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侧柏叶挥发油诱导C57BL-6小鼠毛发生长的作用机制

摘要

侧柏全身皆是宝,不仅可以作为荒漠绿地植物,而且其挥发油也能够促进毛发生长。随着社会的发展,人们越来越重视头发的美观,脱发已经严重影响到人们的外貌美观,所以更安全、更有效地预防脱发和生发变得尤为重要。本文根据文献报道,将侧柏叶的挥发油作为研究目标,对其药理作用机制进行研究,以探索其对毛发再生的作用机制。目前关于侧柏挥发油促进毛发生长的研究还只是表观形态的描述,对其作用机制还未做深入的研究。本课题研究了侧柏叶挥发油对小鼠毛囊细胞中β-catenin蛋白表达谱的影响,明确了侧柏叶挥发油促进毛发再生的作用机制。研究内容如下:

(1)本课题以侧柏叶为研究的材料。依据药典,选用水蒸气蒸馏法提取侧柏叶的挥发油约200ml,并对挥发油作GC-MS的分析,鉴定出其主要含松油醇乙酸酯、β-榄香烯、雪松醇、β-石竹烯、α-石竹烯、(-)-大根香叶烯D等12种物质。

(2)以C57BL6周龄的小鼠作为实验的动物,将提取的侧柏叶挥发油稀释为不同的浓度进行动物实验,使用5%米诺地尔作为阳性对照。采用HE染色技术、NIS-Elements D软件与SPSS软件统计对比不同给药天数(7天、14天、21天与29天)不同处理组的小鼠毛发生长的情况,包括给药区域皮肤颜色变化的天数、开始长生新的毛发的天数、新生毛发的长度、毛囊的长度等分析侧柏叶的挥发油对小鼠毛发再生的影响,同时初步筛选最适挥发油浓度。结果:在给药7天、14天、21天、29天四个处理时间段里,10%与20%两个浓度的挥发油促进小鼠毛发生长的效果较好。

(3)以TGF-β1蛋白与β-catenin蛋白为研究对象,选取给药0天的毛囊细胞与给药7天空白组和20%挥发油组小鼠的毛囊细胞进行免疫组化(IHC)。结果表明:β-catenin 蛋白定位于细胞膜上,TGF-β1蛋白定位于细胞内。

(4)以β-catenin蛋白为研究目标,通过免疫印迹技术、Image J软件和SPSS软件分析不同处理时间段该蛋白的表达谱。数据显示:给药0天、7天、14天,小鼠毛囊细胞中的β-catenin蛋白表达水平上调,20%挥发油组β-catenin蛋白表达水平最高;给药21天后,β-catenin蛋白的表达水平下调,挥发油组小鼠毛囊细胞的该蛋白表达量下降但趋于平衡。由此我们确定侧柏叶的挥发油诱导了小鼠毛囊细胞中的β-catenin蛋白的表达,进而促进了毛囊的再生。

关键词:侧柏叶,挥发油,毛囊,β-catenin

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