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二 〇 一二 年 三 月
科研训练论文(文献综述) 题 目：土霉素提纯方法概述 学生姓名： 学 号： 班 级：
土霉素提纯方法概述
摘要：土霉素是通过生物合成得到的广谱抗生素，有广谱抑菌作用，目前主要应用于兽医临床。本文在查阅了关于土霉素的生产方法、土霉素的提取方法、土霉素的脱色结晶、重结晶以及膜分离技术的应用等提纯方法，比较和归纳了提高土霉素纯度方法的优缺点。
关键词：土霉素；提纯；重结晶；膜分离技术
土霉素是抗生素类药物，具有广谱抗菌作用，主要用于立克次体病支原体肺炎，衣原体感染。土霉素已应用于兽医临床，使一些动物的传染病得到了控制。土霉素还可以治疗鸡、鸭、鹅的巴氏杆菌病等。在食品工业中，土霉素可用作防腐剂来保藏肉类、鲜菜类等。土霉素是由龟裂链丝菌产生的，属于放线菌中的链霉菌属，是通过生物合成得到的广谱抗生素。土霉素生产由发酵工段、酸化过滤、脱色结晶、离心干燥工段工艺组成，因为在土霉素发酵过程中产生大部分有机副产物，如色素、蛋白质等，所以需要对土霉素发酵液进行处理。到目前为止，提纯土霉素的方法有很多，在生产工艺中通过酸化、脱色、结晶、重结晶以及应用超滤-纳滤技术都可得到纯度较高的土霉素产品。
一、土霉素常用提纯方法
土霉素是通过生物合成得到的广谱抗生素，目前国内土霉素提取工艺常用草酸(或磷酸)做酸化剂调节pH值，利用黄血盐-硫酸锌作净
化剂协同去除蛋白质等高分子杂质,然后用122树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调pH至4.8左右结晶得到土霉素碱产品]1[。此工艺在生产中一直沿用至今，产品的收率偏低，纯度仅为96%-97%。因此如何提高土霉素质量，是一些土霉素生产厂面临的新课题。注射用土霉素碱对纯度和热原有更高的要求。
土霉素能和钙、镁等金属离子形成复合物沉淀。在发酵过程中，这些复合物积聚在菌丝中使得土霉素在发酵液中的浓度并不高。发酵结束后，土霉素大部分沉积在菌丝中，发酵液中很少。因此，必须对土霉素发酵液进行酸化处理，酸化将破坏细菌细胞壁结构，使菌丝中的单位释放出来，以保证产品收率和质量。由于土霉素滤液中有钙离子存在，则必须考虑加入酸化剂后形成的不溶性钙盐的沉淀程度，酸化剂一般可采用盐酸、硫酸、草酸、磷酸等，采用草酸不仅能使土霉素释放出来并生成溶于水的盐, 并且能析出草酸钙沉淀, 从而去除发酵液中的钙离子, 同时草酸钙能促进蛋白质的凝结, 从而提高滤液的质量]2[。草酸属于弱酸，比盐酸、硫酸等对设备腐蚀性较小,因此草酸是合适的酸化剂。然而草酸价格昂贵，因此在有条件的情况下应进行草酸回收工作，同时采用草酸结合盐酸做为酸化剂。在采用草酸作酸化剂时，最好低温操作，尽量缩短操作时间，避免或减少土霉素结构发生改变。发酵液中同时存在着许多有机和无机的杂质，目前生产上是利用纯化剂黄血盐和硫酸锌的协同作用来去除杂蛋白，同时去除铁离子，并加入硼砂，以提高滤液质量。在不影响滤液质量的前提下,纯化剂的加入量应尽量减少，以降低成本。过滤土霉素酸化液
也可以除去一些杂质。过滤所得的土霉素液含色素高，结晶产品质量差，因此需要脱色。脱色液到达结晶罐后，经过加碱化剂来调节适当的pH，进行结晶离心除去部分杂质。通常用的碱化剂是氨水。
但由于在发酵液中含有一些性质与土霉素接近的副产物和其它杂质, 土霉素在酸性水溶液中又会分解成一些在性质上与其类似的降解产物，因而由水溶液中结晶出来的土霉素,纯度往往不高, 含有不少杂质]3[。为了保证土霉素的疗效, 减少不良反应, 目前国家药典已对土霉素的质量规定了更高的要求。
二、改进结晶工艺提纯法
在土霉素常用提纯方法的基础上，可以将土霉素再次用酸溶解，加净化剂净化，然后重结晶进一步提高土霉素的纯度。也可以通过控制土霉素生产工艺条件提高土霉素纯度。
随着发酵效价的不断提高，连续结晶设备生产能力逐渐显现不足，而养晶时间偏短，已成为影响土霉素晶型和土霉素纯度的重要因素。为了在较短结晶时间得到较为粗壮的晶体，通过研究结晶过程中影响晶型的各种因素，改进了发酵液预处理、结晶工艺。采用控制酸化PH 值，调整净化剂加量，提高结晶温度等措施，系统地对土霉素产品晶型进行了试验研究，缩短了结晶时间，提高结晶设备的利用率。
试验结果表明，在控制发酵液酸化pH 值1.95-2.05、黄血盐钠加量0.3%、黄血盐钠和硫酸锌配比3：2、结晶温度等条件，找到了一个较为适宜的发酵液预处理和结晶工艺，在结晶时间仅为47min的情况下，可明显改善土霉素晶型，使晶体粒度分布均匀，产品内在质
量得到进一步提高]4[。该工艺不仅使土霉素产品晶型得到改善外，而且其内在质量也得到了明显提高，特别是杂质含量明显降低，产品纯度明显得到提高。
三、膜分离技术分离提纯土霉素
上述一般提纯土霉素方法可以在一定程度上纯化土霉素，例如去除有机大分子杂质、色素等，但是有一些小分子杂质对土霉素的质量有着很大影响，应用膜分离技术可以更好的提纯土霉素。
膜分离技术是本世纪六十年代发展起来的新兴分离技术。研究与应用事实表明，膜分离技术在简化发酵生产工艺，提高产品质量、开发新产品和综合利用等方面都显示了巨大的优越性]5[。
目前，利用发酵液生产药物的提炼工艺主要有溶媒法和树脂吸附法。其中溶媒法主要是利用药物的酸、碱性特征及在不同的pH条件下能溶解在不同的溶剂中的特性，采用合适的溶媒在水溶液中反复萃取以达到提纯和浓缩的目的。而树脂吸附法主要通过树脂对药物的选择性吸附实现分离浓缩。然而，药物发酵液中绝大部分是菌丝体、未用完的培养基以及各种代谢产物，药物的浓度远较各种杂质低，一般在5％以下。大量可溶性蛋白的存在导致溶媒萃取时将产生严重的乳化现象或影响树脂的吸附容量及树脂寿命。因此，通常需加入电解质水解使蛋白质絮凝沉淀，然后通过板框压滤或鼓式真空过滤的方法把菌丝、絮凝蛋白及其他各种本质加以剔除。这一预处理与过滤将导致5％一10％的药物损失，而且会对后续工艺造成影响。经过多年的试验研究发现膜分离技术在提纯土霉素工艺上有很大的优势]6[。
（一）超滤法的应用
在土霉素常用的酸化过滤、脱色结晶提纯方法的基础上，进一步研究了超滤在土霉素纯化中的应用。
土霉素的生产包括酸化、过滤、脱色和结晶等步骤, 多年来土霉素的提纯技术一直没有大的改变。常用的树脂脱色过程成本高, 收率低, 还因树脂再生产生酸、碱废水而增加污水处理费用。
本研究试用超滤取代树脂脱色单元操作以克服其上述缺点。在实验中使用了切割分子量为4960.5u的超滤膜, 实验结果表明超滤是取代树脂脱色的有效手段, 可以充分纯化土霉素结晶液并改善结晶, 脱色过程收率由树脂法的95.3%提高到98.6%。如果超滤与净化剂预处理相结合, 可以提高土霉素质量, 并使土霉素结晶收率由90.58%提高到93.3%]7[。
土霉素的另一种纯化方法是采用酸碱法进行重结晶，其中加净化剂和膜过滤进行纯化的方法。其特征就在于它是先将土霉素溶解在含有盐酸和另外一种在pH2.8-4.0有缓冲作用的酸的混合水溶液中，用碱回调至一定pH值，加入净化剂，而后分别用5-10万分子量超滤膜和6000-10000分子量超滤膜过滤，最后按无菌操作要求经稀释加碱调节pH值结晶，经分离干燥得纯度较高的成品]8[。
本方法利用了土霉素两性化合物的特性，加酸是为了使土霉素充分的溶解以及在结晶时获得较好的晶型。加碱回调使PH接近其等电点而结晶。其中超滤是公认的去除热原比较理想的方法,同时还可去除在滤液中呈分散状态的“溶解性”大分子杂质,进一步纯化滤液。
因此,我们将粗土霉素碱酸溶,加净化剂净化,经超滤去除热原及杂质,然后重结晶获得高纯度土霉素产品。
（二）超滤-纳滤联合技术在土霉素提取中的应用
本方法将膜分离技术应用于土霉素的生产过程中，分别研究了超滤、纳滤及超滤-纳滤组合工艺，研究开发出土霉素的清洁生产新工艺。通过超滤和纳滤筛选试验，选出了对土霉素分离性能较好的超滤膜和纳滤膜，并确定了其操作工艺参数。结果表明，采用膜分离工艺可以减少土霉素在提取工艺中的损失，提高结晶收率，降低杂质吸光度，并改善废水的可生化性]9[。该论文用详细的实验数据论证了超滤纳滤组合工艺的提纯效果最好，获得的土霉素产品纯度最高。在超滤一纳滤连续性实验中，进一步验证了对土霉素的分离提纯膜分离技术比原树脂脱色效果好。
（三）超滤-反渗透提纯法
土霉素属四环素类抗生素，废水主要来自分离四环素晶体后的结晶母液，土霉素结晶母液中土霉素浓度为1000—1500u／ml，直接用生物降解很困难。李十中等]10[把土霉素结晶母液经超滤膜预处理后，通过反渗透膜处理所得的浓缩液，再经超滤膜处理后，15％氨水调pH值从土霉素结晶母液回收土霉素，得到的土霉素纯度82.9％，效价77lu／mg，回收率62%。
四、结论
经过查阅关于土霉素提纯方法的文献资料，了解了在土霉素生产工艺中，在酸化过滤工段中选取酸化剂和纯化剂是非常重要，主要采
用盐酸和草酸做酸化剂，同时利用纯化剂黄血盐和硫酸锌的协同作用来除去杂质，采用改进结晶工艺提纯土霉素，并且采用酸碱法进行重结晶纯化土霉素。目前膜分离技术应用在土霉素生产工艺上进一步提高了土霉素产品的纯度。文献中经过多次试验比较超滤、纳滤、超滤纳滤组合工艺以及反渗透工艺提纯土霉素的能力，结果表明超滤纳滤组合工艺可以更好的提纯土霉素。也可以通过筛选优质菌种从土霉素发酵源头开始控制土霉素的质量。土霉素生产中大多采用一般的纯化工艺，改进的工艺一般是采用超滤膜分离技术过滤获得高纯度的土霉素。
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摘要 土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称（Terramycin Oxytetracycline)属于抗菌素的一种，对多种球菌和杆菌有抗菌作用，对立克次体和阿米巴病原虫也有抑制作用，用来治疗上呼吸道感染﹑胃肠道感染﹑斑疹伤寒等，现今主要用于畜禽药及饲料添加剂。土霉素对多数革兰氏阳性菌(如肺炎球菌，溶血性链球菌，草绿色链球菌以及部分葡萄糖球菌，炭疽杆菌)和革兰氏阴性菌(如大肠杆菌，产气杆菌，破伤风，肺炎杆菌，流感杆菌，百日咳杆菌等)均有抗菌作用。临床上主要用于肺炎、败血症、斑疹、伤寒、淋巴肉芽肿、沙眼及其他细菌性感染等。对伤寒有效，也可用于阿米巴痢疾和阴道滴虫病患者。此外还能抑制立克次体和沙眼病毒及淋巴肉芽肿病毒。 土霉素是一种四环类广谱抗生素，有一定副作用。目前，中国已成为世界上最大的土霉素生产国，占70%。目前我国畜用土霉素需求量很大。本次设计为生产规模500吨/年的土霉素车间。土霉素是微生物发酵产物，目前国内土霉素提取工艺为用草酸(或磷酸)做酸化剂调节pH值,利用黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子杂质,然后用122#树脂脱色进一步净化土霉素滤液,最后调pH至4.8左右结晶得到土霉素碱产品。本次设计也按照这个工艺流程，分为三级发酵、酸化、过滤、脱色、结晶、干燥等。
引言 土霉素属四环素类抗生素，为广谱抑菌剂，许多立克次体属、支原体属、衣原体属、螺旋体对本品敏感。肠球菌属对其耐药。其他如放线菌属、炭疽杆菌、单核细胞增多性李斯特菌、梭状芽孢杆菌、奴卡菌属、弧菌、布鲁菌属、弯曲杆菌、耶尔森菌等对本品亦较敏感。多年来由于土霉素和四环素类的广泛应用,临床常见病原菌对土霉素素耐药现象严重，包括葡萄球菌等革兰阳性菌及多数革兰阴性杆菌。本品与四环素类抗生素的不同品种之间存在交叉耐药。本品作用机制为药物能特异性与细菌核糖体30S亚基的A位置结合，抑制肽链的增长和影响细菌蛋白质的合成。 土霉素原料药在市场竞争中的最大优势是价格低廉，因此，多年来它大量用于畜禽药及饲料添加剂。在众多抗生素品种中，价格最低的土霉素今后将会在我国被广泛运用，现如今主要生产企业主要是赤峰制药、石家庄华署制药、山西星火制药等，产量约占世界的25%，随着产量不断下降，土霉素出口价格也随之降低。在国内市场，土霉素除了作为上产强力霉素的原料外，主要用于禽兽药物以及饲料添加剂、临床用药微乎其微。在发达国家，土霉素基本不再使用，发达国家畜牧业中用的也是纯度高无菌土霉素。我国生产的土霉素大多为抵挡产品，因此对土霉素工艺的研究与创新凸显重要。 本设计为年产500t/a土霉素生产车间提炼工段工艺设计。通过查阅资料，大量的计算，设计出一条满足市场需求，满足客户需求，经济适用的工艺路线。
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蛋白表达纯化实验步骤(待改进) 1、取适当相应蛋白高表达的动物组织提total-RNA。 2、设计蛋白表达引物。引物要去除信号肽,要加上适当的酶切位点和保护碱基。 3、RT-PCR,KOD酶扩增获取目的基因c DNA. 4、双酶切,将cDNA.克隆入PET28/32等表达载体。 5、转化到DH5α感受态细菌中扩增,提质粒。 6、将质粒转化入表达菌株,挑菌检测并保种。表达菌株如Bl21(DE3)、Rosetta gami(DE3)、Bl21 codon(DE3)等。 7、蛋白的诱导表达。 1)将表达菌株在3ml LB培养基中摇至OD=0.6左右,加入IPTG,浓度梯度从25μM 到1m M。37度诱导过夜(一般3h以上即有大量表达)。 2)SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达。注:目的蛋白包涵体表达量一般会达到菌体 蛋白的50%以上,在胶上可以看到明显的粗大的条带。 3)将有表达的菌株10%甘油保种,保存1ml左右就足够了,并记录IPTG浓度范围。 甘油是用0.22μm过滤除菌的,储存浓度一般是30%-60%,使用时自己计算用量。 4)用上述IPTG浓度范围的最低值诱导10ml表达菌,18度,低转速(140-180rpm), 诱导过夜作为包涵体检测样品。 注意:1.如果表达的蛋白对菌体有毒性,可以在加IPTG之前的培养基中加入1%的葡萄糖用来抑制本底表达。葡萄糖会随着细菌的繁殖消耗殆尽,不会影响后面的表达。2. 保种可以取一部分分成50μl一管,每次用一管,避免反复冻融。 8、包涵体检测。方案见附件2 9、如有上清表达,则扩大摇菌。 1)取保种的表达菌株先摇10ml,37度,300rpm摇至OD>=1.5,约5h左右,视菌种
土霉素生产工艺 摘要：目的：土霉素生产工艺的概述。 方法：土霉素提取工艺是通过黄血盐-硫酸锌作净化剂协同去除蛋白质等高分子杂质，然后用树脂脱色进一步净化土霉素滤液，最后调pH至4.8左右结晶得到土霉素碱产品。 关键词：生产工艺；土霉素；黄血盐-硫酸锌 1 土霉素概述 土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称（Terramycin Oxytetracycline)属于抗菌素的一种，对多种球菌和杆菌有抗菌作用，对立克次体和阿米巴病原虫也有抑制作用，用来治疗上呼吸道感染﹑胃肠道感染﹑斑疹伤寒等，现今主要用于畜禽药及饲料添加剂。土霉素是一个典型的利用生物工程技术生产的产品，生产工艺涉及种子培养、发酵、提取、过滤、脱色、结晶、离心和干燥等重要的单元操作和工程概念。 1.1 土霉素简介 1.1.1 名称与化学结构式 中文名：土霉素 英文名：OXYtetracycline 化学名：(4s,4аR，5S，5аR，6S，12аS）-N-4-二甲胺基-1，4，4а，5，5а，6，11，12а-八氢，5, 6，10，12，12а- 六羟基-6-甲基-1，11-二氧代并四苯-2-甲酰胺。 分子式：C22H24N2O9 相对分子质量：460.58 1.1.2 性状与理化性质[1] 土霉素又名氧四环素，为灰白色至黄色的结晶粉末，无臭，味苦，熔点是
180℃，在日光下颜色变暗在碱性溶液中易破坏失效。土霉素盐酸盐为黄色结晶，味苦，熔点190～194℃，有吸湿性，但水分和光线不影响其效价，在室温下长期保存不变质，不失效。盐酸盐易溶于水，溶于甲醇，微溶于无水乙醇，不溶于三氯甲烷和乙醚，在酸性条件下不稳定。添加到饲料中，在室温下保存四个月，效价下降4%～9%，制粒时效价下降5%～7%。 1.2土霉素生产菌种 土霉素是由放线菌（龟裂链霉菌）所产生的抗生素。土霉素钙盐是发酵培养液中入碳酸钙，经过滤，干燥而制得。 2 土霉素生产工艺 2.1土霉素的生产工艺流程概述 土霉素生产工艺主要分为：发酵、酸化过滤、脱色结晶、离心干燥四个阶段。其生产工艺流程，如图2.1： 土霉素工艺流程简图 2.2 发酵工艺流程 2.2.1 斜面孢子制备 首先培养三支斜面孢子, 斜面孢子的培养基是由麸皮和琼脂组成，用水配制。培养孢子条件：斜面孢子在36.5～36.8℃培养，不得高于37℃。若36℃超过2小时则生产能力明显下降，不可用于生产。而且在袍子培养过程中还需保持
提取关键词四法关键词本是网络中经常提及的词语，指的是人们输入搜索框中的文字。关键词的内容大多为网站名、网页名、新闻事件、人名、术语、软件名等。而高考常考语段压缩题型——提取关键词中的“关键词”实是关键信息句中的核心信息。 提取关键词，说到底就是要善于提取关键信息句中的核心信息，考查的是学生提取关键信息的能力。 2011年高考，有两个省（福建省和四川省）的语文试卷中出现了语段压缩题，具体试题内容如下： 福建卷： 阅读下面的材料，回答问题。 某翻译家在《文艺报》上撰文指出：有人说中国人称自己的国家为“中国”，表示自己是坐镇在世界中央的天朝，说明中国人自傲。但从国名的中文翻译来看，译名却能够表达中国人的感情。例如，“英国”为什么不译作“阴国”？“美国”不译作“紊国”？“德国”为什么不译作“歹国”？这是因为中国人要从同音字中选出具有最美好含义的字来命名这些国家。用什么字呢？用“英雄”的“英”、“美丽”的“美”、“道德”的“德”、“法律”的“法”、“芬芳”的“芬”、“祥瑞”的“瑞”……而外国，比如英国，用英文译别国的国名，只用音译，译名中不含有褒贬意义。 请用一句话概括该翻译家的观点。（3分） 答：_______________________________________________________ 此题虽不属提取关键词这类题，但与之有关，解答时要把握住该段文字的核心内容，即中文翻译较外文翻译更能表达美好的感情。答题时要强调中文翻译的感情色彩优势。另外，要注意句子结构的完整，不要把句子写成短语。参考答案为“对别国国名的翻译，中文能表达美好的感情，而外文不能” 四川卷 阅读下面的材料，概括要点回答中国建设世界一流大学缺少“什么”。不超过25字。（4分） 4月23日，“2011大学校长全球峰会”在清华大学举行。其中，“中国建设世界一流大学”成为热议的话题。多位大学校长接受记者采访时表示：目前，中国顶尖大学在吸纳拥有国际学术背景人才、借鉴发达国家的教学制度和成功经验等方面缺乏全球化视野；许多人安于现状，在科研方
表达蛋白的分离与纯化 大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在，需要不同的纯化策略。现在，许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能，这些自然需要将蛋白质分离出来后，进行进一步的研究来获得。分析蛋白质的方法学现已极大的简化和改进。必须承认，蛋白质纯化比起DNA克隆和操作来是更具有艺术性的，尽管DNA序列具有异乎寻常的多样性（因而它是唯一适合遗传物质的），但它却有标准的物理化学性质，而每一种蛋白质则有它自己的由氨基酸序列决定的物理化学性质（因而它具有执行众多生物学功能的用途）。正是蛋白质间的这些物理性质上的差异使它们得以能进行纯化但这也意味着需要对每一种待纯化的蛋白质研发一套新的方法。所幸的是，尽管存在这种固有的困难，但现已有多种方法可以利用，蛋白质纯化策略也已实际可行。目前，待研究蛋白或酶的基因的获得已是相当普遍的事。可诱导表达系统特别是Studier等发展的以噬菌体T7RNA聚合酶为基础的表达系统的出现使人们能近乎常规地获得过表达（overexpression），表达水平可达细胞蛋白的2%以上，有些甚至高达50%。 一、可溶性产物的纯化（融合T7·Tag的表达蛋白） （一）试剂准备 采用T7· Tag Affinity Purification Kit 1．T7·Tag抗体琼脂。 2．B/W缓冲液：4.29mM Na2HPO4，1.47 mM KH2PO4，2.7 mM KCl，3.
0.137mM NaCl，1%吐温-20，pH7.3。 4. 洗脱缓冲液: 0.1M柠檬酸，pH2.2。 5. 中和缓冲液：2M Tris，pH10.4。 1.PEG 20000。 （二）操作步骤 1.100ml 含重组表达质粒的菌体诱导后，离心5000g×5min，弃上清，收获菌体，用10ml预冷的B/W缓冲液重悬。 2. 重悬液于冰上超声处理，直至样品不再粘稠，4℃离心14000g×30min，取上清液，0.45μm膜抽滤后作为样品液。 3. 将结合T7·Tag抗体的琼脂充分悬起，平衡至室温，装入层析柱中。 4. B/W缓冲液平衡后样品液过柱。 5. 10ml B/W缓冲液过柱，洗去未结合蛋白。 6. 用5ml洗脱缓冲液过柱，每次1ml，洗脱液用含150μl中和缓冲液的离心管收集，混匀后置于冰上，直接SDS-PAGE分析。 7. 将洗脱下来的蛋白放入透析袋中，双蒸水透析24hr，中间换液数次。 8.用PEG 20000浓缩蛋白。 （三）注意事项 蛋白在过层析柱前，要0.45μm膜抽滤，否则几次纯化后，柱子中会有不溶物。 二、包涵体的纯化
第一章绪论 1.1引言 目前，全世界的医药产品生产已有一半以上由生物技术合成，其中，抗生素、维生素、激素这三大类药物主要由微生物发酵生产。抗生素在世界范围内的应用十分广泛，从而有效地控制了许多传染疾病，同时也促进了发酵工业的发展。 1.1.1土霉素化学式及性状 土霉素(Terramycin)又称地霉素、氧四环素(Oxytetracycline)，化学名：(4s,4аR,5S,5аR,6S,12аS)-N-4-二甲胺基-1,4,4а,5,5а,6,11,12а-八氢,5, 6,10,12,12а-六羟基-6-甲基-1,11-二氧代并四苯-2-甲酰胺，是四环素类抗生素的一种，因结构上含有四并苯基的母核而得名。化学式如下： 本品为灰白色至黄色的结晶粉末，无臭，味苦，熔点是180℃，在空气中性质稳定，在日光下颜色变暗在碱性溶液中易破坏失效。土霉素的盐酸盐为黄色结晶，味苦，熔点190～194℃，有吸湿性，但水分和光线不影响其效价，在室温下长期保存不变质，不失效。盐酸盐易溶于水，溶于甲醇，微溶于无水乙醇，不溶于三氯甲烷和乙醚，在酸性条件下不稳定。添加到饲料中，在室温下保存四个月，效价下降4%～9%，制粒时效价下降5%～7%。 1.1.2作用机理 本品为广谱抑菌剂，能特异性地与细菌核糖体30S亚基的A位置结合，抑制肽链的增长和影响细菌蛋白质的合成，能抑制动物肠道内的有害微生物，激活大肠中有利于营养物质合成的微生物。可使动物肠壁变薄，更有利于营养物质的
吸收和利用，从而提高肠道吸收效率。许多立克次体属、支原体属、衣原体属、螺旋体、阿米巴原虫和某些疟原虫也对本品敏感。肠球菌属对其耐药。其他如放线菌属、炭疽杆菌、单核细胞增多性李斯特菌、梭状芽孢杆菌、奴卡菌属、弧菌、布鲁菌属、弯曲杆菌、耶尔森菌等对本品敏感。 1.1.3土霉素的应用 土霉素为四环类抗生素，生产工艺简单、生产成本较低，可作为生产其它新型抗生素的原料。 土霉素价格低廉，可以作为饲料添加剂用于养殖业。实践表明：土霉素用于饲料添加剂，可以改善饲料转化效率，促进畜禽生长，提高畜禽抗疾病能力。 土霉素对多数革兰氏阳性菌(如肺炎球菌，溶血性链球菌，草绿色链球菌以及部分葡萄糖球菌，炭疽杆菌)和革兰氏阴性菌(如大肠杆菌，产气杆菌，破伤风，肺炎杆菌，流感杆菌，百日咳杆菌等)均有抗菌作用。临床上主要用于肺炎、败血症、斑疹、伤寒了、淋巴肉芽肿、砂岩及其他细菌性感染等，对伤寒有效，也可用于阿米巴痢疾和阴道滴虫病患者。此外还能抑制立克次体和砂岩病毒及淋巴肉芽肿病毒。 作为抗生素，上世纪六七十年代时，土霉素曾在抗菌药市场上占重要地位，但伴随着其它多种高效抗生素的诞生与发展，土霉素市场快速走向衰落。目前，土霉素已经极少用于临床了。 1.1.4 土霉素的生产 土霉素通常由龟裂链丝菌(streptomyces rimosus)发酵得到，目前国内提取工艺一般以草酸(或部分盐酸替代草酸)作酸化剂调节发酵液pH值，利用黄血盐钠和硫酸锌作净化剂生成普鲁士蓝沉淀协同去除Fe3+及高分子杂质，再经122-2树脂脱色，调节pH至4.6晶得干燥到土霉素成品[1]。
科研训练论文(文献综述) （ 题目：土霉素生产车间提炼工段工艺设计学生姓名：宋世骏 学号：201220515013 学院：化工学院 班级：制药工程专业（2）班 2015年12月
土霉素生产车间提炼工段工艺设计 宋世骏指导教师：秋月 工业大学化工学院，呼和浩特，010051 摘要： 土霉素又称为地霉素或氧四环素，英文名称（Oxytetracycline），土霉素属四环素类抗生素，为广谱抑菌剂，许多立克次体属、支原体属、衣原体属、螺旋体对本品敏感。肠球菌属对其耐药。其他如放线菌属、炭疽杆菌、单核细胞增多性斯特菌、梭状芽孢杆菌、奴卡菌属、弧菌、布鲁菌属、弯曲杆菌、耶尔森菌等对本品亦较敏感。土霉素是一种广谱类抗生素，有一定副作用，多年来由于土霉素和四环素类的广泛应用,临床常见病原菌对土霉素素耐药现象严重，包括葡萄球菌等革兰阳性菌及多数革兰阴性杆菌。目前，中国已成为世界上最大的土霉素生产国，尤其对畜用土霉素需求很大。到目前为止，提纯土霉素的方法有很多，在生产工艺过酸化、脱色、结晶、重结晶以及应用超滤-纳滤技术都可得到纯度较高的土霉素产品。本次设计为1600t/a土霉素提炼工段工艺设计；本文主要讲述土霉素在工厂车间里生产的过程，着重讲述提炼工段的土霉素工艺设计，以及对各类提炼方法的对比及应用。 关键词： 抗生素；生产工艺；物料流程；提炼 引言： （一）土霉素简介 1、中文名称：土霉素[1]
2、英文名称：Oxytetracycline 3、分子式：C22H24N2O9 4、分子量：460.43 5、结构式： 6、外观性状 土霉素又名氧四环素，为灰白色至黄色的结晶粉末，无臭，味苦，熔点是180℃，在日光下颜色变暗在碱性溶液中易破坏失效。土霉素盐酸盐为黄色结晶，味苦，熔点190～194℃，有吸湿性，但水分和光线不影响其效价，在室温下长期保存不变质，不失效。盐酸盐易溶于水，溶于甲醇，微溶于无水乙醇，不溶于三氯甲烷和乙醚，在酸性条件下不稳定。 （二）土霉素生产与提炼 土霉素生产由发酵工段、酸化过滤、脱色结晶、离心干燥工段工艺组成，因为在土霉素发酵过程中产生大部分有机副产物，如色素、蛋白质等，所以需要对土霉素发酵液进行处理。到目前为止，提纯土霉素的方法有很多，在生产工艺过酸化、脱色、结晶、重结晶以及应用超滤-纳滤技术都可得到纯度较高的土霉素产品。土霉素原料药用药广泛，而且价格低廉，因此大量用于畜禽药以及饲料添加剂。为了制备高纯度的土霉素，我们需要研究高纯度土霉素碱[2]的生产工艺。把粗品土霉素碱用盐酸溶解后,加入黄血盐-硫酸锌进一步去除杂质,然后通过超滤去除热原及其他高分子杂质,最后调pH值重结晶得到高纯度的符合注射用标准的土霉素碱产品。在发达国家土霉素基本不再使用，即便是畜牧业也用的是高纯度无菌土霉素。所以我所研究的课题——土霉素车间提炼工段工艺设计变得尤为重要。 1、土霉素常用提纯方法 土霉素是龟裂链丝菌通过发酵合成的广谱抗生素，在发酵过程中,所产生的
提炼分论点的方法 怎样提炼分论对于一篇议论文来说，在很大程度上，分论点的有无、当否，直接影响到思路是否清晰，说理是否透彻，结构是否合理，最终影响到文章的整体效果的优劣。在议论文的写作训练中，很多同学深感苦恼的一个问题是不会围绕中心论点多侧面、多角度、多层次地展开分析说理，文章常常表现出思路狭窄、闭塞，内容肤浅、单薄，说理宽泛、苍白，表达模糊、笼统的毛病。学会围绕中心论点多侧面、多角度、多层次的构设分论点，铺展行文，这是克服上述毛病的有效途径之一。 一、怎样提炼分论点 论证某一方面观点、某一事理，从不同角度、不同侧面、不同层次去展开，这每一层、每一面就是一个“分论点”。分论点是对中心论点的展开与说明，是中心论点的具体化。因此，提炼分论点的前提是先确定中心论点，并用一个句子的形式表达出来。提炼分论点的常用方法有： 1．追问原因法——即问一个“为什么” 追问原因法，就是把中心论点作为结论去追溯这个结论产生的条件和原因，或透过现象深入本质，或揭示问题产生的原因，从而形成分论点。由于因果联系是存在于一切事物和现象之间的一种普遍联系，因此，运用因果分析法形成分论点是议论文写作中使用得较多的一种方法。 例2：古训说：“不以规矩，难以成方圆”。现代人说，如何创新，就是要打破传统的框框，突破规矩。请以“规矩”为话题作文。 分析：先把话题（题目）扩展成一个句子（中心论点）: 没有规矩,难成方圆。再对这个句子表述的现象追问原因，于是得到分论点： ①没有规矩，个人不能成才； ②没有规矩，集体不能稳定； ③没有规矩，国家不能发展。 例3：2000年的高考话题作文“答案是丰富多彩的”。 提炼：话题“答案是丰富多彩的”本身就是一个句子（中心论点），无须扩展。对这个句子表述的现象追问原因，于是得到分论点： ①世界千变万化，事物是复杂的； ②人们看问题的方法、角度不同； ③评判事物时所持的标准不同。 2．追问办法法——即问一个“怎么办” 所谓追问办法法，就是解决论证中的“怎么办”的问题，提出解决问题的具体措施和途径。这些具体措施和途径往往就是文章的分论点。采用“追问办法法”提炼分论点，也必须先确立中心论点。 例1：05年江西高考，话题“脸” 提炼：先把话题（题目）扩展成一个句子（即中心论点）：城市的“脸”（即外显的给外人的整体形象）要美化。然后追问美化的方式： ⑴美化自然环境； ⑵改善城市治安； ⑶提高市民文明素质。 例3：命题作文《学会欣赏别人》。
申论概括题材料提取、要点组织的方法技巧（附案例讲解） 在花木君的课程中，尤其是基础题型的训练中，特别注重对解题过程的梳理，强调提升解题能力。在课程的准备、讲解中，有意识的将审题、材料阅读与勾画、要点整合等一一呈现出来，希望通过这种“手把手”讲解的方式，来帮助大家更高效、更准确的解题。 课程学习中，大家基本上能够做到将练习与课程结合起来，且提出了不少学习中的问题，其中最多的是“要点怎么整合”，那么我们就一起谈谈这一问题吧。 先提一个问题，要达到“要点整合”这一环节，得完成哪些工作(或者说，要达到这一步，得完成前期的哪些步骤)? 答：至少有三步： 1，准确理解题目的要求，尤其是其本质特点和附加要求。 2，找到题目作答指定的材料，然后阅读并勾画材料的要点信息。 3，将所勾画的要点信息分条理呈现出来。 那么，材料阅读中勾画的信息分条理呈现出来后，我们要做什么呢? 是的，还有两步： 1，合并同类项。 2，理顺表达内容的逻辑关系、词汇串联，最终整理成参考答案。 什么是合并同类项？ 同一方向、同一层次、同一性质的信息进行合并，如思想认识、制度建设、法治建设、科学技术、宣传教育等都属于平行的层次，各个层次之下的内容就需要合并;如政府、企业、民众也是平行的几个主体，各个主体之下的内容可合并起来。 我们用课程中的“搞定启示题”为例来说明。 题目的要求是“我国有不少地区在保护和发展具有地方特色的文化方面都取得了一些成功的经验。要求我们将启示提炼出来”。 通过材料的阅读，我们勾画的材料要点如下： 菊儿胡同 住房是城市的细胞。新建房应自觉地顺应城市的传统肌理， 非常留意娱目之景，将“艺文”融入人居环境。 豫园 民俗工艺小商品、上海及全国特色小吃、上海本土文化及民间文化在此得到重生与发展，成为市民节庆庙会地。 既有历史渊源，又有民族风格，豫园被塑造成一个文化综合体。 豫园商城推出了“豫园中国节”的概念。非物质文化遗产。 枫泾镇 家乡民间文化原有的特色，为枫泾古镇增添了无穷的魅力。
土霉素生产工艺 （实训实验报告 姓名： 班级：生物 学号： 指导教师：
目录 第一章绪论 (2) 1.1土霉素的简介 (2) 1.2实验的目的、要求与过程 (2) 第二章设备型号 (4) 第三章操作步骤 (5) 3. 1斜面孢子的制备 (5) 3.2 种子培养基的制备与灭菌 (5) 3.3 发酵培养基的配制与灭菌 (6) 3.4 发酵 (6) 3.5 测定前发酵样品预处理 (6) 3.6 土霉素酸化液的发酵提取 (6) 3.6.1原理 (7) 3.6.2酸化提取方法 (7) 3.7 122#树脂预处理方法 (7) 3.8结晶与干燥 (8) 3.9 相关数据的测定 (9) 3.9.1 pH的测定 (9) 3.9.2发酵液效价的测定 (9) 3.10 标准曲线的绘制 (10) 第四章讨论 (11) 参考文献 (12)
第一章 绪论 1.1土霉素的简介 土霉素是四环类抗生素，其在结构上含有四并苯的基本母核，随环上取代基的不同或位置的不同而构成不同种类的四环素类抗生素。其结构和命名如图。 土霉素是由龟裂链丝菌（S. rimosus ）产生的，属于放线菌中的链霉菌属，他们具有发育零号的菌丝体，菌丝体分枝捂隔膜，直径约为0.4~1.0米，长短不一，多核。菌丝体有营养菌丝、气生菌丝和孢子丝之分，孢子丝分化成为分生孢子，而龟裂链丝菌的菌落为灰白色，后期生褶皱，成龟裂状。 土霉素是典型的次级代谢产物，其发酵的特点之一就是分批过程分为菌体的生长期、产物期和菌体期三个阶段。龟裂链丝菌的生长和土霉素的生物合成受到许多发酵条件的影响：温度、发酵PH 值、溶氧、接种量、泡沫等。同时还受到一些代谢调控机制的控制，磷酸盐的调节作用、ATP 的调节和产生菌生长速率的调节等。 1.2实验的目的、要求与过程 通过专业综合训练我们了解了一种生物产品从上游的菌种培养、发酵工段到下游的提取纯化等工段的完整的生产过程。让学生们理论联系实际，实训过程中锻炼了学生的动手与思考能力，在实践操作中发现问题并利用自己的专业知识解决问题。同时让学生对土霉素这一生产过程有了充分的认识，为后续的课程设计以及毕业设计打下了良好的基础，减少不必要的错误，使实验更加完善。 实训要求我们掌握土霉素生产的工艺流程，掌握分批发酵的原理，熟悉发酵罐的灭菌与使用方法；观察并记录上罐发酵过程中菌体的生长变化；掌握土霉素提取结晶等工艺的原理及操作步骤；掌握土霉素效价的测定原理及方法。 实训按照土霉素的生产工艺流程进行，首先进行培养基的配制及灭菌，然 3N 2 H R 5 C H 3 41
阅读知识讲解 一、如何概括文章的主要内容 写人的文章：找出主要人物（谁+干了什么+结果怎么样） 记事的文章：事情的起因+经过+结果 二、如何提炼文章的中心 1、概括文章的中心思想要包括“文章主要内容”和“思想感情”两部分。 2、概括文章中心思想的常用方法： 1）用分析题目的方法概括思想。 2）用分析中心句的方法概括思想。 3）用分析主要人物的方法来概括思想 3、概括中心思想的基本形式：（部分列举） 1）课文写了（）表达了（）。 2）课文写了（）赞美了（ 3）课文写了（）说明了（）。 4）课文写了（）告诉了（） 5）课文写了（）表达了（）赞美了（）。 例文讲解 一个巴掌拍响的人生 她是一个黑人的女孩。 她从小就“与众不同”，因为小儿麻痹症。她的左腿瘫痪，只能病卧在床，失去了儿童应有的欢乐和幸福。随着年龄的增长，她的忧郁和自卑感也与日俱增，她甚至拒绝所有人的靠近。但也有个例外，邻居家那个只有一只胳膊的老人成了她的好伙伴。老人非常乐观，她非常喜欢听老人讲的故事。 一天，她被老人用轮椅推着去附近的一所幼儿园，操场上孩子们动听的歌声吸引了他们。 当一首歌唱完，老人说：“我们为他们鼓掌吧！”她吃惊地看着老人，问道：“我的胳膊动不了，你只有一只胳膊，怎么鼓掌啊？” 老人对她笑了笑，解开衬衣扣子，露出胸膛，用手掌拍起了胸膛……那是一个初春，风中还有几分寒意，但她却突然感觉自己的身体里涌动起一股暖流。老人对她笑了笑：“只要努力，一只巴掌一样可以拍响。你一样能站起来的！” 那天晚上，女孩给父亲写了一张纸条，贴到了墙上，上面是这样的一行字：一只巴掌也能拍响。那之后，她开始配合医生做运动。9岁那年，父母不在时，她自己扔开金属架，试
蛋白体外表达与纯化 随着后基因组时代的到来，蛋白质组成为科学研究的热点。蛋白质作为生命机体的主要活动的承担者，其体外表达与纯化在研究相应基因的功能上有重要意义。 蛋白体外表达系统按其表达宿主可分为原核表达系统，真核表达系统和哺乳动物细胞表达系统。 一：原核表达系统 原核表达系统的宿主菌主要以大肠杆菌为代表，大肠杆菌表达体系是目前应用最广泛的外源基因表达体系，这也是外源基因表达的首选体系。该表达体系的优点：遗传学和生理学背景清楚；容易培养；外源基因经常可以高效表达及操作简单、周期短、成本低等。其不足之处是不能进行典型真核细胞所具有的复杂的翻译后修饰；广泛的二硫键的形成及外源蛋白组装成蛋白复合体的能力也受到限制；另外外源基因产物在大肠杆菌中易形成不溶的包涵体；有时由于真核mRNA的结构特性及密码子使用频率与大肠杆菌的差异，而的不到足够的产物。二：真核表达系统 真核表达系统的宿主菌主要以酵母表达系统为代表，酵母基因表达系统的载体通常既能在酵母中进行复制也能在大肠杆菌中进行复制，形成所谓酵母菌――大肠杆菌穿梭载体。因以大肠制备质粒DNA较方便，通常利用大肠杆菌系统构建酵母载体以简化手续，缩短时间。作为基因表达系统的宿主应该具备以下条件：安全无毒，不致病；遗传背景较清楚，容易进行遗传操作；容易进行载体DNA的导入；培养条件简单；有良好的蛋白分泌能力；有类似高等真核生物的蛋白翻译后修饰功能。 三：哺乳动物细胞表达系统 由于本专业不涉及哺乳动物细胞表达系统的应用，故此不赘述。 表达载体的种类及相应的分离纯化方法 作为表达载体必须具备以下特征：稳定的遗传复制、传代能力，无选择压力下能存在于宿主细胞内；具有显性的筛选标记；启动子的转录是可调控的；启动子的转录的mRNA能够在适当的位置终止；具有外源基因插入的多克隆位点。 在原核表达系统中常用的表达载体有：PET－载体系列，用这类载体表达出的外源蛋白在Ｎ端或Ｃ端或两端均具有his tag。用该载体表达出的外源蛋白通过其末端组氨酸与Ni2+的结合以亲和层析的方法而纯化。PGEX－载体系列，用这类载体表达出的外源蛋白以GST融合蛋白的形式存在，以Glutathione Sepharose 4B 柱亲和层析得以纯化。 本实验将以PGEX4T—3为载体，在大肠杆菌BL21DE3菌株中表达外源蛋白OsWAK2为例介绍蛋白的表达与纯化。 实验方法与步骤： 一：目的蛋白的粗提 1．构建载体，转化BL21DE3宿主菌感受态细胞 2．挑单菌落于10ml 含有60ug/ ml的液体LB培养基中37℃200rpm摇培16—18小时3．取5 ml摇好的菌液加到250 ml备好的含有60ug/ ml的液体LB培养基中37℃200rpm 摇培，至对数生长中后期
答题技巧申论归纳概括提炼核心关键词的常见方法 归纳概括是申论考试中必出的一种题型，这类题目虽然整体看来单个题目分值占比不是特别高，但它却是我们申论讲解的第一个题型，也是最为基础、最为关键的题型。但在实际授课过程中我们会发现，不同学员的作答情况是千差万别，这类题目并没有学生理解的那么简单。而归纳概括题目要想得高分，不仅在于多找要点，也在于能否在逻辑和内容上表达的更清晰。基于此，核心关键词前置，即给每个要点提炼一个关键词或者核心句就显得非常重要了。下面将介绍几种提炼核心关键词的几种方法，供大家参考学习。 一、什么是核心关键词前置。 在申论答案，尤其是归纳概括题目中，每一个得分点都是由若干个关键词组成，而关键词之间往往也有主次之分，我们为了达到君臣佐使目的，以得更高的分数，会有意识的将最为核心的关键词放置于序号之后、具体要点之前，以便考官能清晰的看到我们的答案要点，有时我们也会将其称之为“二次概括”。
例如：1.解决温饱问题。分地后干劲足，粮食富余，满足需求。2.生活水平提高。家电、网络、汽车、智能设备普及。 在以上的两个示例中“解决温饱问题”和“生活水平提升”就是核心关键词，其答案呈现就是核心关键词前置。在这里要注意的是，如果一道题目字少较少而要要点较多时，或者要点本身很散、数量很多又不具明显关系时我们不强求前置。归纳概括的核心是多体现不同关键词，如果情况不允许、或者能力不足时不做硬性要求，切记不能舍本逐末。 二、核心关键词前置的几种方法 1. 找寻要点中呈现总分关系的总，能够涵盖其他要点的大点，将其前置。在很多材料中，多个关键词可能会呈现明显的总分，有的是材料本身点明了总分(例题1)，有的是依据常识判断(例题2)，我们将表示总的要点前置即可。 经典例题(1)概括材料中反映的主要问题。 材料：当前我国职业教育发展存在许多让人忧心的问题。资金投入成为制约职业学校发展的最大瓶颈，此外学生的培养问题和产学合作不通畅也是其面临的短板。
含组氨酸标签的蛋白的诱导表达及纯化 一.用IPTG诱导启动子在大肠杆菌中表达克隆化基因 所需特殊试剂：1M IPTG 1.将目的基因与IPTG诱导表达载体连接，构成重组质粒并转化相应的 表达用的大肠杆菌。将转化体铺于含相应抗生素的LB平板，37℃培养 过夜。通过酶切序列分析等筛选带有插入片段的转化体。 2.分别挑取对照菌和重组菌1个菌落，接种于1ml含有相应抗生素的LB 培养液中，37℃通气培养过夜。 3.取100微升过夜培养物接种于5ml含有相应抗生素的LB培养液中（各 10份），适当的温度（20－37℃）震荡培养4小时，至对数中期（A550 ＝0.1-1.0）。 4.对照菌和重组菌各取1ml未经诱导的培养物于离心管中，剩余培养物 中加入IPTG至终浓度分别为0.5，1.0，1.5，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5， 5.0mM相同的温度继续通气培养。 5.在诱导的1，2，3，4，5个小时取1ml样品于Ep管中。 细菌的生长速率严重影响外源蛋白的表达，因此必须对接种菌量，诱 导前细菌生长时间和诱导后细菌密度进行控制。生长过度或过速会加 重细菌合成系统的负担，导致包涵体的形成。生长温度可能是影响大 肠杆菌高度表达目的蛋白的最重要因素。低温培养能在一定程度上抑 制包涵体的形成。IPTG的浓度对表达水平的影响也非常大。所以通过 试验确定最佳的培养条件是很必要的。 6.将所有样本室温最高速度离心1分钟，弃上清，沉淀重悬于100微升 1×SDS蛋白上样缓冲液中，100℃加热5分钟，室温最高速度离心1 分钟，取15微升样品上样于SDS聚丙烯酰胺凝胶，用SDS－PAGE 观察表达产物条带，从而确定优化的培养条件。 二.大量表达靶蛋白 1.取保存的重组大肠杆菌菌液150微升接种于30毫升含相应抗生素的 LB培养液中，在100毫升锥形瓶中，300rpm，37℃通气过夜培养。
摘要 土霉素，又名地霉素，氧四环素，属四环素类抗生素，为广谱抑菌剂，许多立克次体属、支原体属、衣原体属、螺旋体对土霉素敏感。它是1949年由美国开发的一种抗生素。 土霉素是一个典型的利用生物工程技术生产的产品，生产工艺涉及种子培养、发酵、酸化、提取、过滤、脱色、结晶、离心和干燥等重要的单元操作和工程概念。本次课程设计进行的是酸化、提炼、干燥工段的工艺设计，该说明书主要对土霉素车间的生产工艺流程进行了简单的概括，并且对酸化、提炼和干燥工段给予了详细介绍。本说明书给出了600t/a土霉素车间的物料衡算的详细计算过程和总结，并将生产中各部分的数据制成了表格。最后，在既得数据和结合工艺流程的基础上绘制了本工段工艺管道及仪表流程的PID图。 关键词：土霉素；物料衡算；工艺流程；提炼工段
Abstract Oxytetracycline, also known as Geotrichum, oxytetracycline, belonging to the tetracycline antibiotics, as a broad-spectrum antimicrobial agent, a lot of Rickettsia, mycoplasma, chlamydia, helicoid of oxytetracycline sensitive. It is in 1949 by the development of an antibiotic. Oxytetracycline is a typical use of biological engineering technology products, the production process involves seed cultivation, fermentation, acidification, extraction, filtration, decoloration, crystallization, centrifugation and drying and other important unit operation and engineering concepts. The curriculum design is acidification, refining, drying in the process design, the specification the main workshop of oxytetracycline production process were summarized briefly, and the acidification, refining and drying section is introduced in detail. This manual gives a detailed calculation process of material balance calculation and 600t/a oxytetracycline workshop summary, and each part of the production data in the table is made. Finally, the process of drawing section piping and instrument flow diagram based on PID data and combined with the vested process. Keywords: Oxytetracyline;material balance; production technology; refining process
概括提炼能力训练——中考现代文阅读八大基本能力训练之四 【常见考点】 概括提炼能力是指从所给的文字材料中提取符合题干要求的内容，并把相关文字材料的共同点归结在一起，用简明扼要的语言表达出来的能力。在中考阅读题中，考查“概括提炼能力”的考点主要有： 1．提炼记叙的要素。2．概括文章的情节。3．概括人物事迹的各个方面。4．提炼刻画人物的方法。5．概括人物形象的特点。6．概括说明对象的特征或事理。7．提炼说明顺序、说明方法。8．提炼或概括中心论点、分论点。9．提炼论证的过程及论证的方法。10．概括文、段的中心或内容的大意。11．提炼段、句的写作模式并进行仿写。12．通过划分文、段的结构，提炼文、段的思路。13．把材料改写成一句话新闻。14．将材料进行归类。15．提炼概括文、段的表达特点。 【答题点拨】 在阅读中做概括提炼题时，可以采用标题诠释法，因为许多文章的标题就是文、段的中心，应结合文段的内容对标题的含义进行阐释。可以采用找中心句法，因为中心句有统领的作用。可以采用摘要法，文、段的意思总是多层次的，如果有主次之分，那就提取主要的省去次要的；如果是层层递进的，那就提取它最后归结的意思。可以采用联合法，如果文章中段落、层次的意思是并列的，那就把它们联合起来，再简要概述。可以采用词句整合法，文、段的主要意思，通常是通过重要的语句或关键的词语表达出来的，我们把这些相关的词语或语句重新整合，就可概括出主要意思。可以采用概述法，某部分的意思有时候很难从原文中
找到相应的词语，那就要在分析的基础上用自己的话简要表述。此外，在答题时，要注意几种方法的交替使用或综合使用。 【单项训练】 （一）痛苦聚积力量矫友田有一个女孩，很小的时候就拥有一个梦想：想成为一名出色的滑雪运动员。然而，她不幸患上了骨癌。为了保住生命，她被迫锯掉了右脚。后来，癌症蔓延，她先后又失去了乳房及子宫。一而再、再而三的厄运降临到她的头上，她哭泣过、悲伤过，但从未放弃过心中的梦想。她一直都在告诫自己：“轻言放弃，就是失败，我要对自己的生命负责。” 最后，她不但没有被病魔打倒。相反，她以顽强的斗志和无比的勇气，排除万难，终于为自己创下了多项世界记录，其中包括获得1988年冬奥会的冠军，还在美国历届滑雪锦标赛中共赢得了29枚金牌。后来，她还成为攀登险峰的高手。她就是美国运动史上极具传奇色彩的著名滑雪运动员——戴安娜?高登。一个人一旦沉沦于痛苦之中，就永远不会有所作为。只有那些懂得消解痛苦，并在痛苦中不断积聚力量者，才会使生命变得愈加丰满和充实。有一位诗人说过：“其实，不论在岁月之内还是在岁月之外，痛苦都是比幸福更为博深更为奥妙更为耐读的书籍！”这是一句多么耐人寻味的话啊。痛苦并不可怕，在痛苦中聚积的力量，犹如剧烈涌动的火山，一旦喷发，必定带给人们一种灵魂的震颤！ 1．试将本文分成两层，并简要说明理由。 2．本文阐明的主要观点是什么？ 3．用一句话概括文中所列举的事例。
概括提炼能力 概括提炼能力是指人们对事物感知获得的信息，通过认知、分析、比较、抽象、综合，将其内部特征或本质属性归结为精要的概念的逻辑思维过程。概括是在深入理解的基础上用凝炼准确的文字把至关重要的意思表达出来。在语言的层面上，可以理解为阅读的一种方法；在逻辑的层面上，可以理解为思维的一种能力。它是一个人的语文思维素质的重要组成部分。阅读与思维紧密相连，不可分割。对语文阅读教学而言，在现代文阅读（包括文言阅读）各个能力等级的阅读训练中都不能缺少概括。学会概括，既有助于迅速获取信息，又有助于整体把握文章，从而准确、全面理解文章内容。 考察概括能力的题型，要求考生用材料中原有的词句或用自己的话针对题目规定的某一个角度以简单明确的文字来表达全文或段落或句子的意思，或人物性格、或事物主要特征。因此我们在阅读过程中首先要力求对整篇材料的准确把握；其次要透过材料领略深一层次的含义，如材料中蕴含的要旨、核心、本义、特点、作用等；再次要审清题意，找准被概括的材料；最后要选用恰当的概括性语言。 中考概括提炼能力检测涉及的要点常见的有： 1、对整篇文章或部分段落进行整体概括提炼，如河南省中考第8题，“请用简洁的语言概括股市的主要内容（《改变一生的闪念》）”，这是检测学生对全文内容概括的能力；南京08年《田野上的白发》19题“母亲的白发让“我”“感到心痛”。文中叙述了哪两件让“我”心痛的事？”这是检测学生对某一段落概括的能力。 2、有的侧重对文章的要点进行概括提炼，如江苏连云港市中考第21题，“综观全文，概括出文章所写‘神奇的鸣沙山’的三个神奇之处（《沙之聚》）；广东广州市中考第19题，“儿子说自己很‘勇敢’，从全文看，他的‘勇敢’在文中有哪些具体表现？请写出其中的两点。” 3、有的侧重对文章或文段的中心、观点的概括提炼，如湖北黄冈市中考第22题，“全文表达的主要观点是什么？（《错过就会永远失去》）”；河北省中考第26题，“把第⑥段画线处应填写的揭示文章中心的话写在下面（《轻点关门》）。”有的侧重对文中人物形象的概括，如陕西省中考第10题，“在‘借钱男生’、‘两少年’以及‘我的女友’中，你印象最深的人物是谁？请简要概括其特点（《一诺千金》）。” 4、有的侧重文章思路或情感变化的概括提炼，如山西临汾市中考第18题，“请你用简洁的语言概括出‘我’在不同时间、地点的感情变化（《青木瓜之味》）。” 5、有的侧重对作品中的人物形象进行概括提炼，如南京08年《田野上的白发》18题：“简要说说文中的母亲是什么样的母亲”。 能力提升指要 概括题答题的原则： 第一，可用提取原句、组合关键词句、用自己的语言等方式进行概括。 第二，语言表达要简明且内容周全。 第三，要仔细审题，按题干规定的方式进行表达。