检验科微生物实验室生物安全事件应急预案 This manuscript was revised by JIEK MA on December 15th, 2012.
检验科微生物实验室生物安全事件应急预案为了有效的预防微生物实验室生物污染，有效应对实验室突发污染事件，保证实验结果的科学准确，保障实验工作人员的健康、生命财产安全，防止实验室污染对周围环境造成严重污染，加强检验工作的质量控制和实验室的管理，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》和《实验室生物安全通用要求》等相关法律法规的规定，特制定本预案，确保一旦发生实验室污染事件及安全事故时，能及时、规范、科学、迅速有效地控制。 一、适用范围 本预案适用于微生物实验室发生的、与实验室安全相关的、危害科室工作人员健康以及社会公众健康和社会稳定的所有事件。主要包括：1．病原微生物的实验室污染事件； 2．工作人员受到实验室内有毒病原微生物的感染或侵害； 3．病原微生物被泄漏出实验室事件。 4．由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件。 当出现以上适用范围中的任意情况，启动本预案。 二、应急管理小组 有微生物实验室生物安全事件应急管理小组，科主任任组长，制定实验室生物安全防护指导方针，规划对实验室的硬件建设、组织实施科学管理。在实验室生物安全事件发生时，决策指挥，调动人员，全面部署。发生突发事件后应急处理小组全体成员，应立即按实验室污染突发事件处理
的技术规范，采取有效措施控制事件、调查原因，减少人员伤亡和财产损失。 三、预防措施 1．加强实验室标准化建设，对实验室设备的配置、个人防护和实验室安全行为应按《实验室生物安全通用要求》做出明确规定。 2．建立实验室病原微生物专库，对于传染病病原样本建立严格的监督管理制度。 3．增强安全意识，合理完善实验室生物安全的各项规章制度。把生物安全管理责任和措施落到实处，消除安全隐患。实验室工作人员应自觉遵守实验室生物安全管理规定，严格按照操作规程和技术规范开展研究工作。 4．提高警惕，加强安全保卫，防止不法之徒盗窃病原微生物和有毒有害化学试剂，用于对人群进行生物化学恐怖攻击，对公众健康产生严重损害，影响社会稳定。 5．建立有效的预警机制，为各种病原微生物和有毒有害化学试剂建立档案和使用纪录，填写准确。每次使用后及时登记，发现遗失或被盗，立即报告。 6．建立实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害应立即报告。 7．定期开展自查，及时发现安全隐患，发出预警通报。 四、应急控制措施
临床免疫实验室检验过程中涉及传染或潜在传染性生物因子时，存在实验室生物安全危害风险，事先对检验过程中的生物安全风险进行评估，以做好风险的防范和控制。 一、实验分析前风险评估及风险控制 1、分离标本。 1）离心机的使用 ⑴使用前应保证离心机各零部件无松弛现象，用蒸馏水平管平衡待离心标本，小心放入离心机内，盖上防护板，打开电源，缓慢地将速度提升到所需的离心速度。⑵在离心机未完全停止之前，严禁打开防护板。⑶离心机使用后，将速度旋钮转到零速度档，将标本管取出待分析，并将平衡管取出，放回原位。 2）可能存在的风险及风险控制：离心管（含标本及平衡管） （1）离心机运行时发生离心管破裂时，应及时关闭电源，密闭防护板30min 以上使气溶胶沉降。 （2）戴橡胶手套、一次性口罩及帽子。 （3）使用镊子清理离心管碎片，用镊子夹着的棉花清理外溢液体。碎片及棉花分别按损伤性和感染性废弃物处理。 （4）离心桶、转轴和转子都应放在2000mg/L优氯净消毒液内浸泡30分钟以上，之后用75%乙醇去除有效氯残余，清水洗净，晾干。 （5）离心机腔用2000mg/L优氯净消毒液擦拭，30分钟后再用75%乙醇去除有效氯残余，湿布擦拭，风干。 （6）用可移动紫外灯消毒离心机腔及其它部件30分钟以上，紫外灯管置于被消毒物上方约80cm，灯管与台面平行。
以上情况发生后，应及时向实验室负责人及科室生物安全员报告，并做事故处理登记。 2、标本（真空采血管）开盖： 1）装有标本的真空采血管离心后需静置30分钟，旋转开启密封盖。 2）可能存在的风险及风险控制：开盖过程中产生气溶胶。 离心管开盖前须静置并在生物安全柜内用旋转方法开启密封盖。 二﹑实验分析中风险评估及风险控制 实验操作过程中，应做好工作防护措施并严格按照标准操作规程进行操作。如因操作失误，标本血清、反应试剂均可能污染皮肤粘膜、防护服、操作台面及使用的仪器设备（如安全柜、酶标仪、洗板机、水浴箱等），将对实验者造成严重危害，相关风险控制如下： 1、血清污染操作台面时，应用纸巾盖住污染位置，用金星消毒液由外向中心喷洒作用消毒30分钟后用纸巾擦拭干净： 2、血清及反应试剂污染使用的仪器设备，应立即用纸巾吸收污染的液体，因消毒液具有腐蚀性，改用75％酒精棉球消毒污染部位。 3、血清及反应试剂污染工作服后应及时更换并做好浸泡消毒处理。 4、血清及反应试剂污染皮肤时，应立即用流动水清洗污染皮肤；粘膜或破损皮肤受污染时，应及时采用无菌水冲洗，必要时采用消毒液进行消毒。粘膜或破损皮肤污染血液时，应填写职业暴露报告卡上报，对源头血液及暴露者进行相关检查，并进行追踪观察随访，如源头血液为艾滋病病毒感染时，按艾滋病职业防护程序进行。 所有实验过程中的废弃物及风险控制中的污染物品必须严格按照医疗废弃物分类处理、 三﹑可能遇到的紧急情况的风险评估及风险控制 当发生自然灾害(如地震﹑水灾等)或设施出现故障，如生物安全柜等关键设备出现故障或实验室内压力﹑气流发生逆转等事件时，有可能使血液等感染性材料外溢而对操作者﹑环境和后续的抢救清理人员的健康造成威胁。风险控制按相
七、病原微生物实验室生物安全管理（共15分） 1、一、二级实验室备案证明☆ （1）法律依据：《病原微生物实验室生物安全管理条例》第二十五条。 （2）检查内容：查一、二级病原微生物实验室是否向设区的市级卫生计生行政部门备案。 （3）检查方法：查备案材料或资格证书。 （4）结果评价：此项不合格则该项目整体不得分。 （5）监督关键点：①一、二级实验室的备案与实际情况是否相符；②有无存在未备案的一、二级实验室。 *2、三级、四级实验室开展高致病性病原微生物实验活动资格证书（重点项☆，或合理缺项） （1）法律依据：《病原微生物实验室生物安全管理条例》第二十条、第二十一条。 （2）检查内容：查三级、四级实验室是否经国家认可并取得从事高致病性病原微生物实验活动资格证书。 （3）检查方法：查备案材料或资格证书。 （4）结果评价：此项不合格则该项目整体不得分。 （5）监督关键点：三、四级实验室是否存在未取得资格证书从事高致病性病原微生物实验活动。 3、实验室建立生物安全委员会，建立健全实验室生物安全管理体系和感染应急预案（1分） （1）法律依据：《病原微生物实验室生物安全管理条例》第三十一条、第三十二条、第四十条，《实验室生物安全通用要求（GB19489-2008）》7.1。 （2）检查内容：实验室生物安全委员会的建立文件，成员应体现其组织及学科的专业范围，具体职责包括①制定生物安全规章制度、操作规程和标准操作程序等；②建立实验活动风险评估的工作制度和程序，组织开展风险评估工作； ③负责本单位生物安全的日常监督、检查；④对本单位实验室开展的第一、第二类病原微生物的实验活动进行审查。 实验室生物安全管理体系：生物安全管理手册、程序文件、作业指导书和记录。 感染应急预案：结合本单位实际制定。从事高致病性病原微生物相关实验活动的实验室制定的预案应向所在地省级卫生计生行政部门备案。 （3）检查方法：查阅生物安全管理体系、预案等文件。
实验室生物安全级别——生物安全一级 生物安全一级(BSL-1) BSL—1适合于非常熟悉的病源，该病源不会经常引发健康成人疾病，对实验人员和环境潜在危险小。实验室没有必要和建筑物中的一般行走区分开。一般按照标准的微生物操作，在开放的实验台面上开展工作。不要求、一般也不使用特殊的遏制设备和设施。实验人员在实验程序方面受过特殊训练，由受过微生物学或相关科学一般训练的科学工作者监督实验。 以下标准及特殊操作、安全设备及设施和BSL—1病源有关： 一、标准微生物操作： 1、在进行有关培养物及样品实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。 2、进行活体处理后，实验人员要洗手；离开实验室前脱手套。 3、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。不允许在工作区存放食物和日常生活用品。在实验室中，戴隐型眼镜的人，也需戴口罩或面罩。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。 4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。 5、制定锐器安全使用规范。 6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生溅出和气溶胶。 7、至少一天一次、活体溅出时，都应进行台面消毒。 8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实验室，其包装应符合有关地方、州、联邦法规。 9、当存在传染源时，应在实验室入口处贴生物危险标志，并显示以下信息：实验中的病源名称、研究者姓名及电话号码。 10、实施控制昆虫和龋齿动物的程序(参见附录G)(另发) 二、特殊操作：无 三、安全设备(第一道屏障) 1、和BSL-1相关的病源，其操作一般不需要生物安全柜之类的特殊遏制装置或设备。 2、建议穿实验服、大褂、制服，避免污染和衣服上的尘土。 3、若手上皮肤有伤或出皮疹，应戴手套。 4、操作过程中，估计会出现微生物或危险物溅出时，应戴保护眼具。
生物安全知情同意书 同志: 为加强临床实验室生物安全管理,保护实验室工作人员和公众健康,根据《江苏省临床实验室生物安全管理规范（试行）》的要求，在您决定是否参加这项工作之前，请尽可能仔细阅读以下内容，它可以帮助您了解该项工作可能给您带来的风险和不适。如果您愿意，您也可以和您的亲属、朋友一起讨论，或者请该科室负责人给予解释，帮助您做出决定。 一、您要从事的工作可能会有如下风险： ①、由于玻璃器皿的破裂、喷溅等原因导致感染性物质泄漏、针刺伤，可能会感染：艾滋病病毒、梅毒、乙肝病毒、丙肝病毒、结核杆菌、炭疽杆菌等传染性致病微生物； ②、由于实验操作、离心机离心过程中产生的气溶胶，可能会感染：结核杆菌、嗜血杆菌、布氏杆菌、肺炎链球菌、β-溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌、肺炎克雷伯菌等及各种呼吸道病毒； ③、您所在的实验室有可能接触强酸、强碱、化工原料等，操作不慎会导致皮肤、眼睛等部位的伤害或对人身有一定的致癌性； ④、由于实验室使用高压锅等压力容器，操作不当可能会导致压力容器爆炸造成人身的伤亡； ⑤、由于实验室拥有众多的电器设备，使用不当会发生触电事故； 二、哪些人不宜参加此项工作： ①、基础体质太弱、患有免疫系统疾病或先天性免疫缺陷的人员。 ②、患有结核、肝炎、艾滋病、梅毒等传染性疾病的人员。 ③、患有精神系统疾病或有心理障碍者。 ④、妊娠期的工作人员。 三、如果您愿意从事此项工作，必须遵守如下规定，否则后果自负 ①、严格遵守国家有关实验室生物安全的法律、法规； ②、遵守本医院制定的各项规章制度； ③、遵守并严格执行微生物实验室制定的生物安全手册； ④、严格按照本实验室制定的SOP文件进行相关的实验和操作； ⑤、按照医院生物安全委员会的要求进行相关的体检和计划免疫； 可以自愿选择是否从事此项工作或中途退出 是否从事此项工作完全取决于您的自愿。您可以拒绝从事此项工作，或在工作过程中的任何时间退出。 四、同意声明 我已经阅读了上述有关此项工作的性质和可能存在的风险介绍，我提出的所
微生物实验室生物安全操作规程 tiger 一、目的 制订本规则，保证实验室工作人员的健康安全、实验设备安全卫生以及防止对外界环境造成污染。 二、适用范围 适用于微生物实验室人员人身安全、卫生健康安全管理及设备安全。 三、职责 实验室工作人员必需严格遵守安全操作规程。 四、安全操作规程： 1.员工安全操作规程 1.1 实验室入口处须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求及离开实验室的程序。 1.2 禁止非工作人员进入实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入，做好卫生防护，并在有关人员陪同下方可进入，同时注意做好环境维护及保密工作。 1.3 进行感染性实验时，禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意后方可进入。免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的工作人员必须经实验室负责人同意方可在实验室工作。 1.4 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手。 1.5 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物。 1.6 尽量以移液器吸取液体，禁止口吸。 1.7 实验过程中，严格按有关操作规程操作，降低溅出和气溶胶的产生。 1.8 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时用75%乙醇或巴氏消毒液消毒。 1.9 工作人员应接受必要的免疫接种和检测(如乙型肝炎疫苗、卡介苗等)。工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训。人员暴露于感染性物质时，及时向实验室负责人汇报，并记录事故经过和处理方案。 1.10禁止将无关动物带入实验室。 2.无菌室安全操作规程 2.1无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面一次(拖布专用)，紫外线照射消毒30min以上，超净工作台台面每次实验前要用75％酒精擦洗。然后紫外线消毒30min。操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。 2.2无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 2.3无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，75％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 2.4无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 2.5需要带入无菌室使用的器械、平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 2.6工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75% 乙醇等消毒剂再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 2.7无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟，并且同时打开超净台进
临床实验室生物安全体系文件 1 目的 建立生物实验室生物安全体系，使之有效运行，明确生物实验室人员职责，落实实验室生物安全管理责任制，做到权责统一。 2 适用范围 适用于检验科生物实验室和人员。 3 组织机构 生物安全管理实行医院院长责任制。 中心主任组织生物安全委员会负责生物安全工作， 同时委派一名副主任具体主管； 相关科室主任应对所辖科室的生物安全工作承担具体工作的领导责任。科负责人或科室生物安全员负责科室或具体项目的运行管理；实验室工作人员应认真阅读、理解本手册，并在相关实验活动中严格遵守，在发生生物安全隐患、意外事件或事故时应及时报告。院感科负责生物安全工作进行监督检查；其他相关职能部门对生物安全体系的运行提供所需保障。实验室设置兼职安全监督员。 4 各部门或人员职责 4.1 中心主任 ①作为实验室生物安全第一责任人，全面负责中心生物安全的各项工作； ②负责建立实验室生物安全防护实验室管理体系；
③组织生物安全委员会负责生物安全的工作 ④组织重大实验室生物安全事故的认定、危害评估和处置方案的制定； 4.2 检验科实验室生物安全管理小组 ①负责医院检验科实验室生物安全管理工作； ②督导生物安全制度的执行和措施的落实； ③负责领导安全防护实验室的建设、管理、使用、维护； ④协调与实验室生物安全相关科室部门的工作。 ⑤负责制定生物安全管理工作规范、操作技术指南及规范性技术文件并定期进行评价和更新； ⑥检验科实验室生物安全体系文件 ⑦批准和发布生物安全相关的技术文件。 4.3 检验科负责人 ①负责实验室的日常管理、实验技术和生物安全工作； ②组织生物安全防护知识和有关法规、制度、规程的宣贯； ③组织相关人员按要求进行培训、考核、体检和预防接种； ④决定进入实验室的工作人员； ⑤监督有关法规和操作规程的执行，纠正出现的违规活动并有权停止实验； ⑥定期组织对实验室设备各项技术参数的检查和实验室装备的维护保养； ⑦负责组织对实验室紧急情况及事故的处理并向生物安全委员会和
一级生物安全实验室验收标准 一、单位基本信息 1、单位名称：法人：电话： 2、实验室名称：负责人：电话：EMAIL： 3、实验室生物安全负责人：电话：EMAIL： 4、实验室性质： 5、实验活动涉及的微生物种类：种，属级病原微生物； 6、实验室生物安全防护申请验收级别：级 二、一级生物实验室安全防护内容 1、生物安全手册 从实验室立项、建设、使用维护的全过程生物安全防护综合措施均要纳入生物安全手册。（含实验活动危险度评估报告） 2、一级防护屏障 A安全设备：超静工作台、排风装臵、离心机要有安全密封的专用离心杯等。 B个人防护：防护服、口罩、手套、消毒剂等防护用品。 3、二级防护屏障 ⒈在出口处设洗手池；⒉门口处要有挂衣处，个人便装与实验室内工作服要分开；⒊墙壁、开花板、地面要平整、易清洁、不渗水、耐化学品、消毒剂腐蚀，地面防滑、不铺地毯；⒋台面要防水、耐腐蚀、耐热；⒌厨柜和实验台应牢固、两者之间要有一定距离便于清洁； ⒍有专门放微生物废弃物容器；⒎有开启的窗户应设纱窗；⒏有保证
工作照明的电力、避免强光、反射光；⒐有适当的消毒设施。 4、安全操作规程 ⒈禁止非工作人员进入；⒉接触微生物后、脱手套后、离开实验室前要洗手；⒊禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆、存放食品等非工作用具；⒋禁止口吸滴定管；⒌按尖锐器安全操作规范尽可能少的使用尖锐器；⒍按安全操作规程、尽可能降低病原微生物的溅出和气溶胶的产生；⒎每天至少消毒一次台面，活性物溅出要随时消毒；⒏培养物、废弃物在运出实验室前必须进行高压锅灭活，并放专用密闭容器中，由2人以上专运；⒐防虫、防鼠措施。 5、管理制度 A实验室布臵和准入：⒈实验室主工作区要合理设臵清洁区、半污染区、污染区；⒉非实验人员不得进入，外来实验者、进修、学习人员要经负责人批准；⒊禁止在主工作区饮食及其他非业务活动。 B实验室工作人员资格和培训：⒈固定的工作人员具备正规院校医学或生物学教育经历，具有医师或技师等专业技术资格，⒉经过生物安全技术专业培训，考核合格方可工作。 C工作人员健康管理：⒈上岗前应被告知有潜在危险，并接受安全教育、自愿从事实验室工作；⒉建立健康档案、接受可能接触微生物免疫、并有记录。 D实验室各项制度、规定、操作规程 （A）实验室涉及病原微生物实验活动的危害评估报告制度 （B）实验室人员准入制度 （C）实验室人员生物安全培训制度
兽医微生物实验室的生物安全分类（2005年版）凡涉及微生物及其提取物或基因工程产物操作的实验室，根据对病原微生物不同种类的生物安全要求。实验室的设计、设施也有所不同。目前国际公认的微生物实验室分为生物安全（biosafety level，BSL）1至4级。其中BSL-1最低，BSL-4最高。BSL-1~4俗称P1~4。 BSL-1实验室可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实验室工作人员和环境可能有微弱危害的、有明确特征的微生物实验工作。实验室与建筑物中的一般通道不隔开，一般在试验台上操作，不要求使用或经常使用专用封闭设备。 BSL-2实验室与BSL-1相似，适用于那些对人及环境有中度可能危害的微生物实验工作。其不同点在于：工作人员要经过操作病原因子的专门培训，并由能够胜任的专业人员进行指导和管理；工作时限制外人进入实验室；某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或其他封闭设备内进行；对污染的锐器采取高度防护措施。凡从事微生物基因的操作，均需在BSL-2实验室进行。 BSL-3实验室供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸入途径引起严重的或致死性疾病病原体的实验工作，例如从事高致病性禽流感、口蹄疫和艾滋病研究或检测的实验室BSL-3实验室的实验人员在处理病原体方面要经专门培训，并由有关专家进行监督管理。传染性材料的所有操作均要在生物安全柜或其他物理防护设施内进行，工作人员要穿适宜的防护服。BSL-3实验室要经过专业的设计和建造。 BSL-4实验室有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的实验室，必须达到BSL-4的安全水平。BSL-4实验室对防止微生物扩散到环境中有特殊的工程和设计要求。每一名实验室工作人员在处理病原微生物方面均要有特殊和全面的培训；要具有法定资格的科学家监督管理。实验室主任要严格控制进入实验室的人员。实验室均应是毒力的建筑物或是建筑物内的隔离区。要实施特殊的实验室安全工作细则。 在此种实验室的工作区内，所有的工作都要限制在II级生物安全柜或者是安全柜与一套由生命维持系统工期的正压个人工作服联合使用。
附件2： 山东省生物安全一级（BSL－1）和生物安全二级（BSL－2）实验室基本要求 项目BSL－1级实验室 BSL－2级实验室（首先满足 BSL－1 实验室的要求） 建筑设计设施装饰 分区 1．实验室(区)应与办公室(区)分开，实验室(区)有可控制进出的门。 2．实验室(区)应按功能划分，人流、物流应符合从清洁区到污染区 的要求。 1．实验区入口处宜设门禁系统。 2．实验区(室)宜划分成清洁区、缓冲区和污染区，人流、物流、信 息流的流程应有效分隔。 标识 1．实验室入口处宜有生物防护级别标识；必要时，还应有毒性、放 射性等危害标识。 2．实验室应有紧急出口和疏散标识，并在黑暗中可辨认。 1．实验室入口处应贴有生物危险标识，应标明生物防护级别、负责 人、紧急联系电话等信息。 2．实验室入口处应有工作状态的文字或灯光讯号显示。 空间大小 1．实验室入口处应设挂衣装置，个人便装与工作服分开放置。 2．实验室大小宜满足安全运行、方便清洁和维护；并有足够的物品 存储空间。 1．实验室工作区域外应有存放个人衣物的条件；有进食、饮水和休 息的场所。 2．实验室工作区域外应有供长期使用的储物间。 门窗 送排风 气流组织 1．实验室的门宜有可视窗并可锁闭，门锁及门的开启方向应不妨碍 室内人员逃生。 2．实验室应有防止节肢动物进入的设计，窗户开启时应使用纱窗(自 然通风)。必要时,应有防止啮齿动物进入的设计。 1．实验室主入口的门、放置生物安全柜实验室的门应可自动关闭。 2．实验室应通风；自然通风应使用纱窗，机械通风宜有不少于3-4 次/小时换气次数。 3．机械通风宜采用上送下排方式；生物安全柜的操作面或其他有气 溶胶操作点应远离送风口；生物安全柜的排风应经独立于建筑物公共 通风系统的管道排出；在确保功能正常基础上安全柜的排风可在室内 循环。 给水 排水 1．每个实验室应设洗手池，并在靠近门口处。洗手龙头应为自动感 应式、长手柄或脚踏式(即非手动开关)，并备消毒洗手皂液。 2．实验室水管系统应不渗漏，下水应有防回流设计。 配电 照明 通讯 1．实验室供电负荷应充足，地线可靠接地；有足够的固定电源插座。 2．实验室的照明应保证工作需要，避免反光和强光；有应急照明； 3．实验室视需要设置通讯系统或预留接口,并配备适宜的通讯设备。 1．有可靠的电力供应。 2．必要时，重要设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应配置备用电源。
临床实验室生物安全危害评估体系文件 1目的 建立生物实验室生物安全体系,使之有效运行,明确生物实验室人员职责,落实实验室生物安全管理责任制,做到权责统一。 2适用范围 适用于医院检验科生物实验室与人员。 3组织机构 生物安全管理实行医院院长责任制。 医院院长组织生物安全委员会负责生物安全工作,同时委派一名医院副院长具体主管; 相关科室(院感科与检验科)的主任应对所辖科室的生物安全工作承担具体工作的领导责任。科负责人或科室生物安全员负责科室或具体项目的运行管理;实验室工作人员应认真阅读、理解本手册,并在相关实验活动中严格遵守,在发生生物安全隐患、意外事件或事故时应及时报告。院感科负责生物安全工作进行监督检查;其她相关职能部门对生物安全体系的运行提供所需保障。实验室设置兼职安全监督员。4各部门或人员职责 4、1医院院长 ①作为实验室生物安全第一责任人,全面负责医院生物安全的各项工作; ②负责建立实验室生物安全防护实验室管理体系;
③组织生物安全委员会负责生物安全的工作 ④组织重大实验室生物安全事故的认定、危害评估与处置方案制定; 4、2检验科实验室生物安全管理小组 ①负责医院检验科实验室生物安全管理工作; ②督导生物安全制度的执行与措施的落实; ③负责领导安全防护实验室的建设、管理、使用、维护; ④协调与实验室生物安全相关科室部门的工作。 ⑤负责制定生物安全管理工作规范、操作技术指南及规范性技术文件并定期进行评价与更新; ⑥医院检验科临床实验室生物安全体系文件 ⑦批准与发布生物安全相关的技术文件。 4、3检验科负责人 ①负责实验室的日常管理、实验技术与生物安全工作; ②组织生物安全防护知识与有关法规、制度、规程的宣贯; ③组织相关人员按要求进行培训、考核、体检与预防接种; ④决定进入实验室的工作人员; ⑤监督有关法规与操作规程的执行,纠正出现的违规活动并有权停止实验; ⑥定期组织对实验室设备各项技术参数的检查与实验室装备的维护保养; ⑦负责组织对实验室紧急情况及事故的处理并向生物安全委员会与分管领导报告;
一级生物安全实验室注 意事项 https://www.doczj.com/doc/0012895491.html,work Information Technology Company.2020YEAR
一、一级生物安全注意事项 1.在实验期间实验室门保持关闭状态。 2.按照操作规程使气溶胶的产生降到最小。 3.在一级生物安全区域内不许吸烟、进食、喝饮料及贮存食物。 4.穿实验服。 5.不许用嘴吸吸液管，应使用机械的吸液设备。 6.避免使用皮下注射针。 7.完成实验操作离开实验室前要洗手。 8.定期消毒工作台面，有液体飞溅应立即消毒。 9.生物废弃物丢弃前需消毒。其它污染的原料在清洗、再利用或丢弃前也 需消毒。 10.污染物封口、耐用的、防漏的容器袋包裹，高压消毒后送到指定销毁 点。 11.控制昆虫和啮齿动物的出没。 12.保持工作区清洁。 二、清除污染 建议使用次氯酸盐和高级别的消毒剂来清除污染。一般情况可使用新鲜配制的含有效氯1 g/L 的次氯酸盐溶液，处理溢出的血液时，有效氯浓度应达到5 g/L。 (一)血液溢出物 1.穿戴手套、实验服和口罩， 2.用纸巾覆盖溢出物，向纸巾上倒有效氯含量5000mg/L含氯消毒剂，直到全 部浸透且不能流出。并维持适当的接触时间约30分钟。 3.用镊子夹取纸巾丢入医疗垃圾袋中。 4.用有效氯含量1000mg/L含氯消毒剂喷雾溢出区域并空气干燥15分钟。 5.15分钟接触反应后，用清水冲洗，用纸巾擦净这一区域。 6.将纸巾、手套丢入丢入医疗垃圾袋中。 7.用皂液和消毒洗手液洗手。 8.就此事件和处理过程做一个记录，报告给主管部门。 (二)皮肤感染
用抗菌皂液和温水冲洗感染部位15分钟。 (三)眼、面部飞溅 用冲眼器冲洗冲洗感染部位15分钟。 (四)医疗锐器伤或粘膜受血液或体液沾染 1.用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜。 2.如有伤口，应当在伤口稍上方轻轻挤压，从伤口近心处向远心方向挤压， 尽可能挤出损伤处的血液。禁止在伤口的局部，以免损伤局部组织。再用肥皂液和流动水进行冲洗5分钟，还应注意是哪个病人污染的，如果不知是哪一个病人，也应留意刺伤自已的针头。然后，填写《医疗锐器伤登记表》，报有关部门，做好登记，定期监测。 3.受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如：75%酒精或者0.5%碘伏进行消 毒，并包扎伤口；被暴露的粘膜，应当反复用生理盐水冲洗干净。 4.如遇被乙肝病人或艾滋病病人用过的针头刺伤，除了上述处理方法外，还 要立即注射免疫球蛋白，同时注射相应的疫苗，如乙肝疫苗等。同时还要在当时，三个月及六个月时抽血化验有没有相应的表面抗原，然后，报有关部门，做好登记，定期监测。 (五)检验冰箱冰柜离心机消毒 1.冰箱、冰柜的消毒 1)冰柜、冰箱的冷藏冷冻室的消毒用75%的酒精。 2)冰箱、冰柜的门把宜每日清洁，用75%的酒精浸湿毛巾擦拭，然后用干布擦 拭水分。 3)冰柜、冰箱的冷藏冷冻室最好每月清洁一次，清洁前取出全部物品，用75% 的酒精浸湿毛巾擦拭，然后用干布擦拭水分。作好记录。 2.离心机的消毒 1)离心机表面的消毒每天一次，按仪器表面消毒操作程序进行。 2)离心机内部的消毒宜每周一次，打开离心机盖，用75%酒精浸湿的毛巾擦拭 离心机内壁，转动机杆、转盘。 3)取出离心机离心筒用75%酒精醮湿棉签擦拭，当发生意外时，如试管离心 破裂时，要立即取出机筒，将玻璃碎片放入锐器盒，将污染的机筒放入容
临床实验室生物安全防 护制度 https://www.doczj.com/doc/0012895491.html,work Information Technology Company.2020YEAR
临床检验工作者在实验室的检测工作中，正确处理生物污染物而遵守的规程。 2.目的 为了满足实验室工作的需要，保证实验室的安全运作，保证工作人员的健康，将事故控制在最低限度，特制订实验室生物防护安全程序。 3. 标准 3.1程序适用对象：临床检验实验室的工作人员。 3.2本程序旨在规范临床实验室的生物安全管理，内容着重是对实验室和工作人员安全的要求。 3.3生物安全防护工作的职责：临床检验实验室的工作人员必须执行生物防护安全程序，以确保实验室的安全运作。 3.4工作程序： 3.4.1工作人员必须按照《临床检验实验室管理总则》进行实验室管理。 3.4.2工作人员必须按照《临床实验室人员流动管理程序》在实验室规范流动。 3.4.4实验室生物污染物严格按照《临床实验室生物污染物的处理程序》进行处理。 3.4.5临床实验室安全准则细则 3.4.5.1实验室工作区内绝对禁止吸烟（点燃的香烟是易燃液体的潜在火种；香烟、雪茄或烟斗都是传染细菌和接触毒物的途径）。 3.4.5.2 实验工作区内不得有食物、饮料。实验室工作区内的冰箱禁止存放食物。专用存放食物的冰箱应放置在允许进食、喝水的休息区内。实验室应制定禁止在同一个冰箱内存放食物和标本的专项制度。 3.4.5.3实验工作区内禁止进行化妆，并建议经常洗手的实验人员使用护手霜。 3.4.5.4在各工作区内，应穿舒适、防滑、并能保护整个脚面的鞋。 3.4.5.5实验室工作人员在脱下手套前后、离开实验室前、接触客户前后、接触标本前后都应该洗手。接触血液、体液或其它污染物时，应立即流水7步法洗手。 3.4.5.6所有实验室操作禁止用口移液，应使用助吸器（加样器）。
病原微生物实验室生物安全培训试题 科室______ 姓名______ 分数______ 1.气溶胶是指悬浮于气体介质中粒径一般为（）的固态或液态微小粒子形成的相对稳定的分散体系。分散 相含有生物因子的气溶胶。?? 1. A.??μm 2. B.??μm 3. C.??μm 4. D.??μm 2.?? 去除生物污染不一定杀灭微生物。所以操作中需要：（）。?? 1. A.??安全柜内操作 2. B.??向室外排放的空气要用高效空气颗粒 (high-efficiency particulate air, HEPA滤器过滤, 3. C.??排出的废水和废物要进行高压灭菌, 对传出的仪器和样本容器表面进行消毒。 4. D.??以上都是 3.?? 下列不属于实验室一级防护屏障的是（）。?? 1. A.??生物安全柜 2. B.??防护服 3. C.??口罩 4. D.??缓冲间 4.《病原微生物实验室生物安全管理条例》中华人民共和国国务院令第424号于2004年11月5日国务 院第69次常务会议通过（）公布，自公布之日起施行。?? 1. A.??2004"年"12"月"1"日" 2. B.??2004"年"11"月"12"日" 3. C.??2005"年"1"月"1"日" 4. D.??2005"年"6"月"1"日" 5.生物实验室中产生微生物气溶胶的操作有（）。?? 1. A.??接种环操作：培养和划线培养、在培养介质中“冷却”接种环、灼烧接种环等 2. B.??吸管操作：混合微生物悬液、混合微生物悬液、吸管操作液体溢出在固体表面等 3. C.??针头和注射器操作：排除注射器中空气、从塞子里拔出针头、接种动物、针头从注射器脱落 等 4. D.??其他操作：离心、搅拌、混合、灌注和倒入液体、打开培养容器、感染性材料溢出、在真空 中冻干和过滤、接种鸡胚和培养物收取等 5. E.??以上都是 6.省、自治区、直辖市人民政府卫生主管部门和兽医主管部门负责（）级实验室的备案。?? 1. A.??一 2. B.??二 3. C.??三 4. D.??一和二 7.生物安全实验室所在单位的上级主管部门设立的生物安全专家委员会职责有（）。?? 1. A.??对涉及感染因子、动物使用、重组DNA以及基因修饰物质等研究方案进行审查和分析危害程 度评估； 2. B.??负责对下属单位生物安全的日常监督、检查；
生物安全实验室一级标准（BSL-1） （一）生物安全实验室一级（BSL-1）适用于具有以下特征的生物因子的操作：已知不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等，且对实验室工作人员和环境的潜在危害性最小。 （二）进入BSL-1 实验室的工作人员要通过实验室操作程序的特殊培训，并由一位受过微生物学及相关科学一般培训的实验室工作人员监督管理。 （三）BSL-1 实验室标准微生物操作准则： 1. 实验正在进行或正在操作组织和标本时，实验室主任应限制人员进入实验室。 2. 操作潜在危险物和摘下手套后要洗手，离开实验室之前也要洗手。 3. 工作区内禁止吃东西、喝水、抽烟、操作隐形眼镜、使用化妆品及储存食物。在实验室戴隐形眼镜的人员应佩戴护目镜和防护面具。食物要储存在工作区外的专用柜子或冰箱里。 4. 严格禁止用嘴吸移液管，要使用机械吸液装置。 5. 制定尖锐物品的安全操作规范。 6. 所有的实验操作步骤尽可能小心，减少气溶胶或飞溅物的形成。 7. 工作日结束后，应实行终末消毒处理。如有任何潜在危险物溅出时，工作台表面应立即净化消毒处理。 8. 所有培养基、保存物和其它系统管理的废弃物，在处理之前应使用经审定批准的净化方法（如：高压灭菌法）进行净化处理。 9. 实验室应具备防止昆虫和啮齿类动物在实验室孳生的防护设备。 (四) BSL-1 实验室生物安全设备（一级屏障） 1. 操作属于生物安全一级的生物因子一般不需要特殊防护装置和设备，如生物安全柜。 2. 实验服、实验袍或实验制服，防止便服被污染或弄脏。 3. 如果手部皮肤破损或起疹时应戴上手套；要配备可替换的胶乳手套。
（一）生物安全实验室一级（BSL-1）适用于具有以下特征的生物因子的操作：已知不会导致健康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等，且对实验室工作人员和环境的潜在危害性最小。 （二）进入BSL-1 实验室的工作人员要通过实验室操作程序的特殊培训，并由一位受过微生物学及相关科学一般培训的实验室工作人员监督管理。 （三）BSL-1 实验室标准微生物操作准则： 1. 实验正在进行或正在操作组织和标本时，实验室主任应限制人员进入实验室。 2. 操作潜在危险物和摘下手套后要洗手，离开实验室之前也要洗手。 3. 工作区内禁止吃东西、喝水、抽烟、操作隐形眼镜、使用化妆品及储存食物。在实验室戴隐形眼镜的人员应佩戴护目镜和防护面具。食物要储存在工作区外的专用柜子或冰箱里。 4. 严格禁止用嘴吸移液管，要使用机械吸液装置。 5. 制定尖锐物品的安全操作规范。 6. 所有的实验操作步骤尽可能小心，减少气溶胶或飞溅物的形成。 7. 工作日结束后，应实行终末消毒处理。如有任何潜在危险物溅出时，工作台表面应立即净化消毒处理。 8. 所有培养基、保存物和其它系统管理的废弃物，在处理之前应使用经审定批准的净化方法（如：高压灭菌法）进行净化处理。 9. 实验室应具备防止昆虫和啮齿类动物在实验室孳生的防护设备。 (四) BSL-1 实验室生物安全设备（一级屏障） 1. 操作属于生物安全一级的生物因子一般不需要特殊防护装置和设备，如生物安全柜。 2. 实验服、实验袍或实验制服，防止便服被污染或弄脏。 3. 如果手部皮肤破损或起疹时应戴上手套；要配备可替换的胶乳手套。
4. 操作中遇到可能有微生物或其它有毒害物质飞溅出来时，应佩戴保护性眼罩。 （五）BSL-1 实验室设施（二级屏障） 1. BSL-1 实验室应该有控制进入的门。 2. 每个实验室应配备一个洗手用的洗涤槽。 3. 实验室的设计应使实验室易于清洁。实验室里不适合铺设地毯。 4. 实验台面应是防水的，并且能够耐受中等程度的热、有机溶剂、酸碱及其它用于净化处理台面和设备的化学药品。 5. 实验室器材设施应能支持预期的承重和使用需要。桌凳、柜子和设备之间的间距应便于清扫。如果实验室有向外开放的窗户，窗户上应安装防蚊蝇的纱窗。
培训教材 实验室生物安全相关法律法规和标准 沅江市疾控中心吟 二零一一年三月十八日
病原微生物实验室生物安全 相关法律法规和标准 实验室生物安全防护的发展 二十世纪五十年代，美国在开展生物武器、化学武器的实验室研究中，为了防止生物因子(病原微生物)和化学毒剂泄漏逃逸到实验室外环境，研制了一系列的防护装备和设备，如高效粒子空气过滤器、生物安全柜等；建设了BSL－3实验室和BSL－4实验室等。 实验室生物安全防护的发展 实验室生物安全法律法规和标准的发展 实验室获得性感染的调查 美国实验室生物安全专家Sulkin and Pike调查了5000多个实验室，发现： ——累计实验室相关感染3921例； ——病原微生物实验室获得性感染的病原微生物有： 肝炎、布氏菌病、肺结核、野兔热(土拉弗氏菌)、斑疹伤寒、 委瑞拉马脑炎(Venzuelan Equine Encephalitis) 实验室获得性感染原因 在3921例实验室感染中，对导致感染的原因分析发现： ——低于20%的实验室获得性感染与已知的事故有关； ——80％与实验室工作人员暴露与感染性气溶胶有关。 ——80% 是不明原因的感染。 ——20% 感染的原因是明确的。 其中80% 是由工作人员操作失误引起的；20% 是由设备故障引起的。 实验室获得性感染原因 在3921例实验室感染中，对导致感染的原因分析发现： 导致感染最多的4种实验室事故 ——溢出和泼洒； ——针头和注射器； ——锐器、碎玻璃； ——动物或动物体外寄生虫的咬伤或抓伤。 案例一 ——新加坡实验室人员感染SARS(2003年) 案例二 ——国实验室人员感染SARS(2004年) 早在1979年，美国实验室生物安全专家Pike在他的一篇评论中指出： ——"生物安全知识、防护技术和设备对防止大多数实验室感染的发生是非常有用的"。 病原微生物危害和生物安全定义 为了避免微生物和医学实验室中有害或有潜在危害的生物因子对人、环境和社会造成的危害或潜在危害，而采取的防护措施（硬件）和管理措施（软件），达到对人、环境和社会的安全防护目的。 什么是实验室生物安全？
世界卫生组织（WHO）根据致病能力和传染的危险程度等，将传染性微生物划分为4类；根据设备和技术条件，将生物实 验室也分为4级（一般称为P1、P2、P3、P4实验室），1级最低，4级最高。P1实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物；P2适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物；P3适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素；P4适用于对人体具有高度的危险性，通过汽溶胶途径传播或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物或其毒素。 P2实验室即二级生物安全实验室，相当于BSL-2实验室。 一、主要技术指标的确定 BLS-2 实验室主要用于初级卫生服务、诊断和研究，其实验对象的危害等级为Ⅱ级（中等个体危害，有限群体危害），具体定义为“能引起人类或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病源体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限”。据此，待颁布的国标《生物安全实验室建筑技术规范对BLS-2实验室规定了以下技术指标(静态): 1、洁净度：无要求 2、最小换气次数：可开窗通风 3、与室外方向相邻相通房间的压差：无要求 4、温度℃：18~27 5、相对湿度％：30~70 6、噪声dB(A)：≤60 7、最低照度lx：300 *上诉指标是建立BLS-2实验室的最低要求，建设者可根据实际需要 适当提高相应指标，如洁净度、压差等。 二．建筑、结构和装修要求
现在BLS-2实验室大多数是在原有建筑物内进行改建，不同于新建的BLS-2实验室（国标中，要求新建BLS-2实验室宜离开公共场所一段距离），在与相邻其他房间之间，存在着一个相对隔离问题。所以在原有建筑物中改建BLS-2实验室，应重点注意以下几个问题。 1、在共用建筑物中建BLS-2实验室，应设可自动关闭的带锁的门，必要时，可设立缓冲区域，如缓冲间等。 2 、如果没有机械通风系统，应有窗户进行自然通风，并应有防虫纱窗。（一般情况下，应有机械通风系统，否则，温湿度指标难以保证）。 3、应有防昆虫、鼠等动物进入和外逃的措施。 三．空调、通风和净化 为满足BLS-2 实验室温湿度要求，宜配备机械空调通风系统，有特殊要求的可增设设计要求，如增设净化要求并按净化要求进行送回（排）风系统设计等。这方面，应重点处理好以下几个问题： 1、可以采用带循环风的空调系统。如果涉及化学溶媒，感染性材料操作和动物实验，则应采用全排风系统。 2、生物安全柜与排风系统连接 I级排风比例100%，密闭连接。 II级A型排风比例30%，可排到房间或设置局部排风罩。 B1型排风比例70%，密闭连接。 B2型排风比例100%，密闭连接。 3 、实验室内各种设备的位置应有利于气流由“清洁”空间向“污染”空间流动，最大限度减少室内回流与漏流（生物安全柜一般应置于室内气流最下游，即最远离送风口处）。 *生物安全柜的排风不能代替室内排风。 四．排水 含菌污水应经高温高压消毒或化学消毒后排放至市政污水排放公用系统。 五．电气设置 1、应设专用配电箱。
一、一级生物安全注意事项 1.在实验期间实验室门保持关闭状态。 2.按照操作规程使气溶胶的产生降到最小。 3.在一级生物安全区域内不许吸烟、进食、喝饮料及贮存食物。 4.穿实验服。 5.不许用嘴吸吸液管，应使用机械的吸液设备。 6.避免使用皮下注射针。 7.完成实验操作离开实验室前要洗手。 8.定期消毒工作台面，有液体飞溅应立即消毒。 9.生物废弃物丢弃前需消毒。其它污染的原料在清洗、再利用或丢弃前也需 消毒。 10.污染物封口、耐用的、防漏的容器袋包裹，高压消毒后送到指定销毁点。 11.控制昆虫和啮齿动物的出没。 12.保持工作区清洁。 二、清除污染 建议使用次氯酸盐和高级别的消毒剂来清除污染。一般情况可使用新鲜配制的含有效氯1 g/L 的次氯酸盐溶液，处理溢出的血液时，有效氯浓度应达到5 g/L。 (一)血液溢出物 1.穿戴手套、实验服和口罩， 2.用纸巾覆盖溢出物，向纸巾上倒有效氯含量5000mg/L含氯消毒剂，直到全部 浸透且不能流出。并维持适当的接触时间约30分钟。 3.用镊子夹取纸巾丢入医疗垃圾袋中。 4.用有效氯含量1000mg/L含氯消毒剂喷雾溢出区域并空气干燥15分钟。 5.15分钟接触反应后，用清水冲洗，用纸巾擦净这一区域。 6.将纸巾、手套丢入丢入医疗垃圾袋中。 7.用皂液和消毒洗手液洗手。 8.就此事件和处理过程做一个记录，报告给主管部门。 (二)皮肤感染 用抗菌皂液和温水冲洗感染部位15分钟。
(三)眼、面部飞溅 用冲眼器冲洗冲洗感染部位15分钟。 (四)医疗锐器伤或粘膜受血液或体液沾染 1.用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜。 2.如有伤口，应当在伤口稍上方轻轻挤压，从伤口近心处向远心方向挤压，尽 可能挤出损伤处的血液。禁止在伤口的局部，以免损伤局部组织。再用肥皂液和流动水进行冲洗5分钟，还应注意是哪个病人污染的，如果不知是哪一个病人，也应留意刺伤自已的针头。然后，填写《医疗锐器伤登记表》，报有关部门，做好登记，定期监测。 3.受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如：75%酒精或者0.5%碘伏进行消 毒，并包扎伤口；被暴露的粘膜，应当反复用生理盐水冲洗干净。 4.如遇被乙肝病人或艾滋病病人用过的针头刺伤，除了上述处理方法外，还要 立即注射免疫球蛋白，同时注射相应的疫苗，如乙肝疫苗等。同时还要在当时，三个月及六个月时抽血化验有没有相应的表面抗原，然后，报有关部门，做好登记，定期监测。 (五)检验冰箱冰柜离心机消毒 1.冰箱、冰柜的消毒 1)冰柜、冰箱的冷藏冷冻室的消毒用75%的酒精。 2)冰箱、冰柜的门把宜每日清洁，用75%的酒精浸湿毛巾擦拭，然后用干布擦拭水 分。 3)冰柜、冰箱的冷藏冷冻室最好每月清洁一次，清洁前取出全部物品，用75%的酒 精浸湿毛巾擦拭，然后用干布擦拭水分。作好记录。 2.离心机的消毒 1)离心机表面的消毒每天一次，按仪器表面消毒操作程序进行。 2)离心机内部的消毒宜每周一次，打开离心机盖，用75%酒精浸湿的毛巾擦拭离心 机内壁，转动机杆、转盘。 3)取出离心机离心筒用75%酒精醮湿棉签擦拭，当发生意外时，如试管离心 破裂时，要立即取出机筒，将玻璃碎片放入锐器盒，将污染的机筒放入容器中用5000mg/l的84消毒液浸泡60分钟，水洗、清洁、干燥后方可使用。 4)作好记录。