抗草甘膦 EPSPS 基因的专利保护分析
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选择标记基因是在基因工程中用于追踪、筛选和识别转基因生物的基因。
常用的选择标记基因通常有以下几种:
1. 抗生素抗性基因:这是最常见的选择标记基因之一。
它包括对抗生素具有抗性的基因,如抗氨苄青霉素的ampicillin抗性基因(Amp^r)、抗卡那霉素的kanamycin抗性基因(Kan^r)等。
在转基因生物中,如果引入了这些抗生素抗性基因,通过培养在含有相应抗生素的培养基上,可以筛选出携带了外源基因的转基因生物。
2. 草除基因:草除基因包括对草甘膦(glyphosate)具有抗性的基因,如EPSPS (5-磷酸戊烯醇酸-3-磷酸基脱氢酶)基因。
转基因植物通过引入这一基因,可以在草甘膦存在的情况下生存,而普通植物则会被草甘膦杀死。
3. 草食动物抗性基因:一些转基因植物中也引入了草食动物抗性基因,如Bt(Bacillus thuringiensis)基因。
这种基因能够产生杀虫蛋白,使得植物对某些害虫具有抗性。
4. 荧光蛋白基因:荧光蛋白基因,如绿色荧光蛋白(GFP)基因,常用于研究中。
它可以使转基因生物的特定组织或细胞发出荧光,方便科学家观察和追踪。
5. 草果糖激酶基因:草果糖激酶(bar)基因是用于水稻等植物的一种选择标记基因,它提供了对草草除剂草甘膦的抗性。
在选择标记基因的应用中,有时也会考虑避免使用对人类和环境可能有不良影响的基因,因此在转基因技术的发展中,也在不断寻求更为安全和可持续的选择标记基因。
辩证法浅谈转基因大豆每次去超市购买豆油的时候,都会仔细挑选,大家都喜欢买非转基因的豆油。
那么转基因大豆到底是什么。
转基因大豆的研制是为了配合草甘膦除草剂的使用。
除草剂有选择性的和非选择性的,草甘膦是一种非选择性的除草剂,抗草甘膦转基因作物是目前全球播种面积最大的转基因作物。
草甘膦杀死植物的原理在于破坏植物叶绿体或者质体中的EPSPS(5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合成酶)。
通过转基因的方法,让植物产生更多的EPSPS酶,就能抵抗甘草膦,从而让作物不被草甘膦除草剂杀死。
有了这样的转基因大豆,农民就不必像过去那样使用多种除草剂,而可以只需要草甘膦一种除草剂就能杀死各种杂草。
当前除了大豆之外,还有很多其他抗甘草膦的转基因作物,包括油菜、棉花、玉米等。
除了抗草甘膦作物之外,还有抗草丁膦除草剂的作物,不过草丁膦与草甘膦杀灭植物的原理并不相同,而培养这两类作物所转的基因也不同。
而当前转基因大豆主要用来提炼大豆油。
对于这种新东西的面世,大家众说纷纭。
它究竟是好还是坏,可以从社会主义基本原理来对它进行讨论。
关于转进因大豆的发明:事物是普遍联系的。
事物具有普遍性,世间万物都是存在普遍的联系的。
因此说,转基因大豆的发明一定是有他的原因的。
转基因技术在农业上的应用大大提高了作物质量极其产量,解决了目前因人口激增带来的粮食短缺问题,这也是很多推广转基因的人重点考虑的因素。
另外,转基因技术研究对于科学家更是有着魔幻般的吸引力。
转基因技术研究分子水平上的生命过程,对于人类探求自身起源与进化有着重要意义,掌握转基因技术,对于研究人类遗传病、推动医学的发展有着巨大的帮助,当然对人类本身非常有利。
转基因技术的弊端:任何事物都是有两面性的。
技术是一把双刃剑,转基因技术的当然也不例外。
转基因技术的研究还不够成熟,其存在很多弊端,具体表现在对环境的影响和对生物的影响。
具体危害如下:1、转基因大豆及产品会引起跨物种感染,使人类感染动物的疾病,带来严重灾难。
抗除草剂转基因玉米的快速鉴定方法作者:王莹袁英来源:《江苏农业科学》2014年第04期摘要:以含不与除草甘膦结合的突变型5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因除草剂筛选标记的转基因玉米为材料,通过叶片喷雾和叶片离体平板培养等试验,建立快速非分子生物学抗除草剂转基因玉米的鉴定方法。
结果表明:用5 000 mg/L草甘膦叶片喷雾和用70 mg/L草甘膦叶片离体培养可快速准确地鉴定是否转入除草剂基因。
关键词:转基因玉米;抗除草剂;草甘膦;鉴定方法中图分类号: S513.01 文献标志码: A 文章编号:1002-1302(2014)04-0054-03收稿日期:2013-08-15基金项目:吉林省财政厅育种项目。
作者简介:王莹(1982—),女,吉林长春人,硕士,讲师,从事生物技术方向研究。
Tel:(0431)84602461;E-mail:grammy1981@。
通信作者:袁英,硕士,研究员,从事作物遗传转化研究。
Tel:(0431)87063098;E-mail:32854085@。
随着转基因作物商业化生产的发展,转基因作物种植面积从1996年的170万hm2增加到2012年的1.7亿hm2,增长了99倍,这是前所未有的突破,其中抗除草剂作物种植面积最大[1]。
在植物转基因研究过程中,通常采用选择性标记基因提高筛选效率,而除草剂基因是较常用的筛选标记基因,而5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因最常用。
目前,国际上种植面积最大的抗除草剂转基因玉米是转EPSPS基因抗农达除草剂玉米[2]。
近几年,国内对抗除草剂转基因玉米和抗除草剂筛选方法的研究也取得了很大的成功[3-11]。
在转基因研究和安全评价等过程中对转基因植株的鉴定是必不可少的环节[12],传统上初步鉴定转基因的方法是利用聚合酶链反应(PCR)鉴定目的基因DNA片段是否存在;但是PCR方法步骤繁琐,做大量鉴定运用时有一定的局限性。
利用筛选标记基因的农艺性状,建立快速有效的非生物鉴定方法非常必要。
浙江省普通高校招生选考科目模拟考试(二)生物试题本试题卷分选择题和非选择题两部分,共8页,满分100分,考试时间90分钟。
选择题部分一、选择题(本大题共19小题,每小题2分,共38分。
每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的,不选、多选、错选均不得分)1.6月17日是世界防治荒漠化和干旱日,根据联合国的最新数据,全球旱地面积已占全球陆地面积的46.2%,全世界有30亿人口居住在这一区域。
下列措施中会加剧荒漠化的是( )A.实施精准农业B.滥牧滥樵滥垦C.推进治沙工程D.流域综合治理2.下列关于细胞生命历程的叙述,正确的是( )A.已分化的动物体细胞的细胞核仍具有全能性B.衰老细胞中细胞核体积增大,细胞中所有酶活性都降低C.已分化的细胞执行特定的功能,均不能再分裂增殖D.被病原体感染的细胞的清除属于细胞坏死3.下列关于果酒和果醋制作的叙述,正确的是( )A.果酒和果醋制作分别需要醋酸菌和酵母菌B.制作果酒和果醋都需要不断充入氧气C.乙醇发酵和醋酸发酵过程中都一定有气体产生D.酵母菌和醋酸菌都可以利用糖源进行发酵4.下列有关生物技术安全性等问题的观点,正确的是( )A.生殖性克隆人理论上增加了人类基因的多样性B.生殖性克隆需要核移植技术,而治疗性克隆不需要C.生物武器的特点有具有传染性、携带和投放相对简单、研发门槛较高等D.“设计试管婴儿”可以有目的地改造特定基因,特定情况下可用于疾病治疗5.细胞只有不断地通过与外界进行物质交换,才能维持其生命活动。
下列叙述正确的是( )A.细胞与外界的物质交换主要依赖于扩散来实现B.载体蛋白介导的物质转运过程中需要ATP为其提供能量C.果脯在腌制中慢慢变甜,是细胞通过主动转运吸收糖分的结果D.大分子物质进出细胞需要依赖于细胞膜的结构特性6.在细胞需氧呼吸过程中,2,4-二硝基苯酚(DNP)能抑制ATP合成过程,但对水的生成没有影响。
据此推测,DNP起作用时( )A.葡萄糖氧化分解时散失的热能增加B.主要在线粒体基质中发挥作用C.不会影响K+进入植物的叶肉细胞D.会影响人体成熟红细胞的需氧呼吸7.下图为人体内环境进行物质交换的部分过程示意图,其中a、b、c表示构成内环境的几种主要体液。
高三生物期末测试卷及答案一、选择题:(每题只有一个选项符合要求。
共20题,每题1分,共20分)1.下列有关化合物分类关系的集合图中正确的是2.图a、b、c分别是三种生物细胞的结构模式图。
下列叙述正确的是A.三种细胞内遗传物质的载体都是染色体B.a细胞有细胞壁,b、c细胞没有该结构C.三种细胞中共同具有的细胞器只有核糖体D.a、b细胞内具膜结构的细胞器构成了生物膜系统3.细胞作为生命活动的基本单位,其结构和功能高度统一。
下列叙述不正确的是A.卵细胞体积较大有利于与周围环境进行物质交换,为早期胚胎发育提供养料B.哺乳动物成熟的红细胞表面积与体积之比相对较大,有利于提高气体交换效率C.小肠绒毛上皮细胞内有大量的线粒体,有助于物质运输的能量供应D.哺乳动物成熟精子中细胞质较少,外形似蝌蚪,有利于精子运动4.下列有关ATP的说法正确的是A.ADP转化为ATP需要Pi、酶、腺苷、能量B.人体细胞内储存有大量的ATPC.线粒体是蓝藻细胞产生ATP的主要场所D.光合作用和细胞呼吸都能产生ATP5.在真核细胞中,核孔复合体是细胞核与细胞质进行物质交换的通道。
下列物质经核孔复合体向细胞质方向运输的是A.DNAB.DNA连接酶C.转运RNAD.RNA聚合酶6.下列有关酶的实验设计思路正确的是A.利用淀粉、蔗糖、淀粉酶和碘液验证酶的专一性B.利用过氧化氢和淀粉酶探究温度对酶活性的影响C.利用过氧化氢、鲜肝匀浆和FeCl3研究酶的高效性D.利用胃蛋白酶、蛋清和pH分别为5、7、9的缓冲液验证pH对酶活性的影响7.下图所示为甘蔗的叶肉细胞内的系列反应过程,下列有关说法正确的是A.过程①消耗CO2释放O2,过程③消耗O2释放CO2B.过程②只发生在叶绿体基质,过程③只发生在线粒体基质C.过程①产生[H],过程②消耗[H],过程③产生[H]也消耗[H]D.若过程②的速率大于过程③的速率,则甘蔗的干重必然增加8.右图示某同学在高倍镜下观察到的水仙根尖细胞有丝分裂的情况,相关叙述正确的是(数字标识其左侧细胞)A.1的染色单体数为其它细胞的两倍B.2的染色单体数与核DNA分子数比为1∶2C.3的染色体数与核DNA分子数比为l∶1D.4的中心体数为2个9.下列数据是人体部分器官中所表达基因的数目,有关叙述正确的是器官或细胞眼唾液腺皮肤甲状腺血细胞心脏所表达基因的数目 1932 186 **** **** 23505 9400A.人体各器官所表达的基因数目不同,种类也完全不同B.血细胞所表达的基因数目最多,说明其遗传物质相对含量较高C.人体各器官表达的基因数目有差异,说明不同细胞内所含基因不同D.细胞种类不同表达的基因不同,这与细胞完成不同的功能相适应10.下列有关染色体、DNA、基因、脱氧核苷酸的说法,不正确的是A.在DNA分子结构中,与脱氧核糖直接相连的一般是一个磷酸基和一个碱基B.基因是具有遗传效应的DNA片段,一个DNA分子上可含有成百上千个基因C.一个基因含有许多个脱氧核苷酸,基因的特异性是由脱氧核苷酸排列顺序决定的D.染色体是DNA的主要载体,一条染色体上含有1个或2个DNA分子11.下图表示某伴性遗传病的家系。
[VOL_43,No_2 February_201^l Frontiersofscienceandtechnology |科技前沿丨3基因超进化:农作物转基因之外的一条新路径◎盛利以往,人们对转基因作物的争论焦点是,把外源 基因转入农作物后,外源基因是否存在安全隐患. 那么,能否找到一条仅靠农作物自身基因突变,就获 取农作物抗病虫、抗除草剂等优良性状基因的路径?一种旨在实现上述目标的“基因超进化”技术己在 四川诞生,并获四川省科技计划项目支持。
目前,该项目科研团队已通过自主研发的“基因 超进化”技术,在实验室内对水稻自身的EPSPS基 因(抗草甘膦除草剂基因)进行髙通量筛选、分离,促进其定向、高速进化,得到高抗草甘膦的功能性基 因,并获得两项发明专利。
—个试管两天完成百万基因筛选上世纪90年代,种业巨头孟山都率先在农杆菌 中分离出EPSPS基因的突变体CP4基因,并将该基 因转入植物使其获得草甘膦抗性,开启了全球农业 转基因的浪潮。
“CP4并非来源植物,而是来自草甘膦生产工厂 内发生突变的f农杆菌’,这成为转基因作物最大的 争议。
”项目承担企业一一四川天豫兴禾生物科技有 限公司首席科学家胥南飞说,由于所有植物都不含 有抗草甘膦基因,这使得传统的、仅限植物之间的基 因育种,很难获得抗草甘膦的基因,最终科学家只有 将细菌中的抗体基因转入植物。
找到一条仅靠农作物自身基因突变,就能获取抗病虫、抗除草剂等优良基因的路径,曾在孟山都、巴斯夫、拜尔等农业科技公司任职近20年的胥南飞,于2015年启动研发“基因超进化”技术。
“基因超进化是指在一个特定的系统中,使植 物的目标基因按照预设的要求,完成高效、快速、定 向的进化过程,从而形成我们所需要的突变性状基 因。
”胥南飞说,这项技术的创新在于,能够将目标基 因从水稻等作物中提取出来,在实验室进行大规模 突变和髙速筛选。
为农作物基因编辑“量体裁衣”目前,胥南飞团队已承担四川省科技计划项目 《植物抗草甘膦功能基因的快速进化与筛选研究》,其目标正是运用“基因超进化”的原理建立抗草甘 膦除草剂基因的高效进化、筛选系统,使其能够大量 地制造EPSPS基因突变体,并通过循环进化不断提 升该基因对草甘膦的抗性。
转基因大豆安全性研究【摘要】转基因大豆是世界上最早商品化、推广应用速度最快的转基因作物,但其遗传转化仍然是基因工程领域的难点之一,如何建立高效稳定的遗传转化体系是转基因大豆的研究重点,同时随着转基因大豆走上人们的餐桌,关于其安全性也引起了人们的质疑。
本文将从目前研究的各个方向来阐述转基因大豆的发展现状、转基因大豆的优势、转化技术、安全性评价以及对未来转基因生物的展望。
【关键字】转基因大豆、环境安全、生物多样性、基因漂移【正文】一、转基因大豆生产的现状近年来,美国的转基因大豆商业化速度进展很快,1994年美国Monsanto公司研制的抗草甘膦转基因大豆被批准进行商业化生产,1997年DuPont公司研制的高十八烯酸(油酸)大豆被批准进行商业化生产,1998年AgrEvo公司研制的抗草丁膦大豆被批准进行商业化生产。
2001年,世界种植大豆总面积7 200万公顷,而转基因大豆有3330万公顷占据全球转基因作物的63%,且均为抗除草剂大豆。
目前种植转基因大豆的国家主要是美国(转基因大豆约占97%)、阿根廷(转基因大豆约占90%)和巴西(转基因大豆约占25%)等,我国还没有转基因大豆生产。
二、转基因大豆的优势1、转基因大豆的主要特性大豆是植物蛋白、油脂、食品、饲料及工业原料的重要来源作物。
仅排在水稻,小麦和玉米之后,是世界四大粮食作物之一。
当前,转基因大豆商业化种植的主要品种美国抗除草剂草甘膦转基因大豆是通过农杆菌介导方法,将矮牵牛Ti质粒(GaMy)中35s启动子控制EPSPE基因导入到大豆植株,进而培育成的新品种[1]。
其含有的4个来源于土壤细菌的5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-膦酸合成酶(epsps)基因,是草甘膦抗性的主要来源[2]。
此基因与大豆酚类、生物碱和芳香族氨基酸等代谢相关。
抗草甘膦转基因大豆的特性主要表现为:较好控制草害、大豆产量高、抗虫性较强、护土壤、降低污染、改善环境、防止土壤养分及水土的流失、减少除草剂活性成分及能有效地控制杂草的生长与繁育,转基因大豆食品使大豆油的产量与品质得到改良、延长食品贮藏时间。
转基因大豆的检测实验设计生物技术安全评估 092012年5月目录前言........................................................................3. 实验一大豆样品的准备 (4)实验二大豆DNA的提取和纯化 (4)实验三靶标基因的扩增 (6)实验四反应产品检测 (10)实验五结果分析 (12)参考文献 (12)前言随着转基因工程技术的迅速发展与在生物改良及遗传育种中的大规模应用,转基因生物(Genetically Modified Organism)及其产品的种类越来越多,含有的外源基因类型也越来越多。
抗草甘膦(glyphosate)大豆(商品名,roundup ready soybean)是在传统大豆株Variety A5403中转入外源基因CAMV-35S启动子、抗草甘膦基因CP4-EPSPS和NOS终止子而得到。
它是目前使用最广的转基因作物之一,每年至少有800万吨转基因大豆进入我国市场。
因此,研究抗草甘膦大豆的快速检测方法具有重要意义。
基于核酸的检测技术主要有PCR 方法和基于PCR 原理的其他检测方法如多重PCR、巢式PCR 等等。
普通PCR 方法已经成为转基因检测中常用的方法,通常是作为定性检测方法,早在2003 年就成为出入境检验检疫系统的行业标准。
这些标准涉及的转基因作物有大豆(SN/T 1195-2003)、玉米(SN/T 1196-2003)、棉花(SN/T 1199-2003)、油菜籽(SN/T 1197-2003)、烟草(SN/T 1200 -2003) 和马铃薯(SN/T 1198 -2003)。
目前广泛应用于进出口商品的转基因成分检测。
随后在2004 年又制定了转基因定性检测的国标(GB/T 19495.4-2004),该国标中用的方法还是普通PCR。
因此,普通PCR 方法的研究主要在于新的转基因作物的鉴定研究。
重组抗原CP4-EPSPS的克隆、表达和纯化邓汉超;刘玉琛;邓国标;刘晋;周向阳【摘要】构建了一个含有CP4-EPSPS外源基因的细菌表达载体并在E.coliBL21(DE3)中的高效表达,通过SDS-PAGE检测发现,目的蛋白完全以可溶性方式存在于细胞破碎上清液中.收集该上清液并进而通过镍柱亲和层析,CP4-EPSPS重组蛋白纯度可达85%以上,利用Brandford法测定蛋白质浓度为0.9 mg/mL.该蛋白表达和纯化体系可为转基因植物、食品等蛋白检测用抗体提供稳定免疫性抗原,同时也可为蛋白标准物质研制提供稳定物质基础.【期刊名称】《粮油食品科技》【年(卷),期】2017(025)005【总页数】3页(P59-61)【关键词】CP4-EPSPS;表达;纯化【作者】邓汉超;刘玉琛;邓国标;刘晋;周向阳【作者单位】深圳市农业科技促进中心,广东深圳518040;农业部农作物种子质量监督检验测试中心(深圳),广东深圳518040;深圳市作物分子设计育种研究院,广东深圳518107;深圳市作物分子设计育种研究院,广东深圳518107;深圳市农业科技促进中心,广东深圳518040;农业部农作物种子质量监督检验测试中心(深圳),广东深圳518040;深圳市农业科技促进中心,广东深圳518040;农业部农作物种子质量监督检验测试中心(深圳),广东深圳518040【正文语种】中文【中图分类】Q81世界上第一例转基因抗草甘膦大豆问世以来,转基因作物的应用与推广已有16载,我国每年从国外进口大量的转抗草甘膦CP4-EPSPS的作物和食品。
随着人们对食品及转基因食品安全的关注,建立转基因作物、苗、种子及其产品的检测技术体系极为重要。
我国目前市场上已经开发出多种商业化的基于蛋白质测定的转基因检测试剂盒,然而由于生产工艺的不同,表达出的外源蛋白通过参考物质定量的量值难以溯源到上一级的计量标准,因此造成不同厂商不同试纸条测定结果不准确和缺乏可比性,为此将对转基因的安全监管带来隐患,而且会引发法律、贸易纠纷等经济和社会问题。
配餐作业(四十)基因工程1.下列有关基因工程的说法正确的是()A.假如某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因把握的性状相同,则这两个基因的结构也完全相同B.一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必需有启动子、终止密码子和标记基因C.目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为转化D.将目的基因导入植物细胞和动物细胞的常用方法是显微注射法解析:cDNA是由mRNA反转录得到的,由于mRNA缺乏内含子和启动子,所以即使某生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因把握的性状相同,这两个基因的结构也可能是不相同的。
基因表达载体包括启动子、目的基因、标记基因、终止子,而终止密码子存在于mRNA上。
将目的基因导入植物细胞通常用农杆菌转化法,导入动物细胞用显微注射法。
答案:C2.下面是3种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图(箭头表示切点,切出的断面为黏性末端)。
相关叙述错误的是()限制酶1:——↓GATC——限制酶2:——CCGC↓GG——限制酶3:——G↓GATCC——A.不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶的专一性B.限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对C.限制酶1和酶3剪出的黏性末端相同D.能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2解析:不同限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶具有专一性;限制酶2和3识别序列分别是CCGCGG和GGATCC,均为6个碱基对;限制酶1和3剪出的黏性末端相同;三种限制酶均不能识别和切割RNA中核糖核苷酸序列。
答案:D3.科学家接受基因工程技术将矮牵牛中把握蓝色色素合成的基因a转移到玫瑰中,以培育蓝玫瑰,下列操作正确的是()A.利用DNA分子杂交技术从矮牵牛的基因文库中猎取基因aB.用氯化钙溶液处理玫瑰叶肉细胞,使其处于感受态C.用含四环素的培育基筛选转基因玫瑰细胞D.将基因a导入玫瑰细胞液泡中,防止其经花粉进入野生玫瑰解析:将目的基因导入微生物细胞时,用氯化钙溶液处理受体细胞,可使其处于感受态,利于目的基因的导入。