编码区序列(coding sequence, CDS)-在核酸序列中能够翻译成蛋白质氨基酸序列的部分(该段核酸序列要有起始与终止密码子)
编码区序列(coding sequence, CDS)-在核酸序列中能够翻译成蛋白质氨基酸序列的部分(该段核酸序列要有起始与终止密码子)。
学术术语来源---
双基因重组腺病毒载体的构建及转染大鼠骨髓间充质干细胞治疗脊髓损伤
文章亮点：
本文将低氧诱导因子1α基因的3个相关降解位点均进行了突变，这样不仅使得低氧诱导因子1α在常氧条件下可以表达，同时表达的效率也相应增加，同时将突变后的低氧诱导因子1α基因联合脑源性神经生长因子基因共同应用于脊髓损伤这一疾病在目前国内尚少见相关报道。
关键词：
干细胞；干细胞移植；骨髓间充质干细胞；脊髓损伤；脑源性神经生长因子；低氧诱导因子1α；血管内皮生长因子
主题词：
干细胞；骨髓；脊髓损伤；神经生长因子；血管内皮生长因子类；腺病毒
摘要
背景：脑源性神经生长因子对多巴胺能神经元、胆碱能神经元等多种神经元都有广泛作用，能促进干细胞更多的向神经元样细胞分化；低氧诱导因子1α可提高组织和细胞在缺血环境下的生存能力，维持局部成血管微环境方面比任何基因均有更广泛的生理作用。
目的：通过构建脑源性神经生长因子联合三点突变型低氧诱导因子1α双基因重组腺病毒载体，探索其转染大鼠骨髓间充质干细胞后2种基因在体外常氧条件下对脊髓损伤促神经再生及血管新生的作用。
方法：①利用PCR方法定点突变人低氧诱导因子1α编码区的第402、564和803位氨基酸，将突变后低氧诱导因子1α基因联合脑源性神经生长因子重组入腺病毒pAdEasy-1系统，包装病毒并测定滴度。②以4种病毒液连同空白组共分5组进行后续实验；将病毒液转染入骨髓间充质干细胞内观察转染效率，检测各组转染细胞中脑源性神经生长因子基因及低氧诱导因子1α mRNA和蛋白表达情况。③进一步通过Western blot方法检测各组细胞中低氧诱导因子1α的下游成血管基因血管内皮生长因子蛋白表达情况。
结果与结论：①编码区第402、564和803位氨基酸均定点突变为丙氨酸；4种腺病毒重组体构建成功并包装鉴定完毕。②实验组、阳性对照组1脑源性神经生长因子 mRNA及蛋白表达量明显高于其他组 (P < 0.05)；实验组、阳性对照组2细胞内低氧诱导因子1α
mRNA及蛋白表达量、血管内皮生长因子蛋白表达均明显高于其他3组(P < 0.05)。结果说明单载体双基因腺病毒系统转染骨髓间充质干细胞后不仅能够在常氧条件下大量且高效表达脑源性神经生长因子及低氧诱导因子1α蛋白，还同时能够促进其下游血管内皮生长因子的高效表达，为基因联合细胞移植治疗脊髓损伤提供了一种新的方向。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
