分子筛层析
分子筛层析又称为凝胶层析或凝胶过滤。具有分子筛作用的物质很多，如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广，商品名是sephadex型号很多，从G10到G200，它的主要应用范围是：①分级分离各种抗原与抗体；②去掉复合物中的小分子物质。如除盐、荧光素和游离的放射性同位素以及水解的蛋白质碎片；③分析血清中的免疫复合物；④分子量的测定。
（一）原理
凝胶是一种多孔性的不带表面电荷的物质，当带有多种成分的样品溶液在凝胶内运动时，由于它们的分子量不同而表现出速度的快慢，在缓冲液洗脱时，分子量大的物质不能进入凝胶孔内，而在凝胶间几乎是垂直的向下运动，而分子量小的物质则进入凝胶孔内进行“绕道”运行，这样就可以按分子量的大小，先后流出凝胶柱，达到分离的目的。
（二）葡聚糖凝胶的种类与性能
葡聚糖又名右旋糖酐，在它们的长链间以三氯环氧丙烷交联剂交联而成。葡聚糖凝胶具有很强的吸水性，交联度大，吸水性小，相反交联度小，吸水性大。商品名以SephadexG表示，G值越小，交联度越大，吸水性越小，G值越大，交联度越小，吸水性就越大，二者呈反比关系，G值大约为吸水量的10倍。由此可以根据床体积而估算出葡聚糖凝胶干粉的用量。
表1－8 Sephadex1的种类与特性
G25、G50有四种颗粒型号：粗（100µ~300µ）、中（50µ~150µ）、细（20µ~80µ）和超细（10µ~40µ）。G75～G200又有两种颗粒型号：中（40µ～120µ），超细（10µ～40µ）。颗粒越细，流速越慢，分离效果越好。
表1－9 DEAE－纤维素与Sephadex1比较
三）试验方法
1．凝胶的选择根据层析物质分子量的大小选择不同型号的凝胶，如除盐和除游离的荧光素，则可选用粗、中粒度的G28或G500，G250多用于分离蛋白质单体，G200多用于分离蛋白质凝胶聚合体等。
2．凝胶的预处理称取适量的凝胶加入过量的缓冲液在冰箱（或室温）中充分膨胀，或在沸水中煮，膨胀时间应根据不同型号的凝胶而定（）。
为使粒子均匀一致需进行浮选，即加入凝胶粒子后，轻轻搅拌，静置20min，倾去沉淀的粒子，如此反复数次即可。
3．装柱层析柱的选择一般根据分离样品的种类和样品的数量而定。纯化蛋白质时，柱床体积应为样品体积的25～100倍。去盐、游离荧光素约为样品体积的4～10倍。柱太短，影响分离效果。柱长一些，分离效果好，但柱太长，则延长分离时间，样品也稀释过度。层析柱的内径也要选择适当。内径过细，会发生“器壁效应”，即靠近管壁的流速要大于中心的流速影响分离效果。所以层析柱的内径和高度应有一定的比例。对于除盐来说应为1︰5～1︰25；对于纯化蛋白质来说应为1︰20～1︰100。
装柱过程基本同离子交换层析柱。
4．加样与洗脱样品体积不宜过多，最好为床体积的1％～5%，最多不要超过10%。样品浓度也不宜过大，浓度过大粘度大，分离效果差，一般不超过4%。
洗脱液应与膨胀一致，否则更换溶剂，凝胶体积会发生变化，影响分离效果。洗脱液要有一定的离子强度和pH值。分离血清蛋白常用0.02～0.1Mol/L pH 6.9~8.0的PBS液（0.14Mol/L NaCl）和0.1Mol/L pH8.0Tris-HCl缓冲盐溶液（0.14Mol/L NaCl）。
5．洗脱液收集同离子交换层析。
6．凝胶柱的重复使用与保存当样品的各组分全部洗脱下来之后，即可加入新的样品，继续使用。保存方法有三种：
⑴在液相中保存最方便，即于凝胶悬液中加入防腐剂（一般为0.02%N2N3或0.002%洗必泰）或高压灭菌后4℃保存。此法至少可以保存半年以上。
⑵用完后，以水冲洗，然后用60%~70%酒精液冲洗，凝胶体积缩小，即在半收缩状态下保存。
⑶长期不用者，最好以干燥状态保存，即水洗净后，用含乙醇的水洗，逐渐加大乙醇用量，最后用95%的乙醇洗，可全部去水，再用乙烯去除乙醇，抽滤干，于60℃~80℃干燥后保存。
层析技术的应用 一、层析技术的原理和分类 （一）层析技术的原理 层析法是目前广泛应用的一种分离技术。本世纪初俄国植物学家M.Tswett发现并使用这一技术证明了植物的叶子中不仅有叶绿素还含有其它色素。现在层析法已成为生物化学、分子生物学及其它学科领域有效的分离分析工具之一。 层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成：一是固定相，它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分；另一是流动相，即可以流动的物质，如水和各种溶媒。当待分离的混合物随溶媒（流动相）通过固定相时，由于各组份的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量对比）不同，而且随溶媒向前移动，各组份不断地在两相中进行再分配。与固定相相互作用力越弱的组份，随流动相移动时受到的阻滞作用小，向前移动的速度快。反之，与固定相相互作用越强的组份，向前移动速度越慢。分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组份，从而达到将各组份分离的目的。 （二）层析法分类见表16-5～7 （三）层析法的特点与应用 表16-5按两相所处状态分类 层析法是根据物质的理化性质不同而建立的分离分析方法。根据层析峰的位置及峰高或峰面积，可以定性及定量。层析法与光学、电学或电化学仪器连用，可检测出层析后各组份的浓度或质量，同时绘出层
析图。层析仪与电子计算机联用，可使操作及数据处理自动化，大大缩短分析时间。由于层析法具有分辨率高、灵敏度高、选择性好、速度快等特点，因此适用于杂质多、含量少的复杂样品分析，尤其适用于生物样品的分离分析。近年来，已成为生物化学及分子生物学常用的分析方法。在医药卫生、环境化学、高分子材料、石油化工等方面也得到了广泛的应用。 表16-6按层析原理分类 表16-7按操作形式不同分类
ZSM-5分子筛的合成及表征 摘要以正丁胺为模板剂，白炭黑为硅源，硫酸铝为铝源，采用水热法合成ZSM-5分子筛。用X射线衍射(XRD)、热重分析(TGA)等手段对其进行了表征。 关键词ZSM-5分子筛；合成；水热法 ZSM-5 型分子筛是目前重要的分子筛催化材料之一，广泛应用于石油加工、煤化工与精细化工等催化领域[1]。高硅ZSM-5分子筛通常以有机胺为模板剂水热法进行合成，有机模板剂合成具有适用pH范围广，晶型规整等优点。苏建明等[2]以正丁胺为模板剂，合成出高硅铝比的ZSM-5分子筛。孙慧勇[3]等人分别以正丁胺、乙二胺和己二胺作模板剂，用水热合成法制备了粒径在200-1000nm的小晶粒ZSM-5分子筛。本文采用直接配料的方法，以正丁胺为模板剂水热法合成出了ZSM-5沸石分子筛，并用XRD和TGA对其进行了表征。 1 实验部分 1.1 试剂与仪器 氢氧化钠（NaOH(A.R.)）；硫酸铝（Al2(SO4)3·18H2O），化学纯，97.0%, 天津市化学试剂三厂）；白炭黑（C.P.）；正丁胺（C4H11N(A.R.)）；氯化钠（A.R.）；去离子水. X射线衍射仪；电热恒温箱；电磁搅拌器；吸虑装置；不锈钢反应釜；电子天平；烧杯等. 1.2实验过程
(1) 溶液的配制 A溶液：称取0.375g氢氧化钠(NaOH)和3.21氯化钠（NaCl），溶于20mL去离子水中，然后加入2.47g白炭黑，以磁搅拌器搅拌成均匀胶体。 B溶液：称取0.326g硫酸铝，置于100mL烧杯中，加入10mL去离子水，搅拌至全部溶解。 (2) 成胶过程 将B溶液滴加至正在搅拌的A溶液中，搅拌10min至均匀为止，然后加入1.36mL正丁胺，搅拌均匀。用广泛pH试纸测混合胶体的pH。 (3) 晶化与产物处理 把成胶的混合物装入聚四氟乙烯釜套中，然后放入不锈钢反应釜中，拧紧釜盖，放入电热恒温箱中于180℃晶化7d左右，取出。以水冷至室温后，将产物吸虑，水洗至pH=8~9，于110℃干燥得ZSM-5沸石分子筛原粉。 Synthesis and characterization of ZSM-5 zeolite Abstract ZSM-5 zeolite is synthesized by the hydrothermal synthesis method；with white carbon black as silica source；with aluminum sulfate as aluminum source. The prepared samples were characterized by XRD and TGA. Key words ZSM-5 zeolite; synthesis; hydrothermal method
色谱法的分类及其原理 （一）按两相状态 气相色谱法:1、气固色谱法 2、气液色谱法 液相色谱法:1、液固色谱法 2、液液色谱法 （二）按固定相的几何形式 1、柱色谱法(column chromatography) ：柱色谱法是将固定相装在一金属或玻璃柱中或是将固定相附着在毛细管内壁上做成色谱柱，试样从柱头到柱尾沿一个方向移动而进行分离的色谱法 2、纸色谱法（paper chromatography）：纸色谱法是利用滤纸作固定液的载体，把试样点在滤纸上，然后用溶剂展开，各组分在滤纸的不同位置以斑点形式显现，根据滤纸上斑点位置及大小进行定性和定量分析。 3、薄层色谱法(thin-layer chromatography, TLC) ：薄层色谱法是将适当粒度的吸附剂作为固定相涂布在平板上形成薄层，然后用与纸色谱法类似的方法操作以达到分离目的。 （三）按分离原理 按色谱法分离所依据的物理或物理化学性质的不同，又可将其分为：
1、吸附色谱法：利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差别而使之分离的色谱法称为吸附色谱法。适于分离不同种类的化合物（例如，分离醇类与芳香烃）。 2、分配色谱法：利用固定液对不同组分分配性能的差别而使之分离的色谱法称为分配色谱法。 3、离子交换色谱法：利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种分离分析方法，利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子交换色谱主要是用来分离离子或可离解的化合物。它不仅广泛地应用于无机离子的分离，而且广泛地应用于有机和生物物质，如氨基酸、核酸、蛋白质等的分离。 4、尺寸排阻色谱法：是按分子大小顺序进行分离的一种色谱方法，体积大的分子不能渗透到凝胶孔穴中去而被排阻，较早的淋洗出来；中等体积的分子部分渗透；小分子可完全渗透入内，最后洗出色谱柱。这样，样品分子基本按其分子大小先后排阻，从柱中流出。被广泛应用于大分子分级，即用来分析大分子物质相对分子质量的分布。 5、亲和色谱法：相互间具有高度特异亲和性的二种物质之一作为固定相，利用与固定相不同程度的亲和性，使成分与杂质分离的色谱法。例如利用酶与基质（或抑制剂）、抗原与抗体，激素与受体、外源凝集素与多糖类及核酸的碱基对等之间的专一的相互作用，使相互作用物质之一方与不溶性担体形成共价结合化合物，
近年来分子筛在“环保催化”中应用亦发展很快。分子筛在工业催化过程的成功应用激励了分子筛合成、改性、表征、应用研究的广泛开展。那么，3a型分子筛是什么？为此，安徽天普克环保吸附材料有限公司为大家总结了相关信息，希望能够为大家带来帮助。 3A分子筛，是一种结晶态铝硅酸盐矿物球粒，主要用于双层玻璃夹层中空气的干燥，是组成中空玻璃不可或缺的、也是至关重要的一部分，那为什么只能用3A分子筛来做中空玻璃的干燥剂呢？3A 型分子筛的晶格孔道只有3埃，是所有分子筛当中孔道最小的分子筛，只能吸收水分，不能吸收空气中的任何其他成分，因为水分的临界直径为2.8埃。其他任何型号的分子筛都会吸附空气当中的氧气或者氮气，而且这种吸附能力会因为温度的微小变化而十分敏感。当温度略微降低，其他型号的分子筛会大量的将中空玻璃内的空气吸附，导致真空状态；当温度升高时，其他型号的分子筛又会把大量的空气
释放到中空玻璃间隔层中，导致中空玻璃内空气膨胀。随着昼夜温差与季节更替的变换，中空玻璃极易因膨胀和收缩扭曲破碎，寿命缩短。 安徽天普克环保吸附材料有限公司是原上海摩力克分子筛有限公司直属公司,本公司成立于2004年，由于生产量扩增，本公司在安徽合肥空港寿县新桥产业园投资建设生产基地。公司目前拥有年产2000吨分子筛、1500吨活性氧化铝生产线各一条。 二期工程将建成4000吨分子筛生产线。公司全面推行ISO9001质量管理体系，建有现代化的实验室和质量控制中心。现有工程技术人员20人，其中工程师8人。 产品系列化、经营多元化，这些都是企业的发展方针，而OEM----更是公司多年的经营模式，并且得到广泛好评。我们的用户涉及石油、化工、冶金、汽车、空调、电子仪表等行业，我们的客户群不仅是在国内而且遍及东南亚、欧美等地。公司热忱欢迎国内外客商与我们真诚合作。我们将以精美的产品、可靠的技术、精益求精的
堆积密度堆积密度是把粉尘或者粉料自由填充于某一容器中，在刚填充完成后所测得的单位体积质量。床料的堆积密度ρb与床料密度ρp之间的关系是ρb= ρp（1-ε）ε为物料静止时的空隙率，ρb为堆积密度，需要测量，ρp为真实密度，可以查阅文献。床料的堆积密度可分为松散堆积密度和振实堆积密度 。其中，松散堆积密度包括颗粒内外孔及颗粒间空隙的松散颗粒堆积体的平均密度，用处于自然堆积状态的未经振实的颗粒物料的总质量除以堆积物料的总体积 求得。振实堆积密度不包括颗粒内外孔及颗粒间空隙，它是经振实后的颗粒堆积体的平均密度。需要补充的是：堆积密度的单位为：g/cm3 或kg/m3，可见 ，密度越大的物质颗粒是越大的。堆积密度：堆积密度是指散粒材料或粉状材料，在自然堆积状态下单位体积的质量。——堆积密度自然堆积体积(含材料间 空隙) 颗粒材料正好装满容器，测量该容器的容积V 计算式ρ0'= m/ v0 ' =m /(V+ VP + Vv ) 式中ρ0'--- 材料的堆积密度，kg/ m3 。VP --- 颗 粒内部孔隙的体积，m3 。Vv --- 颗粒间空隙的体积，m3 。注意：自然堆积状态下的体积含颗粒内部的孔隙积及颗粒之间的空隙体积。 扩展阅读： 被处理液与吸附剂搅拌混合，而被处理液没有自上而下流过吸附剂的流动，这种吸附操作叫静态吸附。 分子筛吸附 分子筛吸附分为变温吸附和变压吸附两大类。1 q# o$ Q! N, W2 y 采用哪种方式主要由被吸附物质的性质决定。1 A e4 d) U1 P0 | 一般的分子筛都是在低温高压下，实现吸附，在低压高温下实现脱附。并且一般吸附过程是一个放热过程，脱附过程是一个吸热过程。5 y' b) q: Q1 X; w' C. i# l 吸附温差较小，一般把它近似看做是变压吸附。1 ?) c$ w* R# W3 n 吸附温差较大，就要考虑由于温差大引起脱附产生的副作用了。 至于说吸附的温升范围主要还是取决于生产任务，被处理物质含量，以及温升因素对吸附速度产生的影响，温升尽量减少为好 4A分子筛的特性 发布日期： 2010-07-21 作者：来源： 1.离子交换性能----软化水质功能：4A分子筛骨架中的每一个氧原子都为相邻的两个四面体所共有，这种结构形成了可为阳离子和水分子占据的大晶穴，而且这些阳离子和水分子有较大的移动性，可进 行阳离子交换和可逆脱水。4A分子筛的离子交换是在带有铝离子的骨架上进行的，每一个铝离子所带 的一个负电荷，不仅可以结合钠离子，也可以结合其它阳离子。钙、镁离子可以进入原来钠离子占据 的大晶穴，将4A分子筛中的钠离子替换下来----即4A分子筛中的钠离子可进行离子交换，可与硬水 中的Ca2+、、Mg2+离子进行交换，从而达到软化水质的目的。 4A分子筛结合钙镁离子的速度比三聚磷酸钠慢，且与镁离子的结合能力较弱。但4A分子筛可将水 溶液中少量有害的重金属离子（如Pb2+、Cd2+、Hg2+）能很容易快速除去，对净化水质有着十分重要 的意义。
对某一类沸石究竟那些性质需要表征，则要视其用途而决定。A型用于洗涤工业，其晶体形貌和晶粒大小十分重要，酸性和稳定性则居于次要地位。Y型主要用于催化裂化催化剂，酸性和稳定性却是第一位的。ZSM-5用作择形催化剂，其结构、孔径、化学组成、酸性、晶粒晶体形貌大小主要，骨架硅铝比稳定性次要。 一、晶体结构和缺陷测定 Collection of Simulated XRD Powder Patterns for Zeolites，沸石分子筛的衍射图谱和晶体数据。 Atlas of Zeolite Structure Types，沸石的立体结构图和孔道截面图。 将实验测得的XRD图谱与已知的标准图谱相比较，发现多或少一些衍射峰，说明样品中可能存在其他的晶相，或者不具有预期的结构。 测定主要衍射峰的强度可以判断样品的结晶度。取样品一个或几个特征峰强度之和与标准样品相比较，可计算样品的相对结晶度。样品的hkl峰强度/标样的hkl峰强度（衍射谱图中各衍射峰的晶格参数）。 二、孔结构 用不同尺寸的探针分子来测定沸石的孔径，比沸石孔径小的才能被吸附，大的分子被排斥在外。多孔材料孔结构表面性质同位素XeNMR谱，氙气体积大只适用于大孔径分子筛，测量核磁共振谱中Xe的化学位移，获得沸石孔径和孔道畅通情况的信息，研究负载金属的分散度和结焦情况。 三、化学组成 最感兴趣的是Na、Al、Si的含量，表示为残钠和硅铝比。X射线荧光光谱、化学分析湿法分析：沸石加浓硫酸加热至出现SO3白烟，水稀释，过滤保留滤液1，滤渣干燥，1000度灼烧称重a。加入HF酸蒸发至干再1000度灼烧称重b。a-b即SiO2含量。灼烧残渣加过硫酸钾加热熔融，将焙融物溶于水中与滤液1合并用原子吸收光谱法分析Na 和Al含量。繁琐 四、酸性 沸石上的酸性位主要是质子酸位，经高温处理后转变成非质子酸位 Si H O Al Si H O Al Si O- Al Si + Al 1.滴定法测定各种酸强度的酸性位数目：样品粉末分散在非极性溶剂中加入指示剂，用正丁胺滴定到中性，根据消耗量计算样品的酸强度分布。缺点：不区分质子酸和非质子酸位。 2.程序升温脱附法，用量热法判断酸强度，吸附时会放出中和热，酸性愈强放热越多。达平衡时间长用脱附代替吸附过程。NH3-TPD分析，吸附碱性分子后进行程序升温脱附(10K/min)，吸附在弱酸位上的碱性分子首先脱出，强酸位上的较高温度才能脱出，得到程序升温脱附图TPD谱。LT低温峰表示由弱酸位脱出的NH3，HT强酸位。由峰面积可得到强弱酸位数目，峰温可推测酸性位的强度。步骤：样品准备活化色谱开机吸附吹扫脱附定量色谱关机数据处理mmol/g。缺点：不区分质子非质子酸位，低温峰还包含非酸性位上脱附，扩散限制使孔道中NH3脱附延迟使脱附温度提高。 3.红外光谱法：测定样品中O-H键振动频率，键越弱频率越低酸强度越高。3740硅羟基峰,3640大笼酸性羟基峰,3540小。硅铝比增加酸性强酸性点少，低硅铝比生命短。Si-O(H)-Al次邻位上无铝时酸性强，铝多（被分摊）中心数量多强度弱。 4.核磁共振法：谱图上酸性羟基位置与OH键强度有关，化学位移越大，OH键越弱酸性越强。峰面积对应酸性位数目。 五、稳定性：经过热、水热或化学处理后用XRD测定结晶保留度，了解晶体状况。（DTA法）晶体破坏时放出热量从DTA谱上高温放热峰可测出晶格破坏温度。一般在1000度左右。良好的耐酸性和热稳定性，天然较合成优越。 六、吸附性能：表面原子或分子受力不对称、有吸附力场存在，吸附力称为色散力，固体表面对气体或液体具有吸附作用的原因。只有直径比较小的分子才能通过孔道被吸附，选择性吸附。晶格孔穴中分布有阳离子，离子周围还有较大的静电力，沸石因由色散力和静电力共同作用故吸附力特别大。 七、离子交换性能：沸石可以进行可逆的阳离子交换，改进沸石的吸附和催化性能。 八、催化性能：沸石做催化剂与结构中的酸性位置、孔穴大小以及阳离子交换性能有关。天然沸石不直接作催化剂的，需要离子交换法改为H型沸石。沸石经质子交换脱除正离子后表面上具有丰富的质子酸位。表面酸位与反应物分子作用形成正碳离子。 电中性[SiO4]四面体被负一价[AlO4]四面体取代使晶格中部分氧出现负电荷。SiAlO和格架外金属离子一起组成催化活性中心，金属阳离子高度分散状态。 活性位置在晶体内部，反应物分析必须扩散到沸石晶格内部才能发生反应，沸石的孔径大小和孔道的连接方式影响催化性能。一维孔道容易堵塞，三维有利于反应物进出。A型4.2?没催化活性Y型9?有机分子顺利扩散。
分子筛的合成、表征及性能研究
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分子筛的合成、表征及性能研究 分子筛材料，广义上指结构中有规整而均匀的孔道，孔径为分子大小的数量级，它只允许直径比孔径小的分子进入，因此能将混合物中的分子按大小加以筛分；狭义上分子筛是结晶态的硅酸盐或硅铝酸盐，由硅氧四面体或铝氧四面体通过氧桥键相连而形成。 分子筛按骨架元素组成可分为硅铝类分子筛、磷铝类分子筛和骨架杂原子分子筛。按孔道大小划分，小于2 nm称为微孔分子筛，2～50 nm称为介孔分子筛，大于50 nm称为大孔分子筛。按照分子筛中硅铝比的不同，可以分为A 型(1.5～2.0) ，X 型(2.1～3.0)，Y 型(3.1～6.0)，丝光沸石(9～11)，高硅型沸石(如Z S M－5) 等，其通式为：MO.Al2O3.xSiO2.yH2O，其中M代表K、Na、Ca等。商品分子筛常用前缀数码将晶体结构不同的分子筛加以分类,如3A 型、4A型、5A型分子筛等。4A型即孔径约为4A；含Na+的A型分子筛记作Na-A,若其中Na+被K+置换,孔径约为3A，即为3A型分子筛；如Na-A中有1/3以上的Na+被Ca2+置换,孔径约为5A，即为5A型分子筛。X型分子筛称为 13X（又称Na-X型）分子筛；用Ca2+交换13X分子筛中的Na+，形成孔径为9A的分子筛晶体，称为 10X（又称Ca-X型）分子筛。 A型分子筛结构，类似于NaCl的立方晶系结构，如将NaCl晶格中的Na+和Cl-全部换成β笼，并将相邻的β笼用γ笼联结起来，就会得到A型分子筛的晶体结构；X型和Y型分子筛结构类似于金刚石的密堆立方晶系结构，如以β笼这种结构单元取代金刚石的碳原子结点，且用六方柱笼将相邻的两个β笼联结，就得到了X和Y型分子筛结构；丝光沸石型分子筛结构，没有笼，是层状结构，结
胶体金标记的全定量免疫层 析技术的原理 -标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII
胶体金标记的全定量免疫层析技术的原理 从定性、半定量向全定量是即时检验（POCT）技术发展的一个趋势。全定量的POCT检测技术有多种原理。本文主要介绍胶体金标记的全定量免疫层析技术的原理。 一、胶体金标记的全定量免疫层析POCT试剂装置结构示意图及作用 1、吸收垫：吸收多余液体。 2、 PVC底板：提供试剂封装外壳。 3、 C1、C2：标准质控区。羊抗鼠抗体结合于硝酸纤维膜上。 4、 T：检测区。鼠源性单克隆二抗。 5、硝酸纤维素膜：提供抗原抗体反应的固相载体。 6、胶体金垫：含胶体金标记的鼠源性单克隆抗体。 7、样品吸收垫：吸收样品液体。 二、原理 该方法的免疫学原理是一个双抗体夹心法。 样品加入样品吸收垫，样品中的液体首先溶解胶体金垫中含有的胶体金标记的鼠源性单克隆抗体。其次样品中待测抗原与胶体金颗粒标记的鼠源性单克隆抗体结合，形成抗原-抗体*胶体金复合物，并靠毛细作用向检测线移动。在硝酸纤维薄膜的检测线上固定有另一鼠源性单克隆二抗。当样品层析至检测线时，可以进一步形成抗体-抗原-抗体*胶体金双抗体夹心复合物，并在检测线上聚积显现出一条可见的显色反应。无显色反应则表示样品中无抗原存在。而胶体金的量反应了待测抗原的量。从加样垫中泳动过来的过量胶体金标记的单克隆抗体是鼠源性的，无论携带抗原与否，均可被固定于标准的羊抗鼠抗体所捕获，形成显色反应，这种显色反应，既代表了整个反应体系是正确的，同时C1、C2区的显色反应的深浅，与检测区中被测抗原的量呈对应关系。胶体金颗粒在特定波长下，对光的吸收和散射与胶体金颗粒的量相关，通过光电感应器检测胶体金颗粒对光的吸收和散射，从而获得待测抗原的量。 三、讨论 全定量是POCT的发展趋势，采用两点定标法是全定量的一个重要标志，只有两点定标才有可能实现真正的全定量。 2
1.凝胶层析法的基本原理？ 答：层析须在两相系统间进行。一相是固定相，需支持物，是固体或液体。另一相为流动相，是液体或气体。当流动相流经固定相时，被分离物质在两相间的分配，由平衡状态到失去平衡到又恢复平衡，即不断经历吸附和解吸的过程。 2.凝胶层析法常用凝胶的种类和特点？ 聚丙烯酰胺凝胶 是一种人工合成凝胶，是以丙烯酰胺为单位，由甲叉双丙烯酰胺交联 成的， 凝胶色谱法 经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶。交联剂越多，孔隙越小。聚丙烯酰胺凝胶的商品为生物胶—P ( Bio-Gel P),由日本tosoh的TSKGE啲pw系列，适合蛋白和多糖的纯化。 交联葡聚糖凝胶 ⑴Sephadex G交联葡聚糖的商品名为Sephadex，不同规格型号的葡聚 糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。例如，G-25 为每克凝胶膨胀时吸水 2.5克，同样G-200克每克干胶吸水20克。交联葡 聚糖凝胶的种类有G-10，G-15, G-25，G-50，G-75，G-100，G-150，和G-200。 因此，“G'反映，凝胶的交联程度，膨胀程度及分部范围。 ⑵Sephadex LH-20，是一Sephadex G -25的羧丙基衍生物，能溶于水及亲脂溶剂，用于分离不溶于水的物质。 琼脂糖凝胶 商品名很多，常见的有，Sepharose (瑞典，pharmacia )，
Bio-Gel-A （美国Bio-Rad ）等。琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢 键来维持网状结构，网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下，它 的结构是稳定的，可以在许多条件下使用 （如水，pH4-9范围内的盐溶液） 琼脂糖凝胶在40C 以上开始融化，也不能高压消毒，可用化学灭菌活处理。 聚苯乙烯凝胶 商品为Styrogel ，具有大网孔结构， 可用于分离分子量 1600到40,000， 000的生物大分子，适用于有机多聚物，分子量测定和脂溶性天然物的分级， 凝胶机械强度好，洗脱剂可用甲基亚砜。 3. 不同性质的物料（热敏性、高粘度、易结垢或易析出晶体、发泡性、腐蚀性） 如何蒸 发浓缩设备？ 答：（一）循环型蒸发器 特点：溶液在蒸发器中循环流动，因而可以提高传热效果。由于引起循环 运动的原因不同。有分为自然循环型和强制循环型两类。 自然循环：由于溶液受热程度不同产生密度差引起 强制循环：用泵迫使溶液沿一定方向流动 1?中央循环管式蒸发器 中央循环管式蒸发器为最常见的蒸发器，其结构如图5-2所示, 它主 要由加热室、蒸发室、中央循环管和除沫器组成。蒸发器的加 热器由垂直 管束构成，管束中央有一根直径较大的管子，称为中央 循环管，其截面积 一般为管束总截面积的 40%-100%当加热蒸汽 （介质）在管间冷凝放热时， 由于加热管束内单位体积溶液的受热 面积远大于中央循环管内溶液的受热 面积， 因此，管束中溶液的相 凝胶色谱法 】如嘗主.2 3-中火咼环口,