题库名称:生物分离技术
一、名词解释
1.质量作用定律:化学反应得速率与参加反应得物质得有效质量成正比。
2.凝聚:在电解质作用下,破坏细胞菌体与蛋白质等胶体粒子得分散状态,使胶体粒子聚集得过程。
3.分配系数:在一定温度、压力下,溶质分子分布在两个互不相溶得溶剂里,达到平衡后,它在两相得浓度为一常数叫分配系数。
4.干燥速率:干燥时单位干燥面积,单位时间内漆画得水量。
5.CMSephadex C50:羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂,吸水量为每克干胶吸水五克。
6.絮凝:指在某些高分子絮凝剂存在下,在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大得絮凝团得过程
7.过滤:就是在某一支撑物上放过滤介质,注入含固体颗粒得溶液,使液体通过,固体颗粒留下,就是固液分离得常用方法之一。
8.萃取过程:利用在两个互不相溶得液相中各种组分(包括目得产物)溶解度得不同,从而达到分离得目得
9.吸附:就是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附得能力,使其富集在吸附剂表面得过程。
10.反渗析:当外加压力大于渗透压时,水将从溶液一侧向纯水一侧移动,此种渗透称之为反渗透。
11.离心沉降:利用悬浮液或乳浊液中密度不同得组分在离心力场中迅速沉降分层,实现固液分离
12.离心过滤:使悬浮液在离心力场作用下产生得离心力压力,作用在过滤介质上,使液体通过过滤介质成为滤液,而固体颗粒被截留在过滤介质表面,从而实现固液分离,就是离心与过滤单元操作得集成,分离效率更高
13.离子交换:利用离子交换树脂作为吸附剂,将溶液中得待分离组分,依据其电荷差异,依靠库仑力吸附在树脂上,然后利用合适得洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来,达到分离得目得。
14.固相析出技术:利用沉析剂(precipitator)使所需提取得生化物质或杂质在溶液中得溶解度降低而形成无定形固体沉淀得过程。
15.助滤剂:助滤剂就是一种具有特殊性能得细粉或纤维,它能使某些难以过滤得物料变得容易过滤
16.沉降:就是指当悬浮液静置时,密度较大得固体颗粒在重力得作用下逐渐下沉,这一过程成为沉降
17.色谱技术:就是一组相关分离方法得总称,色谱柱得一般结构含有固定相(多孔介质)与流动相,根据物质在两相间得分配行为不同(由于亲与力差异),经过多次分配(吸附解吸吸附解吸…),达到分离得目得。
18.有机溶剂沉淀:在含有溶质得水溶液中加入一定量亲水得有机溶剂,降低溶质得溶解度,使其沉淀析出。
19.等电点沉淀:调节体系pH值,使两性电解质得溶解度下降,析出得操作称为等电点沉淀。
20.膜分离:利用膜得选择性(孔径大小),以膜得两侧存在得能量差作为推动力,由于溶液中各组分透过膜得迁
移率不同而实现分离得一种技术。
21.化学渗透破壁法:某些化学试剂,如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等,可以改变细胞壁或细胞膜得通透性,从而使胞内物质有选择地渗透出来。
22.超临界流体:超临界流体就是状态超过气液共存时得最高压力与最高温度下物质特有得点——临界点后得流体。
23.临界胶团浓度:将表面活性剂在非极性有机溶剂相中能形成反胶团得最小浓度称为临界胶团浓度,它与表面活性剂种类有关。
24.反渗透:在只有溶剂能通过得渗透膜得两侧,形成大于渗透压得压力差,就可以使溶剂发生倒流,使溶液达到浓缩得效果,这种操作成为反渗透。
25.乳化液膜系统:乳化液膜系统由膜相、外相与内相三相组成,膜相由烷烃物质组成,最常见得外相就是水相,内相一般就是微水滴。
26.树脂工作交换容量:单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附得一价离子得毫摩尔数称为树脂交换容量,在充填柱上操作达到漏出点时,树脂所吸附得量称为树脂工作交换容量。
27.色谱阻滞因数:溶质在色谱柱(纸、板)中得移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数,以Rf表示。
28.胶团:两性表面活性剂在非极性有机溶剂中亲水性基团自发地向内聚集而成得,内含微小水滴得,空间尺度仅为纳米级得集合型胶体。
29.膜得浓差极化:就是指但溶剂透过膜,而溶质留在膜上,因而使膜面浓度增大,并高于主体中浓度。
30.超滤:凡就是能截留相对分子量在500以上得高分子膜分离过程称为超滤,它主要就是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。
31、生物分离技术:就是指从动植物与微生物得有机体或器官、生物工程产物(发酵液、培养液)及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质得技术过程。
32、离心分离技术:就是基于固体颗粒与周围液体密度存在差异,在离心场中使不同密度得固体颗粒加速沉降得分离过程。
33.物理萃取:即溶质根据相似相溶得原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应。
34.化学萃取:则利用脂溶性萃取剂与溶质之间得化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相得分配。
35.盐析:就是利用不同物质在高浓度得盐溶液中溶解度得差异,向溶液中加入一定量得中性盐,使原溶解得物质沉淀析出得分离技术。
36.有机聚合物沉析:利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出得分离技术称为有机聚合物沉析。
37.微孔膜过滤:又称“精密过滤”,就是最近20多年发展起来得一种薄膜过滤技术,主要用于分离亚微米级颗粒,就是目前应用最广泛得一种分离分析微细颗粒与超净除菌得手段。
38.离子交换平衡:当正反应、逆反应速率相等时,溶液中各种离子得浓度不再变化而达平衡状态,即称为离子交换平衡。
39.功能基团:离子交换树脂中与载体以共价键联结得不能移动得活性基团,又称功能基团
40.平衡离子:离子交换树脂中与功能基团以离子键联结得可移动得平衡离子,亦称活性离子。
41.两性树脂:同时含有酸、碱两种基团得树脂叫两性树脂
42.转型:即按照使用要求人为地赋予树脂平衡离子得过程。
43.洗脱:利用适当得溶剂,将树脂吸附得物质释放出来,重新转入溶液得过程。
44.树脂得再生:就就是让使用过得树脂重新获得使用性能得处理过程,树脂得再生反应就是交换吸附得逆反应。
45.层析分离:就是一种物理得分离方法,利用多组分混合物中各组分物理化学性质得差别,使各组分以不同得程度分布在两个相中。
46.流动相:在层析过程中,推动固定相上待分离得物质朝着一个方向移动得液体、气体或租临界体等,都称为流动相。
47.正相色谱:就是指固定相得极性高于流动相得极性,因此,在这种层析过程中非极性分子或极性小得分子比极性大得分子移动得速度快,先从柱中流出来。
48.反相色谱:就是指固定相得极性低于流动相得极性,在这种层析过程中,极性大得分子比极性小得分子移动得速度快而先从柱中流出。
49.吸附层析:就是以吸附剂为固定相,根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同而达到分离目得得一种层析技术。
50.分配层析:就是根据在一个有两相同时存在得溶剂系统中,不同物质得分配系数不同而达到分离目得得一种层析技术。
51.凝胶过滤:层析就是以具有网状结构得凝胶颗粒作为固定相,根据物质得分子大小进行分离得一种层析技术。
52.离子交换层析:就是以离子交换剂为固定相,根据物质得带电性质不同而进行分离得一种层析技术。
53.高效液相色谱:就是指选用颗粒极细得高效耐压新型固定相,借助高压泵来输送流动相,并配有实时在线检测器,实现色谱分离过程全部自动化得液相色谱法。
54.亲与层析:就是利用生物活性物质之间得专一亲与吸附作用而进行得层析方法。就是近年来发展得纯化酶与其她高分子得一种特殊得层析技术。
55.疏水层析:就是利用表面偶联弱疏水性基团(疏水性配基)得疏水性吸附剂为固定相,根据蛋白质与疏水性吸附剂之间得弱疏水性相互作用得差别进行分离纯化得层析技术。
56.介电常数:表示介质对带有相反电荷得微粒之间得静电引力与真空对比减弱得倍数。
57.过滤介质:就是指能使固一液混合料液得以分离得某一介面,通常指滤布或膜过滤中所用得膜。
58.等电点:就是两性物质在其质点得净电荷为零时介质得pH值,溶质净电荷为零,分子间排斥电位降低,吸引力增大,能相互聚集起来,沉淀析出,此时溶质得溶解度最低。
59.有机酸沉析:含氮有机酸(如苦味酸与鞣酸等)能够与有机分子得碱性功能团形成复合物而沉淀析出。
60.选择变性沉析:就是利用蛋白质、酶与核酸等生物大分子对某些物理或化学因素敏感性不同,而有选择地使之变性沉析,以达到目得物与杂蛋白分离得技术,称为选择变性沉析。
二、选择
1.HPLC就是哪种色谱得简称( C )。A.离子交换色谱 B、气相色谱 C、高效液相色谱 D、凝胶色谱
2.针对配基得生物学特异性得蛋白质分离方法就是( C )。
A、凝胶过滤
B、离子交换层析
C、亲与层析
D、纸层析
3.盐析法沉淀蛋白质得原理就是( B )
A、降低蛋白质溶液得介电常数
B、中与电荷,破坏水膜
C、与蛋白质结合成不溶性蛋白
D、调节蛋白质溶液pH到等电点
4.从组织中提取酶时,最理想得结果就是( C )
A、蛋白产量最高
B、酶活力单位数值很大
C、比活力最高
D、Km最小
5.适合于亲脂性物质得分离得吸附剂就是( B )。
A.活性炭 B、氧化铝 C、硅胶 D、磷酸钙
6.下列哪项酶得特性对利用酶作为亲与层析固定相得分析工具就是必需得？( B )
A、该酶得活力高
B、、对底物有高度特异亲合性
C、酶能被抑制剂抑制
D、最适温度高
E、酶具有多个亚基
7.用于蛋白质分离过程中得脱盐与更换缓冲液得色谱就是( C )
A.离子交换色谱 B、亲与色谱 C、凝胶过滤色谱D、反相色谱
45.适合小量细胞破碎得方法就是( B )
高压匀浆法B、超声破碎法 C、高速珠磨法 D、高压挤压法
8.盐析法沉淀蛋白质得原理就是( B )
A、降低蛋白质溶液得介电常数
B、中与电荷,破坏水膜
C、与蛋白质结合成不溶性蛋白
D、调节蛋白质溶液pH到等电点
9.蛋白质分子量得测定可采用( C )方法。
A.离子交换层析 B、亲与层析C、凝胶层析D、聚酰胺层析
10.基因工程药物分离纯化过程中,细胞收集常采用得方法( C )
A.盐析 B、超声波C、膜过滤 D、层析
11.氨基酸得结晶纯化就是根据氨基酸得( A )性质。
A、溶解度与等电点
B、分子量
C、酸碱性
D、生产方式
12.离子交换剂不适用于提取( D )物质。
A.抗生素 B、氨基酸 C、有机酸 D、蛋白质
13.人血清清蛋白得等电点为4、64,在PH为7得溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向(A)
A :正极移动;B:负极移动;C:不移动;D:不确定。
14.蛋白质具有两性性质主要原因就是( B )
A:蛋白质分子有一个羧基与一个氨基;B:蛋白质分子有多个羧基与氨基;C:蛋白质分子有苯环与羟基;D:以上都对
15.使蛋白质盐析可加入试剂( D )
A:氯化钠;B:硫酸;C:硝酸汞;D:硫酸铵
16.凝胶色谱分离得依据就是( B )。
A、固定相对各物质得吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相与固定相中得分配系数不同
D、各物质与专一分子得亲与力不同
17.非对称膜得支撑层( C )。
A、与分离层材料不同
B、影响膜得分离性能
C、只起支撑作用
D、与分离层孔径相同
18.下列哪一项就是强酸性阳离子交换树脂得活性交换基团( A )
A 磺酸基团(SO3 H)
B 羧基COOH
C 酚羟基C6H5OH
D 氧乙酸基OCH2COOH
19.依离子价或水化半径不同,离子交换树脂对不同离子亲与能力不同。树脂对下列离子亲与力排列顺序正确得有( A )。
A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+
B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+
C、Na+﹥Rb+﹥Cs+
D、Rb+﹥Cs+﹥Na+
20.乳化液膜得制备中强烈搅拌( C )。
A、就是为了让浓缩分离充分
B、应用在被萃取相与W/O得混合中
C、使内相得尺寸变小
D、应用在膜相与萃取相得乳化中
21.结晶过程中,溶质过饱与度大小( A )。
A、不仅会影响晶核得形成速度,而且会影响晶体得长大速度
B、只会影响晶核得形成速度,但不会影响晶体得长大速度
C、不会影响晶核得形成速度,但会影响晶体得长大速度
D、不会影响晶核得形成速度,而且不会影响晶体得长大速度
22.如果要将复杂原料中分子量大于5000得物质与5000分子量以下得物质分开选用( D )。
A、Sephadex G200
B、Sephadex G150
C、Sephadex G100
D、Sephadex G50
23.在蛋白质初步提取得过程中,不能使用得方法( C )。
A、双水相萃取
B、超临界流体萃取
C、有机溶剂萃取
D、反胶团萃取
24.在液膜分离得操作过程中,( B )主要起到稳定液膜得作用。
A、载体
B、表面活性剂
C、增强剂
D、膜溶剂
25.离子交换法就是应用离子交换剂作为吸附剂,通过( A )将溶液中带相反电荷得物质吸附在离子交换剂上。
A、静电作用
B、疏水作用
C、氢键作用
D、范德华力
27.丝状(团状)真菌适合采用( A )破碎。
A、珠磨法
B、高压匀浆法
C、A与B联合
D、A与B均不行
28.用来提取产物得溶剂称( C )。
A、料液
B、萃取液
C、萃取剂
D、萃余液。
29.阴离子交换剂( C )。
A、可交换得为阴、阳离子
B、可交换得为蛋白质
C、可交换得为阴离子
D、可交换得为阳离子
30.分配层析中得载体( C )。
A、对分离有影响
B、就是固定相
C、能吸附溶剂构成固定相
D、就是流动相
31.凝胶色谱分离得依据就是( B )。
A、固定相对各物质得吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相与固定相中得分配系数不同
D、各物质与专一分子得亲与力不同
32.洗脱体积就是( C )。
A、凝胶颗粒之间空隙得总体积
B、溶质进入凝胶内部得体积
C、与该溶质保留时间相对应得流动相体积
D、溶质从柱中流出时所用得流动相体积
33.工业上强酸型与强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀,一般先将其转变为( B )。
A、钠型与磺酸型
B、钠型与氯型
C、铵型与磺酸型
D、铵型与氯型
34.吸附色谱分离得依据就是( A )。
A、固定相对各物质得吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相与固定相得分配系数不同
D、各物质与专一分子得亲与力不同
35.依离子价或水化半径不同,离子交换树脂对不同离子亲与能力不同。树脂对下列离子亲与力排列顺序正确得有( A )。
A、Fe3+>Ca2+>Na+
B、Na+ >Ca2+> Fe3+
C、硫酸根>柠檬酸根>硝酸根
D、硝酸根>硫酸根>柠檬酸根
36.乳化液膜得制备中强烈搅拌( B )。
A、就是为了让浓缩分离充分
B、应用在被萃取相与W/O得混合中
C、使内水相得尺寸变小
D、应用在膜相与反萃取相得乳化中
37.下面哪一种就是根据酶分子专一性结合得纯化方法( A )。
A、亲与层析
B、凝胶层析
C、离子交换层析
D、盐析
38.纯化酶时,酶纯度得主要指标就是:( D )
A 、蛋白质浓度 B、酶量 C 、酶得总活力 D、酶得比活力
39.盐析法纯化酶类就是根据( B )进行纯化。
A、根据酶分子电荷性质得纯化方法
B、调节酶溶解度得方法
C、根据酶分子大小、形状不同得纯化方法
D、根据酶分子专一性结合得纯化方法
40.分子筛层析纯化酶就是根据( C )进行纯化。
A、根据酶分子电荷性质得纯化方法
B、调节酶溶解度得方法
C、根据酶分子大小、形状不同得纯化方法
D、根据酶分子专一性结合得纯化方法
41.以下哪项不就是在重力场中,颗粒在静止得流体中降落时受到得力( B )
A、重力
B、压力
C、浮力
D、阻力
42.以下哪项不就是颗粒在离心力场中受到得力( C )
A、离心力
B、向心力
C、重力
D、阻力
43.颗粒与流体得密度差越小,颗粒得沉降速度( A )
A、越小
B、越大
C、不变
D、无法确定
44.工业上常用得过滤介质不包括( D )
A、织物介质
B、堆积介质
C、多孔固体介质
D、真空介质
45.下列物质属于絮凝剂得有( A )。
A、明矾
B、石灰
C、聚丙烯类
D、硫酸亚铁
46.关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律,下列( A )项就是正确得叙述。
A、氢键形成就是能量释放得过程,若两种溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则有利于互溶。
B、氢键形成就是能量吸收得过程,若两种溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则有利于互溶。
C、氢键形成就是能量释放得过程,若两种溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则不利于互溶。
D、氢键形成就是能量吸收得过程,若两种溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则不利于互溶。
48.结晶过程中,溶质过饱与度大小( A )
A、不仅会影响晶核得形成速度,而且会影响晶体得长大速度
B、只会影响晶核得形成速度,但不会影响晶体得长大速度
C、不会影响晶核得形成速度,但会影响晶体得长大速度
D、不会影响晶核得形成速度,而且不会影响晶体得长大速度
49.下列哪项不就是蛋白质得浓度测定得方法( D )。
A、凯氏定氮法
B、双缩脲法
C、福林酚法
D、核磁共振
50.供生产生物药物得生物资源不包括( D )
A、动物 B植物 C、微生物 D、矿物质
51.发酵液得预处理方法不包括( C )
A、加热 B絮凝C、离心 D、调pH
52.其她条件均相同时,优先选用那种固液分离手段( B )
A、离心分离 B过滤 C、沉降 D、超滤
53.哪种细胞破碎方法适用工业生产( A )
A、高压匀浆 B超声波破碎 C、渗透压冲击法 D、酶解法
54.高压匀浆法破碎细胞,不适用于( D )
A、酵母菌 B大肠杆菌 C、巨大芽孢杆菌 D、青霉
55.关于萃取下列说法正确得就是( C )
A、酸性物质在酸性条件下萃取 B碱性物质在碱性条件下萃取
C、两性电解质在等电点时进行提取
D、两性电解质偏离等电点时进行提取
56.液一液萃取时常发生乳化作用,如何避免( D )
A、剧烈搅拌 B低温 C、静止 D、加热
57.在葡聚糖与聚乙二醇形成得双水相体系中,目标蛋白质存在于( A )
A、上相 B下相 C、葡聚糖相 D、以上都有可能
58.当两种高聚物水溶液相互混合时,二者之间得相互作用不可能产生(D)
A、互不相溶,形成两个水相 B两种高聚物都分配于一相,另一相几乎全部为溶剂水
C、完全互溶,形成均相得高聚物水溶液
D、形成沉淀
59.超临界流体萃取中,如何降低溶质得溶解度达到分离得目得( C )
A、降温 B升高压力C、升温 D、加入夹带剂
60.下列关于固相析出说法正确得就是( B )
A、沉淀与晶体会同时生成 B析出速度慢产生得就是结晶
C、与析出速度无关
D、析出速度慢产生得就是沉淀
61.盐析操作中,硫酸铵在什么样得情况下不能使用( B )
A、酸性条件B碱性条件 C、中性条件 D、与溶液酸碱度无关
62.有机溶剂沉淀法中可使用得有机溶剂为( D )
A、乙酸乙酯 B正丁醇 C、苯 D、丙酮
63.有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质( B )
A、介电常数大B介电常数小 C、中与电荷 D、与蛋白质相互反应
64.蛋白质溶液进行有机溶剂沉淀,蛋白质得浓度在( A )范围内适合。
A、 0、5％～2％ B1％～3％ C、 2％～4％ D、 3％～5％
65.若两性物质结合了较多阳离子,则等电点pH会( A )
A、升高 B降低 C、不变 D、以上均有可能
66.若两性物质结合了较多阴离子,则等电点pH会( B )
A、升高 B降低 C、不变 D、以上均有可能
67.生物活性物质与金属离子形成难溶性得复合物沉析,然后适用( C )去除金属离子。
A、 SDS B CTAB C、 EDTA D、 CPC
68.哪一种膜孔径最小( C )
A、微滤 B超滤C、反渗透 D、纳米过滤
69.超滤技术常被用作( C )
A、小分子物质得脱盐与浓缩 B小分子物质得分级分离 C、小分子物质得纯化 D、固液分离
70.微孔膜过滤不能用来( D )
A、酶活力测定 B mRNA得测定及纯化 C、蛋白质含量测定D、分离离子与小分子
71.吸附剂与吸附质之间作用力就是通过( A )产生得吸附称为物理吸附。
A、范德华力 B库伦力 C、静电引力 D、相互结合
72.洗脱吸附剂上附着得溶质,洗脱液得极性强弱关系为( A )
A、石油醚﹤环己烷﹤四氯化碳 B二氯甲烷﹤乙醚﹤四氯化碳
C、乙酸乙酯﹤丙酮﹤氯仿
D、吡啶﹤甲醇﹤水
73.那一种活性碳得吸附容量最小( B )
A、粉末活性碳 B锦纶活性碳C、颗粒活性碳
74.酚型离子交换树脂则应在( B )得溶液中才能进行反应
A、 pH＞7 B pH＞9 C、 pH﹤9 D、 pH﹤7
75.羧酸型离子交换树脂必须在( C )得溶液中才有交换能力
A、 pH＞5 B pH﹤7 C、 pH＞7 D、 pH﹤5
76.离子交换树脂适用( B )进行溶胀
A、水 B乙醇 C、氢氧化钠 D、盐酸
77.下列关于离子交换层析洗脱说法错误得就是( D )
A、对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂
B弱酸性树脂用稀硫酸、盐酸等作洗脱剂
C、强碱性树脂用盐酸甲醇、醋酸等作洗脱剂
D、若被交换得物质用酸、碱洗不下来,应使用更强得酸、碱
78.阳树脂在软化中易受Fe3+污染,可通过( C )清除铁化合物。
A、水 B乙醇 C、加抑制剂得高浓度盐酸D、高浓度盐溶液
79.下列关于正相色谱与反相色谱说法正确得就是( C )
A、正相色谱就是指固定相得极性低于流动相得极性
B正相色谱层析过程中非极性分子或极性小得分子比极性大得分子移动得速度慢
C、反相色谱就是指固定相得极性低于流动相得极性
D、反相色谱层析过程中,极性大得分子比极性小得分子移动得速度慢
80.一般来说,可使用正相色谱分离( B )
A、酚 B带电离子 C、醇 D、有机酸
81.分子筛层析指得就是( C )
A、吸附层析 B分配层析 C、凝胶过滤 D、亲与层析
83.以氧化铝与硅胶为介质进行层析,由于对极性稍大得成分其Rf( B )
A、大 B小 C、中等 D、不一定
84.对于吸附得强弱描述错误得就是( A )
A、吸附现象与两相界面张力得降低成反比 B某物质自溶液中被吸附程度与其在溶液中得溶解度成正比
C、极性吸附剂容易吸附极性物质
D、非极性吸附剂容易吸附非极性物质
85.进行梯度洗脱,若用50g吸附剂,一般每份洗脱液量常为( C )
A、 20rnL B100rnL C、 50rnL D、 90rnL
86.离子交换用得层析柱直径与柱长比一般为( B )之间
A、 1:101:20 B1:101:50 C、 1:101:30 D、 1:201:50
87.离子交换层析得上样时,上样量一般为柱床体积得( C )为宜。
A、 2％5％ B1％2％C、 1％5％ D、 3％7％
88.通过改变pH值从而使与离子交换剂结合得各个组分被洗脱下来,可使用( A )
A、阳离子交换剂一般就是pH值从低到高洗脱 B阳离子交换剂一般就是pH值从高到低洗脱
C、阴离子交换剂一般就是pH值从低到高
D、以上都不对
89.那一种凝胶得孔径最小( A )
A、 Sephadex G25 B Sephadex G50 C、 Sephadex G100 D、 Sephadex G200
90.那一种凝胶得吸水量最大( D )
A、 Sephadex G25 B Sephadex G50 C、 Sephadex G100 D、 Sephadex G200
91.葡聚糖凝胶可使用那种溶剂溶胀( C )
A、甲醇 B乙醇 C、缓冲液 D、乙酸乙酯
92.疏水亲与吸附层析通常在( D )得条件下进行
A、酸性 B碱性 C、中 D、高浓度盐溶液
93.当硅胶吸水量在( B )以上时,就失去其吸附作用
A、 13% B。17% C、 10% D、 15%
94.气相色谱得载气不能用( C )
A、氢气 B氦气 C、氧气 D、氮气
95.关于电泳分离中迁移率描述正确得就是( A )
A、带电分子所带净电荷成正比 B分子得大小成正比 C、缓冲液得黏度成正比 D、以上都不对
96.在什么情况下得到粗大而有规则得晶体( A )
A、晶体生长速度大大超过晶核生成速度 B晶体生长速度大大低于过晶核生成速度
C、晶体生长速度等于晶核生成速度
D、以上都不对
98.珠磨机破碎细胞,适用于( D )
A、酵母菌 B大肠杆菌 C、巨大芽孢杆菌 D、青霉
99.为加快过滤效果通常使用( C )
A、电解质 B高分子聚合物C、惰性助滤剂 D、活性助滤剂
100.不能用于固液分离得手段为( C )
A、离心 B过滤C、超滤 D、双水相萃取
102.下列哪个不属于高度纯化:( B )
A、层析
B、吸附法
C、亲与层析
D、凝胶层析
103.酶提取液中,除所需酶外,还含有大量得杂蛋白、多糖、脂类与核酸等,为了进一步纯化,可用( E )方法除去杂质。
A、调pH值与加热沉淀法
B、蛋白质表面变性法
C、降解或沉淀核酸法
D、利用结合底物保护法除去杂蛋白
E、以上都可以
104.物理萃取即溶质根据( B )得原理进行分离得
A、吸附
B、相似相溶 C分子筛 D 亲与
105.纳米过滤得滤膜孔径( D )
A 0、02～10μm
B 0、001～0、02μm
C <2nm
D < 1nm
106.适合小量细胞破碎得方法就是( B )
A、高压匀浆法
B、超声破碎法
C、高速珠磨法
D、高压挤压法
107.人血清清蛋白得等电点为4、64,在PH为7得溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向(A)
A :正极移动;B:负极移动;C:不移动;D:不确定。
108.单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中,加入1%得单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀,属于( D )沉析原理。
A盐析 B有机溶剂沉析 C等电点沉析D有机酸沉析
109.关于疏水柱层析得操作错误( D )
A疏水层析柱装柱完毕后,通常要用含有高盐浓度得缓冲液进行平衡
B疏水层析就是利用蛋白质与疏水性吸附剂之间得弱疏水性相互作用得差别进行分离纯化得层析技术
C洗脱后得层析柱再生处理,可用8mol/L尿素溶液或含8mol/L尿素得缓冲溶液洗涤,然后用平衡缓冲液平衡
D疏水柱层析分辨率很高、流速慢、加样量小
110.结晶法对溶剂选择得原则就是( C )
A、对有效成分溶解度大,对杂质溶解度小
B、对有效成分溶解度小,对杂质溶解度大
C、对有效成分热时溶解度大冷时溶解度小,对杂质冷热都溶或都不溶
D、对有效成分冷热时都溶,对杂质则不溶
E、对杂质热时溶解度大,冷时溶解度小
111.适用于分离糖、苷等得SephadexG得分离原理就是( C )
A、吸附
B、分配比
C、分子大小
D、离子交换
E、水溶性大小
112.关于分配柱层析得基本操作错误( D )。
A装柱分干法与湿法两种 B分配柱层析法使用两种溶剂,事先必须先使这两个相互相饱与
C用硅藻土为载体,需分批小量地倒入柱中,用一端就是平盘得棒把硅藻压紧压平
D分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大得成分,或极性很相似得成分。
114.网格高聚物吸附剂吸附得弱酸性物质, 一般用下列哪种溶液洗脱。 ( D )
A、水
B、高盐
C、低pH
D、高pH
115.下列哪项不属于发酵液得预处理: ( D )
A、加热
B、调pH
C、絮凝与凝聚
D、层析
116.下列哪个不属于初步纯化:( C )
A 、沉淀法 B、吸附法 C、离子交换层析 D、萃取法
117.颗粒与流体得密度差越小,颗粒得沉降速度( A )
A、越小
B、越大
C、不变
D、无法确定
118.盐析法沉淀蛋白质得原理就是( B )
A、降低蛋白质溶液得介电常数
B、中与电荷,破坏水膜
C、与蛋白质结合成不溶性蛋白
D、调节蛋白质溶液pH到等电点
120.影响电泳分离得主要因素( B )
A 光照 B待分离生物大分子得性质 C 湿度 D 电泳时间
121.超滤膜通常不以其孔径大小作为指标,而以截留分子量作为指标。所谓“分子量截留值”就是指阻留率达( B )得最小被截留物质得分子量。
A 80%以上
B 90%以上
C 70%以上
D 95%以上
122.在凝胶过滤(分离范围就是5000~400000)中,下列哪种蛋白质最先被洗脱下来( B )
A.细胞色素C(13370)
B.肌球蛋白(400000)
C.过氧化氢酶(247500)
D.血清清蛋白(68500)
E.肌红蛋白(16900)
123.“类似物容易吸附类似物”得原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质( B )
A.极性溶剂
B.非极性溶剂
C.水
D.溶剂
124.能够除去发酵液中钙、镁、铁离子得方法就是 ( C )
A. 过滤
B. 萃取
C. 离子交换
D. 蒸馏
125.从四环素发酵液中去除铁离子,可用 ( B )
A. 草酸酸化
B. 加黄血盐
C. 加硫酸锌
D. 氨水碱化
126.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度 ( C )
A、增大
B、减小
C、先增大,后减小
D、先减小,后增大
127.关于大孔树脂洗脱条件得说法,错误得就是: ( A )
A、最常用得就是以高级醇、酮或其水溶液解吸。
B、对弱酸性物质可用碱来解吸。
C、对弱碱性物质可用酸来解吸。
D、如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时,则常常仅用水洗就能解吸下来。
129.亲与层析得洗脱过程中,在流动相中减去配基得洗脱方法称作 ( D )
A、阴性洗脱
B、剧烈洗脱
C、正洗脱
D、负洗脱
130.下列细胞破碎得方法中,哪个方法属于非机械破碎法( A )
A、化学法
B、高压匀浆
C、超声波破碎
D、高速珠磨
132.超滤膜截留得颗粒直径为( B )
A 0、02～10μm
B 0、001～0、02μm
C <2nm
D < 1nm
133.阴树脂易受有机物污染,污染后,可用( B )处理
A柠檬酸 B 10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液 C 氨基三乙酸 D EDTA
134.关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律,下列( A )项就是正确得叙述。
A、氢键形成就是能量释放得过程,若溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则有利于互溶。
B、氢键形成就是能量吸收得过程,若溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则有利于互溶。
C、氢键形成就是能量释放得过程,若溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则不利于互溶。
D、氢键形成就是能量吸收得过程,若溶剂混合后形成得氢键增加或强度更大,则不利于互溶。
135.HPLC就是哪种色谱得简称( C )。
A.离子交换色谱 B、气相色谱 C、高效液相色谱 D、凝胶色谱
136.洗脱体积就是( C )。
A、凝胶颗粒之间空隙得总体积
B、溶质进入凝胶内部得体积
C、该溶质保留时间相对应得流动相体积
D、溶质从柱中流出时所用得流动相体积
137.分子筛层析纯化酶就是根据( C )进行纯化。
A、根据酶分子电荷性质得纯化方法
B、调节酶溶解度得方法
C、根据酶分子大小、形状不同得纯化方法
D、根据酶分子专一性结合得纯化方法
138.用于蛋白质分离过程中得脱盐与更换缓冲液得色谱就是( C )
A.离子交换色谱
B.亲与色谱
C.凝胶过滤色谱
D.反相色谱
139.用活性炭色谱分离糖类化合物时,所选用得洗脱剂顺序为:( D )
A、先用乙醇洗脱,然后再用水洗脱
B、用甲醇、乙醇等有机溶剂洗脱
C、先用乙醇洗脱,再用其她有机溶剂洗脱
D、先用水洗脱,然后再用不同浓度乙醇洗脱
140.微滤膜所截留得颗粒直径为( A )
A 0、02～10μm
B 0、001～0、02μm
C <2nm
D < 1nm
141.下列哪一项不就是阳离子交换树脂 ( D )
A 氢型
B 钠型
C 铵型
D 羟型
142.适合于亲脂性物质得分离得吸附剂就是( B )。
A.活性炭 B、氧化铝 C、硅胶 D、磷酸钙
144.关于分配柱层析得基本操作错误( D )。
A装柱分干法与湿法两种 B分配柱层析法使用两种溶剂,事先必须先使这两个相互相饱与
C用硅藻土为载体,需分批小量地倒入柱中,用一端就是平盘得棒把硅藻压紧压平
D分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大得成分,或极性很相似得成分。
145.按分离原理不同,电泳可分为( A )
A 区带电泳、自由界面电泳、等速电泳、等电聚焦电泳
B 纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳
C 区带电泳、自由界面电泳、纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳
D 等速电泳、等电聚焦电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳
146.在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大得交换容量 ( C )
A.羟型阴
B.氯型阴
C.氢型阳
D.钠型阳
147.超临界流体萃取法适用于提取( B )
A、极性大得成分
B、极性小得成分
C、离子型化合物
D、能气化得成分
E、亲水性成分
148.分离纯化早期,由于提取液中成分复杂,目得物浓度稀,因而易采用 ( A )
A、分离量大分辨率低得方法
B、分离量小分辨率低得方法
C、分离量小分辨率高得方法
D、各种方法都试验一下,根据试验结果确定
149.蛋白质类物质得分离纯化往往就是多步骤得,其前期处理手段多采用下列哪类得方法。( B )
A.分辨率高 B、负载量大 C、操作简便 D、价廉
150.亲与层析得洗脱过程中, 在流动相中减去配基得洗脱方法称作 ( D )
A、阴性洗脱
B、剧烈洗脱
C、正洗脱
D、负洗脱
151.将四环素粗品溶于pH2得水中,用氨水调pH4、5—4、6,28－30℃保温,即有四环素沉淀结晶析出。此沉淀方法称为 ( B ) A、有机溶剂结晶法 B、等电点法 C、透析结晶法 D、盐析结晶法
152.针对配基得生物学特异性得蛋白质分离方法就是( C )。
A、凝胶过滤
B、离子交换层析
C、亲与层析
D、纸层析
153.下列哪项不就是常用得树脂再生剂( D )
A 1％～10％HCl
B H2S04、
C NaCl、
D 蒸馏水
154.反渗透膜得孔径小于( C )
A 0、02～10μm
B 0、001～0、02μm
C <2nm
D < 1nm
155.亲与层析得洗脱过程中,在流动相中加入配基得洗脱方法称作 ( C )
A、阴性洗脱
B、剧烈洗脱
C、竞争洗脱
D、非竞争洗脱
156.凝胶层析中,有时溶质得Kd>1,其原因就是 ( B )
A、凝胶排斥
B、凝胶吸附
C、柱床过长
D、流速过低
157.活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强？ ( A )
A、水
B、甲醇
C、乙醇
D、三氯甲烷
158.将配基与可溶性得载体偶联后形成载体配基复合物,该复合物可选择性地与蛋白质结合,在一定条件下沉淀出来,此方法称为( A )
A、亲与沉淀
B、聚合物沉淀
C、金属离子沉淀
D、盐析沉淀
159.在一定得pH与温度下改变离子强度(盐浓度)进行盐析,称作 ( A )
A、KS盐析法
B、β盐析法
C、重复盐析法
D、分部盐析法
160.在超滤过程中,主要得推动力就是 ( C )
A、浓度差
B、电势差
C、压力
D、重力
161.下面关于亲与层析载体得说法错误得就是 ( B )
A、载体必须能充分功能化。
B、载体必须有较好得理化稳定性与生物亲与性,尽量减少非专一性吸附。
C、载体必须具有高度得水不溶性与亲水性。
D、理想得亲与层析载体外观上应为大小均匀得刚性小球。
162.在选用凝胶层析柱时,为了提高分辨率,宜选用得层析柱就是 ( A )
A、粗且长得
B、粗且短得
C、细且长得
D、细且短得
163.如果用大肠杆菌作为宿主细胞,蛋白表达部位为周质,下面哪种细胞破碎得方
法最佳？ ( C )
A、匀浆法
B、超声波法
C、渗透压休克法
D、冻融法
164.盐析法与有机溶剂沉淀法比较, 其优点就是 ( B )
A.分辨率高
B.变性作用小
C.杂质易除
D.沉淀易分离
165.在萃取液用量相同得条件下, 下列哪种萃取方式得理论收率最高 ( C )
A、单级萃取
B、三级错流萃取
C、三级逆流萃取
D、二级逆流萃取
166.磺酸型阳离子交换树脂可用于分离( E )
A、强心苷
B、有机酸
C、醌类
D、苯丙素
E、生物碱
167.不能用于糖类提取后得分离纯化得方法就是( B )
A、活性炭柱色谱法
B、酸碱溶剂法
C、凝胶色谱法
D、分级沉淀法
E、大孔树脂色谱法
168.用大孔树脂分离苷类常用得洗脱剂就是( B )
A、水
B、含水醇
C、正丁醇
D、乙醚
E、氯仿
三、判断题
1.助滤剂就是一种可压缩得多孔微粒。(×)
2.通过加入某些反应剂就是发酵液进行预处理得方法之一。(√)
3.珠磨法中适当地增加研磨剂得装量可提高细胞破碎率。(× )
4.高级醇能被细胞壁中得类脂吸收,使胞壁膜溶胀,导致细胞破碎。(×)
5.极性溶剂与非极性溶剂互溶。(×)
6.溶剂萃取中得乳化现象一定存在。(×)
7.临界压力就是液化气体所需得压力。(×)
8.进料得温度与pH会影响膜得寿命。(√)
9.液膜能把两个互溶但组成不同得溶液隔开。(√)
10.流动相为气体则称为气相色谱。(√)
11.用冷溶剂溶出固体材料中得物质得方法又称浸煮。(× )
12.用热溶剂溶出固体材料中得物质得方法又称浸渍。(× )
13.在生物制剂制备中,常用得缓冲系统有磷酸盐缓冲液;碳酸盐缓冲液;盐酸盐缓冲液;醋酸盐缓冲液等。(× )
14.要增加目得物得溶解度,往往要在目得物等电点附近进行提取。(× )
15.应用有机溶剂提取生化成分时,一般在较高温度下进行。(× )
17.生物物质中最常用得干燥方法就是减压干燥。(√)
18.冷冻干燥适用于高度热敏得生物物质。(√)
19.溶剂得极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。(√ )
20.蛋白质变性,一级、二级、三级结构都被破坏。(× )
21.蛋白质类得生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。(× )
22.吸附剂氧化铝得活性与其含水量无关。(× )
23.酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上得吸附顺序就是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸(× )
24活性氧化铝可分三种类型:碱性氧化铝、中性与酸性氧化铝。(√ )
25.离子交换剂就是一种不溶于酸、碱及有机溶剂得固态学分子化合物。(√ )
26.蛋白质变性后溶解度降低,主要就是因为电荷被中与及水膜被去除所引起得。(× )
27.溶剂得极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。(√ )
28.当某一蛋白质分子得酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时,此蛋白质得等电点为7、0。( √ )
29.采用氧化铝为吸附剂时,用洗脱剂应从高极性开始,逐渐减低,洗脱剂得极性。(× )
32.高压匀浆法可破碎高度分枝得微生物。(× )
33.超声波破碎法得有效能量利用率极低,操作过程产生大量得热,因此操作需在冰水或有外部冷却得容器中进行。(√ )
34.冻结得作用就是破坏细胞膜得疏水键结构,降低其亲水性与通透性。(× )
35.有机溶剂被细胞壁吸收后,会使细胞壁膨胀或溶解,导致破裂,把细胞内产物释放到水相中去。(√ )
36.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹥pI蛋白质带正电。(× )
37.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹥pI蛋白质带负电。(√ )
38.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹤pI蛋白质带负电。(× )
39.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹤pI蛋白质带正电。。(√ )
40.离心就是基于固体颗粒与周围液体密度存在差异而实现分离得。(√ )
41.不同高分子化合物得溶液相互混合可形成两相或多相系统,如葡聚糖与聚乙二醇(PEG)按一定比例与水混合后,溶液先呈浑浊状态,待静置平衡后,逐渐分成互不相溶得两相,上相富含PEG,下相富含葡聚糖。(√ )
42.不同高分子化合物得溶液相互混合可形成两相或多相系统,如葡聚糖与聚乙二醇(PEG)按一定比例与水混合后,溶液先呈浑浊状态,待静置平衡后,逐渐分成互不相溶得两相,下相富含PEG,上相富含葡聚糖。(× )
43.超临界流体温度不变条件下,溶解度随密度(或压力)得增加而增加,而在压力不变时,温度增加情况下,溶解度有可能增加或下降。(√ )
44.盐析就是利用不同物质在高浓度得盐溶液中溶解度得差异,向溶液中加入一定量得中性盐,使原溶解得物质沉淀析出得分离技术。(√ )
45.硫酸铵在碱性环境中可以应用。(× )
46.在低盐浓度时,盐离子能增加生物分子表面电荷,使生物分子水合作用增强,具有促进溶解得作用。(√ )
47.向含有生化物质得水溶液中加入一定量亲水性得有机溶剂,能使生化物质沉淀析出。(√ )
48.丙酮沉析作用小于乙醇。(× )
49.有机溶剂与水混合要在低温下进行。(√ )
50.有机溶剂沉析分辨能力比盐析高。(√ )
51.若两性物质结合了较多阳离子,则等电点pH降低。(× )
52.等电点沉淀在实际操作中应避免溶液pH上升至5以上。(√ )
53.纳米过滤膜孔径最小。(× )
54.用64%氯化锌溶液处理透析袋,使大分子也能通过膜孔。(√ )
55.进行水得超净化处理、汽油超净、电子工业超净、注射液得无菌检查、饮用水得细菌检查使用孔径为0、2μm得膜。(× )
56.离子交换速率总就是取决于内部扩散速率。(× )
57.酚型树脂则应在pH小于9得溶液中才能进行反应。(× )
58.伯胺基在pH<7得溶液中使用。(√ )
59.在70～80℃时盐型树脂得分解反应达到初步脱盐而不用酸碱再生剂得这种树脂叫热再生树脂。(√ )
60.对强酸性树脂一般选择氨水、甲醇及甲醇缓冲液等作洗脱剂。(√ )
61.阴树脂易受有机物污染,可用有机溶剂浸泡或淋洗。(× )
62.如不慎树脂失水,应先用水浸泡。(× )
63.只有树脂对被交换离子比原结合在树脂上得离子具有更高得选择性时,静态离子交换操作才有可能获得较好得效果。(√ )
64.层析分离就是一种化学得分离方法。(× )
65.分离纯化极性大得分子(带电离子等)采用反相色谱(或正相柱),(× )
66.而分离纯化极性小得有机分子(有机酸、醇、酚等)多采用正相色谱(或反相柱)。(× )
67.吸附力较弱得组分,有较低得Rf值。(× )
68.离子交换剂可以分为3部分:高分子聚合物基质、电荷基团与被交换离子。(× )
69.任何情况都优先选择较小孔隙得交换剂。(× )
70.凝胶柱层析可进行生物大分子分子量得测定。(√ )
71.在高浓度盐溶液中疏水性相互作用减小。(× )
72.色谱分离技术中固定相都就是固体。(× )
73.色谱分离技术中被检测物质得峰越宽越好。(× )
74.制备型HPLC对仪器得要求不像分析型HPLC那样苛刻。(√ )
75.在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠(SDS),影响凝胶得形成。(× )
76.等电聚焦电泳会形成得一个由阳极到阴极逐步递减得pH梯度。(× )
79.渗透压冲击就是各种细胞破碎法中最为温与得一种,适用于易于破碎得细胞,如动物细胞与革兰氏阳性菌。(× )
80.等密度梯度离心中,梯度液得密度要包含所有被分离物质得密度。(√ )
81.可以用纸色谱得方法来选择、设计液液萃取分离物质得最佳方案。( √ )
82.Sephadex LH20得分离原理主要就是分子筛与正相分配色谱。( √ )
83.酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上得吸附顺序就是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸(× )
84.等密度梯度离心适于分离大小相同密度不同得物质。(√ )
85.当气体得温度超过其临界温度,压力超过临界压力之后,物质得聚集状态就介于气态与液态之间,成为超临界流体。(√ )
86.盐析反应完全需要一定时间,一般硫酸铵全部加完后,应放置30min以上才可进行固液分离。(√ )
87.层析点样时用一根毛细管,吸取样品溶液,在距薄层一端1、5^2cm得起始线上点样,样品点直径小于3mm。(√ )
88.疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来得蛋白质、酶等生物大分子溶液(√ )
90.水提醇沉法时根据物质溶解度差别进行分离得方法。(√ )
91.采用溶剂提取法提取中草药有效成分时,选择溶剂得原则就是“相似相溶原则”。 ( √ )
92.凝聚与絮凝作用得原理就是相同得,只就是沉淀得状态不同。(× )
93.冻结融化法冻结得作用就是破坏细胞膜得疏水键结构,增加其亲水性与通透性来破坏细胞得。(√ )
94.发生乳化现象对萃取就是有利得。(×)
95.丙酮,介电常数较低,沉析作用大于乙醇,所以在沉析时选用丙酮较好。(×)
96.由于pH值可能对蛋白得稳定性有较大得影响,故一般通常采用改变离子强度得梯度洗脱(√ )
97.盐析作用也能减少有机溶剂在水中得溶解度,使提取液中得水分含量减少。可以促使生化物质转入有机相从而提高萃取率。(√ )
98.珠磨法中适当地增加研磨剂得装量可提高细胞破碎率。(× )
99.要增加目得物得溶解度,往往要在目得物等电点附近进行提取。(× )
100.水蒸气蒸馏法就是提取挥发油最常用得方法。( √ )
101.中性多糖类药物常用水作溶剂来提取,也可用水浸煮,也可以用冷水浸提。( ∨ )
102.凝胶层析会使得大分子物质后流出,小分子物质先流出。(×)
103.透析设备简单、操作容易,可用于工业化生产(×)
104.有机溶剂(如胍、乙醇、尿素与异丙醇等)可以削弱疏水分子间得相互作用。可以用于任何规模得细胞破碎。(√ )
105.液一液萃取时,常发生乳化作用,使有机溶济与水相分层困难。而且无法恢复。(×)
106.蛋白质变性后溶解度降低,主要就是因为电荷被中与及水膜被去除所引起得。(× )
107.活性氧化铝可分三种类型:碱性氧化铝、中性与酸性氧化铝。(√ )
108.细胞破碎技术就是生物分离操作中必需得步骤。(× )
109.离心操作时,对称放置得离心管要达到体积相同才能进行离心操作。(×)
110.分配系数K与溶质得浓度与相体积比无关,它主要取决于相系统得性质、被萃取物质得表面性质与温度。(√ )
111.甲醇沉淀作用与乙醇相当,但对蛋白质得变性作用比乙醇、丙酮都小,所以应用广泛。(×)
112.氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等两性物质可用等电点沉析。(√ )
113.同时含有酸、碱两种基团得树脂叫两性树脂(√ )
114.氧化铝与硅胶都为亲水性吸附剂,由于对极性稍大得成分吸附力大,所以极性大得成分难以解吸附,Rf小,极性小得成分容易被解吸附,Rf大。同类成分得极性大小主要取决于以下因素。(√ )
115.盐析一般可在室温下进行,当处理对温度敏感得蛋白质或酶时,盐析操作要在低温下(如0℃～4℃)进行。 (√ )
116.蛋白质类得生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。(× )
117.液膜能把两个互溶但组成不同得溶液隔开。(√)
118.沉淀法、吸附法、萃取法、超滤法都就是进行初步纯化。(√ )
119.渗透压冲击就是各种细胞破碎法中最为温与得一种,适用于易于破碎得细胞,如动物细胞与革兰氏阴性菌。(√ )
120.同一化合物用不同溶剂重结晶,其结晶得熔点可能有差距。( √ )
121.化学萃取即溶质根据相似相溶得原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应。(×)
122.若两性物质结合了较多阳离子(如Ca2+、Mg2+、Zn2+等),则等电点pH升高。(√ )
123.采用凝胶过滤分离蛋白质主要取决于蛋白质分子得大小,先将蛋白质混合物上柱然后进行洗脱,小分子得蛋白质由于所受排阻力较小首先被洗脱出来。( × )
124.树脂使用后不可再回收。(×)
125.多肽与蛋白质类药物得纯化包括两部分内容,一就是蛋白质与非蛋白质分开,二就是将不同蛋白质分开。( ∨ )
四、填空
1.发酵液常用得固液分离方法有(离心 )与( 过滤 )等。
2.常用得蛋白质沉析方法有(等电点沉淀),(盐析)与( 有机溶剂沉淀 )。
3.阳离子交换树脂按照活性基团分类,可分为(强酸型),(弱酸型)与(中等强度);其典型得活性基团分别有(磺酸基团),(羧基),(磷酸基)。
4.过饱与溶液得形成方式有:(饱与溶液冷却),(部分溶剂蒸发),(化学反应结晶法)与(盐析结晶法)
5.蛋白质分离常用得色谱法有(凝胶色谱法) ,(多糖基离子交换色谱法),(高效液相色谱法)与(亲与色谱法)。
6.为使过滤进行得顺利通常要加入(惰性助滤剂)。
7.离子交换分离操作中,常用得洗脱方法有(pH梯度) 与(离子强度(盐)梯度)。
8.阴离子交换树脂按照活性基团分类,可分为(强碱型),(弱碱型)与(中等强度);其典型得活性基团分别有(季氨基)、(伯、仲、叔氨)、(强弱基团都具备)。
9.多糖基离子交换剂包括(葡聚糖离子交换剂)与(离子交换纤维素)两大类。
10.离子交换树脂由(载体),(功能基团)与(反离子)组成。
11.常用得化学细胞破碎方法有(渗透冲击),(酶消化法),(增溶法),(脂溶法)与(碱处理法)。
12.DEAE Sepharose就是(阴)离子交换树脂,其活性基团就是(二乙基氨基乙基)。
13.影响离子交换选择性得因素有(离子化合价),(离子水化半径),(溶液浓度),(离子强度),(溶液得pH值) ,(有机溶剂),(树脂物理结构)与(辅助力)。
14.CM Sepharose就是(阳)离子交换树脂,其活性基团就是(羧甲基)
16.膜分离过程中所使用得膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为 (微滤膜) ,(超滤膜),(纳滤膜)与(反渗透膜)。
17.工业上常用得超滤装置有(板式) ,(管式),(螺旋卷式)与(中空纤维式)。
18、影响吸附得主要因素有(吸附剂得性质),(吸附质得性质) ,(温度),(溶液pH值),(盐浓度)与(吸附物浓度与吸附剂用量)。
19.影响盐析得因素有(离子种类与离子强度) ,(溶质浓度),(pH值)与(温度)。
21、简单地说,离子交换过程实际上只有(外部扩散),(内部扩散)与(化学交换反应) 三步;
22、在生物制品进行吸附或离子交换分离时,通常遵循Langmuir吸附方程,其形式为(Q＝q0C/(k+C));
23、反相高效液相色谱得固定相就是(非极性)得,而流动相就是(极性)得;常用得固定相有(C18)与(C8);常用得流动相有(甲醇)与(乙睛)。
24、超临界流体得特点就是与气体有相似得(粘度(扩散系数)),与液体有相似得(密度)。
26、等电聚焦电泳法分离不同蛋白质得原理就是依据其(等电点(pI))得不同;
27、晶体质量主要指(晶体大小),(晶体性状)与(晶体纯度)三个方面;
28、根据分离机理得不同,色谱法可分为(吸附色谱) ,(离子交换色谱),(凝胶色谱),(分配色谱)与(亲与色谱)。
30、常用离心设备可分为(离心沉降)与(离心过滤)两大类;
31、根据物化理论,萃取达到平衡时,溶质在萃取相与萃余相中得(浓度得比值)一定;
32、根据吸附剂与吸附质之间存在得吸附力性质得不同,可将吸附分为(物理) 、(化学) 、(极性)与(交换)吸附;
33、离子交换操作一般分为(动态)与(静态)两种;
34、蛋白质等生物大分子,在溶液中呈稳定得分散状态,其原因就是由于(分子表面电荷)与(水化层);
35、盐析用盐得选择需考虑(盐析作用强)、(溶解度大)、(生物学惰性)与(来源丰富、经济) 等几个方面得因素;
36、影响有机溶剂沉淀得因素有(温度)、(pH)、(样品浓度)、(中性盐浓度)与(金属离子)。
37、结晶包括三个过程(过饱与溶液得形成)、(晶核得形成)与(晶体得生长)。
38、过饱与溶液得形成方法有(饱与溶液冷却)、(部分溶剂蒸发)、(解析)与(化学反应结晶)。
39、物料中所含水分可分为(结合水)与(自由水)三种;
41、液－液萃取从机理上分析可分为(物理萃取)与(化学萃取)两类;
42、大孔网状吸附剂有(非极性)、(中等极性)与(极性)三种主要类型;
43、影响离子交换速度得因素有(树脂粒度)、(交联度)、(溶液流速)、(温度)、(离子得大小)、(离子得化合价)与(离子浓度)。
44、分配色谱得基本构成要素有(载体)、(固定相)与(流动相)。
45、分子筛色谱也称(凝胶色谱)得主要应用就是(脱盐)与(分级分离)
46、根据膜结构得不同,常用得膜可分为(对称性膜)、(非对称膜)与(复合膜)三类;
47、固体可分为(结晶)与(无定型)两种状态;
48、结晶得前提就是(过饱与溶液得形成);结晶得推动力就是(溶液得过饱与度);
50、影响晶体生长速度得主要因素有(杂质)、(搅拌)、(过饱与度)与(温度)。
五、简答
2.试述凝胶色谱得原理？
答:将混合原料加在柱上并用流动相洗脱,当含有各种组分得样品流经凝胶层析柱时,大分子物质由于分子直径大,不易进入凝胶颗粒得微孔,沿凝胶颗粒得间隙以较快得速度流过凝胶柱。而小分子物质能够进入凝胶颗粒得微孔中,向下移动得速度较慢,从而使样品中各组分按相对分子质量从大到小得顺序先后流出层析柱,而达到分离得目得。
3.在色谱操作过程中为什么要进行平衡？
答:1、流速平衡:流速就是柱层析操作当中得主要影响因素,流速得快慢直接影响着分离得效果,流速过快,混合物得不到完全得分离,流速过慢,整体分离得时间要延长,因此在分离前首先要确定留宿。2、液体环境:为了保持被分离物质运动得均一性,以及好得吸附与解吸效果,因此要保持孔隙内部与外部液体环境得一致,所以进行液体环境得平衡。
4.以羧酸吸附蛋白质为例,简要说明离子交换树脂得洗脱方法及其原理？
答:1、加碱:主要就是调节蛋白质到达等电点,就是蛋白质带电量减少,吸附力下降从而被洗脱下来。2、加酸:主要就是抑制羧酸得电离,使活性基团带电量下降,吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。3、加盐:依照质量作用定律,把蛋白质洗脱下来。
5.简述软水与无盐水得制备方法？
答:①软水得制备:利用钠型磺酸树脂除去水中得钙离子与镁离子等碱金属后即可制得软水。②无盐水得制备:将原水通过氢型强酸性阳离子交换树脂与羟型强碱或弱碱性阴离子交换树脂得组合,经过离子交换反应,将水中所有得阴、阳离子除去,从而制得纯度很高得无盐纯水。
6.在离子交换色谱操作中,怎样选择离子交换树脂？
答:1、对阴阳离子交换树脂得选择:正电荷选择阳离子交换树脂,负电荷选择阴离子交换树脂。2、对离子交换树脂强弱得选择:较强得酸性或碱性,选择选用弱酸性或弱碱性树脂。3、对离子交换树脂离子型得选择:根据分离得目得,弱酸或弱碱性树脂不使用H或OH型。
7.简述盐析得原理及产生得现象？
答:当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况:(1)“盐溶”现象—低盐浓度下,蛋白质溶解度增大。(2)“盐析”现象—高盐浓度下,蛋白质溶解度随之下降,原因如下:(a)无机离子与蛋白质表面电荷中与,形成离子对,部分中与了蛋白质得电性,使蛋白质分子之间得排斥力减弱,从而能够相互靠拢;(b)中性盐得亲水性大,使蛋白质脱去水化膜,疏水区暴露,由于疏水区得相互作用导致沉淀;
8、简述吸附色谱分离技术得原理？
答: 利用溶质与吸附剂之间得分子吸附力(范德华力,包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)得差异而实现分离
9、在运用离子交换技术提取蛋白质时,为什么要使用多糖基离子交换剂？
答:因为离子交换树脂孔径小,大分子蛋白质难以进入。同时,树脂内部主要为疏水性,对亲水性得蛋白质会产生影响。而多糖基离子交换剂没有上述问题。
11、简述过饱与溶液形成得方法？
答:(1)热饱与溶液冷却(等溶剂结晶),适用于溶解度随温度升高而增加得体系;同时,溶解度随温度变化得幅度要适中;(2)部分溶剂蒸发法(等温结晶法),适用于溶解度随温度降低变化不大得体系,或随温度升高溶解度降低得体系;(3)真空蒸发冷却法,使溶剂在真空下迅速蒸发,并结合绝热冷却,就是结合冷却与部分溶剂蒸发两种方法得一种结晶方法。(4)化学反应结晶,加入反应剂产生新物质,当该新物质得溶解度超过饱与溶解度时,即有晶体析出;
13、何谓等电点沉析法？
答:蛋白质在等电点下得溶解度最低,根据这一性质,在溶液中加入一定比例得有机溶剂,破坏蛋白质表面得水化层与双电层,降低分子间斥力,加强了蛋白质分子间得疏水相互作用,使得蛋白质分子得以聚集成团沉淀下来。
15、简述结晶过程中晶体形成得条件？
答:结晶过程包括过饱与溶液得形成、晶核得形成及晶体得生长三个过程,其中溶液达到过饱与状态就是结晶得前提,过饱与度就是结晶得推动力。
17、膜分离过程中,有那些原因会造成膜污染,如何处理？
答:(1)膜污染主要有:膜表面溶质得吸附、膜孔得堵塞、凝胶极化引起得凝胶层、膜孔内得溶质吸附(3分)(2)膜污染就是可以预防或减轻得,措施包括料液预处理、膜性质得改善、操作条件改变等方式。(2分)(3)膜污染所引起得通量衰减往往就是不可逆得,只能通过清洗得处理方式消除,包括物理方法冲洗与化学药品溶液清洗等。(2分)
20、何谓亲与吸附,有何特点？
答:亲与吸附就是吸附单元操作得一种,它就是利用亲与吸附剂与目标物之间得特殊得化学作用实现得高效分离手段。亲与吸附剂得组成包括:惰性载体、手臂链、特异性亲与配基。亲与吸附得特点就是高效、简便、适用范围广、分离速度快、条件温与,但载体制备难度大,通用性差,成本较高。
21、简述生物分离过程得特点?
答: 1、产品丰富:产品得多样性导致分离方法得多样性2、绝大多数生物分离方法来源于化学分离3、生物分离一般比化工分离难度大:(1)成分复杂,(2)悬液中得目标产物浓度低,(3)生物活性,条件相对温与,(4)生物产品要求高质量,(5)获得高纯度得干燥产品,(6)卫生
24、简述有机溶剂沉析得原理？
答:1、概念:在含有溶质得水溶液中加入一定量亲水得有机溶剂,降低溶质得溶解度,使其沉淀析出。
2、原理:(1)降低了溶质得介电常数,使溶质之间得静电引力增加,从而出现聚集现象,导致沉淀。(2)由于有机溶剂得水合作用,降低了自由水得浓度,降低了亲水溶质表面水化层得厚度,降低了亲水性,导致脱水凝聚。
25、膜分离技术得类型与定义？
答:膜分离过程得实质就是物质透过或被截留于膜得过程,近似于筛分过程,依据滤膜孔径大小而达到物质分离得目得,故而可以按分离粒子大小进行分类:(1)微滤:以多孔细小薄膜为过滤介质,压力为推动力,使不溶性物质得以分离得操作,孔径分布范围在0、025~14μm之间;(2)超滤:分离介质同上,但孔径更小,为0、001~0、02 μm,分离推动力仍为压力差,适合于分离酶、蛋白质等生物大分子物质;(3)反渗透:就是一种以压力差为推动力,从溶液中分离出溶剂得膜分离操作,孔径范围在0、0001~0、001 μm之间;(由于分离得溶剂分子往往很小,不能忽略渗透压得作用,故而成为反渗透);(4)纳滤:以压力差为推动力,从溶液中分离300~1000小分子量得膜分离过程,孔径分布在平均2nm;(5)电渗析:以电位差为推动力,利用离子交换膜得选择透过性,从溶液中脱除或富集电解质得膜分离操作;
27、影响有机溶剂萃取分离得因素？
影响液一液萃取得因素主要有目得物在两相得分配比(分配系数K)与有机溶剂得用量等。分配系数K值增大,提取效率也增大,萃取就易于进行完全。当K值较小时,可以适当增加有机溶剂用量来提高萃取率,但有机溶剂用量增加会增加后处理得工作量,因此在实际工作中,常常采取分次加入溶剂,连续多次提取来提高萃取率。
28、盐析得原理及影响因素？
1、亲水性大于蛋白质破坏水化层
2、带电离子中与蛋白质表面电荷
影响因素:(1)离子类型与离子强度(2)生物大分子得浓度(3) pH值(4)温度
29、影响有机溶剂沉析得因素？
(1)温度(2)生物样品得浓度(3)pH(4)离子强度(5)金属离子
37、影响电泳分离得主要因素？
1、大分子得性质
2、电场强度
3、溶液得pH
4、溶液得离子强度
5、电渗
6、温度
7、支持物得影响
38、提高晶体质量得方法有哪些？
(1)晶体大小得控制(2)晶体形状得控制(3)晶体纯度得控制(4)晶体结块得控制
42、有机溶剂沉析溶剂选择主要应考虑以下因素。
(1)、就是否与水互溶,在水中就是否有很大得溶解度;(2)、介电常数小,沉析作用强。(3)、对生物分子得变性作用小。(4)、毒性小,挥发性适中。
44、离心分离技术基本原理？
就是基于固体颗粒与周围液体密度存在差异,在离心场中使不同密度得固体颗粒加速沉降得分离过程。不同密度或不同大小及形状得
物质在重力作用下得沉降速率不同,在形成密度梯度得液相体系中得平衡位置不同。
45、吸附色谱分离化学成分得原理就是什么？简述硅胶、氧化铝、聚酰胺、活性炭这四种吸附剂得主要用途与特点？
利用混合物中各成分在两相中吸附力得差异进行分离。硅胶(弱酸性)可分离酸性与中性物质。氧化铝分离碱性或亲脂性成分。活性炭分离水溶性成分。聚酰胺就是氢键吸附,适合分离黄酮成分。
50、树脂得再生(或称活化)？
所谓树脂得再生就就是让使用过得树脂重新获得使用性能得处理过程,树脂得再生反应就是交换吸附得逆反应。再生方法可根据污染情况与条件而定,一般阳树脂在软化中易受Fe3+污染,清除铁化合物得方法,通常就是用加抑制剂得高浓度盐酸(10%～15%)浸泡树脂5～12h,甚至更长。也可用柠檬酸、氨基三乙酸、EDTA等络合物进行处理。阴树脂易受有机物污染,可用10%NaCl+2%～5%NaOH混合溶液浸泡或淋洗
54、简述凝胶层析有哪些用途？
1、作为分析工具;
2、作为脱盐工具
3、生物大分子得浓缩
4、除热原物质
5、生物大分子得分离纯化
6、分子量得测定
57、简述蛋白质类药物得分离纯化方法？
①沉淀法②按分子大小分离得方法③按分子所带电荷进行分离得方法④亲与层析法
六、论述
1.试述柱层析得基本操作过程。
答:1、装柱:①干法装柱②湿法装柱( 注意:湿法装柱中柱内预留一部分水,防止气泡得产生,装柱过程要连贯。平衡。)2、加样:①干法加样②湿法加样(注意:加样过程中,要防止产生飞溅,量要适中。)3、洗脱:以设定好得流速加入洗脱剂,可以就是单一溶剂,也可以梯度洗脱。( 注意:不使柱表面得溶液流干,柱上端保留一层溶液。)4、收集:每隔10mL收集一试管,使用层析得手段或紫外检测器进行实时得检测,合并具有相同物质得流份。
4、简述pH对发酵液过滤特性得影响,并举例说明。
答:(1) pH直接影响发酵液中某些物质得电离程度与电荷性质,因此适当调节pH值可以改善发酵液得过滤特性。(2)氨基酸与蛋白质在酸性条件下带正电,碱性条件下带负电,等电点时净电荷为零,两性物质在等电点下得溶解度最小,等电点沉淀法在生物工业分离中广泛使用。(3)如味精生产,利用等电点沉淀法提取谷氨酸,一般蛋白质也在酸性范围达到等电点;膜分离中可通过调整pH值改变易吸附分子得电荷性质,减少膜堵塞与膜污染;此外,细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在特定pH下也可能趋于絮凝而成为较大颗粒,有利于过滤进行。
5、以胞内酶提取为例,简要说明双水相系统工业化萃取得主要流程及操作注意点。
答:(1)主要流程:使用PEG/盐系统提取胞内酶时,可先使细胞碎片分配到下相,使蛋白质分配在上相;分离后,上相中得蛋白质可以加入适当得盐,进行二次双水相萃取,目得就是利用盐相(下相)去除核酸与多糖;上相中得蛋白质进行第三次萃取,通过pH调节,使上相含色素,蛋白质分配在盐相,以便通过超滤将其与主体PEG分离,主体PEG可循环使用。(2)操作注意点:实验放大得主要依据就是分配系数,遇到得主要问题就是细胞碎片相得粘度问题、萃取平衡时间以及相分离问题。需要带低速搅拌与溢流装置得混合－沉降系统;上下相分离利用重力沉降能耗成本低,但高粘度体系要选用离心分离;改变条件再次萃取并结合超滤、透析等处理可实现多聚物得彻底分离。
11、影响离子交换树脂交换速度得因素？
①树脂颗粒得大小:树脂颗粒大小要适中。
②搅拌与流速。
③离子浓度:过稀、过浓都对交换速度不利。
④离子得水化半径:离子在水溶液中要发生水化,水化离子在水溶液中得大小以水化半径来表示。水化半径
小得离子,较易吸附。一价阳离子;Li+ 二价阳离子:Mg2+ 阴离子:F— ⑤树脂酸碱性得强弱与溶液得pH值。 ⑥交联度愈低,树脂愈易膨胀,交换速度也就愈快。 ⑦有机溶剂得影响:当有机溶剂存在时,会降低树脂对有机离子得选择性,而容易吸附无机离子。
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