密度较大，加上粪尿臭气的蒸发，尤其是冬季关闭门窗，室内空气极易污染，致使小白鼠抗病力下降，易感染疾病，这对小白鼠的生长发育极为有害。对于工作人员的健康，也有一定的影响。因此，要加强鼠舍的通风调节，装置电动排风扇，每天定时排风，或者选择风和日暖的时候，打开门窗，自然通风。
严格防疫。小白鼠对外来刺激敏感，尤其对鼠症病毒非常敏感，一旦发病就无法控制。在小白鼠的饲养管理中，要建立行之有效的严格防疫制度，减少鼠群感染的机会，保持鼠群的健康。凡从外地引进的小 白鼠，必须在隔离检疫房内隔离观察饲养1个月，确认无病时才能与原鼠群一起饲养。饲养管理人员进入鼠舍必须经过消毒池（垫）。穿戴好工作衣、帽、口罩和工作鞋，离开鼠舍时要脱去外衣、帽等，并要洗手消毒。严禁非工作人员进入小白鼠饲养房。严格执行消毒防病措施，严防野生动物如野鼠、蟑螂等进入小白鼠饲养设施内。
4．管理日程
饲养小白鼠工作，每周应按计划进行，使其生活保持规律性。每周的工作日程安排如下表。
小白鼠管理日程
星期 工作内容
一 添加块料,检查种鼠出生登记及分离
二 换窝,整理室内外卫生
三 灌换水瓶,整理青饲料并饲喂
四 同星期一工作内容
五 同星期二工作内容
六 同星期三工作内容
七 值班
三、繁殖
（一）种鼠选择
小白鼠的繁殖，多采用随机交配，选择下代种鼠时，不需要考虑亲代的血缘关系。选择标准主要根据双亲的繁殖能力，仔代的生长发育和健康状况。尽量做到每代近交系数上升不超过1％。选种条件是亲代应具有较高生殖能力，如采用雌雄长期同居时，以两胎生产的间隔不得超过30天，每胎产仔能力8只以上，并具有良好的泌乳能力和对周围环境有较高的适应能力。要求生长发育快，体型大，一般应从第2～4胎生下的仔鼠中选留幼种。昆明种体重达12克以上，即可选做种鼠。被选的种鼠应体质强壮，运动活泼，对外界刺激反应敏锐，眼睛鲜红有神，被毛光泽，浓密贴身，尾粗而较长，血管明显，呈粉红色，头部宽广，颈部长度适中，背宽而平直，躯干前后匀称，腹部系紧，胸圆满，四肢短而有力，生殖器正常等条件。
根据不同交配方式的要求，对选留的幼种，填好卡片。如采用不限血缘关系的随机交配，把选留的幼鼠，分清性别，群饲或单饲。如采用避免近亲繁殖的交配，必须把同窝中选留的幼鼠，分开雌雄性别，编好组别，同窝的幼鼠采用相同的编号，配种时不得以同一编号的雌雄鼠交配。在育种过程中，应对发育不正常者及时淘汰。选配时应挑选肥度适中的种鼠进行交配。过瘦说明发育不良，过肥的雌鼠，常因卵巢周围沉积脂肪过多，滤泡的发育少，影响卵巢激素的产生和分泌，阻碍卵细胞的成熟和排出，繁殖率低。雄鼠过肥，也会降低性活动和
受精能力。
（二）性成熟与配种
小白鼠发育迅速，性成熟早，在36日龄雄鼠的附来精液中可找到活动的精子。如将同南公母放在一笼内，日龄达57天即可分娩，说明雌鼠在37日龄时，即可发情排卵，进行生殖。小白鼠有明显的性周期，雌鼠20日龄以后，阴道逐渐变薄，不久即可开口，开口的日龄依饲养条件投育状态、不同品系而有所不同。一般36～42日龄的小白鼠即已性成熟。小白鼠性成熟时的标志是母鼠阴道打开，出现求偶现象，有交配的欲望，乐意接近公鼠。公鼠单九下降，精子生成。同时形态和机能上也发生相应的一些变化。据介绍，雄鼠25日龄左右单丸自腹腔落入阴囊，35日龄后单九中出现精子，40日龄后可受精，同时体重增重较快。雌性小白鼠在20日龄以前阴道口闭合，自此以后阴道壁逐渐变薄，阴道开口。这是性成熟的主要标志。小白鼠的性成熟因品系和饲养条件不同而有差异。小白鼠一般在60～90日龄（即2～3个月）体成熟。此时小白鼠体重增长缓慢，是适宜配种年龄，可以根据不同季节、天气冷热、个体情况等，采用适当日龄进行配种繁殖。
（三）发情
小白鼠开始繁殖日龄，多为65～90天。性成熟的雌鼠一年四季都有性的活动，呈周期性发情。一个性周期，又分为发情前期、发情期、发清后第一期、发情后第二期和体情期。母鼠性周期各阶段的特征，可用阴道分泌物涂片和组织学检查加以区分。
小白鼠周期性发情，除妊娠期外，几乎都周期性的排卵。性周期为4～5天，产后12～24小时内还有一次产后发情排卵。由于授乳的原因，性周期受到抑制，仔鼠断乳2～6天后，又开始出现下一个性周期。雌性小白鼠排卵期也为3～4夭，但在排卵期数小时内才允许公鼠交配，其他时间则倦伏于巢内或沿鼠罐爬行。当交配时，常是公鼠追逐母鼠，母鼠双目微闭，匍伏不动或用双爪作半拒绝状，并发出“卿卿”的叫声。公鼠经过几次努力后，方能完成交配。交配后，母鼠阴道口形成特殊的阴道栓，封闭阴道口。阴道栓的形成是公鼠的精液、母鼠的阴道分泌物混合用道上皮细胞等遇空气后迅速变硬，将阴道口封闭的结果。一般在交配后24小时左右自动脱落。在20小时内检查雌鼠有无阴道栓，可以判断小白鼠的交配是否成功。交配方法一般可采用一公多母（1：2或1：4）的交配法和一公一母同居交配法。
（五）妊娠与分娩
小白鼠的妊娠期，因其品种不同而有差异。纯系小白鼠的妊娠期一般19～20天，国内普通小白鼠妊娠期一般18～21天。产后受孕鼠的妊娠期有所延长，其延长时间长短，同小白鼠品系、个体及环境有关。
小白鼠的分娩可昼夜进行，但以晚间为多。临产前表现不安，常不停地整理产窝。分娩过程中，4分钟左右子宫收缩一次，产出一只。胎盘产出后，母鼠将胎盘嚼食。整个分娩过程一般需要一小时左右。分娩后约经12～24小时而出现产后发情，此时著与公鼠交配，亦能受孕。
（六）哺乳
母鼠每胎产仔数的多少，主要取决于品种（品系）、使用时间、胎次和饲养管理的条件好坏等。正常情况下，适龄母鼠每胎产仔8～13只。母鼠第7胎以后产仔数逐渐下降。母鼠带仔数量的多少，根据生产的大小和气候条件的变化而决定其带仔数量。在实际大群生产中，由于都是适龄的生产种鼠，生产力高，带仔力强，带仔数多在7只以上，一般以9只为宜。但带仔数超过9只以上，则易影响仔鼠的质量。若因某种原因，母鼠带仔不足9只时，可在清理产窝时，将其他产窝中多余的同龄仔鼠移定其内，进行代乳，基本保证每批母鼠的平均带仔率。仔鼠哺乳期一般18～21天，种用仔鼠，哺乳可延长到23天，但不超过25天。过于延长哺乳时间，影响母鼠的健康和发情。种鼠繁殖使用时间一般为6～8个月（约9～11月龄），即生产5～6胎，这时繁殖力强，带仔好。此后，繁殖能力下降，易出现各种疾病，仔鼠质量越来越差。所以，种母鼠一般繁殖使用6～8个月（约9～11月龄）后必须予以淘汰。
四、疾病防治
（一）鼠痘
鼠痘又名“脱脚病”，是由鼠痘病毒引起的急性传染病。此病传染迅速，发病死亡率高，对小白鼠威胁最为严重。本病的传染源为脱脚病感染。一年四季均可发生，饲养管理不当或卫生消毒、隔离检疫制度不严等因素都会促进本病的发生和传染。症状有急性型和慢性型两种。
急性型（内脏型）被毛蓬松无光泽，软弱无力，食欲消失，无其他局部症状而突然死亡。病情经过迅速， 4～6小时可死亡80～90％，也有的经l～2天死亡，急性期未死亡的小白鼠可转为慢性型。慢性型（皮肤型）病鼠嘴、脸肿大．头部肿大，尾部皮肤表面出现小结节或红肿，溃疡糜烂，最后坏死脱落，四肢肿胀，尤以脚掌最为明显，呈半球形。小白鼠不能以患肢着地，肿胀的皮肤表面破溃而流出浆液性渗出物。病理剖检，急性型小白鼠体表淋巴潮红肿大，脾肿大。肝灰褐色或灰黄色，切开时几乎不流血。肠道充血，腹腔、胸腔和心包腔内有浆液性渗出物。病程较长的小白鼠，可见到典型的病变，肝肿大，有灰白色坏死点，脾肿大，呈暗紫色，表面可见多数白色小斑点。慢性型病可见头、尾。四肢皮肤炎性水肿，皮下有浆液性渗出物及坏死性溃疡灶。肝呈暗红色或脂肪性变性，有红色斑点及许多淡灰色坏死灶，脾呈暗紫色，有灰白色坏死灶。腹股沟浅淋巴结肿大。本病主要在干预防，坚持自繁自养，建立封锁防疫的饲养制度。凡从外单位引进的小白鼠，必须隔离检疫观察一个月后，方可转入正常饲养群。加强饲养管理，做好冬季保温，夏季防暑工作。对于不符质量要求的小白鼠要严格淘汰。确立小白鼠原窝同罐育种，防止种鼠育养期间咬伤感染，传播疾病。建立消毒制度，坚持日常的清洁卫生和消毒防病措施，定期消毒灭菌。严禁非工作人员进入小白鼠的饲养房舍，对于必须进入的外来人员，必须严格消毒。
（二）脑脊髓炎
本病是由脑脊髓炎病毒引起的传染病。常呈散发性发生。潜伏期8～13天。病鼠主要表现为麻痹，特别是后肢麻痹。通常是病鼠一后肢先出现麻痹或轻瘫，然后另一后肢也出现同样的症状。此时患肢肌肉松弛无力，患鼠躺卧不起，食欲减少，被毛蓬乱，逐渐消瘦，最后因排粪排尿困难而死亡。急性型病程1～3天，慢性型2～4周。本病主要在干预防。饲养小白鼠的鼠罐、笼具及其他用具应定期用3％石炭酸、5％来苏尔或煮沸消毒，对于预防此病具有重要意义。此外对引进小白鼠要坚持检疫制度，严格淘汰可疑病鼠。
（三）病毒性肺炎
病毒性肺炎是由多种病毒引起的小白鼠传染病。其主要病理变化为气管、支气管炎及小叶性肺炎。病鼠食欲减少，不活泼，被毛蓬松，耳廓发紫，弓背，搔鼻，有鼻漏，呼吸加快，伴有“咯咯”的哇叫声杂音。由于病鼠出汗，被毛潮湿而色发暗，感染后4～14天可引起死亡。病理剖检，肺呈褐色，病变常侵犯上肺叶，波及到下肺叶，呈小叶状散布，以支气管、细支气管周围最为显著。胸腔内有浆液性渗出液，少数病例可见胸膜炎症变化。预防措施是喂饲富有维生素的全价营养饲料，注意防寒、防潮、防暑，保持鼠舍中温度相对稳定。切忌温度骤变，防止贼风的侵袭，严格检疫制度，及时淘汰病鼠，定期进行预防性消毒。
（四）仔鼠腹泻
仔鼠腹泻是由大肠肝菌引起的哺乳期仔鼠剧烈腹泻，迅速衰竭或伴有败血症，死亡率较高的急性疾病。病鼠病初可见黄色粘液状稀粪粘于肛门周围及尾部，有时粪痴堵塞肛门，难以剥脱。继而排出恶臭水样稀类，污染肛门周围及全身被毛。患鼠迅速消瘦，皮肤松弛形成皱折，尾呈竹节状。此病往往在同窝或同龄乳鼠中迅速传播。病理剖检可见腹腔有多量的液体，消化道发炎，肠粘膜潮红，部分粘膜脱落，肠系膜淋巴肿大，有时可见肝、脾灰白色病灶。预防措施是加强饲养管理，供给小白鼠优质干净并富有维生素的饲料和清洁新鲜的饮水。每年初春及深秋应加强防寒保温工作。鼠舍温度保持相对稳定，及时加垫卧草以保罐温，并要注意稻草，锯末等垫料的消毒。
（五）副伤寒
副伤寒也叫鼠伤寒。是由副伤寒沙门氏菌属引起的小白鼠消化道传染病。此病主要发生在抵抗力减弱的小白鼠，传播快，流行迅速。临床上，小白鼠患病初期，迟钝不活泼，食欲减少，继而停食。病鼠被毛蓬乱，失去光泽，眼结膜发炎，眼睑粘合，腹部膨大，呼吸加快。病鼠出现腹泻，粪便呈粘液泡沫状，味恶臭，黄绿色，有时混有血液。通常可见病鼠的腹部膨大，用食指弹诊，可听到鼓音。预防措施是针对此病多经消化道感染的特点，特别加强小白鼠的饮食卫生，确保饲料新鲜，饮水清洁和食具、笼、盒的清洁。消灭野鼠、逃鼠、苍蝇、蟑螂等。要坚持严格检疫、卫生消毒防病制度，严格淘汰可疑病鼠。定期检虫驱虫，以增强小白鼠体质，预防由其他胃肠道疾病诱发此病。
（六）细菌性肺炎
小白鼠细菌性肺炎是一种散发性疾病，一年四季均可发生，但以冬季发病率为高。病原作为肺炎球菌。正常小白鼠的呼吸道粘膜上就附有肺炎球菌，但由于动物机体的防御能力，如呼吸道粘膜的屏障作用及呼吸道粘膜分泌的溶菌酶等，小白鼠不致发病。当抵抗力下降时，病原微生物有可能乘虚而入。因此，当季节交替，气候突变，室温忽高忽低或室内通风不良、湿度不稳定或营养缺乏等情况下，降低了小白鼠的抗病力，才会诱发此病。患病鼠被毛蓬乱，呼吸音不正常或发出“咕咕”的响声。一旦发病，应迅速查找发病原因，并采取相应的措施，控制疾病的蔓延。严格淘汰病鼠，消灭传染源。使用消毒药物喷洒小白鼠饲养房间，进行喷雾空气消毒。预防性给药是对于食欲尚好的可疑病鼠，投服长效磺胺（SMP）。每只成年鼠每口口服2毫克。如将药液溶于小白鼠的饮水中服用，连续一周，效果较好。预防上认真做好冬季保温和夏季防暑工作，保持室内温湿度相对稳定。特别要防止室内湿度骤变，做
好鼠舍的通风换气工作，保持室内空气新鲜。经常检查鼠群的健康情况，发现病鼠立即淘汰，并对鼠舍进行消毒。
三、分组与标记
（一）分组原则
实验动物分组应严格按照随机分组的原则进行，使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组中去，尽量避免人为因素对实验造成的影响。
（二）建立对照组
实验动物分组时应特别注意建立对照组。对照组可分自身对照组和平行对照组。
1．自身对照组
自身对照是把实验动物本身在动物实验前、后两阶段的各项相关数据，分别作为对照组和实验组的结果并进行统计学处理。
2．平行对照组
平行对照组分正对照组和负对照组两种。正对照组是对实验动物实施与实验动物相同但排除了所要观察的目的因子（如治疗手段或药物）的处理，负对照组则不作任何处理，这种方法就是平行对照组。例如要观察某种药物的药效，对实验组动物采用肌肉注射的给药方法；正对照组动物同样进行肌肉注射，但注射的不是药物而是同等剂量的生理盐水，以便排除肌肉注射生理盐水可能产生的影响；负对照组动物则不进行肌肉注射，并与实验组动物和正对照组动物在相同的环境和条件下饲养，作为空白对照。
（三）、标记编号
对随机分组后的实验动物进行标记编号，是动物实验准备工作中相当重要的一项工作。标记编号方法应保证编号不对动物生理或实验反应产生影响，且号码清楚、易认、耐久和适用。目前常用的标记编号方法有染色法、耳孔法、烙印法、挂牌法等标记编号方式。此外还有针刺法、断趾编号法、剪尾编号法、被毛剪号法、笼子编号法等。对小鼠实验的方法常用染色法。
染色法
染色法是用化学药品在实验动物身体明显的部位，如被毛、四肢等处进行涂染，以染色部位、颜色不同来标记区分实验动物，是最常用、最易掌握的方法。
1．常用染色剂
（1）3% ~ 5%苦味酸溶液，可染成黄色。
（2）0.5% 中性红或品红溶液,可染成红色。
（3）2%硝酸银溶液，可染成咖啡色（涂染后在可见光下暴露十分钟）。
（4）煤焦油酒精溶液，可染成黑色。
2．染色方法
（1）单色涂染法
单色涂染法是用单一颜色的染色剂涂染实验动物不同部位的方法。常规的涂染顺序是从左到右、从上到下。左前肢为1号、左侧腹部2号、左后肢3号、头部4号、背部5号、尾根部6号、右前肢为7、右侧腹部8号、右后肢9号、不作染色标记为10号。此法简单、易认，在每组实验动物不超过10只的情况下适用。
（2）双色涂染法
双色涂染法是采用两种颜色同时进行染色标记的方法。例如用苦味酸（黄色）染色标记作为个位数，用品红（红色）染色标记作为十位数。个位数的染色标记方法同单色涂染法；十位数的染色标记方法参照单色涂染法，即左前肢为10号、左侧腹部20号、左后肢30号、头部4 0号、背部50号、尾根部60号、右前肢70号、右侧腹部80号、右后肢90号，第100号不作染色标记。比如标记第12号实验动物，在其左前肢涂染品红（红色），在其左侧腹部涂上苦味酸（黄色）即可。双色法色法可标记100位以内的号码。
（3）直接标号法
直接标号法是使用染色剂直接在实验动物被毛、肢体上编写号码的方法。实验动物太小或号码位数太多时，不宜采用此方法。
染色法虽然简单方便，不会给实验动物造成损伤和痛苦，但是长时间实验会使涂染剂自行褪色，或由于实验动物互相嬉闹、舔毛、摩擦、换毛、粪尿和饮水浸湿被毛等原因，易造成染色标记模糊不清，因而染色法对慢性实验不适用。如果所做慢性实验只能采用此种染色方法，则应注意不断地补充和加深染色。
另外，常用染色剂的毒性对实验动物的影响也是需要注意的一个问题
四．动物实验基本技术
1．实验动物的抓取和固定
小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗
的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。
2．实验动物的麻醉方法
麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。
(一)常用局部麻醉剂：普鲁卡因，此药毒性小，见效快，常用于局部浸润麻醉，用时配成0.5％～1％；利多卡因，此药见效快，组织穿透性好，常用1％～2％溶液作为大动物神经干阻滞麻醉，也可用0.25％～0.5％溶液作局部浸润麻醉。
(二)常用全身麻醉剂：
1. 乙醚乙醚吸入法是最常用的麻醉方法,各种动物都可应用。其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。但由于乙醚局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加；通过神经反射还可扰乱呼吸、血压和心脏的活动，并且容易引起窒息，在麻醉过程中要注意。但总起来说乙醚麻醉的优点多，如麻醉深度易于掌握，比较安全，而且麻醉后恢复比较快。其缺点是需要专人负责管理麻醉，在麻醉初期出现强烈的兴奋现象，对呼吸道又有较强的刺激作用，因此，需在麻醉前给予一定量的吗啡和阿托品(基础麻醉)，通常在麻醉前20－30分钟，皮下注射盐酸或硫酸吗啡(每公斤体重5～10mg)及阿托品(每公斤体重0.1mg)。
3．实验小鼠的给药方法
在动物实验中，为了观察药物对机能功能、代谢及形态引起的变化，常需将药物注入动物体内。给药的途径和方法是多种多样的，可根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。
（一）给药方法
1．注射给药
（1）皮下注射给药
皮下注射给药是将药液推入皮下结缔组织，经毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环的过程。作皮下注射常选项背或大腿内侧的皮肤。操作时，常规消毒注射部位皮肤，然后将皮肤提起，注射针头取一钝角角度刺入皮下，把针头轻轻向左右摆动，易摆动则表示已刺入皮下，再轻轻抽吸，如无回血，可缓慢地将药物注入皮下。拔针时左手拇、食指捏住进针部位片刻，以防止药物外漏。注射量约为0.1-0.3ml/10g体重。
（2）皮内注射给药
是将药液注入皮肤的表皮河真皮之间，观察皮肤血管的通透性变化或皮内反应，接种、过敏实验等一般作皮内注射。先将注射部位的被毛剪掉，局部常规消毒，左手拇指和食指按住皮肤使之绷紧，在两指之间，用结核菌素注射器连接4.5针头穿刺，针头进入皮肤浅层，再向上挑起并梢刺入，将药液注入皮内。注射后皮肤出现一白色小皮丘，而皮肤上的毛孔极为明显。注射量为0.1ml/次。
（3）肌肉注射给药
小鼠体积小，肌肉少，很少采用肌肉注射。当给小鼠注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时，采用肌肉注射。操作时1人保定小鼠，另一人用左手抓住小鼠的1条后肢，右手拿注射器。将注射器与半腱肌呈90°角迅速插入1/4,注入药液.用药量不超过0.1ml/10g体重. （4）腹腔注射
左手提起并固定小鼠，使鼠腹部朝上，鼠头略低于尾部，右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两恻进行穿刺，针头刺入皮肤后进针3nm左右，接着使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌，穿过腹肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔后抵抗感消失。固定针头，保持针尖不动，回抽针栓，如无回血、肠液和尿液后即可注射药液。注射量为0.1-0.2ml/10g 体重。
（5）静脉注射
小白鼠和大白鼠：一般采用尾静脉注射，鼠尾静脉有三根，左右两侧及背侧各一根，左右两侧尾静脉比较容易固定，多采用，背侧一根也可采用，但位置容易固定。操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中，使尾巴露出，尾部用45～50℃的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张，并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持注射器连4(1/2)号细针头，使针头与静脉平行（小于30℃），从尾下四分之一处（约距尾尖2-3厘米）处进针，此处皮薄易于刺入，先缓注少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。如需反复注射，应尽可能从末端开始，以后向尾根部方向移动注射。
表1几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升）
（六）经口给药
在急性试验中，经口给药多用灌胃法，此法剂量准确，适用于小白鼠、大白鼠、家兔等动物。
小鼠、大鼠（或豚鼠）用输血针头或小号腰穿针头，将其尖端斜面磨剂，用焊锡在针尖周围焊一圆头，注意勿堵塞针孔，即成灌胃针；亦可用烧成圆头的硬质玻璃毛细管或特制的塑料毛细秋，作为导管。灌胃时将针按在注射器上，吸入药液。左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物固定，右手持注射器，将灌胃针插入动物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。动物应固定成垂直体位，针插入时应无阻力。若感到阻力或动物挣扎时，应立即停止进针或将针拔出，以兔损伤或穿破食道以及误入气管。
一般当灌胃针插入小鼠3－4cm，大鼠或豚鼠4-6cm后可将药物注入。常用的灌胃量小
鼠为0.2-1ml，大鼠1-4ml，豚鼠为1-5ml。
表2常用实验动物的最大给药量和使用针头规格
4．采血方法
采血方法的选择，决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。例如，研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓度，必须采取动脉血液。采血时要注意：⑴采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在25-28℃，冬季，15-20℃为宜；⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒；⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；⑷若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂.
（1）.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒，然后浸在45℃左右的温水中数分钟，使尾部血管充盈。再将尾擦干，用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm，让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取，采血结束，伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口，割破尾动脉或静脉，收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3～0.5ml。
（2）.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查)，可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用7号或8号注射针头，刺入鼠尾静脉，拔出针头时即有血滴出，一次可采集10～50mm3。如果长期反复取血，应先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐渐向近心端穿刺。
（3）.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套)，应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3～4cm)硬质玻璃滴管(毛细
管内径0.5-1.0mm)，使采血器与鼠面成45℃的夹角，由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度，小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm。当感到有阻力时即停止推进，同时，将针退出约0.1-0.5mm，边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练，用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml；体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可适用于某些生物化学项目的检验。
（4）.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤，并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈，约1/2-4/5的颈部前剪断，让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8～1.2ml;大鼠约5-10ml。
（5）.心脏采血鼠类的心脏较小，且心率较快，心脏采血比较困难，故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血，先将动物作深麻醉，打开胸腔，暴露心脏，用针头刺入右心室，吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml；大鼠约0.8-1.2ml。
（6）.颈动静脉采血先将动物仰位固定，切开颈部皮肤，分离皮下结缔组织，使颈静脉充分暴露，可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉，离心端结扎，向心端剪口将血滴入试管内。
（7）.腹主动脉采血最好先将动物麻醉，仰卧固定在手术架上，从腹正中线皮肤切开腹腔，使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液，防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织，夹住动脉近心端，用尖头手术剪刀，剪断动脉，使血液喷入盛器。
（8）.股动(静)脉采血先由助手握住动物，采血者左手拉直动物下肢，使静脉充盈。或者以搏动为指标，右手用注射器刺入血管。体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8ml，大鼠约0.4-0.6ml。小鼠采血的几个问题：
1.最大安全采血量：小鼠循环血量占体重的6%，或50-70mi/kg
采血占全血量的10%不会对机体造成严重的不良影响。3-4周后可以重新采集一次。
特别注意的是：老年小鼠血量降低。疾病会加重不良反应，所以必须考虑这些影响因素。采血后应补充响应体积的液体
如果需要很短时间反复采血，比如每天一次，每次的采血量不应超过全血的1%。
30g*6%=血量1.8mls
1.8mls*10%=0.18mls(最大安全采血量)
2.隐静脉采血法
隐静脉采血法是小量、反复小鼠采血的常用方法。特点是不用麻醉
3.颈静脉采血法
隐静脉采血法也是小量、反复小鼠采血的常用方法。特点是需要麻醉
4.心脏穿刺采血法。
麻醉动物
将动物仰放
局部酒精消毒
用塑料注射器，从动物的左侧胸部，肋沿下，心尖部向右侧15-30度角刺入心脏，给小负压，小心操作.
第二章动物实验的基本知识和操作技术 第一节实验动物 药理学实验常用的动物有蛙、蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、猫和犬等。常根据实验目的和要求选用不同的实验动物。由于不同的动物具有不同的特点，故所选用的动物应能较好地反映试验药物的选择性作用，并符合节约的原则。 （一）、实验动物的选择原则 1、尽量选择与人体结构、机能、代谢及疾病特征相似的动物； 2、选用的实验动物的解剖、生理特点应符合实验目的； 3、根据人与实验动物对同一刺激的反应差异，选用具有明显反应的动物； 4、根据生物医学研究必须达到的精确度，选用结构功能简单又能反映研究指标的动物； 5、选用患有人类类似疾病的近交系或突变系动物； 6、选用与实验设计、技术条件、实验方法等相适应的标准化动物； 7、在不影响实验目的与结果的前提下，选择最易获得、最经济、便于操作管理的动物； 8、供实验用的动物应具备质量合格证。 （二）、常用实验动物的特点 1、蛙和蟾蜍 离体心脏能较持久地有节律地搏动，常用于观察药物对心脏的作用；坐骨神经和腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、神经肌肉或横纹肌的作用；蛙的腹直肌还可以用于鉴定胆碱能药物的作用。 2、小白鼠 是实验室最常用的一种动物。易于大量繁殖，且价廉，适用需要大量动物的实验，如药物筛选、半数致死量测定、药物效价比较、抗感染、抗肿瘤药物及避孕药物的研究等。 3、大白鼠 与小白鼠相似。一些在小白鼠身上不便进行的实验可选用大白鼠，如药物抗炎作用的实验常选用大白鼠踝关节制备关节炎的模型。此外，也可用大白鼠直接记录血压、作胆管插管，或用大白鼠观察药物的亚急性或慢性毒性。大白鼠的血压和人相近，且稳定，现常用于抗高血压药物实验。
第一节实验动物的捉拿、固定和编号方法 在基础医学实验中，正确捉拿与固定动物，是实验工作的基础，也是实验顺利进行的保证。掌握正确捉拿、固定动物的目的就是防止实验者被动物咬伤抓伤，同时也是为了维持动物的正常生理活动，从而不影响实验观察结果。 一、实验动物的捉拿与固定方法 在基础医学实验中，最常用的动物有小鼠、大鼠、豚鼠、蟾蜍、蛙、家兔和犬，现分别就其捉拿与固定方法依次予以介绍。 1. 小鼠 捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，在其向前爬行时，右手向后拉尾(图5-1)，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈部皮肤，将其置于左手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢(图5-2)，右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上(图5-11)。 图5-1 图5-2 2. 大鼠 方法基本与捉拿小鼠相同，但实验者事先应戴帆布防护手套。用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，抓住鼠尾向后轻拉，左手拇指和食指抓紧两耳和头颈部皮肤，余下三指紧捏鼠背部皮肤，如果大鼠后肢挣扎厉害，可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住，将整个鼠固定在左手中，右手进行操作。若进行手术或解剖，则应事先麻醉或处死，然后用棉线活结缚四肢，用棉线固定门齿，背卧位固定在大鼠固定板上。需取尾血及尾静脉注射时，可将其固定在大鼠固定盒里，将鼠尾留在外面供实验操作。 3. 豚鼠 豚鼠具有胆小易惊的特性，因此抓取时要求快、稳、准。一般方法是：先用右手掌迅速、轻轻地扣住豚鼠背部，抓住其肩中上方，以拇指和食指环握颈部，对于体型较大或怀孕的豚鼠，可用另一只手托住其臀部(图5-3、图5-4)。
生物化学实验知识点整理 实验一 还原糖的测定、实验二 粮食中总糖含量的测定 1.还原糖测定的原理 3,5-二硝基水杨酸与还原糖溶液共热后被还原成棕色的氨基化合物,在550nm 处测定光的吸收增加量，得出该溶液的浓度，从而计算得到还原糖的含量 2.总糖测定原理 多糖为非还原糖，可用酸将多糖和寡糖水解成具有还原性的单糖，在利用还原糖的性质进行测定，这样就可以分别求出总糖和还原糖的含量 3.电子天平使用 4.冷凝回流的作用： 使HCl 冷凝回流至锥形瓶中，防止HCl 挥发，从而降低HCl 的浓度。 5.多糖水解方法： 加酸进行水解 6.怎样检验淀粉都已经水解： 加入1-2滴碘液，如果立即变蓝则说明没有完全水解，反之，则说明已经完全水解。 7.各支试管中溶液的浓度计算 8.NaOH 用量：HCl NaOH n n = 9.不能中途换分光光度计,因为不同的分光光度计的光源发光强度不同 10.分光光度计的原理：在通常情况下，原子处于基态，当通过基态原子的某辐射线所具有的能量（或频率）恰好符合该原子从基态跃迁到激发态所需的能量（或频率）时，该基态原子就会从入射辐射中吸收能量，产生原子吸收光谱。原子的能级是量子化的，所以原子对不同频率辐射的吸收也是有选择的。这种选择吸收的定量关系服从式/E h hc νλ?==。 实验证明，在一定浓度范围内，物质的吸光度A 与吸光样品的浓度c 及厚度L 的乘积成正比，这就是光的吸收定律，也称为郎伯-比尔定律 分光光度计就是以郎伯比尔定律为原理，来测定浓度 11.为什么要水解多糖才能用DNS 因为DNS 只能与还原糖溶液在加热的条件下反应生成棕红色的氨基化合物，不能与没有还原性的多糖反应。 12.为什么要乘以0.9 以0.9才能得到多糖的含量。 13.为什么要中和后再测？ 因为DNS 要在中性或微碱性的环境下与葡萄糖反应 实验三 蛋白质的水解和纸色谱法分离氨基酸、实验四 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 1.纸色谱分离氨基酸分离原理 由于各氨基酸在固定相（水）和流动相（有机溶剂）中的分配系数不同，从而移动速度不同，经过一段时间后，不同的氨基酸将存在于不同的部位，达到分离的目的。 2.天然氨基酸为L 型 3.酸式水解的优点是：是保持氨基酸的旋光性不变，原来是L 型，水解后还是L 型，由于甘氨酸所有的R 基团是氢原子，所以它不是L 型
第六章生物化学实验基本知识 主编：齐锦生编委： 孔德娟齐锦生许丽辉杨崇辉周秀霞罗湘衡君智炜张晓玲王芳 实验室要求 一、实验课的目的 1、加深理解：加深对生物化学基本理论的理解。 2、掌握技术：掌握生物化学的基本实验方法和实验技术（四大基本技术：离心、电泳、层析、比色）及分子生物学的一些基本技术和方法。 3、培养能力：培养学生的思维能力、动手能力和表达能力。 4、掌握精髓：科学的精髓是实事求是、敢于探索、善于创新的精神，要对实验中出现的一切反常现象进行讨论，并大胆提出自己的看法。 二、生化实验室规则和要求 1、预习：课前要预习实验教材，了解实验目的、原理，熟悉操作规程。 2、秩序：自觉遵守纪律，维护教学秩序，不准迟到、早退，保持安静，严禁谈笑打闹，听从教师指导，未经教师同意，不得随意离开实验室。 3、整洁：搞好实验环境和仪器的卫生整洁，实验台面必须保持整洁，仪器药品要井然有序，公用试剂用毕，应立即盖严放回原处，勿使药品试剂撒在实验台面和地面。实验完毕，需将药品试剂排列整齐，仪器要洗净倒置放好。固体废物，如滤纸、棉花、血块不得倒入水池中，以免堵塞下水道；一般性废液可倒入水池中冲走，但强酸强碱或有毒有害溶液必须用水高度稀释后，方可倒入水池中，同时放水冲走，以免腐蚀水管。全体同学由班长安排轮流值日，负责当天实验室卫生、安全和一些服务性工作，经教师验收合格后，方可离开实验室。 4、节约：使用仪器、药品、试剂及各种物品必须厉行节约，并节约水电。应特别注意保持药品和试剂的纯净，严防混杂、乱用和污染。使用和洗涤仪器应小心仔细，防止损坏，贵重仪器使用前应熟悉使用方法，严格遵守操作规程，严禁随意开动，发现故障后应立即报告指导教师，不要自己动手检修，如有损坏按学校规定赔偿。 5、安全：注意人身和国家财产安全是至关重要的，要时刻注意防火、防水、防电、防危险品、防事故，以免发生意外。实验室内严禁吸烟。使用乙醚、苯、乙醇、丙酮等易燃品时，不允许在电炉、酒精灯上直接加热。实验中须远离火源，如有危险发生，应首先关掉电源；有机溶剂着火时，勿用水泼，以免扩大燃烧面积，可用沙土、灭火器具灭之。用火时必须严格做到：火着人在，人走火灭。用毕电器后及时切断电源。加热试剂、液体时，管口不要对人，要十分小心操作，避免灼伤人。实验室内一切物品未经本室负责教师批准，严禁携带出室外，有毒物品尤其如此。借物必须办理登记手续。
化学实验室常识知识点复习 1、化学是研究物质的组成、结构、性质以及变化规律的基础科学。 2、我国劳动人民商代会制造青铜器，春秋战国时会炼铁、炼钢。 3、绿色化学-----环境友好化学 (化合反应符合绿色化学反应) ①四特点P6（原料、条件、零排放、产品）②核心：利用化学原理从源头消除污染 4、蜡烛燃烧实验（描述现象时不可出现产物名称） （1）火焰：焰心、内焰（最明亮）、外焰（温度最高） （2）比较各火焰层温度：用一火柴梗平放入火焰中。现象：两端先碳化；结论：外焰温度最高（3）检验产物 H2O：用干冷烧杯罩火焰上方，烧杯内有水雾 CO2：取下烧杯，倒入澄清石灰水，振荡，变浑浊 （4）熄灭后：有白烟（为石蜡蒸气），点燃白烟，蜡烛复燃 5、吸入空气与呼出气体的比较 结论：与吸入空气相比，呼出气体中O2的量减少，CO2和H2O的量增多 （吸入空气与呼出气体成分是相同的） 6、学习化学的重要途径——科学探究 一般步骤：提出问题→猜想与假设→设计实验→实验验证→记录与结论→反思与评价 化学学习的特点：关注物质的性质、变化、变化过程及其现象； 7、化学实验（化学是一门以实验为基础的科学） 一、常用仪器及使用方法 （一）用于加热的仪器－－试管、烧杯、烧瓶、蒸发皿、锥形瓶 可以直接加热的仪器是－－试管、蒸发皿、燃烧匙 只能间接加热的仪器是－－烧杯、烧瓶、锥形瓶（垫石棉网—受热均匀） 可用于固体加热的仪器是－－试管、蒸发皿
可用于液体加热的仪器是－－试管、烧杯、蒸发皿、烧瓶、锥形瓶 不可加热的仪器——量筒、漏斗、集气瓶 （二）测容器－－量筒 量取液体体积时，量筒必须放平稳。视线与刻度线及量筒内液体凹液面的最低点保持水平。 量筒不能用来加热，不能用作反应容器。量程为10毫升的量筒，一般只能读到0.1毫升。 （三）称量器－－托盘天平（用于粗略的称量，一般能精确到0.1克。） 注意点：（1）先调整零点（2）称量物和砝码的位置为“左物右码”。 （3）称量物不能直接放在托盘上。 一般药品称量时，在两边托盘中各放一张大小、质量相同的纸，在纸上称量。潮湿的或具有腐蚀性的药品（如氢氧化钠），放在加盖的玻璃器皿（如小烧杯、表面皿）中称量。 （4）砝码用镊子夹取。添加砝码时，先加质量大的砝码，后加质量小的砝码（先大后小） （5）称量结束后，应使游码归零。砝码放回砝码盒。 （四）加热器皿－－酒精灯 （1）酒精灯的使用要注意“三不”：①不可向燃着的酒精灯内添加酒精；②用火柴从侧面点燃酒精灯，不可用燃着的酒精灯直接点燃另一盏酒精灯；③熄灭酒精灯应用灯帽盖熄，不可吹熄。 （2）酒精灯内的酒精量不可超过酒精灯容积的2/3也不应少于1/4。 （3）酒精灯的火焰分为三层，外焰、内焰、焰心。用酒精灯的外焰加热物体。 （4）如果酒精灯在燃烧时不慎翻倒，酒精在实验台上燃烧时，应及时用沙子盖灭或用湿抹布扑灭火焰，不能用水冲。 （五）夹持器－－铁夹、试管夹 铁夹夹持试管的位置应在试管口近1/3处。试管夹的长柄，不要把拇指按在短柄上。 试管夹夹持试管时，应将试管夹从试管底部往上套；夹持部位在距试管口近1/3处；用手拿住 （六）分离物质及加液的仪器－－漏斗、长颈漏斗 过滤时，应使漏斗下端管口与承接烧杯内壁紧靠，以免滤液飞溅。 长颈漏斗的下端管口要插入液面以下，以防止生成的气体从长颈漏斗口逸出。
动物实验操作的基本知识 一、实验动物抓拿固定 （一）小白鼠(mouse) 右手抓住其尾，放在鼠笼铁纱网上，然后用左手拇指及食指沿其背向前抓住其颈部，并以左手的小拇指和掌部夹住其尾固定在手上(图3-1)。取尾血及尾静脉注射时，可将mouse固定在金属或木制的固定器上。 （二）大白鼠(rat) 实验者应戴帆布手套，用右手将鼠尾抓住提起，放在粗糙的台面或鼠笼上，抓住鼠尾向后轻拉，左手抓紧两耳和头颈部皮肤，余下三指紧捏鼠背部皮肤，如果rat后肢挣扎厉害，可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住，将整个鼠固定在左手中，右手进行操作（图3-2）。若进行手术或解剖，则应事先麻醉或处死，然后用棉线活结缚四肢，用棉线固定门齿，背卧位固定在大鼠固定板上。需取尾血及尾静脉注射时，可将其固定在大鼠固定盒里，将鼠尾留在外面供实验操作。 （三）豚鼠(cavy) Cavy具有胆小易惊的特性，因此抓取时要求快、稳、准。一般方法是：以右手拇指和食指夹住两前肢及头部，使整个颈胸部皆在手掌中（不要抓得太紧以免窒息），左手抓住两后肢，使腹部向上，而后进行操作（图3-3）。 （四）蛙或蟾蜍(frog or toad) 捉拿方法宜用左手将动物背部贴紧手掌固定，以中指、无名指、小拇指压住其左腹侧和后肢，拇指和食指分别压住左，右前肢，右手进行操作（图3-4）。 在捉拿toad时，注意勿挤压其两侧耳部突起之毒腺，以免毒液射到眼中。 实验如需长时间观察，可破坏其脑和脊髓以后放在蛙板上固定进行操作。 （五）家兔(rabbit) 用右手抓住其颈背部皮毛，轻提动物，再以左手托住其臀部，使家兔的体重主要落在左手掌心，然后按实验要求固定（图3-5）。作兔耳血管注射或取血时，可用兔盒固定。作各种手术时，可将家兔麻醉后固定在手术台上。固定方法常采用仰卧位固定，四肢用粗棉线固定，头用兔头固定夹固定或用棉线钩住家兔门齿再固定在兔台头端铁柱上。 （六）狗(dog)
生物化学实验细则 为了保证生物化学实验的顺利进行，培养同学们掌握良好、规范的生物化学基本实验技能，特制定以下实验细则，请同学们严格遵守。 1. 实验前应提前预习实验指导书并复习相关知识。 2. 严格按照生物化学实验分组，分批进入实验室，不得迟到。非本实验组的同学不准进入实验室。 3. 进入实验室必须穿实验服。各位同学进入各自实验小组实验台后，保持安静，不得大声喧哗和嬉戏，不得无故离开本实验台随便走动。绝对禁止用实验仪器或药物嬉耍。 4. 实验中应保持实验台的整洁，废液倒入废液桶中，用过的滤纸放入垃圾桶中，禁止直接倒入水槽中或随地乱丢。 5. 实验中要注意节约药品与试剂，爱护仪器，使用前应了解使用方法，使用时要严格遵守操作规程，不得擅自移动实验仪器。否则，因非实验性损坏，由损坏者赔还。 6. 使用水、火、电时，要做到人在使用，人走关水、断电、熄火。 7. 做完实验要清洗仪器、器皿，并放回原位，擦净桌面。 8. 实验后，要及时完成实验报告。
实验记录和实验报告 一、实验记录 实验课前应认真预习，将实验名称、目的和要求、原理、实验内容、操作方法和步骤等简单扼要地写在记录本上。 实验中观察到的现象、结果和数据，应该及时地直接记在记录本上，绝对不可以用单片纸做记录或草稿。原始记录必须准确、简练、详尽、清楚。从实验课开始就应养成这种良好的习惯。 记录时，应做到正确记录实验结果、切忌夹杂主观因素，这是十分重要的。在实验条件下观察到的现象，应如实仔细地记录下来。在定量实验中观测的数据，如称量物的重量、滴定管的读数、光电比色计或分光光度计的读数等，都应设计一定的表格准确记下正确的读数，并根据仪器的精确度准确记录有效数字。例如，光密度值为0.050不应写成0.05。每一个结果最少要重复观测两次以上，当符合实验要求并确知仪器工作正常后再写在记录本上。实验记录上的每一个数字，都是反映每一次实验的测量结果，所以，重复观测时即使数据完全相同也应如实记录下来。数据的计算也应该写在记录本的另一页上，一般写在正式记录左边的一页。总之，实验的每个结果都应正确无遗漏地做好记录。 实验中使用仪器的类型、编号以及试剂的规格、化学式、分子量、准确的浓度等，都应记录清楚，以便总结实验时进行核对和作为查找成败原因的参考依据。 如果发现记录的结果有怀疑、遗漏、丢失等，都必须重做实验。因为，将不可靠的结果当作正确的记录，在实际工作中可能造成难于估计的损失。所以，在学习期间就应一丝不苟，努力培养严谨的科学作风。 二、实验报告 实验结束后，应及时整理总结实验结果，写出实验报告。实验报告的书写应使用黑色或蓝色钢笔或圆珠笔，可使用铅笔作图或用Excel电脑打印制作标准曲线。 在实验报告中，目的和要求、原理以及操作方法部分应简单扼要的叙述，但是对于实验条件（试剂配制及仪器）和操作的关键环节必须写清楚。对于实验结果部分，应根据实验课的要求将一定实验条件下获得的实验结果和数据进行整理、归纳、分析和对比，并尽量总结成各种图表，如原始数据及其处理的表格、标准曲线图以及比较实验组与对照组实验结果的图表等。另外，还应针对实验结
生物化学实验报告 动物营养研究所 树润 2015.10.12 猪血中超氧化物歧化酶（SOD）的分离纯化及活性测定一．实验目地 1.通过实验了解活性物质的分离提取。 2.了解超氧化物歧化酶的基本功能与应用。 二．实验原理 超氧化物歧化酶是一种酸性蛋白，是唯一以自由基为底物 的酶，具有清除自由基的功能酶，在酶分子上共价连接金属辅 基，因此它对热、PH、以及某些理化性质表现出异常的稳定性。 该酶首次从牛红细胞中分离得到，是一种蓝色含铜蛋白，之后， 研究发现该蛋白酶具有催化氧发生歧化反应的能力，因此将其 命名为超氧化物歧化酶1-2。超氧化物歧化酶是一种能专一地清 除超氧离子自由基（O2-）的金属酶，它具有抗衰老、抗辐射、 抗炎抗癌等作用，因而在医药（如关节炎、红斑狼疮等疾病的 治疗3）、化妆品(有防晒抗炎效果4)、食品工业（SOD灵芝菌5 等）等方面具有了广泛的应用前景。 超氧化物歧化酶是广泛存在于生物体的一种金属酶, 可催化超氧阴离子自由基(O2-)与H+发生歧化反应, 生成H2O2和 O2。SOD催化下述反应：2H++2O2-→H2O2+O2。
超氧化物歧化酶按照它所含金属离子的不同，可分为 Cu-Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD等三种。Cu-Zn-SOD为二聚体，呈 蓝绿色；Mn-SOD呈紫红色；Fe-SOD呈黄褐色。 SOD提取、纯化制备方法各异, 常用方法有经典的溶剂沉淀法、盐析法、超滤法和层析法等6-7。本实验采用有机溶剂沉淀法8以新鲜猪血为原料，从中提取SOD并进行纯化。酶活力测定可用以下方法：邻苯三酚自氧化法9、黄嘌呤氧化酶法、NBT光还原法、化学发光法、肾上腺素自氧化法、亚硝酸法等。 该实验SOD酶活性采用邻苯三酚自氧化法测定，酶活性单 位定义为：每毫升反应液中，每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率 达50%的酶量定义为一个酶单位。 样品中蛋白质含量用考马斯亮蓝G-250法测定。考马斯亮 蓝G-250在游离状态下呈红色，与蛋白质结合呈现蓝色。在一 定围，溶液在595nm波长下的光密度与蛋白质含量成正比，可 用比色法测定，测定围1-1000μg。 三．实验试剂与器材 1.实验试剂 ACD抗凝剂、0.9%Nacl、丙酮、95%乙醇、氯仿、考马斯 亮蓝G-250、50mmol/L pH8.3磷酸缓冲液、10mmol/L EDTA钠盐 溶液、3mmol/L邻苯三酚溶液等 2.实验器材
检测实验室基础知识汇总
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１、检验用水的要求 分析检验中绝大多数的分析是对水溶液的分析检测,因此水是最常用的溶剂。在实验室中离不开蒸馏水或特殊用途的纯水,在未特殊注明的情况下，无论配制试剂用水，还是分析检验操作过程中加入的水,均为纯度能满足分析要求的蒸馏水或去离子水。蒸馏水可用普通的生活用水经蒸馏汽化冷凝制成，也可以用阴阳离子交换处理的方法制得。特殊项目的检验分析对水的纯度有特殊要求时,一般在检验方法中注明水的纯度要求和提纯处理的方法。 为保证纯水的质量能符合分析工作的要求，对于所制备的每一批纯水，都必须进行质量检测。一般应达到以下标准: ①用电导仪测定的电导率小于或等于53０μs/cm（25℃)。 ②酸度呈中性或弱酸性,PＨ=5.0～7.5（25℃).可用精密ｐH试纸、酸度计测定，也可用如下指示剂法测定:在10 mｌ水中加入2~３滴1ｇ/L甲基红指示剂，摇匀呈黄色不带红色，则说明水的酸度合格，呈中性;或在１0ml水中加入４~５滴1g/L溴百里酚蓝指示剂,摇匀不呈蓝色,则说明水的酸度合格，呈中性。 ③无有机物和微生物污染。检测方法为：在100 ml水中加入2滴０.1g／L高锰酸钾溶液煮沸后仍为粉红色。 ④钙、镁等金属离子含量合格。检测方法为：在10mｌ水样中加入2 mｌ氨-氯化铵缓冲溶液(PH=10），2滴5ｇ/L铬黑Ｔ指示剂,摇匀。溶液呈蓝色表示水合格，如呈紫红色则表示水不合格。 ⑤氢离子含量合格。检测方法为：在10 ｍｌ水样中加入数滴硝酸，再加入4滴10g／L 的ＡｇNO３溶液,摇匀。溶液中无白色浑浊物表示水合格，如有白色浑浊物则表示水不合格。 ２、检验用试剂的要求 化学试剂是符合一定质量要求标准的纯度较高的化学物质，它是分析工作的物质基础。试剂的纯度对分析检验很重要，它会影响到结果的准确性,试剂的纯度达不到分析检验的要求就不能得到准确的分析结果。能否正确选择、使用化学试剂，将直接影响到分析实验的成败、准确度的高低及实验的成本,因此，仪器使用人员必须充分了解化学试剂的性质、类别、用途与使用方面的知识。 根据质量标准及用途的不同，化学试剂可大体分为标准试剂、普通试剂、高纯度试剂与专用试剂四类。 ①标准试剂 标准试剂是用于衡量其他物质化学量的标准物质，通常由大型试剂厂生产，并严格按照国家标准进行检验,其特点是主体成分含量高而且准确可靠。
动物实验基本操作一（固定、性别判定、标识） 【实验目的】在做动物试验时，为确保给药、实验顺利进行，防止被动物咬伤、准确辨别动物性别、准确标识动物，要学会用正确方法捉拿实验动物、掌握辨别动物性别的方法以及掌握标识动物的方法。 【实验对象】SD大鼠，KM小鼠，雌雄各半，体重180-250g。 【实验器材和药品】 器材：鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套 药品：苦味酸80%~90%酒精饱和溶液、20%乌拉坦 【实验步骤】 一、小鼠的捉拿 1、徒手固定：用右手提起尾巴中部，放在鼠笼盖或其他粗糙面上。向后上方轻拉，此时，小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面。左手拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤，再置小鼠于左手心，并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤，无名指压住小鼠尾根部，将其固定于手中。右手可行注射或其它操作。 2、固定器固定：尾静脉注射或给药时，将小鼠放进固定器中或者大小和重量适当的容器（如烧杯），只露出尾巴，该类容器能够压住尾部，避免其活动。勿固定过紧造成窒息死亡。进行腹腔手术或心脏采血时，先准备一个15-20cm的方木板，边缘钉入五颗钉子。将小鼠四肢分别用20-30cm的线绳捆绑，线的另一头分别绑在方木板的钉子上，并且在头部上颚切齿牵引一根线绳，也固定在钉子上，达到完全固定。 二、大鼠的捉拿
4-5周内的大鼠，方法同小鼠。周龄较大的，则：1、首先戴好防护手套。2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上。3、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行。4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。三、性别判定 小鼠、大鼠性别判定 （1）幼鼠外生殖器与肛门间隔短的是♀，外生殖器与肛门间隔长的是♂。 （2）成年动物可直接肉眼辨认，雄性有膨起的阴囊和阴茎，雌性动物有阴道口。四、动物的标记 小鼠的短期标记法：苦味酸80%~90%酒精饱和溶液（黄色），标出属于自己的编号【注意事项】 1、实验人员要有精神准备：掌握方法，胆大心细，做好防护。 2、动物兴奋的时候不要抓取，待其安静下来。 3、根据受试动物的给药部位或采血方法的不同，事先选择徒手固定还是固定器固定。 4、固定时把握好力度，过分用力会使小鼠颈椎脱臼或窒息死亡，若用力过轻头部能反转过来咬伤实验者的手。 【思考题】 1.在固定实验动物时如何才能快、准、稳？
药理学实验动物的基本操 作实验心得 Revised by Jack on December 14,2020
这次是第一次药理学实验，我们学习了很多实验动物的基本操作方法。在做药理学实验之前我们就有做过人体解剖生理学实验，解剖过蟾蜍，小白鼠和家兔，这次的药理学实验更是一次对所学知识的巩固和深化，教给了我们很多在生理学实验中并没有学过的知识点。在刚做实验时，黄老师就向我们介绍了3R原则，即减少，优化，替代。动物是我们人类的朋友，首先我们应该尊重动物。它们用生命来换取人类的健康，推动着医学的进步，人类医学的发展离不开动物实验，动物为我们人类的健康做出了牺牲，我们应遵循“3R”原则。黄老师还通过视频给我们重点介绍了常用麻醉药及用法，实验动物的捉拿、麻醉、固定、给药、取血和处死方法。让我学到了很多实用性很强的东西。 之后便是分组自己做实验了，首先陈老师向我们讲解了小白鼠的标记方法，用中性品红表示十位数，苦味酸表示个位数，加上空白对照，一共可以标记一百支小白鼠。标记顺序为先左后右，从上至下。用苦味酸作为标记物的一个原因是它不容易被分解和弄掉，不会因为小鼠的活动而消失。其次是因为其有苦味，避免了被其他老鼠舔掉。之后讲解了小鼠的性别鉴定方法，除了书上说的方法外还可通过观察小鼠的乳房辨别。关于大鼠和家兔的捉持方法，大鼠在捉持前最好对其进行安抚，避免其急躁而咬人，而家兔则不可用手扯其双耳将其拉起。在给药方法方面，灌胃法要注意从口角插入口腔，用灌胃针抵住舌头，插入不可过深，一般入喉即可。腹腔注射时最好将其倒转，头部朝下，这样不容易刺入内脏。是否插入腹腔的判断方法：推注完后，轻微回抽，若有负压将注射器的推杆拉回，则已入腹腔。皮下注射时是否的入皮下的判断方法上同，皮下无负压，回抽不拉回。尾静脉注射时注意静脉在尾的两侧，不在上下，注射时用手捏住尾巴前段有利于暴露血管。 家兔的灌胃用木质开口器，使用时要想办法将其舌头压在开口器下，因为舌头会阻碍导尿管插入口腔，可以另外使用棉签配合，一边用棉签压住舌头，一边将开口器插入口腔。耳缘静脉注射时要注意选择小号针头，因家兔耳静脉较小，插入时应仔细谨慎。
2015-动物实验基本操作动物实验 基本操作一（固定、性别判定、标 识）【实验目的】在做动物试验 时，为确保给药、实验顺利进 行，防止被动物咬伤、准确辨别动 物性别、准确标识动物，要学会 用正确方法捉拿实验动物、掌握 辨别动物性别的方法以及掌握标识 动物的方法。 【实验对象】SD大鼠，KM小鼠，雌雄各半，体 重180-250g。 【实验器材和药品】 器材：鼠笼、大小鼠固定器、方木板、美式图钉、细绳、防护手套 药品：苦味酸80%?90酒精饱和溶液、20%乌拉坦【实验步骤】 一、小鼠的捉拿 1、徒手固定：用右手提起尾巴中部，放在鼠笼盖或其他粗糙面上。向后上方轻拉，此时，小鼠前肢
紧紧抓住粗糙表面。左手拇指和食指迅速捏住小鼠颈背部皮肤，再置小鼠于左手心，并以左手掌心和中指夹住小鼠背部皮肤，无名指压住小鼠尾根部，将其固定于手中。右手可行注射或其它操作。 2、固定器固定：尾静脉注射或给药时，将小鼠放进固定器中或者大小和重量适当的容器（如烧杯），只露出尾巴，该类容器能够压住尾部，避免其活动。勿固定过紧造成窒息死亡。进行腹腔手术或心脏采血时，先准备一个15-20cm的方木板，边缘钉入五颗钉子。将小鼠四肢分别用20-30cm的线绳捆绑，线的另一头分别绑在方木板的钉子上，并且在头部上颚切齿牵引一根线绳，也固定在钉子上，达到完全固定。 二、大鼠的捉拿 4-5 周内的大鼠，方法同小鼠。周龄较大的，^V: 1、首先戴好防护手套。2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上。3、左手顺势按、卡在大鼠躯干背部，稍加压力向头颈部滑行。4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳后部的头颈皮肤，其余三指和手掌握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。 三、性别判定小鼠、大鼠性别判定 (1)幼鼠外生殖器与肛门间隔短的是早，夕卜生殖器与肛门间隔长的是￡。 (2)成年动物可直接肉眼辨认，雄性有膨起的阴囊和阴茎，雌性动物有阴道口。
常用实验动物的实验基本操作技术 第一节常用实验动物的生物学特征 1．蛙（或蟾蜍）的生物学特点是什么？主要用于哪些实验？ 属于两栖变温动物，皮肤光滑湿润，有腺体无外鳞。蛙的心脏有两个心房，一个心室，心房与心室区分不明显，动静脉血液混合，有冬眠习性。生存环境比哺乳动物简单，在机能学实验中有多种实验选择该动物。如：①离体蛙心实验，常用来研究心脏的生理功能及药物对心脏活动的影响。②蛙的腓肠肌和坐骨神经可用于观察外周神经及其肌肉的功能，以及药物对周围神经、骨骼肌或神经肌肉接头的影响。③缝匠肌可用于记录终板电位。脊休克、脊髓反射、反射弧分析、肠系膜微循环等。在临床检验中，可用雄蛙作妊娠反应实验。 2．小白鼠的生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 小白鼠性情温顺，易于捕捉，胆小怕惊，对外来刺激敏感。它胃容量小，不耐饥渴，随时采食。在机能学实验中常选用该动物。故适用于大量的实验动物，如：某些药物的筛选实验、半数致死量（LD50）测定、药效比较、毒性实验、妊娠期20天左右，常用于避孕药实验及抗癌药实验。 3．大白鼠的生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 大白鼠性情温顺，行动迟缓，易于捕捉，但受惊吓或粗暴操作时，会紧张不安甚至攻击人。大鼠嗅觉发达，对外界刺激敏感，抵抗力较强。大鼠无胆囊，肾单位表浅，肝再生能力强。大鼠的血压反应比兔稳定，可用它作血压实验，也可用于慢性实验、抗炎、降脂、利胆、子宫实验及心血管系统的实验。药典规定该动物为催产素效价测定及药品指控中升压物质检查指定动物。 4．豚鼠生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 豚鼠性情温和，胆小，饲养管理方便，可群养。豚鼠耳蜗管发达，听觉灵敏，存在可见的普赖厄反射（听觉耳动反射），乳突部骨质薄弱。豚鼠对组织胺、人型结核杆菌很敏感。能耐受腹腔手术，使用于肾上腺机能的研究。其自身不能制造维生素C，是研究实验性坏血症的唯一动物。 5．家兔生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 家兔属于草食性动物，性情温顺但群居性差，听觉、嗅觉十分灵敏，胆小易惊，具夜行
动物实验给药量
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动物实验基础知识系列之一：剂量换算 关于剂量换算的问题 最近不少战友询问关于不同实验动物之间或者实验动物与人之间的剂量如何作“等效”换算的问题。 ?这个问题对学习药理的战友来讲,可能是非常熟悉了。但对于非药理专业但又需做药理实验的战友来说，仍然是令人困扰的问题。 下面我们分以下几点来探讨这个问题。?第一、等效剂量系数折算法换算?第二、体表面积法换算 第三、系数折算法与体表面积法的比较?第四、系数折算法的相对误差?第五、小孩与成人的剂量换算?第六、少常用实验动物剂量间的换算?第七、不同给药途径间的剂量换算 第八、LD50与药效学剂量间的换算? 下面我来简单说一下这个问题。 我们在实验中估算一种药物或化合物的使用剂量的时候,差不多是来源于两条途径: 一是查文献,参考别人使用的剂量。有时有现成的,可直接用。有时没有我们所用动物的剂量，但有其它实验动物的。也有的是有临床用量的，但没有实验动物的。这样，我们就得进行换算。这是我们今天要谈的这种方法。 另一种方法就是根据自己或文献上有关急性毒性的数据来进行估
算,以期采用合适的剂量。一般参考数据是LD５０。至于该选择ＬD ５0的多少分之一来作为参考剂量，众说纷纭。这个我们再另题讨论。 ?下面我来说一说用第一种方法进行如何换算。?目前我们大多数人用的方法,是参考徐叔云教授主编的《药理实验方法学》。在其附录中有一个表，列出了人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值。这个表，几乎被药理专业的人们奉为经典，一直在科研中沿用。 表如下所示： 请注意最后一行,这个就是我们通常用到的。把人的临床剂量转换为实验动物的剂量。 试着换算一个。 如:人的临床剂量为Ｘ mg/kｇ , 换算成大鼠的剂量： 大鼠的剂量=Ｘmg/kg×7０ｋｇ×0．018/200g=X mg／kg×70ｋg×0．018/0.2ｋg＝６.3 X ｍg/kg．
当动物有病时，常表现为精神不振、行动迟缓、毛发蓬乱无光泽、鼻部皮肤干燥并流鼻水、眼有分泌物等。 1.大白鼠的生物学特征是什么？主要用于哪些实验？ 大白鼠性情温顺，行动迟缓，易于捕捉，但受惊吓或粗暴操作时，会紧张不安甚至攻击人。 大鼠嗅觉发达，对外界刺激敏感，抵抗力较强。大鼠无胆囊，肾单位表浅，肝再生能力强。大鼠的血压反应比兔稳定，可用它作血压实验，也可用于慢性实验、抗炎、降脂、利胆、子宫实验及心血管系统的实验。药典规定该动物为催产素效价测定及药品指控中升压物质检查指定动物。 2.动物实验的常用方法有哪些？ 动物实验方法已成为医学科学研究和实验教学及相关学科研究中不可缺少的重要手段。 动物的实验方法是多种多样的，在医学的各个学科领域内都有其不同的应用，但基本的实验方法则是共同的， ⑴如健康动物的识别、选择、抓取、固定、麻醉、动物分组、编号、脱毛、给药、采血、取尿、急救、处死、尸检等，不论从事何种课题的医学研究都涉及到这套实验动物基本操作方法。
⑵动物实验按机体水平不同可分为整体实验和离体实验。还可进一步具体分为分子、亚细胞、细胞、组织、器官、整体动物和无损伤动物等水平的实验。按动物时间的长短则可分为急性实验和慢性实验。 ⑶按学科的实验方法可分为生理学的动物实验方法，病理生理学的动物实验方法，药理学的动物实验方法，病理解剖学、组织学的动实验方法等。 3.实验动物的捉持与固定 如何正确捉拿及固定大白鼠？ 以防大鼠在惊恐或激怒时咬伤手指，捉拿时最好带上防护手套， 右手抓住鼠尾立即提起，放在易攀抓的粗糟面上， 用左手拇指和食指抓住其两颊及后枕部皮肤，充分固定慎防咬伤， 其余手指握住整个鼠体，注意握力不要太大，以免大鼠窒息死亡。 然后将其腹部向上，作腹腔麻醉，最后固定。 4．实验动物性别的鉴别？ （1）如何鉴别小、大鼠的性别？ 根据外生殖器（阴蒂或阴茎）与肛门之间的距离来判断这些动物新生仔的性别， 一般间隔短的是雄性，外生殖器阴茎与阴蒂大，但是对此判别要有一定经验，成熟期雌性有阴道口，有膨起的阴囊和阴茎。 5．实验动物编号标记的方法 （1）为什么要对实验动物进行编号标记？标记的方法有几种？ 动物在实验前常常需要作适当的分组，不同的体重或相同的体重放在同一个笼时，这就 需要编号标记。标记的方法很多，良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、适用、无 明显损伤、无毒和易辨认等要求。标记的方法有染色标记法、号牌法、打孔剪口法和剃毛、 剪毛法。
实验一、药理学实验的基础知识和药理学总论实验 一、实验动物的基本技能和实验技术基础 1、实验动物的标记 大、小鼠和白色家兔的标记常用3～5％黄色苦味酸溶液涂于皮毛上标号。常用的方法：1号 --- 左前腿 2号 --- 左腰部 3号 --- 左后腿 4号 --- 头部 5号 --- 正中 6号 --- 尾根部 7号 --- 右前腿 8号 --- 右腰部 9号 --- 右后腿 10号 ---不标记 2、实验动物的捉持（大、小鼠） (1)小鼠的捉持用右手提起鼠尾，放在粗糙物（如鼠笼盖）上面，向后轻拉鼠尾；用左手拇指和食指捏住其两耳颈背部皮肤，将小鼠固定在掌中，使其腹部朝上，然后以无名指和小指夹住鼠尾或小鼠的左后肢。 （2）大鼠的捉持捉持和固定方法基本同小鼠，无经验者可戴上防护手套，并应动作轻柔。用右手捉住鼠尾，放在鼠笼盖上，向后轻拉鼠尾；左手掌面向鼠背，食指和中指压住鼠的头顶，拇指和无名指分别从鼠的两腋下插入，将鼠的两前肢卡住；或拽紧鼠后颈及后背皮肤即可。 3、实验动物的给药方法（大、小鼠） （1）小鼠的给药方法 灌胃（ig）：将小鼠固定后，使颈部拉直，右手持装有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，压其头部，使口腔与食道成一直线，沿上腭壁向鼠口腔的后下方轻轻插入食道。如遇阻力，可将针头抽出再插，以免刺破食管或误入气管。一般给药量为0.1-0.3ml/10g（体重）。 皮下注射（H或sc）：常在背部皮下。轻轻捏起背部皮肤，将注射针头刺入皮下，稍稍摆动针头，若容易摆动则表明针尖位于皮下。然后注入药液。一般给药量为0.1-0.20ml/10g （体重）。 腹腔注射（ip）：左手固定动物，右手持注射器，从下腹部外侧，呈45度角刺入腹腔，进针约3～5mm（注意：进针不宜过深，以免伤及肝脏和脾脏。注药前回抽一下，无回血时再注药）。一般给药量为0.1-0.3ml/10g（体重）。 肌内注射(im)：多注射于后肢股部肌肉，一般每侧不超过0.1ml。 尾静脉注射（iv）：将小鼠置于固定筒内，使尾部露在外面，用70％～75％的乙醇棉球擦尾部，或将鼠尾浸入45～59oC温水中，待尾部左右侧静脉扩张后，左手拉尾，右手进针。一般给药量为0.1-0.2ml/10g （2）大鼠的给药方法 均同小鼠。一般情况下，灌胃剂量为1～2ml/100g，皮下注射、尾静脉注射<1ml / 只，腹腔注射为1.5ml /只，肌内注射为
实验室基本常识 1.1分析实验室用水 分析化学实验用水是分析质量控制的一个因素，影响到空白值及分析方法的检出限，尤其是微量分析对水质有更高的要求。分析者对用水级别、规格应当了解，以便正确选用，并对特殊要求的水质进行特殊处理。 通常在分析实验室洗涤仪器总是先用自来水洗再用去离子或蒸馏水洗。进行无机微量分析要用二次去离子水，而有机微量分析又强调用重蒸馏水，所以我们应该了解有关实验室用水的知识。 1.1.1源水、纯水、高纯水 1.1.1.1源水、纯水、高纯水概念 水的纯度指水中杂质的多少。从这个角度出发将水分为源水、纯水、高纯水三类。 1.源水 源水又称常水，指人们日常生活用水，有地面水、地下水和自来水，是制备纯水的水源。源水水质直接关系纯水制备工艺的选取。源水中有悬浮物、胶体及溶解性物质等杂质。 2.纯水 纯水是将源水经预处理除去悬浮物、不溶性杂质后，用蒸馏法或离子交换法进一步纯化除去可溶性、不溶性盐类、有机物、胶体而达一定纯度标准的水。 3.高纯水 高纯水系指以纯水为水源，再经离子交换、膜分离[反渗透（RO）、超滤（UF）、膜过滤（MF）、电渗析（ED）]除盐及非电解质，使纯水电解质几乎完全除去，又 等去除到非常低的程度。 将不溶解胶体物质、有机物、细菌、SiO 2 1.1.2纯水与高纯水水质标准 中华人民共和国国家标准GB 6682－86《实验室用水规格》中规定了实验室用水规格、等级、制备方法、技术指标及检验方法。 1.1. 2.1实验室用水级别及主要指标 表1－1列出实验室用一、二、三级水性能主要指标。
表1－1 实验室用水级别指标 1.1. 2.2制备方法 一级水：基本不含有溶解或胶态离子杂质及有机物。可用二级水经进一步处理而制得。例如可用二级水经过蒸馏、离子交换混合床和0.2μm膜过滤方法制备，或用石英蒸馏装置进一步蒸馏制得。 二级水：可含有微量的无机、有机或胶态杂质。可采用蒸馏、反渗透、去离子后再经蒸馏等方法制备。 三级水：适用于一般实验室采用。可以采用蒸馏、反渗透、或去离子（离子交换及电渗析）等方法制备。 制备实验室用水的源水应当是饮用水或比较纯净的水。 *1.1.3蒸馏水与去离子水的比较 1.1.3.1蒸馏法 蒸馏法制纯水，由于绝大部分无机盐不挥发，因此水较纯净，适于一般化验 碱性溶液破室用。若用硬质玻璃或石英蒸馏器制取重蒸馏水时，加入少量KMnO 4 坏有机物，可得到电导率低于1.0～2.0μS·cm-1的纯水，适用于有机物分析。 1.1.3.2离子交换法 用离子交换法制取的纯水也叫“去离子水”或“无离子水”，所制纯水纯度高，比蒸馏法成本低，产量大，为目前各种规模化验室所采用，适用于一般分析及无机物分析。 表1－2、表1－3比较了各种蒸馏水及离子交换水中杂质量。
实验动物知识学习大纲 实验动物法规知识 1、1988年，原国家科委颁布了2号令《实验动物管理条例》 2、1988年，广东省人民政府颁布了《广东省实验动物管理条例》 3、1993年，原国家科委颁布了16号令《药物非临床研究质量管理办法》 4、1994年，原国家技术监督局颁布了实验动物的《中华人民共和国国家标准》文件一批 5、1997年，原国家科委、原国家技术监督局颁布了593号文《实验动物质量管理办法》 6、1997年，原国家科委、卫生部、农业部、原国家医药管理局发布了文件《关于“九五”期间实验动物工作发展的若干意见》 7、2001年，国家科技部等7大部委联合颁布了《实验动物许可证管理细则（试行）》 8、2001年，国家质量监督检验检疫总局发布了实验动物的《中华人民共和国国家标准》文件一批，定于2002年5月1日起实施。新的国家标准取消了普通级小鼠、大鼠，取消了亚屏障环境标准。对饲养豚鼠家兔犬和猴的普通级开放系统的环境，增加了换气次数、落下菌数和日温差控制等要求。 9、2002年，广东省科技厅等8大厅局部制定了《广东省实验动物许可证管理细则（试行）》。决定对在广东省行政区域内从事与实验动物有关工作的单位和个人，实行实验动物许可证制度，实验动物许可证由广东省科技厅印发，包括“实验动物生产许可证”和“实验动物使用许可证”，许可证每5年发放一次，每年实行年检。 10、2003年，广东省科技厅下发《关于开展我省首批实验动物许可证评审工作的通知》，对2003年上半年申办实验动物合格证的28家单位进行了首批实验动物许可证评审工作。 11、2003年，广东省科技厅颁发了《关于印发实验动物许可证申领办法的通知》，组织了专家对受理单位进行了现场考察，现场考察主要内容有：⑴申办单位主管领导进行实验动物政策法规考察；⑵对实验动物从业人员进行实验动物知识和技能考察；⑶对申办材料的内容进行现场考察核对。 12、2003年，广东省科技厅下发《关于在我省全面实施实验动物国家标准2001修订版的通知》。通知决定：将小鼠、大鼠分为清洁级SPF级和无菌级，取消普通级。2003年不再发放普通级大小鼠合格证，已取得的普通级大小鼠合格证到2003年5月1日自然失效。各单位要加紧建设SPF级动物设施，以满足科研需要。 实验动物学知识 1、实验动物、实验动物学的概念 实验动物（Laboratory Animal,LA），指由人工培育，来源清楚，遗传背景明确，对其携带的微生物和寄生虫实行监控，用于生命科学研究、药品与生物制品生产和检定，以及其他科学研究的动物。 实验动物科学（Laboratory Animal Sciences），是研究有关实验动物和动物实验的一门新兴科学。简言之，实验动物科学是专门研究实验动物的生物特性、饲养繁殖、遗传育种、质量控制、疾病防治和开发应用的科学。 2、实验动物具有的三大特点： 1）、遗传学特点；2）、微生物与寄生虫的监控特点；3）、应用特点 3、实验动物学的分支学科有哪些：