糖尿病大鼠骨髓基质细胞的体外生长特性研究

EPO促进大鼠脊髓损伤后内源性神经干细胞增殖的实验研究的开题报告一、研究背景与意义：脊髓损伤是一种严重的神经系统损伤，目前仍没有有效的治疗方法。

内源性神经干细胞（NSCs）在成年动物脊髓中存在，能够分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞等成分，具有重要的再生潜能。

因此，寻找能够促进NSCs增殖与分化的治疗方法，对于脊髓损伤的治疗尤为重要。

EPO（人类促红细胞生成素）是一种内源性角蛋白质，已被证明能促进神经细胞的增殖和分化，减轻脊髓损伤的后果。

然而，EPO是否可以促进大鼠脊髓损伤后NSCs的增殖，尚未得到完全证实。

因此，本研究旨在探究EPO是否能够促进大鼠脊髓损伤后NSCs的增殖与分化。

二、研究方法：1.建立脊髓损伤的大鼠模型选取SD大鼠，采用影响法建立脊髓损伤模型。

2.NSCs的分离和培养通过玻璃棒摇匀轻抚方法，从大鼠脊髓中分离出NSCs，并进行原代培养。

采用胶质细胞培养基添加EGF和FGF2等方法，进行NSCs的进一步培养。

3.实验分组将实验大鼠随机分为对照组和EPO处理组，每组n=8。

4.给药方法对照组注射生理盐水，EPO处理组注射EPO，剂量为1000U/kg一日，连续注射7天。

5.检测指标采用光镜和电镜分别观察大鼠脊髓和NSCs的形态结构。

同时，采用免疫荧光方法检测Nestin蛋白、β-tubulin-III和GFAP的表达水平。

使用Western blot方法检测PCNA和Ki-67的表达水平。

三、研究意义通过本研究，可以探究EPO在大鼠脊髓损伤后人NSCs的增殖与分化方面的潜在作用。

该研究结果有望为脊髓损伤的治疗方法提供新的思路和策略。

间充质干细胞治疗1型糖尿病及其并发症的研究进展许跃;顾志峰【摘要】1型糖尿病是一种T细胞介导的组织特异性自身免疫性疾病,以抗胰岛细胞抗体出现、严重的胰岛炎症和自身免疫性胰岛β细胞破坏为特征.间充质干细胞(mesenchylnal stem cells,MSCs)是一类具有自我更新,多向分化潜能,免疫调节和低免疫原性的细胞.近年来越来越多的研究表明,间充质干细胞移植对1型糖尿病及其慢性并发症治疗有效.本文就间充质干细胞治疗1型糖尿病及其慢性并发症研究进展做一综述.【期刊名称】《交通医学》【年(卷),期】2011(025)003【总页数】4页(P220-223)【关键词】间充质干细胞;1型糖尿病;糖尿病性心脏病;糖尿病肾病;糖尿病性多神经病变;糖尿病性视网膜病变【作者】许跃;顾志峰【作者单位】南通大学附属医院,江苏,226001;南通大学附属医院,江苏,226001【正文语种】中文【中图分类】R587.11型糖尿病是一种T细胞介导的器官特异性自身免疫性疾病[1-2]。

在遗传、环境等诸多种因素作用下机体产生胰岛自身抗体，T淋巴细胞浸润，使胰岛β细胞破坏，最终引起胰岛素分泌绝对缺乏。

近年来1型糖尿病的发病率不断增加，由于其并发糖尿病性心脏病、肾病、多神经病变和视网膜病变等严重并发症，目前已成为危及人类健康的重要问题[1]。

1型糖尿病一旦发病需要终身依赖胰岛素，胰岛移植虽能达到不依赖胰岛素效果，但因排斥反应和供体来源不足限制其临床应用。

近年来干细胞理论和技术快速发展，给糖尿病患者治疗带来新的希望，干细胞移植有望替代胰岛移植治疗糖尿病。

间充质干细胞（MSCs）由于其多向分化潜能及免疫调节功能，提示其具有治疗1型糖尿病及其慢性并发症的能力。

本文就MSCs治疗1型糖尿病及慢性并发症做一综述。

1 间充质干细胞生物学特性及免疫特性MSCs是一种来源广泛的多能祖细胞，骨髓、脐带、脐带血等各种组织中均可获得，其形态与成纤维细胞相似，不表达造血细胞标志CD14，CD31、CD34和CD45，表达基质细胞特有标志CD73和CD105及Stro-1，CD71，CD106，CD120，CD124 等表面抗原，表达极低水平MHC-I类抗原，不表达MHC-Ⅱ类抗原及FasL。

Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2019, 9(7), 827-830Published Online July 2019 in Hans. /journal/acmhttps:///10.12677/acm.2019.97127Research Status and Progress of Insulin-Like Growth Factor-1Bo Yang, Hongbin Xue, Fang WangDepartment of Plastic Surgery, Yan’an University Hospital, Yan’an University, Yan’an ShaanxiReceived: Jun. 15th, 2019; accepted: Jul. 4th, 2019; published: Jul. 11th, 2019AbstractInsulin-like growth factor-1 (IGF-1) is a multifunctional cell proliferation regulator that is widely distributed in various tissues and plays an important role in the growth and development of indi-vidual cells. Studies have shown that IGF-1 plays an important role in related fields such as cardi-ovascular disease, diabetes and wound repair. The current research status and progress are re-viewed, aiming to provide ideas and directions for further research of IGF-1.KeywordsInsulin-Like Growth Factor, Myocardial Infraction, Wound Repair, Progress, Review胰岛素样生长因子-1的研究现状与进展杨波，薛宏斌，王芳延安大学，延安大学附属医院烧伤整形外科，陕西延安收稿日期：2019年6月15日；录用日期：2019年7月4日；发布日期：2019年7月11日摘要胰岛素样生长因子-1 (insulin-like growth factor 1, IGF-1)是一种多功能细胞增殖调控因子，广泛分布于各个组织当中，在细胞的分化增殖个体的生长发育中具有重要的作用。

地塞米松对骨髓细胞有什么诱导作用发表时间：2019-08-06T14:22:42.140Z 来源：《总装备部医学学报》2019年第05期作者：赵菊[导读] 所以对于地塞米松与骨髓细胞之间的关系，我们也进行了系列的监测试验和探索。

四川省凉山彝族自治州冕宁县中医医院 615600地塞米松（Dexamethasone）是治疗多发性骨髓疾病方案中的重要组成部分，疗效已经被认可，但是其引起不良的反应也较多。

随着对骨组织的进程研究和发展，骨髓细胞的成骨潜能受到了越来越多人的关注和重视。

正常的骨髓细胞成分是比较复杂的，包括造血和基质两个大系统，其中具有成骨潜能的细胞多数来自于基质干细胞。

所以对于地塞米松与骨髓细胞之间的关系，我们也进行了系列的监测试验和探索。

一、地塞米松的背景地塞米松又叫氟美松或德沙美松、是猪病防治中常用的一种人工合成的长效的糖皮质激素，是泼尼松龙的氟化衍生物。

在肝内可以转换成氢化考的松地塞米松，属于肾上腺皮质激素类的药物。

具有抗炎、抗过敏、抗休克和抗毒等作用，临床上一般用于严重的细菌感染性疾病、过敏性疾病、休克、局部炎症等综合治疗。

来那度胺联合地塞米松的治疗方案已经应用于初治并且不适合的移植和复发难治的骨髓疾病，第一代的蛋白酶体抑制剂硼也被批准治疗于初治并且适合移植的骨髓病了。

目前这两种药分别联合地塞米松用于治疗骨髓病的效果都得到了广泛的认可。

大剂量与小剂量的研究通常是解决骨髓病化疗方案中不可缺少的因素。

地塞米松的应用也会导致一些不良的反应，其中包括升高血糖导致继发的糖尿病和原发糖尿病并发症的进展、血压的升高、乙肝病毒再激活导致的爆发性肝炎、增加感染的几率、精神异常、骨质疏松、白内障等疾病。

在临床工作中，临床如需要应用地塞米松治疗，含地塞米松在内的治疗方案同时也会给患者带来一系列的不良反应。

因此在关注治疗药物疗效的同时，我们也应关注药物的不良反应。

二、骨髓基质细胞骨髓基质细胞是存在于成体骨髓组织中的一类细胞，具有多向分化潜能。

国隧囱坌塑垡遨苤查２堂生！旦箜堑鲞筮！塑丛婴』丛曼！丛丛堂！趔！堂：巡堑！№：璺肾小管上皮细胞表型转化与糖尿病肾病李能娟李红【摘要】肾小管病变及肾问质纤维化在糖尿病肾病中的重要作用逐渐被认识，其中肾小管上皮细胞向间充质细胞转化（ＥＭＴ）可能是其发挥作用的关键环节，与肾间质纤维化的程度相平行。

在糖尿病肾病中引发ＥＭＴ的因素主要有高血糖、晚期糖基化终末产物、蛋白尿、血管紧张素Ⅱ、结缔组织生长因子等。

【关键词】糖尿病。

肾病；上皮细胞向间充质细胞转化；肾间质纤维化Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ－ｔｏ－ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎａｎｄｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙⅡⅣｅ略扣ｎ，１１舶愕．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｎ—ｄｏｃｎ加ｌｏｇｙ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＣｏｌｌｅｇｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１０００３，Ｃｈ／ｎａ【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｒｅ耐ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｉｂｒｏｓｉｓｐｌａｙｓｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ａｎｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ－ｔｏ－ｍｅ￥一ｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ（ＥＭＴ）ｍａｙｂｅｔｈｅｋｅｙｓｔｅｐ．Ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ，ａｄｖａｎｃｅｄｇｌｙｃａｆｉｏｎｅｎｄｐｒｏｄｕｃｔｓ（ＡＧＥｓ），ａｎ·ｇｉｏｔｅｎｓｉｎ１Ｉ，ａｌｂｕｍｉｎｕｒｉａ，ｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒａｎｄｏｎ，ｍａｙｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆＥＭＴｉｎｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ；Ｅｐｉｔｈｅｆｉａｌ－ｔｏ－ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ；Ｒｅｎａｌｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｉｂｒｏｓｉｓ（ＩｎｔｅｒｎＪＥｎｄｏｃｎｎｏＺＭｅｔａｂ，２００６，２６：２７７—２７９）糖尿病肾病（ＤＮ）是糖尿病最为常见的慢性微血管并发症之一。

・３１５２・自然排卵期的正反馈信号几乎不起作用，在雄性动物群中也有相似的研究结果。

５结语脑内雌激素施加快速非基闪组效应调节多种离子通道，第二信使和激酶信号，并且这些快速非基因组效应在雌激素诱导的神经保护，动态平衡和脑内突触可塑性的调节方面显示重要生理学作用。

ＧＰＲ３０的发现和作为雌激素膜受体的效应已经被证实，但对其和脑内的相应作用仍存在争议——脑内雌激素的快速效应可能是由ＥＲａ，ＥＲＢ，ＧＰＲ３０，或是一种尚未证实的雌激素膜受体介导。

过去二十年已有大量关于脑内雌激素非基因组信号的研究．而为了更好的理解脑内雌激素快速信号效应，仍需做大量工作。

６参考文献１Ｙａ｝；ｉｋＣｈａｎｇｅｓｉｎ６ｒｉｎｇｒａｔｅｓｏｆｓｉｎ曾８Ｐ”叩ｔ；ｃ∞ｄｈｙｐｏｔｈａｌａｍｉｃｕｎｂｆ０１ｌｏｗｉ“ｇａｎｉｎｔｍｖｅｎｏｕｓａｄｍｉｎｊｓｔｒａｌｉｏｎｏｆｅｓｔｍｇｅｎｉｎｔｈｅｃ越【憎ｌｅｄｆｅ哪ｌｅｒａｔ［Ｊ］．ＢｍｉｎＲｅｓ。

１９７３；５３（２）：３４３－５２．２ＭｅｍｌｅＩｓｔｅｉｎＰＧ，ＢｅｃｋｅｒＪＢ，ＳｕｒｒｎｅｉｅｒＤＪ．Ｅｓ眦ｌｄｉｏＩｒｅｄｕｃｅｓｃａｌｃｊｕｍｃｕｒ．ｒｅｎｔ８ｉｎ瑁ｔｎｅｏ蚍＾ａ浏ｎｅｕｒｏｎｓｖｉａａｍｅｍｂｒａｎｅｒｅｃ８ｐｌｏｒ［Ｊ］．ＪＮｅｕｒ０８ｃｊ，１９９６；１６（２）：５９５蜘４．３ＷｕＴＷ，Ｗ锄ｇＪＭ，ＣｈｅｎＳ，叫一．１７Ｂｅｔａ—ｅ８ｔｆａｄｉｏｌｉｎｄｕｃｅｄＣａｚ＋ｉＴＩｆｌ呱ｖｉａｔ柳ｐｅｃａＩｃｉｕｍｃｈ咖ｅ１８ａｃｔｉＶａｔ曲山ｅＳｒｃ／ＥＲＫ／。

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黄芪多糖对STZ糖尿病小鼠内皮祖细胞功能的作用*张根水，张贵平，罗柳金（广州医学院药理学教研室，广州510182）摘要目的：观察黄芪多糖对STZ诱导一型糖尿病小鼠骨髓内皮祖细胞（EPCs）功能的作用。

方法：糖尿病小鼠给予100 mg/kg与400mg/kg黄芪多糖腹腔注射4周，观察小鼠EPCs小管形成能力、粘附能力以及VEGF蛋白表达。

结果：黄芪多糖给药4周后，100mg/kg与400mg/kg两个剂量组EPCs小组形成与细胞粘附显著多于对照组（P＜0．05），明显降低STZ糖尿病小鼠血糖水平（P＜0．05），并能明显升高VEGF蛋白表达（P＜0．05）。

结论：黄芪多糖能改善糖尿病EPCs功能，可能有助于糖尿病伤口愈合的内皮修复。

关键词黄芪多糖；糖尿病；血管内皮生长因子；内皮祖细胞黄芪多糖（Astragalus polysaccharide，APS）为中药黄芪中重要有效成分之一，上世纪九十年代以来，人们发现黄芪多糖对实验糖尿病模型具有治疗作用，引起了人们的兴趣和重视。

更深入研究发现黄芪多糖具有广泛的药理作用，并有大量研究表明黄芪多糖在糖尿病治疗中具有重要意义［1］。

内皮祖细胞（Endothelial progenitor cells，EPCs）是血管内皮细胞的前体细胞，其主要功能为参与出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复，EPCs数量及功能与糖尿病伤口局部血管新生及伤口愈合关系密切［2］，本研究观察黄芪多糖对一型糖尿病小鼠EPCs功能的作用。

1材料与方法1．1试验药物黄芪多糖：西安鸿生生物技术有限公司产品，批号：100223；规格：1000g/袋；纯度＞95%。

1．2动物SPF级8周龄C57BL/6小鼠：南方医科大学实验动物中心，批文：SCXK（粤）2011-0015。

1．3试剂链脲霉素（Streptozotocin，STZ，Sigma）；Vitronectin（Sigma）；Matrigel（Sigma）；EGM-2培养基（Lonza）；Hoechst33258（Sigma）。

骨髓间充质干细胞治疗大鼠脑缺血的实验研究的开题报告一、研究背景随着人口老龄化程度的加剧，脑卒中发生率逐年增加。

其中，脑缺血是一种常见的脑卒中类型。

脑缺血可导致脑细胞缺氧、缺血，导致神经元死亡，从而导致严重的脑功能障碍。

传统的治疗方法主要为早期血管再通，但随着时间的推移，神经细胞死亡已经成为一条不可逆的路线。

因此，需要新的治疗方式来恢复缺血脑组织的功能。

骨髓间充质干细胞（MSCs）是来自骨髓的一种多功能细胞。

这些细胞具有自我更新的能力，可分化为多种细胞类型，包括肌肉细胞、软骨细胞和成骨细胞。

此外，MSCs还具有细胞因子和分泌物的作用，可抑制炎症反应，并促进组织修复。

在很多研究中，MSCs已被证明是有效的治疗方法，可用于治疗多种神经系统疾病，包括脑梗死和脑损伤。

通过转移MSCs来治疗脑缺血的前体细胞，可恢复缺血脑的功能。

二、研究目的本研究旨在探究骨髓间充质干细胞是否能够促进大鼠脑缺血后的康复，通过实验验证骨髓间充质干细胞对缺血脑组织的治疗作用，并对治疗机制进行探讨。

三、研究内容1.建立大鼠脑缺血模型。

2.通过尾静脉注射MSCs，评估其治疗效果。

3.对比治疗组和对照组在行为学和神经组织学方面的差异，并进一步探讨骨髓间充质干细胞的治疗机制。

四、研究方法大鼠脑缺血模型的制作：采用经颅供血不足法制作大鼠脑缺血模型。

将大鼠分为治疗组和对照组，治疗组在脑缺血后24小时内尾静脉注射MSCs。

对照组则接收相同的操作但未注射MSCs。

观察制备胶质纤维蛋白（GFAP）和神经元特异性脯氨酸酶（NSE）染色的神经元分布和神经组织损伤，并通过行为测试（如同仁圆盘试验和Morris水迷宫试验）评估大鼠神经学功能的恢复情况。

此外，还将通过ELISA分析细胞因子IL-6和TNF-α的表达以及其他分子的变化。

五、研究预期成果预计本研究将进一步确认骨髓间充质干细胞的神经保护作用，说明其治疗缺血后神经功能障碍的机制，并为开发人类脑缺血的治疗方法提供基础数据。

大鼠骨髓干细胞成软骨诱导培养基配方关于大鼠骨髓干细胞成软骨诱导培养基配方，这是一种可促进软骨细胞和软骨组织再生的有效方法，也是重中之重的治疗手段。

在这篇文章中，我们将一步步阐述大鼠骨髓干细胞成软骨诱导培养基配方的制作方法。

第一步：收集所需材料制作大鼠骨髓干细胞成软骨诱导培养基，需要一些特殊的试剂和器材，这些主要包括DMEM高糖培养基、10%的胎牛血清、1×L-谷氨酸、非必需氨基酸、β-酮体等。

第二步：制作大鼠骨髓干细胞成软骨诱导培养基将DMEM高糖培养基与10%的胎牛血清混合，加入足量的1×L-谷氨酸，并加入非必需氨基酸，使用0.22μm滤膜将混合液细胞滤就，用1%无菌β-酮体加入其中，并在无菌条件下保存。

第三步：培养大鼠骨髓干细胞将大鼠骨髓细胞组织分离出来，用甲醛溶液进行固定后，使用上述配方的培养基进行细胞培养。

第四步：诱导培养大鼠骨髓干细胞成软骨将上述培养基与生长期达到70%-80%的骨髓干细胞混合。

经过21天的培养，可观察到软骨细胞已经形成。

在培养过程中，注意消泡和观察细胞的生长状态。

第五步：软骨诱导剂添加在第三天，加入0.5μM的dexamethasone，10ng/ml的TGF-β1和0.1mM的L-ascorbic acid 2-phospahte在培养基中，培养至第七天更换培养基中的软骨诱导剂，神经生长因子、TGF-β1和其他相关成分，确认软骨细胞的稳定形成。

总结：以上就是大鼠骨髓干细胞成软骨诱导培养基配方的制作方法。

制作该诱导基的过程非常细致和耗时，需要严格控制各种试剂的浓度和加入时机，才能得到预期的效果。

希望本篇文章能够帮助需要制作大鼠骨髓干细胞成软骨诱导培养基的人员成功完成该过程。