A549
肺腺癌细胞
U87
人脑胶质瘤细胞
kasumi-1
急性骨髓细胞白血病细胞系
Jurkat
人急性T淋巴细胞白血病细胞系
K562
人慢性髓系白血病细胞
SW480
人结肠癌细胞
PC-3
人前列腺癌细胞
MCF-7
人乳腺癌细胞系
Hepg2
人肝癌细胞
H9
T淋巴癌细胞
Hela
人宫颈癌细胞
THP-1
单核细胞白血病
SK-OV-3
人卵巢腺癌细胞
人教版高一生物下册《细胞的癌变》知识点 总结 一、癌细胞的概念：有的细胞受到致癌因子的作用，细胞中遗传物质发生变化，就变成不受机体控制的、连续进行分裂的恶性增殖细胞。 二、癌细胞的特征 (1)在适宜的条件下，癌细胞能够无限增殖体细胞能分裂 50-60 次 (2)癌细胞的形态结构发生显著变化癌变后球形的成纤维细胞癌细胞的分散和转移示意图癌症为什么难治? 由于细胞膜上的糖蛋白等物质减少，使得癌细胞彼此之间的黏着性显著降低，容易在体内扩散和转移 (3)癌细胞的表面发生变化 三、细胞癌变的原因 (1) 物理致癌因子： 辐射(紫外线、X射线、电离辐射等) 1、致癌因子 日本广岛、长崎在第二次世界大战时受原子弹的影响。幸存的居民皮肤癌、白血病发生率明显增加。 切尔诺贝利核电站核泄漏，诱发众多白血病患者。图为
悲惨的受害者居里夫人在研究工作中长期被放射性射线损伤，导致白血病 (2) 化学致癌因子： 无机物- 如石棉、砷化物、铬化物、镉化物等; 有机物- 如黄曲霉素、亚硝胺、尼古丁、甲醛、苯、联 苯胺、煤焦油、苯并芘等 (3) 病毒致癌因子：感染人的细胞，将其基因整合进入人的基因组，诱发癌变 如：感染乙肝病毒可诱发肝癌; 感染人乳头状病毒可诱发宫颈癌; EB 病毒是一种疱疹病毒，使儿童患淋巴癌、成人患鼻咽 癌。 2、内因遗传因素 抑制细胞不正常的增殖。 负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的进程。A. 原 癌基因 B. 抑癌基因 肿瘤细胞正常细胞为什么会转化成癌细胞?癌细胞正常 细胞原癌基因 抑癌基因突变突变癌基因失去抑制作用不能控制 （致癌因子的作用）不受控制，恶性增殖 四、癌症的预防
癌细胞的十大特征 2000年，Douglas Hanahan和Robert A. Weinberg在Cell上发表文章：The Hallmarks of Cancer，这篇综述性文章介绍了肿瘤细胞的六大基本特征：自给自足生长信号；抗生长信号的不敏感；抵抗细胞死亡；潜力无限的复制能力；持续的血管生成；组织浸润和转移。这篇论文被称为肿瘤学研究的经典论文，到目前为止，已经被引用了上万次。 在2011年3月出版的Cell杂志上，两位教授又发表了一篇升级版综述：Hallmarks of Cancer: The Next Generation，这篇论文长达29页，简述了最近10年肿瘤学中的热点和进展，在原有的六大特征的基础上，新增了四大特征，包括避免免疫摧毁、促进肿瘤的炎症、细胞能量异常和基因组不稳定和突变。
将原有的肿瘤细胞六大特征扩增到了十个，这十个特征分别是： 1.自给自足生长信号（Self-Sufficiency in Growth Signals）， 2.抗生长信号的不敏感（Insensitivity to Antigrowth Signals）， 3.抵抗细胞死亡(Resisting Cell Death)， 4.潜力无限的复制能力(Limitless Replicative Potential)， 5.持续的血管生成(Sustained Angiogenesis)， 6.组织浸润和转移(Tissue Invasion and Metastasis)， 7.避免免疫摧毁(Avoiding Immune Destruction)， 8.促进肿瘤的炎症（Tumor Promotion Inflammation），
癌细胞的十大特征 癌细胞十大特征释义 众所周知，癌细胞几乎肆虐横行在人体的每一个部位，从大脑到各个器官，从表皮到骨骼，我们曾经在进化中得到的、在生物界引以为豪的人体，在癌细胞肆虐下往往显得那么脆弱，有时似乎变得不堪一击。 癌细胞并非入侵的外族，它们与组成人体各个器官的正常细胞同文同种，但不同的是癌细 胞基因结构和功能的变化赋予了它们十种特殊“器物”，从而使得它们能够在人体内纵横 捭阖，所向披靡。 1.自给自足生长信号（Self-Sufficiency in Growth Signals）， 2.抗生长信号的不敏感（Insensitivity to Antigrowth Signals）， 3.抵抗细胞死亡(Resisting Cell Death)， 4.潜力无限的复制能力(Limitless Replicative Potential)， 5.持续的血管生成(Sustained Angiogenesis)， 6.组织浸润和转移(Tissue Invasion and Metastasis)， 7.避免免疫摧毁(Avoiding Immune Destruction)， 8.促进肿瘤的炎症（Tumor Promotion Inflammation）， 9.细胞能量异常（Deregulating Cellular Energetics）， 10.基因组不稳定和突变（Genome Instability and Mutation） 其一：生长信号的自给自足 在人体这个迄今为止最为复杂的系统中，倘若一个细胞想要改变其现有状态（如从静止到 生长分化状态的改变），必须接收到一系列相关指令，这一过程才能进行，就像军队中的 令行禁止一样。就这样，数以万亿计的细胞各司其职，在和谐统一的秩序中维系着人体的 健康。到目前为止，科学家在正常细胞中还没有发现一例例外。 这些改变细胞状态的指令，生物学上称之为信号分子，它们多是外源的，即由另一类细胞 产生，这也是人体保持自我平衡的重要机制。信号分子通过与靶细胞上相应指令接收器 （受体）相结合，细胞状态改变这一过程得以实施。 在这方面，癌细胞是截然不同的，它们通过种种“奇巧淫技”把自己对外源生长信号的依 赖降到了最低限度。首先癌细胞们获得自己发号施令的能力，也就是说它们可以自行其是 的合成生长分化所需的生长信号，无需依赖外源性信号。比如科学家们发现在神经胶母细 胞瘤和恶性肉瘤中的癌细胞就分别获得了合成PDGF（血小板源生长因子）和TGFα（肿瘤 生长因子α）的能力。其次癌细胞还会大量表达其表面的信号接收器，这样就可以富集周 围微环境中的生长信号从而进入生长分化状态（注：正常情况下，未经富集浓度的生长信 号不足以触发生长分化）。此外癌细胞还会改造它周围的一些正常细胞成为生长信号的生 产工厂供其使用，并招募一些帮凶细胞，如成纤维细胞和内皮细胞来帮助它们生长分化。 其二：对抑制生长信号不敏感 平衡似乎是人体系统中最重要的关键词。人体内除了有生长信号外，还存在着生长抑制信号。在细胞分裂的不同阶段，都有一些分子如同看家护院的“爱犬”一般时刻检测这些细 胞的“身体状况”和周边环境，根据情况来决定细胞的未来的命运：或是继续生长分化， 或是仍然处于静止期，抑或丧失生长分化能力进入有丝分裂的后期。这样正常细胞才能保 持动态平衡的状态，进行有序的生长分化。对于癌细胞来说，如果想要扩大自己的地盘， 不断地生长分化，必须逃避这些“爱犬”分子的监控。他们主要策略就是通过基因突变使 得这些“爱犬”分子失去活性，从而实现对抑制生长信号不敏感的目的。 其三：规避细胞凋亡 逃避细胞凋亡几乎是所有类型的癌细胞都具有的能力。负责细胞凋亡的信号分子大体上可 以分为两类：一类如同上文所述的“爱犬”分子，如一种名叫p53的蛋白就是其中最重要 的成员之一；另一类则负责执行细胞凋亡。前者监控细胞内外环境，一旦发现不正常情况 足以触发细胞凋亡，即指挥后者执行。目前科学研究证实，DNA损伤，信号分子的失衡以 及机体缺氧都有可能触发细胞凋亡。
血细胞形态特征和常见血液病的血液学特征 第一节血细胞的生成、发育规律及正常形态学特征 一、血细胞的生成： （一）红细胞系统（红系） 多能干细胞髓系干细胞红系祖细胞 原红早幼红中幼红晚幼红网织红红细胞 分裂次数 1次 1次 2次无 故一个原红可生成16个红细胞。 （二）粒细胞系统（粒系） 多能干细胞髓系干细胞粒单系祖细胞粒系祖细胞 原粒早幼粒中幼粒（三种）晚幼粒杆状核粒细胞分叶核粒细胞分裂次数 1次 1次 2-3次无 故一个原粒可生成16个以上成熟粒细胞。 （三）单核细胞系统 多能干细胞-------------单核细胞 -------进入组织成为组织细胞---------抗原刺激成为巨噬细胞。 （四）淋巴浆细胞系统 全能干细胞淋系干细胞淋系祖细胞（B）原始淋巴（B）幼稚淋巴细胞（B）淋巴细胞（B）原始浆细胞幼稚浆细胞浆细胞 （五）巨核细胞系统 多能干细胞---------------产板巨------裸核、血小板 二、各期细胞正常形态学特征 【红细胞系统】 （一）各期红细胞的形态特点 1．原始红细胞（pronormoblast）： 胞体：直径15~20μm、圆形或椭圆型，边缘常有钝角状或瘤状突起。 胞核：圆形、居中或偏于一旁，约占细胞直径的4/5，核染色质呈颗粒状，比原始粒红细胞粗而密，核仁1-2个，大小不一，染浅蓝色。 胞质：量少，深蓝色，不透明，有油画蓝感，在核周围常形成淡蓝区。 2. 早幼红细胞（eary normoblast） 胞体：直径10-18μm、圆形或椭圆型。 胞核：圆形或椭圆型，占细胞2/3以上，居中或稍偏位，核染色质可浓集成粗密小块，较原红细胞粗糙，核仁模糊或消失。 胞质：量多，染不透明蓝或深蓝色，仍可见瘤状突起及核周淡蓝区。
第6章肿瘤细胞的培养 肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药的敏感性、肿瘤细胞和癌分子生物学特性的重要手段。癌细胞是比较容易培养的细胞，当前所建立的细胞系中癌细胞是最多的。应用体外细胞培养技术进行肿瘤研究具有许多优点： (1)可免受机体内环境因素的影响，避免了个体差异性，便于探索各种物理、化和生物 因素对肿瘤细胞生命活动的影响。 (2)既便于从细胞水平上研究肿瘤细胞的结构与功能，又便于从基因及分子水平上研究 癌变的发生机理； (3)可长期传代、保存，便于观察肿瘤细胞生物学特性和遗传行为的改变。 (4)可用于快速筛选抗癌药物和研究耐药机理。 (5)研究周期短，比较经济。 但是它也有缺点，如长期培养可使细胞生物学特性发生改变；体外实验所得的结果不能完全代表体内的情况，应与体内试验结合研究更为合理等。 一、肿瘤细胞培养的生物学特性 1、形态和性状 形态不规则，细胞界限清晰，伸展较差，核膜、核仁轮廓明显，核仁多、核浆丰富。折光性强，电镜观察细胞表面微绒毛多而细密，与肿瘤细胞具不定向运动和铺着不依赖性有关。 2、生物特性 癌细胞在无血清或低血清(2%～5%)时仍能生长，营养要求不高，因能自分泌促增殖因子，在软琼脂培养时单个细胞能形成集落，生长方向性消失，再加上失去了接触抑制，癌细胞数量增多时可呈多层重叠生长，细胞饱和密度大，有丰富的三极有丝分裂，分裂指数高，细胞倍增周期短。 3、永生性 永生性也称不死性，在体外培养中表现为可无限制传代而不凋亡(Apoptosis)，体外培养的肿瘤细胞系(株)都表现有这种特性。但体外培养的永生性和体内肿瘤的恶性(包括侵润性)是两种性状，受不同基因调控的，因恶性肿瘤多数在体外培养时并不那么容易获得成功，生长增殖能力并不旺盛，有时只能传若干代，说明体外培养的永生性可在体外培养后获得的。另外，体外培养的许多细胞系，如NIH3T3、Rat-1 10T1/2等均具有永生性而无恶性。但两者有相关性，永生性可能是细胞恶性变的某一阶段。 4、侵润性 侵润性是肿瘤细胞扩张性增殖行为，体外培养的肿瘤细胞仍保持有这种特性，当与正常组织混合培养时，能侵润入其他正常组织中，甚至能穿透人工隔膜。 5、异质性 所有肿瘤细胞都是由增殖能力、遗传性、起源、周期状态等性状不同的细胞组成，属于异质性，其中有的衰老、退化，有的处于周期阻滞状态，只有那些处于活跃增殖的肿瘤干细胞才是支持肿瘤生长的成分，肿瘤干细胞易于生长增殖，分离培养干细胞的方法称干细胞培养(有干细胞系和数个亚系组成)。
CELL综述: 肿瘤新十大特征 Hallmarks of Cancer: The Next Generation 2011年3月4号，Douglas Hanahan和Robert A. Weinberg在《Cell》发表综述，题目为：Hallmarks of Cancer: The Next Generation。整个综述29页，简述了最近10年肿瘤学中的热点和进展（例如细胞自噬、肿瘤干细胞、肿瘤微环境等），并且将过去的6个特征扩增到10个特征，新增加的4个特征为： 避免免疫摧毁(Avoiding Immune Destruction); 促进肿瘤的炎症（Tumor Promotion Inflammation）; 细胞能量异常（Deregulating Cellular Energetics）; 基因组不稳定和突变（Genome Instability and Mutation）。 并且将过去的回避凋亡(Evading Apoptosis)，调整为抵抗细胞死亡(Resisting Cell Death)。 背景介绍 我们已经提出了总共6种肿瘤标志，组成了一个基本原理，它提供了一个理解肿瘤性疾病显著差异的逻辑网络(Hanahan and Weinberg, 2000)。我们的讨论中包含了这样的概念，肿瘤细胞逐渐进展成新生物，它们获得一系列标志性能力，而人类肿瘤形成的多步骤的过程可以用初始癌细胞获得使它们成为肿瘤并最终表现出恶性肿瘤的特征。 我们注意到由于附属结构的存在，肿瘤不只是癌细胞组成的岛状物。它们是由多种不同类型的细胞组成的复合物，这些细胞之间存在异质的相互作用。我们是这样描述招募来的正常细胞，它们以主要参与者的身份形成肿瘤相关基质，而不是作为旁观者；这样的话，这些间质细胞对于特定能力标志的发展和表达是有贡献的。在接下来的十
低倍镜，增生活跃或明显活跃 (图一) 40倍，可见各阶段幼稚粒、有核红，粒系有核 左移，有的中性中幼粒有核浆发育不平衡；幼红细胞体积偏小，偏蓝 (图二) 100倍，幼红细胞胞体偏小，胞浆偏碱 外周血，成熟红细胞体积小，中心浅染去扩大 (图三) (图四) 低倍镜，增生活跃，细胞胞体偏大 (图五) 低倍镜，增生活跃，细胞胞体偏大 (图五) 40倍，可见各阶段巨幼红细胞 (图六)
高倍镜，杆状核巨型变(图七) 中巨幼红(图八) 大红细胞及H-J小体（100倍）(图九) 过分叶核粒细胞(图十) 低倍镜，增生明显活跃(图十一) 高倍镜，红系明显增生，中晚幼红为主， 成熟红细胞多嗜性(图十二)
低倍镜：成人CAA，髂骨：增生减低，高倍镜骨髓小粒：组织嗜碱细胞， 油滴较多，小粒空虚，细胞面积约20％浆细胞，网状细胞 (图十三) (图十四) 儿童（CAA)髂骨涂片，增生活跃（-）粒系晚幼一下阶段为主，炭核红，巨核巨核少见(图十五) 少（40倍）(图十六) 儿童SAA（胸骨）(图十七) 破骨细胞(图十八)
(图十九) (图二十) 核间桥（细胞内）(图二十一) 三核红(图二十二) 假性Pelge-Huet畸形(图二十三) 环形核(图二十四)
免疫酶标(图二十五) 环状铁粒幼红细胞(图二十六) 增生极度活跃 CML (图二十七) BM:以中心中晚幼粒为主，嗜酸， 嗜碱粒易见(图二十八) CML(PB) (图二十九) PV 增生活跃(图三十)
成熟红细胞堆积排列(图三十一)外周血可见泪滴红(图三十二) ET外周血，血小板大片状分布(图三十三) ET 骨髓成熟产板巨核，(图三十四) 幼稚浆细胞细胞形态(图三十五)
外周血细胞形态检验 1.外周血涂片检查步骤： （1）肉眼观察：涂片面膜大小、厚薄是否适中，染色好坏。（2）低倍镜观察全貌： ①涂片及染色好坏； ②了解白细胞数（可大体校对WBC直接计数是否正确）； ③了解白细胞大致分布及其各阶段大致比例，特别要注意由于涂片过力，把WBC及成熟粒细胞大多推于片尾部位，造成分类比值误差。片尾有无异常细胞。 ④选择具有代表性的细胞镜检区域。 （3）油镜观察：进行WBC分类计数，观察细胞形态、比例、有无巨大或异常细胞。 ①血涂片对WBC总数准确性估计：从低倍及油镜中估计WBC数及其分布。医|学教育网搜集整理一般区分WBC数几个等级（油镜视野中WBC密度、分散无重叠）。参见WBC形态诊断技巧节段。 ②白细胞分类计数：血中主要两大比例的中性成熟粒细胞与淋巴细胞及其他小比例细胞是否属正常范围及形态有 无异常。
③注意片尾端有无巨大或出现不成熟或异常细胞（如中晚幼粒、中晚幼红细胞、异常淋巴细胞、吞噬细胞、肿瘤细胞等）。 ④红细胞形态（群体、个体）、排列（重叠、缗钱状）。 ⑤血小板数量、形态及聚集性。⑥寄生虫。 ●注意事项 1．血膜呈舌状，头、体、尾分明 2.空气中晃动，尽快干燥；37℃恒温箱中促干 3．涂片的厚薄、长度与血滴大小（10~20μl）与血片质量4．1h内染色或在1h内甲醇固定 5.正确清洁玻片 6．抗凝血或毛细血管血涂片；EDTA能阻止PLT聚集 7．抗凝血液4h内涂片，先在低倍镜下浏览全片，了解染色好坏和细胞分布情况，观察有无异常细胞。选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。 8.分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛 状迂回移动，计数使不能重复和遗漏。
2011年3月4号，发表在《Cell》上的一篇综述， Hallmarks of Cancer: The Next Generation [Abstract] The hallmarks of cancer comprise six biological capabilities acquired during the multistep development of human tumors. The hallmarks constitute an organizing principle for rationalizing the complexities of neoplastic disease. They include sustaining proliferative signaling, evading growth suppressors, resisting cell death, enabling replicative immortality, inducing angiogenesis, and activating invasion and metastasis. Underlying these hallmarks are genome instability, which generates the genetic diversity that expedites their acquisition, and inflammation, which fosters multiple hallmark functions. Conceptual progress in the last decade has added two emerging hallmarks of potential generality to this list—reprogramming of energy metabolism and evading immune destruction. In addition to cancer cells, tumors exhibit another dimension of complexity: they contain a repertoire of recruited, ostensibly normal cells that contribute to the acquisition of hallmark traits by creating the ‘‘tumor microenvironment.’’ Recognition of the widespread applicability of these concepts will increasingly affect the development of new means to treat human cancer. 译文：癌症的特征：代代相传 摘要：癌症的特征由六大经过了很久的人类肿瘤发展史的生物功能构成，这个特征构成了一个使错综复杂的肿瘤疾病合理化的组织原理。它包括维持增生的信号、躲避生长抑制器、抑制细胞死亡、使细胞能不断地繁殖，血管生成，保持侵袭细胞和转移肿瘤位置。这些潜在的特性是基因组产生有助于其细胞的生存和炎症的基因的多样性的不稳定性，这种不稳定性造就了多种多样的特性功能。在过去的十年里，概念的发展有助于显现潜在的概论对于这个清单目录：能量新陈代谢的重组和防止免疫坏死。对于癌症细胞，肿瘤表现出另外一个复杂的方面，它们包含全面的吸收，表面上正常的细胞贡献于创造了肿瘤生长环境的特性。认识到这种观念的广泛可适用性将日益的治疗人类癌症的新方法的发展。 下图单词注释：EGFR inhibitors 因子蒙体克制剂 Cyclin-dependent kinase inhibitors 细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂 Immume activating anti-CTLA4 mAb 免除激活anti-CTLA4 mAb Telomerase inhibitors 端粒酶抑制剂 Selective anti-inflammatory drugs 选择性抗炎药物 Inhibitors HGF/c-Met 抑制剂/ c-Met特性 Inhibitors of VEGF signaling VEGF抑制剂的信号 PARP inhibitors PARP抑制剂 Proapoptotic BH3 mimetics Proapoptotic BH3限食拟药 Aerobic glycolysis inhibitors 有氧糖酵解作用抑制剂 备注: Proapoptotic大概意思为凋亡proapoptotic protein凋亡前体蛋白 十大特性单词在文中都有，翻译为译文中的绿色字体 本文档只是个人翻译非标准仅供参考
正常血细胞形态观察 实验准备 一．器材： 载玻片 盖玻片： 滴管：4个 橡皮吸头：4个 玻璃棒：4根 烧杯：1000 ml，2个 量筒：100ml、500 ml、1000 ml各一 蜡笔 棕色小口瓶 碾钵 载玻片处理：一般将载玻片先用洗衣粉水溶液煮沸20分钟，用流水冲洗，再经清洁液浸泡过夜，用流水反复冲洗，最后入95%酒精浸泡约1小时。取出，以洁净布巾夹持玻片边缘擦干备用。 二．试剂： 瑞氏染液240ml 瑞氏染料粉剂 0.1g 纯甲醇（AR） 60ml 将粉剂放入洁净干燥碾钵内，先加少量甲醇研磨使染料溶解，
然后将已溶解的染料倒入洁净的棕色玻璃瓶内，剩下未溶解的再加入少量甲醇研磨，如此反复，直至染料完全溶解为止。新配制的染液需密封保存，室温放置1周后才能使用。染料存放越久，染色效果越好。 磷酸盐缓冲液 1%KH2PO4 30ml 1%Na2HPO4 20ml 加蒸馏水至800 ml，调PH值到6.5~7.0，定容至1000ml。 甲醇 二甲苯 实验步骤 一．涂片 （一）血液涂片的制作 （1）需载玻片2张，分别称为玻片1和玻片2（推片）。 （2）用玻片1一端接约3mm直径的血滴，将此玻片1保持水平。（3）取另一边缘平整的载玻片2（推片），将其前端放在血滴前，与片1保持30°角并稍向后移与血滴接触，即见血液沿片2（推片）下缘散开，使血液展开并充满整个推片的宽度。 （4）立刻将推片与载玻片呈30°角，边轻压推片边将血液按下图的箭头方向推动涂抹，至血液铺完血膜为止。 （5）挥动片1使血膜吹干，用蜡笔将血膜边缘圈画备染色。
（6）每只动物涂片一张。 （7）一张良好的血片，要求厚薄适宜，头、体、尾分明。 （8）置30min～1hr后较利于观察红细胞的形态。 注意事项： ●如标本本身太短，可观察的部分会受局限，故以在离开载玻片 另一端2cm地方涂抹为宜。 ●载玻片、推片的角度越小、血液越薄；涂抹速度越慢、也越薄。 在涂抹贫血病人的血液时，将推片稍竖起（不是30°而是35°～40°左右），以较快的速度推比较好，而对红细胞增高的病人则相反。 ●如用力过猛白细胞容易破损。 二．染色 （一）血液涂片的染色 （1）将待染涂片平放于染色架上。 （2）用滴管将染液滴于涂片上，覆盖整张涂片，放置1～3分钟。 （3）加入等量的磷酸缓冲液或蒸馏水，与染液混匀，可以用滴管从一端吸入，另一端放出，混匀为止，或用嘴来回轻轻
Cell：肿瘤细胞的十大特征 2000年，Douglas Hanahan和Robert A. Weinberg在Cell上发表文章：The Hallmarks of Cancer，这篇综述性文章介绍了肿瘤细胞的六大基本特征，被称为肿瘤学研究的经典论文，到目前为止，这篇论文已经被引用了上万次。 在近期，3月新出版的Cell杂志上，Weinberg教授又发表了一篇升级版综述：Hallmarks of Cancer: The Next Generation，这篇同样也是与Douglas Hanahan合作的论文长达29页，简述了最近10年肿瘤学中的热点和进展，包括细胞自噬、肿瘤干细胞、肿瘤微环境等等，并且将原有的肿瘤细胞六大特征扩增到了十个，这十个特征分别是： 自给自足生长信号（Self-Sufficiency in Growth Signals）；抗生长信号的不敏感（Insensitivity to Antigrowth Signals）；抵抗细胞死亡(Resisting Cell Death)；潜力无限的复制能力(Limitless Replicative Potential)；持续的血管生成(Sustained Angiogenesis)；组织浸润和转移(Tissue Invasion and Metastasis)；避免免疫摧毁(Avoiding Immune Destruction)；促进肿瘤的炎症（Tumor Promotion Inflammation）；细胞能量异常（Deregulating Cellular Energetics）；基因组不稳定和突变（Genome Instability and Mutation）。 Robert A.Weinberg：美国科学院院士，世界着名的Whitehead研究所创始人之一，他曾发现了第一个人类癌基因Ras和第一个抑癌基因Rb，他的一系列杰出研究工作已经成为肿瘤研究领域乃至整个医学生物学领域的重要里程碑。
实验三放线菌形态及菌落特征的观察 一、目的要求 掌握观察放线菌形态的基本方法，并观察放线菌的形态特征。 二、基本原理 和细菌的单染色一样，放线菌也可用石炭酸复红或碱性美蓝等染料着色后，在显微镜下观察其形态。放线菌的孢子丝形状和孢子排列情况是放线菌分类的重要依据，为了不打乱孢子的排列情况，常用印片染色法和胶带纸粘菌染色法进行制片观察。 放线菌是由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基表面的气生菌丝。有些气生菌丝分化成各种孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆形或杆形。气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。三、器材 1.活材料：放线菌培养物，酵母菌斜面培养物； 2.染色液：复红染色液（或结晶紫，美兰）； 3.器材：载玻片，胶带纸，小刀，接种环，吸水纸，擦镜纸，酒精灯，香柏油，乙醚-乙醇混合液，显微镜。 四、操作步骤 1．印片法：放线菌自然生长状态的观察 印片：取干净载玻片一块，用小刀切取放线菌培养体一块，放在载玻片上，用另一块载玻片对准菌块的气生菌丝轻轻按压，然后将载玻片垂直拿起。注意不要使培养体在玻片上滑动，否则会打乱孢子丝的自然形态； 微热固定：将印有放线菌的涂面朝上，通过酒精灯火焰2-3次加热固定；染色:石炭酸复红染色1min； 水洗：水洗后晾干； 镜检：先用低倍镜后用高倍镜，最后用油镜观察孢子丝、孢子的形态及孢子排列情况。 2．胶带纸法 粘菌：用胶带纸在放线菌培养体上粘取菌体，注意，压取时从菌落边顺着菌体生长方向，避免从菌落上面压取，以免取得的全是孢子。 染色：将粘有菌体的胶带纸压在事先准备好的滴油染液的载玻片上。将多余染色液用滤纸吸掉。 镜检：同上。 五、实验报告 绘图说明你所观察到的放线菌的形态特征。
试述各种血细胞形态结构及功能? 1、红细胞：成熟的红细胞呈双面微凹的圆盘状，直径约7.5um，无细胞核及细胞器。细胞质内含有大量淡红色的血红蛋白，肯有运输氧及二氧化碳的功能。 2、白细胞：在血液中呈球形，又分为两类：细胞质内有特殊颗粒的称有粒白细胞；无特殊颗粒的称无粒白细胞。 （1）有粒白细胞：根据其所含特殊颗粒的嗜色性，又可分为中性粒细胞，嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。 1）中性粒细胞：直径10～12um，细胞核多数分为2～5叶，核叶之间有细丝相连；也有少数细胞核呈腊肠形，称为杆状核。细胞核分叶少或不分叶的是比较幼稚的细胞；分叶较多的是比较衰老的细胞。细胞质内有染成淡紫红色的颗粒、颗粒较小，分布均匀。颗粒至少可分为两类：一类是特殊颗粒，数量较多，有杀菌的作用；另一类是嗜天青颗粒，数量较少，能消化细胞所吞噬的异物。中性粒细胞肯有变形运动和吞噬异物的能力，在体内起重要的防御作用。 2）嗜酸性粒细胞：直径10～15um，细胞核多数分为两叶。细胞质内含有嗜酸性颗粒，颗粒较大，大小均匀，染成橘红色。嗜酸性粒细胞能吞噬抗原抗体复合物。 3）嗜碱性颗粒：直径10～11um，细胞核呈S形或不规则形，染色较淡。细胞质内含有嗜碱性颗粒，颗粒的大小不一，分布不均，染成紫蓝色。颗粒中含有肝素、组胺和慢反应物质等。（2）无粒白细胞：包括淋巴细胞与单核细胞。 1）淋巴细胞：呈圆形或椭圆形，大小颇不一致，直径6～16um。细胞核呈圆形或椭圆形。细胞核相对较大，染成深蓝色。细胞质很少，染成天蓝色。还可根据细胞膜的表面结构和免疫功能等方面的差别，在光镜下形态基本一致的淋巴细胞，还可分为T淋巴细胞和B淋巴细胞等数种。T淋巴细胞能识别、攻击和杀灭异体细胞、肿瘤细胞、感染病毒的细胞等；B淋巴细胞能转化为浆细胞，产生抗体。 2）单核细胞：是血液中最大的细胞，直径14～20um。单核细胞呈圆形或椭圆形。细胞核呈肾形，蹄铁形或不规则形，染色浅淡。细胞质较多，染成淡灰蓝色。单核细胞具有活跃的变形运动和一定的吞噬能力。单核细胞在血液中存在的时间较短，即进入结缔组织，转化成巨噬细胞。3、血小板：呈双面微凸的圆盘状，直径2～4um，在血液涂片标本中，血小板多成群分布在血细胞之间，其外形不规则，中央部染成紫红色，周围部染成浅蓝色。血小板在凝血过程中有重要作用。
肺癌组织和肿瘤细胞系中ＢＲＧ1的表达分析 摘要：BRGJ(brahma-related gene 1)是进化上高度保守的SWI／SNF染色质重塑复合物的成员之一，研究表明：BRGI具有抑瘤基因的特征，可能与肿瘤的发生发展有关,我们采用RT—PCR、NortherR杂交和Westemblotting证实：肺腺癌细胞系A549和鼻咽癌细胞系HNE2、HNE3、CNE1中无BRG1的表达，而肺鳞癌细胞系NCI—H520、永生化正常人支气管上皮细胞系HBE和鼻咽癌细胞系HONE1、HNE1、CNE2中有BRGJ的表达，同时，通过RT—PCR检测10例肺癌组织标本，发现60％(6/10)的肺癌组织中日BRG1的mRNA水平明显下调，而配对正常肺组织中BRG1，的mRNA表达未见改变,对29例肺癌组织和10例配对正常肺组织切片进行免疫组化染色，结果显示：肺癌组织中BRG1蛋白表达的阳性率为37.9％(11/29)，配对正常肺组织中BRG1蛋白表达的阳性率为90％(9/10)，两者的差异有显著性(P＜0.05)，这提示BRG1确实在肺癌组织及多种肿瘤细胞系中表达下调或缺失，在肺癌发病过程中可能起一定的作用。 关键词：BRG1；表达；肺癌；肿瘤细胞系 肺癌是目前全球发病率最高的恶性肿瘤，严重威胁人类的健康和生命,近年来我国肺癌的发病率和死亡率迅速上升，有人预计中国将成为21世纪的肺癌大国，肺癌一般分为4种主要的组织学类型：鳞癌、腺癌、大细胞癌和小细胞癌，前三者统称为非小细胞肺癌(NSCLC)，约占肺癌总数的75％，后者称小细胞肺癌(SCLC)，约占25％，肺癌的发生发展是一个多因素、多步骤的复杂过程，其中瘤基因和抑瘤基因发挥着至关重要的作用，已有研究显示，肺癌在临床前期就有大约10个分子事件，包括瘤基因myc、K-ras、EGFR、Her-2/neu、Bcl-2的激活与抑瘤基因p53、Rb、FHIT、p16的失活等，但这些基因在多种肿瘤中都普遍存在改变，还不足以完全解释肺癌发生发展的机制，因此有必要继续寻找和鉴定新的肺癌相关基因。 Girard等利用399个微卫星标记对肺癌细胞系及组织标本进行全基因组等位基因分析(allelotyping)，发现NSCLC中19p13区域存在高频率的杂合性丢失(LOH)，已知定位于19p13.3的抑瘤基因LKB1/STK11，在约30％-50％有19p LOH 的肺腺癌中失活，但定位于该区域的其他基因仍可能是肺癌的候选抑瘤基因，因为LKB1/STK11的突变目前只发现于肺腺癌中，而占NSCLC大多数的鳞癌中并未检测到LKB1/STK11的突变。 BRGl是1993年Khavari等利用果蝇的Brm(Brahma)DNA片段为探针，筛选Hela细胞cDNA文库而分离得到的一个人类基因，属于进化上高度保守的SWI/SNF染色质重塑复合物的成员之一，它由35个外显子和34个内含子组成，其转录本的大小约为5kh.BRG1蛋白由1613个氨基酸组成，共有4个结构域：I 脯氨酸富集区、Ⅱ电荷富集区、Ⅲ依赖DNA的ATP酶区、IV溴化区，其相对分子质量为205kD，是一种磷酸化核蛋白，主要以ATP依赖的方式通过破坏组氨酸一DNA的接触而调节基因的表达，通过放射杂交图谱分析，已将BRGl定位于19p13，
低倍镜，增生活跃或明显活跃(图一) 40倍，可见各阶段幼稚粒、有核红，粒系有核 左移，有的中性中幼粒有核浆发育不平衡；幼 红细胞体积偏小，偏蓝(图二) 100倍，幼红细胞胞体偏小，胞浆偏碱外周血，成熟红细胞体积小，中心浅染去扩大(图三) (图四) 低倍镜，增生活跃，细胞胞体偏大(图五) 低倍镜，增生活跃，细胞胞体偏大(图五) 40倍，可见各阶段巨幼红细胞(图六)
高倍镜，杆状核巨型变(图七) 中巨幼红(图八) 大红细胞及H-J小体（100倍）(图九) 过分叶核粒细胞(图十) 低倍镜，增生明显活跃(图十一) 高倍镜，红系明显增生，中晚幼红为主， 成熟红细胞多嗜性(图十二)
低倍镜：成人CAA，髂骨：增生减低，高倍镜骨髓小粒：组织嗜碱细胞， 油滴较多，小粒空虚，细胞面积约20％浆细胞，网状细胞 (图十三) (图十四) 儿童（CAA)髂骨涂片，增生活跃（-）粒系晚幼一下阶段为主，炭核红，巨核巨核少见(图十五) 少（40倍）(图十六) 儿童SAA（胸骨）(图十七) 破骨细胞(图十八)
(图十九) (图二十) 核间桥（细胞内）(图二十一) 三核红(图二十二) 假性Pelge-Huet畸形(图二十三) 环形核(图二十四)
免疫酶标(图二十五) 环状铁粒幼红细胞(图二十六) 增生极度活跃 CML (图二十七) BM:以中心中晚幼粒为主，嗜酸， 嗜碱粒易见(图二十八) CML(PB) (图二十九) PV 增生活跃(图三十)
成熟红细胞堆积排列(图三十一)外周血可见泪滴红(图三十二) ET外周血，血小板大片状分布(图三十三) ET 骨髓成熟产板巨核，(图三十四) 幼稚浆细胞细胞形态(图三十五)
实验四酵母菌形态及菌落特征的观察 一、目的要求 1．观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。 2．观察酵母菌的菌落特征。 3. 学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。 二、基本原理 酵母菌是多形的、不运动的单细胞微生物，细胞核与细胞质已有明显的分化，菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂，无性繁殖主要是出芽生殖，仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色制成水浸片，和水-碘水浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。美蓝是一种无毒性染料，它的氧化型是蓝色的，而还原型是无色的，用它来对酵母的活细胞进行染色，由于细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型，所以酵母的活细胞无色，而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们无此还原能力或还原能力极弱，而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此，用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态，还可以区分死、活细胞。但美蓝的浓度、作用时间等均有影响，应加注意。 三、器材 1.活材料：酿酒酵母（Saccharomyces calsbergensis）2-3d培养物； 2.染液：吕氏碱性美蓝染液 3.器材：显微镜，载玻片，盖玻片等。 四、操作步骤 1．酵母菌落形态观察并记录。 2.美蓝浸片观察 (1)在载玻片中央加一滴碱性美蓝染液，液滴不可过多或过少，以免盖上盖玻片时，溢出或留有气泡。然后按无菌操作法取斜面上培养2-3d的酿酒酵母少许，放在碱性美蓝染液中，使菌体与染液均匀混合。 (2)取盖玻片一块，小心地盖在液滴上。盖片时应注意，不能将盖玻片平放下去，应先将盖玻片的一边与液滴接触，然后将整个盖玻片慢慢放下，这样可以避免产生气泡。 (3)将制好的水浸片放置3分钟后镜检。先用低倍镜观察，然后换用高倍镜观察酿酒酵母的形态和出芽情况，同时可以根据是否染上颜色来区别死、活细胞。 2．水浸片观察 在载玻片中央滴一滴蒸馏水，取酿酒酵母少许，放在水-碘液滴中，使菌体与水混匀，盖上盖玻片后镜检。可以适当将光圈缩小观察。 五、实验报告 绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征。
2011肿瘤的新十大特征（Hallmarks of Cancer: The Next Generation）2000年，Douglas Hanahan和Robert A. Weinberg在《Cell》上撰写题目为：The Hallma rks of Cancer的综述，阐明了肿瘤细胞的6个基本特征，即：自给自足的生长信号（Self -Sufficiency in Growth Signals）；抗生长信号的不敏感（Insensitivity to Antigrow th Signals）；回避凋亡(Evading Apoptosis)；潜力无限的复制能力(Limitless Replica tive Potential)；持续的血管生成(Sustained Angiogenesis)；组织浸润和转移(Tissue Invasion and Metastasis)。这一肿瘤学经典综述很快被生命科学工作者和教科书大量引用，截止到今天，已经被引用10643次（参考谷歌学者搜索）。 今天（2011年3月4号），他们在《Cell》上再次发表该综述的升级版，题目为：Hall marks of Cancer: The Next Generation。整个综述29页，简述了最近10年肿瘤学中的热点和进展（例如细胞自噬、肿瘤干细胞、肿瘤微环境等），并且将过去的6个特征扩增到1 0个特征，新增加的4个特征为：避免免疫摧毁(Avoiding Immune Destruction);促进肿瘤的炎症（Tumor Promotion Inflammation）; 细胞能量异常（Deregulating Cellular Ene rgetics）; 基因组不稳定和突变（Genome Instability and Mutation）。并且将过去的回避凋亡(Evading Apoptosis)，调整为抵抗细胞死亡(Resisting Cell Death)。总之细细读完全文，能够快速的了解肿瘤学流派的全貌以及肿瘤研究中的重要事件，毫无疑问该文又将缔造引用神话。 Hallmarks of Cancer: The Next Generation,cell,2011,144(5):646-674.
各种血细胞模式图 1.红细胞 2.嗜酸性粒细胞 3.嗜碱性粒细胞 4.中性粒细胞 5.淋巴细胞 6.单核细胞 7.血小板 红细胞聚集分布 成熟红细胞随机呈块状或束状聚集在一起，临床主要表现为以下病症： 1.多种抗体暴露； 2.溶血性贫血（自身免疫性）； 3.非典型肺炎； 4.金葡菌感染； 5.冷凝集疾病。
靶形红细胞 红细胞中央色深，外周以苍白圈，在近红细胞边缘处又较深。形同射击之靶，在正常情况下靶形细胞极少见。但在黄疸、肝病、脾切除后，缺铁性贫血，尤其是在地中海贫血的血涂片上颇为常见。 镰状红细胞 这种红细胞两端尖锐，长而狭，形如镰刀样，见于先天性镰状红细胞贫血和Hb-C病等
Bite Cell 红细胞 由于细胞内血红蛋白变性或沉淀成块，使细胞呈半圆形，提示可能有红细胞膜的缺乏，如G-6-PD缺乏症。 水滴形红细胞 红细胞形态如梨形或水滴形，见于各种增生性贫血及骨髓纤维化，以及地中海贫血、脾功能亢进或肾病等。 固缩红细胞 红细胞中有一侧清晰区，而血红蛋白浓缩偏向另一侧，临床上常见于婴儿固缩红细胞增多症。 半月形红细胞 胞体巨大，呈月形，淡红色。为衰老红细胞在制片时人工造成，或见于某些增生性贫血、血小管球性肾炎。
刺毛红细胞 亦称锯凿细胞。包括刺细胞、钻细胞及距细胞。往往见于微血管病性溶血性贫血、丙酮酸激酶缺乏症、PNH，距细胞多见于肝脏疾病，钻细胞也见于尿毒症。 球形红细胞 此种红细胞直径缩短，厚度增加，细胞中心区的血红蛋白比周围多，呈小球形状。常见于遗传形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、异常血红蛋白病（如Hb-S等）。 椭圆形红细胞
肿瘤历年考试大题汇总 说明：标注页码内容来自于万德森主编的《临床肿瘤学》第三版。如：p45即表示可在万德森主编的《临床肿瘤学》第三版这本书的45页找到答案。 1肿瘤病理学 ◆肿瘤（） 肿瘤是指生长与正常组织不协调、生长过快的异常肿块，即使去除刺激仍以相同的方式过度生长。 ★★原位癌（）p45 指黏膜上皮层内或皮肤表皮层内的异型细胞累及上皮全层，但尚未突破基底膜、未发生间质浸润生长者。 ★★错构瘤（）p45 指某一器官内原有组织或细胞局灶性增生并紊乱组合构成的良性肿瘤。 ◆迷离瘤（）p45 指组织异位形成的肿块。 ◆交界性肿瘤（）p45 指在形态学及生物学行为上介于良性与恶性之间的肿瘤，更倾向于发展位恶性。 ◆瘤样病变（）p45 非肿瘤细胞增生所形成的瘤样肿块。 ◆息肉 从表皮或粘膜表面突出的肉眼可见的结节或肿块。 ◆肿瘤病理诊断的目标和任务p42 （1）为诊断提供依据，是众多诊断方法中最可靠的 1）明确病变性质（是否肿瘤） 2）判断肿瘤良恶性 3）明确病变的组织学分类、分期和分级 4）明确病变的分子学改变和生物标记物 （2）为治疗提供依据 5）是制订治疗方案的依据 6）分析疗效的基础 （3）有助于判断预后，确定有无复发和转移，进行死因分析 ◆冰冻切片的作用p46 （1）用于术前未能诊断、术中需要了解病变性质以确定治疗方案 （2）术中需明确病变侵犯范围以决定手术切缘 （3）了解肿瘤外的一些病变是否肿瘤转移 （4）证明有无创伤正常组织 （5）证实活检已取到肿瘤组织 ◆免疫组化的作用 p48 （1）肿瘤的诊断和鉴别诊断 （2）确定转移性恶性肿瘤的原发部位 （3）恶性淋巴瘤的诊断和分类 （4）评估肿瘤的生物学行为