吉林农业大学
学士学位论文
题目名称：酶法提取猪皮中胶原蛋白的工艺优化
学生姓名：王发明
院系：生命科学学院专业年级：07级生物技术指导教师：王莘职称：教授
2011年5月17日
目录
题目 (Ⅰ)
摘要及键词 (Ⅰ)
1 前言 (1)
2 实验材料和方法 (1)
2.1 实验材料和仪器 (1)
2.1.1 实验材料及试剂 (1)
2.1.2 实验仪器 (1)
2.2 实验方法 (1)
2.2.1 猪皮的简单预处理 (1)
2.2.2 胶原蛋白的提取和纯化 (1)
2.3 蛋白质含量测定 (1)
2.3.1 考马斯亮蓝法 (1)
2.3.1.1 标准曲线的制作 (1)
2.3.1.2 样品蛋白的测定 (2)
2.3.1.3 蛋白质含量计算 (2)
3 结果与分析 (2)
3.1 酶处理条件对胶原蛋白提取量的影响 (2)
3.1.1 酶处理pH值对胶原蛋白提取量的影响 (2)
3.1.2 酶处理时间对胶原蛋白提取量的影响 (3)
3.1.3 酶处理温度对胶原蛋白提取量的影响 (3)
3.1.4 加酶量对胶原蛋白提取量的影响 (4)
4 讨论 (4)
5 结论 (5)
参考文献 (5)
致谢 (6)
酶法提取猪皮中胶原蛋白的工艺优化
姓名：王发明
专业：生物技术
指导教师：王莘
摘要：目的：对猪皮中进行胶原蛋白提取。方法：用中性蛋白酶预处理猪皮，再用考马斯亮蓝法测得胶原蛋白的含量。结果：在单因素试验的基础上，通过对比实验确定胶原蛋白提取的最佳条件:酶处理pH6,加酶量(E/ S)400 U/g，温度40 ℃，处理时间2h。
关键词：胶原蛋白; 酶处理; 考马斯亮蓝
Semi-bionic extraction of pigskin to optimize the technology of
collagen
Name：Wang Faming
Major：Biotechnology
Tutor：Wang Xin
Abstract: purpose:The pigskin extraction of collagen. Methods: use neutral protease pretreatment pigskin, reoccupy test measured MaSiLiang blue method of collagen content. Results: on the basis of single factor experiment, through the contrast experiment determined the best condition of collagen extraction enzyme treatment
pH6, add, enzyme quantity (E/S) 400 U/g, temperature 40 ℃, the processing time 2h. Keywords: Collagen; Enzyme treatment; Coomassie Brilliant Blue
I
1 前言
猪皮中的蛋白质含量高达33%，其中胶原蛋白含量为87.8%[1]，而瘦猪肉的蛋白含量仅为18 %左右。由此看来猪皮中的蛋白质含量远高于瘦猪肉，其营养价值十分可观。此外胶原蛋白具有特殊的结构与功能,并具有皮肤保湿等的用途，开发胶原蛋白产品已经成为人们研究的热点[2]。随着生物和高分子科学的不断发展,人们会对此有更深的了解和认识，因此开发胶原蛋白资源具有广阔的前景。
本论文实验研究主要利用中性蛋白酶处理猪皮，采用考马斯亮蓝方法测定猪皮中的胶原蛋白含量的方法。通过酶的不同处理条件，胶原蛋白提取量的比较来确定胶原蛋白提取的最佳条件，是对胶原蛋白的提取进行的基础性研究工作。2 材料和方法
2.1 实验材料和仪器
2.1.1 实验材料及试剂
猪皮，中性蛋白酶，牛血清蛋白，无水乙醇，NaCl溶液，蒸馏水，考马斯亮蓝溶液
2.1.2 实验仪器
电动搅拌器，电子天平，恒温水浴锅，离心机，分光光度计
2.2 实验方法
2.2.1 猪皮的简单预处理[3]
将皮下脂肪剔除，切成10mm×10mm的小块，用35℃的清水洗2次，再用无水乙醇浸泡，振荡约10小时，弃掉有机溶剂。
2.2.2 胶原蛋白提取和纯化
称取一定量经简单预处理的皮块于烧杯中，加入相应量的中性蛋白酶，并用缓冲溶液控制pH值，在一定温度下搅拌一定时间，离心去残渣[4]，上清液经考马斯亮蓝法测得蛋白质提取量[5]。
2.3 蛋白质含量的测定
2.3.1 考马斯亮蓝法
2.3.1.1 标准曲线的制作[6]
称取10mg牛血清蛋白用蒸馏水定容至100ml（100ug/ml）分别取0ml，0.1ml，0.2ml，0.3ml，0.4ml，0.5ml，0.6ml，0.7ml，0.8ml，用蒸馏水补足1ml，再分别加入5ml考马斯亮蓝G-250，摇匀。放臵2min后在595nm波长下比色测定（比色应在1h内完成测定）。以牛血清蛋白含量（ug）为纵坐标，以吸光度为横坐标。如图3-1
1
图2-1标准曲线
Figure2-1 standard curve
2.3.1.2 样品蛋白的测定
取1试管准确加入0.1ml蛋白溶液，再加入0.9ml蒸馏水，5ml考马斯亮蓝G-250试剂，充分混合，放臵2min后，以标准曲线1号试管做参比，在595nm 波长下比色，记录吸光度
2.3.1.3 蛋白质含量计算
样品蛋白质含量（ug/g)=CV T/WV S
试中C ——查标准曲线值
V T——提取液总体积
W——猪皮鲜重
V S——测定时加样量
3 结果与分析
3.1 酶处理条件对胶原蛋白提取量的影响
3.1.1 酶处理pH值对胶原蛋白提取量的影响
称取一定量经简单预处理的猪皮,在不同pH体系下进行酶处理，酶处理温度35℃、酶处理时间2h、加酶量400U/g。之后进行考马斯亮蓝法测得蛋白质含量，实验结果见图3-1所示。
图3-1酶处理时pH对提取蛋白量的影响Figure 3-1 Enzymes to extract protein when processing the amount of the pH influence
2
从图3-1可以看出，蛋白的提取量在pH6到6.5的区间内不断升高，pH6.5时达到最大值，而pH6.5到7.5之间逐渐下降，之后逐渐趋于平稳，说明pH6.5是该酶的最适PH。
3.1.2 酶处理时间对胶原蛋白提取量的影响
称取一定量经简单预处理的猪皮，用酶处理不同的时间，酶处理温度35 ℃、pH 6.5加酶量400 U/g。之后进行考马斯亮蓝法测得蛋白质含量，实验结果见图3-2所示。
图3-2 酶处理时间对蛋白量的影响
Figure 3-2 Enzymes to protein processing time the amount of influence
从图3-2可以看出，蛋白提取量在酶处理时间1小时到2小时逐渐升高，在2小时时达到最大值，之后又随着酶处理时间增加而降低，说明该酶的最适处理时间为2小时。
3.1.3 酶处理温度对提取量的影响
称取一定量经简单预处理的猪皮，在不同温度下进行酶处理，酶处理时间2 h、pH 6.5、加酶量400U/g。之后进行考马斯亮蓝法测得蛋白质含量，实验结果见图3-3所示。
图3-3 酶处理温度对蛋白量的影响
Figure 3-3 Enzyme treatment effect of temperature on protein quantity
3
从图3-3可以看出蛋白的提取量随着酶处理温度的升高而逐渐升高在40℃的时候达到最大追，之后又随着温度升高而降低，说明该酶的最适温度为40℃。
3.1.4 加酶量对胶原蛋白提取量的影响
称取一定量经简单预处理的猪皮，采用不同的加酶量对猪皮进行酶处理，酶处理温度35℃、pH 6.5、时间2h。之后进行考马斯亮蓝法测得蛋白质含量，实验结果见图3-4所示。
图3-4 加酶量对蛋白量的影响
Figure 3-4 Add enzyme amount of protein amount of influence
从图3-4可以看出，蛋白提取量随着加酶量的增加而组建升高在400U/g时达到最大值，之后随着加酶量增加而组建降低，说明加酶量在400U/g时蛋白提取量最大。
4 讨论
4.1 胶原蛋白的提取量在pH值6.5时最大。而在两边区域，蛋白量均有所降低。这说明对于中性蛋白酶而言，在pH偏酸性时，对猪皮的处理效果最好。
4.2 胶原蛋白的提取量在酶处理时间为2 h时出现最高值。而在两边区域，蛋白质的量均有所降低，酶处理时间过短，不能充分疏松猪皮表层结构、除去非纤维蛋白中的球状蛋白、软化胶原蛋白的皮层，酶处理时间过长，猪皮中部分胶原蛋白可能溶于缓冲溶液中，导致猪皮中胶原蛋白溶失，胶原蛋白提取量低，因此酶处理时间过长或过短，都会影响胶原蛋白的提取量。
4.3 胶原蛋白的提取量在酶处理温度40 ℃时出现最高值。而在两边区域，提取率均有所降低。说明中性蛋白酶在40℃时酶处理效果最好，过高或者过低的温度都可能导致酶活性的降低，甚至失活，从而影响酶处理的效果。
4.4 胶原蛋白的提取量在加酶量400 U/g 时出现最高值。而在两边区域，提取率均有所降低。这是由于中性蛋白酶作为一种生物催化剂，对底物的吸附作用有一定的饱和度，随着加酶量的增加，与底物的结合是逐渐饱和,因此提取率逐渐增加；然而，当酶用量增大到饱和值后，猪皮中一部分胶原蛋白由于受酶作用而被缓冲溶液溶解，所以导致提取率略有下降。
4
5 结论
采用中性酶法预处理再用考马斯亮蓝法测定猪皮中胶原蛋白的最佳工艺条件是酶处理pH 6.0、处理温度40℃、加酶量(E/S)400 U/g、处理时间2h。
参考文献
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学,1994(7):37 391
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5
致谢
感谢我的指导老师王莘教授，这篇论文是在王老师的的悉心指导与鼓励下完成的。王老师为我提供了良好的实验条件，在申请和开展项目、参加学术会议、撰写论文等方面提供了很多专业性的指导。宋老师渊博的学识、严谨的治学态度、精益求精的工作作风和诲人不倦的高尚师德，都将深深地感染和激励着我。在此谨向王老师致以诚挚的感谢。
感谢大学四年来给予我帮助和指导的学院领导、老师和同学们，在次致以真挚的感谢。
6
猪皮熬胶原蛋白的方法 猪皮是我们常吃的一种荤类食物。猪皮的美容功效是众所周知的。猪皮含有丰富蛋白质，胶原蛋白。正是因为胶原蛋白的丰富，才使得猪皮拥有美容的功效。胶原蛋白会使得我们的脸看起来更嫩，更滑，可以让肌肤看上去更加年轻。所以猪皮就成了补充胶原蛋白的不二选择。那么猪皮怎样熬制胶原蛋白呢？接下来我们就一起来了解一下吧！ 一、胶原蛋白在营养价值上与蛋、肉、奶（完全蛋白，必需氨基酸齐全，可以维持生命，促进生长发育）等不同，属于不完全蛋白质，必需氨基酸不齐全，不可以维持生命和促进生长发育。 二、首先要把买来猪皮清洗干净，除毛。接着用砂锅或者锅子用水煮，直到猪皮融化成胶状。然后冷却；或者冷却后进行冷藏。 三、胶原蛋白的特点： 1、温和：不刺激皮肤和眼睛，性质温和。用于面部肌肤护理可渗透至肌肤内层。
2、保湿：胶原蛋白富含亲水性的天然保湿因子，它与皮肤表面的蛋白质结合，可补充人体流失的胶原蛋白、氨基酸，能涵养皮肤水分，使皮肤有着良好的亲合性。 3、防皱：由于活性胶原蛋白的分子结构和人体皮肤胶原蛋白相容性极好，所以能完全被皮肤吸收、填充在皮肤基质层之间，从而使皮肤丰满、皱纹舒展，同时提高皮肤密度，产生张力。 4、修复：胶原蛋白具有独特的修复功能，胶原蛋白和周围组织的亲合性好，具有修复组织的作用，有痘痘留下的皮肤坑洞可以填洞好。 5、赋予肌肤弹性：胶原蛋白可以使皮肤柔软丰满富有弹性，润滑角质层，刺激皮肤微循环，促进皮肤的新陈代谢，使皮肤光滑、亮泽，减少皱纹。
6、产品为可溶性活性胶原蛋白多肽精华粉，100%纯活性胶原蛋白，均不含任何防腐剂、添加剂或填充剂。 7、胶原蛋白与丰胸 胶原蛋白对丰胸的作用早已为人们所熟知。乳房主要由结缔组织和脂肪组织构成，而挺拔丰满的乳房很大程度上依靠结缔组织的承托，胶原蛋白是结缔组织的主要成分，"在结缔组织中胶原蛋白常与及多糖蛋白相互交织成网状结构，产生一定的机械强度，是承托人体曲线，体现挺拔体态的物质基础。"
年产5000吨乳酸工厂车间设计 乳酸是世界上应用广泛的三大有机酸之一，目前生产乳酸主要采取的方法有传统发酵工艺以及固定化微生物法、电渗析连续发酵法、萃取发酵法、膜法发酵法、吸附发酵法、同时糖化发酵法等新工艺，在工业生产中多采用微生物发酵法生产L-乳酸。乳酸的提取精制是乳酸生产中非常重要的步骤，工业生产中常用的乳酸提取工艺主要有：钙盐法、锌盐法、离子交换法、溶剂萃取法和电渗析法等。本设计采用德式乳杆菌为菌种，以大米为主要原料，麸 作为乳酸中和剂和发酵液皮为辅助原料经糖化发酵并行式来生产乳酸。在发酵时加入CaCO 3 稳定剂，得到的发酵液经预处理→浓缩→冷却结晶→洗晶→离心分离→乳酸钙结晶→溶晶→酸解→过滤→脱色等一系列步骤得到粗乳酸；粗乳酸先经浓缩再经离子交换法（先通过732阳离子交换柱再通过331阴离子交换柱）得到纯乳酸。 根据上述工艺流程，在进行乳酸工厂提取车间设计时，根据工厂的实际生产工艺和产能采取最优的提取工艺，通过对乳酸生产平衡、设备平衡和能量平衡等的计算，选取相应的生产设备，合理布局设计，使生产操作可靠性、方便性达到生产要求，降低成本，最终使生产效益最大化，并设计出合理的工艺流程图、设备结构和布置图以及全厂平面布置图。 关键词：发酵工艺；乳酸提取车间；工厂设计 1
目录 1 绪论 (1) 1.1 乳酸的概况 (1) 1.1.1 乳酸的理化性质 (1) 1.1.2 乳酸的工业生产 (2) 1.1.3 乳酸的用途及功能 (2) 1.1.4 乳酸的质量检验与储存 (3) 1.2 乳酸的发酵方法 (3) 2 生产工艺 (5) 2.1 发酵工艺 (6) 2.1.1 发酵工艺流程及特点 (6) 2.1.3 发酵工艺操作要点及注意事项 (7) 2.2 提取精制工艺 (8) 2.2.1 提取工艺流程及特点 (8) 2.2.2 提取工艺条件 (8) 2.2.3 提取注意事项以及工艺操作要点 (8) 3 工艺计算及设备选型 (11) 3.1 发酵工段 (11) 3.1.1 物料平衡计算 (11) 3.1.2 设备计算及选型 (12) 3.2 提取工段 (12) 3.2.1 生产平衡计算 (12) 3.2.2 设备平衡计算及选型 (13) 4 车间布置设计 (15) 4.1 设计依据 (16) 4.2 车间布置（厂房平面布置） (16) 4.2.1 车间布置设计原则 (16) 4.2.2 车间平面布置 (17) 4.2.3 车间立面布置 (17) 4.2.4 设备布置 (17) 结论 (17) 2
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910257876.7 (22)申请日 2019.04.01 (71)申请人 武汉轻工大学 地址 430023 湖北省武汉市汉口常青花园 学府南路68号 (72)发明人 徐玉玲 汪海波 何浪 李盛 张军涛 未本美 (74)专利代理机构 北京思创大成知识产权代理 有限公司 11614 代理人 高爽 (51)Int.Cl. C07K 14/78(2006.01) C07K 1/30(2006.01) C07K 1/14(2006.01) (54)发明名称一种胶原蛋白及其提取方法(57)摘要本发明公开了一种胶原蛋白及其提取方法。该方法包括如下步骤：1)将含有胶原蛋白的动物组织在液氮中进行冷冻、研磨；2)将研磨后的动物组织以酸/酶法提取胶原蛋白，得到胶原蛋白溶液；3)将胶原蛋白溶液透析、冻干后，得到粉末状的所述胶原蛋白。本发明采用冷冻研磨预处理方法，在液氮中预先冷冻含有胶原蛋白的动物组织一段时间，利用研磨仪在一定频率下研磨成粉末，该方法处理后，三螺旋结构及热变性温度并未受影响，能在保持天然胶原纤维化性能的基础上，比原有不冷冻研磨的酸提法的提取率提高18％-82％，这对于胶原应用及胶原基生物材料 的应用具有重要意义。权利要求书1页 说明书5页 附图2页CN 109796529 A 2019.05.24 C N 109796529 A
权 利 要 求 书1/1页CN 109796529 A 1.一种胶原蛋白提取方法，其特征在于，该方法包括如下步骤： 1)将含有胶原蛋白的动物组织在液氮中进行冷冻、研磨； 2)将研磨后的动物组织以酸/酶法提取胶原蛋白，得到胶原蛋白溶液； 3)将胶原蛋白溶液盐析、透析、冻干后，得到粉末状的所述胶原蛋白。 2.根据权利要求1所述的胶原蛋白提取方法，其中，进行步骤1)之前，还包括预处理步骤： 将含有胶原蛋白的动物组织脱脂、除杂蛋白后，干燥。 3.根据权利要求1所述的胶原蛋白提取方法，其中， 所述含有胶原蛋白的动物组织为哺乳动物皮和/或鱼类皮； 所述胶原蛋白为哺乳动物皮胶原蛋白和/或鱼皮胶原蛋白。 4.根据权利要求1所述的胶原蛋白提取方法，其中，步骤1)中，冷冻的时间为16～32h。 5.根据权利要求1所述的胶原蛋白提取方法，其中，步骤1)中，所述研磨的时间为3-25min。 6.根据权利要求5所述的胶原蛋白提取方法，其中，步骤1)中，所述研磨的时间为10-20min。 7.根据权利要求1所述的胶原蛋白提取方法，其中，步骤1)中，所述研磨的频率为10～25HZ。 8.根据权利要求1所述的胶原蛋白提取方法，其中，步骤2)中，酸/酶法提取胶原蛋白的步骤包括： 将研磨后的样品使用0.4～0.6mol/L乙酸浸泡并搅拌3～5d，再加入胃蛋白酶使混合溶液中胃蛋白酶的浓度为1.5～2.5％，搅拌16～32h后得到胶原蛋白溶液。 9.根据权利要求1所述的胶原蛋白提取方法，其中，步骤3)中，所述透析的时间≥3d。 10.由权利要求1-9中任意一项所述的胶原蛋白提取方法得到的胶原蛋白。 2
猪皮含有胶原蛋白吗 猪皮我们都知道，其中还含有丰富蛋白质，以及脂肪。不仅如此，猪皮的含脂肪量甚至不到猪肉的一半。所以猪皮也不会使人发胖，也是许多减肥人士爱吃的休闲零食。猪皮是以有美容效果闻名的。那么猪皮内是否含有对皮肤有极大作用的胶原蛋白呢？接下来就跟随一起了解一下吧！ 一、猪皮是一种蛋白质含量很高的肉制品原料。以猪皮为原料加工成的皮花肉、皮冻、火腿等肉制品，不但韧性好，色、香、味、口感俱佳，而且对人的皮肤、筋腱、骨骼、毛发都有重要的生理保健作用。 猪皮里蛋白质含量是猪肉的2.5倍，碳水化合物的含量比猪肉高4倍，而脂肪含量却只有猪肉的一半。 二、猪皮中含有大量的胶原蛋白质在烹调过程中可转化成明胶，明胶具有网状空间结构，它能结合许多水，增强细胞生理代谢，猪皮所含蛋白质的主要成分是胶原蛋白，约占85%，其次为弹性蛋白。生物研究发现：胶原蛋白质与结合水的能力有关，人
体内如果缺少这种属于生物大分子胶类物质的胶原蛋白，会使体内细胞贮存水的机制发生障碍。细胞结合水量明显减少，人体就会发生“脱水”现象，轻则使皮肤干燥、脱屑，失去弹性，皱纹横生，重则影响生命。 ★三、一般人群均可食用： 1、适宜阴虚之人心烦、咽痛、下利者食用；适宜妇女血枯、月经不调者食用；也适宜血友病人出血者食用； 2、外感咽痛、寒下利者忌食；患有肝病疾病、动脉硬化、高血压病的患者应少食或不食为好。 四、加工好的正常猪皮具备以下特点：皮白有光泽，毛孔细
而深；去毛彻底，无残留毛、毛根；无皮伤及皮肤病； 无皮下组织，去脂干净；成型好；煮熟后具备正常的色、香、味，口感柔软，韧性良好，肉汤透明澄清，冷置后呈无色胶冻。
胶原蛋白的提取 实验原料：猪皮，氯仿，乙醇，乙酸，0.05mol/L Tris-HCl缓冲液，NaCl，NaOH，胃蛋白酶，蒸馏水。 实验器材：搅拌机，低温离心机，控温磁力搅拌器，电子天平，透析设备，PH试纸，烧杯，玻璃棒，小刀，研钵。 实验需配药品：A:氯仿/乙醇（2:1）约需400ml， B:0.5mol/L乙酸约3000ml， C:6mol/L NaOH溶液约40ml, D:质量分数0.1％、0.01％的乙酸（透析用）， E:含4.5mol/LNaCl的0.05mol/LTris-HCl缓冲液约需200ml。 实验步骤： 1,猪皮的前处理： （1）称取猪皮50g，用氯仿/乙醇（2:1，A）溶液对其进行脱脂后切除皮下脂肪，去毛并细切； （2）将组织小块用乙醇和蒸馏水洗涤多次； （3）将洗涤后的组织放入搅拌机中搅拌成糊状，用含4.5mol/L NaCl的0.05mol/L Tris-HCl 缓冲液（pH 7.5，E）充分洗涤（2h）以去除脂质及血清等成分，低温离心（8000r/min，30min，4℃）取沉淀。 2,提取胶原蛋白： （1）进行前处理后，在沉淀中加入500ml含胃蛋白酶250mg的0.5mol/L冰醋酸（B），搅拌并维持在4℃，提取48h； （2）高速冷冻离心机离心（4000r/min）吸取上清液。在上清液中加入NaCl至4.4mol/L （NaCl2.2mol）搅拌过夜； （3）低温离心，将沉淀溶于0.5mol/L冰醋酸中，再逐级用2.4mol/L（NaCl1.2mol，以500ml 冰醋酸计），1.7mol/L（NaCl0.85mol）及1.0mol/L（NaCl0.5mol）的NaCl反复盐析、酸溶。最后得到的上清液即为胶原粗提液。 3,胶原蛋白提纯: （1）在粗提胶原蛋白溶液缓慢加入6 mol/L NaOH溶液（C）调节pH值到7，冷冻离心除掉沉淀物，在剩余的溶液中加入氯化钠固体研细粉末，缓慢搅拌，4 ℃静置过夜保存；（2）离心取沉淀，用稀醋酸再次溶解，将溶解液装入透析袋中，用质量分数分别为0.1%、0.01%的乙酸溶液（D）透析1 d，再用蒸馏水透析3d，每天换透析液两次，最后得到的是纯度较高的胶原蛋白水溶液； （3）将纯化的胶原蛋白水溶液采用低温冷冻干燥法制备成纯胶原蛋白样品，备用。
植物酯酶提取工艺： （1）酶活测定条件的优化，如pH值，时间，底物浓度，显色剂用量及浓度等。 （2）植物酯酶或胆碱酯酶的溶剂提取条件的确定如：溶液的种类、固液比、温度、时间等。（3）纯化条件如超滤、凝胶、离子交换等条件的确定。 （4）经纯化后的纯酶的酶学性质如：热稳定性、pH稳定性、金属对酶活性的影响。 1、标准曲线的绘制 称取0.0036gα-萘酚（分子量：144.17），溶解于无水乙醇中，定容至100mL，得0.25mmol/L溶液。 分别移取0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8mLα-萘酚溶液，用磷酸缓冲液稀释至10mL。 在各比色管中分别加入0.5mL0.08%固兰B盐3.6%SDS显色剂，置于30℃恒温水浴5min后做光谱扫描，并在最高吸收峰测吸光度。 用测得的结果做标准曲线。 1）PH的影响 磷酸缓冲液：6、6.5、7、7.5、8 比较：以缓冲液为空白作基线，固兰B盐+缓冲液扫描，求出A0，比较大小。 不同PH条件下，各最大吸收波长偏移情况，及A值大小。 不同pH条件下，其标准曲线线性 2）固兰B盐的浓度影响 1%、0.5%、0.2%、0.1%、0.08%、0.02%等，求出A0，以缓冲液为空白作基线 不同浓度下，做标准曲线 将固兰B盐放置，每天测A。，估计能放置保存天数。 3）加入SDS浓度 0、0.1、0.2、0.5、1、2、3、3.6空白，A0 取一中间浓度的扫描求最大吸收波长，及A 于冰箱及常温下放置，求A、A0 确定最佳浓度及固兰B盐能放置的时间。 取0.5mL稀释酶液，加入4.5mL缓冲液（可定容至5mL），加入0.5mLα- 乙酸萘酯溶液，30度，反应5min，缓冲液定容至10mL，加入0.5mL固兰B盐，置于30℃恒温水浴5min 1)乙酸萘酯乙醇溶液浓度影响 0.04、0.02、0.015、0.0005等测（萘酯+显色剂）A0，及A，最大吸收波长 2）加入乙酸萘酯溶液体积的影响 4）最后恒温水浴时间、温度的选择 5）初始缓冲液pH选择 6）酶液的稀释倍数 于固液比（1：7）水,于35度，150rpm ,振荡30min提取，4度， 1）固液比
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年处理2000吨板蓝根药材提取车间工艺设计 摘要 板蓝根是我国一味传统中药，是大青叶、菘蓝等的干燥茎、根，始载于《神农本草经》，在我国有着悠久的临床治疗历史。板蓝根中可提取出多种化学成份，如:靛蓝、靛玉红、氨基酸、有机酸等有效物质，能够有效防治流行性乙型肝炎、急慢性肝炎、流行性腮腺炎、骨髓炎等病症，在抗菌、抗病毒、抗免疫系统疾病方面也有着很好疗效。 板蓝根颗粒剂因为其方便有效特点应用较广，本文将结合国家GMP 车间设计相关规定，设计板蓝根提取车间。主要对板蓝根颗粒剂的前处理和提取工艺进行讨论优化：前处理的工艺选择，水提醇沉与醇提水沉的优缺点，用正交试验法优化选出板蓝根提取的最佳工艺，设计提取车间工艺流程。按照设计任务书给出数据进行物料衡算与热量衡算，计算车间的生产处理能力，根据计算结果进行设备选型，使满足车间生产要求。最后进行车间平面布置，车间将按照传统四层设计。车间的辅助设施设计也要符合国家规定，三废排出、安全防护等方面也会根据车间特点进行相应布局。 关键词板蓝根；提取；浓缩；车间设计
胶原蛋白的提取方法 胶原蛋白的提取与纯化的目标是尽量使胶原提取的产率、纯度更高，并且使所提取的胶原能满足不同领域的要求。迄今为止，胶原的提取方法主要有以下4种：酸法、碱法、盐法、酶法。在实际提取过程中，不同提取方法之间往往相互结合，以取得较好的提取效果。 1、酸法提取 酸法提取主要采用低离子浓度酸性条件浸渍处理原料，从而破坏分子间的盐键和希夫碱，而引起纤维膨胀、溶解。作为溶剂使用的酸，主要有盐酸或亚硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、柠檬酸和甲酸等。酸法是提取胶原蛋白比较常用和有效的方法，用酸法提取的胶原最大程度地保持了其三股螺旋结构。此法处理快速，所得产品的分子量是连续的，适用于医用生物材 料及原料的制备，但产品得率低，设备腐蚀严重，污染重。赵苍碧等采用0.3 %的醋酸溶液在 4 ℃下从牛腱中提取胶原蛋白，得到高纯度的胶原蛋白溶液。余海等采用0.5 mol/L的醋酸溶液在4 ℃下从鼠尾肌腱胶成功提取出I型胶原蛋白。Takeshi等胶原蛋白课题组 采用0.5 mol/L的醋酸溶液从海妒鱼、鳍鱼、金枪鱼、水母等的皮中提取、分离出纯度较高的胶原蛋白，并对所提取的胶原蛋白的理化性质作了系统的研究。2、碱法提取 碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。如Holzer等采用1 %～1.5 %石灰水浸泡的方法提取胶原蛋白。由于它容易造成肽键水解，因此得到的水解产物分子量比较低。所以，若想保留胶原的三股螺旋结构，此法不可取。 3、盐法提取 盐法提取胶原蛋白所用的中性盐有盐酸-三羟甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化钠、柠檬酸盐等。在中性条件下，当盐的浓度达到一定量时，胶原溶解。并且可采用不同浓度的氯化钠对提取的胶原蛋白进行盐析处理，可以沉淀出不同类型的胶原蛋白。 4、酶法提取
猪皮胶原蛋白面膜情况介绍 我们大家知道现在的美容市场真是多种多样的，为什么这么说，主要看面膜就知道，微笑圈，qq朋友圈里面大把买面膜的，这种面膜也不知道质量怎么样，我们可以不相信他们的面膜，但是我们自己可以试着做一些面膜来看看，比如：猪皮胶原蛋白面膜，下面我们就来为大家介绍介绍关于猪皮胶原蛋白面膜情况介绍。 猪皮胶原蛋白面膜，顾名思义，“用猪皮做原料，做成面膜用以保养皮肤”。看似平常无用的猪皮却能发挥如此作用，它的横空出世来源于韩国的辣妈马胜智，曾参加韩国SBS“娃娃脸选拔赛”而一举成名，同样走红的还有她那独创美颜秘方——胶原满满的“猪皮面膜”。马美女原本是用来做料理给小孩吃了长身体，无奈小孩都不喜欢吃，不得已才突发奇想拿来敷脸，结果皮肤居然惊天地泣鬼神地越变越好
成分：水解胶原蛋白、甘油、硬脂酸甘油酯、PEG-100硬脂酸酯、澳洲胡桃油、聚二甲基硅氧烷、透明质酸钠、尿囊素、可可籽萃取物、聚谷氨酸、大豆发酵萃取物等。 一、制作方法 1.沸水煮1个小时后切块。 2.搅拌猪皮成膏状。 3.猪皮膏凝结，切块，冷冻。 5.加入绿茶、薏仁粉、蜂蜜等，锦上添花
二、产品特点 1、含量高达50000mg的猪皮胶原蛋白成分 2、不含任何化学添加剂，无异味 三、使用方法 1、洁面后进行日常脸部基础护理； 2、取适量的猪皮面膜均匀涂抹于脸部； 3、20分钟左右吸收后即可清洗。 四、媒体报道
45岁韩国辣妈嫩过大学生猪皮面膜成独门秘方 传说中那胶原满满的猪皮面膜 好了，上面就是我们关于猪皮胶原蛋白面膜情况介绍了，大家看完之后感觉是怎么样的呢？是不是能够自己亲手去做做猪皮胶原蛋白面膜呢？这个就是我们自己所要知道的，也是我们自己所需要去制作的，为什么这么说，因为我们用的面膜太多，还不如自己制作！
凝血酶的提取 凝血酶是机体凝血系统中的天然成分，它由两条肽链组成，多肽链之间由二硫键连接。凝血酶在体内以凝血酶原形式存在，在一定条件下凝血酶被激活并转化为有活性的一种蛋白质水解酶。分子量335800，白色无定形粉末，溶于水，不溶于有机溶剂。 目前国内主要从动物血浆及人血浆中制备凝血酶，在经激活物激活而成为凝血酶。它可催化血纤维蛋白原中血纤维肽A和B的断裂，转变成不溶性血纤维蛋白凝块。凝血酶在临床上应用广泛，常以干粉或溶液局部涂于伤口及手术处，控制毛细血管血液渗出，多用于骨出血、扁桃腺摘除和拔牙时出血等。有时也可口服，用于胃和十二指肠出血。凝血酶局部止血效果好，且无副作用。目前凝血酶的应用范围正日渐扩大，由单纯的局部外敷发展到外科手术、耳鼻喉、口腔、妇产、泌尿及消化道等部位出血的止血，亦可作为多种外用止血药物的重要原料，其止血效果优于“对氨基苯甲酸”、“止血环酸”、“止血敏”等通过注射后须经血管收缩而起止血作用的药物，顾深受广大用户的欢迎，将广泛应用于临床。由于临床使用该药日渐广泛，将使目前十分紧俏的凝血酶更趋紧缺，因此生产前景看好，只要原料有保证，技术过关，就可获得产品。 （一）原料及试剂： 1、动物血液：须选用新鲜的动物血液，防止混入其它杂志。盛血液的器具一定要干净。 2、柠檬酸三钠（Na3C6H5O7·2H2O）：又名枸橼酸钠。无色晶体或粒状粉末。相对密度1.875。150℃时失去结晶水，温度再高则分解。溶于水，难溶于乙醇。本工艺中主要作抗凝血剂用，防止血液凝固。选用化学纯试剂。 3、醋酸：学名乙酸。无色澄清液体，有刺激气味。相对密度1.049，沸点118℃。溶于水、乙醇和乙醚。用于调节pH值。选用化学纯试剂。 4、氯化钠：白色立方晶体或细小结晶粉末。相对密度2.165，熔点801℃。味咸，中性。有杂质时易潮解。溶于水和甘油，难溶于乙醇。选用一级工业品。 5、氯化钙：白色立方晶体，易潮解，相对密度2.15，熔点782℃，沸点大于1600℃，溶于水、乙醇。本工艺中用作激活剂，选用分析纯试剂。 6、丙酮：无色易挥发、易燃液体。有微香气味。相对密度0.7893，沸点56.5℃。于水、甲醇、乙醇、乙醚、氯仿等混溶。能溶解油、脂肪、树脂和橡胶。其蒸汽与空气形成爆炸性混合物，化学性质活泼。本工艺中用作沉淀剂，选用化学纯试剂。 7、乙醇：又称酒精，无色透明易挥发、易燃的液体。有酒味和刺激辛辣滋味。相对密度0.789。沸点78.4℃。溶于水、甲醇、乙醚、氯仿等。有吸湿性，能与水形成共沸混合物。其蒸汽与空气形成爆炸性混合物。本工艺中用来洗涤凝血酶，选用工业乙醇。 8、乙醚：又称二乙醚。是易流动的无色透明液体。有令人爽快的特殊气味，其蒸汽能使人失去知觉，甚至死亡。相对密度0.7135，沸点34.5℃。难溶于水，易溶于乙醇和氯仿等溶剂，极易挥发和着火。本工艺主要用于洗涤凝血酶，选用化学纯试剂。使用时，操作人员应注意防护，避免吸入，周围应杜绝明火并保持空气流通。 9、草酸钾：又名乙二酸钾。这里用于测定凝血酶活性，选用分析纯试剂。 10、标准纤维蛋白原：这里用于测定凝血酶效价，选购药检部门提供的标准品。 （二）凝血酶的提取工艺： 1、工艺流程：
中草药所含成分十分复杂，既有有效成分，又有无效成分和有毒成分。为了提高中草药的治疗效果，就要尽最大限度提取有效成分，去除无效成分及有毒成分。因此，中草药提取对于提高中药制剂的内在质量和临床疗效最为重要。但常用的提取方法（如煎煮法。回流法、浸渍法。渗漉法等）在保留有效成分，去除无效成分方面，存在着有效成分损失大、周期长、工序多。提取率不高等缺点。近10年来，在中药提取方面出现了许多新技术、新方法，这些新技术和方法的应用，使得中草药提取既符合传统的中医理论，又能达到提高有效成分的收率和纯度的目的。本文就这方面作一综述。 1. 超临界流体萃取技术 超临界流体萃取（简称SC FEFE）是一种以超临界流体（简称SCF）代替常规有机溶剂对中草药有效成分进行革取和分离的新型技术，其原理是利用流体（溶剂）在临界点附近某区域（超临界区）内与待分离混合物中的溶质具有异常相平衡行为和传递性能，且对溶质的溶解能力随压力和温度的改变而在相当宽的范围内变动，利用这种SCF作溶剂，可以从多种液态或固态混合物中萃取出待分离组分。常用的SCF为CO。，因为CO。无毒，不易燃易爆，价廉，有较低的临界压力和温度，易于安全地从混合物中分离出来。超临界CO。萃取法与传统提取方法相比，最大的优点是可以在近常温的条件下提取分离，几乎保留产品中全部有效成分，无有机溶剂残留，产品纯度高，操作简单，节能。 廖周坤等用不同浓度的乙醇作夹带剂，对藏药雪灵芝进行了总皂苷粗品及多糖的苹取试验，与传统溶剂萃取工艺相比较，收率分别提高至旧．9倍和 1．62倍。何春茂、梁忠云利用超临界CO。卒取技术从黄花蒿中革取所得的萃取物中杂质（蜡状物）含量低，青蒿素提纯精制简单，收率高产品质量好。雷正杰等利用超临界CO。流体萃取技术，对厚朴的有效成分进行萃取和分离，革取物为淡黄色膏状物，经分析该萃取物由厚朴酚等11个化学成分组成，其中厚朴酚和厚朴酚的相对含量高达46．81％和45．00％。葛发欢等探讨了从黄山药中萃取薯预皂素的最佳条件，同时进行了中试放大，证明应用超临界CO。萃取薯预皂素进行工业化生产是可行的，与传统的汽油法相比较，收率提高15倍，生产周期大大缩短，避免使用汽油有易燃易爆的危险。葛发欢等研究了超临界CO。萃取柴胡挥发油和皂苷的工艺，STh－CO。法提取柴胡挥发油，与传统水蒸气蒸馏法相比较，能大大提高收率，缩短提取时间，而挥发油组成一致，只是各成分含量有差异。原永芳等通过五因素一四水平正交试 验法，用超临界流体萃取技术对川穹的挥发油萃取条件进行了优化选择，结果最佳萃取条件为压力34．smPa，温度60℃，改性剂乙醇0．3ml，静态苹取时间10min，动态萃取量10ml，以水作为吸收。与水蒸气蒸馏法相比较，该法具有耗时少，提取安全等优点。 SCFE技术对于提取分离挥发性成分、脂溶性物质、高热敏性物质以及贵重药材的有效成分显示出独特的优点，但SCFE设备属高压设备，一次性投资较大，运行成本高，因此这一技术目前在工业生产中还难以普及。 2. 超声提取技术 超声提取技术的基本原理主要是利用超声波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外超声波的次级效应，如机械振动、乳化、扩散。击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合，利于提取。与常规提取法相比，具有提取时间短、产率高、
中药提取车间设计的几点体会 中药提取是中成药生产过程中很重要的一环,它直接影响成品制剂的产量和质量。提取车间的设计除了应当满足现代药品生产的需要外,还应考虑中药所具有的特殊性。提取车间设计的优劣,对整个中药制药厂的生产至关重要。本文从植物药材的提取生产工艺及提取车间特点出发浅谈对中药提取车间设计的几点体会。 1正确的设计构思及规划在提取车间设计前,首先应确定其在厂区总平面中的位置。在总体布局上,应将提取车间原料进口靠近前处理车间,浸膏和半成品出口靠近制剂车间,出渣间门前应留有货流通道,中药提取车间的设计,要根据其投资的多少,来进行综合考虑。设计程序依次为:设计准备、厂区总平面设计、生产工艺的选择与方框流程图的确定、物料衡算、能量计算、生产工艺流程设计、设备设计与选型、设备平面与立面布置设计、非工艺设计、设计说明书编制、概(预)算书编制等[1]。由于许多中药提取是多品种、小批量的生产,而且缺乏提取实验研究报告以及物料、工艺参数,在设计方面存在着许多困难。在当前条件下可以参照以上设计程序,根据中药提取生产的许多共同点及国产提取设备的特点,做能适应当前生产的较粗放设计。中药提取生产包括中药的提取,提取液的分离、纯化、浓缩、干燥等工艺过程,向外散发水、酒精等溶媒蒸汽,影响周围环境,因此,在总图设计时将其尽可能布置在制剂车间的下风向。并且车间有大量的药材运进,又有大量的药渣运出,故将其尽量靠近厂区物流出入口,最好专门设置药渣的运出口。 2提取车间的总体布置提取车间布置要满足GMP规范要求,车间人流物流应满足总图对人流物流的要求,还要满足消防、环保、职业安全卫生的要求,同时要尽量减轻劳动强度。 车间布置应遵循一般工业厂房的布置原则,还要处理好以下问题: (1)提取车间一般有醇提和醇沉,应考虑车间的防爆;(2)提取车间产热产湿岗位较多,应考虑车间排热排湿;(3)提取车间运输量较大,应考虑减轻劳动强度;(4)浓缩液的后处理工艺。由
猪皮里的胶原蛋白一周吃几次猪皮是很多人都喜欢吃的一种东西，特别是喜欢弄成猪皮冻或者其他的一些猪皮制作的食物。主要是猪皮里面还有很多胶原蛋白，对于人体来说很有帮助，特别是对于女性的美容来说有着极好的效果。但每个人都知道，不管再好的东西都要有一个量。其他的猪皮会对身体产生一定的负担，那么猪皮里的胶原蛋白一周吃几次是最好的了。 胶原蛋白实际上是多种氨基酸组成的。猪皮和人体皮肤的氨基酸模式大致接近，不过，猪皮虽然富含胶原蛋白，但也是合成后的胶原蛋白大分子，并不能被人体直接吸收。即使服用了，最终还是被分解成各种氨基酸。 这样看来，直接吃猪皮补充胶原蛋白的想法还是太过单纯了。而且，猪皮脂肪含量很高，对于易胖体质的姑娘来说可能不是很好的选择，这类食物还有鸡皮、鱼皮、蹄筋等。 那么，应该如何有效补充人体所需的胶原蛋白呢? 1.补充优质蛋白。不能执着于某种看似富含蛋白实际只是富含胶质的食物，要补充优质蛋白的话，鱼、蛋、奶、豆等已经足够提供人体所需了。 例如，鱼类当中补充胶原蛋白效果最佳的首推金枪鱼和鲑鱼，它们可以很好的防止蛋白质流失，为弹性皮肤提供足够支撑。而各种豆制品，如豆腐、豆皮等则可以加速胶原蛋白合成，还能抑制对皮肤不利的酶的活性，延缓皮肤衰老的速度。
2.多补充维生素C，以促进其他生物酶的辅酶活性，进而使人体皮肤有光泽、有弹性，而补充维生素C首选就是蔬菜和水果了。 蔬菜当中推荐甘蓝、菠菜等富含维生素C的绿色蔬菜，维生素C的抗氧化作用可以稳定酶的活性，防止胶原蛋白遭到破坏。而胡萝卜、番薯等根茎类蔬菜所富含的维生素A可以修复受损的胶原蛋白。另外，一些含有番茄红素的蔬菜，如红椒、番茄等，也能提升皮肤中的胶原蛋白。 3.最后推荐一款比较冷门的胶原蛋白：白茶。白茶对于保护皮肤中的胶原蛋白有较好的效果。 人体皮肤的胶原蛋白随着年龄的增长而流失是一件非常正常的事情，不必有过大的负担，合理饮食，规律作息，保持充足的精力和愉悦的心情，抗皱的效果比市面上一些打着“蛋白质分子”噱头的产品更有效，更健康。
羊软骨Ⅱ型胶原蛋白的提取纯化与鉴定 作者：肖旭，石文达，姚青，陈虎，王基云，李晓兵，高岭 【摘要】目的从羊肋软骨中提取纯化Ⅱ型胶原蛋白，并对其进行鉴定。方法选择羊肋软骨为原料经脱脂、脱钙后，用盐酸胍去除蛋白多糖，经胃蛋白酶消化、氯化钠盐析等步骤，提取纯化蛋白，然后进行鉴定。结果 4mol/L盐酸胍能有效去除蛋白多糖，用胃蛋白酶的限制性酶解结果满意；氯化钠盐析浓度为3mol/L时最佳。SDS-PAGE 电泳结果显示提取纯化的蛋白与Sigma公司的Ⅱ型胶原蛋白一致。Ⅱ型胶原蛋白最大吸收峰为212 nm。结论从羊肋软骨提取的Ⅱ型胶原蛋白纯度高，且符合II型胶原蛋白的特征。 【关键词】Ⅱ型胶原蛋白；软骨；蛋白多糖 Abstract: Objective To isolate and purify collagen type Ⅱ(CⅡ) from Sheep cartilage and to identify its purity. Methods The Sheep cartilages were collected as raw materials. After degreasing and decalcification, Guanidine hydrochloride was used to remove the proteoglycans. The digestion of pepsin, salting of sodium chloride were performed for extracting CⅡand identification. Results The proteoglycans could be efficiently removed by 4mol?L 1 guanidine hydrochloride. The results were obtained by limited enzyme digestion of pepsin added. The optimizing concentration of sodium chloride for salting CⅡwas 3mol?L 1. It was found that the protein and Sigma
科研训练论文(文献综述) （ 题目：土霉素生产车间提炼工段工艺设计学生姓名：宋世骏 学号：201220515013 学院：化工学院 班级：制药工程专业（2）班 2015年12月
土霉素生产车间提炼工段工艺设计 宋世骏指导教师：陈秋月 内蒙古工业大学化工学院，呼和浩特，010051 摘要： 土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称（Oxytetracycline），土霉素属四环素类抗生素，为广谱抑菌剂，许多立克次体属、支原体属、衣原体属、螺旋体对本品敏感。肠球菌属对其耐药。其他如放线菌属、炭疽杆菌、单核细胞增多性李斯特菌、梭状芽孢杆菌、奴卡菌属、弧菌、布鲁菌属、弯曲杆菌、耶尔森菌等对本品亦较敏感。土霉素是一种广谱类抗生素，有一定副作用，多年来由于土霉素和四环素类的广泛应用,临床常见病原菌对土霉素素耐药现象严重，包括葡萄球菌等革兰阳性菌及多数革兰阴性杆菌。目前，中国已成为世界上最大的土霉素生产国，尤其对畜用土霉素需求很大。到目前为止，提纯土霉素的方法有很多，在生产工艺中通过酸化、脱色、结晶、重结晶以及应用超滤-纳滤技术都可得到纯度较高的土霉素产品。本次设计为1600t/a土霉素提炼工段工艺设计；本文主要讲述土霉素在工厂车间里生产的过程，着重讲述提炼工段的土霉素工艺设计，以及对各类提炼方法的对比及应用。 关键词： 抗生素；生产工艺；物料流程；提炼 引言： （一）土霉素简介 1、中文名称：土霉素[1]
2、英文名称：Oxytetracycline 3、分子式：C22H24N2O9 4、分子量：460.43 5、结构式： 6、外观性状 土霉素又名氧四环素，为灰白色至黄色的结晶粉末，无臭，味苦，熔点是180℃，在日光下颜色变暗在碱性溶液中易破坏失效。土霉素盐酸盐为黄色结晶，味苦，熔点190～194℃，有吸湿性，但水分和光线不影响其效价，在室温下长期保存不变质，不失效。盐酸盐易溶于水，溶于甲醇，微溶于无水乙醇，不溶于三氯甲烷和乙醚，在酸性条件下不稳定。 （二）土霉素生产与提炼 土霉素生产由发酵工段、酸化过滤、脱色结晶、离心干燥工段工艺组成，因为在土霉素发酵过程中产生大部分有机副产物，如色素、蛋白质等，所以需要对土霉素发酵液进行处理。到目前为止，提纯土霉素的方法有很多，在生产工艺中通过酸化、脱色、结晶、重结晶以及应用超滤-纳滤技术都可得到纯度较高的土霉素产品。土霉素原料药用药广泛，而且价格低廉，因此大量用于畜禽药以及饲料添加剂。为了制备高纯度的土霉素，我们需要研究高纯度土霉素碱[2]的生产工艺。把粗品土霉素碱用盐酸溶解后,加入黄血盐-硫酸锌进一步去除杂质,然后通过超滤去除热原及其他高分子杂质,最后调pH值重结晶得到高纯度的符合注射用标准的土霉素碱产品。在发达国家土霉素基本不再使用，即便是畜牧业也用的是高纯度无菌土霉素。所以我所研究的课题——土霉素车间提炼工段工艺设计变得尤为重要。 1、土霉素常用提纯方法 土霉素是龟裂链丝菌通过发酵合成的广谱抗生素，在发酵过程中,所产生的
开题报告 食品质量与安全 酶解法提取牛皮胶原蛋白的条件优化 一、选题的背景与意义 胶原蛋白，主要存在于动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腱、韧带和血管中，是结缔组织极重要的结构蛋白。由于胶原蛋白具有良好的物理性能和生物学特性，因而其被广泛的应用于化工、食品、医学、生物材料以及农业等诸多领域。因此，胶原蛋白的提取一直是研究的热点。 目前国际上已开发出许多胶原保健品和功能性胶原生物材料。相对于我国，其在胶原蛋白的基础研究上已经具有一些优势并拥有一定的国际专利，而且部分已经投入市场，形成一定的市场规模。而我国的高质量胶原蛋白基础研究还有差距，有关这方面的核心专利技术不多。 但就目前的消费趋势来看，我国胶原蛋白的需求量逐渐增加，特别是随着人们对饮食和健康的不断重视，因此市场前景较为关阔。另一方面在肉制品和制革加工过程中含有丰富胶原物质的副产物（皮、内脏、肉骨头）利用的附加值很低。这样既浪费资源又污染环境，利用这些废弃物生成胶原蛋白实现资源的合理和有价值的利用，实现经济和社会效益的双赢。 本实验的以牛肉制品的下脚料——牛皮为原料，利用酶解法提取胶原蛋白，同时通过试验条件的优化，得到较优的提取条件，为今后的进一步研究提供参考。 二、研究的基本内容与拟解决的主要问题： 基本内容： 1、对牛皮成分的测定：主要测其水分、脂肪、粗蛋白、胶原蛋白等。 2、酶制剂的选择和复合：选择两种胶原蛋白提取率比较高的酶，然后按一定比例进行 复合试验。 3、研究不同实验条件对胶原蛋白提取率的影响：通过对加酶量、水解pH、水解温度、 水解时间、固液比等因素进行单因素试验，并在此基础上进行正交试验得出优化的 工艺条件。 拟解决的问题： 1、如何选择合适的比例对两种单酶进行复合。 2、如何提高胶原蛋白的提取率。
用酶法从虎杖中提取白藜芦醇的工艺流程图 45—50℃, PH4.8±0.2,沿壁缓慢 加入HCl调节PH值,轻轻搅拌 加复合酶增加收率原因：一是植物细胞壁被破坏，使内容物溶出率增加；二是白藜芦醇苷在复合酶的作用下被转化成白藜芦醇。 可用复合酶SPE—002、SPE—007醇提前和醇提后的酶解结果与单独进行乙醇提取得率进行比较。
从茶叶中提取茶多酚 过滤 提取物 酶提法优点： ○1可以软化植物细胞壁，使有效成分最大限度溶出，提高收率；对茶叶进行复合酶法提取, 茶多酚提取率可达98 %以上; 酶解法提取的茶多酚中儿茶素相对含量较沸水提取的高出9 %～10 %。○2酶法提取茶多酚及多糖具有提取率高, 且茶多酚的主要活性成分———儿茶素氧化损失少, 原料茶叶不需粉碎○3节省时间，降低成本；
酶法提取红景天有效成分的工艺流程图 1、酶提法 红景天 SPE —001或007 提取物〈 2、醇提法（略） 3、水提法（略） 酶提法优点： ○1可以使植物细胞壁破裂，使有效成分最大限度溶出，提高收率； ○ 2可替代水提醇沉工艺，节省时间，降低成本； ○ 3可降解红景天中的氨基酸、多肽、多糖、易于滤过。 每次分别为3、2、1小时 粉碎
1、酶提法 菊花 SPE — 007 提取物 2、醇提法（略） 3、水提法（略） 酶提法、醇提法与水提法进行比较 SPE-007：主要用于破除植物细胞壁，使有效成分最大限度溶出。SPE-006：主要用于提取液的沉清，加快滤过速度，降低成本。 加7倍量水 60℃水浸泡30min 40℃温水，PH ：4.8 活化5—10min 1∶10倍量水溶解酶 用水煎煮3h 温度降至45-52℃，PH ：3.5—4.5,时间1.5h 提取液 用SPE-006（干物 质重量）的40ppm
毕业论文外文资料翻译 学院：生物科学与工程学院 专业：生物工程 姓名：李秀莉 学号：120302214 外文出处：Food Chemistry 190(2016) 186-193 附件： 1.外文资料翻译译文；2.外文原文。
附件1：外文资料翻译译文 响应面优化蛋壳膜中胃蛋白酶溶性胶原蛋白提取工艺关键词： 蛋壳膜、响应面优化法、胃蛋白酶溶性胶原蛋白 摘要： 本文利用响应面优化法（RSM）确定了自变量对蛋壳膜中胃蛋白酶溶性胶原蛋白（PSC）提取产率的影响。采用中心复合设计（CCD）的实验设计和结果分析方法，选取最有可能的条件范围进行了优化实验：NaOH浓度（X1：0.4-1.2mol/L）,碱处理时间（X2：6-30h），酶浓度（X3：15-75U/mg）以及水解时间（X4：12-60h）。实验数据用适当的统计学方法通过多元线性回归分析得到一个二阶多项式方程，分析表明最佳提取条件为：NaOH浓度为0.76mol/L，碱处理时间为18h，酶浓度为50U/mg，水解时间为43.42h。在最佳提取条件下的提取率实验值是30.049%，这与预测值30.054%高度一致。 1.前言 胶原蛋白是脊椎动物的主要结构蛋白，大约占一个动物总蛋白的30%（Muyonga, Cole, & Duodo, 2004)。胶原蛋白的分子结构由三个多肽α-链扭曲在一起形成的一个三股螺旋体。在所有胶原蛋白的“胶原域”都发现了(Gly-X-Y)n重复。X和Y的位置往往分别被脯氨酸和羟脯氨酸占用（Gelse, Poschl, & Aigener, 2003）。目前，至少已有27中胶原蛋白类型已确定，其氨基酸序列、分子结构和功能明显不同（Canty & Kadler, 2005; Cheng, Hsu, Chang, Lin, & Sakata, 2009）。胶原蛋白已被广泛用作医药、化妆品、生物医学和食品行业的材料（Cheng et al.,2009）。一般来说，工业应用的胶原蛋白的主要来源是牛与猪的皮肤和骨头。然而，阮病毒疾病的爆发，如海绵脑病（BSE），传染性海绵脑病（TSE）和口蹄疫（FMD），以及禽流感，导致一些消费者对从这些动物体提取的胶原蛋白和胶原蛋白产品的担忧。此外，以猪为原料提取胶原蛋白不能被犹太人和穆斯林接收（Liu, Liang, Regenstein, & Zhou, 2012; Regenstein & Zhou, 2007）。因此，全球对胶原蛋白的代替原料的需求增加了，如水生动物。但是，关于胶原蛋白提取的其他来源的信息是有限的。 蛋壳作为副产品大约占了一个鸡蛋总重量（60g）的10%（Nys, Bain, & Immerseel, 2011）。据估计每年在伊朗蛋制品工业都产生100000吨的蛋壳。蛋壳膜存在于白色液体和固体蛋壳内表面之间。胶原蛋白占蛋壳膜总蛋白含量的10%（MacNeil, 2006）。在蛋
黄酮提取工艺设计思路 1、黄酮类化合物含量测定的原理 在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成螯合物，加入氢氧化钠溶液后显红橙色。黄酮类化合物能与金属离子络合产生有色反应，于波长510nm附近有吸收，可用分光光度法进行测定。实验采用在碱性条件下，亚硝酸盐存在时，硝酸铝与黄酮形成红色络合物，在波长510nm附近有吸收可进行比色分析。 在中性或弱碱性及硝酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成鳌合物，加入氢氧化钠溶液后显红橙色，硝酸钠还原黄酮，加硝酸铝络合，加氢氧化钠使黄酮类化合物开环，生成2’-OH查耳酮而显色。 利用黄酮类化合物中的3－羟基、4－羟基、5－羟基、4－羰基或邻二位酚羟基，与Al3＋进行络合反应，在碱性条件下生成红色络合物的原理测定其含量 2、测定波长的确定 取样品溶液和标准溶液2mL，加70 %的乙醇至5 mL, 然后加入5 %的NaNO2 溶液1 mL, 室温放置6min, 再加入10 %的Al(NO3)3 1mL, 混匀, 室温放置6 min, 加入4%的NaOH 10mL, 用水稀释至25 mL,混匀, 放置15 min, 在分光光度计上扫描波长从400 nm～600 nm 之间的吸收度, 结果在510nm 波长处有最大吸收值。 配合物在Kmax1= 354nm 及Kmax2= 510nm有两个吸收峰, 经实验后得出Kmax1= 354nm波长处得到的工作曲线线性关系及精密度数据均不佳, 故本实验选取Kmax2= 510 nm为测定波长。 3、标准溶液的配制 精确称取105℃干燥恒重芦丁对照品50mg, 加乙醇适量, 使之充分溶解, 用乙醇定容到100mL, 摇匀, 制得芦丁溶液。精确量取芦丁溶液20mL, 置于50mL容量瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀, 即得对照品溶液。每1mL溶液含芦丁对照品0.2mg。或精密称取干燥至恒重的芦丁标准品10mg, 置50mL容量瓶中, 加无水乙醇20mL, 轻摇使充分溶解,定容, 摇匀, 得0. 2mg /mL芦丁标准液。 精确称取芦丁标准品5mg，用70%乙醇溶解，于50 mL容量瓶中定容，即得每1mL溶液含芦丁对照品0.1mg芦丁标准品溶液。 称取约20mg芦丁标准品于称量瓶中置105℃烘箱下烘干至恒重,干燥器中冷却，精确称