第28卷,第3期光 谱 实 验 室Vol.28,No.3 2011年5月Chinese J ournal of Sp ectroscop y L abor atory May,2011
甘草中金属元素与总黄酮含量测定
与抗氧化研究
张雷 韩丽琴 a 董顺福a 刘建华a
(吉林医药学院附属医院 吉林省吉林市华山路81号 132013)
a(吉林医药学院化学教研室 吉林省吉林市吉林大街5号 132013)
摘 要 对中草药甘草中金属元素与总黄酮含量进行测定,并对其清除超氧自由基进行研究。测定结果显示,甘草中含有丰富的金属元素和黄酮类化合物,其中总黄酮为16.42%,金属元素含量为铁>锌>锰>铜,对超氧自由基具有一定的清除作用。实验结果为研究甘草治疗呼吸系统疾病及清除自由基提供了有用的数据。
关键词 甘草;总黄酮;金属元素;抗氧化
中图分类号:O657.31;O657.32 文献标识码:A 文章编号:1004-8138(2011)03-1258-03
1 引言
甘草为豆科甘草属植物,是常用中药之一。近年来研究发现,甘草黄酮类化合物具有抑菌、抗真菌、增强机体免疫功能、抗氧化、抗肿瘤、保肝等广泛的药理作用[1]。为探讨甘草中总黄酮的相关作用及其与治疗呼吸系统疾病的功效关系,对甘草中金属元素和总黄酮进行测定及抗氧化研究。
2 实验部分
2.1 试剂与仪器
甘草,市售。
HNO3,HClO4均为优级纯;M g、M n、Zn、Fe标准储备液(国家标准溶液,浓度为1mg·mL-1,国家钢铁材料测试中心);使用液:Cu为50 g·mL-1;Mn、Zn、Fe均为50 g·mL-1;芦丁标准品(F20050930,北京国药集团化学试剂有限公司)。其他试剂均为分析纯。实验用水为去离子高纯水(R>106 )。
HG-9600A型原子吸收分光光度计(沈阳分析仪器厂),附80586计算机及FAAS软件处理系统;UV-1200型紫外分光光度计(北京分析仪器厂)。
2.2 实验方法
2.2.1 甘草中金属元素测定
取样品50g,烘干研碎,充分混匀,准确称取1.0000g,平行取3份,置于25mL锥形瓶中,加浓HNO310mL,封口过夜;次日分别加入浓HNO310m L、HClO45mL,于电热板上缓慢加热,当剩下
吉林省教育厅课题(第自125号)
联系人,电话:(0432)64560784;E-mail:a5699@https://www.doczj.com/doc/005901770.html,
作者简介:张雷(1965—),男,吉林省吉林市人,副主任药师,学士,主要从事医院制剂与药物分析工作。
收稿日期:2010-07-02;接受日期:2010-08-03
1mL 左右时再加浓HNO 320mL 、HClO 45mL ,继续消解至溶液呈无色透明近干为止。
用3%硝酸稀释溶解,转移至50mL 容量瓶中,用3%硝酸定容至刻度,选择仪器最佳工作条件,分别测定样品液中Cu 、Zn 、Cr 、Mn 的含量,仪器工作条件见表1,测定结果见表2。
表1 仪器工作条件
元素波长(nm )灯电流(mA)火焰高度(mm)光谱通带(nm )乙炔流量(L/min)空气流量(L/min)Cu
324.7 3.0 3.0 2.0 1.0 6.5Fe 248.3 5.0 3.0 2.0 1.0 6.5Zn 213.9 5.0 3.0 2.0 1.0 6.5M n
279.5
4.0
3.0
2.0
0.9
6.5
2.2.2 甘草中总黄酮的测定
2.2.2.1 校准曲线绘制
准确称取干燥至恒重的芦丁标准品0.0760g ,用70%乙醇溶解后,转入250mL 容量瓶中,用70%乙醇定容,摇匀备用。此溶液浓度为0.3040m g /mL 。准确移取上述芦丁溶液0、0.04、0.80、1.20、1.60mL 和2.00mL 于25mL 容量瓶中,加入70%乙醇至12.5m L ,加入0.8m L 5%NaNO 2溶液,放置5min ,加入0.8mL 5%Al (NO 3)3溶液,放置6min ,加入5mL 4%NaOH 溶液、70%乙醇稀释至刻度,放置10min,于510nm 处测定吸光度,绘制校准曲线。回归方程:A =9.2321C +0.0011,相关系数:r =0.9998。
2.2.2.2 甘草中总黄酮的提取、含量测定
准确称取中草药甘草10.0g 于索氏提取器中,120m L 乙醚回流4h ,至无色,换成70%乙醇提取10h ,过滤,减压浓缩至20mL 左右,等体积石油醚萃取,用30%乙醇定容至100mL ,在200—400nm 波长范围内紫外扫描,最大吸收波长为260nm 。
准确量取提取液0.5m L 于25mL 容量瓶中,加70%乙醇至12.5mL ,加入0.8mL 5%NaNO 2溶液,放置5min,加入0.8mL 5%Al(NO 3)3溶液,放置6min,加5mL 4%NaOH 溶液、30%乙醇稀释至刻线,放置10min,于510nm 处测定吸光度。总黄酮含量为16.42%。2.2.3 总黄酮清除氧自由基测定
锥形瓶中加入5mL Tris-HCl 缓冲溶液、0.2mmol/L 样品液0.1、0.5、1.0、2.0mL,37℃恒温预热15m in,迅速加入预热的邻苯三酚1mL,反应4min 后加入0.5mL 浓盐酸终止反应,在320nm 波长下测定吸光度,并计算总黄酮对氧自由基的清除率E (%)。取0.5mL 样品液加入0.5mL 不同金属离子,相同条件下测定自由基的清除率E (%)。测定结果见表3。
E (%)=1-A 1-A 2
A 0×100%式中:A 0——未加样品的溶液吸光度;A 1——未加邻苯三酚的溶液吸光度;A 2——加入样品和邻苯
三酚的溶液吸光度。
3 结果与讨论
3.1 结果
甘草金属离子含量及对氧自由基清除率测定结果见表2、表3、表4。
表2 甘草金属离子含量测定结果
( g ?g -1,n =6)
金属离子铁铜锌锰含量
301.6825
0.3550
29.7770
24.1777
1259
第3期张雷等:甘草中金属元素与总黄酮含量测定与抗氧化研究
1260光谱实验室第28卷
从测定结果看,甘草中含有丰富的金属元素,铁元素的含量最高,但铜元素含量较低。
表3 总黄酮清除氧自由基测定结果
甘草黄酮溶液加入量(mL)0.100.50 1.00 2.00 E(%)13.7522.6030.2232.62
从表3测定结果看,对氧自由基的清除率E(%)随着甘草的加入量增多而增大,清除率与浓度呈正相关。
表4 总黄酮与金属离子清除氧自由基测定结果
金属离子(0.1mol/L,0.5mL)
甘草
Fe Cu Zn M n E(%)29.0928.7235.6137.75
从表4测定结果看,在加入金属离子后,甘草黄酮清除率明显增加,且加入不同金属离子清除率不同。总黄酮与M n结合后对氧自由基清除率最高。
3.2 讨论
中草药因毒副作用小、富含黄酮类化合物,成为人们进行身体保健、治疗疾病的首选。近年来越来越多的研究表明,总黄酮与人体健康有着密切的关系。
提取总黄酮的溶剂可采用不同浓度的甲醇、乙醇。本试验用乙醚回流,去除药品中脂溶性的色素,选用乙醇作溶剂,可将黄酮全部提出,用石油醚进一步萃取后,可除去溶解于乙醇中的杂质,并避免和减少多种水溶性成分的溶出。
4 结论
甘草中含有丰富的金属元素和总黄酮,黄酮类化合物本身具有清除氧自由基作用,与金属离子可以相互作用后可以更有效去除体内游离基。
参考文献
[1]王淑杰,王淑华,刘钢.双波长紫外分光光度法测定甘草中总黄酮的含量[J].宁夏医学院学报,2005,27(6):506.
Determination of Metal Elements and Flavonoid in Licorice Root
and Study on Antioxidant Mechanism
Z HANG Lei H AN Li-Qin a D ONG Shun-Fu a L IU Jian-Hua a
(T he Af f i liated H ospital of Jilin M ed ical Colleg e,Jilin,Jilin132013,P.R.China)
a(Department of Chemistry,Jilin M ed ical Colleg e,Jilin,J i lin132013,P.R.China) Abstract T he contents of m etal elements and flavonoid were determined and the antioxidative activity w as studied.T he contents of metal elements and flavonoid w ere rich in licorice root,the content of flavonoid was16.42%,the contents of metal elements are in the order of iron>zinc> manganese>copper.Flavonoid had antioxidative activity on superox ide radical scavening.The results provide a useful data for using licorice root to against respiratroy sy stem diseases and scavenge free radical.
Key words Licorice Root;Flavonoid;M etal Elem ent;Antioxidant
复方甘草酸苷片 说明书来源: 日本米诺发源制药株式会社 【药品名称】 通用名称：复方甘草酸苷片英文名称：CompoundGlycyrrhizinTablets商品名称：美能 【成份】 本品为复方制剂，其组份(每片) 为：甘草酸苷(Glycyrrhizin) 25mg甘草酸单铵盐(MonoammoniumGlycyrrhizinate) 35mg甘氨酸(Aminoacetic Acid) 25mg蛋氨酸(Methionine) 25mg 【性状】 白色糖衣片。 【适应症】 慢性肝病，改善肝功能异常。湿疹、皮肤炎、斑秃。 【规格】 【用法用量】 成人通常1次2-3片，小儿1次1片，1日3次，饭后口服。可依年龄、症状适当增减。【不良反应】 本制剂在治疗慢性肝病时，在双盲法试验107例中，7例(占6.5%) 出现副作用。主要症状有血钾值降低2例(占1.9%) ，血压上升2例(占1.9%) ，腹痛2例(占1.9%) 等。重要副作用假性醛固酮症(Pseudoaldosteronism)(发生频率不明) ：可以出现低血钾症、血压上升、钠及体液潴留、浮肿、尿量减少、体重增加等假性醛固酮增多症状，因此在用药过程中，要充分注意观察(血清钾值等) ，发现异常情况，应停止给药。另外，可出现乏力感、肌力低下、肌肉痛、四肢痉挛、麻痹等横纹肌溶解的症状，在发现CK (CPK) 升高，血、尿中肌红蛋白升高时应停药并给与适当的处置。其它副作用还可能出现以下症状(见表) 。 【禁忌】 (以下患者不宜给药)醛固酮症患者、肌病患者、低钾血症患者(可加重低钾血症和高血压症) 。有血氨升高倾向的末期肝硬化患者(该制剂中含有的蛋氨酸的代谢物可以抑制尿素合成，而使对氨的处理能力低下) 。 【注意事项】 慎重给药对高龄患者应慎重给药(高龄患者低钾血症发生率高)(参照【老年用药】) 。重要注意事项由于该制剂中含甘草酸苷，所以与其它甘草制剂并用时，可增加体内甘草酸苷含量，容易出现假性醛固酮增多症，应予注意。给药时注意药品交付时，应指导服药时请将片剂从铝箔包装中取出后再服用(有报导将铝箔一起服用而导致食道粘膜损伤，甚至穿孔引起纵膈炎症等危重并发症) 。 【孕妇及哺乳期妇女用药】 孕妇及哺乳期妇女，应在权衡治疗利大于弊后慎重给药。 【儿童用药】 尚未有药理、毒理或者药代动力学方面与成人差异的试验。药物使用请参见【用法用量】和【注意事项】。 【老年用药】 基于临床应用经验，高龄者有易发低血钾副作用倾向，因此需在密切观察基础上，慎重给药。【药物相互作用】
第一讲：茶叶重金属元素含量现状及累积特 点 第一讲:一岍:茶叶重金属元素含量现状及累积特点 石元值金李孟祝幼松 (中国农业科学院茶叶研究所,310008)(绍兴御茶村茶业有限公司)(嵊州市三办镇农办) 随着现代无机生物化学的发展与进步,已发现茶叶中含 有50多种矿质元素,这些元素中有很多种属于重金属元素, 与人类的健康息息相关.有些重金属元素如锌,锰,铜,铁等 对人体或茶树来说都是必需的微量矿质营养元素,若人体或 茶树摄入量不足,均易导致多种疾病,但如果摄入过多,也易 产生毒副作用.而有些重金属元素对人体及茶树来说都为非 必需元素,如铅,汞,镉等,这些元素对人体或茶树来说均只 有害处,没有益处. 通常来说,重金属是指比重大于4的金属,约有45种, 如铜,铅,锌,铁,钴,镍,钒,铌,钽,钛,锰,镉,汞,钨,钼,金, 银等.从环境亏染方面所说的重金属元素,实际上主要是指 汞,镉,铅,铬以及类金属砷等生物毒性显着的重金属,也指 具有一定毒性的一般重金属如锌,铜,钴,镍,锡等.它们在危 害环境方面的特点是:微量浓度即可产生毒性(一般为1～ 10mg/1,汞,镉为0.001—0.010mg/1),在微生物作用下会转化 为毒性更强的有机金属化合物(如洋一甲基汞);可被生物富 集,通过食物链进入人体,造成慢性中毒.亲硫重金属元素 (汞,镉,铅,锌,硒,铜,砷等)与人体组织某些酶的巯基(一 SH)有特别大的亲合力,能抑制酶的活性.亲铁元素(铁, 镍)可在人体的肾,脾,肝内累积,抑制精氨酶的活性.六价 铬可能是蛋白质和核酸的沉淀剂,可抑制细胞内谷胱甘肽还
原酶,导致高铁血红蛋白,可能致癌.过量的钒和锰(亲岩元素)则能损害神经系统的机能.重金属的污染有时会造成很 大的危害,例如13本发生的水俣病(汞污染)和骨痛病(镉 污染)等公害病,都是由重金属污染引起的,所以应严格防 止重金属污染. 一 ,茶叶中主要的重金属元素及其特性 1.铅 铅是一种有神经毒性的微量重金属元素,为生物体非必 需元素,对人体无任何生理功用,理想血液中浓度为零.但因全球现代工业和交通的迅猛发展,使铅在环境中普遍存在, 如涂料油漆,铅笔,教科书的彩色封面,玩具,汽车尾气和工 业废气等都含铅;煤在燃烧中释放铅;含铅焊锡在罐头食品, 水管等的应用,使食物和饮用水中也含铅.铅通过手一口途径,或经呼吸道进入人体.铅被人体吸收后,90%储存在骨 骼,其余随血液分布到全身各器官和组织.铅在生物体中会 作用于生物体全身,并能使卟啉代谢产生障碍,进而阻碍血 红蛋白的合成.铅对人体神经末梢和中枢神经的侵害,会引 起神经衰弱症,多发性神经炎,铅中毒性脑病,产生消化不良和铅I生贫血等.值得一提的是,铅对人体的影响是个"剂量一效应"持续累积的过程,随血铅水平的提高,可对全身血液, ? 17? 神经,肾脏,内分泌和免疫等各系统产生毒性作用,临床表现复杂,缺乏特异性.铅对儿童智能发育及体格生长的影响更 为显着,常会引起智能下降,生长迟缓等.研究表明,儿童的 智力低下发病率随铅污染程度的加大而升高,儿童体内血铅每上升l0g/1,儿童智力下降6～8分.为此,美国把普遍认 为会使儿童产生中毒的血铅含量下限由0.25g/ml下降到
燕麦总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 （一）、样品处理及总黄酮的提取 1. 将样品籽粒分别称取 2.5 g置于小信封里，80℃烘干24 h。 2. 研成粉末，称取500±2 mg样品于10 mL离心管中，使样品位于试管底部（重复3次）。 3. 每管加4 mL 60％乙醇，放水浴锅60℃浸提2 h。6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于10 mL容量瓶中。 4. 再向离心管中加4 mL的60％乙醇，放水浴锅60℃浸提1 h。6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应的10 mL容量瓶中。60％乙醇定容至10 mL，待测。 （二）、标准曲线绘制 1. 精确量取浓度200 μg/mL芦丁标准溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL 分别置于10 mL容量瓶中。 2. 向容量瓶中分别加60％乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5％亚硝酸钠0.3 mL，摇匀，静置6 min。 4. 再加10％硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min。 5. 加4％氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为纵坐标，以吸光度为横坐标，绘制标准曲线。 （三）、样品提取液总黄酮含量的测定 准确吸取总黄酮提取液2.0 mL于10 mL容量瓶中，按二的方法测定吸光度，
复方甘草酸苷片说明书 药名：复方甘草酸苷片 【性状】本品为白色糖衣片。 【组分】甘草甜素25mg（甘草酸单胺盐35mg)、甘氨酸25mg、蛋氨酸25mg 【适应症】治疗慢性肝病，改善肝功能异常。可用于治疗湿疹，皮肤炎、斑秃。 【禁忌】1．醛固酮症患者，肌病患者，低钾血症患者（可加重低钾血症和高血压症）。2．有血氨升高倾向的末期肝硬化患者（该制剂中所含有的蛋氨酸的代谢物可以抑制尿素合成，而使对氨的处理能力低下）。 【孕妇及哺乳期妇女用药】孕妇及哺乳期妇女，应在权衡治疗利大于弊后慎重给药。 【儿童用药】小儿1次1片，1日3次饭后口服。 【老年用药】高龄者有易发低血钾不良反应倾向，药理作用1抗炎症作用（1）抗过敏作用：甘草酸苷可抑制兔局部过敏反应(ArthusPhenomenon)及抑制施瓦茨曼(ShwartsmanPhenomenon)等抗过敏作用。对皮质激素,有增强激素的抑制应激反应作用，拮抗激素的抗肉芽形成和胸腺萎缩作用。对激素的渗出作用无影响。（2）对花生四烯酸代谢酶的阻碍作用甘草酸苷可以直接与花生四烯酸代谢途径的启动酶-磷脂酶A2)结合以及与作用于花生四烯酸使其产生炎性介质 【药物相互作用】与袢利尿剂、利尿酸、速尿等噻嗪类及降压利尿剂三氯甲噻嗪、氯噻酮等同时使用时可能出现低血钾症，应特别注意血钾的检测。 不良反应不良反应有：重要副作用假性醛固酮症（发生频率不明）：可以出现低血钾症、血压上升、钠及液体贮留、浮肿、尿量减少、体重增加等假性醛固酮增多症状。还可出现脱力感、肌力低下、肌肉痛、四肢痉挛、麻痹等横纹肌溶解症的症状，在发现CK(CPK)升高，血、尿中肌红蛋白升高时应停药并给与适当处置。复方甘草酸苷片是可以引起脱力感，检查一下电解质和血尿。 其他副作用： 1.服用复方甘草酸苷片可能会出现出没力气、乏力，这可能是电解质代谢的异常。 2.据研究表明长期服用复方甘草酸苷片可以出现低血钾症、血压上升、钠及液体贮留、浮肿、尿量减少、体重增加等假性醛固酮增多症状，因此在用药过程中，要充分注意观察（血清钾值等），发现异常情况，应停止给药。 3.还可出现肌力低下、肌肉痛、四肢痉挛、麻痹等横纹肌溶解症的症状，在发现CK(CPK)升高，血、尿中肌红蛋白升高时应停药并给与适当的处理。 药疹，药物不良反应， 硫代硫酸钠1.28 禁忌与重金属盐、氧化物和酸混合。对本药过敏者。 1.本品与亚硝酸钠同时应用，可加重血压降低。 2.本品作为抗氧化剂，可防止 呋喃西林溶液浓度下降。 2.本品为氰化物解毒剂，在酶的参与下与体内游离的(或与正铁血红蛋白结合的) 氰离子相结合，使其变为无毒的硫氰盐。在体内尚能与砷、汞、铅等金属离子结合，形成无毒的硫化物排出体外。此外有抗过敏作用，临床上用于皮肤瘙痒症，慢性荨麻疹。本品主要用于解救氰化物中毒，解毒效果明显，是氰化物中毒者抢救常用药物。
总黄酮含量测定 一样品溶液的制备 70%乙醇溶液，料液比1﹕8 ，80度下回流2h。取10g样品放入圆底烧 瓶中加入80ml 70%乙醇溶液回流2h,抽滤定容至100ml备用。使用时先离心再用70%乙醇稀释10倍做样品溶液。 二芦丁标准品的配置 精密称取芦丁2mg，加无水乙醇定容至10ml。制得浓度为0.2mg/ml芦 丁标准品溶液。 三显色方法的确定 1 扫描原液分别取芦丁溶液和样品溶液各1ml，加无水乙醇定容至25ml，空白对照，全波扫描。 2硝酸铝显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加5%亚硝酸 钠溶液（1.25g亚硝酸溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 摇匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液(4,4014g硝酸铝.九水溶于无水乙醇中定容到25ml 容量瓶中) 1ml，摇匀，放置6min，加4%氢氧化钠试液(2g氢氧化钠溶于无水乙醇中定容到50ml容量瓶中）10ml, 再加无水乙醇定容至25ml，摇匀，放置15min，空白对照，全波扫描bb 。 3氯化铝显色法分别取芦丁对照溶液和样品溶液各5ml ,加1%的氯化 铝溶液（1g氯化铝溶于无水乙醇中定容到100ml容量瓶中)10ml，摇匀放置10min，空白对照，全波扫描。 4 氢氧化钾显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加3ml10% 氢氧化钾溶液（2.5g氢氧化钾溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中）， 充分摇匀显色5min后，用无水乙醇定容至25ml, 摇匀，空白对照，全波 扫描。 四显色条件的确定 五标准曲线的绘制 分别取1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml芦丁对照品溶液，按所选的显色方法测定吸光度，绘制标准曲线。 六精密度实验 按标准曲线绘制方法，分别准确量取1.0ml芦丁标准液5份，按所选显色剂和所确定的最优显色条件在所选波长下测定吸光度。
总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 （一）、标准曲线绘制 1. 芦丁标准品40mg置于称量瓶中80℃烘干至恒重，取烘干后的20mg芦丁标准品用水定容至100mL,得200μg/mL芦丁标准贮备液，精确量取上述浓度芦丁标准贮备溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL分别置于10 mL具塞试管中。 2. 向具塞试管中分别加60％乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5％亚硝酸钠0.3 mL，摇匀，静置6 min。 4. 再加10％硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min。 5. 加4％氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。研究表明芦丁标准品含量在0～0.5mg 范围内与吸光度具有良好的线性关系。 （二）、样品处理及总黄酮的提取（以60%乙醇提取为例） 1. 将样品在80℃烘干24 h，粉碎后过80目筛置于干燥器中备用。 2. 称取500±2 mg样品于25 mL具塞三角瓶中，使样品位于三角瓶底部（重复3次）。 3. 每瓶加4 mL 60％乙醇，放超声波提取器提取2 h。提取液转至10 mL具塞离心管中。 4. 再向具塞三角瓶中加4 mL的60％乙醇，放超声波提取器提取1 h，提取液转至相应10 mL具塞离心管中，6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应
复方甘草酸苷片(美能)的说明书 现在的肝胆胰腺类疾病属于一种常见疾病了，人们的生活日益富饶，饮食方面的不节制很容易造成一系列的肝胆胰腺类疾病出现，药物治疗成为了当务之急。目前服用复方甘草酸苷片(美能)治疗肝胆胰腺类疾病的效果非常好，许多患者服用复方甘草酸苷片(美能)都得到了有效的治疗，下面我们先来看看具体的介绍吧。 【药品名称】 通用名称：复方甘草酸苷片 商品名称：复方甘草酸苷片(美能) 英文名称：Compound Glycyrrhizin Tablets 拼音全码：FuFangGanCaoSuanGanPian(MeiNeng) 【主要成份】本品为复方制剂，其组分为：每片含甘草酸苷25mg、甘氨酸25mg、蛋氨酸25mg。
【性状】本品为白色糖衣片,除去包衣后显白色或类白色。 【适应症/功能主治】治疗慢性肝病，改善肝功能异常。可用于治疗湿疹、皮肤炎、斑秃。 【规格型号】25mg*10s*10板 【用法用量】成人通常1次2-3片，小儿1次1片，1日3次饭后服用。可依年龄、症状适当增减。 【不良反应】尚未实施调查本制剂使用中出现不良反应的确实发生频率。重要不良反应：假性醛固酮症(发生频率不明)：可以出现低血钾症、血压上升、钠及液体贮留、浮肿、尿量减少、体重增加等假性醛固酮增多症状，因此在用药过程中，要注意观察(血清钾值等)，发现异常情况，应停止给药。另外，还可出现脱力感、肌力低下、肌肉痛、四肢痉挛、麻痹等横纹肌溶解症的症状，在发现CK(CPK)升高，血、尿中肌红蛋白升高时应停药并给予适当处置。 【禁忌】以下患者不宜给药：1.醛固酮症患者，肌病患者，低钾血症患者(可加重低钾血症和高血压症)。2.有血氨升高倾向的末期肝硬化患者(该制剂中所含有的蛋氨酸的代谢物可以抑制尿
银杏叶黄酮提取及含量测定 一、实验目的 1、掌握银杏叶中黄酮的提取方法 2、了解银杏叶中黄酮的含量测定 二、实验原理 近几年来，随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视，黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。 １．１有机溶剂浸提法 目前国内外使用最广泛的银杏叶中黄酮的提取方法就是有机溶剂提取法，一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇或某些极性较大的混合溶剂，如甲醇－水（１＋１）溶液。由于甲醇的毒性、挥发性较大，因此一般采用乙醇作为提取剂。银杏叶干燥粉碎后用有机溶剂浸泡、提取、过滤，滤液中的溶剂经减压蒸馏除去后得银杏叶浸膏粗提物。徐桂花等［１］提取银杏叶中黄酮类化合物时，采用乙醇（７０＋３０）溶液为提取剂，提取温度为７０℃，料液质量浓度比为１ｇ比４０ｍＬ，提取时间为４ｈ。由于乙醇提取工艺在安全性、溶剂成本、效率及杂质酚酸去除等方面都不能应对日益严酷的市场竞争，张林涛等［1］提出了以硼砂－ 氢氧化钙碱水为溶剂提取银杏叶黄酮，其黄酮提取率与文献值相近，但提取工艺时间缩短为１ｈ。 １．２超声波提取法 超声波提取法是利用搅拌作用、强烈的振动和空间效应、高的加速度等使药物有效成分进入溶剂，从而提高提取率，缩短提取时间，并能消除高温对提取成分影响的一种提取法。刘晶芝等［2］运用了超声波技术与水浸提取相结合的方法得出超声波提取的最佳工艺条件为：超声频率４０ｋＨｚ，超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比１００，提取温度３５℃，静置３ｈ，提取率为８１．９％。郭国瑞等［3］以水为介质，超声波提取银杏叶中黄酮苷，与常规水浸提法比较，超声波提取效率大大提高，确定超声波提取的最佳工艺为：超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比３０，提取温度５０℃，提取率为８２．３％。 １．３超临界流体萃取法 超临界流体萃取法是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对有效成分进行萃取和分离的新技术。可作为超临界流体的物质很多，其中二氧化碳临界温度（ＴＣ＝３１．３℃）接近室温，且具有无色、无毒、无味、不易燃、化学惰性、价廉、易制成高纯气体等优点而被广泛应用，特别在中药材及其制剂中更显示出其独特、简便、快速、具有较高的选择性、提取杂质少、可直接进样分析的优点。邓启焕等［4］探讨了超临界萃取银杏叶有效成分的影响因素，最佳条件为萃取压力２０ＭＰａ、时间９０ｍｉｎ、粒度３．９ｍｍ、温度４０℃，经测定银杏叶黄酮的质量分数为２８％，高于国际公认标准。 １．４微波提取法 微波提取法是利用分子或离子在微波场中的导电效应直接对物质进行加热从而提取植物细胞内耐热物质的新工艺。曾里等［5］的研究表明以乙醇溶液作溶剂比以水作溶剂的效果好，最佳条件为以乙醇 （６０＋４０）溶液为提取剂，解冻处理２０ｍｉｎ。张鹏等［6］对微波法提取银杏叶中黄酮类物质进行了研究，最佳提取条件为以乙醇（５０＋５０）溶液
复方甘草酸苷片产品可行性分析 目录 1 产品简介 (1) 2 复方甘草酸苷片的研究现状 (1) 3复方甘草酸苷片的市场容量 3.1肝病 3.1.1乙肝的流行病学 (1) 3.1.2药物性肝病 (3) 3.2皮肤病 3.2.1皮肤病的流行病学 (4) 3.2.2皮肤病的市场容量 (4) 4主要竞争品牌 4.1抗炎保肝药物基本情况 (5) 4.2甘草酸制剂在四川省内销售情况 (6) 5四川省同类竞争产品情况 5.1复方甘草酸苷制剂销量比较 (7) 5.2复方甘草酸苷口服制剂 5.2.1口服制剂基本情况 (7) 5.2.2口服制剂四川市场销量情况 (9) 6帅能?复方甘草酸苷片销售现状 (10) 7片剂四川市场招投标情况 (11) 8综合分析 (13)
1、产品简介 【通用名称】复方甘草酸苷片 【成份】甘草酸单铵盐、甘草酸苷、甘氨酸、甲硫氨酸。 【性状】本品为白色糖衣片 【功能主治】治疗慢性肝病，改善肝功能异常。可用于治疗湿疹、皮肤炎、斑秃。【用法用量】成人通常1次2—3片，小儿1次1片，1日3次，饭后口服。可依年龄、症状适当增减。 【药理作用】 （1）抗炎症作用①抗过敏作用②对花生4烯酸代谢酶的阻碍 （2）免疫调节作用 （3）对实验性肝细胞损伤的抑制作用 （4）抑制病毒增殖和对病毒的灭活作用 2、复方甘草酸苷片的研究现状 目前，复方甘草酸苷片主要用于皮肤科、小儿科和肝病科，可单独或联合其他药物治疗白癜风、斑秃、急性肝损伤等疾病，具有大量文献研究作为疾病用药的基础，是临床上应用非常成熟的品种。 （需要给出现在的一个国内外学术研究情况，研究报告目录） 3、复方甘草酸苷片的市场容量 3.1肝病 3.1.1乙肝的流行病学 乙型病毒性肝炎(viral hepatitis type B，简称乙肝)系由乙肝病毒(HBV)引起，以乏力、食欲减退、恶心、呕吐、厌油、肝大及肝功能异常为主要临床表现。部分病例有发热和黄疸；少数病例病程迁延转为慢性，或发展为肝硬化甚至肝癌；重者病情进展迅猛可发展为重型肝炎；另一些感染者则成为无症状的病毒携带者。 乙型肝炎可分为急性肝炎和慢性肝炎。急性肝炎病程一般持续少于六个月，且
茶叶中重金属含量分析 学习目的： 1．通过实验了解茶叶中重金属检测的意义。 2．了解茶叶中重金属检测的方法。 中国是茶的发源地，不仅种植面积和茶类品种等均居世界前列，而且还拥有丰富的种质资源，这是人类宝贵财富，也是我国茶业发展的物质基础。但近年来随着我国加入世界贸易组织，部分贸易国调整了茶叶质量标准，也由于我国茶叶卫生质量总体不高，从而影响了我国茶叶出口圆。茶叶生产重金属超标问题，也严重制约着我国的茶产业经济效益！化学上常把相对密度在5以上的金属称为重金属。如：金、银、铜、铅、锌、镍、钴、铬、汞、镉等大约45种。茶叶中的重金属主要包括铅(Pb)、铜(Cu)、汞(№)、铬(Cr)、砷(As)、镉(cd)等，这些重金属都有可能通过茶树吸收进入到茶叶中。虽然有些元素，如铜、铁等是人体不可缺少的微量元素，但大部分重金属元素并非人体生命活动所必需，摄人量过多时会对人体及动植物造成伤害。 茶叶中重金属来源：
检测方法： 1.原子吸收光谱 原子吸收光谱(Atomic Absorption Spectroscopy，AAS)即原子吸收光谱法，是基于气态的被测元素基态原子外层电子对紫外光和可见光范围的吸收为基础进行元素定量分析的方法。也是检测茶叶中重金属元素最常用的一种方法。 2. 分光光度法 分光光度法是一种经典的方法，其所需仪器常见，测定成本低，方法简单，稳定性、回收率均符合要求，适宜在实验室及中小型茶场中推广。但是对低含量的重金属检测达不到要求。 3．电化学分析法 电分析化学方法是一种公认的快速、灵敏、准确的微量和痕量分析方法，用于测定茶叶中重金属含量也有较多报道。其中又有伏安分析法、离子选择性电极法、极谱分析法、电位溶出法等。电化学法灵敏度、准确度高，测量范围宽，仪器设备简单，价格低廉，容易实现自动化，但条件苛刻，测定结果重现性差。 4. 电感耦合等离子体原子发射光谱法 电感耦合等离子体原子发射光谱法(InductivelyCoupled Plasma-Atomic Emission Spectrometry，ICPAES)法是近几十年发展起来的一种新的分析技术，也是目前为止公认能够有效地进行多元素测定的方法。它具有灵敏度高、稳定性好、线性范围宽和同时测定或顺序测定多元素等特点，能够广泛地应用于各个行业中。 此外，茶叶中重金属的检测方法还有高效液相色谱法、毛细管离子分析法、电感耦合等离子体质谱分析法(Inductively Coupled Plasma Mass Spec—trometry，ICP—MS) 等。 样品处理方法： 传统方法一般分为灰化法和消化法两种。灰化法采用高温灼烧破坏样品中的有机物，最后用稀硝酸来溶解灰分中的重金属。消化法则利用浓硝酸和浓硫酸
1 各批次药材含量测定 使用已经确定的总黄酮含量检测方法分别进行5个批次原料含量的测定 总黄酮含量测定：分别精密称取药材粗粉0.5g，置100ml锥形瓶中，加70%乙醇50ml，称定重量，超声60分钟，放冷，称定，加入70%乙醇补足减失重量，摇匀，过滤，弃去粗滤液，精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂，待充分吸附后，用乙醇进行洗脱，至流出液基本无色，以洗脱液定容至25ml量瓶中，备用。精密量取供试品溶液5ml，置10ml比色管中，加 5％亚硝酸钠溶液0.4ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6 分钟，加2mol/L氢氧化钠溶液3ml，再加30%乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，照分光光度法（《中国药典》2010版一部附录Ⅴ B），在504nm 的波长处测定吸收度。 表1 不同批次药材总黄酮含量测定结果 批号含量（%） 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035 20140516紫外扫描色谱图 2 药材总黄酮转移率研究 2.1 单个药材转移率研究
2.1.1 单个药材的转移率测定 同一批次的各药材，分别按照产品生产工艺提取得单个药材的总黄酮浓缩液样品，进行总黄酮含量检测，与“1”项下同批药材的总黄酮含量相比得出单个药材的转移率（如下式），分别进行5批次药材测定。 黄芪、桑叶、黄精、山茱萸：分别取黄芪、桑叶、黄精、山茱萸各100g，加水煎煮两次（回流），第一次加水12倍量，煎煮2.0h，过滤；第二次加水10倍量，煎煮1.0h，过滤，合并滤液浓缩至100ml，备用。 黄芪不同浓缩程度的考查：取黄芪100g，加水煎煮两次（回流），第一次加水20倍量，煎煮2.5h，过滤；第二次加水20倍量，煎煮2.0h，过滤，合并滤液，重复试验三次，分别浓缩至50ml、100ml、200ml，备用。 精密量取上述溶液5ml，加乙醇15ml，摇匀，过滤，弃去粗滤液，精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂，待充分吸附后，用乙醇进行洗脱，至流出液基本无色，以洗脱液定容至25ml量瓶中，备用。精密量取供试品溶液5ml，置10ml 比色管中，加5％亚硝酸钠溶液0.4ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6 分钟，加2mol/L氢氧化钠溶液3ml，再加70%乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，照分光光度法（《中国药典》2010版一部附录ⅤB），在504nm 的波长处测定吸收度。 表2 不同批次药材提取液总黄酮含量测定结果 批号含量（%） 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035
复方甘草酸苷胶囊(凯因甘乐)的说明书 肝胆胰腺类疾病是大多数中年朋友都会患上的疾病，随着人们年纪逐渐增大，身体对于食物的消化能力越来越差，这就导致了肝胆胰腺疾病发病率越来越高。药物治疗肝胆胰腺疾病是大家都比较热衷的选择，服用复方甘草酸苷胶囊(凯因甘乐)治疗肝胆疾病效果特别显著，下面我们来看看对于复方甘草酸苷胶囊(凯因甘乐)的各种介绍吧。 【药品名称】 通用名称：复方甘草酸苷胶囊 商品名称：复方甘草酸苷胶囊(凯因甘乐) 拼音全码：FuFangGanCaoSuanGanJiaoNang(KaiYinGanLe) 【主要成份】每粒含甘草酸苷25mg、甘氨酸25mg、蛋氨酸25mg，做为辅料，还含有乳糖、碳酸钙、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、滑石粉、硬脂酸镁及聚维酮k30适量。
【性状】本品为胶囊剂，内容物为淡黄色颗粒。 【适应症/功能主治】治疗慢性肝病，改善肝功能异常。可用于治疗湿疹﹑皮肤炎﹑斑秃。 【规格型号】10s*4板 【用法用量】成人通常1次2-3粒，小儿1次1粒，1日3次，饭后口服。 【不良反应】大量或长期给予甘草酸后可见到低血钾、血压升高、血钠及体液贮留、浮肿、体重增加等伪醛固酮症。对于其发病机制，熊谷朗认为是由于甘草酸及其代谢产物甘草次酸抑制了肝内Δ4- 3Ketocteroid（甾酮类物质）的代谢酶Δ4-reductase（Δ4-还原酶）的活性；Stewort认为，是由于在肾脏甘草次酸抑制了使cortisol转化成cortisone的代谢酶11β-HCD（11-β-羟甾类脱氢酶）的活性，使过剩的氢化可的松代替了醛固酮与肾脏I型受体结合，从而发挥了水电皮质激素样作用。当健康人长期给予甘草酸后也可见到不同程度的水电皮质激素样作用。另外，也有关于甘草酸使11β-HCD活性受到抑制导致类固醇代谢异常的报道[9]。然而，伪醛固酮症的出现也只限于大量或长期给予甘草或甘草酸的患者，而在这些患者中也与个体差异有关[10]。
重金属含量的检测（硫化钠—丙三醇法） 1、引用标准：GB/T 8451—1987 2、原理 在乙酸介质中（PH3~4），将重金属转变为硫化物沉淀悬浮在溶液中，并用目视比色法进行测定 3、使用试剂 3.1 盐酸（1+3） 3.2 氨水（1+2） 3.3 酚酞（10g/L乙醇溶液） 3.4 冰乙酸（6%溶液） 3.5 硫化钠—丙三醇溶液（配制：将5g硫化钠溶解于10ml水和30ml丙三醇的混合液中，混匀，装入棕色瓶中，避光封闭保存，有效期三个月） 3.6 铅标准溶液：1ug/ml 4、实验步骤 4.1 标准管的制备 准确移取铅标准溶液（1ug/ml）至比色管中，加水至25ml，混匀，滴加氨水（1+2）至溶液呈微红色，加盐酸（1+3）使红色刚刚褪去，再加入2ml冰乙酸（6%），用水稀释至50ml，混匀，此时溶液PH控制在3.5~4.0，向标准管中加入2滴硫化钠—丙三醇溶液，充分混合，放置5min，待用。 4.2 样品管的制备 1.称取1g适量样品（准至0.0001g），加水溶解至25ml，滴加氨水（1+2）至溶液呈微红色，加盐酸（1+3）使红色刚刚褪去，再加入2ml冰乙酸（6%），用水稀释至50ml，混匀，此时溶液PH控制在3.5~4.0，向样品管中加入2滴硫化钠—丙三醇溶液，充分混合，放置5min，用比色箱进行比色 结果：样品液和标准液进行比色，样品的颜色应不深于标准 2.称取1g适量样品（准至0.0001g），加水溶解至2Hml，加PH= 3.5NaAC-HAC5ml,PH控制 3.5- 4.0，加1滴硫化钠—丙三醇溶液，充分混合，放置5min，待用。 标准管中加入2滴硫化钠—丙三醇溶液，充分混合，放置5min，待用。用比色箱进行比色
黄酮含量的测定方法 1、对照法 1） ①对照品制备：精密称取芦丁对照品20.8mg，置于100ml容量瓶中，加70%乙 醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。 ②样品溶液制备 精密称取样品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。 ③标准曲线的制备 精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加1mol/L 氢氧化钠溶液10ml，加70%乙醇置刻度，摇匀，放置15分钟。各取10ml 置于50ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。 2） ①样品溶液的制备： 分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取，料液比1：15,提取两次，每次30min，将两次提取液合并浓缩至一定体积，用30%甲醇定容至50ml 容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀释至刻度，再从100ml 容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波长的选择：分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线，均在350 nm 处有一强吸收，因此选择350 nm为测定波长。 ③标准曲线的制定： 精密称取芦丁对照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解后，转移至50ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml 容量瓶中，于350 nm 波长处测定吸光值，以芦丁空白为参比，以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，提示在4.12～12.36mg／103ml浓度之间，吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。 ④含量测定结果： 分别吸取2．2．1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中，按标准芦丁一吸光度测定法，以样液空白参比，于350nm 波长下测定吸光值，计算各提取液中总黄酮含量。 计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。 注:上式为通过回归方程转化而来，式中A为测得样品液的吸光度值，W为称样量。
他克莫司软膏联合复方甘草酸苷片治疗面部激素依赖性皮炎疗效观察 发表时间：2016-11-24T16:02:29.920Z 来源：《中国医学人文》(学术版)2016年8月第15期作者：张小超[导读] 在面部激素依赖性皮炎的治疗中，选择他克莫司软膏联合复方甘草酸苷片治疗发挥了很好的效果。 江苏省徐州市贾汪区徐州矿务集团第二医院 221001 【摘要】目的：分析他克莫司软膏联合复方甘草酸苷片用于治疗面部激素依赖性皮炎的临床效果。方法：选择我院在2014年9月~2015年5月诊治的面部激素依赖性皮炎患者76例进行治疗分析，根据治疗方法的不同将患者分为研究组和对照组患者各38例，研究组患者采用他克莫司软膏联合复方甘草酸苷片进行治疗，对照组患者采用口服复方甘草酸苷片进行治疗，比较两组患者的治疗效果和不良反应。结果：研究组患者治疗有效率为94.7%，对照组患者治疗有效率为73.6%，研究组治疗效果更好；研究组治疗出现不良反应有4例，对照组不良反应有12例，研究组治疗安全性高。结论：在面部激素依赖性皮炎的治疗中，选择他克莫司软膏联合复方甘草酸苷片治疗发挥了很好的效果，患者症状改善明显，不良反应少，临床治疗意义积极，值得推广应用。 【关键词】他克莫司软膏；复方甘草酸苷片；面部激素依赖性皮炎；配伍治疗；效果观察 面部激素依赖性皮炎指的是患者长期在面部不规范的使用糖皮质激素或者含有激素成分的劣质护肤品，使得皮肤产生激素依赖，屏障功能被破坏，在停止激素产品使用后症状加重，患者面部皮肤潮红、出现丘疹、肿胀、毛细血管扩张、干燥、脱皮有灼热感和疼痛感，瘙痒感觉明显，该疾病具有病程长、易反复等特点，对患者面部美观、生活工作等均产生了严重的影响[1]。本文分析了他克莫司软膏联合复方甘草酸苷片来治疗面部激素依赖性皮炎的临床效果，现总结如下； 1资料和方法 1.1一般资料 选择我院在2014年9月~2015年5月收治的面部激素依赖性皮炎患者76例进行治疗分析，患者均符合临床诊断标准：曾经在面部使用激素制剂，时间在1个月以上，停止使用激素后原有皮肤破损症状加重，比如灼热、瘙痒、干皱、紧绷、面色潮红、脱皮、丘疹等，曾使用过皮康王、恩肤霜和自制类激素等外用药物，主要成分有去炎松、地塞米松等糖皮质激素。排除患者患有肝肾功能不全、内科疾病、药物过敏史、妊娠期、哺乳期女性，难以配合等情况。根据患者治疗方法的不同将患者分为研究组和对照组各38例，研究组患者中男性15例，女性23例，年龄在25~43岁之间；对照组中男性16例，女性22例，患者年龄在26~44岁之间，两组患者的年龄、性别等数据资料差异不具有统计学研究意义，可比。 1.2治疗方法 研究组患者采用他克莫司软膏（批准文号：国药准字J20100015；生产厂商：安斯泰来制药（中国）有限公司；规格：0.1%（10g：10mg））联合复方甘草酸苷片（美能；批准文号：H20130148；生产厂家：秋山片剂株式会社；规格：10片*10板/盒）进行治疗[2]，观察患者面部状态，有渗液时需要先采用3%的硼酸进行湿敷，口服复方甘草酸苷片，每次一片，一日服用三次，当患者渗液情况缓解后采用他克莫司软膏药物在面部外擦，一日涂抹2次。对照组患者面部有渗液时同样采用3%的硼酸进行湿敷，口服复方甘草酸苷片，一日3次，每次一片。两组患者在治疗过程中若有明显的面部灼热感，可以用生理盐水进行冷喷处理。 1.3治疗效果评价 对比治疗前后患者面部症状好转情况，痊愈：患者面部症状完全消失，皮肤损害完全恢复；有效：患者皮损面积恢复面积在50%以上，自觉症状有明显好转；无效：面部皮损恢复面积小于50%，各项症状恢复较差或是无好转，有效率=（痊愈+有效）/例数×100%。 1.4统计学方法 本文分析了面部激素依赖性皮炎的治疗效果，其数据的分析和处理均选择统计学软件包SPSS17.0进行，计数资料用（n，%）表示，差异用卡方检验，只有当检验结果P<0.05时方可判定数据具有统计学研究意义。 2结果 从表1、表2的数据统计上看，研究组的治疗效果好于对照组患者；不良反应也少于对照组患者，数据差异均具有统计学研究意义，可比。 3讨论 临床治疗面部激素依赖性皮炎的原则是彻底停止使用原激素制剂，恢复皮肤的屏障功能，改善皮肤破损症状[3]。本文分析了他克莫司软膏联合复方甘草酸苷片治疗面部激素依赖性皮炎的临床效果，从结果中表格数据分析上看，研究组治疗的效果要好于对照组，不良反应少于对照组，说明他克莫司软膏联合复方甘草酸苷片治疗不仅能够改善患者症状，还具有很高的安全性。复方甘草酸苷片的药物主要成分是甘草甜素，其结构与糖皮质激素相似，有很好的抗过敏、抗炎、免疫调节等功效，不会对丘脑、肾上腺轴等产生影响，因此药物副作用少[4]。他克莫司为大环内酯类免疫抑制剂，可以抑制磷酸酯酶的活性，减少抗原特异性T细胞的活化与增值，减少炎性细胞因子的转录。他克莫司在抗炎上具有选择性，促进皮肤胶原蛋白的合成，改善激素造成的皮肤破损、毛细血管扩张等，对治疗激素依赖性皮炎发挥了非常好的效果。药物联合应用可以提升药效，本次治疗中出现的并发症均自行恢复，说明药物配伍治疗效果好，安全性高。结语： 选择他克莫司软膏联合复方甘草酸苷片治疗面部激素依赖性皮炎效果好，安全性高，值得临床推广治疗。
设计性实验： 银杏叶中总黄酮的提取和测定 小组人员：袁国明郎启国赵永仓王蓉 一、目的要求 1、探究不同浓度的乙醇和在不同时间下对黄酮类化合物提取率的影响。 2、掌握从银杏叶中提取总黄酮的操作步骤和测定方法。 3、了解提取银杏叶中黄酮类化合物制备的基本原理和方法。 二、实验原理 根据超声波具有空化、粉碎、搅拌等特殊作用，对银杏叶的细胞有破坏现象，使乙醇溶液能渗透到银杏叶中，以便让总黄酮溶解在乙醇中，在通过分离提纯的方法，来获得总黄酮的含量。 黄酮类是含酚羟基的化合物，能够和铝离子产生黄色络合物，在碱性条件下溶液呈红色。因此，本实验所采用的方法是在碱性溶液中加铝盐显色的分光光度法。其具体操作是在所测定的溶液中加入5％NaNO2；10%A1(NO3)3；5％NaOH溶液，在500nm波长下，用紫外分光光度法测定所提溶液中总黄酮的含量。 三、试剂和器材 1、试剂 芦丁标准品；5％NaNO2；10%A1(NO3)3；5％NaOH；30%、40%、50%、60%、70%、80％的乙醇（用95%的酒精31.91ml、42.55ml、53.19ml、68.83ml、74.47ml、85.11ml ）；及蒸馏水等。 2、材料 新鲜的银杏叶 3、器材 容量瓶25ml（×1） 100ml（×6）；吸管0.5ml（×2）1ml（×2），2ml（×1），5ml （×1）粉碎机；超声波清洗机；高速离心机；三角锥形瓶50ml（×6）；滤纸；分光光度
计；烧杯；具塞刻度试管；分析天平；20ml量筒等 四、操作方法 1、银杏叶的处理 把新鲜的银杏叶低温烘干，使水分小于8％，制成干粉，待用。 2、制作标准曲线 准确称取芦丁标准品5mg，用80％乙醇溶解，定容于25mL容量瓶中，摇匀，得0.2mg ／mL的标准溶液。 移液管精确吸取标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，分别置于10mL容量瓶中，加入5％NaNO2 0.4mL，摇匀，放置5min；加入10%A1(NO3)3 0.4mL，摇匀，放置6min；加入5%NaOH 4.0mL，再加蒸馏水至刻度，摇匀，在80℃水浴中保温10min。以试剂空白作为参比溶液。用1cm比色皿，在510nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线（标样浓度和吸光度的关系）。 表1-1 标准曲线制作 管号 1 2 3 4 5 6 7 芦丁标准液（mL）0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 5％NaNO2（mL）0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 放置时间(min) 5 5 5 5 5 5 5 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 10%Al(NO3)3 （mL） 放置时间(min) 6 6 6 6 6 6 6 5%NaOH（mL） 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 蒸馏水（mL） 5.2 5.0 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 3、探究不同时间对黄酮提取的影响 分别称取6分1g的银杏叶粉末，放在50mL的三角锥形瓶中，并作相应标记，分别加入70%的乙醇溶液各20mL，在超声波清洗机（500W）超声30 min、35 min 、40min、45 min、50min、 55min将溶液用高速离心机离心后除去滤渣，得到粗产品，用量筒量体积做记录，等待备用。 4、探究不同浓度的乙醇对总黄酮提取的影响
目录 1 引言 (1) 1．1 研究背景及意义 (2) 1．2 国内外研究概况 (3) 1．3 研究内容及路线 (5) 2 研究区域概况 (5) 2．1 自然环境概况 (5) 2．2 社会经济概况 (6) 2．3 现场周边概况 (7) 3 材料与方法 (7) 3．1 仪器与试剂 (7) 3．2 标准曲线的测定 (8) 3．3 土壤样品的采集与制备 (8) 3．4 土壤样品预处理 (9) 3．5 土壤样品重金属含量测定 (10) 3．6 准确度、精密度、检出限的测定 (10) 4 结果与讨论 (10) 4．1 标准曲线测定结果 (10) 4．2 土壤样品中重金属含量测定结果 (13) 4．3 准确度和精密度测定结果 (19) 4．4 土壤样品中重金属元素的空间分布 (19) 结论 (23) 致谢 (24) 参考文献 (25) 1 引言 土壤是决定土地功能和生态系统服务的包含物理、化学和生物成分的异质混合物。土壤可以提供营养，为生物提供栖息地和支持。它也可以是有机化合物和无机化合物的
大型汇合场所，包括重金属和类金属。自然和人为改变过程都可以导致重金属释放到生态系统中。作为一种特殊的污染物，重金属原是指密度大于4.0g/cm3的约60种元素或密度大于5.0g/cm3的45种元素[1]，如镉、铅、锌、铜等，它被普遍应用于工业生产中。由于未能进行合理的处理，它们最后将通过各种渠道被排放进环境里并大量积累于土壤中。土壤中的重金属污染由于高毒性、隐蔽性、持久性和生物积累而在世界许多地方成为严重的问题。重金属污染不仅造成农业土壤成分、结构和功能的变化，而且还抑制作物根系生长，甚至减少作物产量。此外，土壤重金属污染会直接或间接地通过食物链对人类健康产生有害影响。因此，土壤重金属的生物危害性质的污染问题引起了社会的关注。研究并建立一个正确、高效的分析方法，寻找并发现重金属元素在土壤中的分布、迁移转化规律，对人类健康和其它生物正常生长具有极其重要的意义[2]。 1．1 研究背景及意义 1.1.1 土壤重金属的研究背景 随着近几十年来工业化和城市化的快速发展，土壤重金属污染加剧，生态环境质量也大幅度下降。土壤重金属的来源具有多样性。一般分为自然来源和人为来源。部分重金属元素天然存在于自然系统的土壤母质中，这部分重金属主要是以不易使生物循环利用的形式存在，土壤中重金属的天然含量往往保持在较低水平。因此，重金属的富集通常是人类活动因素造成的，而人类活动污染源一般又分为农业生产污染源、工业生产污染源和生活污染源。在农业生产中，含有重金属的受污染水体经过灌溉会将重金属转移至土壤。除此之外，还有化肥的不恰当使用。农业生产频繁使用的石灰和超磷酸盐肥料不仅含有植物生长所必需的营养元素，还含有As、Cd和Pb等有毒金属元素。煤燃烧导致的大气污染，也极易使重金属污染扩散到土壤。金属矿石的开采和加工以及交通运输都可能会加重土壤中重金属的污染程度。还有部分工业污染源是基于重金属和有机污染物的流动，例如，在石油泄漏的情况下，从肥料进入土壤，改善土壤等方式。这种类型的重金属污染性相对较弱。在生活中，常见的有随手乱扔含汞、镍、铅的电池以及体温计和血压计等危险物品，都很可能造成土壤大面积污染的严重后果。因此，土壤污染控制需明确土壤中重金属的主要来源，根据其来源来进行研究并制定相关的污染控制措施[3-6]。 1.1.2 重金属元素的危害 （1）重金属对人类的危害