PBS缓冲液配制方法
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PBS缓冲液配方
不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS 缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。
我们实验室的配方：
A 液：0.1mol/L 磷酸二氢钾：
磷酸二氢钾(KH2PO4, MW136.09) 1.361g,加双蒸水至100ml。
B液：0.1mol/L磷酸氢二钠：
酸酸氢二钠(Na2HPO4.2H2O, MW177.99) 1.78g，加双蒸水至100ml。
或者酸酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O, MW358.14) 3.58g,加双蒸水至100ml。pH －－ A 液 ( ml) －－ B 液( ml)
5.60 －－9.50 －－0.25
5.91 －－9.00 －－ 1.00
6.24 －－8.00 －－ 2.00
6.47 －－
7.00 －－ 3.00
6.64 －－ 6.00 －－ 4.00
6.81 －－ 5.00 －－ 5.00
6.98 －－ 4.00 －－ 6.00
7.17 －－ 3.00 －－7.00
7.38 －－ 2.00 －－8.00 7.73 －－ 1.00 －－9.00
8.04 －－0.50 －－9.50
一般免疫组化用PBS都只包含Na2HPO4?12H2O (磷酸氢二钠)
NaH2PO4?2H2O ( 磷酸二氢钠 ) Nacl
用于细胞培养的PBS需含有氯化钾
称取8g NaCl、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4 禾口0.24g KH2PO4,溶于
800ml 蒸馏水中，用HCl 调节溶液的pH 值至7.4，最后加蒸馏水定
容至1L即可0.01M
PBS 缓冲液称取NaCI 8g，KCI 0.2g，Na2HPO4?12H2O3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS 是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是我的总结：
母液的配制：0.2M Na2HPO4 :称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于
1000ml 水0.2M NaH2PO4 ：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4) 的配制：
先配0.2M PB (pH=7.4 ，100ml) ：取19ml 0.2mol/L
的NaH2PO4 ，81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可然后只需将0.2M PB (pH=7.4) 按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PB ( PH=7.4) ：取500ml 0.2M PB ，加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB ( PH=7.4 ) ：取
50ml 0.2M PB ，加水稀释至
1000ml 即
可。
0.02M PB ( PH=7.4) ：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可
若需要NaCL 的话，加入NaCL 至0.9% ( g/100ml
)
即可。
另：其它各种另PH 值的0.2M PB ( 100ml) 配方：pH
0.2M NaH2PO4 ( ml ) 0.2M Na2HPO4 ( ml ) 5.7 93.5 6.5
5.8 92
8
5.9 90 10
6.0 8
7.7 12.3
6.1
85
15
6.2 81.5 18.5
6.3 7
7.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 3
7.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51 49
6.9 45
55
62
7.0
38
7.1
33 67
7.2 28 72
7.3 23
77
7.4 19ml 81ml
7.5 16 84
7.6 13
87
7.7 10.5 0.5
7.8 8.5 91.5
7.9
7 93
8.0 5.3 94.7
磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB，磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方
磷酸盐缓冲液( Phosphate Buffer, PB)
试剂：NaH2PO4 2H2O Na2HPO4 12H2O
配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的
Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1 ) 0.2mol/L 的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或
NaH2PO4 H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L 的Na2HP04:称取NaHPO4.12H2O 71.632g (或Na2HPO4
7H2O 53.6g或Na2HPO4・2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml 溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4 的PB 的配制:取19ml 0.2mol/L 的NaH2PO4 和81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4 12H2O,充分混合即为0.2mol/L 的PB
(pH约为7.4〜7.5)。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
0.2mol/L 磷酸盐缓冲液( pH5.7〜8.0)
pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7 93.5
6.5
5.8 92.0 8.0
5.9 90.0 10.0
6.0 8
7.7 12.3
6.1 85.0 15.0
6.2 81.5 18.5
6.3 7
7.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 3
7.5
6.7 56.5 43.5