肌酸激酶同工酶——MB评估 上海仁济医院检验科 肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）是由M和B亚基构成的杂化型二聚体，主要存在于心肌细胞的外浆层，是心肌酶谱中最有特异性的酶，从80年代起公认为心肌酶学诊断的“金标准”，应用于急性心肌梗塞（AMI）的早期诊断[1，2]1979年Gerhardt[3]等人首次报道用免疫抑制原理测定CK同工酶，免疫抑制法以其快速、灵敏、定量且可进行自动分析等优点适合常规检测，随着方法与试剂不断改进与完善，1986年国外已有试剂盒供应，但价格昂贵；最近国内研制成功免疫抑制法测CK-MB的试剂盒，本文旨在对该试剂盒的特性作一评估。 材料和方法 一、标本来源 分正常组，AMI组和非AMI组，非常人血清来自体检健康人员，计30例，AMI 组53例，系仁济医院心内科病房已确诊为AMI者，非AMI组系心内科及其它科门诊病人，因胸痛、心率失常等初诊疑拟AMI，后经系列观察和酶学检查证实不是AMI患者，共20例。 血标本留取后及时分离血清检测或将检测血清置于-20度冰箱保存至测定。 二、试剂 1. 免疫抑制法检测CK-MB试剂盒：上海北加生化试剂有限公司产品 （1）R1：含CK-MB抗体的咪唑缓冲液 （羊抗人CK-M多克隆抗体抑制剂>2000U/L，100mmol/L的咪唑缓冲液成 pH6.7内含葡萄糖20mmol/L，醋酸镁10mmol/L，EDTA 2mmol/L）（2）R2(A)：酶干粉。 （AMP 5mmol/L，磷酸肌酸30mmol/L，五磷酸二腺苷10mmol/L，NADP 2mmol/L，V-乙腺半胱氨酸20mmol/L，已糖激酶≥2500U/L，G6PDH≥ 500U/L，ADP 2mmol/L）。
常用生化检验项目的名 称 -CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
注：ADA，腺苷脱氨酶； PA，前白蛋白； MYO，肌红蛋白； FRA，果糖胺； LPS，脂肪酶； CHE，胆碱酯酶； P-AMY，胰腺淀粉酶； hs-CRP，超敏C反应蛋白 临床生化检验中常见套餐组合模式 肝功能检测项目： 肝功能五项：谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、r-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶 肝功能十四项：谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、r-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比、直接胆红素、间接胆红素、腺苷脱氨酶、总胆汁酸、胆碱脂酶 肝功能十八项：谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素、r-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶、总蛋白、白蛋白、球蛋白、白/球比、直接胆红素、间接胆红素、腺苷脱氨酶、总胆汁酸、前白蛋白、甲胎蛋白、5-核苷酸酶、胆碱脂酶、a-L-岩藻糖苷酶
肾功能检测项目： 肾功能五项：肌酐、尿素氮、尿酸、二氧化碳、β2-微球蛋白 肾功能九项：肌酐、尿素氮、尿酸、二氧化碳、β2-微球蛋白、胱胺酸蛋白酶抑制剂C、尿微量白蛋白、视黄醇结合蛋白、a1微球蛋白。 血脂检测项目： 血脂七项：甘油三酯、胆固醇、血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A、载脂蛋白B。 血脂八项：甘油三酯、胆固醇、血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A、载脂蛋白B、脂蛋白a。 心血管疾病检测项目： 血管紧张素转换酶、全量C反应蛋白、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶、α-羟丁酸、肌红蛋白、肌钙蛋白、同型半胱胺酸。 血脂类及心血管类检测项目： 甘油三酯、胆固醇、血糖、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、载脂蛋白A、载脂蛋白B、脂蛋白a、全量程c反应蛋白、同型半胱胺酸、血管紧张素转换酶。 糖尿病检测项目： 葡萄糖、果糖胺、糖化血红蛋白、β-羟丁酸。 胰腺疾病检测项目： 淀粉酶、脂肪酶 血栓与止血检测项目： D-二聚体 风湿三项： 抗‘O’、类风湿、C-反应蛋白 微量元素及电解质： 铜、铁、锌、无机磷、镁、钙、CO2-CP 其他项目： 免疫球蛋白IgG、免疫球蛋白IgM、免疫球蛋白IgA、补体C3、补体C4
检验科生化室工作流程 1.标本的接收与处理 1.1标本的接收 ①严格执行患者、化验单及标本收集器皿的核对制度，保证无差错。 ②认真审核检验申请单，申请单上需标明：患者姓名、性别、年龄、科别、病区及床号、临床诊断、标本采集时间和实验室收到时间等。 ③签收人员应逐一检查标本的质量，避免血少或严重污染等，对不合格、但可以接受 的样本，签收人员要记录标本的缺陷，对于不符合要求的样本，签收人员应拒绝接受， 同时注明拒收原因，并通知临床重新采集标本。 1.2 标本的处理 ①生化室收到临床标本后，应尽快低速离心分离血清或血浆(天冷血清尚未析出，可将 标本放置水浴箱15-20 min)，离心速度为3000 r/min左右，时间为5-10 min。不主张用玻璃棒或类似器材去剥离附着于试管壁和管塞上的凝块，因处理不当可导致溶血；如果必须将凝块与试管内壁分开或取下管塞时，一定要小心处理。 2.仪器与试剂 2.1 仪器 ①建立仪器档案：保存每一台仪器的购置论证书、仪器说明书、操作手册。 ②建立仪器操作程序：按照操作手册的要求，建立本室仪器操作程序，并在实际操作中严格按操作程序实施。 ③仪器校准：所有仪器按要求进行校准。校准时，必须选用与仪器配套的校准品，不同系统应选用不同的校准品。所有校准都应有时间、结果、变更和频度的记录和说明。④仪器比对:对具有两台或两台以上同类仪器, 并有相同检测项目，应定期进行仪器间比对实验, 以确保结果的一致性。一般3个月或有以下情况应进行一次比对：质控结果不一致、其中一台仪器经维修保养、更换元器件、试剂更换厂家等。
⑤检测方法选择:原则上在确保质量的前提下，生化室应尽可能选择各项目的推荐方法，如因测定方法和试剂的更换造成临床正常值参考范围发生变动的，应做好对临床的宣传工作。 2.2 试剂 ①试剂选择：参照《卫生部临床检验体外诊断试剂盒质量检定暂行标准》的有关规定，在充分考虑质量的前提下，应尽可能选用和生化检验仪器相配套的试剂，如使用其他商品化试剂应做相应的对照实验并有可行性的报告和记录。 ②试剂的使用和保存：严格按照说明书的要求进行操作和保存，如果是干粉或片剂，一定要注意复溶水的质量。在试剂的使用过程中，应有相应的批号、使用情况及更换记录和说明。 3.室内质控与室间质评 室内质控是为了监测和评价实验室工作质量，以决定常规检验报告能否发出所采取 的一系列检查、控制手段，它代表每天检验结果的准确性；而室间质评既由实验室 以外的某个机构对各实验室常规工作的质量进行监测忽然评定，以评价各实验室工作 质量，逐步提高常规检测的准确性和可比性。以切实做好本室的室内质控为基础，实 验室应积极参加室间质评活动，以增加检验结果的准确度和可比性。各类生化检验项 目应有相应的室内质量控制系统。①质控品选择：选择符合要求的两个浓度质控品。 ②严格按照质控品说明书要求，正确使用和保存。③设定靶值：实验室应对新批号质 控品的各个测定项目确定靶值，靶值必须用本室现行使用的测定方法进行确定；定值 质控品的标定值只能作为确定靶值的参考。④质控方法选择：根据室内质控的要求选 择多规则质控方法。⑤绘制质控图及记录质控结果:根据质控品的靶值和控制限绘制 Levey Jennings控制图(单一浓度水平)，或将不同浓度水平的结果绘制在同一图上 的Youden图，将原始质控结果记录在质控图表上，保留打印的原始质控记录。⑥失 控处理及原因分析：填写失控报告，分析误差原因，并采取相应处理措施；根据分析 所得的失控原因，判断结果是真失控还是假失控，以决定当批结果是否发出或重新测 定。
2方法：不同项目方法学不同。参照后面具体的单项目操作规程。 3目的：室内质量控制是实验室质量保证体系中的重要组成部分，其目的是为了保证每个患者样本测定结果的可靠性。测定结果的可靠性包括两个方面的含义，一是精密度高，即测定的重复性好；另一个方面是准确度高，即测定结果正确，接近真值。 4试剂： 迪瑞：TBIL、DBIL、TP、ALB、ALT、AST、ALP、GGT、GLU 、TG、TC、HDL-C、LDL-C、BUN、CRE、UA诊断试剂； 江苏奥迪康电解质试剂； 5仪器：迪瑞CS-600B全自动生化分析仪；AC9000电解质分析仪; 6室内质控品的选择 理想的室内质控品至少应具备以下特点：人血清基质；无传染性；瓶间变异小，酶类项目CV％＜2％，其它分析物CV％＜1％；冻干品复溶后稳定性好，多数常规生化项目2 －8℃稳定7天，－20℃稳定30天；未开封干粉有效期应在1年以上。本室来用RANDOX 质控品。 7质控品的正确使用与保存 严格按质控品说明书操作和保存，不使用超过保质期的质控品；冻干质控品的复溶确保所用溶的质量和所加溶剂的量的准确性，复溶时应轻轻匀，使内容物完全溶解，切忌剧烈振摇，防止泡沫产生，复溶时间不得少于30分钟；质控品要在与患者标本同样测定 条件下进行测定；有条件每天至少做两水平以上质控品。 8室内质控图的绘制 8.1均值和质控限的确定 8.1.1在开始室内质控时，首先要确定质控图的均值和质控限，质控限通常以标准差倍数表示。实验室应对质控品的各个质控项目自行确定均值和质控限。均值和质控限必须根据实验室内现行的测定方法进行确定。定值质控品的标定值只能作为确定均值的参考； 8.1.2为了确定均值和质控限，质控品应与常規标本一起测定。根据20次质控结果（每天测定，一天测3次），对数据进行离群值检验（剔除超过3SD外的数据），计算出平均数和标淮差，作为暂定均值和暂定标准差； 8.1.3以此暂定均值和标准差作为下一个月室内质控的均值和标准差进行室内质控：一个月结束后，将该月的在控结果与前20个质控测定结果汇集在一起，计算累积平均数 和累积标准差（第一个月），以累积平均数和标住差作为下一个月质控的均值和标准差；8.2绘制质控图及质控方法（规则）的应用 根据质控品的靶值和质控限绘制质控图，并将原始质控结果记录在质控图表上，保留打印的原始质控记录。将设计的质控规则应用于质控数据，判断每一质控结果是否在控， 现多采用Westgard多规则即1 2S 、1 3S 、2 2S 、R 4S 、4 1S 、10x。 9.质控品的存放：干粉置2-8℃保存，溶解、分装后置-20℃冰箱冷冻保存。 10.质控结果的判定程序：质控结果全部录入迪瑞CS-600B全自动生化分析仪系统。11操作：使用迪瑞CS-600B全自动生化分析仪，AC9000电解质分析仪
生化室检验项目 血液生化 项/次 1、250301001 总蛋白（TP）4元 2、250301002 白蛋白（ALB）4元 3、250305007 谷丙转氨酶（ALT）4元 4、250305008 谷草转氨酶（AST）4元 5、250305001 总胆红素（TBil）4元 6、250303001 总胆固醇（chol）4元 7、250303002 甘油三酯（Trig）4元 8、250302001 葡萄糖（GLU）6元 9、250306001 肌酸激酶（CK）6元 10、250306002 肌酸激酶同工酶（CK-MB11元 11、250307002 肌酐（Cr）11元 12、25030700 尿酸（UA）6元 13、250304010 二氧化碳结合力（CO2cp）6元 14、250304001 血清钾（K+）5元 15、250304002 血清钠（Na+5元 16、250304003 血清氯（Cl-）5元 17、250304004 血清钙（Ca2+）5元 18、250307001 尿素氮（BUN) 4元 19、250303004 高密度脂蛋白胆固醇8 元 20、250303005低密度脂蛋白胆固醇8元 肝功项目 1、250301001 总蛋白（TP）4元 2、250301002 白蛋白（ALB）4元 3、250305011 碱性磷酸酶（ALP）6元 4、250305007 谷丙转氨酶（ALT）4元 5、250305001 总胆红素（TBil）4元 6、250305002 直接胆红素（DBili）4元 7、250305009 Y-谷氨酰转肽酶（GGT6元 8、250305005 总胆汁酸（TBA）14元 9 250305014血清胆碱酯酶测定8元 血脂血糖 1、250303001总胆固醇（chol）4元 2、250303004 高密度脂蛋白胆固醇（HDL-chol）8元 3、250303005 低密度脂蛋白胆固醇 （LDL-chol）8元 4、250303002 甘油三酯（Trig） 4 元 5、250303007 载脂蛋白A（ApoAl7元 6、250303008 载脂蛋白B（ApoB 6元 7、250302001 葡萄糖（GLU）6元 心肌酶项目 1、250306001 肌酸肌酶（CK）6元 2、250306002 肌酸肌酶同工酶（CK-MB） 11元 3、250306007 α--羟丁酸脱氢酶（HBDH）4元 4、250305008 谷草转氨酶（AST）4元 5、250306005 乳酸脱氢酶（LDH）4元肾功 1、250301001 总蛋白（TP）4元 2、250301002 白蛋白（ALB）4元 3、250307001 尿素氮（BuN）4元 4、250307002 肌酐（Cr）11元 5、250307005 尿酸（UA）6元 6、250304010 二氧化碳结合力（CO2cp）6元 电解质 1、250304001 血清钾（K+）5元 2、250304002 血清钠（Na+）5元 3、250304003 血清氯（Cl-）5元 4、250304004 血清钙（Ca2+）5元 1 、250308004 淀粉酶活力测定（AMY.
生化培养箱的使用标准操作规程 1 目的 建立生化培养箱使用标准操作规程，规范生化培养箱操作程序， 保证该设备的正常运行 2 范围：适用于本公司生化培养箱的运行操作。 3 责任者：生化培养箱的运行操作人员、设备管理人员。 4 内容 4.1设备概况 生化培养箱是用于细菌、霉菌、微生物、组织细胞的培养保存， 是生物、遗传工程、医学等行业实验室作稳定性实验及生物培养的重要实验设备，该设备外形为立式，容积为80升，箱体及箱内均采用优质 钢板表面喷塑，采用双层玻璃观察窗的结构，箱内装有可控制的照明灯，不开箱门就可清晰观察箱内培养物品的状况，工作室采用优质镜面不锈钢版，内有由不锈钢丝制成的可方便移动的多层隔板，隔板的间距可灵活改变。电源开关、电源指示灯、控温仪等集中于箱体上部。 该设备采用高精度微机控温仪及控湿仪，具有响应快、超调小、精度高的特点，使用轻触按键设定参数，具有可调温差报警方式、可调定时控制方式、基本控制模式等基本功能。 4.2设备主要参数
4.4 操作前的准备 4.4.1 确认设备状态是否处于完好已清洁。 4.4.2 取下完好已清洁状态标识卡，挂上运行状态标识卡。 4.5 操作 4.5.1 设定工作温度（最高可设定到60℃） 4.5.1.1 打开电源开关，此时控温仪会进行自检并显示箱内温度。 4.5.1.2 按“SET”键设定工作温度，这时控温仪上显示的温度值会闪烁。 4.5.1.3 根据工艺要求按“▲”升高键或“▼”降低键不放设定工作温度。 4.5.1.4 到达设定温度后放开“▲”升高键或“▼”降低键，这时设定的显示值会闪烁。 4.5.1.5 按一下“SET”键确认设定温度，新温度设定后，这时控温仪就转换为显示箱内实际温度。
C S全自动生化分析仪 操作规程 公司内部编号：（GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-9018）
CS-1300全自动生化分析仪操作规程 一、开机程序 1.1开机前检查 ①加样系统 探针（样品针、试剂针），搅拌棒是否沾有水滴，脏污，是否弯曲，堵塞；反应槽以及各清洗槽是否脏污或堵塞。如有以上情况发生，请参照“维护指南”进行。 ②清洗液 测试前先检查清洗液，不足时添加，具体位置如下： 清洗液位置清洗液种类 W1……………………………CS-碱性清洗液 ★W2……………………………CS-ISE清洗液 ★W3……………………………CS-酸性清洗液 清洗液盒………………………CS-碱性清洗液 45号位置………………………CS-抗菌无磷清洗液 ★此清洗液为选用 注：以上所有清洗液请使用迪瑞原厂清洗液
③废液桶 应保证废液桶有足够的空间盛装废液，当桶满时，及时倒掉并清理。 ④打印机 检查打印机是否正确地安装，打印纸是否充足。 ⑤仪器台面 检查仪器台面是否清洁，有无杂物。 ⑥供电电源 检查UPS电源开关应处再打开（ON）状态。 ⑦供水 打开自来水阀门，接通纯水机的电源，保证春水装置清洁，纯水机能正常给仪器供水且供水管路连接正确。 注：CS系列全自动生化分析仪耗水量最大为40L/h（CS-800为60L/h）,要求纯水导电率小于1us/cm。 ⑧连接 分析仪与计算机主机间用通讯电缆正确地连接。 1.2开机 ①打开仪器右侧下方空开（总电源开关）。
注：为保证试剂仓和样样品圈的冷藏作用，存放试剂时，总电源开关处于打球开状态。 ②打开仪器右侧上方的电源开关（分析部电源）。 ③打开电脑，进入“CS全自动生化仪”操作软件，仪器进入待机状态后，方可进行下一步操作。 1.3开机后试剂准备 ①在软件主界面上点击“试剂信息”键，查看各试剂的剩余量。 ②更换试剂：结合当日预计测定量及时更换试剂（不同批号的试剂不能混合使用），试剂位置按屏幕显示放置，注意试剂瓶内不能有气泡。 ③试剂水平扫描：仪器可进行“自动扫描试剂水平”和“手工扫描试剂水平”两种试剂水平扫描模式。 自动扫描试剂水平：更换试剂完成后，如果“试剂信息”窗体下的“自动扫描试剂水平”单选框被选。那么仪器在盖好试剂盘盖后将自动进行试剂水平的扫描； 手工扫描试剂水平：更换试剂完成后，点击“试剂信息”窗体下的“手工扫描试剂水平”键，此时仪器进行试剂水平扫描，扫描完成后方可进行测试。 二、常规操作程序 2.1单个样本登记 在主界面点击“样本登记”选项，输入以下相应内容：
项目 标本 参考值 临床意义 丙氨酸氨基转移酶（ALT ） 血清（浆） 5～34U ／L 增高：肝胆疾病：病毒性肝炎、肝硬变活动期、肝癌、中毒性肝炎、阿米巴性肝病、脂肪肝、细菌性肝脓肿、肝外阻塞性黄疸、胆石症、胆管炎、血吸虫病等。严重肝损伤时出现转氨酶与黄疸分离的现象，即黄疸日益加重，而ALT 却逐渐下降。 重症肝炎及肝硬变有肝细胞再生者，可有AFP 升高，而ALT 下降。其他ALT 升高的疾病：心血管疾病（心肌梗塞、心肌炎、心力衰竭时肝瘀血、脑出血等）、骨胳肌疾病（多发性肌炎、肌营养不良）、内分泌疾病（重症糖尿病、甲脏腺功能亢进）、服用能致ALT 活动性增高的药物或乙醇等。 天冬氨酸氨基转移酶（AST ） 血清（浆） 9.0～ 48.0U/L 增高：急性心肌梗塞：6－12小时内显著升高， 48小时内达到峰值，3－5天恢复正常。急性或慢性肝炎、肝硬变活动期等肝胆疾病。胸膜炎、心肌炎、肾炎、肺炎、皮肌炎、服用肝损害的药物等。 碱性磷酸酶（ALP ） 血清（浆） 31～115U/L 增高：肝胆疾病：阻塞性黄疸、急性或慢性黄疸性肝炎、肝癌等。ALP 与转氨酶同时检测有助于黄疸的鉴别。阻塞性黄疸，ALP 显著升高，而转氨酶仅轻度增加。肝内局限性胆管阻塞（如肝癌） ALP 明显升高，而胆红素不高。肝细胞性黄疸，ALP 正常或稍高，转氨酶明显升高。溶血性黄疸ALP 正常。骨胳疾病：纤维性骨炎、成骨不全症、佝偻病、骨软化、骨转移癌、骨折修复期。ALP 可作为佝偻病的疗效的指标。 乳酸脱氢酶（LDH-L ） 血清（浆） 89～221U/L 增高：见于心肌梗塞、肝炎、肺梗塞、某些恶性肿瘤、白血病等。溶血可致LDH 假性升高。 谷氨酸转肽酶（GGT ） 血清（浆） 0.0～53.0U/L 增高：原发性肝癌、腺癌、乏特氏壶腹癌等，血清Υ－GT 活力显著升高，特别在诊断恶性肿瘤患
化验室设备操作规程
SH220石墨消解仪 一、设备参数 二、操作方法 1、接通电源，打开仪器开关。 2、通过控制面板设定所需温度并按确认键。 3、当实际温度显示屏达到所需温度时，放入样品即可。 4. 实验结束后，关闭仪器电源，等待冷却。 K9840凯氏自动定氮仪 一、设备参数 二、操作方法 1、化学试剂的准备 (1)将蒸馏水加入到蒸馏水桶中，并将瓶盖拧紧。 (2)配置30%~40%的氢氧化钠溶液，加入到碱液桶内，并将桶盖拧紧。 (3)配置2%的硼酸溶液，加入到硼酸桶内，并将瓶盖拧紧。 2、调试 将冷却水管接在水龙头上，并打开自来水，检查设备是否漏水。打开设备，换上一个空的消解管和三角瓶，关闭防护门后，选择自动，连续确认三次后，观察设备运行是否正常。
3、检测 设备试运行正常后，关闭防护门，选择＂自动＂，连续确认三次后，对样品进行蒸馏。 三、注意事项 1、仪器使用前首先确认蒸馏水桶、碱液桶、硼酸桶内液体是否充足，如不足需补充。 2、排废液的管路出口要比仪器安放的高度要低，以便排液通畅。 3、仪器长期不用，应将碱液管路中的碱液排除，并加入清水。 YP202N型电子天平 一、设备参数 二、操作方法 1、调水平。 2、开机，按开机键开机，预热30min。 3、样品称量。 4、关机 称量完毕，按关机键关机，拔下电源。 三、注意事项 1、将天平置于稳定的工作台上，避免振动，阳光直射和气流。 2、经常使用天平时，应使天平连续通电以减少预热时间，使天平处于相对稳定状态，如果天平长期不用应关闭电源。
3、天平以保持清洁，谨防灰尘等无钻入天平。不应该放在有腐蚀性气体的环境中。 4、根据天平的使用程度，应作周期性的检查校准。 AL204电子分析天平 一、仪器参数 二、操作方法 1、调水平。 2、开机，按开机键开机，预热30min。 3、样品称量。 4、关机 称量完毕，按关机键关机(或一段时间不用后自动关闭显示器)，拔下电源。 三、注意事项 1、将天平置于稳定的工作台上，避免振动，阳光直射和气流。 2、经常使用天平时，应使天平连续通电以减少预热时间，使天平处于相对稳定状态，如果天平长期不用应关闭电源。 3、天平应保持清洁。不应该放在有腐蚀性气体的环境中。 4、根据天平的使用程度，应作周期性的检查校准。 JA2003N电子天平 一、仪器参数
血清肌酸激酶MB同工酶测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 实验原理 使用CK-M 多克隆抗体对肌酸激酶（CK）中CK-M同工酶的活性进行抑制后，采用德国临床化学会（DGKC）和国际临床化学会（IFCC）推荐的连续监测法测定余下的肌酸激酶（CK）活性。其反应原理如下： ⑴CK-MM 型同工酶 + CK-M抗体→ CK-MM型同工酶的活性被抑制；CK-MB 型同工酶+ CK-M 抗体→ 50%的CK-MB 型同工酶的活性被抑制； ⑵剩余的50%无活性的CK-MB型同工酶 + N-乙酰半胱氨酸→有活性的CK-B型同工酶 CK同工酶 ⑶磷酸肌酸 + ADP 肌酸 + ATP 己糖激酶(HK)
ATP + 葡萄糖 ADP + 葡萄糖-6-磷酸 (G6P-DH) 葡萄糖-6-磷酸+NADP+6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+ 式中：ADP为二磷酸腺苷；ATP为三磷酸腺苷；NADP+为氧化型辅酶II；NADPH+H+为还原型辅酶II。 在上述反应中，NADPH+H+ 的生成速率与样本中肌酸激酶B 型同工酶（CK-B）的活性成正比。通过在波长340nm 处监测吸光度值的上升速率，即可测得样本中肌 酸激酶B 型同工酶（CK-B）的活性。肌酸激酶B 型同工酶（CK-B）活性相当于1/2肌酸激酶MB型同工酶的活性，将所测得的肌酸激酶B型同工酶（CK-B）的活性乘以2，即为肌酸激酶MB 型同工酶（CK-MB）的活性。 3 标本： 3.1 病人准备：无特殊。 3.2 类型：血清或肝素血浆。
3.3 标本存放：稳定性：-20℃保存稳定4周（避光保存）。 活性损失：2～8℃保存24小时或18～22℃保存1小时至少 损失10%。 3.4 标本运输：常温条件下保存运输。血标本应尽快送往化 验室,室温下放置30―45分钟,后离心,放置时间不得超过3h. 血清必须吸出,转移至有盖的试管中. 3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。 4 实验材料 4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司CK-MB试剂盒（沪 食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014） 4.1.1 试剂组成 试剂1（R1）： D-葡萄糖27mmol/L 咪唑缓冲液 60mmol/L 乙酸镁14mmol/L NADP 2.7mmol/L
a-L-岩藻糖苷底物测定AFU酶活的评估 元升生物科技技术研发部 1概述 a-L-岩藻糖苷酶(a-L-Fucosidase，AFU)的分类名为a-L-岩藻糖苷酶水解酶(EC3．2．1．51），催化岩藻糖苷键水解，参与含岩藻糖的低聚糖、糖肽、糖蛋白和糖脂的分解代谢。AFU合成于细胞内，定位于溶酶体，是一种酸性水解酶，它的本质是糖蛋白。广泛分布于人体肝、肾、胰、脑和胎盘等组织以及血清、尿液、唾液和泪液中。AFU在人体内呈多形性，在等电聚焦电泳中AFU 可分出5～9条区带，血清中AFU除含有PI为4．68和4．84两种主要成分以外，还可见到5个次要成分。AFU具有3型同工酶，即AFU1、AFU2和AFU3，是由1个位于第一号染色体短臂（1p34）上基因位点的2个等位基因所表达，由于不同人所表达的同工酶类型不同，所以正常人群AFU活性也有所不同，大约有10%左右的正常人血浆AFU呈低活性。测定a-L-岩藻糖苷酶(a-L-Fucosidase,AFU)对诊断原发性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)具有重要临床意义。它是PHC的特异性标志物,可用于PHC的早期诊断. 2 原理 底物CNP-AFU在血清样本中a-L-岩藻糖苷酶酶作用下，生成产物CPNP，而产物CPNP的生成量与样本中AFU的酶活性成正比，通过测定黄色产物在405nm波长的生成速率，即可计算出样本中AFU的活性。 3 实验方法 3.1 样本瑞安市人民医院临床新鲜血清样品。 3.2 仪器和试剂CNP-AFU元升生物科技生物科技有限公司生产，批号 1213M05QH。进口底物购自美国sigma公司，批号1013C07QH；仪器为日立7080全自动生化分析仪、抗坏血酸、胆红素、人胎盘a-L-岩藻糖苷酶均购自sigma公司，血红蛋白标准品购自上海血液中心。 3.3 试剂配制方法按常法配制，所用原料均为分析纯。 3.4 测定方法HITACHI 7080自动分析仪参数反应类型：Rate-A法；反应温
BS-420全自动生化分析仪标准操作规程 一、BS-420全自动生化分析仪标准操作规程（开/关机程序） 1开机 1.1依次打开分析部主电源、分析部电源、操作部显示器电源、操作部主机电源、打 印机电源； 1.2开启操作部主机后会自动启动操作软件，在对话框中输入用户名与密码； 1.2.1若只关闭分析部电源保持试剂盘制冷，则要依次打开分析部电源、操作部显 示器电源、操作部主机电源、打印机电源； 1.2.2若使用仪器睡眠功能，则只需在对话框中输入用户名与密码，重新登陆；2分析前准备 2.1观察各压力表是否在绿色标线之内； 2.2检查蒸馏水、去离子水是否足够、废液管道有否堵塞，废液桶是否清空； 2.3检查高浓度清洗罐是否有足够高浓度清洗液； 2.4确认试剂盘的D1号位置已放置碱清洗液，D2号位置已放置酸清洗液，W号位 置已放置蒸馏水、去离子水。 2.5确认样本盘的U号位置已放置尿液稀释液（ISE专用稀释液），D1位置已放置ISE 清洗液（如选配有ISE模块），D2位置已放置酸清洗液，D3位置已放置碱清洗 液，W位置已放置足够的蒸馏水、去离子水。 2.6对于选配ISE模块的仪器，确认ISE试剂包已安装且试剂存量充足。 2.7检查样本注射器和试剂注射器是否漏液以及是否有气泡。 2.8检查样本针，确认无污物，无弯折。如有污物，清洗样本针。如有弯折，更换样 本针。 2.9检查试剂针，确认无污物，无弯折。如有污物，清洗样本针。如有弯折，更换样 本针。 2.10检查样本搅拌杆与试剂搅拌杆，确认搅拌杆表面无污物，杆无弯折。如有污物， 清洗搅拌杆。 3关机 3.1 行关机操作。依次关闭打印机电源，操作部主机电源，操作部显示器电源，分析 部电源，分析部主电源。此时需要取走试剂仓内试剂冰箱保存。 3.2如保留试剂制冷功能，则不需要关闭分析部主电源。 3.3 以新用户登陆。 3.4 行休眠状态。 3.5清理取走样本盘所有标本。 二、BS-420全自动生化分析仪标准操作规程分析参数设置程序 1 1.1
精品文档 检验科生化室工作流程 1.标本的接收与处理 1.1标本的接收 ①严格执行患者、化验单及标本收集器皿的核对制度，保证无差错。 ②认真审核检验申请单，申请单上需标明：患者姓名、性别、年龄、科别、病区及床 号、临床诊断、标本采集时间和实验室收到时间等。 ③签收人员应逐一检查标本的质量，避免血少或严重污染等，对不合格、但可以接受 的样本，签收人员要记录标本的缺陷，对于不符合要求的样本，签收人员应拒绝接受， 同时注明拒收原因，并通知临床重新采集标本。 1.2 标本的处理 ①生化室收到临床标本后，应尽快低速离心分离血清或血浆(天冷血清尚未析出，可将 标本放置水浴箱15-20 min)，离心速度为3000 r/min左右，时间为5-10 min。不主张用玻璃棒或类似器材去剥离附着于试管壁和管塞上的凝块，因处理不当可导致溶血；如果必须将凝块与试管内壁分开或取下管塞时，一定要小心处理。 2. 2.1 仪器①建立仪器档案：保存每一台仪器的购置论证书、仪器说明书、操作手册。建立仪器操作程序：按照操作手册的要求，建立本室仪器操作程序，并在实际操作②中严格按操作程序实施。③仪器校准：所有仪器按要求进行校准。校准时，必须选用与仪器配套的校准品，不同
系统应选用不同的校准品。所有校准都应有时间、结果、变更和频度的记录和说并有相同检测项目，应定期进行仪, 对具有两台或两台以上同类仪器明。④仪器比对:个月或有以下情况应进行一次比对：质控以确保结果的一致性。一般3, 器间比对实验结果不一致、其中一台仪器经维修保养、更换元器件、试剂更换厂家等。精品文档． 精品文档 ⑤检测方法选择:原则上在确保质量的前提下，生化室应尽可能选择各项目的推荐方法，如因测定方法和试剂的更换造成临床正常值参考范围发生变动的，应做好对临床的宣传工作。 2.2 试剂 ①试剂选择：参照《卫生部临床检验体外诊断试剂盒质量检定暂行标准》的有关规定，在充分考虑质量的前提下，应尽可能选用和生化检验仪器相配套的试剂，如使用其他商品化试剂应做相应的对照实验并有可行性的报告和记录。 ②试剂的使用和保存：严格按照说明书的要求进行操作和保存，如果是干粉或片剂，一定要注意复溶水的质量。在试剂的使用过程中，应有相应的批号、使用情况及更换记录和说明。 3.室内质控与室间质评 室内质控是为了监测和评价实验室工作质量，以决定常规检验报告能否发出所采取 的一系列检查、控制手段，它代表每天检验结果的准确性；而室间质评既由实验室 以外的某个机构对各实验室常规工作的质量进行监测忽然评定，以评价各实验室工作 质量，逐步提高常规检测的准确性和可比性。以切实做好本室的室内质控为基础，实 验室应积极参加室间质评活动，以增加检验结果的准确度和可比性。各类生化检验项
肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 说明书 【产品名称】 通用名称：肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 英文名称：Creatine kinase MB（CLIA） 【包装规格】 2×30 人份/盒、2×50 人份/盒、2×100 人份/盒 【预期用途】 用于体外定量测定人体血清或（和）血浆中肌酸激酶同工酶MB 的含量。 肌酸激酶主要催化高能磷酸键从ATP 转移到肌酸，生成磷酸肌酸。肌酸激酶是二聚体酶，包括骨骼肌CK-MM，脑组织CK-BB，心肌CK-MB 和线粒体肌酸激酶等四种同工酶形式。CK-MB 分子量80,000，由两个亚单位组成(每个亚基MW= 40000)：亚单位M 表示肌肉型，亚单位B 表示脑型。CK-MB 主要存在于心肌组织，占CK 总活性的20%，骨骼肌中也有微量分布。 血清中CK-MB 含量对诊断急性心肌梗死、心肌炎等心肌缺血性疾病有重要意义。CK-MB 在心肌损伤早期即可出现于循环血中，于心肌损伤后2-6 小时开始升高，在12-24 小时内达到峰值，之后降至正常水平(36–72 小时)， CK-MB 测值的升降伴随ECG 演变和胸痛病史。CK-MB 含量和时间变化，对评估心肌损伤发病时间、梗死体积 以及再灌注后损伤有重要意义。此外，骨骼肌损伤、横纹肌溶解症及中风等疾病中，也伴随有CK-MB 含量升高。 临床诊断上，CK-MB 经常与肌红蛋白和肌钙蛋白I 联合检测。在心肌损伤相关疾病诊断上，肌钙蛋白I 特异 性强，肌红蛋白和CK-MB 早期敏感性高，三者联合检测可以提高诊断的特异性、敏感性。 【检验原理】 肌酸激酶同工酶MB 测定采用双位点夹心化学发光免疫分析法，其采用的技术原理如下： 第一步：将样本与包被着CK-MB 单克隆抗体的超顺磁性磁微粒（磁珠）以及CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，经过孵育，样本中的CK-MB 和包被在磁珠上的CK-MB 单克隆抗体结合，同时CK-MB 单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中CK-MB 另一位点结合。反应完成后，磁场吸住磁珠，洗去未结合的物质。 第二步：将化学发光底物（3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷，AMPPD）添加到反应管内，发光底物AMPPD 能有效地被碱性磷酸酶所分解, 脱去一个磷酸根基团，生成不稳定的中间产物，该中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态返回基态时，产生化学发光，由光电倍增管对反应所产生的光子数进行测量，所产生的光子数与样本内CK-MB 的浓度成正比。样本内分析物的量由定标曲线来确定。 【主要组成成分】 注：不同批号试剂盒中各组分不能互换。
生化室内质控的标准操作方法 1.目的：旨在检测和控制常规化学工作的精密度，提高常规化学工作中天内和天间标本检测的一致性。 2.范围：生化室临床化学项目及凝血项目。包括日立7600，XD683电解质分析仪，STAGO血凝分析仪 3.质控品的选择和保存：临床化学项目测量两个水平质控，分别为生理水平和病理水平，7600项目选用罗氏生化质控血清正常值（PNU）和异常值（PPU），凝血选用STAGO正常异常两水平值。血气选用伯乐的高中低水平。糖化血红蛋白选用伯乐的高低水平。临床化学质控品规格5ml/瓶，凝血质控品1ml/瓶。每年订购一次，数量为一年的用量(数量见年质控物计划)。保存：把两水平的质控品存放在4℃低温冰箱内，在有效期范围内使用。 4.操作方法： 4.1质控品以及标准品的复溶与分装： 4.1.1罗氏冻干质控品的复溶方法: 严格按说明书操作，两个水平一次各取20瓶，每瓶用校正后的吸管加5ml去离子水复溶，轻轻摇匀，切忌剧烈振摇，置室温约半小时，待内容物完全溶解后把20瓶质控品全部倒入20ml的烧杯内，混匀，接着用吸管边搅拌边分装于4ml的塑料试管内，每支约0.4ml，加盖，试管上写上批号，存贮于-70℃冰箱内，过24小时后取出15支存放于2号冰箱的冰格内，待用。每日在2号冰箱取二水平各一支, 置室温约半小时，待内容物完全溶解待用。 4.1.2凝血质控品的复溶方法： 严格按说明书操作，每日高低值各取1瓶，每瓶用校正后的吸管加1ml 去离子水复溶，轻轻摇匀，切忌剧烈振摇，置室温约半小时，待内容物完全溶解待用。 4.1.3血气质控品的准备： 取质控品一支，剧烈颠倒混匀40秒以上，后立即开瓶送检！ 4.1.4糖化血红蛋白的复溶： 严格按说明书操作，首次取冰干品一瓶，用校正后的吸管加0.5ml去离子水复溶，轻轻摇匀，切忌剧烈振摇，置室温约半小时待用。 4.1.5罗氏定标品的复溶：
总胆红素(T-Bil)标准操作程序（SOP） 【目的】 保证总胆红素检测结果准确，可靠。 【该SOP变动程序】 本SOP的改动，可有任一使用本SOP的工作人员提出，并经下述人员批准签字：专业主管，科室主任。 【本SOP适用范围】 BT-815A半自动生化仪总胆红素重氮法测定。 【试剂来源】 上海荣盛生物技术有限公司。 【标本类型】血清、血浆 【实验原理】 对氨基苯磺酸＋亚硝酸钠 ??→ ?盐酸重氮苯磺酸盐 胆红素＋重氮苯磺酸盐酸盐 ? ? ?→ ?二甲亚砜重氮复合物（红紫色） 【实验仪器】BT-815A半自动生化仪 【操作步骤】 1、一份R1于一份R2等比例混合。 2、每个病人600微升温浴10分钟备用。 3、取离心后标本30微升加入600微升试剂温浴10分钟，后检测。 【参考值】血清：<5.17mmol/L。 【临床意义】总胆红素的测定对于急性性肝炎，慢性肝炎，肝硬化，胆管炎，胆石症，急性胆囊炎等肝胆疾病和溶血性贫血的诊断具有重要意义。 【注意事项】 1、标本为血清或肝素血浆。标本采集后应避光保存。
丙氨酸氨基转移酶(ALT)标准操作程序（SOP） 【目的】 保证丙氨酸氨基转移酶检测结果准确，可靠。 【该SOP变动程序】 本SOP的改动，可有任一使用本SOP的工作人员提出，并经下述人员批准签字：专业主管，科室主任。 【本SOP适用范围】 BT-815A半自动生化仪丙氨酸氨基转移酶测定。 【试剂来源】 上海荣盛生物技术有限公司 【标本类型】血清、血浆 【实验原理】一步法或者两步法、速率法 L-丙氨酸+α-酮戊二酸→丙酮酸+ L-谷氨酸（ALT催化） 丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD++H2O(LDH催化) 【实验仪器】BT-815A半自动生化仪 【操作步骤】 1.取标本与试剂30/600的比例混匀。 2.上机检测。 【参考值】血清：<40umol/L。 【临床意义】血清ALT活力的检测对中毒性肝炎,病毒性肝炎,肝癌,肝硬化活动期,脂肪肝,阻塞性黄疸,胆管炎,胆囊炎,心血管疾病,心肌梗塞,心肌炎,骨骼肌疾病,内脏和肌肉炎症性坏死等病症的诊断具有重要的价值。 【注意事项】 1、试剂空白吸收光度小于1.000时,勿用。 2、当样本的ALT活力大于1000U/L时,应将样本用生理盐水稀释后再分析,结果乘以稀释倍数。标佳 试剂使用原装试剂参数，具有自动稀释功能。
肌酸激酶与肌酸激酶同工酶的结果解读 摘要：在当前肌钙蛋白在绝大多数县级以上医院普及的情况下，依然有相当多 的基层医院在评价心肌损伤标记物时会选择心肌酶谱。目前这些指标已整合到生 化全套检测中，其中CK-MB在临床诊断中的敏感性和特异性最高，至今仍然可以 作为心肌损害的重要的诊断指标。 关键词：肌酸激酶；同工酶 The results of creatine kinase and creatine kinase were interpreted Xu ying.（Anhui huainan east hospital group xiesan hospital，Anhui Huainan 232052，China） [Abstract] In the current troponin in the vast majority of the popularization of the hospital at or above the county level cases，there are still quite a lot of basic-level hospitals in evaluating myocardial injury markers will choose myocardial enzyme spectrum. At present，these indexes have been integrated into the biointegration test，and the sensitivity and specificity of ck-mb in clinical diagnosis can still be regarded as an important diagnostic index for myocardial damage. [Key words] Creatine kinase；isozyme 20世纪90年代前，肌钙蛋白还未广泛在临床应用，血清心肌酶谱是诊断心肌损伤的一 类重要指标，即使在当前肌钙蛋白在绝大多数县级以上医院普及的情况下，依然有相当多的 基层医院在评价心肌损伤标记物时会选择心肌酶谱，包括肌酸激酶CK及肌酸激酶同工酶CK-MB、乳酸脱氢酶LDH、谷草转氨酶AST和α羟丁酸脱氢酶α-HBDH。目前这些指标已整合到 生化全套检测中，其中CK-MB在临床诊断中的敏感性和特异性最高，至今仍然可以作为心肌 损害的重要的诊断指标。临床也经常能碰到患者拿化验单咨询的情况，护理人员对此应该有 所了解。CK广泛存在于机体组织中，至少有3种主要的同工酶：CK-MM、CK-MB、CK-BB。 CK-MM 主要存在于骨骼肌细胞中；CK-MB主要存在于心肌细胞中；CK-BB主要存在于脑组织中。心肌细胞损伤主要以CK-MB升高为主，总CK也会随之升高。解读CK-MB应该注意： 1药物原因 他汀是最常见的引起CK-MB升高的药物，主要与他汀肌溶解有关，故CK升高水平更为 明显。除此之外，某些麻醉药、镇静药、催眠药、乙醇、秋水仙碱等均可引起CK和CK-MB 升高。 2运动影响 一般生化检查要求检查者前两天尽可能避免剧烈的运动和锻炼，尤其平常比较少参加锻 炼的检查者，即便检查前不很剧烈的活动也可能会引起CK明显升高，同时伴有CK-MB不同 程度的升高。 3发热 尤其是高热可以引起肌肉损伤，所以对于感染发热患者，如果CK轻度升高并不用特别处理。 4手术或挤压创伤 有时手术后1-2个月CK仍然会不同程度升高，这种患者如果因其他原因再次住院，如没 有仔细询问患者近期手术史，往往会因不清楚CK或CK-MB升高的原因而进行很多不必要的 检查。 5年龄因素 14岁以下儿童的CK-MB无论是绝对活性或相对活性，一般要比成人高出2-3倍，由于不 同年龄CK-MB正常值范围不同，建议有怀疑心肌炎的儿童，以肌钙蛋白作为主要血清学参考 指标。另外，妊娠3个月左右CK和CK-MB水平也明显高于正常人。 6其他系统疾病 肿瘤、脑部疾病、甲状腺功能减退、多发性肌炎、横纹肌溶解、低钾血症等病变也会引 起CK和CK-MB增高，其中肿瘤、脑部疾病可引起CK-BB增高，但由于CK-BB不能直接检测，
生化室上岗、轮岗考核 1.下列哪组酶常用于诊断肝脏疾病( ) A.CK GGT ALP ACP B.ALT AST GGT ALP C.AMY LD a-HBDH LPL D.ACP AST LipasE LDL E.AST CK CK-MB LD 2.在室内质控过程中，若质控血清的检测结果在x±3SD之外，则判断为( ) A.不能判断 B.在控 C.警告 D.失控 E.待决定 3.下列哪种病理情况血浆清蛋白水平不下降( ) A.手术后 B.营养不良 C.吸收功能紊乱 D.肾病综合征 E.急性肝炎早期 4.下列关于糖尿病合并脂类代谢紊乱描述，正确的是( ) A.高CM血症 B.脂肪肝 C.高VLDL血症 D.酮症酸中毒 E.以上都是 5.准确度最高的临床生化方法为( ) A.经典方法 B.对比方法 C.常规方法 D.参考方法 E.决定性方法 6.C反应蛋白在下列哪种情况下不升高( ) A.细菌感染 B.病毒感染 C.急性心肌梗死 D.高血压
E.大面积烧伤 7.既能用于判断肝细胞损伤，又可用于鉴别良恶性渗出液的项目为( ) A.ALT B.ADA C.γ-GT D.ChE E.AMY 8.关于急性胰腺炎的测定下列叙述错误的是( ) A.诊断的重要指标是血、尿淀粉酶 B.尿淀粉酶的增高比血淀粉酶的增高晚 C.急性胰腺炎早期测尿淀粉酶比血淀粉酶更有意义 D.尿淀粉酶维持时间较血淀粉酶增长 E.血淀粉酶在发病后2-12小时活性开始升高 9.在缺铁潜伏期时，未出现的是( ) A.铁蛋白减低 B.细胞外铁缺乏 C.转铁蛋白饱和度减低 D.血红蛋白减低 E.血清铁降低 10.患者，女性，38岁。患急性肾小球肾炎8个月，因双下肢进行性水肿 而求医。体检：双踝压陷性水肿，面部苍白、浮肿，拟进一步做生化检查，哪项检查价值不大( ) A.血清蛋白 B.血糖 C.A／G比值 D.血尿素氮 E.尿蛋白 11.下列有关血糖的叙述，哪项是错误的( ) A.肝脏有活性很高的糖异生酶类，对维持饥饿时血糖浓度恒定很重要 B.胰岛素和肾上腺激素可降低血糖浓度 C.葡萄糖耐量试验可反映糖代谢是否正常 D.胰岛索和胰高血糖素是调节血糖浓度的主要激素 E.血糖水平保持恒定是糖、脂肪、氨基酸代谢协调的结果 12.患者，男性，44岁，因急性腹痛伴呕吐人院，血压110／60mmHg，脉 搏86次／分。在上腹部周围肠鸣音活跃，有反跳触痛。实验室检查：血