两种纳豆激酶活性测定方法对比及相关性分析

纳豆激酶的研究综述王爱萍;林燕飞;王赞;陶志文【摘要】纳豆激酶具有非常好的溶血栓作用,具有半衰期长、血液中半衰期长等优点,来源于传统食品纳豆,安全可靠,是一种潜在的安全有效的绿色抗血栓药物,高活性纳豆激酶产品技术的研发有利于民生健康.源于传统食品纳豆的纳豆激酶,可由细菌发酵生产,成本低、安全性好,并且作用迅速,是一种理想的预防和治疗血栓的天然药物,具有极为诱人的广阔前景.【期刊名称】《科技视界》【年(卷),期】2018(000)012【总页数】2页(P110-111)【关键词】抗血栓药物;纳豆激酶;研究概况【作者】王爱萍;林燕飞;王赞;陶志文【作者单位】四川卫生康复职业学院,四川自贡 643000;四川卫生康复职业学院,四川自贡 643000;四川卫生康复职业学院,四川自贡 643000;四川卫生康复职业学院,四川自贡 643000【正文语种】中文【中图分类】TQ464.81 纳豆激酶的作用及研究意义纳豆激酶是纳豆菌发酵分泌到细胞外的一种具有溶纤维蛋白活性的蛋白质，由学者须见洋行于1987年在日本传统食品纳豆中发现[1]，经研究证明纳豆激酶具有显著的溶解血栓的能力。

其溶解血凝块的能力为血纤溶酶的4倍，它不但能直接作用于纤维蛋白，而且还可以诱导肝脏或血管内皮细胞产生纤溶酶原激活剂，使生物体自身纤溶系统活化[2]；纳豆激酶的半衰期长，经研究其作用时间可长达8小时，因其来源于传统食品纳豆，安全无毒副作用，所以能够温和持续的提高血液的纤溶活性。

目前研究早已证明，血栓的形成是由血液中纤维蛋白与相关血细胞粘在一起导致，而增大的血凝块会阻塞血液循环进而引起组织供血不足。

这是引起各种心血管病的重要原因。

由于纤维蛋白是血栓中的骨架成分，所以分解血栓中的纤维蛋白成分是溶栓工作中的关键。

正常生理情况下，机体血液循环系统处于凝血过程和溶栓过程的动态平衡中，随着个体年龄的增加，机体合成纤维蛋白的功能减退而使凝血过程加重，凝血和溶栓之间的平衡被打破，这就是老年人更容易出现心血管疾病的原因[3]。

第5卷 第10期 食品安全质量检测学报 Vol. 5 No. 102014年10月Journal of Food Safety and Quality Oct. , 2014基金项目: 黑龙江省自然科学基金项目(C2011-24)、黑龙江省教育厅科学技术研究项目(12511128)及黑龙江省博士后科研启动基金项目(LBH-Q13098)Fund: Supported by Natural Science Foundation of Heilongjiang Province of China (C2011-24), Science and Technology Research Project of Heilongjiang Province Department of Education (12511128) and Postdoctoral Scientific Research Start-up Fund Project of Heilongjiang Province (LBH-Q13098)*通讯作者: 曲敏, 教授, 主要研究方向为新型植物蛋白及食品添加剂。

E-mail: qumin777@*Corresponding author: QU Min, Professor, Harbin University of Commerce, Tongda Street 138, Daoli District, Harbin 150076, China. E-mail: qumin777@两种检测SOD 酶活性方法的比较曲 敏*, 秦丽楠, 刘羽佳, 范宏臣, 朱 姝, 王金凤(哈尔滨商业大学食品科学与工程省级重点实验室, 哈尔滨 150076)摘 要: 目的 比较邻苯三酚自氧化法和氮蓝四唑(NBT)光还原法分别测定超氧化物歧化酶(SOD)酶活力的差异。

方法 采用两种方法分别测定SOD 标准品、苜蓿和番茄两种植物提取物的不同来源SOD 酶活性, 比较其精确性和灵敏度。

纳豆激酶溶血栓作用的研究张利;成子强;李培锋;关红;后有斐;王俊菊【期刊名称】《山东农业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2005(036)004【摘要】本研究通过纳豆激酶纤维蛋白溶解活性实验、纳豆激酶体内血栓溶解实验对纳豆激酶的溶栓作用做了较全面的研究.对纤维蛋白溶解活性研究结果显示:高、中、低剂量的纳豆激酶均能显著地降低血浆优球蛋白的溶解时间、显著地降低血浆纤维蛋白原的含量、显著地增加纤维蛋白裂解产物的含量,表明纳豆激酶具有较强的纤维蛋白溶解性,且同等剂量的纳豆激酶和尿激酶相比,前者的纤溶性大于后者;体内血栓溶解的实验结果显示:纳豆激酶可明显地延长血栓形成时间、显著减少股动脉的长度及湿重并明显提高血栓的再通率、显著减少肺内血栓的形成,表明纳豆激酶具有较强的体内溶栓作用,且同等剂量的纳豆激酶和尿激酶相比,前者的溶栓作用高于后者.显示了纳豆激酶具有强大的溶栓作用,且起效快、药效长,有望成为一代溶栓药物.【总页数】7页(P625-631)【作者】张利;成子强;李培锋;关红;后有斐;王俊菊【作者单位】山东农业大学动物科技学院,山东,泰安,271018;山东农业大学动物科技学院,山东,泰安,271018;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018【正文语种】中文【中图分类】S851.3【相关文献】1.纳豆激酶纤维蛋白溶解和抗血栓作用初步研究 [J], 梁惠婵;杨鹊;欧慧瑜;肖百全;杨威;王茜莎2.纳豆激酶对大鼠脑血栓的溶栓作用研究 [J], 郑立娟;陈小婕;杨岩;史新龙;吴焘;张生琰3.日本纳豆激酶协会倡导——常吃纳豆激酶有助于预防血栓 [J], 金文4.纳豆激酶对动物体内血栓的溶解作用 [J], 杨德智;聂凤环;马静洁5.纳豆激酶粗制液对家兔溶血栓作用及其机制研究 [J], 段智变;江汉湖;张书霞;江晓;董名盛;赵晓燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

一、实验目的本实验旨在通过磷酸肌酸底物法测定肌酸激酶（Creatine Kinase，CK）的活性，并探讨其在生物体内的功能。

通过实验，了解CK活性受温度、pH值等因素的影响，以及酶的激活和抑制现象。

二、实验原理肌酸激酶（CK）是一种广泛存在于生物体内的重要酶，参与细胞内能量代谢过程。

磷酸肌酸底物法是一种常用的测定CK活性的方法。

该法基于CK催化磷酸肌酸（Creatine Phosphate，CP）与ADP反应生成ATP和肌酸（Creatine，Cr）的原理。

在特定条件下，ATP的生成量与CK的活性成正比。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 肌酸激酶样品- 磷酸肌酸（CP）- ADP- NADH- 磷酸氢二钠（NaH2PO4）- 磷酸二氢钠（Na2HPO4）- 氯化镁（MgCl2）- 氯化钠（NaCl）- 碘化钾（KI）- 碘液- 水浴锅- 移液器- 试管- 离心机2. 实验仪器：- 分光光度计- 烧杯- 量筒- 胶头滴管- 恒温箱四、实验方法与步骤1. 配制底物溶液：- 称取一定量的CP，用磷酸缓冲液溶解并定容至一定体积。

- 称取一定量的ADP，用磷酸缓冲液溶解并定容至一定体积。

- 将NADH用磷酸缓冲液溶解并定容至一定体积。

2. 配制反应混合液：- 取若干试管，分别加入不同浓度的肌酸激酶样品、磷酸肌酸溶液、ADP溶液、NADH溶液、磷酸氢二钠溶液、磷酸二氢钠溶液、氯化镁溶液和氯化钠溶液。

- 将混合液置于水浴锅中，调节温度至实验设定的温度。

3. 测定酶活性：- 在特定时间点，向反应混合液中加入碘液，观察溶液颜色的变化。

- 用分光光度计测定溶液在特定波长下的吸光度值。

- 根据吸光度值计算酶活性。

4. 稳定酶活性：- 在实验过程中，分别调节pH值和温度，观察酶活性的变化。

五、实验结果与分析1. 酶活性与温度的关系：- 实验结果表明，随着温度的升高，CK的活性逐渐增加，但当温度超过一定范围时，酶活性开始下降。

赤小豆纳豆发酵工艺的研究付文静;王家林;张杰【摘要】纳豆是一种传统的发酵豆制品,具有丰富的营养价值和良好的保健功效.但由于其特殊的氨味,一直以来难以被大众接受,因此需要对传统纳豆的风味进行改善.本试验在传统纳豆原料中添加一定比例的赤小豆,以感官评价和纳豆激酶酶活的综合分数为指标,利用单因素试验和正交试验,对赤小豆纳豆的发酵工艺进行探讨,确定赤小豆纳豆的最佳发酵条件为:发酵温度38℃,发酵时间22 h,赤小豆与黄豆质量比为1:4,纳豆激酶酶活达942 U/g,为纳豆产品的多元化提供了理论支持.%Natto is a traditional fermented soybean product with high nutritional value, healthy function and more. It is not easy to be acceptted because of its special ammonia flavor all the time,so we need to improve the traditional natto flavor.In this experiment, a certain proportion of Phaseolus angularis was added to the traditional natto raw materials. Based on the comprehensive evaluation of sensory evaluation and nattokinase activity,the optimal fermentation conditions of Phaseolus angularis natto was studied by single factor test and orthogonal test.The optimum fermentation conditions were as follows:the fermentation temperature was 38℃, the fermentation time was 22 h,the mass ratio of Phaseolus angularis to soybean was 1:4,and the activity of nattokinase was up to 942 U/g, which provided the theoretical basis for the development of diversified natto product and natto food.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)002【总页数】5页(P109-113)【关键词】纳豆;赤小豆;工艺;发酵【作者】付文静;王家林;张杰【作者单位】青岛科技大学海洋科学与生物工程学院,山东青岛266042;青岛科技大学海洋科学与生物工程学院,山东青岛266042;青岛科技大学海洋科学与生物工程学院,山东青岛266042【正文语种】中文纳豆是一种以黄豆为主要原料，蒸煮后经过纳豆芽孢杆菌发酵而成的古老豆制食品，在日本，食用纳豆的历史已长达两千多年[1]。

第1篇一、实验目的1. 掌握体内外激酶活性的测定方法；2. 了解激酶在生物体内外的活性变化及其影响因素；3. 熟悉实验操作技能，提高实验动手能力。

二、实验原理激酶是一类催化磷酸基团转移的酶，在细胞信号传导、代谢调控等生物过程中发挥重要作用。

本实验通过测定体内外激酶活性，了解激酶在不同条件下的活性变化，为进一步研究激酶的功能提供实验依据。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：激酶底物、激酶抑制剂、酶反应缓冲液、pH计、电泳仪、凝胶成像系统等；2. 仪器：酶标仪、离心机、冰箱、恒温水浴锅、电子天平等。

四、实验方法1. 体内外激酶活性测定原理：在一定的条件下，激酶催化底物发生磷酸化反应，通过检测磷酸化产物的生成量来反映激酶的活性。

2. 实验步骤：（1）样品制备：将待测激酶样品在适当条件下进行提取、纯化，得到高纯度的激酶。

（2）底物制备：根据实验需要，选择合适的底物，按照说明书配制底物溶液。

（3）酶活性测定：将激酶样品和底物溶液混合，在一定条件下进行反应，检测磷酸化产物的生成量。

（4）数据处理：根据实验数据，计算激酶的活性。

五、实验结果与分析1. 实验结果：通过测定不同浓度激酶样品的活性，得到一系列活性数据。

2. 结果分析：（1）体内激酶活性：在体内条件下，激酶活性受到多种因素的影响，如温度、pH 值、底物浓度等。

实验结果显示，在适宜的条件下，激酶活性较高。

（2）体外激酶活性：在体外条件下，激酶活性受到底物浓度、激酶浓度、pH值等因素的影响。

实验结果显示，在适宜的条件下，激酶活性较高。

（3）激酶活性影响因素：通过比较体内和体外激酶活性，发现温度、pH值等因素对激酶活性有显著影响。

六、实验结论1. 本实验成功测定了体内外激酶活性，为研究激酶在生物体内的功能提供了实验依据。

2. 实验结果表明，激酶活性受到多种因素的影响，如温度、pH值、底物浓度等。

3. 通过本实验，提高了学生的实验操作技能，培养了学生的科研思维。

纳豆激酶项目可行性分析报告目录前言 (4)一、纳豆激酶项目建设背景及必要性分析 (4)(一)、行业背景分析 (4)(二)、产业发展分析 (5)二、土建工程方案 (6)(一)、建筑工程设计原则 (6)(二)、纳豆激酶项目总平面设计要求 (7)(三)、土建工程设计年限及安全等级 (8)(四)、建筑工程设计总体要求 (9)(五)、土建工程建设指标 (11)三、市场分析 (12)(一)、行业基本情况 (12)(二)、市场分析 (13)四、技术方案 (15)(一)、企业技术研发分析 (15)(二)、纳豆激酶项目技术工艺分析 (16)(三)、纳豆激酶项目技术流程 (17)(四)、设备选型方案 (19)五、纳豆激酶项目可行性研究报告 (21)(一)、产品规划 (21)(二)、建设规模 (22)六、进度计划 (24)(一)、纳豆激酶项目进度安排 (24)(二)、纳豆激酶项目实施保障措施 (25)七、劳动安全生产分析 (26)(一)、设计依据 (26)(二)、主要防范措施 (28)(三)、劳动安全预期效果评价 (29)八、财务管理与资金运作 (30)(一)、财务战略规划 (30)(二)、资金需求与筹措 (31)(三)、成本与费用管理 (32)(四)、投资决策与财务风险防范 (32)九、环境影响评估 (33)(一)、环境影响评估目的 (33)(二)、环境影响评估法律法规依据 (34)(三)、纳豆激酶项目对环境的主要影响 (34)(四)、环境保护措施 (34)(五)、环境监测与管理计划 (35)(六)、环境影响评估报告编制要求 (35)十、供应链管理 (36)(一)、供应链战略规划 (36)(二)、供应商选择与评估 (37)(三)、物流与库存管理 (38)(四)、供应链风险管理 (40)(五)、供应链协同与信息共享 (41)十一、团队建设与领导力发展 (42)(一)、高效团队建设原则 (42)(二)、团队文化与价值观塑造 (44)(三)、领导力发展计划 (45)(四)、团队沟通与协作机制 (47)(五)、领导力在变革中的作用 (48)前言本项目投资分析及可行性报告是为了规范纳豆激酶项目的实施步骤和计划而编写的。

纳豆激酶的溶栓实验人工血栓试验简介：1987年，纳豆博士须见洋行实验证明纳豆激酶（nk）具有溶解血栓的药作用。

这个试验是须见洋行教授在美国芝加哥某血液研究所进行担任研究员时进行的试验。

试验的原理是因为血栓的主要成分就是蛋白质；另外在人体中凝血酶可以使得纤维蛋白原构成纤维蛋白，也就是我们常说道的血栓的主要共同组成物质，所以须见到洋行博士使用了纤维蛋白原＋凝血酶去制作人工血栓，也就是类似人体的蛋白质然后将从超市买回的纳豆放进人工血栓中观测，这就是大家晓得的两点半试验．两点半试验说明，纳豆具备体外熔化人体血栓的促进作用。

之后的大量动物试验和人体试验都证明纳豆中所含的纳豆激酶不但能体外溶栓，还能通过口服就能够达至体力溶栓的效果。

体外溶栓试验是最好的，也是能够简单操作的试验．纳豆都可以达到体外溶栓效果，如果是纳豆激酶的提纯物，溶解速度就更加快速，通常正常人体体温３７度下，只需要十几分钟就能看到很明确的溶栓效果．反之如果一个产品连体外溶栓效果都没，我们应批评它是否是存有活性的纳豆产品．生动纳豆具备体外溶栓功能，但是如果没活性的纳豆或者纳豆加工食品，那么就是没任何溶栓效果的．通过试验我们必须能够检验该产品是否是存有活性的纳豆产品。

该产品是否具有体外溶栓的效果。

该产品是否具有持续体外溶栓效果。

（常温放置时间越长，溶解范围越大）为什么不用人血进行试验首先只有医疗机构、科研单位等才有资格采血、化验，且必须由经过专业技术培训的医务工作者进行，未取得医疗机构执业许可证不得开展血压测量、血液检测的诊疗行为。

现场进行抽血、化验是非法的，涉嫌非法行医．另外，人体每天都会生成血栓，这是人体的一个正常生理现象．血栓形成后抗凝系统作用于血栓，这个平衡机制维系着我们的健康．随着年龄的增长，压力，或疾病的出现，身体的抗凝能力都会下降，这个时候就不能及时溶解血栓，因而发生血栓类疾病．因此，不是光靠一滴血，或一时的检测，就能说明什么问题．血栓的形成有着合理的行程过程和诸多因素，也不是说身体里有血栓，就要恐慌，只要明白人体的机制，就能明白血栓检测是没有实际意义的．纳豆激酶溶解血栓实验步骤；①制作人工血栓在人抽取纤维蛋白原内重新加入凝血酶，数分钟后即可构成人工血栓，为白色液态状。