作者简介：赵会敏（1974－），男，河南洛阳人，广西大学生命科学与技术学院讲师，硕士。
生物技术专业动物细胞工程课程的改革与思考
赵会敏
（广西大学生命科学与技术学院，广西南宁530005）
［摘
要］
动物细胞工程是生物技术专业学生的一门非常重要的必修课，为了将这门课上好，我们根据学生的实际
情况，从教学内容、教学方法、考核方式等方面对动物细胞工程这么课程的教学改革进行了探讨，以提高教学质量，培养出合格的人才。［关键词］
动物细胞工程；教学；改革
［中图分类号］
G642文献标识码：A 文章编号：1001－8182（2011）增－0172－02
《动物细胞工程》是生物技术专业的一门非常重要的必修课，它是基础知识与生产实践相结合的桥梁。为了响应国家高等教育的政策，培养出实践性人才，《动物细胞工程》被广西大学设置为生物技术专业的专业必修课。随着生物技术的不断发展和社会需求的不断扩大，《动物细胞工程》的重要性也日渐突出。学好《动物细胞工程》为同学们今后从事生物学领域的相关研究和生产实践打下良好的基础，使同学们更好的适应社会的发展，更好的为人们服务。《动物细胞工程》是将分子生物学技术和细胞生物学技术相结合，在细胞层面对细胞进行改造，从而生产人们所需产品的课程，它兼有生物学和工程学的特征。它的主要内容包括细胞培养技术、抗体制备技术、胚胎工程技术、胚胎干细胞工程、动物克隆技术、转基因动物生产技术和染色体工程，内容非常丰富，技术难度很大，要想使同学们真正学好这门课程，必须在讲授的内容、形式和教学环节进行改革。为此，本文对该课程的改革进行了如下的探讨。
一、对教学内容的改革
（一）补充新的教学内容。教学内容是教学的核心，也是培养高素质人才的基石，先进的教学内容可以开拓学生是视野，激发同学们的创造性思维，培养成具有创新能力的科学家。我们很多同学总是抱怨：有些老师每年捧着同一本发黄的教案给同学上课，虽然老师对他的教案如数家珍，但一成不变的教学内容是很难跟上时代步伐的，这样就很难培养出优秀人才。之所以要对教学内容进行改革，是因为近几年在动物细胞工程领域出现了两个非常重要的研究分支，即：精原干细胞工程（Spermatogonial Stem Cells Engineering ，
SSCE ）和人工诱导干细胞工程（Induced Spermatogonial Pluripotent Stem Cells Engineering ，IPSE ），这两个方向是两个
崭新的领域，它将会对未来干细胞的研究方向带来重大的影响。下面对这两个领域做简单的介绍：精原干细胞工程是利用分子生物学和细胞生物学的方法和原理，对精原干细胞在体外培养、操作，以改变其遗传性状或定向诱导的工程。
2005年，Kanat su2Shinohara 等［1］人建立了小鼠精原干细胞
的体外培养体系。目前，哺乳动物精原干细胞在体外培养的
条件已经成熟。对于精原干细胞的研究有两个重要的意义：第一是生产转基因动物，传统生产转基因动物的方法是转染体细胞，通过核移植的方法实现，当这种方法设备昂贵、效率低，如果将精原干细胞在体外培养而不失去它分化精子能力的话，就可以进行外源基因转染，用这些精原干细胞来产生携带外源基因的精子，从而受精生产转基因动物，这将是一个高效、简单的途径，不需要核移植过程中昂贵的设备；第二、通过精原干细胞诱导精子，这样可以为无精症患者提供一个拥有自己后代的机会，这将是很多无精症患者的梦想。所以，精原干细胞工程是一个崭新的领域、是一个具有光明发展前景的领域。对于《动物细胞工程》的教学改革，一定要将这些知识补充进去，带领学生走进科学发展的前沿。2007年，日本科学家Yamanaka ［2］第一次成功诱导出的多功能干细胞，称为人工诱导多功能干细胞（induced pluripotent stem
cells ，IPS ）。他将四个外源基因导入到已经分化的体细胞内，
成功的将体细胞诱导成干细胞，故称为人工诱导多功能干细胞。这种方法避开了从早期胚胎中分离多功能干细胞的途径，为人类及动物干细胞的研究开辟了新的领域，这种方法简单有效，不涉及人类胚胎，避开了伦理道德的限制，为未来干细胞的应用研究开辟了新的领域。
所以，对于《动物细胞工程》这门课程的教学改革，首先要补充这些新的内容，这样才可以跟上科学发展的步伐，带领学生走进新的知识领域，使同学们学习到新的知识，同时也可以激发学生的创新思维，为培养出未来的优秀人才打下良好的基础。
（二）精选教学内容。现在《动物细胞工程》有很多教材可供选择。每种教材编写的方法和侧重点都不一样。从不同的教材中选出有特色的章节，不要拘泥于一本教材的内容。针对于广西大学生命科学与技术学院生物技术专业的学生，因没有学习《动物繁殖学》、《动物组织胚胎学》和《动物解剖学》，在讲授胚胎工程这章内容的时候一定要先补充相关的知识，然后再讲胚胎工程的内容，这样学生才可以理解和接受。
二、组建教师队伍
邓小平同志指出：“一个学校能不能为社会主义培养合
第33卷增刊
Vol.33Suppl
广西大学学报（哲学社会科学版）
Journal of Guangxi University （Philosophy and Social Science ）2011年6月June ，2011
172--
DOI:10.13624/https://www.doczj.com/doc/0410649651.html,ki.jgupss.2011.s1.007
格人才，培养出德智体全面发展、有社会主义觉悟的有文化的劳动者，关键在教师”。可见优秀的教师队伍是培养高素质人才的必要条件，没有优秀的教师队伍是很难培养出优秀的学生。《动物细胞工程》这门课程内容很多，主要包括细胞培养技术、抗体制备技术、胚胎工程技术、胚胎干细胞工程、动物克隆技术、转基因动物生产技术、染色体工程［3］，以及需要补充的精原干细胞工程和人工诱导多功能干细胞工程，每一章都是一个独立的内容，每一个内容都是一个独立的研究领域。正所谓：“闻道有先后，学术有专攻”，我们的教师不可能在所有的研究领域都有很深的造诣，但每一个老师都有自己的研究领域，将这些老师组织起来，组建成一个教学团队，取百家之长，每位老师负责自己擅长的章节。通过团队教学，才能将这门课真正上好。
三、教学实践环节的改革
以往对于《动物细胞工程》这门课程，侧重点主要在课堂讲授环节，注重各种技术的原理的讲授而忽略了实践环节。随着社会的发展，这种方法培养出来的人才已经不能胜任新形势下的工作岗位。目前，社会的发展不仅要求学生掌握扎实的理论知识，更重要的是要求学生具有熟练的操作技能。所以，要想培养出符合社会发展需求的人才，培养出具有创新能力的人才，必须加强实践环节的教学。联合其它学院，充分利用相关的教学资源，让学生亲自操作，掌握好一些相关的实验技能，如：细胞培养技术、干细胞分离培养技术、显微操作技术、胚胎培养技术等。这样才能培养出合格的人才。
四、改革教学方法
《动物细胞工程》这门课程的内容大部分都是关于细胞、胚胎、染色体以及分子水平微观世界。我们的学生目前还没有进入实验室，对细胞工程的知识了解很少，如果仅靠语言表述，不易让同学接受。为了提高教学质量，必须借助多媒体技术，利用文字、图片、声音以及动画技术，将微观的内容形象直观的呈现在同学面前，使学生容易理解和掌握。如多功能干细胞的诱导，可以用动画的方式演示一遍，可以将枯燥的知识形象化，使学生更直观的理解多功能干细胞的诱导过程和原理。同时，作为老师，也要不断学习，找到最新的、最形象、最直观的图片，来丰富补充自己的教案内容，使学生更容易理解和掌握。引导学生动手查阅资料。动物细胞工程技术发展的很快，可以说是日新月异。在教学过程中不仅要将课本知识传授给学生，而且要培养同学们自己查阅资料的能力，使同学们掌握主动学习的本领。在课余时间，可以给同学们留些作业，让同学们通过查阅资料写一些综述，例如，让同学们到http：／／www．ncbi．nlm．nih．gov／PubMed查阅相关资料，了解人工诱导多功能干细胞的发展状态，并写下综述等。这不仅使同学们掌握了新的知识，而且让同学们掌握了查阅资料的方法，为同学们今后的工作和学习打下了良好的基础。
五、改革考核方式
考核是手段而不是目的，教学的目的是培养出优秀的人才。目前，社会上需要大量具有动手操作能力的技术型人才，为了适应这种新的变化，《动物细胞工程》这门课程的考核方式也需要改革，以适应社会发展的需要：降低期末考试成绩在考核中的比重，增加实践环节在考核中的比重，对于那些真正熟练掌握了某一项或多项实验技能的同学应该给予高分，这样才能培养成适应社会发展的人才。
六、提高教师的教学艺术
作为教师要把握好学生们的心理，在教学过程中安排好教学内容的先后顺序，激发同学们好奇心和学习兴趣，使教学过程在轻松愉悦的气氛中完成，这样才能取得良好的教学效果。如在胚胎工程这一章节，首先告诉学生：现代畜牧业的发展需要良好的品种，包括肉质、生长率、经济价值等。但优良的品种毕竟很少，为了改良品种，使优良品种在短时间迅速繁殖，创造巨大的财富，我们必须借助胚胎工程这门技术。首先让同学们了解这章节的意义和必要性，这样才能激发同学们的学习兴趣，使同学们认真听课，取得良好的教学效果。另外，老师可采用启发式教学，多用诙谐幽默，形象生动的语言激发同学们的兴趣，例如在讲细胞融合时，可以让同学们自己想一下在自然界有哪些细胞融合的现象，然后告诉学生：有性繁殖就是细胞融合的过程，如精子和卵子的融合，这样才可以进行生命的延续。通过这样的教学，可以激发同学们的好奇心，将学生融入到教学环节中，使同学们在轻松愉快的气氛中接受知识，提高了教学的效果。
七、加强师德建设
“师有百行，以德为首”。师德是教师的生命，是教师立业之根本［4］。老师的使命是教书育人，这包括两方面：一是传播知识，二是培育人才。作为教师一定要有高尚的情操，正确的人生观和世界观，这样才能引导学生树立正确的人生观和为人民服务的思想。特别的对于《动物细胞工程》这门课程，因为它具有生物学和工程学的特性，我们的学生将来很多要从事相关专业的工作，他们生产的产品很多是生物制品，故要引导学生正确应用自己的技术，生产的产品要服务于人类，而不是生产毁灭人类的生物武器，这一点是非常重要的。如果不能正确引导学生，我们教育出来的人才有可能是我们的敌人。所以，教师要不断提高自身修养，言传身教，这样才能培养出合格的人才。
结语
随着社会的发展、科技的进步，现在经济的发展和科学技术紧密的结合在一起。为了适应新的形式，培养出合格的技术人才，我们从教学内容、教学方式以及考核方式上对细胞工程的教学环节进行了改革，把最新的科技成果和研究领域融入到教学中，提高教学质量。今后，我们将不断的学习，提高自身理论知识，丰富教学内容，紧跟科技发展的前沿，将科技发展的最新成果和研究方向及时的告诉学生，开阔学生的视野，激发同学们的创造性思维。在教学过程中不断的优化教学体系，提高教学质量。
参考文献：
［1］Kanat Shinoharo M，Ogonuki N，Inoue K，et al．Long term proliferation in culture and germline transmission of mouse male germline stem cells［J］．Biol Reprod，2003，69．［2］Yamanaka，S．（2007）．Strategies and new developments in the generation of patient－specic pluripotent stem cells．Cell Stem Cell1，39–49．
［3］安利国．细胞工程［M］．北京：科学出版社，2004．
［4］张庚灵，黄坚毅，刘志勇等．全面加强师德修养不断提升高校师德水平．山东农业教育，2005，（3）：41–44．
（责任编辑：唐奇展）
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2.2动物细胞工程 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 课时训练7动物细胞培养和核移植技术 1.动物细胞工程常用的技术手段中,最基础的是()。 A.动物细胞培养 B.动物细胞融合 C.单克隆抗体 D.动物细胞核移植 解析:动物细胞工程常用的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等,其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 答案:A 2.动物体内的细胞不易受到外界细菌、病毒等微生物的感染,原代培养的细胞()。 A.对微生物有一定的防御能力 B.培养环境中可以有一定量的微生物 C.对微生物已失去了防御能力 D.必须生活在无菌条件下,以后的培养对无菌条件的要求不严格 解析:动物体具有一定免疫力,是因为动物体具有非特异性免疫系统和特异性免疫系统,对各种病原微生物有一定的防御能力,而离体的动物细胞失去了对各种微生物的防御能力,因此,动物细胞培养的环境中不能存在微生物,否则,动物细胞就会死亡。 答案:C 3.在克隆猪的培育过程中,将猪M(基因型为Aa)的体细胞核移入猪N(基因型为aa)的去核卵子中,然后在雌猪L(基因型为AA)体内发育成熟。产出的幼猪基因型为()。 A.AA B.Aa C.aa D.Aaa 答案:B 4.离体的植物组织或细胞在适当培养条件下能够发育成完整的植株,离体的动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体,原因是()。 A.动物细胞内没有成套的遗传物质 B.动物细胞的全能性随动物细胞分化程度的提高而受到限制,分化潜能变弱 C.动物细胞的细胞核太小 D.动物细胞的全能性低于植物细胞 解析:动物细胞的全能性随动物细胞分化程度的提高而受到限制,分化潜能变弱,只能通过核移植实现克隆动物的目的。 答案:B 5.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于()。 A.培养基不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株 解析:由于人们对动物细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚,因此在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分,而植物组织培养则不需要加上述物质。 答案:A
动物科技创新及其产业化问题 王双山（兽医博士学位班） 摘要：本文介绍动物科技创新对实现我国畜牧业持续发展具有重要意义。动物科技的核心是动物生物技术，阐明其内涵、现状、创新趋势。以及我国动物生物技术产业化存在的问题与对策。 关键词：动物科技；创新；产业化 自从进入上世纪80年以后的30年，我国畜牧业每年一直保持着8%以上的增长速度，在农业生产总值中占的比例接近40%。但这与发达国家畜牧业产值占农业总产值70%还有一定的差距。今后我国畜牧业要想继续保持强劲的增长速度，出路在于动物科技创新。动物科技中对畜牧业贡献最大的应该算是动物生物技术，在我国畜牧业的发展过程中怎样更好的吸收和应用好动物生物技术并形成产业化，使我国的畜牧业获得更大的效益是摆在我们面前的首要任务。 动物生物技术是生物技术重要的组成部分，也是当今发展最快的高技术领域之一。动物科学和动物医学与生物技术的结合，也必将成为本世纪中国畜牧兽医事业创新的先导和现代动物生物技术的生长点，为培育新的高产、优质、抗逆的畜禽品种、丰富动物产品种类、有效保护动物遗传资源、促进动物快繁技术的产业化和为动物疫病防治等方面提供新的技术支撑和技术储备。当前，集中优势力量发展动物生物技术，对推进我国农业和农村经济结构战略性调整、提高畜牧经济整体素质和效益，实现畜牧业持续、稳定发展具有十分重要的意义。重点发展的动物生物技术包括克隆技术、转基因技术、基因组研究与分子标记育种技术及基因工程标记疫苗与诊断技术等。 1 动物生物技术 1.1 动物克隆技术 通常所说的动物克隆就是指细胞核移植。细胞核移植是指通过显微操作，电融合等实验室手段将发育到一定阶段的核供体及相应发育阶段的核受体进行体外重构，通过重构胚的胚胎移植，达到大量生产遗传同质哺乳动物的一种生物工程技术。根据核供体不同可将动物克隆技术的发展分为两个阶段，即胚胎细胞移植阶段和体细胞核移植阶段。这两个阶段以1997年2月，在英国罗斯林研究所，用成年母羊乳腺上皮细胞作为核供体克隆的世界首例体细胞核移植后代“多莉”的诞生为分界线。目前我们通常所说的动物克隆常指后者。 1.2 动物转基因技术 转基因动物指染色体基因组中整合有外源基因，并能遗传给后代的一类动物。自1982年美国科学家Palmiter等将大鼠生长激素基因导入小鼠受精卵中获得转基因“超级鼠”以来，转基因动物已成为当今生命科学中一个发展最快、最热门的领域。转基因体系打破了自然情况下的种系隔离，使基因能在种系遥远的机体间流动，既可加快家畜品种的改良，提高动物的生产性能及产品品质，又可作为生物反应器生产珍稀药用蛋白及其它稀有的有用物质。1.3 动物基因组研究及分子育种技术 现代分子生物学与传统动物育种科学的结合催生了新型的分子育种学。以动物基因组研究、基因鉴定与分子标记辅助选择技术为重点的分子育种技术近年发展迅速，现已成为动物生物技术发展的重要领域。 1.4 畜禽基因工程标记疫苗及诊断技术 标记疫苗及其相应鉴别诊断是国际上基因工程疫苗研究的前沿技术。利用生物技术手段开发新型基因工程标记疫苗并辅以鉴别诊断技术以取代现用的常规疫苗已是发展的必然趋
观察动物细胞教案 学习目标： 1 知识与技能 （ 1 ）进一步熟悉制作临时装片和规范使用显微镜观察细胞，说明人口腔上皮细胞的基本结构，区别动植物细胞结构的主要不同点。 （ 2 ）了解制作以及观察临时装片的技能。 2 过程与方法 （ 1 ）通过制作人口腔上皮细胞的临时装片并规范使用显微镜观察细胞，了解制片的过程，熟悉动物细胞的基本结构。 （ 2 ）通过分析模拟制作，进一步了解动物细胞的基本结构。 3 情感态度价值观目标： 通过制作人的口腔上皮细胞临时装片，并用显微镜进行观察，养成实事求是的科学态度教学重难点： 1 教学重点： （ 1
）说明人口腔上皮细胞的基本结构。 （ 2 ）提高实验能力和观察能力。 2 教学难点： 制作临时装片过程中的刮取，并在显微镜下找到人口腔上皮细胞。 课前准备 教师准备： 1. 生理盐水、稀碘液、消毒牙签、滴管、纱布 、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜、擦镜纸、镊子。提前准备几片做好的装片，摆放一台示范镜。制作做多媒体课件。 教学过程 （板书：§ 2.1.3 观察动物细胞 一、实验） Ⅰ 复习 显微镜的使用步骤有哪些啊？（ 1 、取镜安放
2 、对光 3 、观察） 那使用完显微镜要记得把显微镜进行复位。 Ⅱ 引入 那 大家学会使用显微镜之后， 想不想看看自己的细胞长什么样子呢？它有什么基本结构呢？ 由于人的细胞和动物细胞的基本形态和结构是一样的。下面我们通过观察自己的口腔上皮细胞，来认识人和动物细胞的基本结构。 Ⅲ 讲授知识 一、实验 - 观察人口腔上皮细胞 （一）目的要求 制作和观察人口腔上皮细胞的临时装片，认识动物细胞的基本结构 （二）材料用具 生理盐水（ 0.9%
动物细胞工程制药的研究进展 程庆佳 （云南大学，生命科学学院，生物技术，20091070004） 摘要：动物细胞工程制药是动物细胞在制药产业中的应用，本文主要介绍动物细胞工程最新的制药研究进展，包括动物细胞融合技术，细胞核移植技术，转基因动物技术，细胞大规模培养技术等，同时讨论动物细胞制药的发展方向和发展前景。 英文摘要：Animal Cell Engineering is animal cells in the pharmaceutical industry in the application. This paper describes the latest pharmaceutical animal cell engineering research, including animal cell fusion techniques, monoclonal antibodies, transgenic animal technology, large-scale cell culture technology, Also discussed animal cell engineering pharmaceutical development prospects. 关键词：动物细胞融合技术，单克隆抗体的制备，转基因动物技术，细胞大规模培养技术，发展前景 英文关键词：Animal cell fusion techniques, monoclonal antibodies, transgenic animal technology, large-scale cell culture technology, development prospects 所谓动物细胞工程就是以动物细胞为基本单位在体外条件下进行培养、繁殖和人为操作，使细胞产生某些人们所需要的生物学特性，从而改良品质，加速繁殖动物个体或获得有用品系的技术。这种技术在制药业中起到关键的作用，目前全世界生物技术药物中使用动物细胞工程生产的已超过8 0％，例如蛋白质、单克隆抗体、疫苗等。当前动物细胞工程制药所涉及的主要技术领域包括细胞融合技术、细胞核移植技术、转基因动物技术和细胞大规模培养技术等方面。本文就是以细胞工程为基础阐述动物细胞工程制药的技术与发展前景。 1、用于制药业的动物细胞系 目前用于生物制药的动物细胞有4类，即原代细胞、传代细胞系，转化细胞系和融合的或重组的工程细胞系。 1.1 原代细胞 原代细胞是直接取自动物组织器官，经过粉碎消化而获得的细胞悬液。动物细胞生产生物药品的早期，一般用原代培养的细胞来生产疫苗，如鸡胚细胞、原代兔肾细胞、鼠肾细胞、淋巴细胞等，Ender最先用原代培养的猴肾组织细胞来生产脊髓灰质炎灭活疫苗。原代细胞增殖能力有限，需要大量动物才能增加产量，费钱费力，限制了它的应用。 1.2 传代细胞系 传代细胞系是二倍体细胞在传代繁殖过程中，有些细胞发生改变，不仅形态发生变化，且生长更快，能以少量的细胞起始培养。由一个这样的细胞得到的细胞克隆，与它起源的细胞株大不相同，它能无限期地生存，这样的细胞克隆称为传代。许多传代细胞系建立于50年代，用它们来生产疫苗不仅可以降低实验动物的量，并且因为所用的细胞性质均一，通过体外大规模培养技术生产的疫苗可以保证质量，避免了动物个体差异产生的疫苗质量不稳定问题。但传代细胞系在生物学特性上与肿瘤细胞有许多相似之处，有时是从肿瘤细胞衍生而来，由于缺乏有效的科学手段来排除其潜在的致瘤性，因而数十年间未允许传代细胞系用于生产。7 O年代以后，大量研究工作证实了二倍体细胞的安全性，wI一38是第一个生产脊髓灰质炎灭活疫苗的二倍体细胞系。二倍体细胞系一般从动物胚胎组织中获取，有明显的贴
（生物科技行业）普通生物学基础实验A教学大纲（生科）动物生物学
普通生物学基础实验A2教学大纲 课程编号：08207313 学时：34 学分：1 开课对象：生物科学系本科生 课程类别：专业必修课 课程英文译名：BasicalbiologyexperimentA2 一、教学任务和目的 本课程是高校生物类壹年级本科生的专业基础课。本课程从加强基础、培养能力、提高素质的教学目标出发，建立壹个科学、合理的动物生物学实验教学课程体系。使学生通过本课程实验教学，不只是加深理解和巩固所学理论知识，而是更能切实掌握动物生物学基本实验技能，正确使用常规仪器，学会正确记录，分析讨论实验结果，初步综合运用已学实验技术方法设计简单实验。在实验教学中，同时加强对学生进行科学素质和良好的实验室工作习惯的训练。为继续培养具有创新精神和实践能力的高素质人才奠定良好的基础。 二、教学基本要求 以动物生物学实验的基本操作、基本技能和基本理论为基础，精选重组验证性实验，增加综合性实验及知识范围，操作难度适宜的自选实验的比例，引导、指导学生初步设计实验。建立壹个既和理论课有壹定互补作用，又具有相对独立性的科学、合理、实用性强的实验教学课程体系。 在切实培养提高学生实践能力的同时，理论联系实际地培养学生独立思考、综合分析、推理判断的能力，科学思维能力和创新意识，以及科学求实的态度，相互协作的团队精神。 三、教学内容 本课程实验教学内容在突出基本实验技能训练为先导的基础上，以进化上有重要地位门
类的代表动物（实验动物）为材料，贯穿生物学原理，由简单到综合，由基础性到提高层次的实验，构成包括基本实验—综合性实验—自选性和设计实验3个层次的实验教学课程体系。本课程总共34学时，1学分。 实验壹动物细胞、组织的制片和观察 实验目的 1、了解普通光学显微镜的基本构造，能够规范和较熟练地使用和维护。 2、学习掌握涂片法制作动物细胞显微玻片标本，动物组织平铺片等临时装片和涂片的制 作方法。 3、了解动物细胞的基本结构。 4、掌握动物的4类基本组织结构特点及其结构和机能的关系。 实验内容 1、双筒光学显微镜的构造和使用和维护方法。 2、制备口腔粘膜细胞标本，观察细胞形态结构。 3、制备和观察蛙的肠系膜平铺片、蝗虫的肌肉组织分离片、血涂片。 4、利用显微镜观察动物4类组织玻片标本。 实验主要仪器设备及材料 双筒光学显微镜，无菌牙签，解剖器材，玻片，注射器，染色缸，蛙，蝗虫 7%生理盐水，0.9%生理盐水，0.1M碘液或0.1%亚甲基蓝，1%硝酸银，甲醇，姬母萨染液。 实验二原生动物系列实验 实验目的 1、学习在显微镜下对运动活泼的原生动物的观察和实验方法。
新人教版七年级生物上册动物细胞知识点 人体或动物体的各种细胞虽然形态不同，基本结构却是一样的，都有细胞膜、细胞质和细胞核。因此精心准备了动物细胞知识点，以供大家参考。 知识点 ▲动物细胞的结构 (动物细胞图P48) 细胞膜：控制物质的进出 细胞核：贮存和传递遗传信息 细胞质：液态，可以流动 植物细胞与动物细胞的相同点：都有细胞膜、细胞质、细胞核 植物细胞与动物细胞的不同点：植物细胞有细胞壁和液泡，动物细胞没有。 ▲细胞的生活需要物质和能量 细胞是构成生物体的结构和功能基本单位。 细胞是物质、能量、和信息的统一体。细胞通过分裂产生新细胞。 ▲细胞中的物质 有机物(一般含碳，可烧)：糖类、脂类、蛋白质、核酸，这些都是大分子 无机物(一般不含碳)：水、无机物、氧等，这些都是小分子▲细胞膜控制物质的进出，对物质有选择性，有用物质进入，
废物排出。 课后习题 1.在生物的遗传中具有重要作用的细胞结构是 A.细胞壁 B.细胞膜 C.细胞质 D.细胞核 2.细胞结构中能进行能量转换的是 A.细胞膜 B.细胞核 C.内质网 D.线粒体 3.人体细胞最外面的结构是 A.细胞壁 B.细胞膜 C.叶绿体 D.细胞核 4.临时装片出现了气泡，这主要是哪个操作步骤不符合要求 A.净片 B.滴水 C.盖片 D.染色 5.下面关于细胞有关知识叙述错误的是： A、细胞是生物体结构和功能的基本单位 B、只有植物细胞具有细胞壁 C、烟草中的尼古丁存在于细胞液中 D、遗传信息的载体-------DNA主要存在于细胞核中 6.组织是构成生物体的结构层次之一。下列哪种组织是人和动物体不具有的? A.上皮组织 B.输导组织 C.肌肉组织
2.1.2 植物细胞工程的实际应用 目标导航 1.举例说明植物细胞工程在植物繁殖方面的应用。2.列举植物细胞工程在作物新品种培育方面的应用。3.概述细胞产物的工厂化生产的原理。 一、植物繁殖的新途径(阅读P 38－39) 1．微型繁殖 (1)概念：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。 (2)属于无性(填有性、无性)繁殖，能够保持优良品种的遗传性状。 2．作物脱毒 (1)选材部位：植物分生区附近的部位，因为此处细胞内病毒极少，甚至无病毒。 (2)优点：提高作物的产量和品质。 3．人工种子 (1)组成：由胚状体、不定芽、顶芽和腋芽作为保护性外壳的人工种皮和提供胚状体进一步发育所需营养的人工胚乳。如下图： (2)特点：后代无性状分离，不受季节、气候和地域的限制。 二、作物新品种的培育及细胞产物的工厂化生产(阅读P 40－41) 1．单倍体育种 (1)过程：花药――→离体培养 单倍体植株――→人工诱导染色体加倍稳定遗传的优良品种。 (2)优点：①后代是纯合子，能稳定遗传。 ②可明显缩短育种年限。 (3)实例：烟草、小麦等。 2．突变体的利用 (1)过程：在植物的组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变，从中筛选出对人们有用的突变体，进而培育成新品种。 (2)优点：可以得到抗逆性(抗盐、抗病和抗除草剂等)品种和含有高蛋白的植株。
(3)实例：抗花叶病毒的甘蔗、抗盐碱的野生烟草、抗除草剂的白三叶草等。 3．细胞产物的工厂化生产 (1)种类：蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。 (2)技术：植物组织培养技术。 (3)实例：人参、三七、紫草和银杏的细胞产物都已实现工厂化生产。 判断正误： (1)植物组织培养技术不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。( ) (2)人工种子就是以植物种子的胚等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。( ) (3)单倍体育种通过花药离体培养获得单倍体植株，染色体加倍后两年便可获得稳定遗传的优良品种，极大地缩短了育种年限。( ) (4)在植物的组织培养过程中，由于所培养的细胞进行有丝分裂，所以不会发生突变。( ) (5)利用植物组织培养技术可获得的细胞产物包括蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。( ) (6)单倍体育种的目的是获得单倍体本身。( ) (7)细胞产物的生产是将植物细胞培养到愈伤组织。( ) 答案(1)√(2)×(3)×(4)×(5)√(6)×(7)√ 一、植物繁殖的新途径 1．微型繁殖 (1)本质：微型繁殖实际上是一种无性繁殖，能保持亲本的一切优良性状，这项技术只运用了植物组织培养技术，因此该过程只涉及有丝分裂，不涉及减数分裂。 (2)优点：使用材料少，培养周期短，繁殖率高，便于自动化管理，有利于进行工厂化培养。2．作物脱毒 (1)病毒的特点：病毒是寄生生物，在用种子繁殖或用植物根、茎的无性繁殖过程中，种子、根、茎的细胞中可能携带着病毒并传给下一代，使其繁殖的子代感染病毒。 (2)材料的选取：据检测，植物的分生区附近的病毒极少，甚至无病毒。如果将未被病毒感染的植株的分生组织用植物组织培养的方法培育幼苗用于生产，可以避免病毒对作物的影响，大大提高作物的产量。 3．人工种子 (1)人工种皮的要求：
植物细胞工程和动物细胞工程默写 1、细胞工程是在或的操作 2、细胞工程按操作对象分为和 3、植物细胞工程通常采用的技术手段是：和 4、植物组织培养的理论基础是： 5、理论上每一个活细胞都应该具有。因为 6、受精卵的全能性最高，受精卵生殖细胞体细胞 7、为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 8、植物组织培养的外界条件：， 内在原理是： 9、植物组织培养的过程：经过形成 经由过程形成，最后移栽发育成。 10、是指已分化细胞经诱导，失去其特有的结构和功能而变为未分 化细胞的过程。 11、是指由外植体长出来高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成 的排列疏松无规则的组织。 12、植物体细胞杂交的意义（优势）：。 13、去除细胞壁的常用方法：（纤维素酶、果胶酶等） 14、人工诱导原生质体融合方法：物理法：等； 化学法： 15、融合完成的标志是： 16、植物体细胞杂交过程包括：和。 17、植物体细胞杂交的原理是：和 18、人工种子的特点是： 19、作物脱毒(1)材料: (2)脱毒苗: 20、单倍体育种：(1)方法: (2)优 点: ; 21、动物细胞工程常用的技术手段： (基础)、、 、
22、动物细胞培养的原理是：。 23、用处理，一段时 间后获得单个细胞。 24、细胞贴壁： 25、细胞的接触抑制： 26、原代培养：，培养的第1代细胞与传10代以 内的细胞称为原代细胞培养。 将原代细胞从培养瓶中取出，用处理后配制成，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为 27、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为 28、细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡， 少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代 细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失 去接触抑制，容易传代培养。 29、动物细胞培养的条件：1. 2. 3. （培养 液的Ph为7.2-7.4）4. 30、细胞所需营养：等， 按种类和所需数量严格配制而成的合成培养基。培养基内还需加入、等天然成分 31、动物细胞培养所需的气体环境：95%的空气和5%的二氧化碳的混合气体。氧 气：；二氧化碳： 32、植物组织培养和动物细胞培养的比较：
……………………….…………………………………………………………………………………姓名：杜宗飞专业：动物生物技术专业 院校：浙江大学学历：本科……………………….…………………………………………………………………………………手机：×××E – mail：×××地址：浙江大学
自荐信 尊敬的领导： 您好！今天我怀着对人生事业的追求，怀着激动的心情向您毛遂自荐，希望您在百忙之中给予我片刻的关注。 我是动物生物技术专业的2014届毕业生。大学四年的熏陶，让我形成了严谨求学的态度、稳重踏实的作风；同时激烈的竞争让我敢于不断挑战自己，形成了积极向上的人生态度和生活理想。 在大学四年里，我积极参加动物生物技术专业学科相关的竞赛，并获得过多次奖项。在各占学科竞赛中我养成了求真务实、努力拼搏的精神，并在实践中，加强自己的创新能力和实际操作动手能力。 在大学就读期间，刻苦进取，兢兢业业，每个学期成绩能名列前茅。特别是在动物生物技术专业必修课都力求达到90分以上。在平时，自学一些关于本专业相关知识，并在实践中锻炼自己。在工作上，我担任动物生物技术01班班级班长、学习委员、协会部长等职务，从中锻炼自己的社会工作能力。 我的座右铭是“我相信执着不一定能感动上苍，但坚持一定能创出奇迹”！求学的艰辛磨砺出我坚韧的品质，不断的努力造就我扎实的知识，传统的熏陶塑造我朴实的作风，青春的朝气赋予我满怀的激情。手捧菲薄求职之书，心怀自信诚挚之念，期待贵单位给我一个机会，我会倍加珍惜。 下页是我的个人履历表，期待面谈。希望贵单位能够接纳我，让我有机会成为你们大家庭当中的一员，我将尽我最大的努力为贵单位发挥应有的水平与才能。 此致 敬礼！ 自荐人：××× 2014年11月12日 唯图设计因为专业，所 以精美。为您的求职锦上添花，Word 版欢迎 下载。
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 [学习目标] 1.掌握动物细胞融合的原理和方法。2.归纳单克隆抗体的制备过程及应用。 方式一1970年，有两位科学家做了人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。思考该如何实现人—鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？植物体细胞杂交可得到杂种植株，动物细胞融合后能像电影上一样形成杂种动物个体吗？ 方式二“太空婚礼” 2002年12月30日，两场筹备了10年的“太空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细胞“新人”是黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在“产房”——电融合仪内孕育新生命。 请思考： 新人一的婚礼流程是怎样的？爱情结晶是什么？ 新人二的婚礼流程又是怎样的？爱情结晶会是什么呢？ 要想知道答案，就让我们一起来进入今天的课题吧！ 一、动物细胞融合 1．概念：两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，也称细胞杂交。 2．原理：细胞膜的流动性。 3．诱导融合的方法 (1)物理、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇、电激等。 (2)生物方法：灭活的病毒。
4 ．过程：具有不同遗传信息的两个或多个细胞―――――→ 灭活的病毒 PEG、电激等杂交细胞。 5．结果：形成单核杂交细胞，具有原来两个或多个细胞的遗传信息，可表现出两个或多个亲本的特点。 6．意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。如：利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 归纳总结 1．对动物细胞融合的理解 (1)动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。其中细胞膜融合是细胞融合的先导，细胞核融合是细胞融合的实质。 (2)融合处理后的细胞不可以直接用于培养，还需要筛选。因为诱导融合的手段只是促使细胞间的融合，不能保证所有的细胞都发生融合，形成的融合细胞也有多种，因此需要进行筛选。 (3)细胞融合技术与有性杂交不同。有性杂交有着十分严格的时空关系和物种界限；动物细胞融合则不同，它通过人工的方法克服了存在于物种之间的遗传屏障，从而能够按照人们的意愿，把不同物种的不同组织类型的细胞融合在一起。 2．动物细胞融合与植物体细胞杂交的对比 比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合 原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性 细胞融合方法用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导 原生质体融合 用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散 后，诱导细胞融合 诱导手段离心、电激、振动、聚乙二醇等诱导与植物体细胞杂交相比，还可用灭活的病毒诱导 结果形成杂种植株形成杂交细胞，以生产细胞产品 用途克服远缘杂交不亲和的障碍，扩展杂交 亲本范围，培育新品种 制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等
第三章动物细胞工程制药 一?生产用动物细胞目前用于生物制药的动物细胞有4类,即原代细胞?二倍体细胞系,融合的或重组的工程细胞系和转化细胞系? 1原代细胞 原代细胞是直接取自动物组织器官,经过粉碎消化而获得的细胞悬液?动物细胞生产生物药品的早期,一般用原代培养的细胞来生产疫苗,如鸡胚细胞?原代兔肾细胞?鼠肾细胞,淋巴细胞等,Ender最先用原代培养的猴肾组织细胞来生产脊髓灰质炎灭活疫苗?原代细胞增殖能力有限,需要大量动物才能增加产量,费钱费力,限制了它的应用? 2传代细胞系 原代细胞经过传代筛选克隆,从多种细胞成分中挑选并纯化出某种具有一定征的细胞株称为CCL?许多CCL建立于50年代,用它们来生产疫苗不仅可以降低实验动物的量,并且因为所用的细胞性质均一,通过体外大规模培养技术生产的疫苗可以保证质量,避免了动物个体差异产生的疫苗质量不稳定问题?但C CL在生物学特性上与肿瘤细胞有许多相似之处,有时是从肿瘤细胞衍生而来,由于缺乏有效的科学手段来排除其潜在的致瘤性,因而数十年间未允许C CL用于生产?7 O 年代以后,大量研究工作证实了二倍体细胞的安全性,wI一38是第一个生产脊髓灰质炎灭活疫苗的二倍体细胞系?二倍体细胞系一般从动物胚胎组织中获取,有明显的贴壁和接触抑制特性,有正常细胞的核型,一般可传代培养5 0代?且无致瘤性,现在C C L已被广泛用于人用治疗性药物的生产,但仍不是理想的生产细胞系? 3工程细胞系 工程细胞系是指采用基因工程技术或细胞融合技术对宿主细胞的遗传物质进行修饰改造或重组,获得具有稳定遗传的独特性状的细胞系?用于构建工程细胞的动物细胞有BHK一2l,CHO—dhfr?Namalwa?Vero?SP2/O,Sf一9等细胞系?sP2/0一Ag l4工程细胞系是通过融合的方法,从抗羊红细胞活性的BALB/c的小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞P3x63A98融合杂交瘤sP2/NL—Ag 亚克隆中分离获得,可用于生产单克隆抗体幢l?目前用重组DNA技术改造的C H O细胞生产干扰素,白介素,E P O?单克隆抗体?诊断试剂以及其它各种蛋白质类药品已成为国际医药市场上的热销产品,但这些产品的生产规模普遍较小(大多为5~50升的小型培养罐)? 4转化细胞系 通过某个转化过程形成的,常由于染色体断裂变成异倍体,失去正常细胞特点,而获得无限增殖能力?转化细胞系具有长期培养,倍增时间短,对培养条件和生长因子等要求较低的特点,适于大规模工业化生产?在生物制药中,可通过改造宿主细胞特性,如延长细胞周期.提高工程细胞原始表达水平等来提高药物的产量?李红艳等研究空间环境对CH0(dhfr)细胞生长特性的影响,结果表明空间诱变致生长减慢的细胞株有利于提高目的蛋白的产量,为筛选优化的生物工程制药细胞提供可能?目前cHo(dhfr)作为重要的基因表达受体细咆,已成功应用于表达促红细胞生成素(EPO)?重组乙型肝炎疫苗等生物制药领域? 二、动物细胞工程制药技术 1细胞融合
专题04 动物细胞工程 【基础回顾】 1.动物细胞培养——动物细胞工程技术的基础 (1)动物细胞的培养过程 (2)培养条件 ①无菌、无毒的环境：对和所有培养用具进行无菌处理，添加，定期更换培养液以清除。 ②营养：除正常的有机和无机营养外，加入等一些天然成分。 ③适宜的温度和pH：温度为℃(哺乳动物)，pH为。 ④气体环境：含95%空气加的混合气体，其中后者的作用是。 (3)应用：生物制品的生产、检测有毒物质、医学研究。 2.动物体细胞核移植技术和克隆动物 (1)动物体细胞核移植技术的过程 (2)原理：。
(3)结果：。 (4)应用：①加速家畜进程，促进优良畜群繁育。②保护 。③生产医用蛋白。④作为异种移植的供体。⑤用于组织器官的移植。 3.动物细胞融合和单克隆抗体的制备 (1)动物细胞融合 ①原理：。 ②融合方法：聚乙二醇(PEG)、、电激等。 ③意义：突破了的局限，使成为可能，也为制造开辟了新途径。 (2)单克隆抗体 ①制备过程 ②优点：特异性强、，可大量制备。 ③用途：作为；用于治疗疾病和。 【想一想】 例1.如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。下列判断错误的是
A．B点之前的培养称为原代培养，之后的培养称为传代培养 B．接触抑制现象主要发生在AB段和DE段 C．分瓶后的每个培养瓶中的细胞群称为一个克隆 D．E点后的细胞大多数具有异倍体核型，从而可连续传代 例2.核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛 选原理的叙述，正确的是 A．免疫的B细胞及其互相融合细胞因全合成途径被A阻断而在HAT培养基上不能增殖B．骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖C．杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以能在HAT培养基上大量增殖 D．HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体 例3.下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是 A．图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原 B．利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙 C．用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能增殖，未融合细胞均不能增殖 D．丙需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁 【练一练】 1.抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两个合成途径的研究。下列是利用生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。下列说法错误的是 A．过程①至②所获取的抗体称为单克隆抗体
生物技术应用 生物技术应用（Biotechnology applications）是指生物技术在各方面的应用。生物技术是应用生物的领域。生物技术是利用有机体和生物过程在工程，技术，医药和其它要求生物产品的领域制成产品。 生物技术需要纯生物科学（遗传学，微生物学，动物细胞培植，分子生物学，生物化学，细胞生物学等）以及生物学外的领域（化学工程，生物加工工程，信息技术，生物机器人）的知识。相反，现代的生物科学（包括分子生态学概念）是和生物技术的发展密切相关的。现代的生物技术还包括遗传工程和细胞及组积培植技术。 中文名：生物技术应用，英文名：Biotechnology applications，含义：生物技术在各方面的应用，应用领域：农业、医药、轻工食品、海洋开发等。 应用： 生物技术在四个主要工业领域应用；包括医疗保健，谷物生产和农业，谷物非食品利用和其它产品（生物所能分解的塑料，植物油，生物燃料）及环境的使用。例如，生物技术的一种应用是直接用有机体生产有机产品（例，包括蜜蜂和牛奶的生产）。另外的例是生物浸矿采矿工业用已有的细菌。生物技术还用到回收，废品处理，清理污物（生物处理法）和生产武器。 一系列发展产生了生物技术的一些分支，例如： 生物信息学是利用计算技术处理生物问题的多学科领域。使很快组织和分析生物数据成为可能。它可称为计算生物学。 生物信息学在各领域内起作关键的作用；如功能基因组学，结构基因组学和蛋白组学；并在生物技术和制药方面形成了关键成份。
兰色生物技术是一项用到海里和水生应用的生物技术，但较少用。 绿色生物技术是一项用到农业生产的技术。一个例子是通过微细菌增殖，选择和驯化植物。另一例子是设计转基因植物在有或无化学药品特别环境中生长。希望绿色生物技术可产生比传统工业和农业更好的效果。 红色生物技术是应用医药方面的技术。一些例子是设计生产抗菌素，以及改变基因治疗疾病的基因工程。 白色生物技术，也称工业生物技术，是应用到工业生产的技术。例子是设计一个有机体去产生有用的化学医药。 现代生物技术可在医药的下列方面应用： 遗传药理学 遗传药理学研究个体遗传如何影晌他/她的身体对药物的反应。遗传药理学的着眼点在能设计和生产适合每个个体遗传特性的药物。 制药产品 大多数传统制药用简单分子；这些是由经验处理疾病的痛症而得来。生物制药用生物大分子，如蛋白和从疾病产生的机理有针对性地选用。这是一个相对年轻的工业。 小分子用化学制造，但大分子要用在人体内的活细胞：如细菌细胞，动物或植物细胞。小细胞的药可制成药片；但大分子的药则要注射。 基因测试 基因测试可直接试验DNA 分子本身。可测出它是否有变异。 基因疗法 可用正常基因补充或替换有缺陷的基因治病。 克隆
国内外细胞工程制药研究现状及发展前景 摘要：动物细胞工程制药是动物细胞工程技术在制药行业方面的应用。当前动物细胞工程所涉及的主要技术领域包括细胞融合技术、细胞器特别是细胞核移植技术、染色体改造技术、转基因动植物技术和细胞大量培养技术等方面。本文综合论述了国内外动物细胞工程制药的发展简史，研究近况和制造实例，并在此基础上探讨了动物细胞工程制药的未来发展趋势和前景。 关键词：细胞工程、细胞融合、核移植、染色体改造、转基因、细胞培养 1 前言 细胞工程制药是细胞工程技术在制药工业方面的应用。所谓细胞工程，就是以细胞为单位，按人们的意志，应用细胞生物学、分子生物学等理论和技术，有目的地进行精心设计，精心操作，使细胞的某些遗传特性发生改变，达到改良或产生新品种的目的，以及使细胞增加或重新获得产生某种特定产物的能力，从而在离体条件下进行大量培养、增殖，并提取出对人类有用的产品的一门应用科学和技术。它主要由上游工程（包括细胞培养、细胞遗传操作和细胞保藏）和下游工程（即将已转化的细胞应用到生产实践中用以生产生物产品的过程）两部分构成。当前细胞工程所涉及的主要技术领域包括细胞融合技术、细胞器特别是细胞核移植技术、染色体改造技术、转基因动植物技术和细胞大量培养技术等方面[1]。
21世纪，生物技术制药是制药行业的亮点，近25年来，世界生物技术工业飞速发展，创造了35种重要的治疗性生物技术药物。中国生物技术产业是紧跟世界产业同步发展的。2007年全球生物技术药物市场销售额已达到828亿美元[2]。基因工程、细胞工程和酶工程组成三驾马车行驶在现代生物技术发展大道的前列。动物细胞工程在生物制药的研究和应用中起关键作用，目前全世界生物技术药物中使用动物细胞工程生产的已超过80%，例如蛋白质、单克隆抗体、疫苗等。 2 细胞工程制药研究现状 动物细胞工程制药主要涉及细胞融合技术、细胞器移植尤其是核移植技术、染色体改造技术、转基因技术和细胞大规模培养技术等。 2.1 细胞融合 是用自然或人工的方法使两个或几个不同细胞融合为一个细胞的过程。可用于产生新的物种或品系及产生单克隆抗体等。在我国目前动物细胞工程的发展中,技术最成熟的当数细胞融合。其中淋巴细胞杂交瘤在国内已普遍开展,并培育了许多具有很高实用价值的杂交瘤细胞株系,它们能分泌产生在诊断和治疗病症方面发挥重要作用的单克隆抗体。如甲肝病毒单克隆抗体[3]、抗人Ig M单克隆抗体[4]、肿瘤疫苗[5]等可用于治疗疾病;抗人结肠癌杂交瘤细胞系分泌的单克隆抗体[6],巨噬细胞集落刺激因子受体)胞外区的单克隆抗体等[7]则对诊断疾病具有重要价值。由于技术已趋成熟,目前许多单克隆抗体已经进入产业化的生产阶段。
2.2 动物细胞工程 一、教学目标 1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 2.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 3.举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。 二、教学重点和难点 1.教学重点 （1）动物细胞培养的过程及条件。 （2）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 （3）单克隆抗体的制备和应用。 2.教学难点 （1）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 （2）单克隆抗体的制备过程。 三、教学策略 有了第一节的基础，学生对本节内容易于理解。因此，本节教学采用讲授、自学、讨论等相结合的教学方法。具体建议如下。 在动物细胞培养的教学中，可把这部分内容归纳成三个问题：（1）为什么要进行动物细胞的培养？（2）什么是动物细胞的培养？（3）怎样进行动物细胞的培养？第三个问题是本节课的重点。关于动物细胞的培养过程，教师可参照教材中的动物细胞培养过程示意图进行讲解，讲庵幸⒁馇衷嘌痛嘌饬礁龈拍睢６杂诙锵赴嘌奶跫蛞友延械哪诨肪车闹冻龇ⅲ舴⒀约憾运伎颊飧鑫侍猓约由疃耘嘌跫睦斫狻?/FONT> 在动物体细胞核移植技术及克隆动物的教学中，可首先让学生列举所知道的克隆动物，调动学生已有的知识。随后可向学生提问：克隆动物的方法与植物组织培养一样吗？然后向学生说明目前动物体细胞克隆是通过核移植技术来实现的，以引入本节课的主题。关于核移植技术发展简史，可让学生在课堂上阅读，本节课的重点和难点是在动物体细胞核移植技术过程，教材中选用了一个非常好的素材──以诞生在我国的高产克隆奶牛为例，来说明体细胞核移植的过程。教师应充分利用和挖掘教材内容，带领学生一步步弄清动物体细胞核移植技术的过程。对于体细胞核移植技术的应用前景和存在的问题这部分内容，可结合本节教材“思考与探究”中的有关问题，以及“拓展视野”中的有关克隆羊多利的早衰问题等，让学生讨论。 在细胞融合和单克隆抗体的教学中，教师可先启发学生回顾植物体细胞杂交技术的过程，再通过动植物细胞异同点的对比，引导学生大胆推测出动物细胞融合与植物原生质体融合的原理及
生物技术在农业方面的应用 一、生物技术概念介绍 生物技术又称为生物工程，或称为生物工程技术，是指利用生物的特定功能，通过现代工程技术的设计方法和手段来生产人类需要的各种物质，或直接应用于工业、农业、医药卫生等领域改造生物，赋予生物以新的功能和培育出生物新品种等的工艺性综合技术体系。生物技术包括传统生物技术和现代生物技术两部分，现代生物技术是在传统生物技术的基础上发展起来的，但与传统生物技术又有着质的差别。 二、现代生物技术的发展 现代生物技术的发展是以２０世纪７０年代ＤＮＡ重组技术的建立为标志。１９５３年提出了ＤＮＡ的双螺旋结构模型，阐明了ＤＮＡ的半保留复制模式，从而开辟了分子生物学研究的新纪元。１９６１年破译了遗传密码，揭开了ＤＮＡ编码的遗传信息是如何传递蛋白质这秘密。１９７２年实现了ＤＮＡ体外重组技术，标志着生物技术的核心技术———基因工程技术的开始，它向人们提供了一种全新的技术手段，使人们可以按照意愿在试管内切割ＤＮＡ，分离基因并进行重组后导入其它生物或细胞，以改造农作物或畜牧品种；也可以导入细菌，由细菌产生大量有用的蛋白质或作为药物；也可以直接导入人体进行基因治疗。显然，这是一项技术上的革命。以基因工程为核心，带动了现代发酵工程、现代酶工程、现代细胞工程以及现代蛋白质工程的发展，形成了具有划时代的意义和战略价值的现代生物技术。 农业生物技术是指运用基因工程、发酵工程、细胞工程、酶工程以及分子育种等生物技术‘改良动植物及微生物品种生产性状、培育动植物及微生物新品种、生产生物农药、兽药与疫苗的新技术。应用生物技术可以培育出优质、高产、抗病虫、抗逆的农作物以及畜禽、鱼类等新品种；可以进行再生能源的利用解决能源短缺问题；可以扩大食饲料、药品等来源，满足人类日益增长的需要；可以进行无废物的良性循环，减少环境污染，充分利用各种资源等。 三、生物技术在农业中的应用 1.植物生物技术 植物生物技术是一门研究植物遗传规律、探索植物生长发育机理，应用现代生物技术改良遗传性状、培育新品种、创造新种质的学科。 （1）植物育种和繁殖 随着生物技术的发展，人们已经可以把一个品种、品系的理想遗传性状转入另一品种、品系，以提高植物的价值、产量和质量。在番茄中导入编码ＥＦＥ酶的反义基因，使得ＥＦＥ酶活性降至正常的５％以下，成功限制了乙烯的生成，果实生理成熟后长期保持坚硬，仓贮一个月以上不会软化、不会腐烂，很大程度上提高了番茄的耐贮藏性能和经济效益。将大
动物细胞工程制药技术 摘要 生物制药产业以基因工程、抗体工程、细胞工程为主要代表。文章主要讲述动物细胞工程技术。动物细胞工程制药是动物细胞工程技术在制药行业方面的应用。当前动物细胞工程所涉及的主要技术领域包括细胞融合技术、细胞器特别是细胞核移植技术、染色体改造技术、转基因动植物技术和细胞大量培养技术等方面。 关键词：动物细胞工程制药细胞融合细胞大规模培养核移植
1、动物细胞工程制药技术 1、1.细胞融合 细胞融合指在诱导剂或促融剂作用下，两个或两个以上的异源细胞或原生质体相互接触，进而发融合并形成杂种细胞的现象。细胞融合技术作为细胞工程的核心基础技术之一，不仅在农业、工业的应用领域不断扩大，而且在医药领域也取得了开创性的研究成果，如单克隆抗体、疫苗等生物制品的生产。在动物体细胞融合技术的基础上 Kohler G和 Milstein C将能产生特异性抗体的原代 B 淋巴细胞与肿瘤细胞进行融合，创立了单克隆抗体制备的方法。国内外已培育出了许多具有很高实用价值的杂交瘤细胞株系，它们能分泌用于疾病诊断和治疗的单克隆抗体，如甲肝病毒、抗人 I g M 、抗人肝癌和肺癌、抗M-CSFR（Macrophage Colony-Stimulat-ing Factor Receptor，巨噬细胞集落刺激因子受体）胞外区的单克隆抗体等。目前单克隆抗体技术已趋成熟，许多产品已经进入产业化的生产阶段。 此外利用细胞融合技术可以生产各种免疫疫苗，肿瘤细胞 / 树突状细胞融合疫苗是近年来国内外恶性肿瘤免疫治疗研究的热点, 在各种动物模型及病人身上观察到肿瘤的消退。Avigan 等将乳腺癌或肾癌病人的自体癌细胞与树突状细胞在含有人粒 - 巨噬细胞集落刺激因子、白介素 - 4 的自体血清中培养，加入聚乙二醇使两种细胞产生融合, 融合细胞疫苗能使肿瘤消退，显示其在肿瘤治疗方面具有良好的应用前景。 1、2.转基因动物 利用转基因动物乳腺反应器生产药用或食品蛋白是生物制药领域近年来研究的热点之一。因为乳腺是一个外分泌器官，乳汁不进入体内循环，不会影响到转基因动物本身的生理反应，从转基因动物的乳汁中获取的目的基因产物，不但产量高、易提纯，而且表达的蛋白经过了充分的修饰加工，具有稳定的生物活性，因此又被称为动物乳腺生物反应器，所以用乳腺表达人类所需蛋白基因的羊、牛等产量高的动物就相当于一座药物工厂。20 世纪 80 年代中期，英国科学家克拉克首先在鼠的乳腺组织高效表达了人抗胰蛋白酶因子基因，开创了研制动物乳房生物反应器的先河。 据美国遗传学会预测，到2010年，所有基因工程药物中利用动物乳房生物反应器生产的份额将高达95％。国外现已有数十家以动物乳腺反应器为核心技术的公司，可生产α 1 －抗胰蛋白酶、人红细胞生成素、乳铁蛋白、人血清白