常见的几种禽病毒病采样技术
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病料的采集与运送一、病料的采集一般应在感染初期或发病急性期从死禽(死亡时间不超过一天)或症状明显的活禽采取。
死禽采取气管、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、法氏囊等组织样品。
要求:送检材料具有代表性,并有一定的数量;采集送检的病料要求做好登记,注明所采鸡的品种、年龄、发病日龄、发病情况(临床症状)、采集时间、采集地点、死亡量、养户、送检日期、采集部位、用药情况、需要检测的项目等。
二、病毒和病料的保存采集的病料若再48小时以内进行检测,可放4度保存;否则应放在低温条件下保存即:-20度以下。
细菌性疾病检测不能冷冻,病料不能放置时间太久。
二、具体疾病的采样部位新城疫禽流感:喉头、气管、肺、气囊、肝、脾如果有神经症状可以取脑部。
传染性支气管炎:气管、肺、肾传染性喉气管炎:喉头、气管、肺以上气管的含毒量最高。
取病料是务必要取传染性法氏囊:法氏囊、脾脏在不明原因导致疾病的情况下可以各个部位都采集一下,有病变部位和免疫器官可重点采集。
细菌性疾病可带整只鸡(带回来时可用消毒药把表层浸泡消毒),一般取肝脏、肿胀关节液或肿胀部位。
球虫可以采集粪便或刮取感染鸡的肠内容物(也可带整个鸡到实验室)。
曲霉菌病可以采集病变部位(如肺脏),确证之后可以收集饲料,棉签刮去环境微生物帮助寻找治病原因。
具体可根据实际情况灵活调整。
三、现在耒阳实验室疾病诊断的方法简介:一、病毒性疾病:很多烈性传染病都具有凝集红细胞的作用,所以一般通过接种鸡胚分离病毒,通过血凝实验看是否具有血凝性缩小范围,看是否是血凝性病毒,在通过中和实验看是否是H9、H5、ND等,可以看鸡胚的病变来判断。
如传候会使绒毛膜形成豆斑。
未来也可以通过PCR来检测(具有准确快速的特点,也是总部常用的检测方法)。
二、细菌性疾病通过菌落特征、不同培养基的生长特性、显微镜的镜检及生化试验等来进行诊断。
四、球虫饱和盐水漂浮法和直接涂抹法等进行诊断五、环境微生物检测和水质检测。
动物疫病实验室检验采样方法 (NY/T541-2002)1 范围本标准规定了动物疫病诊断实验室的样品采集方法。
本标准适用于病因(原)学、病理组织学、血清学、免疫学等实验室检验所需样品的采集。
2 样品采集的一般原则和采集前的准备2.1 样品采集所遵循的一般原则2.1.1 凡发现患畜(包括马、牛、羊及猪等)有急性死亡时,如怀疑是炭疽,则不可随意解剖,应采取患畜的血液,万不得已时局部解剖作脾脏触片的显微镜检查。
只有在确定不是炭疽后,方可进行剖检。
2.1.2 采取病料的种类,根据不同的疾病或检验目的,采其相应的脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料;进行流行病学调查、抗体检测、动物群体健康评估或环境卫生检测时,样品的数量应满足统计学的要求。
采样时应/jxjD,.谨慎,以免对动物产生不必要的刺激或损害和对采样者构成威胁。
在无法估计病因时,可进行全面的采集。
检查病变与采集病料应统筹考虑。
2.1.3 内肌病料的采取,如患畜已死亡,应尽快采集,最迟不超过6h。
2.1.4 血液样品在采集前一般禁食8h。
2.1.5 应做好人身防护,严防人畜共患病感染。
2.1.6 应防止污染环境,防止疫病传播,做好环境消毒和病害肉尸的处理。
2.2 使用器械的消毒刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30min,使用前用酒精擦拭,用时进行火焰消毒。
器皿(玻制、陶制等)经103kPa高压30min,或经160C干烤2h灭菌;或放于0.5%一1%的碳酸氢钠(NaHCr~)水中煮沸10min 15rain,水洗后,再用清洁纱布擦干,保存于酒精、乙醚等溶液中备用。
注射器和针头放于清洁水中煮沸30rain。
一般要求使用“一次性”针头和注射器。
采取一种病料,使用一套器械与容器,不可用其再采其他病料或容纳其他脏器材料。
采过病料的用具应先消毒后清洗。
检查过传染性海绵状脑病的器械要放在2mol/L的氢氧化钠(NaOH)溶液中浸泡2h以上,才可再使用。
3 样品的采集3.1 血液3.1.1 采血部位大的哺乳动物可选用颈静脉或尾静脉采血,也可采胫外静脉和乳房静脉血。
关于动物检疫样品的采集和检疫方法动物检疫是防止动物疫病传播的重要手段,而动物检疫样品的采集和检疫方法则是保障动物健康和人类安全的重要环节。
本文将介绍动物检疫样品的采集和检疫方法,以及相关的注意事项。
1. 采样工具准备在采集动物检疫样品时,需要准备好相应的采样工具。
常用的采样工具包括采样刀、剪刀、无菌采样管、无菌采样袋等。
2. 选择采样部位根据动物的症状和可能感染的病原体,选择合适的采样部位。
对于疑似口蹄疫的动物,可以采集口腔、蹄部和外阴等部位的样品;对于疑似禽流感的动物,可以采集呼吸道分泌物、粪便和血液等样品。
3. 采样方法(1)消毒:在采样前,需要对采样部位进行消毒处理,以防止外部细菌的污染。
(2)采样:使用无菌采样工具采集样品,并放入无菌采样管或采样袋中。
(3)保存:将采集的样品放入冰箱或冷藏盒中保存,以防止细菌的繁殖。
4. 注意事项在采集动物检疫样品时,需要注意以下事项:(1)避免交叉污染:在采样过程中,需要避免不同样品之间的交叉污染,保持采样工具和采样容器的无菌。
(2)避免伤害动物:在采样过程中,需要轻柔操作,避免伤害动物。
(3)采样时机:对于不同的病原体,需要在不同的时间点采样,以获得准确的检测结果。
1. 样品送检采集好的动物检疫样品需要及时送往检疫机构进行检测。
在送检时,需要填写详细的样品信息,并按照规定的方式进行样品包装和运输。
2. 实验室检测样品送检到实验室后,实验室技术人员将进行相关检测,包括病原体的分离、鉴定、培养和鉴定等。
也会对样品进行病理学检查和免疫学检测。
3. 结果分析实验室检测完成后,会产生相应的检测报告。
检疫部门将根据检测报告进行结果分析,判断样品是否存在病原体感染。
4. 处理结果根据检测结果,检疫部门将采取相应的措施,包括隔离感染动物、消毒环境、终结感染链等,以防止病原体的传播和蔓延。
5. 监测和溯源在应急事件处理完毕后,检疫部门还会进行相关动物的监测和溯源工作,以保障周边环境和人群的安全。
基层动物防疫检疫中常用采血方法及注意事项摘要:畜牧业是我国经济发展中极为重要的产业类型,是保障动物性食品稳定供给和帮助农民增收的关键产业。
因此,畜牧业发展不仅事关经济更关乎民生。
在保证畜牧业稳定发展的过程中,基层畜牧服务中心发挥着重要作用,承担着动物防疫检疫重任。
从现实角度来看,基层动物防疫检疫实效性将直接影响动物健康情况和畜牧业发展情况。
为此,必须高度重视基层动物防疫检疫工作。
本文着眼于基层防疫检疫中的采血环节,结合实践经验探讨基层动物防疫检疫环节的采血工作,及其常见方法、注意事项;并从提高采血质量、提升基层动物防疫检疫水平和促进畜牧业发展的角度出发,提出推进此项工作提质增效的保障措施。
关键词:采血方法;动物防疫检疫;基层畜牧服务中心;注意事项;颈静脉采血当前,仁义镇畜牧服务中心受区农业农村委员会及镇党政委政府领导,开展动物疫病防控监测工作,承担保障畜牧业健康可持续发展的重任。
对于基层动物防疫检疫工作人员来说,采血是必不可少也至关重要的一项工作;对于基层畜牧服务中心而言,有效采集、使用血样是发挥单位职能的必然要求。
因此,研究基层动物防疫检疫采血方法和注意事项十分必要。
1 基层动物防疫检疫中采血的重要作用动物健康成长是畜牧业可持续发展的根本要求,面对疫病威胁必须强调动物疾病防控。
因此,基层动物防疫检疫成为基层畜牧服务中心的工作重点,也成为保障动物健康的基础措施。
在这一过程中,采血扮演着十分重要的角色。
血样采集的质量和效率与采血技术应用水平有直接关系,而前者还深切影响着动物防疫检疫质效[1]。
由此可见,基层动物防疫检疫中,采血工作必不可少,是影响防疫检疫质量的决定性因素。
从现实角度来看,基于动物采血能够让兽医切实掌握动物的健康状况、病菌携带情况以及疫病抵抗能力,可以为动物防疫检疫提供信息支持,更能够为完善基层动物防疫检疫奠定坚实基础。
2 基层动物防疫检疫采血方法与注意事项结合实践不难发现,以采血为基础的动物防疫检疫工作模式已经十分成熟,实践中可选用的采血方式也十分多样。
高致病性禽流感防治技术规范高致病性禽流感(Highly Pathogenic Avian Influenza,HPAI),是由正粘病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的禽类烈性传染病。
世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。
为预防、控制和消灭高致病性禽流感,依据《中华人民共和国动物防疫法》及有关的法律法规,特制定本规范。
1.适用范围本规范规定了高致病性禽流感的诊断、疫情报告、疫情处理、防治措施、控制和净化标准。
本规范适用于中华人民共和国境内的一切从事禽类饲养、经营和禽类产品生产、经营,以及从事动物防疫活动的单位和个人。
2.诊断有下列情况之一的,可确认为高致病性禽流感:有典型的临床症状和病理变化,发病急、死亡率高,且能排除鸡新城疫和中毒性疾病,血清学检测阳性。
未经免疫鸡场的家禽出现H5、H7亚型禽流感血清学阳性。
在禽群中分离到H5、H7亚型禽流感病毒株或其它亚型高致病力禽流感毒株。
流行特点鸡、火鸡、鸭、鹅、鹌鹑、雉鸡、鹧鸪、鸵鸟、鸽、孔雀等多种禽类均易感染。
传染源主要为病禽和带毒禽(包括水禽和飞禽)。
病毒可长期在污染的粪便、水等环境中存活。
病毒的传播主要通过接触感染禽及其分泌物和排泄物、污染的饲料、水、蛋托(箱)、垫草、种蛋、鸡胚和精液等媒介,经呼吸道、消化道感染,也可通过气源性媒介传播。
3.临床症状潜伏期从几小时到数天,最长可达21天。
表现为突然死亡、高死亡率,饲料和饮水消耗量及产蛋量急剧下降,病鸡极度沉郁,头部和脸部水肿,鸡冠发绀、脚鳞出血和神经紊乱;鸭鹅等水禽有明显神经和腹泻症状,可出现角膜炎症,甚至失明。
4.病理变化剖检病变全身组织器官严重出血。
腺胃粘液增多,刮开可见腺胃乳头出血、腺胃和肌胃之间交界处粘膜可见带状出血;消化道粘膜,特别是十二指肠广泛出血;呼吸道粘膜可见充血、出血;心冠脂肪及心内膜出血;输卵管的中部可见乳白色分泌物或凝块;卵泡充血、出血、萎缩、破裂,有的可见"卵黄性腹膜炎"。
现代农业科技2017年第23期动物科学在进行鸡的疫病监测和诊断时,经常需要采集鸡的血液、喉拭子、泄殖腔拭子、粪便和环境污染物等,熟练掌握鸡样品采集操作技术,对快速准确地诊断鸡病、做好鸡病预警预报工作、及时扑灭疫情具有重要意义。
为使从事动物疫病防控工作的初学者尽快掌握本项技术,提高工作效率,做到样品采集快速准确、应激损失降到最低、安全防护科学到位,现将鸡样品采集的规范操作技术阐述如下。
1样品采集前的准备工作一是监测人员准备好防护用品,例如穿戴好隔离衣、防护帽、胶靴或鞋套、乳胶手套、口罩和护目镜等。
二是备齐样品采集器械和用品,例如5mL 一次性注射器、1.5mL 离心管、灭菌试管、pH 值为7.4的磷酸缓冲液、酒精棉球、碘酊棉球、消毒剂、保温箱或泡沫箱、热水袋、冰袋、自封袋、胶布、封口膜、封条、皮筋、无菌棉签、剪刀、笔、记号笔和采样单等[1]。
三是组织好抓鸡人员,准备好高度适宜的采血台或桌椅。
2鸡翅静脉采血技术2.1采血操作一是鸡的保定。
抓鸡人员一手抓住鸡的2个翅膀,一手抓住鸡的2条腿,侧放于采血台(桌椅)上,鸡腹部朝向采血人员,鸡头在采血人员的左侧。
二是采血部位用酒精消毒。
调整注射器,使注射器内留出空隙,安装针头且使针头的斜面和注射器的刻度保持在同一面上。
三是采血人员左手食指拨开覆盖在翅静脉上的羽毛,左手拇指压住翅静脉的近心端,左手心握住干棉球以备止血,右手持注射器,针头斜面朝上,从翅静脉近心端向远心端水平刺入,有回血时左手拇指压住针头基部,稍用力缓缓地吸血,达到2mL 时迅速拔出针头,左手拇指用干棉球按压止血,稍许把鸡放回原处。
四是采好的血吸入少量空气,留有空隙以便血清析出,编号后针头斜向上,用皮筋捆绑和采样单一起放入有热水袋的保温箱(泡沫箱)内。
五是将采血场地清扫干净并消毒。
2.2注意事项一是不注意个人防护,采血人员有时被鸡的粪便、羽毛和血等污染或抓伤。
二是采血台或桌椅高度不合适,鸡的保定不合适,影响规范操作。
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常见的几种禽病毒病采样技术
在防治畜禽疾病中,很多畜禽传染病的临床症状
不明显,单凭临床经验是难以做到确切诊断、准确用
药,往往因此而贻误了病情。为此,需要通过从病畜
或尸体采取病料,进一步做微生物学和血清学化验,
查清病原,进而有针对性地采取相应的防治措施,以
达到预防、控制和扑灭传染病的目的,同时减少临床
工作的盲目性,提高兽医人员的技术水平,保护养殖
户的利益。而病料采集、保存、送检的方法是否正确,
直接影响到检验的结果和防治工作的开展,故采集检
测样品是诊断检测工作的重要容,另外采样的时机是
否适宜,样品是否具有代表性,样品处理、保存、运
送是否及时等,都会影响到检验结果的准确性和可靠
性。
下面就如何正确地采集、保存、送检病料等进行
归纳和整理,希望能够对基层兽医和养殖户提供一些
借鉴。
一、采集原则
1,新鲜、具代表性,且足量:采集死禽样本,夏
天6小时之完成,冬天在24小时之完成;采集样品的
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数量要满足诊断检测的需要,并留有余地,以备必要
时复检使用。
2,减少对病料的污染:在做尸体剖检时,应将尸
体浸泡在消毒剂溶液中,防止羽毛及皮屑飞扬对病料
造成的污染;病料采集时,对采集病料的器械及容器
必须提前消毒,减少因器械或盛放病料的容器对病料
的污染;尸体剖开腹腔时,第一时间采取病料,减少
病料因暴露于空气中而造成的污染。
3,典型采样:选取未经药物治疗、症状最典型或
病变最明显的样品,如有并发症,还应兼顾采样。
4,合理采样:根据诊断检测的要求,须严格按照
规定采集各种足够数量的样品外,不同疫病的需检样
品各异,应按可能的疫病侧重采样。对未能确定为何
种疫病的,应全面采样。
5,安全采样:既要保护采样人员,以要防止病原
外泄,还要防止样品受到污染。
6,迅速送检:应尽快送实验室进行检测,延误送
检时间,会影响到检测质量和结果的可靠性。
二、病料的采集方法
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1,组织和实质器官的采集:剖开腹腔后,必须注
意肠管的完整。如需进行细菌的分离培养,要以烧红
的手术刀片烫烙脏器表面,使用经火焰灭菌的接种针
插入烫烙的部位,提取少量的组织或液体,作涂片镜
检或接种于培养基上,进行培养。
2,液体病料的采集:采集血液、胆汁、脓肿液、
渗出物等液体病料,使用灭菌吸管或注射器,经烫烙
部位吸取病变组织的液体,将病料注入灭菌的试管中,
塞好棉塞送检。
3,全血的采集方法:用灭菌注射器自鸡的心脏或
翅静脉采血2-5毫升,注入灭菌试管中。建议加入少量
的抗凝剂(3.8%枸橼酸钠0.1-0.5毫升或柠檬酸钠液,
配制方法:葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸
0.055g、氯化钠0.42g,加蒸馏水至100ml高压灭菌10
磅/10分钟。)
4,血清的采集方法:用灭菌注射器自禽的心脏或
翅静脉采血2毫升,注入灭菌的1.5ml离心管中摆成斜
面,待血液凝固血清析出后,将血清吸出注入另一个
灭菌试管中,备用。
5,肠道及肠容物的采集方法:选择病变明显部位
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的肠道,将容物弃掉,用灭菌生理盐水冲洗干净,然
后将病料放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲液中送
检。亦可将肠管切开,用灭菌生理盐水冲洗干净,然
后用烧红的手术刀片烫烙粘膜表面,将接种针插入粘
膜层,取少量病料接种于培养基上。采集肠容物则需
用烧红的手术刀片烫烙肠道浆膜层,将接种针插入肠
道,吸取少量肠容,放入试管中或将带有肠容的肠道
两端扎紧,去掉其它部分送检。
6,皮肤及羽毛的采集:皮肤要选病变明显部分的
边缘,采取少许放入灭菌的试管中送检;羽毛也要选
病变明显部分,用灭菌的刀片刮取羽毛及根部的皮屑
少许,放入灭菌的试管中送检;采集孵化室的绒毛需
用灭菌镊子采取出雏机出风口的绒毛3-5克,放入灭菌
的试管中送检。
三、各种病料的采集部位
表1鸡病毒性疾病主要采集的主要部位
疾病名称 病原 病料采集部位
鸡新城疫 副粘病毒
脑组织、喉头、气管、气囊、
肝、脾、肺
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禽流感
A型流感病毒
脏器官、气管粘液、肺、泄
殖腔拭子、血液
传染性法氏囊病 双RNA病毒 法氏囊、脏器官、肠道粘液、
泄殖腔拭子、血液
传染性支气
管炎病
冠状病毒 气管栓子、肺组织、肾、肝、脾、淋巴组织、输卵管、气
管泄殖腔拭子
传染性喉气
管炎
A型疱疹病毒
气管渗出物、气管、肺
病毒性关节炎 禽呼肠孤病毒 关节、腱鞘、脾、泄殖腔、
气管
禽脑脊髓炎 禽脑脊髓炎病毒 脑、胰
淋巴白血病
禽白血病病毒 血液、泄殖腔拭子、肿瘤组
织
马立克氏病 疱疹病毒 血液、肿瘤组织
网状皮组织增殖病 网状皮组织
增殖病病毒
血液、肿瘤组织、脾
鸡传染性贫鸡传染性贫肝、皮肤、脾、心脏、胸腺、
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血病 血病毒 肺、法氏囊、肾、骨髓、血
液
产蛋下降综合征 禽腺病毒 肝、胰、气管、肺、空肠、盲肠扁桃体、肠容、输卵管、
畸形蛋、变形卵泡、粪便、
血液
禽痘 痘病毒
病变组织、口、鼻、咽、喉、
食道、气管粘膜的结节
鸭病毒性肝
炎
鸭肝炎病毒 肝、脾、病变组织、血液
鸭病毒性肠炎 疱疹病毒科鸭瘟病毒 肝、脾、脑、肺、肾、口腔
分泌物、肠道、粪便、血液
小鹅瘟 鹅细小病毒
脏器官、组织、肠管、粪便、
血液
四、病料的保存和处理
1,采集的样品应一种样品一个容器,立即密封,
防止样品损坏、污染和外泄等意外发生。也可以根据
表1将几种适合检测同种病毒的病料合并于一个容器。
2,装样品的容器应贴上标签,标签要防止因冻结
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而脱落,标签标明采集的时间、地点、和样品名称,
并附上发病、死亡等相关资料,尽快送实验室。
3,根据样品的性状检验要求的不同,作暂时的冷
藏、冷冻或其它处理。
4,病料采集后,应先存放于冰箱中1-2小时后,
再做微生物检验。
五、病料的送检要点
1,在没有条件的情况下,可以采取运送整鸡、鹅
或鸭尸体,运送时用浸透消毒液的布包好,装入塑料
袋中运送;如果需要长途运输,整个尸体放入冰箱冰
冻过夜。
2,装在容器中的病料应先密封,然后装入冰桶中
运送,放入冰袋运送。
3,运送的病料必须标明:送检单位、地址、送检
病料的品种、性别、日龄、种类、数量、死亡日期、
送检日期、检验目的、送检者,并附临床病例摘要(发
病时间、死亡情况、临床症状、产蛋及饮食情况、免
疫和用药情况等)。
4,运送病料时一定注意病料要低温保存。供病毒
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学检验的样品,数小时要送到实验室,只作冷藏处理,
超过数小时的要冷冻处理,可将样品放入-30℃冰箱冻
结后再装入有大小冰块或干冰的冷藏瓶(箱)运送,
亦可将装入样品的容器放入隔热保温瓶,再放入冰块,
然后按100g冰块加入食盐约35克,立即将隔热保温
瓶瓶口塞紧,瓶温度可达-21℃左右。