一、纸片扩散法
该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。
二、稀释法
稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性，分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时，抗菌药物的浓度通常经过倍比（lg2）稀释，能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度（MIC），一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释性折点（敏感、中介和耐药）的浓度，同时也应该包含质控参考菌株的MIC.
2.1 琼脂稀释法首先制备含抗菌药物的琼脂稀释平板。再接种待测菌株，然后是结果判读。
2.2 肉汤稀释法
三、抗生素浓度梯度法
四、自动化仪器法
一、实验材料
普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。
药敏试纸：购买或自制（详见实验准备）
细菌：待做药敏试验的细菌
仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头
二、实验准备
2.1 药敏片的准备：购买或自制
2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。
2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。
2.2 药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。此稀释液即为用于做药敏试验的药液。
三、实验操作方法
3.1 药敏片法
3.1.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密）
3.1.2 将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。
3.1.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。
3.2 牛津杯法
3.2.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，
依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密。）
3.2.2 以无菌操作将灭菌的不锈钢小管（内径6nm、外径8nm、高10nm的圆形小管，管的两端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），放置在培养基上，轻轻加压，使其与培养基接触无空隙，并在小管处标记各种药物名称。每个平板可放4-6支小管。待分钟后，分别向各小管中滴加一定数量的各种药液，勿使其外溢。置37℃培养8-18小时，观察结果。
3.2.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。
3.3 打孔法：
该法较简单，成本低，易操作，比较适用于商品药物的检测。
3.3.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密。）
3.3.2 以无菌操作将灭菌的不锈钢小管（外径为4毫米、孔径与孔距均为3毫米，管的两端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），放置在培养基上打孔，将孔中的培养基用针头挑出，并以火焰封底，使培养基能充分的与平皿融合（以防药液渗漏，影响结果）。
3.3.3 加样：按不同药液加样，样品加至满而不溢为止。
3.3.4 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。
在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受到抑制。过夜培养后形成一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。其直径大小与药物浓度、划线细菌浓度有直接关系。
一、药敏实验的结果，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。
表1 药物敏感实验判定标准
抑菌圈直径（毫米）敏感度
20以上极敏
15~20 高敏
10~14 中敏
10以下低敏
0 不敏
二、药物敏感实验判定标准参考表1，多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上为高敏，6—9
毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。
一、培养基：应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注平板时，厚度合适（约5-6mm），不可太薄，一般90mm直径的培养皿，倾注培养基18-20ml为宜。培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸（PABA）能拮抗磺胺药和TMP的活性。
二、细菌接种量：细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗菌活性。
三、药物浓度：药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制。商品药应严格按照其推荐治疗量配制。
四、培养时间：一般培养温度和时间为37℃ 8-18小时，有些抗菌药扩散慢如多粘菌素，可将已放好抗菌药的平板培养基，先置4℃冰箱内2~4小时，使抗菌药预扩散，然后再放37℃温箱中培养，可以推迟细菌的生长，而得到较大的抑菌圈。
药物敏感实验后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少耐药菌株。在选择高敏药物时应考虑药物的吸收途径，因为我们药敏实验是药液直接和细菌接触，而在给禽用药的时候，必须通过机体的吸收才能使药物达到一定的效果，所以在给禽用药时，高敏药物一定要配合适宜的给药方法，这样才会达到好的治疗效果。
特殊细菌药敏试验的规范化操作 一、目前我国细菌药敏试验现状 20年以来，我国在卫生部和各地临床检验中心和检验学会的共同努力下引进CLSI药敏系列标准，使全国微生物实验室能在同一标准下进行质量控制活动。当前，微生物实验室对常见临床分离细菌的药物敏感试验的水平已有了显著的提高，但对特殊细菌的药敏试验的各个环节的规范操作还不能得到普及，对目前还无折点的细菌能否做药敏试验，以及如何判断细菌的药物敏感和耐药，仍然概念模糊，有待进一步规范和普及。 目前常见错误做法： （一）铜绿假单孢菌的药敏判断标准用于其他非发酵细菌；嗜血杆菌的标准用于卡他莫拉菌等的错误做法时有发生。 （二）借用同属细菌敏感标准 （三）借用同类抗生素的敏感标准 二、各菌属的药物敏感性报告及试验方法的CLSI药敏标准 （一）“嗜麦芽”菌属药敏报告标准 1.CLSI对“嗜麦芽”纸片药敏判断标准 药物名称纸片含量ug/片耐药 R 中介I 敏感S 米诺环素30 ≤1415-18 ≥19 左氧氟沙星 5 ≤1314-16 ≥17 复方新诺明 1.25/23.75 ≤1011-15 ≥16 2.CLSI对“嗜麦芽”稀释法判断标准 药物名称S I R 替卡西林/棒酸≤16/232/2-64/2 128/2 头孢他定≤816 ≥32 米诺环素≤48 ≥16 左氟沙星 2 4 ≥8 复方新诺明≤2/38- 4/76 氯霉素≤816 ≥32（二）无折点细菌的药物敏感试验报告 1. 其他药物的敏感性报告: CLSI推荐的药物可以报告MIC值和敏感度（S、I、R），临床需要的其他药物的药敏试验报告可以直接报告MIC值但不报告S、I、R。 2. 不要用认为相近细菌的折点代替报告S、I、R，这会误导医生用药。
药敏试验程序及步骤 微生物标本的采集 通常有血液、脑脊液、尿液、伤口的脓液、胸水腹水、粪便、痰液及泌尿生殖系统的分泌物。1）采集的一般原则： a早期采集 b 无菌采集注意对局部及周围皮肤的消毒，渎道底部采集的标本（外通道）正常菌群 寄生部位采集的标本应明确目的菌，采用选择培养基。 C 不同菌不同采集方法 D 采集适量标本，量不应过少，注意采集不同时间不同部位标本，要全面有特征 E 安全采集 2）标本处理 2h送到检验处，部分菌应保温于一定环境中保存注意安全尤其对烈性传染病。有时可以直接用抽取标本的注射器 如尸检组织、支气管洗液、心包液、痰、尿等标本要保存于4℃环境中，脑脊液保存于25℃ 3）各部位标本的采集及注意事项 A 血液 皮肤消毒采血部位采血量采血次数采血时间不同动物有所不同血液应马上送检室温保存不可冷藏。 配置的培养基血液和肉汤比为1：5～1：10 血液中常见的病原体引起的疾病有葡萄球菌菌血症，肠球菌菌血症、革兰隐性杆菌、厌氧菌菌血症真菌血症。 B 脑脊液 采集脑脊液一般用腰椎穿刺术获得。采集后立即送检，一般不要超过1h，避免凝固和混入血液一般取3～5ml 35度保温送检不可至于冰箱保存做病毒检查时应放置冰块4度保存72h
常见细菌性脑膜炎如流行性脑脊髓膜炎肺炎球菌脑膜炎，链球菌脑膜炎等 真菌性脑膜炎常见隐球菌脑膜炎假丝酵母菌脑膜炎等特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易并发。如AIDS 恶性肿瘤严重糖尿病等 流行性乙型脑炎是一种人兽共患病肠道病毒可见多种病毒引起脑膜炎和肺炎 c 脓液标本的采集 首先用无菌生理盐水清洗脓液及病灶的杂菌，在采集标本，用针和注射器抽吸采取，再移入无菌容器立即送检也可用拭子在伤口深部采集渗出物，对于皮肤或下表皮的散播性感染，应采集病灶出边缘而非中央处的感染组织送检。脓肿标本以无菌注射器抽取为好，也可用排液法取得，先用70的酒精擦拭病灶部位，袋干燥后用以无菌刀切开排脓，以无菌拭子采取，不能及时送检可放冰箱冷藏，厌氧菌培养的标本只能放于室温下。厌氧菌感染的脓液常有腐臭味，采集和运送要注意不要接触空气，可直接针筒送检或置于厌氧运送培养基送检。 外伤性创伤感染以葡萄球菌和链球菌多见，放线菌，结核分枝杆菌，大肠埃希菌，铜绿假单胞杆菌也常见。深部感染极易引起破伤风和气性坏死感染。 烧伤创面最常见革兰阴性杆菌感染和革兰阳性球菌感染 急性化脓性骨关节炎常由金黄色葡萄球菌感染溶血性链球菌肺炎链球菌感染所致慢性化脓性骨关节炎慢性骨髓炎常由结合分支杆菌感染所致。 放线菌感染可发生在免疫功能下降时或由于拔牙口腔粘膜损伤一起的感染。 d痰液标本的采集 自然咳痰法和支气管镜采集法对呼吸道感染诊断有重要意义，细菌性肺炎为下呼吸道感染最常见的类型。支原体肺炎常以不典型肺炎表现。真菌性肺炎和病毒性肺炎也常见。 E 粪便标本的采集 用药前自然排便采集脓血粘液部分2～3g，粪便表面采样，液体便取絮状物1～2ml置于无菌容器内送检。 细菌性痢疾细菌真菌病毒引起的胃肠炎细菌性食物中毒致病性大肠埃希菌的肠道感染幽门螺杆菌感染导致消化性溃疡，主要部位是十二指肠球部。 F 尿液标本采集 采集清洁中段尿最好早晨取样，先清洗尿道口。必要时导尿或膀胱穿刺留尿样本采集容器要求清洁无菌、密封、加盖、防渗透、广口、容积大于50ml。主要主要经尿道口上行感染，极少数血道感染，可反映肾脏，膀胱，尿道，前列腺等处的炎症变化。
临床上常用的抗高血压药物的种类，各类药物的特点及抗高血压药物应用原则 【摘要】抗高血压药物种类繁多，而各类药物都有其独特作用和适应证。如何结合高血压的病理生理特点恰当地选择降压药物，仍是一大难题。在临床中，要掌握抗高血压药的用药原则，采取科学的选药策略和合理的应用措施，为高血压患者提供科学合理的用药指导。 【关键词】抗高血压药物合理应用临床 高血压可以引起患者心、脑、肾等器官的损害，并与糖、脂代谢紊乱和糖尿病有密切关系，明显降低患者的生活质量，严重时甚至危及生命。如何结合高血压的病理生理特点恰当地选择降压药物，仍是一大难题。因此，控制血压、合理应用抗高血压药具有重要的临床意义。 常用抗高血压药的分类 利尿剂：利尿剂又分为酚噻嗪类、袢利尿剂、醛固酮受体拮抗剂。其中酚噻嗪类药用于充血性心力衰竭、老年高血压、单纯收缩期高血压；强制性禁忌证为痛风；可能禁忌证为妊娠。袢利尿剂用于肾功能不全，充血性心力衰竭。醛固酮受体拮抗剂用于充血性心力衰竭，心梗后；强制性禁忌证为肾功能衰竭，高血钾症。 β受体阻滞剂：β受体阻滞剂用于心绞痛、心梗后、快速心率失常、充血性心力衰竭；强制性禁忌证为Ⅰ-Ⅱ度房室阻滞、哮喘、慢性阻塞性肺疾病；可能禁忌证为周围血管病糖耐量减低经常运动者。 二氢吡啶类钙通道阻滞剂：用于周围血管病、妊娠及老年单纯收缩期高血压、心绞痛；可能禁忌证为快速心律失常。而维拉帕米、地尔硫卓用于心绞痛、颈动脉粥样硬化、室上性心动过速；强制性禁忌证为Ⅱ-Ⅲ度房室传导阻滞、充血性心力衰竭；可能禁忌证为充血性心衰。 α受体阻滞剂：用于前列腺增生、高血脂症；强制性禁忌证为体位性低血压；可能禁忌证为充血性心衰。 血管紧张素转换酶抑制剂：用于充血性心力衰竭、心梗死后左室功能不全，非糖尿病肾病/1型糖尿病肾病、尿蛋白：强制性禁忌证为妊娠、高血钾、双侧肾动脉狭窄。 血管紧张素Ⅱ受体阻断剂：用于2型糖尿病肾病、蛋白尿、糖尿病微量白蛋白尿、左室肥厚、ACEI所致的咳嗽；强制性禁忌证为妊娠、双侧肾动脉狭窄。 合理应用抗高血压药的原则 持之以恒原则：使用降压药治疗，虽然能控制高血压，但不能治愈。因此，需要长期治疗。特别是除临界高血压、轻度高血压、阵发性高血压、继发性高血压外，凡有药物治疗指征者，均应终身治疗。在血压降到所要求的水平后，药量及服药次数应减至最小有效量，长期坚持治疗有利于减少并发症及死亡率。 个体化原则：临床医师要尽力针对病因和发病机制选药，区别对待，使血压保持在理想水平。治疗高血压应根据患者的年龄、性别、种族、同时患有的疾病和接受的治疗等，选用不同的药物及剂量，使治疗个体化，让患者得到最佳的抗高血压治疗，逆转靶器官损伤，维持和改善患者的生活质量，降低心血管事件的发生率［1］。 合理联合用药原则：联合治疗具有安全有效降压、减少不利效应、更好保护靶器官、提高依从性的优点，但要避免同一类药物间的重复给药。现临床辅助用药中的抗栓治疗重复给药现象较为普遍，如阿司匹林+川芎嗪、川芎嗪+脉络宁等，也应引起高度重视［2］。 循序渐进原则：采用药物降压治疗，一般宜从小剂量开始，不宜操之过急，避免降压过快、过剧，以免造成重要器官灌流不足而引起的不良反应。
一、纸片扩散法 该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，二抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。 二、稀释法 稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性，分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时，抗菌药物的浓度通常经过倍比（lg2）稀释，能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度（MIC），一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释性折点（敏感、中介和耐药）的浓度，同时也应该包含质控参考菌株的MIC. 2.1 琼脂稀释法首先制备含抗菌药物的琼脂稀释平板。再接种待测菌株，然后是结果判读。 2.2 肉汤稀释法 三、抗生素浓度梯度法 四、自动化仪器法 一、实验材料 普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。 药敏试纸：购买或自制（详见实验准备）
细菌：待做药敏试验的细菌 仪器：接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯、移液器、滴头 二、实验准备 2.1 药敏片的准备：购买或自制 2.1.1 制备方法：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅15-20分钟高压消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 2.1.2 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。 2.2 药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的使用治疗量的比例配制药液；如商品药百病消按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。此稀释液即为用于做药敏试验的药液。 三、实验操作方法 3.1 药敏片法 3.1.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。（另：可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密） 3.1.2 将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴七片），每种药敏片的名称要记住。 3.1.3 将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。 3.2 牛津杯法 3.2.1 在“超净台”中，用经（酒精灯）火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，
药敏试验操作方法 药敏试验根据美国临床标准委员会（NCCLS）推荐的K-B琼脂法进行，药敏纸片选择中国生物制品鉴定所药敏纸片，试验所选择药物必须包括下列抗生素：氨苄西林（AMP），阿莫西林/克拉维酸（AMC），头孢噻吩（CFT），头孢噻肟（CTX），庆大霉素（GEN），萘啶酸（NAL），诺氟沙星（NOR），四环素（TBT），利福平（RFA），复方新喏明（SMZ）。 1 操作方法： (1)将待检菌接种于普通营养琼脂平板，37℃培养16～18小时，然后挑取普通营养琼脂平板上的纯培养菌落，悬于3ml生理盐水中，混匀后与菌液比浊管比浊。以有黑字的白纸为背景，调整浊度与比浊管（0.5麦氏单位）相同。 (2)用无菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上挤压去掉多余菌液。用棉拭子涂布整个M-H培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60度，最后沿周边绕两圈，保证涂均匀。 (3)待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面，纸片一贴就不可再拿起。每个平板贴5张纸片，每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。在菌接种后15分钟内贴完纸片。 (4)将平板反转，孵育18～24小时后取出，用游标卡尺测量抑菌圈直径，从平板背面测量最接近的整数毫米数并记录（附表5）。抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。有的菌株可出现蔓延生长，进入抑菌环，磺胺药在抑菌环内出现轻微生长，这些都不作为抑菌环的边缘。结果判断依据鉴定所药敏纸片判定标准。 2 注意事项： (1)制备MH琼脂平板应用直径90mm平皿，在水平的实验台上倾注。琼脂厚为4±0.5mm（约25-30ml培养基），琼脂凝固后塑料包装放4℃保存，在5日内用完，使用前应在37℃培养箱烤干平皿表面水滴。倾注平皿前应用pH计测pH值是否正确(pH应为7.3)。pH过低会导致氨基糖苷类，大环内酯类失效，而青霉素活力增强。 (2) 药敏纸片长期储存应于－20℃，日常使用的小量纸片可放在4℃，但应至于含干燥剂的密封容器内。使用时从低温取出后,放置平衡到室温后才可打开，用完后应立即将纸片放回冰箱内的密封容器内。过期纸片不能使用, 应弃去。 (3) 不稳定药物如亚胺培南, 头孢克洛, 克拉维酸复合药等, 应冷冻保存, 最好在-40 ℃以下。 (4) 保证质控菌株不变异的简便方法，将新得到的冻干菌株接种含血的M-H平板复活。然后每株细菌接种10支高层琼脂管，放置冰箱保存。每月取出一支，传出细菌供常规用。待用剩至最后一支，可传种在M-H平板上，再接种一批高层琼脂管备用。如此可保证原始菌种永不接触抗菌素。
降压药 降压药：又称抗高血压药。是一类能够降低外周血管阻力，使动脉血压下降，用于治疗高血压的药物。 服用降压药的目的： 合理应用降压药，不仅能控制血压，改善症状，延缓动脉粥样硬化的行成和发展，并能防止和减少心脑血管等并发症发生，从而提高病人生活质量，降低病死率，延长寿命。 目前常用的降压药物可归纳为五大类：利尿剂、β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）、血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂（ARB）。 各类药物介绍： 1.利尿剂：噻嗪类、袢利尿剂（主要用于肾功能不全）、保钾利尿剂（肾功能不全者禁用）（三者疗效相仿，噻嗪类多用） 降压作用：主要通过排钠，减少细胞外容量，降低外周血管阻力。 特点：起效平稳、缓慢，持续时间相对长，作用持久，服药2~3周后达到高峰，能增强其他降压药疗效，并防止其他药物引起的水钠潴留，长期应用不易发生耐药性。 适应症：轻、中度高血压，在盐敏感性高血压、合并肥胖或糖尿病、更年期女性、老年人 不利作用：低血钾症，影响血脂、血糖和血尿酸代谢（往往发生于大剂量时）
禁忌症：痛风患者禁用 2.β受体阻滞剂：常用的有美托洛尔、比索洛尔、阿替洛尔等 特点：起效较迅速、强力，不仅降低静息血压，而且能抑制体力应激和运动状态下血压急剧升高。 适应症：各种不同严重程度的高血压，尤其是心率较快的中、青年患者或合并心绞痛患者，对老年人疗效相对较差。 注意：长期使用不能突然停药，以免诱发或加重心绞痛。 不良反应：心动过缓、乏力、四肢发冷。 禁忌症：急性心力衰竭、支气管哮喘、病态窦房结综合征、房室传导阻滞和外周血管病患者禁用。 3.钙通道阻滞剂：常用的有非洛地平、氨氯地平、硝苯地平等 特点：起效迅速，降压疗效和降压幅度相对较强；降压时不减少心、脑、肾的血流；疗效个体差异性较小，除心力衰竭外较少有治疗禁忌症，长期控制血压的能力和服药依从性较好。 较其他种类降压药，具有以下优势：老年患者有较好的降压疗效，高钠摄入不影响降压疗效，非甾体类抗炎症药物不干扰降压作用；嗜酒的患者也有显著降压效果；可用于合并糖尿病、冠心病或外周血管病患者；长期治疗还具有抗动脉粥样硬化作用。 不良反应：开始治疗阶段可引起心率增快、面部潮红、头痛、下肢水肿等，尤其使用短效制剂时。 4.血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）：常用的有卡托普利、依那普利、贝那普利、赖诺普利等。 特点：降压起效缓慢，逐渐增强，在3~4周时达到最大作用，限制钠盐摄入或联合使用利尿剂可使起效迅速和作用增强。具有改善胰岛素抵抗和减少尿蛋白作用，特别适用于伴有心力衰竭、心肌梗死后、糖耐量减退或糖尿病肾病的高血压患者。可防止或逆转高血压患者的血管壁增厚、心肌肥大和心室重构。增加肾血流量，保护肾脏。 不良反应：刺激性干咳和血管性水肿，停药后可消失。 禁忌症：高血钾症、妊娠妇女和双侧肾动脉狭窄患者禁用。
药敏试验方法： 默认分类 2009-05-06 22:37 阅读285 评论0 字号：大中小 K-B法： 1 从孵育了16-24小时的琼脂平板上（血平板），挑出单个菌落，直接用生理盐水制成0.5麦氏单 位。 2 在15分钟内，用无菌棉拭子蘸取调好的菌液，在液面上方管壁处旋转并用力挤压几次，以从中挤 出过多的菌液。 3 用棉拭子在无菌的M-H培养基表面化线接种，再重复操作两次，每次将平板转动60度，每次接 种都应保证接种物均匀分布，最后用棉拭子涂抹平板的边缘。 4 将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。每个纸片都应压一下，以保证与平板表面完全接触。每个 纸片中心间距24mm。纸片一旦与平板接触，不应再移动。 5 贴完纸片后，应在15分钟内放入35度孵箱。嗜血杆菌属，链球菌属放入3%-5%的CO2烛缸。 6 孵育24小时以后，测量各药敏纸片抑菌圈直径，与NCCLS手册比较，作出结果判断。 说明：细菌药敏结果的判断以NCCLS为标准，所以药敏试验的每一步都应严格按照NCCLS操作，否则将失去意义。链球菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌、除铜绿假单孢菌和不动杆菌外的假单孢菌属不用K- B法. 肺炎链球菌胶乳凝集测定法 1 在一干净玻片上分别滴两滴生理盐水。 2 从冰箱取出鉴定试剂(Slidex pneumo-kit)于室温。 ·3 在其中一滴生理盐水上滴加R1试剂，在另外一滴上滴加R2试剂，用搅拌棒混匀。 4 轻轻晃动玻片2分钟，观察结果。 5 2分钟内，如R1出现凝集为阳性；如R1和R2均未出现凝集为阴性。 注：R3为阳性对照。 药敏纸片的选择 1、革兰阴性杆菌（肠杆菌科）
头孢噻肟（CTX）头孢唑林（CZ）头孢他定（CAZ） 氨苄西林（AM）哌拉西林（PIP）阿米卡星（AN） 头孢噻吩（CF）环丙沙星（CIP）头孢呋辛（CXM） 庆大霉素（GM）头孢噻肟/棒酸（CTX/CA） 头孢他定/克拉维酸（CAZ/CA）羧苄青霉素（CB） 奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦（PIP/TZ）亚安培南头孢匹肟（FEP）头孢克罗（CEC） 2、铜绿假单孢菌/不动杆菌 妥布霉素（TM）阿米卡星（AN）安曲南（AZT） 头孢哌酮（CFP）哌拉西林（PIP）头孢匹肟 头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）头孢他定（CAZ） 左旋氧氟沙星（OFL）亚安培南哌拉西林/三唑巴坦 3、金黄色葡萄球菌 苯唑西林（OX）青霉素G（P）头孢唑林（CZ）阿米卡星（AN）红霉素（E）头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP） 万古霉素奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦 头孢噻吩（CF） 4 、肠球菌 氨苄西林（AM）万古霉素环丙沙星（CIP） 庆大霉素（GM）红霉素（E）氧氟沙星（OFL） 5、除肺炎链球菌外链球菌 氨苄西林（AM）头孢噻肟（CTX）万古霉素 红霉素（E）氧氟沙星（OFL）克林霉素(CM) 肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌和大肠杆菌ESBLs的检测
细菌自动鉴定及药敏系统的研究进展(2) 录入时间:2011-2-23 9:13:34 来源：中华检验医学网 （四）Vitek Ⅱ： 在第一代Vitek的基础上发展而成。有4个架子，每个架子能容纳15片试验卡。司同时容纳60片试验卡，每片试验卡包含64个反应孔，采用快速荧光法测定细菌，2小时提供鉴定报告，鉴定敏感度高，分辨能力强。可在鉴定的同时进行药敏试验，结果可分级报告(先完成的药敏结果先报告)。该仪器具有高级专家系统，可根据药敏试验的表则结果提示有何种耐药机制的存在，对耐药机制推断准确性大于90％，MIC 平均药敏检测所需时间9.74小时，比传统方法缩短1天检测时间，能对药敏试验的结果进行“解释性”判读。该专家系统还能自动复核检验结果，如发现鉴定与药敏不符合的现象，即发出提示，要求进行复查。 （五）SENSITITRE MICROBIOLOGY SYSTEMS ARIS英国先德荧光快速微生物鉴定/药敏系统工作原理 1.概述： SENSITITRE MICROBIOLOGY SYSTEMS ARIS由英国Accu Med公司于20世纪70年代开始研制生产。1996年12月美国惠好公司正式成为SENSITITRE在中国的总代理。分为全自动SENSITITRE Aris和半自动Auto-Reader两种组合。可鉴定细菌180种。数据库含500种细菌资料。可对200种抗生素进行分析，在全世界有800家用户。1996年12月进入中国。国内5家用户。 2．原理： (1)鉴定原理： 通过检测荧光的增加间接地测定MIC值。SENSITITRE系统采用传统生化反应，8进位数码鉴定及荧光分析项结合。荧光分析是用荧光标记细菌表面特异酶的底物，经细菌水解底物产生荧光来判断结果。不同
加量？减量？活学活用玩转降压药之用法技能原创2015-10-13陈阿丹丹临床用药 降压治疗的策略方法也可以用一句口诀「连长找小兵（联长早小并）」来归纳总结。 即联合治疗，长期治疗及应用长效制剂，早发现、早诊断、早治疗、早达标，小剂量开始，治疗并发症，平稳降压。 那么这些降压策略该如何实施呢？ 治疗目标 根据2013 ESH/ESC 高血压治疗指南： 1. 第1 目标血压＜150/90 mmHg，在第1 目标达到后，应达到第2 目标血压＜140/90 mmHg 或更低（即在保证重要脏器灌注的情况下，缓慢、平稳降压）。 许多老年患者需要应用 2 种以上的药物才能达到目标血压。 当SBP 比目标值高20 mmHg，DBP 比目标值高10 mmHg 时，联合药物治疗应作为一线用药。 2. 合并糖尿病、肾脏疾病、心血管疾病或者器官损伤的患者，在保证重要脏器血流灌注的情况下，通常认为血压控制目标为＜130/80 mmHg。
但新指南认为获益情况与＜140/90 mmHg 相比无明显获益，所以＜140/90 mmHg 仍然是此类患者的目标血压值。 降压药剂量调整 降压治疗方案通常在应用4-6 周达到其最大降压效果，服药后 1 周时血压下降的幅度是该药可达到的最大降压幅度的一半。 采用标准剂量下，各类降压药降压幅度平均10-20/5-10 mmHg。 血压不达标时，可以换药或加量吗？ 下面有一些降压药调整的规则： 1. 起始单药，达到最大剂量再加第2 种药物。 单药治疗未达标，增加至最大推荐剂量，仍未达标增加第 2 种药物。 两种药物均达最大剂量还未达标，小剂量增加第 3 种药物，并增加剂量直至血压达标。 2. 单药起始，未达标小剂量联合2 种药物，并调整2 个药物的剂量。 如两药均达最大剂量，血压仍未达标，增加第 3 种药物，并逐渐增加剂量直至血压达标。
糖尿病合并高血压的可能机制和降压药选择策略 发表时间：2018-07-31T16:15:38.827Z 来源：《医药前沿》2018年7月第21期作者：张洁 [导读] 分析糖尿病合并高血压的可能机制，评价降压药物选择指导干预的价值 张洁 （华东医院药剂科上海 200040） 【摘要】目的：分析糖尿病合并高血压的可能机制，评价降压药物选择指导干预的价值。方法：在2017年1月—3月，在门诊接待糖尿病合并高血压复查对象184例，通过沟通，了解患者的既往用药情况，分析降压药物处方合理性。结果：治疗后，SDP、DBP、24hSBPCV、24h DBPCV低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05）。干预后6个月后，水肿、头晕头痛、合计不良反应发生率低于干预前6个月，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：糖尿病合并高血压可能与糖尿病所致的血管损伤、血压调节相关因子表达有关，降压药物选择需要考虑用药机制、不良反应发生风险。 【关键词】糖尿病；高血压；发病机制；降压药 【中图分类号】R587.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）21-0099-02 糖尿病与高血压均为社区常见病，可致多靶器官损害。糖尿病的发病年龄一般高于高血压，糖尿病合并高血压风险较高，合并率约为30%～40%[1]。为进一步提升糖尿病合并高血压患者降压药物合理应用水平，医院尝试加强用药干预，取得较好的效果。 1.资料及方法 1.1 一般资料 在2017年1月—3月，在门诊接待糖尿病合并高血压复查对象184例，其中男110例、女74例，年龄（59.6±9.4）岁。高血压病程（5.1±1.3）年。糖尿病病程（8.5±1.4）年。纳入标准：（1）2型糖尿病合并原发性高血压病，2型糖尿病病史更长；（2）未合并慢性心力衰竭等其他重大疾病；（3）尚未达到长期使用胰岛素的适应症；（4）未出现并发症急性期；（5）知情同意。排除标准：（1）无法获得随访；（2）非本地社区居民；（3）认知精神障碍；（4）达到减重手术适应症需求；（5）恶性高血压；（6）无法获得随访。 1.2 方法 1.2.1用药合理性评价分析降压药物的合理性。了解不良反应发生情况。点评发现，当前主要用药为CCB、ARB、BB，少部分对象还使用ACEI、利尿剂、α阻断剂、SPC、中成药，联合用药以CCB＋ARP为主，约占30～40%，其次为CCB＋ACEIα。约1/3的对象未按照推荐的要求用药。发现用药不合理情况仍然比较突出，主要为不良反应发生率较高，不合理的应用特别是α受体阻断剂以及β受体阻断剂所致的体位性低血压发生率较高。 1.2.2用药改进 （1）从起效机制选择用药：需要坚持个体化用药的原则，灵活的应用一线药物，联合用药以苯磺酸氨氯地平＋缬沙坦为主，避免使用可能增加肾脏代谢负担的药物，如ACEI、ARB。 （2）从用药的安全选药：糖尿病患者容易出现水肿，避免使用钙离子通道剂量，容易出现心血管反应。除此之外，糖尿病患者还容易出现肾功能障碍、心脏损伤、高尿酸血症，需要进行筛查，合理用药。如2型糖尿病容易出现高尿酸血症，噻嗪类利尿剂会加重高尿酸血症，需慎用。对于合并运动功能障碍、体位更换频繁的对象，使用α受体阻断剂、β受体阻断剂、神经节阻断剂更容易出现体位性血压波动，需慎用。 （3）疗效反馈用药：更改处方后4周复查疗效不佳，考虑患者不敏感，可能存在潜在的耐药基因，则需要调整用药。 1.3 观察指标 两组对象6个月后随访，对比干预前、6个月后的8：00—9：00坐位收缩压（SBP）与舒张压（DBP）、24h收缩压变异系数（24hSBPCV）、24h舒张压变异系数（24h DBPCV）。6个月降压药物不良反应发生情况。 1.4 统计学处理 采用SPSS20.0软件进行统计学处理，血压水平服从正态分布，采用（x-±s）表示，干预前、6个月比较采用t检验，不良反应发生情况比较采用χ2检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。 2.结果 2.1 血压水平 治疗后，SDP、DBP、24hSBPCV、24h DBPCV低于治疗前，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。
常见抗真菌药物比较 表1，常见抗真菌药物抗菌谱比较 1、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、棘白菌素、多烯类抗菌谱摘自于第39版桑福德抗微生物治疗指南，咪康唑、丙烯胺类抗菌谱搞自于产品说明 2、-无活性；±可能有活性；+有活性，三线治疗（至少临床有效）；++有活性，二线用药（临床作用稍差）；+++有活性，一线用药（临床常常
有效）； 3、棘白菌素类、伏立康唑、多烯类尿中浓度很低；
胃肠道反应： 特比奈芬>咪康唑>两性霉素B >两性霉素B脂质体>伊曲康唑>伏立康唑、氟康唑>米卡芬净、卡泊芬净肝功能不良反应： 两性霉素B >两性霉素B脂质体>卡泊芬净、米卡芬净>伊曲康唑>伏立康唑>氟康唑 米卡芬净说明书中黑框警告：有严重肝损害的报道，有导致肝脏肿瘤的潜在风险。 肾功能不良反应： 两性霉素B >两性霉素B脂质体>伊曲康唑>伏立康唑>氟康唑>卡泊芬净、米卡芬净
与细菌感染性比较，侵袭性真菌感染发病隐匿、不易诊断，抗真菌治疗目标性差，合理使用抗真菌药物已经成为临床严峻的挑战。临床医师需要加强对侵袭性真菌感染的关注，掌握不同类别抗真菌药物特点，合理使用。 临床可供使用的治疗侵袭性真菌感染的药物有如下几类，各自特点不同，需要注意选择。 两性霉素B及其脂类制剂 两性霉素B是最早应用于临床的治疗侵袭性新型真菌感染药物，其普通制剂为去氧胆酸盐，不良反应明显。近年来开发的两性霉素B脂制剂安全性明显提高，成为临床重要的侵袭性真菌感染治疗药物。这些制剂包括两性霉素B脂质复合体、两性霉素B胶质分散体、两性霉素B脂质体。 该类制剂特点为：①药物易分布于网状内皮组织，肝、脾和肺组织中，减少肾组织浓度，低血钾少见，肾毒性均低于普通制剂。②临床可应用较高剂量，一般3~6mg/(kg.d)，滴速相对快。③长程用于艾滋病病人，对曲霉菌、隐球菌、念珠菌的耐受性好。④脂类制剂的剂量为常规制剂的3～5倍时,治疗念珠菌菌血症和隐球菌脑膜炎的疗效与常规制剂相仿。 三唑类抗真菌药物 此类药物包括氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑等，氟康唑已在临床应用多年，主要对酵母样菌具有抗菌活性，对曲霉缺乏抗菌作用。由于长期应用，部分真菌已产生耐药性，临床必须加以关注。 伊曲康唑对深部真菌与浅表真菌都有抗菌作用，对皮肤癣菌、酵母菌、曲霉菌属、组织胞浆菌属、巴西副球孢子菌、申克孢子丝菌、着色真菌属、枝孢霉属、皮炎芽生菌以及各种其他的酵母菌和真菌感染有效。目前已有胶囊、口服液和静脉注射三种剂型。胶囊吸收较差，以羟丙基环糊精为助溶剂的口服液，生物利用度可达55%。伊曲康唑脂溶性强，在肺、肾脏、肝脏、骨骼、胃、脾脏和肌肉中的药物浓度比血浆浓度高2~3倍。主要在肝脏中代谢，主要代谢产物为有活性的羟基伊曲康唑，平均终末半衰期为33ｈ。口服液与注射液可应用于侵袭性真菌感染，如曲霉病、芽生菌病、组织胞浆菌病、球孢子菌病，亦用于AIDS患者隐球菌病的长程治疗和中性粒细胞减少症患者真菌感染的预防与治疗。常见不良反应为胃肠道不适，如厌食、恶心、腹痛和便秘。较少见的副作用包括头痛、可逆性肝酶升高、月经紊乱、头晕和过敏反应。 伏立康唑是从氟康唑衍生的三唑类抗真菌药，抗菌谱广、抗菌作用强。对念珠菌属、新型隐球菌和毛孢子菌均有良好的抑制活性；对一些霉菌，以及荚膜组织胞浆菌等都有抑制作用，对足放线病菌属、镰刀菌属也具有抗菌活性。本品口服后迅速吸收，血浆达峰时间为1~2h，生物利用度高达96％，蛋白结合率58%，食物可影响本品的吸收，因此应在进食后1~2h服用。给予负荷剂量后，24h内其血药浓度接近稳态浓度。在组
一、目的： 指导实验人员准确完成酵母样真菌药敏试验（微量稀释法）。 二、适用范围： 怀疑酵母样真菌感染患者 三、检验原理： ATB FUNGUS 3试条包括16对杯状凹cupules。第一对不含任何抗真菌剂。用作阳性生长对照。另外的15对包含不同稀释度的5种抗真菌剂。用于测定最小抑菌浓度（MIC）和（或）区分临床敏感性。 将准备好的待测酵母样真菌的悬浮液转移到培养基中，并接种到试条上。孵育后，我们可以通过肉眼判读，或者应用A TB仪器或miniAPI判读杯状凹中液体的生长情况。获得MIC(两性霉素B[AMB])，氟康唑[FCA],伊曲康唑[ITR],伏立康唑[VRC],5-氟胞嘧啶[5FC]),将菌株分为敏感、中介或耐药。 四、职责：生物梅里埃 实验人员准确完成酵母样真菌药敏试验（微量稀释法） 试剂厂家： 规格：25测试／盒 内含物：-25个独立包装的A TB FUNGUS 3 试条，包括干燥剂 -25个孵育盖 -25安瓿A TB F2培养基 -25张结果记录单 -一份说明书 五、储存条件及有效期： 在包装盒上指示的有效期前，试条和培养基应在2-8℃下存放。 有效期为12个月。 六、工作程序： (一)试验的准备： 1、从包装中取出试条 2、在试条延长翼上记录下被测酵母菌株的编号 （二）接种物的准备： 1、打开一个API?0.85%氯化钠培养基安瓿（或API培养悬液） 2、采集不超过4天的菌落，制备成浊度相当于2 McFarland的悬浮液 3、用McFarland试剂盒的标准浊度管比较，或使用ATB比浊仪DENSIMAT 4、此菌悬液必须在准备后立即使用 5、使用一移液管转移20ul此悬浮液到一A TB F2培养基的安瓿中 （三）试验条的接种： 手工接种： 1、用ATB电子移液管混匀A TB F2培养基，避免产生气泡 2、使用ATB电子移液管在每个杯状凹中加入135ul的ATB F2 培养基（大约3*104酵母菌/毫升或4*103酵母菌/杯状凹）
作者单位:100853北京,解放军总医院微生物科(刘梅系进修医师) 论著 酵母菌对氟康唑的敏感性及三种药敏试验方法的比较 沈定霞 谢灵 刘梅 周贵民 摘要 目的 了解酵母菌对氟康唑的敏感性,并对3种抗真菌药敏试验方法进行比较。方法 利用纸片扩散法,微量稀释法及浓度梯度法(Etest法)测定92株临床分离酵母菌对氟康唑的敏感性。结果 Etest法和微量稀释法所测酵母菌对氟康唑的总敏感率分别是73.9%和81.5%。纸片扩散法所测敏感菌,微量稀释法全部敏感,Etest法敏感率为91%;纸片扩散法所测耐药菌,其余两种方法检测多数仍为敏感。从不同菌种来看,白念珠菌、热带念珠菌、假热带念珠菌、葡萄牙念珠菌、白吉利丝孢酵母菌及酿酒酵母菌对氟康唑全部敏感;氟康唑对克柔念珠菌及光滑念珠菌的最小抑菌浓度(M IC)值均较高;近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、异常汉逊酵母菌及新型隐球菌中的部分菌株对氟康唑敏感,部分菌株为剂量依赖性敏感,未发现耐药菌株。结论 氟康唑对除克柔念珠菌及光滑念珠菌的M IC值较高外,其余酵母菌对氟康唑敏感性好。纸片扩散法虽简便,但仅可用于初筛敏感菌,对抑菌环直径 14mm者应进一步用微量稀释法或Etest法测定其M I C值。 关键词 酵母菌 氟康唑 微生物敏感性试验 C omparison of three methods for f luconazole antifungal susceptibility test Shen Dingx ia,X ie Ling, L iu M ei,et al.Dep ar tment of M icr obiology,Gener al H osp ital of PLA,Beij ing100853 Abstract Objectives T o study the susceptibility of yeasts to fluconazole and to compare three methods for antifung al susceptibility test.Methods 92clinical isolates of yeasts were examined for the sus-ceptibility to fluconazole by disk diffusion test,bro th microdilutio n method and E test.Results T he total susceptibility r ate of yeasts to fluconazole was73.9%and81.5%by E test and broth microdilution method r espectiv ely.Susceptible strains by disk diffusion test were all susceptible by broth microdilution method r ecommended by N CCLS and91%susceptible by the E test.T hose with inhibition zone diameters of 14mm w er e almost susceptible by anot her2methods.As concerned w ith t he species, C.albicans, C.trop-i calis, C.pseudotropicalis, C.lusitaniae,T r ichosporon beig elii and Saccaromyces cer ev isiae w er e all suscept-i ble to fluconazole,their M ICs 8 g/ml; C.krusei and T orulopsis glabrata possessed higher M I Cs of all 16 g/ml,even 256 g/ml.Some of Hansenula anomala, C.guillier mondii, C.parapsilosis and Crypto-coccus neofor mans w ere susceptible,and some were dose-dependent susceptible to fluconazole.C onclusions Almost all yeasts ex amined are susceptible to fluconazole except C.krusei and T orulopsis g labrata.T he disk diffusion test can only be used to screen sensitive strains althoug h it is easier to be done,the M I Cs must be tested by broth microdilut ion method or E test when the inhibition zone is 14mm. Key words Yeasts F luconazole M icrobial sensitivity tests 近年来,由于激素、免疫抑制剂及广谱抗生素的广泛应用,器官移植术的普遍开展,以及艾滋病病人的不断增加,原发及继发性免疫功能低下人群扩大,全身性真菌感染日益增多,抗真菌药物的使用,又使真菌的耐药现象出现[1]。因此,开展真菌的体外药敏试验,指导临床医生合理用药已受到越来越多的关注。 我们应用纸片扩散法、微量稀释法及浓度梯度法(Etest法)分别测定并比较了92株分离自临床标本的酵母菌对氟康唑(临床应用最多的抗真菌药物之一)的敏感性,现报告如下。 材料与方法 一、材料 1 试验菌:92株酵母菌分别来自临床送检的血 199 中华医学检验杂志1998年7月第21卷第4期
高血压病治疗原则 一、高血压病 高血压治疗获益主要来自降压本身,因此降低血压是高血压治疗的主要目标。有效降低或逆转因高血压导致的靶器官损害是高血压治疗的目的。24小时稳定降压,有助于防止靶器官损害、猝死、脑卒中和心脏病发作。长效制剂可增加治疗的依从性，高血压一旦确诊后应坚持长期治疗。联合治疗能提高疗效、降低不良反应。高血压危险分层治疗、降压达标是临床治疗的重要策略。\......感谢聆听 (一）原发性高血压 1．治疗原则 (１）综合治疗：高血压治疗应非药物治疗措施和药物治疗措施结合. （2）非药物治疗:低盐饮食、戒烟、限酒、合理饮食和适当体育运动等,适用于各级高血压。 (3）应用长效制剂：最好应用长效制剂，维持24h血压谷峰比值应＞5０%,避免血压一天内大幅度波动，尤其清晨血压. （4）个体化:选择最合适的药物和剂量。
(5）达标和停药:除高血压急症外,血压宜在1~２周内逐渐下降达标为好，尤其是老年患者，避免短期内血压急剧下降.一般应长期治疗。 ２。药物治疗 (1) 1级高血压无并发症或合并症患者降压治疗方案：可以单独或者联合使用噻嗪类利尿剂、β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂、ACE抑制剂和ＡRB治疗，应从小剂量开始，逐步递增剂量。 (２）２级和３级高血压无并发症或合并症患者降压方案：采用两种或以上降压药物联合治疗方案。2和3级高血压在开始时可以单片（或固定剂量）复方制剂。联合治疗应采用不同降压机制的药物。比较合理的两种降压药联合治疗方案是：钙通道阻滞剂与ACE抑制或 ＡRＢ;钙通道阻滞剂与β受体阻滞剂；利尿剂与A ＣE抑制剂或ＡRB；利尿剂与β受体阻滞剂. 三种或以上降压药合理的联合治疗方案，除有禁忌证外应包含利尿剂。 （3）有并发症和合并症的降压治疗: ①脑血管病：急性脑卒中患者的降压治疗的目标尚未统一.脑卒中恢复期患者降压治疗的目标是13０/80mmHg以下。降压过程应该缓慢、平稳，避免
药敏试验方法： K-B法： 1 从孵育了16-24小时的琼脂平板上（血平板），挑出单个菌落，直接用生理盐水制成0.5麦氏单位。 2 在15分钟内，用无菌棉拭子蘸取调好的菌液，在液面上方管壁处旋转并用力挤压几次，以从中挤出过多的菌液。 3 用棉拭子在无菌的M-H培养基表面化线接种，再重复操作两次，每次将平板转动60度，每次接种都应保证接种物均匀分布，最后用棉拭子涂抹平板的边缘。 4 将确定好的药敏纸片分贴到平板表面。每个纸片都应压一下，以保证与平板表面完全接触。每个纸片中心间距24mm。纸片一旦与平板接触，不应再移动。 5 贴完纸片后，应在15分钟内放入35度孵箱。嗜血杆菌属，链球菌属放入3%-5%的CO2烛缸。 6 孵育24小时以后，测量各药敏纸片抑菌圈直径，与NCCLS手册比较，作出结果判断。 说明：细菌药敏结果的判断以NCCLS为标准，所以药敏试验的每一步都应严格按照NCCLS操作，否则将失去意义。链球菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌、除铜绿假单孢菌和不动杆菌外的假单孢菌属不用K-B法. 肺炎链球菌胶乳凝集测定法 1 在一干净玻片上分别滴两滴生理盐水。 2 从冰箱取出鉴定试剂(Slidexpneumo-kit)于室温。 3 在其中一滴生理盐水上滴加R1试剂，在另外一滴上滴加R2试剂，用搅拌棒混匀。 4 轻轻晃动玻片2分钟，观察结果。 5 2分钟内，如R1出现凝集为阳性；如R1和R2均未出现凝集为阴性。 注：R3为阳性对照。 药敏纸片的选择 1、革兰阴性杆菌（肠杆菌科） 头孢噻肟（CTX）头孢唑林（CZ）头孢他定（CAZ） 氨苄西林（AM）哌拉西林（PIP）阿米卡星（AN） 头孢噻吩（CF）环丙沙星（CIP）头孢呋辛（CXM） 庆大霉素（GM）头孢噻肟/棒酸（CTX/CA） 头孢他定/克拉维酸（CAZ/CA）羧苄青霉素（CB） 奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦（PIP/TZ） 亚安培南头孢匹肟（FEP）头孢克罗（CEC） 2、铜绿假单孢菌/不动杆菌 妥布霉素（TM）阿米卡星（AN）安曲南（AZT） 头孢哌酮（CFP）哌拉西林（PIP）头孢匹肟 头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP）头孢他定（CAZ） 左旋氧氟沙星（OFL）亚安培南哌拉西林/三唑巴坦 3、金黄色葡萄球菌 苯唑西林（OX）青霉素G（P）头孢唑林（CZ）阿米卡星（AN） 红霉素（E）头孢噻肟（CTX）环丙沙星（CIP） 万古霉素奥格门丁（AMX/CA）哌拉西林/三唑巴坦 头孢噻吩（CF） 4 、肠球菌 氨苄西林（AM）万古霉素环丙沙星（CIP） 庆大霉素（GM）红霉素（E）氧氟沙星（OFL） 5、除肺炎链球菌外链球菌 氨苄西林（AM）头孢噻肟（CTX）万古霉素