猪人工授精操作详解(附表)
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猪人工授精技术培训教材
一,精液的采集
(一)采精的设备和要求
1.照明良好的采精圈
2.一头经过调教的公猪(采精间隔时间一般为72---96小时,但不一定适用所有公猪)3.一头正常大小可移动的台畜或一头发情母猪,如果使用发情母猪,注意不要弄弯公猪阴茎,以防公猪感到不适。
4.带有性气味的喷雾罐
5.用带有公猪或母猪气味的布或畜皮盖住台畜,并在台畜下方铺好防滑垫。
6.用300—450毫升的大纸杯(已消毒)作为集精杯(为保温,外面可套有加盖的保温杯)7.过滤精液用的消毒过的纱布或采精专用的滤纸及固定用的橡皮圈
8.两只薄的乳胶手套或采精专用的手套,要求不含滑石粉,对精液无毒
9.用于擦洗公猪阴茎和容器的纸巾,消毒的毛巾或软布等
10.所有与精液直接接触的容器应贮存在37度的恒温箱中。
(二)采精的程序
1.根据日常工作安排将公猪赶入交配圈或带着台畜到公猪圈
2.让公猪熟悉台畜与台畜玩耍,但在公猪开始对其爬跨时应在场
3.准备好采精杯,手套和纸巾,并将采精杯预热到37℃
4.确定好那只手清洗阴茎,哪只手采精
5.按摩尾囊基部,动作轻柔,清洗掉尿液和其它赃物
6,将干净手套套在准备采精的手上,在公猪开始插入时,抓住阴茎头,模仿母猪阴道皱褶,给公猪勃起的机会。不要向上推包皮,要有耐性,让公猪自己勃起
7.准备好容器,不要收集前面的包皮液,当公猪即将射精时,用干净纸巾擦净阴茎,然后集精
8.让公猪完全射精直至阴茎软化
9.一旦公猪结束爬跨,立即关闭容器,并在容器上标明公猪的名字,尽快交给实验室处理10.如果开始对另一头公猪采精,重复上述步骤
二,实验室的要求与程序
(一)一般原则
实验室接受精液后,最终目的是配制几份稀释精液,以备某地某时需要时有足够剂量的精液。精液剂量的数量不重要,重要的是受精率。因此,除测定精子的密度外,要对精液质量进行认真的评价。严格按照干净和卫生的程序进行操作,做好记录,上好标签,以防污染和弄混。
由于公猪一次正常射出的精液中含有100亿至1000亿个精子,因此可供几头母猪输精。通常情况下,一次输入(最少60毫升)精液中含有15亿活精子就足够了。在生产实际中,通常配制成75---100毫升的稀释剂量,最少含30--40亿个精子。在采精半小时后输精时,用稀释液混合非常重要。稀释液中含有精子所需的养分和抗生素,如果保存得当,其寿命可延至几天。
(二)设备和材料
1.显微镜(双目或单目)
2.比色计(或分光光度计)以确定精子的密度
3.电子秤(精确度在1克)
4.16---17度的恒温柜
5.双蒸馏水器
6.数显恒温水浴锅
7.显微镜恒温载物台
8.磁力加热恒温搅拌器
9.便携式恒温箱
10、5升玻璃放水器
11、稀释剂(粉)
12、1升的烧杯2个
13、1升和2升的量杯各2个
14、盖、载玻片
15、保温采精杯
16、温度计(水银或酒精的)若干
17、吸管或取液器
18、一次性输精管、瓶(袋)
19、一次性薄膜手套
20、一次性1升集精袋
21、一次性2升稀释混合袋
22、玻璃棒
23、一次性过滤纱布(纸)
24、润滑剂
25、稀释粉必须用脱矿或蒸馏水
(三)、精液的处理程序
1、准备好干燥的玻璃容器和待分装精液的容器备用,最好将上述器械置于35度恒温箱中存放
2、在精液到来之前,用蒸馏水配制好稀释液在锥形瓶中,置于32--37度水浴箱中(视冬夏情况而定)
3、精液到达后,用量筒或秤测量精液的数量
4、用眼观察精液的颜色和用鼻嗅其气味
5、将原精液置于100×或200×的显微镜下观察活力
6、用比色计测量精子的密度,确定配备多少剂量
7、先将原精液用等温的稀释液1:1稀释,观察稀释后精液的活力和活动力
8、再加入到所需的稀释液量,分装到输精瓶或袋中,封口,置于17度恒温箱中保存
9、用温水清洗和消毒装有精液的玻璃容器,置于高温干燥箱中消毒(100—120度),35度恒温箱中无尘存放
10、用消毒液擦洗工作台,墙壁和地面最好每周用消毒液彻底擦洗一遍
(四)精液质量的评价
1、直接观察
A、颜色:公猪射出的精液灰白色或乳白色。较多的白色物表明浓度较高
B、气味:气味较重表明公猪有一定的问题,或射精过程中精液有污染,如混有尿液或性腺分泌物较多,这种精液应丢弃
2、微生物评价
在100×或200×显微镜下观察原精液可获得对活力的初步印象,另外,在精液稀释后、输精前都应进行活力的评价。观察时记录两个数值:一个是视野中活动的精子占总精子的百分率,另一个是呈直线前进运动的精子所占的比例。可采用十分计数法。
3、精液剂量的确定
一剂量(头份)的标准:75---100毫升稀释精液,应含有30--40亿个精子。即便活精子数只有70%,那么还有20多亿精子参与受精。
每毫升精液中精子的密度可通过比色计测出。
例如:一次射精190毫升,每毫升含2.3亿个精子,意味着总精子数为437亿。每个剂量30亿精子,就可生产14个精液剂量。如果一个剂量为100毫升,表明加入到精液中的稀释液为1400-190=1210毫升。
在将稀释液小心地与精液混合后(两者温度一定要相同,温差控制在1℃以内),封上瓶或袋,贴上标签,在17℃贮存用于输精。
如果精液将在近几天内使用,有必要每间隔8小时或一天3次轻轻将精液转动混匀进行质量控制(采集后应尽快地使用配种,最好在48---72小时内)。要想获得好的效果,可以将稀释后的精液分别贮存在小的带帽的试管内,投入32℃水浴箱中加温10--15分钟后再检查,而不必打开一些输精小瓶来检查质量。
从采精到输精的整个过程应遵循以下原则:
a.任何时候都应该避免阳光直射、温度的干扰和强烈震动。
b.应逐渐降温冷却,在升温后精液不应再次冷却。
c.操作时尽可能地保持清洁。
d.进行记录。
三、输精程序
象自然交配一样,人工授精成功的关键因素是母猪适宜输精时间的确定(有关内容见其它相关材料)。另外,使用灭菌的输精设备和良好的技术也是重要的。输精管的种类很多,有的是一次性的,用后即处理掉;另一些可重复利用,但每次用过后,一定要经过煮沸消毒,并彻底干燥,将输精管的螺旋头用消毒的纸巾包裹好。
具体的输精步骤如下(参看图片):
1、在打开精液包裹前要预先检查母猪的静立发情(确定在静立发情开始后大约24小时最
适宜)
2、插入输精管之前,通过温和地按摩母猪侧面以及对其背部和腰角施加压力来刺激母猪。
输精期间有一头公猪在前面或旁边来诱导母猪安静地站着是有利的。
3、取下输精管上的纸巾,清洁母猪的外阴部(或用0.1%高锰酸钾溶液洗净擦干)。
4、用润滑剂润滑输精管头部
5、打开阴门的唇端,插入输精管向内、向上进入阴道(泡沫头输精管先如此进入三分之一
后再平行进入),推进输精管直到感觉有一些阻力为止;逆时针转动输精管直到它锁住