实验二 糖类的颜色反应

⽣物化学实验实验⼀1、糖类的颜⾊反应1. α-萘酚反应糖在浓⽆机酸（硫酸或盐酸）作⽤下，脱⽔⽣成糠醛及糠醛衍⽣物，后者能与α-萘酚⽣成紫红⾊物质。

注意：因糠醛及糠醛衍⽣物对此反应均呈阳性，不是糖类的特异反应。

2. 间苯⼆酚反应在酸作⽤下，酮糖脱⽔⽣成羟甲基糠醛，后者再与间苯⼆酚作⽤⽣成红⾊物质。

此反应是酮糖的特异反应。

因为醛糖在同样条件下呈⾊反应缓慢，只有在糖浓度较⾼或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。

2、还原作⽤许多糖类由于其分⼦中含有⾃由的或潜在的醛基或酮基，因此在碱性溶液中能将铜、铁、银等⾦属离⼦还原，同时糖类本⾝被氧化成糖酸及其他产物。

糖类这种性质常被利⽤于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。

本实验所⽤的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。

它们都是Cu2＋的碱性溶液，能使还原糖氧化⽽本⾝被还原成红⾊（颗粒⼤）或黄⾊（颗粒⼩）的Cu2O沉淀。

实验⼆脂肪碘值的测定碘值（价）是指100g脂肪在⼀定条件下吸收碘的克数。

碘值是鉴别脂肪的⼀个重要常数，可⽤以判断脂肪所含脂肪酸的不饱和程度。

脂肪中常含有不饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸具有⼀个或多个双键，能与卤素起加成作⽤⽽吸收卤素。

常⽤碘与脂肪中不饱和脂肪酸的双键起加成作⽤。

脂肪的不饱和程度越⾼，所含的不饱和脂肪酸越多，与其双键起加成作⽤的碘量就越多，碘值就越⾼。

故可⽤碘值表⽰脂肪的不饱和度。

I2+－CH=CH－－CHI－CHI－本实验⽤溴化碘(Hanus试剂)代替碘。

⽤⼀定量(必须过量)溴化碘和待测的脂肪作⽤后，⽤硫代硫酸钠滴定的⽅法测定溴化碘的剩余量，然后计算出待测脂肪吸收的碘量，求得脂肪的碘值。

加成作⽤：IBr+－CH=CH－－CHI－CHBr－剩余溴化碘中碘的释放：IBr + KI KBr + I2再⽤硫代硫酸钠滴定释放出来的碘：I2 +2Na2S2O3 2Na2S4O6+2NaI思考题：何谓空⽩溶液和空⽩实验？空⽩实验有何意义？在各种分析⽅法中，为消除⼲扰，⽤与测定试样时完全⼀致的条件进⾏测定的溶液。

高中生物16个实验原理解析生物实验题是历年高考的拉分大项，但是生物实验既多又杂，容易混淆，下面为大家总结了十六个生物实验原理，考前一定看一遍哦~1检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

1、可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。

反应方程式：葡萄糖+ Cu(OH)2 葡萄糖酸+ Cu2O↓（砖红色）+ H2O，即Cu (OH) 2被还原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸；2、脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）；淀粉遇碘变蓝色；3、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应）。

2观察DNA、RNA在细胞中的分布1、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿使DNA呈现绿色，吡罗红使RNA呈现红色。

利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布；2、盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

3用高倍显微镜观察线粒体和叶绿体1、叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形；2、线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等；3、健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。

4观察植物细胞的吸水和失水1、质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。

由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离；2、质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。

一、实验目的1. 掌握糖类物质的基本性质和鉴定方法。

2. 学习使用化学试剂和方法检测溶液中的糖类物质。

3. 了解不同糖类物质的鉴定原理及其在实际应用中的意义。

二、实验原理糖类物质是一类多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称，它们在化学性质上具有一些共同的特性。

例如，糖类物质可以与某些特定的试剂发生颜色反应，从而实现对糖类的鉴定。

常见的糖类鉴定方法包括：1. 还原糖的鉴定：还原糖在碱性条件下可以与斐林试剂发生反应，生成砖红色沉淀。

2. 非还原糖的鉴定：非还原糖可以通过与苏丹溶液反应，观察颜色变化来鉴定。

3. 蛋白质的鉴定：蛋白质可以与双缩脲试剂发生紫色反应。

三、实验器材1. 试管2. 烧杯3. 滴管4. 移液器5. 恒温水浴锅6. 显微镜7. 斐林试剂8. 苏丹溶液9. 双缩脲试剂10. 糖类溶液（葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉等）11. 蛋白质溶液12. 碱性溶液13. 酸性溶液四、实验步骤1. 还原糖的鉴定- 向试管中加入2mL待测糖类溶液。

- 向试管中加入1mL斐林试剂（甲乙液等量混合均匀后加入）。

- 将试管放入盛有50-65度温水的大烧杯中加热约2分钟。

- 观察溶液颜色变化，若出现砖红色沉淀，则说明溶液中含有还原糖。

2. 非还原糖的鉴定- 向试管中加入2mL待测糖类溶液。

- 向试管中滴加3滴苏丹溶液。

- 观察溶液颜色变化，若出现颜色变化，则说明溶液中含有非还原糖。

3. 蛋白质的鉴定- 向试管中加入2mL待测蛋白质溶液。

- 向试管中加入1mL双缩脲试剂A液（摇匀）。

- 向试管中加入双缩脲试剂B液4滴（摇匀）。

- 观察溶液颜色变化，若出现紫色反应，则说明溶液中含有蛋白质。

五、实验结果1. 还原糖的鉴定：实验结果显示，葡萄糖溶液在斐林试剂作用下出现砖红色沉淀，果糖溶液也出现砖红色沉淀，而蔗糖溶液没有出现沉淀。

2. 非还原糖的鉴定：实验结果显示，蔗糖溶液在苏丹溶液作用下出现颜色变化，而葡萄糖溶液和果糖溶液没有出现颜色变化。

属于2-去氧糖的颜色反应是
蓝绿色反应。

2-去氧糖的颜色反应指的是Fehling滴定。

Fehling滴定实验是一种
用来检测糖类的实验，它可以用于鉴别2-去氧糖，特别是检验淀粉是否
含有2-去氧糖，比如葡萄糖和果糖等。

Fehling滴定的基本原理是，2-去
氧糖可与铜(II)离子络合生成一种深色的沉淀，这种沉淀的颜色在湿度和pH值的不同变化情况下而有所不同。

该实验中，当加入Fehling溶液时，若存在2-去氧糖，则溶液的颜色会发生显著的变化，有的会变成浅褐色，有的变成棕褐色，有的变成深红色。

生物化学实验一、糖的颜色反应及还原作用实验一：糖的颜色反应实验1.1 莫氏实验一、目的精品文档，你值得期待掌握莫氏（molisch）实验鉴定糖的原理和方法。

二、原理糖经浓无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用下，能与α-萘酚生成紫红色缩合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称“紫环反应”，其反应如下图：利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材1、棉花或滤纸。

2、吸管1.0ml(*4)、2.0ml(*1)。

3、试管1.5*15cm(*4)。

四、实验试剂1、莫氏试剂：称取α-萘酚5g，溶于95%乙醇并稀释至100ml。

此试剂需新鲜配置，并贮于棕色试剂瓶中。

2、1%蔗糖溶液：称取蔗糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml。

3、1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖1g，溶于蒸馏水并定容至100ml.4、1%淀粉溶液：讲1g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混合溶液合成薄浆状物，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加边搅。

最后以沸蒸馏水稀释至100ml。

五、操作于4支试管中，分别加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素（棉花或滤纸浸在1ml水中）。

然后各加莫氏试剂2滴1，摇匀，讲试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1.5ml(切勿振摇！)硫酸层沉于试管底部与糖溶液分成两层，观察液面交界处有无紫色环出现。

六、注意事项1、试管中加入各种糖后，应做好标记，浓硫酸加入的方式应保持一致。

2、莫氏反应非常灵敏，所用的试剂应洗净，不可再样品中混入纸屑等杂物。

3、当糖浓度过高时，由于浓硫酸对他的焦化作用，将呈现红色及褐色而不呈现紫色，需稀释后再做。

思考题：1、解释α-苯酚反应的原理。

2、用莫氏试验鉴定糖时需注意哪些？试验1.2 塞氏试验一、目的掌握塞氏（Seliwanoff）实验鉴定酮糖的原理和方法。

二、原理酮糖在浓酸的作用下，脱水生产5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈红色反应，有时亦同时产生棕色沉淀，此沉淀溶于乙醇，呈鲜红色沉淀2，以果糖为例，其反应如下：三、实验器材1、吸管0.5ml(*3)、5.0ml(*1)。

一、实验目的1. 掌握糖类物质的鉴定原理和方法。

2. 熟悉使用化学试剂鉴定不同类型糖类的操作步骤。

3. 通过实验，加深对糖类物质化学性质的理解。

二、实验原理糖类物质是生物体内重要的能量来源和结构成分。

根据糖分子结构的不同，可以将糖类物质分为单糖、二糖和多糖。

在实验中，我们可以通过特定的化学反应来鉴定不同类型的糖。

1. 单糖鉴定：单糖如葡萄糖、果糖等具有还原性，可以与斐林试剂发生反应，生成砖红色沉淀。

2. 二糖鉴定：二糖如蔗糖、麦芽糖等，可以通过水解生成单糖，然后利用单糖的鉴定方法进行鉴定。

3. 多糖鉴定：多糖如淀粉、纤维素等，需要先通过水解生成单糖，再进行单糖的鉴定。

三、实验材料与试剂1. 材料：葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉、纤维素等样品。

2. 试剂：- 斐林试剂（NaOH和CuSO4溶液）- 3%的盐酸溶液- 硫酸铜溶液- 碘液- 95%的乙醇溶液- 氢氧化钠溶液- 氯化钠溶液四、实验步骤1. 单糖鉴定：- 取少量葡萄糖、果糖样品，分别加入斐林试剂，加热，观察是否生成砖红色沉淀。

- 取少量蔗糖、麦芽糖样品，分别加入3%的盐酸溶液，加热，观察是否生成砖红色沉淀。

2. 二糖鉴定：- 取少量淀粉、纤维素样品，分别加入碘液，观察颜色变化。

- 取少量淀粉、纤维素样品，加入硫酸铜溶液，加热，观察是否生成砖红色沉淀。

3. 多糖鉴定：- 取少量淀粉、纤维素样品，加入95%的乙醇溶液，沉淀蛋白质等杂质。

- 取少量沉淀，加入氢氧化钠溶液，加热，观察是否生成砖红色沉淀。

- 取少量沉淀，加入氯化钠溶液，观察颜色变化。

五、实验结果与讨论1. 单糖鉴定：- 葡萄糖、果糖样品与斐林试剂反应，生成砖红色沉淀。

- 蔗糖、麦芽糖样品加热后，加入斐林试剂，也生成砖红色沉淀。

2. 二糖鉴定：- 淀粉、纤维素样品加入碘液，颜色变蓝。

- 淀粉、纤维素样品加热后，加入硫酸铜溶液，生成砖红色沉淀。

3. 多糖鉴定：- 淀粉、纤维素样品加入95%的乙醇溶液，沉淀蛋白质等杂质。

一、实验目的1. 掌握糖类检测的基本原理和方法。

2. 学习使用化学试剂对糖类进行定量和定性分析。

3. 了解糖类在生物体中的重要性及检测方法在生物学研究中的应用。

二、实验原理糖类是一类生物大分子，广泛存在于自然界中，是生物体的重要营养物质。

本实验采用化学试剂法对糖类进行检测，主要利用糖类与特定试剂发生颜色变化的原理。

1. 斐林试剂法：还原糖在斐林试剂的作用下，加热后生成砖红色沉淀，根据沉淀的量可以定量分析还原糖的含量。

2. 苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂法：脂肪在苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂的作用下，呈现红色或橙色，可以定性检测脂肪的存在。

3. 双缩脲试剂法：蛋白质与双缩脲试剂反应，产生紫色复合物，可以定性检测蛋白质的存在。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：待测生物组织样品、斐林试剂、苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂、双缩脲试剂、蒸馏水、移液器、试管、酒精灯、烧杯、显微镜等。

2. 实验仪器：分析天平、恒温水浴锅、显微镜、电子天平等。

四、实验步骤1. 糖类检测（1）取待测生物组织样品，研磨成匀浆。

（2）取2 mL匀浆于试管中，加入2 mL斐林试剂，混合均匀。

（3）将试管放入50-65℃的恒温水浴锅中加热2分钟。

（4）观察试管中溶液的颜色变化，记录结果。

2. 脂肪检测（1）取待测生物组织样品，研磨成匀浆。

（2）取2 mL匀浆于试管中，加入3滴苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂，混合均匀。

（3）观察试管中溶液的颜色变化，记录结果。

3. 蛋白质检测（1）取待测生物组织样品，研磨成匀浆。

（2）取2 mL匀浆于试管中，加入1 mL双缩脲试剂A液，摇匀。

（3）加入4滴双缩脲试剂B液，摇匀。

（4）观察试管中溶液的颜色变化，记录结果。

五、实验结果与分析1. 糖类检测实验结果显示，待测生物组织样品在斐林试剂的作用下，溶液呈现砖红色沉淀，说明其中含有还原糖。

2. 脂肪检测实验结果显示，待测生物组织样品在苏丹Ⅲ/Ⅳ试剂的作用下，溶液呈现红色，说明其中含有脂肪。

3. 蛋白质检测实验结果显示，待测生物组织样品在双缩脲试剂的作用下，溶液呈现紫色，说明其中含有蛋白质。