1发展背景
杂交构树[Broussonetia papyrifera （L ·）Vent ·]为
桑科（Moracea e ）构树属（Broussonetia ）落叶乔木，是中国科学院植物研究所通过现代生物技术和传统杂交育种方法利用光叶楮培育出来的，具有突出抗逆性的速生丰产树种。光叶楮即日本构树，喜光、速生、适生性强，是特用纸（如钱币纸等）的造纸原料，同时具有多种生态保健功能，也是较为优良的园林绿化树种。另外，其树叶中粗蛋白的含量高，Ca 、P 、Zn 等微量元素和氨基酸的含量丰富，是动物和鱼的优质饲料原料，发展前景广阔。我国是世界上最大的纸和造纸原料贸易净进口国，特别是木浆等纤维原料进口量巨大。近年来从日本引进光叶楮作为制浆造纸专用树种，但光叶楮为引进树种，资源有限，一般种植2～3代以后就会退化。目前光叶楮苗木主要靠常规的无性扦插繁殖，但由于材料来源不足，扦插成活率不高，费时费工，难以满足当前大面积栽培及推广的需要。
近两年来，构树组织培养快繁技术发展较快，主要是针对1997年从日本引用的纸浆材专用树种四倍体光叶楮的研究。李际红等采用光叶楮母株茎段为外植体，探讨了不同消毒处理方法对其离体培养的影响，发现在常规消毒剂中加入吐温能取得良好的灭菌效果。孙天洲等利用光叶楮顶芽进行优代再生，探索了其快繁和生根的最佳培养条件。由于光叶楮为新引进树种，顶芽数量有限，孙天洲等进一
步以侧芽为外植体诱导培养，通过调节培养基中激素含量，使不定芽的分化速度大大加快，繁殖系数达
6～7倍，在短期内能够提供大量的优质种苗，加快了
光叶楮推广应用的速度。郁蒙蒙等初步建立了光叶楮叶片和叶柄的高效再生体系，并探索了硝酸银在减轻光叶楮外植体褐化方面的作用，该体系的建立不仅为实现其无性快繁、扩大种源生产提供了一种途径，也为外源基因导入该树种，进行分子育种方面的研究，实现其种质资源的改良打下坚实的基础。但对于改良品种杂交构树的组培快繁的研究报道较少。
杂交构树组培快繁研究不仅可以解决构树种苗大量需求问题，为造纸、饲料等相关产业提供充足苗木来源，还为优良品种的保存、遗传转化和转基因品种培育与筛选打下坚实的理论基础。然而关于构树人工繁殖研究报道较少、起步较晚，加强其繁殖方面的研究，尤其是构树高效再生体系的建立和遗传转化是今后研究的重点。
2组培快繁技术介绍
通过对杂交构树茎段的离体培养和繁殖，探讨
了杂交构树茎段萌发、分化、不定芽生长分化及生根的最佳培养基。为实现其快速无性繁殖、扩大种源生产、保存优良品种提供了一种行之有效的方法，也为杂交构树的遗传转化及转基因品种改良打下了坚实的试验基础。
杂交构树组培快繁技术概况
作者简介：张伟（1984-），女，硕士，主要从事蝴蝶兰、凤梨、红掌、竹芋等花卉组织培养及栽培应用的研究。
张
伟
（山东省聊城市农业科学研究院
聊城252000）
摘要：杂交构树是中国科学院植物研究所通过现代生物技术和传统杂交育种方法利用光叶楮培育出来的，具有突出抗逆性的速生丰产树种。目前光叶楮苗木主要靠常规的无性扦插繁殖，但由于材料来源不足，扦插成活率不高，费时费工，难以满足当前大面积栽培及推广的需要。近两年来，构树组织培养快繁技术发展较快，通过对杂交构树茎段的离体培养和繁殖，探讨了杂交构树茎段萌发、分化、不定芽生长分化及生根的最佳培养基。为实现其快速无性繁殖、扩大种源生产、保存优良品种提供了一种行之有效的方法，也为杂交构树的遗传转化及转基因品种改良打下了坚实的试验基础。关键词：构树；茎段；组织培养；规模化生产
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草莓的组织培养 一、茎尖 1．概述通过对草莓茎尖离体培养的试验研究表明：取草莓茎尖为外植体，以0．35 mm大小为宜；用MS+0.5 mg/L 6-BA+O.2 mg/L NAA培养基． 不定芽再生率高；以1/2 MS+O.1 mg/L IBA 生根效果最好。 2.结论（1）再生途径：草莓刚抽出的匍匐茎的茎尖 （2）灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理，最后用无菌水冲洗5～8次，接种于诱导培养基中。诱导培养基为MS+0．5 mg／L6一BA+0．2mg／L NAA+3 蔗糖(w／v)+0．5﹪卡拉胶，pH值为5.6～5.8。每个灭菌处理接种2O枚外植体，l5d后观察记录外植体的污染、死亡、无菌成活生长等情况。 （3）培养基： ①芽诱导试验，于MS培养基附加0．2 mg／L NAA、IAA、IBA不同种类生长素的培养基中，20d后调查记录幼芽分化情况。 ②继代培养与扩大繁殖，MS培养基附加0.5 mg/L6-BA、0.01 mg/L NAA。 ③根诱导试验, 用1/2 MS附加不同浓度(mg/I )IBA 有0．05、0．1、0．2、0．5及不加IBA的5个处理. （3）条件：培养基均在1～ 1.1大气压下热压灭菌20min。培养温度(25± 2)℃。每日光照12h，光强2 000Lux。 （1）再生途径：用其花药、花蕾、叶、叶柄、子叶、下胚轴等作外植体进行离体培养。 （2）灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理. （3）培养基：①MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L(浓度单位,下同)；②MS+6一BA0.5+KT 0.5；③MS+BA2.0+IAA 1.0；④MS+BA2.0+NAA0.5+2,4-D0.1；⑤MS+BA2.0+IBA0.1。以上培养基各加CH 100 mg/L，蔗糖20g/ L(①为30g/ L)。 ①用于花药诱导培养基； ②用于花药幺伤组织分化培养； ③、④用于其余5种外植体(叶盘、叶柄、下胚轴、子叶、花蕾)诱导培养；⑤仅用于花蕾培养。 （4）条件：培养条件均为12 h光照12 h黑暗。光强度1200-1500lx、温度(25 ±2)℃。 三、叶片以红颊、章姬、丰香草莓叶片为试材，对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究，建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明，基因型、不同激素种类和配比直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素，不同激素配比是不定芽产生的关键因素。 叶片愈伤组织的诱导培养基以MS+TDZ 2~3mg／1较理想， 芽伸长的理想培养基为MS+6一BA 0．3～O．5mg／l， 生根培养基以1／2MS+IBA0．3mg／1较适宜，移栽成活率可达90％以上。 2.结论（1）再生途径：先采取当年生匍匐茎茎尖培养繁殖，建立起三个品种的无性繁殖系；再从继代3周的无菌苗上剪取叶片作为外植体，进行不同的处理，每瓶接10片叶盘，每处理重复5瓶。 （2）灭菌方法：于121℃下高温高压蒸汽灭菌20min。
植物组织培养技术 植物组织培养是指将植物体的一部分接种在合成培养基上，使其按照预定目标生 长发育成新植株。近年来，花卉组织培养及快繁脱毒技术越来越多地应用于花卉种苗 繁殖生产中。 一、组织培养在花卉产业中的应用 1.快速、大量繁殖优良品种组织培养技术已成为种苗生产的主要技术之一。经组织 培养，可增加繁殖系数，加快繁殖速度，可生产出种性纯、品质好、产花量高的生产 性用苗。在花卉育种过程中，不断的杂交、选种极大地扩展了花卉的花形与颜色，使 得花卉在各方面都越来越接近人们的需求。但在同时，也造成了花卉基因类型的高度 异质化———子代不易有均一表现。而组培苗是在母株器官、组织或细胞的基础上发展起来的，可以保持母株的全部特性（花形、花色、株形、开花习性、抗逆性等）， 因而可以根据需要来选择集多种优良性状于一体的植株加以分生，从而得到大量与母 株一模一样的植株。 2.培育脱毒苗木采用组织培养技术，利用植株的分生组织不易感染病毒的原理，可 以对花卉植株的分生组织进行组织培养来繁殖苗木，防止亲代植株的病害传递给子代，从而达到脱毒的目的。 病毒病对长期应用营养繁殖（分株、扦插等）的观赏植物及其生产的危害相当严重。由于观赏植物多采用营养繁殖，如嫁接、分株、压条等方法繁殖时，病毒（及类 病毒）则通过营养体及刀具、土壤传递给后代，大大加速了病毒病的传播与积累，导 致病毒病的危害越来越严重。据统计，观赏植物的病毒已多达100多种，并且逐年有 新增病毒的报道。观赏植物因病毒病大大影响其观赏价值，表现在康乃馨、菊花、百合、风信子等的鳞茎、球茎与宿根类花卉及兰科植物等严重退化，花少且小，花朵畸形、变色，大大影响观赏价值，严重者甚至导致某些品种的灭绝，严重制约观赏植物 生产的发展，这也是我国切花品种跨不出国门的原因之一。组培快繁技术已应用到蝴蝶兰的栽培中非洲菊也可以通过组培快繁技术进行繁殖 植物组织培养脱毒的原理主要是利用茎尖分生组织不带毒或少带毒。感病植株体内的病毒分布不均匀，其数量随植株部位和年龄而异，越靠近茎尖顶端的区域，病毒 的浓度也越低。分生区域无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞不断分 裂和活跃的生长速度，因此生长点含有病毒的数量极少，几乎检测不出病毒。因此， 茎尖培养时，切取茎尖的大小对脱毒效果有很大影响，茎尖越小效果越佳，但太小时 不易成活，过大则不能保证完全除去病毒。不同种类的植物和不同种类的病毒在茎尖
杂交构树农业综合开发项目 一、项目概况 1、建设地点 项目建设地点位于龙泉市兰巨乡。 2、项目投入总资金及效益 项目总投资5902万元。项目建成后实现年销售收入5570万元，利税1144万元。项目各项财务指标较好，投资回收期较短，经济效益好，抗风险能力强。 二、项目背景 构树（杂交构树）是利用现代生物技术和传统杂交育种方法培育出的新树种，其具有速生、适应性强、分布广、易繁殖、热量高、轮伐期短、抗逆性突出等特点，并富含植物蛋白，拥有天然药性，是极具经济、社会和生态价值的绿色饲料。发展构树种植，可增加荒山、河滩、石漠化地区和矿
山的植被，能有效保护生态环境，解决人畜争粮等问题，实现中国经济。因此，在中国三农产业工作委员会的领导和支持下，构树扶贫工程被列入2015年我国十大精准扶贫工程之一，并面向全国发展多元化的生态农业产业链。 国务院扶贫办把杂交构树项目列为十大精准扶贫工程，并率先在安徽、广西、山西等十多余省、自治区进行示范推广。杂交构树被称为“东方神树”、“黄金树”、“摇钱树”等，浑身都是宝。一年种植，可收益20年，当年种植当年就可收益，从种植到收成不用打农药。目前杂交构树的主要用途非常广泛，嫩叶可加工作为保健功能茶叶、构树饮品、保健食品等食用，同时其他枝叶还可加工用作畜牧饲料。由于杂交构树的营养成分及矿物质元素等含量相当高，因此用杂交构树饲料喂养的猪、牛、羊、鸡等畜禽所排出的粪便也是非常好的肥料。 三、市场前景 （1）杂交构树饲料市场前景： 杂交构树饲料是通过杂交构树枝叶经过特殊发酵加工而成，具有独特香味，羊、猪、牛、兔、鸡、鹅等畜禽喜吃、肯长，因而生长速度快、抗病能力强，饲料的消化率高达90％以上。杂交构树枝叶含有丰富的营养成分、大量的氨基酸成分及其他微矿物质元素，是一种优质全能蛋白饲料。比较苜蓿、豆粕，其蛋白质、氨基酸等大部分成分含量都有着显著
蓝莓（Vaccinium corymbosum）属杜鹃花科，越橘属植物。起源于北美，多年生灌木小浆果果树。因果实呈蓝色，故称为蓝莓国际粮农组织将其列为人类五大健康食品之一。 本试验以蓝莓半木质化茎段为外植体，并通过瓶外生根技术，建立起植株再生体系。 1 材料与方法 1.1 外植体材料及培养条件 1.1.1 外植体选择 高灌蓝莓半木质化茎段。 1.1.2 外植体预处理及灭菌 剪取蓝莓半木质化枝条，立即去掉上部叶片带回室内，剪成带有一个叶芽2-3厘米长茎段，在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒2-3分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5-8分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剪去茎段两端约 0.5-1厘米，立即接种到初代培养基中。 1.1.3 培养条件 诱导培养基：改良WPM + ZT 1.0mg/L 增殖培养基：改良WPM + IAA 0.1mg/L + ZT 2.0mg/L 复壮培养基：改良WPM + IBA 0.1mg/L WPM具体改良为：以硝酸钙 684mg/L、硝酸钾 190mg/L、EDTA铁钠 73.4mg/L和盐酸硫胺素0.1mg/L代替原WPM培养基中的硫酸钾、氯化钙、硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠。 以上培养基均加蔗糖3%，琼脂0.7%，pH值5.2。 培养温度为25℃，光照强度为2000lx，光照时长为12-16时/天。
2 结果与分析 2.1 初代诱导培养 将处理好的外植体立即接种到诱导培养基中，5-6天叶芽开始萌动，10天开始展叶，20天腋芽长到1厘米长，30天腋芽长到1.5-2.5厘米长。 2.2 继代增殖培养 将初代培养长出的茎剪成1.5-2厘米长茎段转接到增殖培养基中。30-35天增殖5-7倍，增殖苗生长健壮。 2.3 复壮培养 将继代苗剪成1-1.5厘米茎段，转接到壮苗培养基，复壮培养30-40天，复壮苗高5-6厘米且粗壮。 2.4 瓶外生根培养
苹果的组织培养是采用无菌培养技术，将来自优良植物的茎尖、腋芽、叶片、鳞片、块根和球茎等器官以及它们的组织切片进行离体培养，使之在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。由于离体技术处理严格，所以很容易脱除一些细菌病原及病毒，是复壮品种的有效措施。已成功脱除的病毒和病害有苹果褪绿叶斑病毒、花叶病病毒、轮纹病等。苹果矮化砧、抗寒砧的组织培养也已成功。苹果脱毒组培技术流程具体如下。
一 外植体材料选择与处理 早春，将上年芽接或切接的盆栽长富2号苹果苗移人温室，待新梢长出3～5片新叶时，放入热处理箱中，37℃恒温热处理30d或32℃与37℃每8h变换一次，变温热处理60d。脱毒率可达80％以上。热处理结束后，从盆栽苗嫩梢上采集生长旺盛、长约2～3cm顶梢，流水冲洗10min，去掉小叶。70％乙醇浸泡30s，蒸馏水冲洗后放入0.1％HgCI。中消毒10min，无菌水冲洗3～5次，解剖镜下迅速剥取1.0mm的茎尖进行分离培养，接种于起始培养基上。
二 培养基制备 1.1 芽诱导 适宜苹果芽诱导培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。诱导的芽生长正常可发育成新梢。 1.2 继代培养 选择诱导的芽丛切割成单芽茎段，转接于设计的继代培养基上。适宜的苹果继代培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖4％+琼脂0.36mg/L。培养条件：光照强度2000～ 2500lx，光照时间14～16h/d，适宜温度为25℃±2.0℃。40d后增殖6.1倍。 1.3 生根培养 选择生长正常的继代培养苗，剪成单芽茎段，插入生根培养基中，苹果适宜的生根培养基为：1／2MS+IAA1.5mg/L+蔗糖25％+琼脂0.36％。培养30d后，平均4～6条根／苗，长达0.5～1.0cm。根白且粗，多直接生于茎基部。
构树的栽培技术 繁殖方式：用种子或扦插繁殖。为克服雌株多浆的果实在成熟时大量落果，影响环境卫生，可利用雄株作接穗，培育嫁接苗种植。 育苗：每年10月份采集成熟的构树果实，装在桶内捣烂，进行漂洗，除去渣液，便获得纯净种子，稍晾干即可干藏备用。由于种粒小，种壳坚硬，吸水较困难，播种前必须用湿细砂进行催芽。春季条播，行距25~30cm，播种时，将种子和细砂混合均匀后撒入2cm深的条沟内，覆土以不见种子为宜，播后盖草，待3周后种子即发芽出土。做好出苗前期管护工作，防止鸟类及鼠害，保证种子的安全越冬。当年生苗木可达到80~90cm，即可出圃造林。 播种：选择背风向阳、疏松肥沃、深厚、不积水的壤土地作为圃地。在秋季翻犁一遍，去除杂草、树根、石块。在播种前1个月进行整地和施肥，整地要做到三犁三耙，深度达到30cm以上，土壤细碎、平整。结合整地每667m2施入粉碎的饼肥150kg或厩肥1000~1200kg。播种床宽1.0m，长8~10cm，床高约15cm，排水沟宽30cm。 播种时间一般在3月中、下旬。播种前要将种子用清水浸泡2~3h，捞出晾干后用倍于种子的细沙混合均匀，堆放于室内进行催芽，要定期查看，保持湿润，当种子有30%裂嘴时，即可进行播种。采用条播方法，行距25cm，播种量每667m20.15kg左右，播种时，将种子和细沙混合均匀后撒入条沟内，覆土以不见种子为度，播后盖草以防鸟害和保湿。当30%~40%幼苗出土时，应在下午分批揭除盖草。 造林：构树造林不受条件和地形地貌的限制，既可集中连片造林也可见缝插针，在沟、塘、库岸、溪流两侧，房前屋后都可种植。种植密度根据营林目的不同而有差别，一般造林密度以株距1.5m，行距2m，每亩约200株为宜；以营造水土保持林和薪炭林为目的，每亩分别以330~660株为宜。定植2年后，要从主干30~50cm处截掉，以促其萌枝条，3~5年即可进入产皮产叶的盛期。 抚育管理：构树幼林地易生杂灌，影响林木生长，为使林相整齐，生长健壮，提高树林的产量和质量，因此，砍杂除灌是林地抚育管理的必要工作，每年要进行1~2次，必要时可进行林地中耕除草和施肥。另外，对散生和成龄老树，要进行适时截干更新，促其抽发枝条，提高单位面积产量，同时也便于采叶取皮。 病虫防治：主要病虫害为烟煤病和天牛。防治方法：烟煤病用石硫合剂每隔15天喷1次，连续2～3次即可。天牛用敌敌畏和敌百虫合剂800倍液喷杀，或用脱脂棉团沾放敌畏原液，塞入虫孔道，再用黄泥等将孔口封住毒杀。 主要价值：构树能抗二氧化硫、氟化氢和氯气等有毒气体，可用作为荒滩、偏僻地带及污染严重的工厂的绿化树种。也可用作行道树，造纸。构树叶蛋白质含量高达20%～30%，氨基酸、维生素、碳水化合物及微量元素等营养成分也十分丰富，经科学加工后可用于生产全价畜禽饲料。 饲用价值：嫩叶可喂猪。采用构树叶为主要原料发酵制成，不含农药、激素。利用生物技术发酵生产的构树叶饲料具有独特的清香味，猪喜吃，吃后贪睡、肯长。根据饲养牲猪品种的不同和生长阶段的不同，饲料消化率达80%以上。 药用价值：中医学上称果为楮实子、构树子，与根共入药，功能补肾、利尿、强筋骨。主治：补肾、明目、强筋骨。构树以乳液、根皮、树皮、叶、果实及种子入药。夏秋采乳液、叶、果实及种子；冬春采根皮、树皮，鲜用或阴干。 性味：子甘、寒；叶甘、凉；皮甘、平。 功能主治 子：补肾，强筋骨，明目，利尿。用于腰膝酸软，肾虚目昏，阳痿，水肿。 叶：清热，凉血，利湿，杀虫。用于鼻衄，肠炎，痢疾。
满天星 Gypsophila elegans 满天星，又名为霞草、重瓣丝石竹，原产地中海沿岸，属石竹科多年生宿根草本花卉。为常绿矮生小灌木，其株高约为65～70cm，茎细皮滑，分枝甚多，叶片窄长，无柄，对生，叶色粉绿。由于它花型小、浅色、花姿蓬松具立体感，气质高雅清秀，给人以朦胧感，花序群体效果极佳，是重要的陪衬花，为当今最流行的切花之一，十分畅销。
满天星种苗多采用边生产切花，边利用植株下部发生的腋芽进行插扦获得。用这种方法，满 天星繁殖系数较低，种苗品质参差不齐，较难获得大批量的优质种苗。一些单瓣种可用种子 繁殖。商品化切花生产的，种苗繁殖以组培为主，采用茎尖培养，繁殖系数高，根系生长状 况好，花枝挺拔，色泽纯正，切花质量高。满天星组织培养繁殖速度快，生根率高，无畸形 变异，过渡苗驯化成活率高，与其他花卉组培相比，易获得成功，但普遍存在玻璃化现象。 1、初代培养 诱导培养基为1/2MS+0.3mg/L 6-BA+0.1mg/L KT+0.3mg/L NAA，或MS+1.0mg/L 6- BA+2.0mg/L KT+0.3mg/L NAA+0.2mg/L IAA，各培养基加3％～4％蔗糖0.6％～0.7％琼脂。培养温度25～27℃，光照强度2000～2200lx，光照时间每天12～16h。 剪取满天星母株上生长较粗壮的嫩梢，剪去展开叶片，留下生长较嫩的叶片，将外植体放在 烧杯中，用自来水冲洗10～20min，然后加入少量家用洗衣粉或洗洁精少许，加入少量的水，用小毛刷搅拌2～5min。用此方法重复数次，再用自来水冲洗干净满天星茎尖上的洗涤液。 把冲洗净的满天星茎尖外植体放入75％的酒精中约3～5min，再用0.1％的升汞浸泡外植体 5～7min，或在10％的漂白粉清洗液中浸泡10～15min，再用无菌蒸馏水冲洗5～7次，即得 无菌外植体，置于无菌操作台中的培养皿中待用。然后将嫩茎切成lcm左右的带芽茎段，腋 芽切取0.5～1.0cm长的茎尖，接种到诱导培养基上。
构树的经济价值如何种植构树的效益怎么样 构树（Broussonetia ayrifera(L.)Vent.）英文名：aer mulberry。又名光叶楮谷浆树鹿仔树当当树奶树纸木桑科构树属（或楮属）为多年生落叶乔木古名楮高达16米；树皮平滑浅灰色；枝粗壮平展红褐色密生白色绒毛。叶阔卵形长8～20厘米宽6～15厘米顶端锐尖基部圆形或近心形边缘有粗齿3～5深裂(幼枝上的叶更为明显)两面有厚柔毛；叶柄长3～5厘米密生绒毛；托叶卵状长圆形早落。花雌雄异株；雄花序为腋生下垂的葇夷花序长6～8厘米；雌花序头状苞片棒状顶端圆锥形有毛花柱基部不分枝。果球形直径约3厘米。花期5月果熟期为9月。 构树树皮为造纸原料是一种古老的造纸用树种可用于复写纸、蜡纸、绝缘纸、制伞用的棉纸等构树皮还可加工高级天然纤维利用构树皮生产“和”纸、工艺书画纸、食品包装纸、装饰用纸等。构树在我国分布极广除东北外其余大部分地区均 有分布。该树种适应性强耐干旱瘠薄可耐0.3%的盐碱多生长在丘陵、山坡、河滩地、平坦地或村落附近既可作绿化和水土保持树种又可作经济树种。 杂交构 ... 构树（Broussonetia ayrifera(L.)Vent.）英文名：aer mulberry。又名光叶楮谷浆树鹿仔树当当树奶树纸木桑科构树属（或楮属）为多年生落叶乔木古名楮高达16米；树皮平滑浅灰色；枝粗壮平展红褐色密生白色绒毛。叶阔卵形长8～20厘米宽6～15厘米顶端锐尖基部圆形或近心形边缘有粗齿3～5深裂(幼枝上的叶更为明显)两面有厚柔毛；叶柄长3～5厘米密生绒毛；托叶卵状长圆形早落。花雌雄异株；雄花序为腋生下垂的葇夷花序长6～8厘米；雌花序头状苞片棒状
樱桃组培快繁技术研究 摘要：以甜樱桃品种高砂、顽童和中国樱桃品种莱阳矮樱为试材，以MS与F14为基本培养基进行组织培养试验。对增殖率和成苗率等指标进行研究。结果表明，用F14做培养基3个樱桃品种茎尖组培苗的增殖系数比MS高，F14上高砂、顽童和莱阳矮樱的增殖系数分别是4．17、3．78和5．0，MS上则分别是3．33、3．22和4．17；在F14上，樱桃茎尖组培成苗率莱阳矮樱为83．3％，高砂23．3％，顽童16．7％；在F14添加植物生长调节剂的增殖培养基中，以F14+6-BA 1．0mg／L+IBA 0．5mg／L+GA32．0mg／L对高砂和顽童的茎尖组培苗增殖系数大，以F14+6-BA 1．Omg／L+IBA 0．1mg／L+GA 2．0mg／L对高砂组培苗的增殖系数大，促进节间伸长的效果好：在一步生根法培养基F14+IBA 1．0mg／L上，平均生根率高砂较顽童高；在F14+IBA 1．0mg／L上添加活性炭500～1000mg／L时，可有效提高顽童的生根率。 关键词：樱桃；茎尖；组织培养；快速繁殖 组织培养技术的发展为果树的育种工作带来许多方便，也为长期保存果树种质资源提供了新的手段?。研究表明，通过茎尖外植体进行樱桃组培繁殖，可达到快速繁殖苗木和脱去病毒病的效果。 1 材料和方法 试材为甜樱桃品种高砂、顽童．中国樱桃品种莱阳矮樱，均来自辽阳市农林科学院果树基地。试验采用F14和Ms 为基本培养基；F14+蔗糖30 L+琼脂7 L为分化培养基；F14+植物生 长调节剂为增殖培养基，添加的植物生长调节剂有6一苄基氨基嘌呤(6．BA)、赤霉素(GA )和吲哚丁酸(IBA)，具体配方见表3；F14+IBA和MS+IBA为生根培养基。F14+IBA 1．0mg／L为一步生根法培养基。F14+IBA 1．0mg／L+活性炭为试验活性炭作用的培养基。培养基的pH值为5．6～5．8，分装在lO0ml三角瓶中，在121℃下灭菌20分钟，在黑暗条件下保存备用。 1．1 试材的预处理 取樱桃芽露绿的一年生成熟枝条，剪成带一个芽、长约2cm的枝段，用刀将芽从枝段上削下来(带些木质部)，剥除芽鳞片，去除茎表皮，用洗洁精浸泡3分钟，在流水中冲洗60～90分钟，在超净工作台上用70％酒精消毒30秒钟，用无菌水冲洗3次(每次1～2分钟)，再用0．1％氯化汞消毒15分钟，置无菌水中浸泡20分钟，用无菌水冲洗4次，待接种。 1．2 试材的接种培养 在超净工作台上将经预处理的试材用镊子剥除芽外部的叶原基，去除木质部，切下1mm大小的茎尖，接种于分化培养基F14+蔗糖3O L+琼脂7 L上培养。培养温度25±2cC，光强2000～2500K．每天光照l6小时。 1．3 评价指标 微茎尖成苗数=萌发后能正常增殖继代、具有成苗能力的微茎尖数。 成苗率(％)=成苗微茎尖数／接种微茎尖数×100 增殖芽数=接种1个芽25天后增殖的所有芽数 增殖系数=转接后芽数／转接前芽数 生根率(％)=生根嫩梢数／接种嫩梢数×100 2 结果与分析 2．1 不同樱桃品种间茎尖组培成苗率的差异 在F14基本培养基上，接种甜樱桃品种高砂、顽童和中国樱桃莱阳矮樱的茎尖，高砂的成苗率为23．3％，顽童16．7％，莱阳矮樱83．3％(表1)。在组培中发现，甜樱桃萌发率较低，接种后的第2天伤口处及茎尖边缘褐变，之后有的茎尖周围发生大量愈伤组织，延缓了茎尖的萌发及成苗时间，甚至导致死亡。而中国樱桃莱阳矮樱则萌发率和成苗率均高，组培容易。
植物无糖组培快繁技术 一、无糖组培技术原理 无糖组培快繁技术是由日本千叶大学的古在丰树教授上世纪八十年代末发明。它是一种全新的植物组织培养技术，是环境控制技术和组织培养技术的有机结合。它以CO2代替糖作为植物体的碳源，利用工程技术手段调节组培微环境的空气、光照、温度、湿度等影响因子，促进植物光合作用，使组培植物由兼养型转变为自养型，从而促进植物的生长发育。 经大量实验研究证明，该项研究成果已成为世界领先技术。目前，中国、美国、英国、韩国等国家已将该项技术应用于种苗工业化生产中。该技术于1997年由国家外国专家局和昆明市科技局委托昆明市环境科学研究所从日本引进。 二、无糖组培技术优势 由于植物无糖组培以CO2代替糖作为植物体的碳源，对植物无糖组培微繁殖中的容器换气次数、光照强度、CO2浓度、培养基质、植物生长调节剂进行调节，并通过监测反馈结合植株生长特性建立符合植株生长要求的稳定供气系统和温度调控系统，从而解决了传统组织培养中存在的污染率高、植物生长发育不良、生长迟缓、生理功能紊乱、玻璃苗、畸形苗多等问题。据相关资料报道，无糖组培快繁技术与传统的植物组织培养技术相比，显著提高苗的质量和产苗率，可缩短培养周期，种苗生产综合成本降低。经大量实验研究证明，该项
研究成果已成为世界领先技术。 无糖组培生产工艺简单，流程缩短，技术和设备的集成度提高，降低了人工操作强度，更易于在规模化生产上推广应用。 三、无糖组培技术国内外研究进展 无糖组培快繁技术通过多年的试验研究和生产示范，在引进消化吸收国外先进技术的基础上，结合国情，昆明市环境科学研究所研制开发了无糖培养微繁殖生产的配套设施，获得三项专利。 目前，该项技术已初步应用于非洲菊、彩色马蹄莲、灯盏花、甘薯、葡萄、满天星等植物并获得成功。上述研究结果表明，无糖组培技术培育出的苗具有抽叶多、植株健壮、节间距短、根系发达、干物质积累多、光合自养能力强等优良的生物学性状。美国、韩国、英国、日本等国家已将该项技术应用于生产，并显示出了巨大的优势和良好的效果。 无糖组培快繁技术可解决传统组织培养中存在的诸多问题，显著提高种苗质量，缩短培养周期，提高产苗率，降低生产成本。但目前，该项技术在药用植物方面的应用研究，除云南农大王荔课题组报道外尚未见其它报道。
[摘要] 从草莓组织培养类型（草莓茎尖组织培养、草莓花药培养、草莓叶片、叶柄组织培养）开始，介绍了近几十年国内外草莓组培的研究现状和进展。 [关键词]草莓;组织培养; 草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，是世界上七大水果之一，素有“水果皇后”的美称。草莓果实色泽艳丽，芳香多汁，酸甜适度，鲜美可口，营养丰富，每百克果实内含有蛋白质1g，脂肪，糖4～12g，酸～2g，无机盐，粗纤维，Vc45～120mg，比苹果和葡萄高10多倍，并含有丰富的磷、钙、铁、锌等矿物质，其中锌的含量是香蕉的4倍以上，比柑橘高6倍以上，比苹果高40倍以上。另外食用草莓对肠胃病和贫血病有一定的疗效，对促进智力发育有重要作用。深受国内外消费者的喜爱。草莓作为一种栽培周期短、结果早、见效快的经济作物，近15年来在我国发展迅猛，中国园艺学会草莓分会统计2003年底，我国草莓总面积和总产量均跃居世界第一位。在浆果中，草莓的总产量和总面积仅次于葡萄，成为我国发展农村经济，促进农民增收的重要经济作物。 随着草莓在国内栽培面积的扩大和种植年限的延长，草莓的病毒病严重影响草莓的生产。作为高级浆果的草莓，在我国目前的生产栽培上多沿用无性繁殖种苗：主要方法是匍匐茎繁殖和分株繁殖，但这两种方法效率低、种苗易退化、易造成病毒蔓延。王国平（1988）等调查，我国栽培草莓带病毒植株率过80%以上，戴子林（1995）等调查，我国长江流域感染大面积植株感染率在50%以上；感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差、生长缓慢，一般减产30%-80%，并逐年加重；严重影响草莓的长势、品质和产量，对病毒病目前还没有药剂可以防治。 通过草莓组织培养扩繁草莓脱毒苗，可以解决上述问题。近年来在草莓种苗生产中，有关草莓组培快繁技术的研究备受人们的重视，本文就草莓组织培养研究与应用作一综述。 一、常见草莓组织培养类型 目前，国内外在草莓品种快速繁殖上已有不少报道：常用的外植体主要有：茎尖（Adam，1972；庆子孝，1972；谭兰英等，1981）、腋芽（Boxus，1974、1977；杨乃博，1981）、叶片、叶柄、茎段，花药（Quak,1977；大泽，1972）。常见的草莓组织培养主要的类型：草莓茎尖组织培养、草莓叶片和叶柄组织培养、
构树种植项目可行性研究报告 构树种植项目可行性研究报告构树种植项目可行性研究报告构树种植项目可行性研究报告目录第一章总论............................................................... (5) 项目概要：........................................................... . (5) 项目名称：........................................................... .............................................. 5 项目性质：........................................................... ................................................ 5 项目实施地点: ............................................................... ...................................... 5 项目承担单位: ...............................................................
...................................... 5 项目建设期限：........................................................... ........................................ 5 项目主要建设内容及规模............................................................... .................... 5 总投资估算............................................................... ............................................ 8 资金筹措：........................................................... ............................................ 8 主要技术经济指标：........................................................... ............................................. 9 可行性研究报告编制依据............................................................... ............................... 10 综合评价与结论：........................................................... ............................................ 10 综合评价：........................................................... ............................................ 10 第二章项目背景及建设的必要
万象（Haworthia maughanii）又名毛汉十二卷，为百合科、十二卷属多年生肉质植物。万象形态非常奇特，叶半圆筒状，肉质叶肥厚，属典型的珍奇观赏多肉植物。 试验以花葶为外植体，获得再生植株，并从芽诱导、芽增殖，到诱导生根的培养，已建立起完整的无性繁殖体系，本课题万象微型繁殖技术已应用于在企业生产中。 1 材料与方法 1.1 外植体材料及培养条件 1.1.1 外植体选择 购得的万象成熟种苗在25℃环境下培养，浇少量水，待到其抽出花葶3-5厘米时切下。 1.1.2 外植体预处理及灭菌 用洗衣粉水清洗并用毛笔刷洗；在超净工作台上用75%酒精快速浸泡30秒，然后用加有两滴吐温-80的0.1%氯化汞溶液浸泡8分钟，之后用无菌水冲洗4次，每次洗2分钟。 1.1.3 培养条件 培养温度22℃-26℃之间，光照12小时/天，光照强度1500-2000lx。 2 结果与分析 2.1 初代诱导培养 在超净工作台上把花葶切断，每段0.5-1厘米，接入诱导培养基（配方见文末，下同）中，培养20天左右，会诱导出愈伤组织，培养45-60天可诱导出丛生芽。 2.2 继代增殖培养 愈伤组织形成后，会在愈伤组织上萌发丛生的不定芽。在超净台上，剥离不定芽，接种于增殖培养基，培养30-40天有新的丛生芽长出。 2.3 生根培养 将长至2厘米以上的小苗，转接至生根培养基中，转接时，切净芽基部的愈伤组织。10天开始可以看到根的发生。 2.4 炼苗与移栽 小苗根长1厘米时可以出苗，移栽前在培养室中打开瓶盖练苗3天，取出生根苗，在放有800-1000倍多菌灵溶液中清洗去基部培养基。
栽培基质用新鲜湿润的蛭石，植入后遮阴，第一次不浇水。1个星期后喷杀菌剂，浇少量水。小苗移栽成活率78%。 附配方 诱导培养基：MS + KT 2mg/L + NAA 0.2mg/L + Ad 5mg/L 增殖培养基：MS + KT 1mg/L + NAA 0.1mg/L + NaH2PO4 40mg/L 生根培养基：1/2MS + NAA 0.2mg/L 以上培养基均加琼脂0.7%，诱导愈伤组织和芽以及芽增殖时加蔗糖3%，生根时加蔗糖2.5%。pH值5.6-5.8，其中NaH2PO4主要起促进芽的分化的作用。
国内外植物组织培养技术的差距 姓名：*** 学号：********* 指导教师：*** 专业班级：生物工程2009级1班 完成日期：2012-06-05
摘要 植物组织培养技术是农业生物技术中最早实现产业化并取得显著经济效益和社会效益的领域，在理论研究和生产实践中具有广泛的应用价值。通过对国内外植物组培的发展概况以及技术差距的分析，指出了我国植物组织培养技术的发展现状、目前存在的主要问题和应采取的措施，并对植物组织培养技术的发展作了展望。 关键词：组织培养概况差距展望 Abstract The plant tissue culture technology is agricultural biotechnology as the first realized industrialization and get a remarkable economic and social benefits of the field, in the theoretical research and production practice has wide application value. Through the domestic and international plant tissue and the development situation of the technology gap analysis, and pointed out the plant tissue culture technology's development present situation, the existing problems and the measures should be taken, and the development of plant tissue culture technology are discussed. Key words：Tissue culture situation gap looking
果苗知识 西北苗木网2006-06-26日信息:构树(BroussonetiapapyriferaL)有速生、适应性强、分布广、易养殖、热量高、轮伐期短的特点,在我国的温带、热带均有分布,不论平原、丘陵或山地都能生长。据测定,构树在同等立地条件下早期生长与刺槐、杨树等生长不相上下,另据2年生构树在同等条件下与杨树生长对比看,构树单株重18.5kg,而杨树只有15.5kg,二者相差16%。 构树的树叶还是很好的猪饲料,15～20棵构树即可饲养一头猪。构树的皮是造纸的高级原料;材质洁白,纤维长,是制备木浆的高级原料。其根和种子均可入药,树液可治皮肤病,因此利用构树资源可开发鲜果、果汁、果酱、中药、饲料配料、造纸用木浆等多种用途的产品,可以营造造纸林与薪炭林。构树枝干易燃烧,无臭味,热量20kj/g,比刺槐稍高,从薪炭林的经营角度看,构树比刺槐还具有无刺、容易收割和使用的优点。 1播种育苗 1.1采种10月份采集成熟的构树果实,装在桶内捣烂,进行漂洗,除去渣液,便获得纯净种子,稍晾干即可干藏备用。 1.2选地、整地选择背风向阳、疏松肥沃、深厚的壤土地作为圃地。在秋季翻犁一遍,去除杂草、树根、石块。 1.3施基肥在播种前1个月,将粉碎的饼肥150kg/667m2,撒施于圃地耙入土壤中。 1.4 播种采用窄幅条播,播幅宽6cm,行间距25cm,播前用播幅器镇压,种子与细土（或细沙）按1:1的比例混匀后撒播,然后覆土00.5cm,稍加镇压即可。对于干旱地区,需盖草。 1.5 苗期管理、出圃对于盖草育苗的,当出苗达1/3时开始第一次揭草,3天后第二次揭草。当苗出齐后１周内用细土培根护苗。此间注意保湿、排水。进入速生期可追肥2～3次。作好
《植物组培快繁技术》 康乃馨植物组织培养 实 验 设 计 小组成员：陈梅20141641044 郑莉20141641002 雷雨田20141641043
康乃馨植物组织培养 一、实验目的 掌握植物离体快速繁育原理、方法和完整过程。 二、实验原理 香石竹（学名Dianthuscaryophyllus）又名康乃馨，花色艳丽，开花时间长，装饰效果好，是世界上最畅销的切花之一，具有较高经济价值。由于病毒病侵害，常使植株矮化，花朵变小，花色产生斑点，退色甚至不开花，影响切花产 量和质量。通过茎尖分生组织培养，能够获得“无病毒”的健康植株，对于引 进的少而新的脱毒种苗，再进行一次茎尖培养，进一步降低基础苗中的病毒含量，并通过组织培养的方法快速繁殖，在短期内，就可以获得大量的脱毒试管苗，使引入材料迅速在生产上推广应用，取得明显的经济效益。 三、实验仪器与材料 仪器：超净工作台、酒精灯、电炉、烧杯、玻璃棒、镊子、解剖刀、接种盘、 纱布、记号笔、标签纸 试剂：75%乙醇、0.1%升汞、无菌水、MS培养基、IAA0.1mg/L、BA0.5mg/L、pH5.8-6.0、蔗糖、琼脂 材料：康乃馨带芽外植体材料 四、实验步骤 （一）培养基的配方 1、康乃馨的生芽培养基 MS+IAA(0.1mg/L)+BA(2.0mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖30g/L+琼脂(8g/L) pH5.8-6.0,配制300ml,用培养瓶分装10~15瓶。另外需要制备无菌水10瓶，培养瓶每人3~4瓶。纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。
2、康乃馨的继代培养基 MS+BA(0.3mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖30g/L+琼脂(8g/L)，pH5.8-6.0,配制300ml,用培养瓶分装10-15瓶。另外需要制备无菌水10瓶，培养瓶每人3-4瓶。纱布、碟子若干后二者分别用报纸包好一同灭菌。 3、康乃馨的生根培养基 MS+生根培养基为1/2MS+NAA(0.075mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂(8g/L)， pH5.8-6.0,配制0.3L，用培养瓶分装10-15瓶。另外，需要制备无菌水10瓶，每人3-4培养瓶、纱布、碟子若干后二者分别用报纸包好一同灭菌。 （二）康乃馨的生芽培养 1、无菌操作准备 将培养基、无菌水、及各种接种用具放入超净工作台，开紫外灯照射消毒20-30min,开送风开关，关紫外灯，通风10min后，打开照明日光灯。洗手、换鞋，换实验服，戴口罩，进入接种室，开启超净工作台。用纱布吸取75%酒精擦手、擦拭超净台、擦拭培养基和无菌水瓶，点燃酒精灯，镊子、解剖刀、剪刀等接种工具放入灭菌锅灭菌，待冷却后使用。 2、外植体消毒 选取康乃馨叶腋间生出的侧芽为外殖体，用自来水冲洗半小时，将材料上的泥土和灰尘及杂质冲洗干净，用解剖刀切取所需组织放入大烧杯中，用75%的酒精浸泡消毒30s，用无菌水冲洗3次，再将材料移入0.1%升汞溶液浸泡10分钟,然后在超净台内用无菌水冲洗6次。材料消毒完成。 3、外植体的制备 将消毒好的材料用无菌滤纸吸去多余的水份,然后在无菌超净工作台上的接种盘内，借助解剖刀剥离茎尖，剥取茎尖大小通常在0.3mm左右。以上操作均
第一节植物组培快繁工厂的设计 第一节植物组培快繁工厂的设计 一、组培苗生产规模的确定 生产规模的确定首先应根据市场需求、生长的植物种类和经济实力来确定，例如，木本植物比草本植物的培养周期长，设计时必须比草本植物多增30%的空间、设备。植物种苗无糖微繁殖工厂化生产程序包括①入选品种外植体的筛选及获取; ②外植体灭菌诱导培养; ③快速 繁殖; ④生根培养; ⑤出瓶过渡炼苗; ⑥包装进入市场等工艺。一般一个熟练的接种工人根据繁殖品种的不同，年生产量可达15―20万苗。即规划一个年生产量达500万株的组培室，需设25―30个无菌操作位置。当无菌操作位置数量确定后，即可计算出接种室的需求面积。按日生产组培苗的数量及培养周期计算需要的培养架数量，以此为基础很容易就可计算出培养室的需求面积，一般为1台无菌工作台或者说一个无菌操作位置，需配备净培养面积（放置培养物的面积）7-10平方米，无菌操作室与培养室的面积比例为1：2，围绕组培工厂建设，其它必备的配套设施设备及操作用具购置的数量，应以每个无菌工作台的需求量计算，解剖刀、镊子、刀片等常用工具还要有充足的备用量。室外应有相应的温室配套，生产品种栽培展示区等，其面积的大小应根据不同的植物种类来确定。因此组培工厂的建设，需要认真规划、仔细计算、合理投资，使之既有系统性又适用，才能充分发挥最大的生产潜力。在市场竞争中，尽量降低生产成本，提高产品质量和确保品种的可靠性。 二、组培种苗工厂的设计 植物组培育苗工厂应选址在安静、清洁、可避开各种环境污染源的地方，以减少污染，降低生产成本确保工作的顺利进行。根据已确定的生产规模，设计组培生产车间时，要全面了解组培工作中所需的最基本的条件，以便因地制宜地利用现有房屋改建或新建组培工厂，尽量做到合理布局。通常按工作程序先后，安排成一条连续的生产线，避免环节错位，增加日后工作的负担或引起混乱。组织培养的生产线主要包括培养器皿清洗；培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌；无菌操作材料的表面灭菌和接种；进入培养室培养；试管苗出瓶、移栽等。各个房间的面积要合理安排，做到大小适中，工作方便，减少污染，节省能源，使用安全。图5.1所示的是一种组培生产车间设计的平面布置图： 图5.1组培生产车间的设计
菊苣(Cichorium intybus L.)菊科菊苣属多年生草本植物。根肉质、短粗；茎直立，有棱，中空，多分枝；叶互生，长倒披针形；头状花序，花冠舌状，花色青蓝。 菊苣为药食两用植物，叶可调制生菜，根含菊糖及芳香族物质，可提制代用咖啡，促进人体 消化器官活动；其地上部分及根可供药用，中药名分别为菊苣、菊苣根，具有清热解毒，利 尿消肿，健胃等功效。 该植物耐寒，耐旱，喜生于阳光充足的田边、山坡等地，具有较强的固土护坡与水土保持作用。为此，艾比蒂繁育大量菊苣组培苗，为大面积的沙漠和退化、沙化土地提供帮助。 菊苣の快繁技术 材料准备 菊苣的种子为外殖体 培养条件 初代培养基 MS+BA0.5-1.0mg/L+IBA0.05-0.1 mg/L 愈伤组织诱导分化培养基
MS+BA1.0-1.5mg/L+IBA0.05-0.1 mg/L 生根培养基 1/2MS+NAA0.05-1.0 mg/L 以上培养基中加入2-3%的蔗糖和0.7%琼脂，pH 5.8-6.8，培养温度为25±2℃，光照时间12 h，光照强度为1000-2000LX。 生长与分化情况 (1) 初代培养：挑选野生菊苣结实饱满的成熟种子，用纱布包好，在超净工作台内，用75% 乙醇消毒30s，再用0.1%的氯化汞浸泡3-5分钟，无菌水冲洗3-5次，种子用滤纸吸干，置 于初代培养基上培养。15-20天，菊苣种子萌发生长2cm左右，切取0.5cm左右的叶片接种 于诱导分化的培养基上。 (2) 愈伤组织诱导分化培养：15-20天叶片分化为疏松的愈伤组织，有绿点凸起的愈伤组织逐 渐长出了小芽。芽生长较快，20天左右长成2-3cm的植株。 (3)生根培养：挑选3-4cm生长健壮的植株转接入生根培养基上，培养10天左右就有根的发生，根生长较快，须根较多。