PI=PH是，蛋白质净电荷为零，电泳时，蛋白质不移动。
4.试述蛋白质变性作用的实际应用？
答：蛋白质的变性有许多实际应用，例如，第一方面利用变性：（1）临床上可以进行乙醇、煮沸、高压、紫外线照射等消毒杀菌；（2）临床化验室进行加热凝固反应检查尿中蛋白质；（3）日常生活中将蛋白质煮熟食用，便于消化。第二方面防止变性：当制备保存蛋白质制剂（如酶、疫苗、免疫血清等）过程中，则应避免蛋白质变性，以防止失去活性。第三方面取代变性：乳品解毒（用于急救重金属中毒）。
第二章
1.简述RNA的种类及其生物学作用。
答：（1）RNA有三种：mRNA、tRANA、rRNA；
（2）各种RNA的生物学作用：
①mRNA是DNA的转录产物，含有DNA的遗传信息，从5’-末端起的第一个AUG 开始，每三个相邻碱基决定一个氨基酸，是蛋白质生物合成中的模板。
②tRNA携带运输活化的氨基酸，参与蛋白质的生物合成。
③rRNA与蛋白质结合构成核糖体，核糖体是蛋白质合成的场所。
2.简述tRNA二级结构的基本特点。
答：tRNA二级结构为典型的三叶草形结构，其特点为：（1）氨基酸臂：3’-末端为-C-C-A-OH 结构；（2）二氢尿嘧啶环：环中有二氢尿嘧啶；（3）反密码环：环中间部分三个相邻核苷酸组成反密码子；（4）TΨC环：环中含胸苷，假尿苷和胞苷；（5）附加叉：是tRNA分类标志。
3.试述B-DNA双螺旋结构的要点。
答：（1）DNA是一反向平行、右手螺旋的双链结构：脱氧核糖基和磷酸亲水性骨架位于双链的外侧，疏水性碱基位于双链的侧，螺旋一周含10.5对碱基，螺距3.54nm，直径2.37nm。（2）DNA双链之间形成了互补碱基对：两条链的碱基之间以氢键相连。腺嘌呤与胸腺嘧啶配对，形成两个氢键（A=T），鸟嘌呤与胞嘧啶配对，形成三个氢键（G≡C）。（3）疏水作用力和氢键共同维系DNA双螺旋结构的稳定：DNA双螺旋结构横向的稳定性靠两条链间互补碱基的氢键维系，纵向的稳定性则靠碱基平面间的疏水性碱基堆积力维持。
4.何为增色效应？为什么DNA变形后出现增色效应？
答：增色效应：核酸变性后，在260nm处对紫外光的吸光度增加，此现象为增色效应。
原因：嘌呤环和嘧啶环中含有共轭双键，因此对260nm波长的紫外光有最大的吸收峰，碱基平时在DNA双螺旋的侧。当DNA变性后，氢键破坏，成为两股单链DNA，在螺旋侧的碱基暴露出来，故出现增色效应。
5.试述真核生物mRNA的特点。
答：成熟的真核生物mRNA的结构特点是：（1）大多数的真核mRNA在5’-端以7-甲基鸟嘌呤及三磷酸鸟苷为分子的起始结构。这种结构称为帽子结构。帽子结构在mRNA作为模板翻译成蛋白质的过程中具有促进核糖体与mRNA的结合，加速翻译起始速度的作用，同时可以增强mRNA的稳定性。（2）在真核mRNA的3’末端，大多数有一段长短不一的多聚腺苷酸结构，通常称为多聚A尾。一般由数十个至一百几十个腺苷酸连接而成。因为在基因没有找到它相应的结构，因此认为它是在RNA生成后才加进去的。随着mRNA存在的时间延续，这段聚A尾巴慢慢变短。因此，目前认为这种3’-末端结构可能与mRNA从核向胞质的转位及mRNA的稳定性有关。
第三章
1.简述Km和Vmax的意义。
答：Km：（1）Km值等于酶促反应速度为最大速度一半时的底物浓度；
（2）当ES解离成E和S的速度大大超过分解成E和P的速度时，Km值近似于ES的解离常数Ks。在这种情况下，Km值可用来表示酶对底物的亲和力。此时，Km值愈大，酶与底物的亲和力愈小；Km值愈小，酶与底物的亲和力愈大。Ks值和Km值的涵义不同，不能互相代替使用；（3）Km值是酶的特征性常数之一，只与酶的结构、酶所催化的底物和外界环境（如温度、pH、离子强度）有关，与酶的浓度无关。各种酶的Km值围很广，大致在10^-6——10^-2mol/L之间。
Vmax（最大速度）：是酶完全被底物饱和时的反应速度。如果酶的总浓度已知，便可从Vmax计算酶的转换数。酶的转换数定义是：当酶的底物被充分饱和时，单位时间每个酶分子（或活性中心）催化底物转变为产物的分子数。对于生理性底物，大多数酶的转换数在1——10^4/秒之间。
2.举例说明竞争性抑制的特点和实际意义。
答：竞争性抑制的特点：竞争性抑制剂与底物的结构类似：抑制剂结合在酶的活性中心；增大底物浓度可以降低抑制剂的抑制程度；Km增大，Vmax不变。
如磺胺药与PABA的结构类似，PABA是某些细菌合成二氢叶酸（DHF）的原料，DHF可转变成四氢叶酸（THF）。THF是一碳单位代谢的辅酶，而一碳单位是合成核苷酸不可缺少的原料。由于磺胺药能与PABA竞争性结合二氢叶酸合成酶的活性中心。DHF合成受抑制，THF也随之减少，使核酸合成障碍，导致细菌死亡。
3.比较三种可逆性抑制作用的特点。
（1）竞争性抑制：抑制剂的结构与底物结构相似，共同竞争酶的活性中心。抑制作用大小与抑制剂和底物的浓度以及酶对它们的亲和力有关。Km升高，Vmax不变。
（2）非竞争性抑制：抑制剂与底物的结构不相似或完全不同，只与酶活性中心以外的必需基团结合。不影响酶在结合抑制剂后与底物的结合。抑制作用的强弱只与抑制剂的浓度有关。Km不变，Vmax下降。
（3）反竞争性抑制：仅与酶和底物形成的中间产物（ES）结合，使中间产物ES的量下降。这样，既减少从中间产物转化为产物的量，也同时减少从中间产物解离出酶和底物的量。Km减小，Vmax下降。
