类别护理常规生效日期 2004.1
部门妇科病区修改日期 2010.4
题目葡萄胎护理常规页数 1/2
主任签名：护士长签名：
一、定义
葡萄胎也称水泡状胎块，因妊娠后胎盘绒毛滋养细胞增生、间质水肿，而形成大小不一的水泡，水泡间借蒂相连成串，形如葡萄得名。包括完全性葡萄胎和部分性葡萄胎。
二、病因与发病机制
完全性葡萄胎与地域差异（种族因素）、营养状况与社会经济因素、年龄、前次妊娠有葡萄胎史有关。
部分性葡萄胎原因尚不完全清楚。
完全性和部分性葡萄胎核型和病理特征比较：
1、完全性葡萄胎：核型为46，XX（90%）和46，XY，缺乏胚胎或胎儿组织，弥漫绒毛水肿，滋养细胞增生。
2、部分性葡萄胎：核型为三倍体，存在胚胎或胎儿组织、绒毛呈扇形、滋养层基质内陷、羊膜、胎源性血管。绒毛水肿，滋养细胞增生程度较轻。
三、临床表现
随着超声检查和HCG测定的广泛应用，典型症状的葡萄胎越来越少见。
典型症状：停经后阴道流血，子宫异常增大、变软，妊娠呕吐，子痫前期征象，卵巢黄素化囊肿，腹痛，甲状腺功能亢进征象。
四、病情观察要点
严密观察腹痛及阴道出血情况，记录出血量，出血多时除密切观察病人的血压、脉搏、呼吸外，配合医生做好抢救工作，及时做好手术准备。认真观察转移灶症状，发现异常，立即通知医生并配合处理。
五、治疗原则
1、一经确诊，应及时清宫，有严重并发症或合并症时先对症处理，稳定病情。首选吸刮术，在手术室内由有经验的医生操作，避免穿孔，在充分扩张宫颈管和开始吸宫后使用缩宫素，每次刮出物，必须送组织学检查。
2、卵巢黄素化囊肿：一般不作处理。
3、预防性化疗：不作常规推荐，不能替代随访，适用于有高危因素且随访困难者。
4、子宫切除术：适用于年龄较大、无生育要求者，不能预防子宫外转移和替代随访。
5、随访：对早期发现滋养细胞肿瘤有重要意义。随访内容：HCG定量测定、注意有无异常阴道流血等症状、妇科检查，定期或必要时作B型超声、胸部X
线摄片或CT。HCG随访：葡萄胎清宫后每周一次，直至连续3次正常，然后每个月一次持续至少半年，此后可每半年一次，共随访2年，国外也推荐每2个月一
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次，共随访1年。
6、避孕：时间一年；避孕套或口服避孕药。
六、主要护理问题及相关依据
1、焦虑：与担心清宫手术及预后有关。
2、功能障碍性悲哀：与分娩的期望得不到满足及对将来妊娠担心有关。
3、有感染的危险：与长期阴道流血、贫血造成免疫力下降有关。
七、主要护理问题的护理措施
1、焦虑
（1）做好心理护理，建立良好的护患关系，告知病情及大致的治疗经过，清宫的必要性，及预后等知识。
（2）做好清宫前准备及术中护理。
2、功能障碍性悲哀
（1）评估病人对疾病的心理承受能力，鼓励病人表达不能良好妊娠结局的悲哀，告诉病人2年后可正常怀孕，让病人以比较平静的心理接受手术。
（2）做好健康宣教，坚持正规的治疗和随访是根治葡萄胎的基础，懂得监测HCG的意义，鼓励病人进食，增强机体的抵抗力。注意休息，保持外阴清洁，以防感染。节制性生活，做好避孕指导。
3、有感染的危险
（1）做好会阴护理，保持会阴清洁，及时更换会阴垫，排出物送病检。
（2）监测体温、血常规，严密观察病情，严格无菌操作，抗炎、止血治疗。
（3）注意休息、营养，补铁饮食。
八、健康指导
1、指导患者了解疾病发生、发展过程及坚持正规的治疗和随访是根治葡萄胎的基础，懂得监测HCG的意义。
2、告诉病人进高蛋白、高维生素、易消化饮食，适当活动，保证充足的睡眠，以改善机体的抵抗力。
3、保持会阴清洁和室内空气清新，每次刮宫手术后禁止性生活1个月以防感染。
4、做好随访指导，随访内容：HCG定量测定、注意有无异常阴道流血等症状、妇科检查，定期或必要时作B型超声、胸部X线摄片或CT。HCG随访：葡萄胎清宫后每周一次，直至连续3次正常，然后每个月一次持续至少半年，此后可每半年一次，共随访2年，国外也推荐每2个月一次，共随访1年。
葡萄胎的护理查房 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020
葡萄胎的护理查房 概述 葡萄胎是妊娠滋养细胞疾病的一种,又称水泡状胎块,指妊娠后胎盘绒毛滋养细胞异常增生,终末绒毛水样变性,呈相连成串的水泡,状如葡萄. 病因: 不太清楚,与营养不良,病毒感染,种族因素,内分泌失调,高龄等有关. 葡萄胎的具体症状: 1.停经后阴道出血:是最常见的症状.常在停8-12周阴道不规则出血,量多少不定,当葡萄 胎排出前将发生大量出血,严重时可危及生命. 2.子宫增大速度快:由于葡萄胎的迅速增大以及宫腔内出血,常使子宫迅速增大,子宫大于 正常妊娠相应停经月份. 3.下腹痛:因葡萄胎快速增长,子宫迅速扩张所致,为阵发性下腹痛,一般不剧烈,可忍受. 4.妊娠欧吐:由于滋养细胞过度增生产生大量的绒毛膜促性腺激素(HCG),使得葡萄胎患者 的呕吐较正常妊娠出现的早,症状重,且持续的时间长. 5.妊娠高血压综合征表现:少数病人24周前出现高血压,水肿,蛋白尿,严重者出现抽搐, 昏迷,心力衰竭. 6.卵巢黄素化囊肿:由于葡萄胎患者产生大量的HCG,刺激卵巢发生多房性囊肿改变.这种 囊肿多在葡萄胎排出后1-3个月消失,有时候需要6个月,消失后对卵巢功能无影响. 7.甲状腺功能亢进表现: 少数患者出现轻度的甲状腺亢进表现,如心动过速,皮肤潮湿和 振颤.因而,一段停经后出现上述症状应及时就医,并进行HCG和B超检查。
葡萄胎的诊断 1.病史停经后阴道出血 2.体征子宫增大变软，刮出物为水泡样组织。 3.辅助检查血HCG〉200000mlu/ml 4.B超子宫内膜异超增厚不均，宫内孕囊样回声，未见胚胎组织，盆腔积液。 5.病理宫腔内容物部分绒毛水肿，中央见水泡，滋养叶细胞轻度增生，符合部分性水泡 状胎块。 葡萄胎的治疗 1.迅速清除宫腔内容物 a)吸宫，轻柔刮宫 b)刮出物送病检 2.预防性的治疗 a)子宫切除：年龄大于40岁无生育要求。 b)预防性化疗：有恶性高危因素 病案分析 患者ww，女性，26岁，0－0－0－0，因“停经2+月，阴道流血半天”于3月31日拟“1、难免流产2、滋养细胞疾病”入院，患者停经后自测尿妊娠试验：阳性。停经后检
类别护理常规生效日期 2004.1 部门妇科病区修改日期 2010.4 题目葡萄胎护理常规页数 1/2 主任签名：护士长签名： 一、定义 葡萄胎也称水泡状胎块，因妊娠后胎盘绒毛滋养细胞增生、间质水肿，而形成大小不一的水泡，水泡间借蒂相连成串，形如葡萄得名。包括完全性葡萄胎和部分性葡萄胎。 二、病因与发病机制 完全性葡萄胎与地域差异（种族因素）、营养状况与社会经济因素、年龄、前次妊娠有葡萄胎史有关。 部分性葡萄胎原因尚不完全清楚。 完全性和部分性葡萄胎核型和病理特征比较： 1、完全性葡萄胎：核型为46，XX（90%）和46，XY，缺乏胚胎或胎儿组织，弥漫绒毛水肿，滋养细胞增生。 2、部分性葡萄胎：核型为三倍体，存在胚胎或胎儿组织、绒毛呈扇形、滋养层基质内陷、羊膜、胎源性血管。绒毛水肿，滋养细胞增生程度较轻。 三、临床表现 随着超声检查和HCG测定的广泛应用，典型症状的葡萄胎越来越少见。 典型症状：停经后阴道流血，子宫异常增大、变软，妊娠呕吐，子痫前期征象，卵巢黄素化囊肿，腹痛，甲状腺功能亢进征象。 四、病情观察要点 严密观察腹痛及阴道出血情况，记录出血量，出血多时除密切观察病人的血压、脉搏、呼吸外，配合医生做好抢救工作，及时做好手术准备。认真观察转移灶症状，发现异常，立即通知医生并配合处理。 五、治疗原则 1、一经确诊，应及时清宫，有严重并发症或合并症时先对症处理，稳定病情。首选吸刮术，在手术室内由有经验的医生操作，避免穿孔，在充分扩张宫颈管和开始吸宫后使用缩宫素，每次刮出物，必须送组织学检查。 2、卵巢黄素化囊肿：一般不作处理。 3、预防性化疗：不作常规推荐，不能替代随访，适用于有高危因素且随访困难者。 4、子宫切除术：适用于年龄较大、无生育要求者，不能预防子宫外转移和替代随访。 5、随访：对早期发现滋养细胞肿瘤有重要意义。随访内容：HCG定量测定、注意有无异常阴道流血等症状、妇科检查，定期或必要时作B型超声、胸部X 线摄片或CT。HCG随访：葡萄胎清宫后每周一次，直至连续3次正常，然后每个月一次持续至少半年，此后可每半年一次，共随访2年，国外也推荐每2个月一
华科基因ABO血型分型方法 按照Bernstein三复等位基因学说，ABO基因座主要有三个等位基因A、B和O。A、B对O为显性，O为隐性。ABO血型的表型与基因型的关系是：A型为AA或AO；B型为BB 或BO；AB型为AB；O型为OO。因为隐性基因O存在，ABO基因型不能直接用凝集反应来确定，但可通过DNA分型技术直接检测基因型，或通过表型的家系调查来推定。 ABO血型分型方法 一、ABO血型血清学分型方法 ABO血型是根据红细胞与特异性抗体的反应来分型。即用抗A抗体判定A抗原，用抗B抗体判定B抗原，这种检查法称作正定型试验(direct grouping)。同时依据血清中的凝集素与标准型别红细胞膜上的凝集原反应的性质来检验结果。即用标准的A型红细胞判定抗A抗体，用标准的B型红细胞判定抗B抗体，称作反定型试验（reverse grouping)。为使结果准确，应进行正反两个试验来分型，同时也应用抗H抗体判定H抗原。当正反试验的结果与常规的ABO分型原则不符的时候,提示可能是弱亚型或变异型。 二、ABO血型DNA分型方法 分子生物学技术将ABO血型分型由血清学水平深入到基因水平。DNA分型方法都是针对核苷酸顺序差异而设计的。常用的有序列特异性引物PCR技术与PCR-RFLP技术等。序列特异性引物PCR(PCR-sequence-specific primers,PCR-SSP)是根据等位基因的序列，设计具有序列特异性的引物，对样本进行DNA分型。该方法是以引物决定分型特异性，具有特异性强、重复性好、结果易于判定的优点。 ABO血型分型可提供以下样本： 常用样本：血液，血痕，带毛囊的毛发，口腔粘膜细胞（口腔拭子）等。 特殊检材：如精斑、混合斑、肌肉、烟蒂、胎儿的羊水等都可以采用。 采样建议： 1.我们建议您采用血痕或口腔棉签作为检测样本，或采用毛发（带毛囊）作为检测样本。 2.如果您的孩子未满四周岁，请采用血痕、口腔棉签作为样本。 3.如果孩子还未出生，则参考羊水样本抽取方法。
葡萄胎患者临床护理 发表时间：2012-03-22T09:07:53.247Z 来源：《中外健康文摘》2012年第2期供稿作者：高月[导读] 葡萄胎是一种良性滋养细胞肿瘤，在欧美国家较少见，而在亚洲，尤其是东南亚各国则较多见。 高月（大庆市中医医院黑龙江大庆 163311） 【中图分类号】R473.71【文献标识码】B【文章编号】1672-5085（2012）2-0393-02 【摘要】葡萄胎是一种良性滋养细胞肿瘤，在欧美国家较少见，而在亚洲，尤其是东南亚各国则较多见。目的讨论葡萄胎患者临床护理。方法配合治疗进行护理。结论阴道出血的病人要绝对卧床休息，保留会阴垫，随时观察出血量及性质，异常情况时及时通知医生。患者阴道出血期间，保持局部的清洁干燥，每日冲洗会阴一次。监测体温及血象变化，及时发现感染征兆。【关键词】葡萄胎护理 一、概述 葡萄胎是一种良性滋养细胞肿瘤，在欧美国家较少见，而在亚洲，尤其是东南亚各国则较多见。葡萄胎均发生于生育年龄妇女，且40岁以上的高龄孕妇中葡萄胎发病率明显升高。 葡萄胎的发病原因迄今为止不完全清楚，存在着很多的假说，但是没有一种假说能够完整地解释本病的发生。 根据葡萄胎的大体所见可将其分为完全性和不完全性两种，前者宫腔全部为大小不等的水疱所填充，水疱间有细蒂相连成串，形状类似未成熟的葡萄，故称葡萄胎；后者为除不等量的水疱外，还有正常的绒毛，此外，还可见到胚胎组织。 二、护理评估 (一)临床症状评估与观察 1．评估年龄及妊娠情况此病均发生于孕龄期女性，有停经史。在停经期间有反复阴道出血。 2．评估症状及体征阴道出血是最常见的症状，常有1～2个月的闭经，迟至2～3个月开始阴道不规则出血，若在排出的血液中发现小葡萄，诊断即可成立。妊娠剧烈呕吐和妊娠高血压综合征也是较常见的症状。由于葡萄胎的迅速增长以及宫腔内出血，子宫体增长速度较快，因此，半数以上在体检时发现子宫大于停经月份。由于滋养细胞的过度增生而产生大量的HCG(绒毛膜促性腺激素)的刺激，使得双侧或单侧卵巢呈多发性囊性改变，囊肿小则仅在显微镜下才能见到，大则可达胎儿头大。一般在葡萄胎排出后数周或数月，黄素化囊肿可以逐渐萎缩、消失，卵巢则恢复正常大小。 3．评估心理社会问题葡萄胎患者均为孕龄期女性，有生育的渴望。部分患者来自农村，经济条件差，营养状况不好，突如其来的疾病，让她们从生育的喜悦一下降到失望的谷底。由于对葡萄胎缺乏足够的认识，她们表现得异常紧张、害怕，接下来的治疗又要承受很大的经济压力。 (二)辅助检查评估 1．肿瘤标记物的检测由于葡萄胎可以产生大量的HCG，故HCG的测定对于葡萄胎的诊断十分重要。葡萄胎患者血清HCG测定远高于正常妊娠，且持续不降，近年来应用与 LH无交叉的β-HCG亚单位作为标记，更为敏感与专一。 2．B超检查 B超检查不能发现完整的胚胎及胎儿，不能发现胎心搏动，同时还表现为“暴风雪”样的改变，这是超声下较特异的征象。近年来阴道B超的应用，可使葡萄胎的诊断提早到妊娠8周左右。 三、护理问题 1．潜在的并发症一出血，与葡萄胎清宫前后随时有可能大出血有关。 2．自理能力缺陷与长期的阴道出血、化疗及手术有关。 3．有感染的危险与长期的阴道出血、化疗或手术，机体抵抗力降低有关。 4．知识缺乏与缺乏对疾病的了解及其相关防护知识有关。 5．营养失调-低于机体需要量与反复阴道出血易造成贫血，以及葡萄胎引起患者恶心、呕吐，摄入量不足有关。 四、护理措施 1．入院护理患者入院后，护士应主动热情接待，向其介绍有关知识及治疗方法和疗效，消除患者紧张焦虑心理，使其能主动配和治疗。 2．阴道出血的护理阴道出血的病人要绝对卧床休息，保留会阴垫，随时观察出血量及性质，异常情况时及时通知医生。 3．预防感染患者阴道出血期间，保持局部的清洁干燥，每日冲洗会阴一次。监测体温及血象变化，及时发现感染征兆。 4．生活护理患者卧床期间，护士应经常巡视，做好生活护理，满足病人的基本生活需要。 5．清宫术的护理葡萄胎一经诊断应立即行清宫术，为防止术中大出血，术前建立有效的静脉通路，备血，准备好抢救措施。术前协助病人排空膀胱，术中严密观察病人一般情况，注意有无面色苍白、出冷汗、口唇发绀的表现，及时测量血压、脉搏，防止出血性休克发生。术后注意观察阴道出血及腹痛情况。 6．化疗的护理部分病人需要进行预防性化疗。 7．心理社会支持入院后加强与患者及家属的沟通，讲解葡萄胎清宫术的注意事项，讲解化疗的相关知识，告诉患者只要积极配合治疗，加强随诊，还有再次妊娠的机会，特别是家属的支持尤为重要，要和患者一起勇敢面对疾病，战胜疾病。 8．健康教育避孕尤为重要，应坚持l～2年。宜选用阴茎套及阴道隔膜。葡萄胎病人有10％～20％恶变可能，因此病人要定期随访。尤其是随访血β-HCG的变化，可早期发现恶变倾向，对疾病预后尤为重要。葡萄胎清宫术后必须每周查β-HCG一次，直到3～4次正常，以后每月一次，半年以后每3个月一次，至少随访2年。随访期间坚持避孕，并注意观察自身症状，出现不规则阴道出血、咯血时及时就诊。参考文献 [1]袁进萍，王秀英.侵蚀性葡萄胎化疗的护理体会.白求恩医学院学报,2007,5(3)：196. [2]周吕菊，陶新陆，丁娟．现代妇产科护理模式[M]．北京：人民卫生出版社，2001：261．
Chapter16 High-Throughput Methods for SNP Genotyping Chunming Ding and Shengnan Jin Abstract Single nucleotide polymorphisms(SNPs)are ideal markers for identifying genes associated with complex diseases for two main reasons.Firstly,SNPs are densely located on the human genome at about one SNP per approximately500–1,000base pairs.Secondly,a large number of commercial platforms are available for semiautomated or fully automated SNP genotyping.These SNP genotyping platforms serve different purposes since they differ in SNP selection,reaction chemistry,signal detection,throughput,cost,and assay flexibility.This chapter aims to give an overview of some of these platforms by explaining the technologies behind each platform and identifying the best application scenarios for each platform through cross-comparison.The readers may delve into more technical details in the following chapters. Key words:Whole genome association,fine mapping,single nucleotide polymorphism,copy number variation,haplotyping. 1.Introduction Single nucleotide polymorphisms(SNPs)are best known as genetic markers in disease-association studies to identify genes associated with complex diseases(1,2).However,SNPs are also used in many other clinically and biologically important applica- tions(3).A large variety of commercial platforms are available for semiautomated or fully automated SNP genotyping analysis.On the basis of the purposes of the study,SNP genotyping can be divided into two domains:whole genome association(WGA)and fine mapping(Fig.16.1).Most of the genotyping platforms can be classified accordingly.This chapter aims to briefly explain the principles behind various platforms which lead to a comparison of these platforms so that the readers will get a quick overview before delving into the technical details of some of these methods in the following chapters. A.A.Komar(ed.),Single Nucleotide Polymorphisms,Methods in Molecular Biology578, DOI10.1007/978-1-60327-411-1_16,aHumana Press,a part of Springer Science+Business Media,LLC2003,2009 245
完全性葡萄胎 有些女性会突然出现闭经、妊娠呕吐这样的怀孕的症状，但是用验孕棒测试有显示不是怀孕，这到底是怎么一回事呢？其实，这是葡萄胎的症状，葡萄胎分为两种情况，一种是完全性葡萄胎，一种是部分性葡萄胎。下面让小编给大家介绍完全性葡萄胎是怎样的病症吧。 完全性葡萄胎 完全性葡萄胎是胎盘绒毛全部受累，无胎儿及其附属物，宫腔内充满水泡。 完全性葡萄胎的染色体基因组是父系来源，即卵子在卵原核缺失或卵原核失活的情况下和精原核结合后发育形成。染色体核型为二倍体，其中90%为46,XX，由一个空卵(无基因物质卵)与一个单倍体精子(23，X)受精，经自身复制恢复为二倍体(46,XX)，再生长发育而成，称为空卵受精。其少数核型为46，XY，这是两个性染色体不同的精子(23，X及23,Y)同时便空卵受精，称为双精子受精。 完全性葡萄胎症状 1、闭经 因葡萄胎系发生于孕卵的滋养层，故多有两到三个月或更长时间闭经。 2、停经后阴道出血 为葡萄胎常见症状，通常停经8~12周左右开始有不规则阴道流血，量多不定，时出时停，反复发作，逐渐增多。个别情况下还会导致母体大血管破裂，造成大出血，可导致休克，甚至死亡。葡萄胎组织有时可自行排除，但排出之前和排出只是常常伴有大量的流血。 3、子宫异常增大、变软 多数患者的子宫大于相应的停经月份的妊娠子宫，不少患者即因触及下腹包块（胀大子宫或黄素囊肿）而来就诊，但也有少数子宫和停经月份符合甚或小于停经月份者。可能有两种情况： ①为绒毛水泡退变呈萎缩状，停止发展，形成稽留性葡萄胎； ②部分水泡状胎块已排出，使子宫体缩小，形成葡萄胎不全流产。 4、腹痛 葡萄胎增长迅速和子宫过度快速扩张所致，刺激子宫收缩而疼痛，常发生于阴道流血之前，可轻可重。 5、妊娠呕吐 多发生于子宫异常增大和hCG水平异常升高者，出现时间一般较正常妊娠早，症状严重，持续时间长。 完全性葡萄胎就是胎盘绒毛全部受累，无胎儿及其附属物，宫腔内充满水泡，可以说是假怀孕，我们要怎么去判定葡萄胎呢？一般来说，出现了停经、腹痛、妊娠呕吐之后，检测子宫孕5个月的时候没能听到胎心、无胎动，那就可以怀疑是葡萄胎。
葡萄胎患者的护理 摘要】葡萄胎亦称水泡状胎块，是指妊娠后胎盘绒毛滋养细胞异常增生，终末 绒毛转变成水泡，水泡间相连成串，形如葡萄得名。目的讨论葡萄胎患者的护理。方法配合治疗进行护理。结论严密观察病情。注意观察阴道出血及排出物， 保持外阴清洁。 【关键词】葡萄胎护理 葡萄胎亦称水泡状胎块，是指妊娠后胎盘绒毛滋养细胞异常增生，终末绒毛 转变成水泡，水泡间相连成串，形如葡萄得名。葡萄胎分为完全性和部分性两类，其中大多数为完全性葡萄胎，且具较高的恶变率；少数为部分性葡萄胎，恶变罕见。两类葡萄胎从发病原因至临床病程均不相同。 一、病因及发病机制 (一)病因 确切原因尚不十分清楚，但孕卵本身的缺陷可能是最主要的原因。其他原因 还可能为蜕膜变性以致发生胚胎营养障碍，或是卵巢功能衰竭发生卵巢激素功能 紊乱，但这些说法均待进一步探明。临床曾见有多次妊娠发生葡萄胎史，同时也 有在葡萄胎以前与以后均为正常妊娠者。因此，有人认为可能与精子一时未能生 长成熟或胎卵本身的病理变化有关。 (二)发病机制 正常的胎盘绒毛滋养细胞都有侵蚀母体组织的特性，而母体组织亦有对抗使 之不受侵害的能力，成为葡萄胎后的绒毛滋养细胞的侵蚀能力，较正常妊娠时的 绒毛更为强劲，超过母体组织的对抗能力，使母体组织受到更多的侵蚀。其阴道 流血量，随着绒毛滋养细胞对蜕膜组织血管侵蚀的增加而增多，也随葡萄胎组织 不断地形成及从宫壁剥离面积的扩大而不断加大。故葡萄胎的出血，先为少量褐 色的血性分泌，逐渐变为多量的出血，并带水疱状组织的排出。在大量的水疱状 组织排出时，可有大量的出血，伴失血性休克。 二、临床特点 (一)临床表现 1.症状 (1)闭经(停经)：100%的患者有停经史，从4～37周不等，平均为12周。 (2)阴道流血：为不规则阴道流血，多为断续性少量流血，也可突然大量流血。部分出血可蓄积于子宫内，从而使闭经时间延长。 (3)腹痛：一般在阴道流血之前，常有隐隐阵发性腹痛，是子宫阵发性收缩及 子宫胀大所致，一般不剧烈。 (4)子宫异常增大：子宫增大与停经月份不符者占半数以上，是葡萄胎的又一 症状特点。 (5)早孕剧吐，中孕出现水肿、高血压、蛋白尿，甚至抽搐。 (6)发现下腹双侧包块：为双侧卵巢黄素囊肿，一般不产生症状，偶有急性扭 转而致急腹痛。 (7)贫血与感染：反复出血或突然大出血而未及时治疗者常呈不等程度的贫血。反复的阴道流血，宫颈口开放，贫血患者抵抗力低，阴道内细胞乘机而入，造成 感染。 2.体征做妇科检查时发现子宫大而软，下段较宽，子宫大小与停经月份不符。子宫大于5个月者尚触不到胎体，听不到胎心，无胎动感。卵巢黄素囊肿可因子
10 Sheng W et al.J Virol,2003;77(6):3859 11 C ohen J I,et al.J Virol,1999;73(9):7627 12 Wei MX et al.Cancer Res,1994;54(7):1843 13 G ao Y et al.Oncogene,2002;21(5):825 14 T anner J E et al.J In fect Dis,1997;175(1):3815 Decaussin G et al.Cancer Res,2000;60(19):5584 16 Brink AA et al.J Clin M icrobiol,1998;36(11):3164 17 Hayes DP et al.M ol Pathol,1999;52(2):97 18 zur Hausen A et al.Cancer Res,2000;60(10):2745 (2002211201 收稿) 高通量SNP基因分型技术研究进展 方唯意综述 姚开泰审阅 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所(长沙,410078) 摘要 在后基因组时代,单核苷酸多态性研究已迅速成为了生物医学许多领域的焦点。发展可靠、敏感、经济、稳定、高通量的S NP基因分型技术已迫在眉睫。本文主要着重于高通量S NP基因分型技术的原理、利弊以及这些技术在这个领域过去几年中的进展。 关键词 高通量;单核苷酸多态性;基因分型 单核苷酸多态性(S NPs)是最普遍的遗传变异形式。通过开展具有明显表型特征的S NPs基因分型大规模相关研究,有助于鉴定许多复杂疾病原因,了解个体对各种药物的耐受性和对环境因子的反应。人类基因组测序的完成和142万个S NPs在基因组上的定位[1],为首次在全基因组水平上进行S NPs研究打开了方便大门。经典的S NPs分析方法是PCR 扩增后用凝胶电泳检测,虽然可靠性好,但缺乏效率。寡核苷酸微阵列和其他高通量筛选技术效率有了明显的提高,但临床应用绝非可靠,因此,有必要改进和发展新的可靠、敏感、高通量、经济、稳定的S NPs基因分型技术。在本文中,我们主要阐述高通量S NPs基因分型方法,包括一步均质法、焦磷酸测序、DNA芯片/阵列分析法、微球法、MA LDI2T OF质谱基因分型分析法等,讨论这些技术的目前状态和将来潜力。 1 一步均质法 T aqman、Scorpion分析和分子灯塔组成了微滴定平板荧光阅读系统。T aqman和分子灯塔都依赖于等位基因特异性寡核苷酸杂交在PCR期间对等位基因进行区分。而Scorpion分析能使用等位基因特异性PCR或是等位基因特异性杂交反应[2]来区分等位基因。它们作为一个末端分析能在一个完全均质的反应条件下进行分析。在反应起始,所有试剂和基因组DNA都混合在一起,经热循环步骤后,荧光信号能被检测到。该反应既没有单独的预扩增步骤,也没有中间的处理过程,因此它们是一种最简单的分析方法。由于没有适合这些方法的384孔荧光检测器,以及荧光标记探针的价格过高和缺乏可靠的自动化基因型呼叫软件,因此阻碍了这些方法的发展。最近,Applied Biosystems公司新开发的7900HT型高通量荧光定量PCR仪,使得进行384孔微滴定平板荧光检测成为了可能,这主要归因于高通量能力的增加和反应容积的减少。当如果要发展更高的基因分型通量时,一个可靠的自动化等位基因呼叫能力是必须的,它不只是纠正基因型呼叫信号更快,而且在处理和加工数据上必须更迅速,更准确。近来研究表明,自动化基因型呼叫在无阳性对照情况下进行聚类分析是可行的[3]。 2 焦磷酸测序Pyrosequencing 焦磷酸测序是对短到中等长度的DNA序列样品进行高通量、精确和重复性好的分析方法。其反应原理是当测序引物与PCR扩增的,单链DNA模板杂交,和各种酶包括DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶、三磷酸腺苷双磷酸酶、以及底物、荧光素一起共同孵育。4种dNTP之一被加入反应体系,如与模板配对,该dNTP与引物的末端形成共价键,dNTP 的焦磷酸基团释放出来。ATP硫酸化酶在APS存在的情况下催化焦磷酸生成ATP,ATP驱动荧光素酶介导的荧光素向氧化荧光素的转化,氧化荧光素发出的可见光信号与ATP量成正比。ATP和未掺入的dNTP由三磷酸腺苷双磷酸酶降解,光信号淬灭,并再生反应体系,然后再加另一种dNTP继续反应。焦磷酸测序最初作为DNA测序方法而发展起来的,其化学反应与Sanger双脱氧二核苷酸法完全不同。它无需灌胶、毛细管电泳,也无需同位素或荧光染料
葡萄胎的护理查房 ●概述 葡萄胎是妊娠滋养细胞疾病的一种,又称水泡状胎块,指妊娠后胎盘绒毛滋养细胞异常增生,终末绒毛水样变性,呈相连成串的水泡,状如葡萄. 病因: 不太清楚,与营养不良,病毒感染,种族因素,内分泌失调,高龄等有关. ●葡萄胎的具体症状: 1.停经后阴道出血:是最常见的症状.常在停8-12周阴道不规 则出血,量多少不定,当葡萄胎排出前将发生大量出血,严重时可危及生命. 2.子宫增大速度快:由于葡萄胎的迅速增大以及宫腔内出血, 常使子宫迅速增大,子宫大于正常妊娠相应停经月份. 3.下腹痛:因葡萄胎快速增长,子宫迅速扩张所致,为阵发性下 腹痛,一般不剧烈,可忍受. 4.妊娠欧吐:由于滋养细胞过度增生产生大量的绒毛膜促性 腺激素(HCG),使得葡萄胎患者的呕吐较正常妊娠出现的早,症状重,且持续的时间长. 5.妊娠高血压综合征表现:少数病人24周前出现高血压,水肿, 蛋白尿,严重者出现抽搐,昏迷,心力衰竭. 6.卵巢黄素化囊肿:由于葡萄胎患者产生大量的HCG,刺激卵 巢发生多房性囊肿改变.这种囊肿多在葡萄胎排出后1-3个
月消失,有时候需要6个月,消失后对卵巢功能无影响. 7.甲状腺功能亢进表现: 少数患者出现轻度的甲状腺亢进表 现,如心动过速,皮肤潮湿和振颤.因而,一段停经后出现上述症状应及时就医,并进行HCG和B超检查。 ●葡萄胎的诊断 1.病史停经后阴道出血 2.体征子宫增大变软，刮出物为水泡样组织。 3.辅助检查血HCG〉200000mlu/ml 4.B超子宫内膜异超增厚不均，宫内孕囊样回声，未见胚胎组织， 盆腔积液。 5.病理宫腔内容物部分绒毛水肿，中央见水泡，滋养叶细胞轻度增 生，符合部分性水泡状胎块。 ●葡萄胎的治疗 1.迅速清除宫腔内容物 a)吸宫，轻柔刮宫 b)刮出物送病检 2.预防性的治疗 a)子宫切除：年龄大于40岁无生育要求。 b)预防性化疗：有恶性高危因素 ●病案分析 患者ww，女性，26岁，0－0－0－0，因“停经2+月，阴道流血半天”于3月31日拟“1、难免流产？2、滋养细胞疾病？”入院，患
葡萄胎的诊断与鉴别方法 葡萄胎的临床表现为闭经，多数在闭经二三个月时或个别更迟些时，出现阴道流血。血可多可少，呈间断性，大多情况下子宫大于停经月份也是可能的。子宫达四五个月妊娠大小时，不仅孕妇感觉不到胎动，触不到胎块，也听不到胎心。仔细检查阴道流血中，如发现有水泡状胎块，则可确诊。 一、诊断方法 临床表现有闭经，多数在闭经二三个月时或个别更迟些时，出现阴道流血，血可多可少，呈间断性，多数情况下子宫大于停经月份也是可能的，子宫达四五个月妊娠大小时，不仅孕妇感觉不到胎动，触不到胎块，也听不到胎心，仔细检查阴道流血中，如发现有水泡状胎块，则可确诊。 1、B超腹部扫描。 2、HCG测定。 3、目前很少用X线技术诊断葡萄胎。 二、鉴别方法 1、羊水过多症多发生在妊娠晚季期，急性羊水过多症或可发生在妊娠中季期，可出现呼吸困难，无阴道流血。而葡萄胎鲜有呼吸困难，但有反复阴道流血。B超检查可各自查出自己的特征，不难鉴别。 2、流产葡萄胎患者虽亦常表现流产现象，但其子宫往往大于同期的妊娠;且妊娠试验阳性，滴定度较高，故不难鉴别。但葡萄胎患者的子宫亦有不特别增大者或当其早期，则往往易与先兆流产混淆。先兆流产是指在妊娠早期出现的阴道少量出血，时下时止，伴有轻微下腹痛和腰酸的一种疾病。但阳性妊娠试验滴定度在葡萄胎终较高于先兆流产。B超检查即可分辨。 3、子宫体肌瘤合并妊娠子宫肌瘤在孕前查出者，不难鉴别。肌瘤合并妊娠较大肌壁间肌瘤合并妊娠时由于机械性阻碍或宫腔畸形也易流产。妊娠期子宫充血、组织水肿、平滑肌细胞肥大，肌瘤明显增大，分娩后逐渐缩小。妊娠期肌瘤迅速增大可发生红色变，出现剧烈腹痛伴恶心、呕吐、发热、白细胞计数升高。一般无阴道流血。双合诊时有可能查到肌瘤存在宫体某部分。B超检查可以鉴别。 4、双胎妊娠双胎妊娠一般早孕反应较重，容易发生缺铁性贫血，还容易并发妊高征、羊水过多，胎儿畸形和前置胎盘。并有羊水过多及先兆流产时与葡萄胎鉴别最为困难。不但临床表现二者极相似，妊娠试验滴定度亦高于正常，常导致误诊。双胎妊娠一般无阴道流血，而葡萄胎常有，超声检查可确诊。
遗传标记STR基因座的高分辨电泳分型 摘要：STR（Short Tandem Repeat，短片段重复序列）广泛存在于人类及哺乳动物的基因组中，具有高度多态性，一般由2～6个碱基构成一个核心序列，核心序列串联重复排列，由核心序列重复数目的变化产生长度多态性。本实验用磁珠法提取人类基因组DNA后，用三对引物（D1S1677、D4S2364和D10S1248）分别对一号染色体、四号染色体和十号染色体的STR序列进行PCR扩增，通过聚丙烯酰氨凝胶电泳技术（PAGE）对PCR产物进行分离，最后用EB染色凝胶后在紫外灯下观察实验结果并进行分析。通过此次实验，我们了解了STR序列的特征和相关应用，掌握了磁珠法提取人类基因组DNA技术、PCR技术，以及聚丙烯酰氨凝胶电泳技术（PAGE）。 关键词：STR磁珠法PCR扩增聚丙烯酰氨凝胶电泳技术（PAGE） 1．引言 DNA指纹技术是一项具有广泛应用价值的技术。它在人类医学中被用于个体鉴别、确定亲缘关系、医学诊断及寻找与疾病连锁的遗传标记；在动物进化学中可用于探明动物种群的起源及进化过程；在物种分类中，可用于区分不同物种，也有区分同一物种不同品系的潜力。在作物的基因定位及育种上也有非常广泛的应用。 DNA指纹技术的发展经历了三代。第一代DNA指纹技术利用了DNA 指纹图谱。1984年英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合作者首次将分离的人源小卫星DNA用作基因探针，同人体核DNA的酶切片段杂交，获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹，这种图纹极少有两个人完全相同，故称为“DNA指纹”，意思是它同人的指纹一样是每个人所特有的。众多“DNA指纹”组成“DNA指纹图谱”。第二代DNA指纹技术用PCR 的方法对STR位点进行PCR扩增可得到不同长度DNA片段，用银染或荧光的方法对扩增后的DNA片段检测得到DNA指纹。第三代DNA指纹技术是用PCR的方法对SNP位点进行PCR扩增。 STR（Short Tandem Repeat，短片段重复序列）广泛存在于人类及哺乳动物的基因组中，具有高度多态性。它们一般由2～6个碱基构成一个核心序列，核心序列串联重复排列，由核心序列重复数目的变化产生长度多态性。对于一个特定的个体，染色体上某个特定位置的重复序列的重复次数是固定的，而对于不同的个体在同一位置处的重复次数可能不同，这就构成了人群中这些重复序列的多态性。由于人类基因组中这种重复序列非常多，通过对这种多态性的检测，就可以明确区分个体与个体的不同，确定父母子的亲缘关系，这就是STR 分型。联合应用16个STR位点的特异性，其个体识别率可达0.999999999998，其父权排除率可达0.99998。 本次实验中人类基因组DNA的提取使用的是磁珠法核酸纯化技术。它采用了纳米级磁珠微珠，这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团，能同核酸发生吸附反应。该方法快速简捷，一般可在36分钟完成。不用多次漂洗磁珠也可确保基因组DNA的高纯度，提取出的基因组DNA OD260/OD280典型的比值达 1.7～1.9，长度可达20kb～50kb，可直接用于PCR、Southern-blot和各种酶切反应。 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是体外核酸扩增技术，由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成。本实验以人类基因组DNA为模板，以dNTP为原料，以含有Mg2+的buffer为缓冲液，在Taq酶催化下，用特定引物（D1S1677、D4S2364和D10S1248）为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，获得不同基因座的STR扩增片段。可用于基因分离克隆，序列分析，基因表达调控，基因多态性研究等许多方面。总之，PCR是一项DNA 体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增任何目的DNA。可用于基因分离克隆，序列分
用非标记探针、遮蔽技术及高分辨率熔解扩增子分析对RET原 癌基因进行基因分型 RET原癌基因单个碱基的突变可以引发多发性内分泌腺瘤2型。RET突变传统的基因分型方法是外显子测序。一种闭管操作的基因分型方法已经成熟，此方法用的是一种饱和DNA 染料，非标记探针及高分辨率熔解扩增子分析。此方法需要两个连续的聚合酶链式反应阶段，主要的和第二次实验。主要的实验共用7个反应和8个非标记探针分析RET基因外显子10、11、13、14和16 。主要实验基因分型了野生型外显子，外显子13普通的多态性，外显子16的一个突变及其它检测到的序列变化。主要非标记探针数据限制检测到的RET基因序列突变的基因分型，这些突变位点的基因分型在第二次实验的2-5个反应中进行。设计6条探针，所用方法是：用遮蔽技术和遮蔽选择的序列变化使探针下其它位置的突变的分析变得明确。这两步RET基因分型之后，少于实验0.2%的外显子需要测序确定基因型。对5个野生型和29个可用的RET序列突变样品（与测序结果100%一致）做盲研究。用非标记探针和遮蔽技术进行高分辨率熔解分析是快速、精确的基因分型方法，>50的RET序列突变可以进行基因分型。 多发性内分泌腺瘤2型（MEN2）综合症，MEN2A，MEN2B及家族性甲状腺髓样癌由生殖细胞系RET基因外显子10、11、13和16的突变引发。MEN2综合症是常染色体显性秩序失调引起的高生命危险的甲状腺癌。RET突变的遗传学检测可以确认处于甲状腺癌危险中但是没有爆发癌症的病人，此时切除甲状腺可以增加存活的机率。 之前有许多实验方法检测或基因分型RET突变，比如说单链构象多态性，变性梯度凝胶电泳，温度梯度毛细管电泳，限制性内切酶消化PCR产物，焦磷酸测序，荧光标记杂交探针及微卫星。但是，这些方法中的大多数需要PCR反应之后的操作来检测突变。其中一些方法报道突变检测的敏感性为95%或少于95%，或者仅实验了RET突变样品的一小部分。这些方法分析RET序列变化的限制范围，可能只以普通突变为目标而错过了稀有突变。此外，不致病多态性的存在可以导致异常的结果。因为这些限制，RET外显子测序保持黄金标准。 测序是一种耗时且昂贵的开管实验，需要生成PCR产物之后的额外操作。相反，高分辨率熔解曲线的突变扫描分析是一种快速且便宜的闭管操作实验，不需要进行PCR产物之后的额外操作。通过用一种饱和DNA染料：LC Green，高分辨率熔解曲线分析可以检测PCR扩增子之
参考文献：南方医科大学硕士学位论文~《HCV基因型和亚型：分型技术、临床意义及其流行病学研究》 HBV基因型和亚型：分型技术 乙肝临床与分型研究国际现状： 乙型肝炎病毒（HBV）是一种嗜肝病毒，在全世界长期感染约3亿人，据报道每年造成约100万人死亡。基于对完整基因组的序列相似性，将诸多HBV分离株分为8个基因型A至H。HBV基因型显示特征性地理分布：基因型A流行最广，但普遍是在北欧、北美和中非;在东亚，韩国、中国、日本、波利尼西亚和越南发现了基因型B和C;基因型D也是大流行性基因型，但最要在地中海地区、中东和印度为主要分布地;基因型E是非洲的典型常见型;美国当地人和波利尼西亚发现基因型F;基因型G在西欧和北美，基因型H主要发现在中美洲。不仅对于分子流行病学的目的，HBV的基因分型是重要的；最近的几项研究也表明，一些基因型的慢性结局和肝脏疾病的严重程度可能是不同的。来自：National Center for Biotechnology Information—Viral Genotyping Tool Hepatitis B virus (HBV) is a hepatotropic virus, that chronically infects some 300 million people worldwide and is thought to be responsible for a million deaths annually. Numerous HBV isolates have been grouped into eight genotypes, A through H, on the basis of sequence similarities of their complete genomes. HBV genotypes show a characteristic geographical distribution: genotype A is pandemic but most prevalent in northern Europe, North America and central Africa; genotypes B and C are found in eastern Asia, Korea, China, Japan, Polynesia and Vietnam; genotype D is also pandemic but is predominant in the Mediterranean area, the Middle East and India; genotype E is typical for Africa; genotype F is found in American natives and in Polynesia; genotype G in western Europe and North America and genotype H is found predominantly in Central America. Genotyping of HBV is important not only for molecular epidemiology purposes. Several recent researches demonstrated that rate of the chronic outcome and the severity of liver disease can be different for some genotypes. 来自：National Center for Biotechnology Information—Viral Genotyping Tool 乙肝临床与分型研究中国现状： 目前（追溯至2005年），根据乙型肝炎病毒（HBV）全基因组序列差异大于8%或者S基因序列大于4%，将HBV分为A、B、C、D、E、F、G、H等8个基因型，当时报道，HBV每个基因型还可以分为不同亚型，如：A基因型可分为Aa和Ae亚型；B基因型可分为B1、B2、B3和B4亚型，C基因型可分为C1、C2、C3和C4亚型等。有研究表明，HBV基因型与感染途径、感染谱、疾病进展有一定相关性。但是在2005年，国内现有关于HBV亚型的报道。我们研究组应用特异性引物聚合酶链式反应法对我国多个城市的445份HBV感染者血清进行了HBV基因型和亚型的分析。来源：北京大学医学部微生物系，庄辉课题组 乙型肝炎病毒（HBV）是引起人兽共患病的最小DNA病毒，全球分布，引发急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、乙肝相关性肝癌，对人类健康威胁大。目前（追溯至2005年），根据HBV全基因序列异质性大于8%或者S基因序列大于4%，将HBV分为8个基因型A~H，并根据全基因序列异质性不大于8%，大于4%将HBV同一种基因型再分为不同的亚型。不同基因型、亚型的HBV各具独特的流行病学特点及分子生物学特征。并发现可能与HBV感染途径、疾病谱、病程进展以及抗病毒治疗的反应局相关性。来源：福建医科大学附属第一医院肝病中心 乙肝病毒与复制 乙型肝炎病毒(HBV)为直径42～47nm的球形颗粒(Dane颗粒)，由外壳与核心两部分组成。外壳有许多小球状颗粒，只含病毒表面抗原(HBsAg)。核心含环状双股脱氧核糖核酸(DNA)、DNA多聚酶、核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)。双股DNA的正链短且不完整，长度仅为负链的50%，不含开放读码区，不能编码蛋白。负链完整，长度恒定，约含3200个核苷酸，有4个大开放读码区，可编码全部病毒蛋白：①S区基因。编码病毒外壳蛋白(HBsAg)，分为S、前S1、前S2基因区共同编码3种外壳蛋白肽段，即主蛋白由S基因编码，中蛋白由前S2和S基因编码，大蛋白由前S1、前S2和S基因编码。3种外壳蛋白的功能和性质有所不同；②C基因。编码核心抗原蛋白及其可溶成分e抗原，前C基因区可能在HBV的装配和分泌中起作用；③P基因。其翻译产物为病毒的DNA多聚酶；④X基因。编码HBxAg，存在于HBsAg或HBcAg阳性病例的肝细胞核内，可能是一种转录调节蛋白。来自：百科全书
葡萄胎得护理查房 ●概述 葡萄胎就是妊娠滋养细胞疾病得一种,又称水泡状胎块,指妊娠后胎盘绒毛滋养细胞异常增生,终末绒毛水样变性,呈相连成串得水泡,状如葡萄。 病因:不太清楚,与营养不良,病毒感染,种族因素,内分泌失调,高龄等有关、 ●葡萄胎得具体症状: 1.停经后阴道出血:就是最常见得症状.常在停8－1２周阴道 不规则出血,量多少不定,当葡萄胎排出前将发生大量出血,严重时可危及生命。 2.子宫增大速度快:由于葡萄胎得迅速增大以及宫腔内出血, 常使子宫迅速增大,子宫大于正常妊娠相应停经月份. 3.下腹痛:因葡萄胎快速增长,子宫迅速扩张所致,为阵发性下 腹痛,一般不剧烈,可忍受. 4.妊娠欧吐:由于滋养细胞过度增生产生大量得绒毛膜促性 腺激素(HCG),使得葡萄胎患者得呕吐较正常妊娠出现得早,症状重,且持续得时间长。 5.妊娠高血压综合征表现:少数病人２4周前出现高血压,水 肿,蛋白尿,严重者出现抽搐,昏迷,心力衰竭。 6.卵巢黄素化囊肿:由于葡萄胎患者产生大量得HCG,刺激卵 巢发生多房性囊肿改变、这种囊肿多在葡萄胎排出后1-
３个月消失,有时候需要6个月,消失后对卵巢功能无影响、7.甲状腺功能亢进表现: 少数患者出现轻度得甲状腺亢进表 现,如心动过速,皮肤潮湿与振颤。因而,一段停经后出现上述症状应及时就医,并进行HCＧ与Ｂ超检查、 ●葡萄胎得诊断 1.病史停经后阴道出血 2.体征子宫增大变软,刮出物为水泡样组织、 3.辅助检查血HCＧ〉２0０000mlu/mｌ 4.B超子宫内膜异超增厚不均,宫内孕囊样回声,未见胚胎组织,盆腔 积液。 5.病理宫腔内容物部分绒毛水肿,中央见水泡,滋养叶细胞轻度增 生,符合部分性水泡状胎块。 ●葡萄胎得治疗 1.迅速清除宫腔内容物 a)吸宫,轻柔刮宫 b)刮出物送病检 2.预防性得治疗 a)子宫切除:年龄大于４0岁无生育要求。 b)预防性化疗:有恶性高危因素 ●病案分析 患者wｗ,女性,26岁,０－0-0—０,因“停经2+月,阴道流血半天”于3月31日拟“１、难免流产?２、滋养细胞疾病?”入院,患者停经后自